离体大鼠心脏灌流
前言：
我们知道，实验动物的器官在在体的情况下要受到体内多种因素的影响，象神经、体液等因素。离体的情况下，由于排除了这些体内因素的影响，就可以相对独立地观察某一个实验因素的作用。但离体实验必须要模拟在体的环境，比如合适的温度、湿度、营养物质、离子浓度、酸碱度等。由于离体实验脱离了正常的生理环境，所以椐此得出得结论也有局限性。
实验目的
1,学会制备离体大鼠心脏灌流的模型。
2,观察前负荷、温度、药物、离子对心脏的影响。
3,模拟离体心肌缺血/再灌注损伤模型，并观察心功能的改变。
操作过程
1,称重
2,麻醉：腹腔注射乌拉坦1ml/100g，要注意麻醉剂量不能过量，过量后会影响心功能（宁少勿多）
3,固定
4,舌下静脉注入肝素(0.3ml/100g)
麻 醉
固 定
舌下静脉注射
5,开胸：找到剑突的位置，在剑突的水平剪开腹部的皮肤和肌层，这样腹腔就暴露出来了，再沿着胸壁和腹壁这一侧剪断膈膜，沿两侧肋骨向上平行剪开，翻起前胸壁，暴露心脏。
6,用镊子提起心脏根部，用剪刀尽量靠近头端剪断血管，这样的目的是尽量保留较长的主动脉。（可以剪去右肺，保留左肺，目的：便于分辨左心耳的位置）。放置到4℃的生理盐水平皿中使心脏停搏。
开 胸
暴露心脏
放置到4℃的生理盐水中停搏
7,在平皿中，找到主动脉的位置，并进行修剪经主动脉把心脏挂在灌流装置上，用动脉夹夹住，然后用线结扎。
8,打开灌流液行逆向灌流，心脏很快恢复自主跳动。
修剪心脏
灌流装置
将心脏挂在灌流装置上
9,插入球囊：关闭灌流液，用眼科剪在左心耳根部剪一个小口，将球囊通过左心耳、房室瓣插到左心室里。
10,在仪器的监测下，向球囊内注入生理盐水，使左室的舒张末期压调整在0～10mmHg之间。
11,预灌注几分钟，观察心率、心室内压、±dp/dt等指标。
插入球囊
开始灌流
观察指标
1,前负荷对心功能的影响：向球囊内注入少量生理盐水，使左室舒张压升高到40mmHg，观察心功能的变化。
2,离子对心功能的影响：无钙灌流液灌流20秒，观察心功能的变化；打开高钙灌流液，灌流1-2分钟，观察心功能的变化。
3,温度对心功能的影响：升高灌流液的温度至39℃，观察心功能的变化
4,药物对心功能的影响：含有西地兰的灌流液观察5分钟；含有异丙肾上腺素的灌流液观察1分钟；含有心得安的灌流液观察5分钟。
5,缺血/再灌注损伤：停灌20-40分钟，恢复灌流20分钟，观察心功能的变化。
思考题
1.与正常血液相比，本实验所用的K-H灌流液对心脏有什麽影响？
2.心脏进行正常的舒缩活动应具备什麽条件？
3.用无钙灌流液灌注，心脏会收缩吗？为什麽？什麽是钙反常？
4.用高钙灌流液灌注心脏其收缩会增加吗？为什麽？什麽是钙僵？
5.发热病人的心率有什麽变化？为什麽？
前言：
我们知道，实验动物的器官在在体的情况下要受到体内多种因素的影响，象神经、体液等因素。离体的情况下，由于排除了这些体内因素的影响，就可以相对独立地观察某一个实验因素的作用。但离体实验必须要模拟在体的环境，比如合适的温度、湿度、营养物质、离子浓度、酸碱度等。由于离体实验脱离了正常的生理环境，所以椐此得出得结论也有局限性。
实验目的
1,学会制备离体大鼠心脏灌流的模型。
2,观察前负荷、温度、药物、离子对心脏的影响。
3,模拟离体心肌缺血/再灌注损伤模型，并观察心功能的改变。
操作过程
1,称重
2,麻醉：腹腔注射乌拉坦1ml/100g，要注意麻醉剂量不能过量，过量后会影响心功能（宁少勿多）
3,固定
4,舌下静脉注入肝素(0.3ml/100g)
麻 醉
固 定
舌下静脉注射
5,开胸：找到剑突的位置，在剑突的水平剪开腹部的皮肤和肌层，这样腹腔就暴露出来了，再沿着胸壁和腹壁这一侧剪断膈膜，沿两侧肋骨向上平行剪开，翻起前胸壁，暴露心脏。
6,用镊子提起心脏根部，用剪刀尽量靠近头端剪断血管，这样的目的是尽量保留较长的主动脉。（可以剪去右肺，保留左肺，目的：便于分辨左心耳的位置）。放置到4℃的生理盐水平皿中使心脏停搏。
开 胸
暴露心脏
放置到4℃的生理盐水中停搏
7,在平皿中，找到主动脉的位置，并进行修剪经主动脉把心脏挂在灌流装置上，用动脉夹夹住，然后用线结扎。
8,打开灌流液行逆向灌流，心脏很快恢复自主跳动。
修剪心脏
灌流装置
将心脏挂在灌流装置上
9,插入球囊：关闭灌流液，用眼科剪在左心耳根部剪一个小口，将球囊通过左心耳、房室瓣插到左心室里。
10,在仪器的监测下，向球囊内注入生理盐水，使左室的舒张末期压调整在0～10mmHg之间。
11,预灌注几分钟，观察心率、心室内压、±dp/dt等指标。
插入球囊
开始灌流
观察指标
1,前负荷对心功能的影响：向球囊内注入少量生理盐水，使左室舒张压升高到40mmHg，观察心功能的变化。
2,离子对心功能的影响：无钙灌流液灌流20秒，观察心功能的变化；打开高钙灌流液，灌流1-2分钟，观察心功能的变化。
3,温度对心功能的影响：升高灌流液的温度至39℃，观察心功能的变化
4,药物对心功能的影响：含有西地兰的灌流液观察5分钟；含有异丙肾上腺素的灌流液观察1分钟；含有心得安的灌流液观察5分钟。
5,缺血/再灌注损伤：停灌20-40分钟，恢复灌流20分钟，观察心功能的变化。
思考题
1.与正常血液相比，本实验所用的K-H灌流液对心脏有什麽影响？
2.心脏进行正常的舒缩活动应具备什麽条件？
3.用无钙灌流液灌注，心脏会收缩吗？为什麽？什麽是钙反常？
4.用高钙灌流液灌注心脏其收缩会增加吗？为什麽？什麽是钙僵？
5.发热病人的心率有什麽变化？为什麽？
