UDC 633.1/.8.001.4:631.531 B 00 ? ? ? ? 中华人民共和国国家标准 ? GB/T 3543.1-3543.7---1995 ? ? ? ? ? 农 作 物 种 子 检 验 规 程 ? Rules for agricultural seed testing ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1995-08-18发布 1996-06-01实施 ? 国 家 技 术 监 督 局 发 布 ? ? 目 录 GB/T 3543.1——1995 农作物种子检验规程 总则 GB/T 3543.2——1995 农作物种子检验规程 扦样 GB/T 3543.3——1995 农作物种子检验规程 净度分析 GB/T 3543.4——1995 农作物种子检验规程 发芽试验 GB/T 3543.5——1995 农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定 GB/T 3543.6——1995 农作物种子检验规程 水分测定 GB/T 3543.7——1995 农作物种子检验规程 其他项目检验 ? ? ? ?? 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 ?GB/T 3543.1-1995 农 作 物 种 子 检 验 规 程 代替 GB 3543-83 ? 总 则 Rules for agricultural seed testing -General directives ? ? ? 1?????????????? 1????????????? 主题内容与适用范围 本标准规定了种子扦样程序，种子质量检测项目的操作程序，检测基本要求和结果报告。 本标准适用于农作物种子质量的检测。 ? 2 引用标准 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB/T 3543.3 农作物种子检验规程 净度分析 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 GB/T 3543.5 农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定 GB/T 3543.6 农作物种子检验规程 水分测定 GB/T 3543.7 农作物种子检验规程 其他项目检验 GB/T 8170 数值修约规则 ? 3?????????????? 3????????????? 农作物种子检验规程的构成与操作程序图 ? 3．1 构成 农作物种子检验规程由GB/T 3543.1——3543.7等七个系列标准构成。就其内容可分为扦样、检测和结果报告三部分。 种子批的扦样程序 扦样部分 实验室分样程序 （见第4章） 样品保存 净度分析（包括其他植物 （见5.1） 种子的数目测定） 发芽试验 （见5.2） 真实性和品种纯度鉴定 （见5.3） 检测部分 水分测定 (见5.4) 生活力的生化测定 (见5.5) 重量测定 (见5.5) 种子健康测定 (见5.5) 包衣种子检验 (见5.5) ? ? ? 容许误差 （见第6章） 结果报告 签发结果报告单的条件 (见7.1） 结果报告单 (见7.2) 其中检测部分的净度分析、发芽试验、真实性和品种纯度鉴定、水分测定为必检项目，生活力的生化测定等其他项目检验属于非必检项目。 3．2?????????? 3．2?????????? 种子检验操作程序图 全面检验时应遵循的操作程序见下图。  注： ①本图中送验样品和试验样品的重量各不相同，参见GB/T 3543.2中的第5.5.1和6.1条。 ②健康测定根据测定要求的不同，有时是用净种子，有时是用送验样品的一部分。 ③若同时进行其他植物种子的数目测定和净度分析，可用同一份送验样品，先做净度分析，再测定其他植物种子的数目。 ? 4 扦样部分 ? 扦样是从大量的种子中，随机取得一个重量适当、有代表性的供检样品。 样品应由从种子批不同部位随机扦取若干次的小部分种子合并而成，然后把这个样品经对分递减或随机抽取法取法分取规定重量的样品。不管哪一步骤都要有代表性。 具体的扦样方法应符合GB/T 3543.2的规定。 ? 5 检测部分 5．1???? 净度分析 净度分析是测定供检样品不同成分的重量百分率和样品混合物特性，并据此推测种子批的组成。 分析时将试验样品分成三种成分：净种子、其他植物种子和杂质，并测定各成分的重量百分率。样品中的所有植物种子和各种杂质，尽可能加以鉴定。 为便于操作，将其他植物种子的数目测定也归于净度分析中，它主要是用于测定种子批中是否含有有毒或有害种子，用供检样品中的其他植物种子数目来表示，如需鉴定，如需鉴定，可按植物分类鉴定到属。 具体分析应符合GB/T 3543.3的规定。 5.2 发芽试验 发芽试验是测定种子批的最大发芽潜力，据此可比较不同种子批的质量，也可估测田间播种价值。 发芽试验须用经净度分析后的净种子，在适宜水分和规定的发芽技术条件进行试验，到幼苗适宜评价阶段后，按结果报告要求检查每个重复，并计数不同类型的幼苗。如需经过预处理的，应在报告上注明。 具体试验方法应符合GB/T 3543.4的规定。 5.3 真实性和品种纯度鉴定 测定送验样品的种子真实性和品种纯度，据此推测种子批的种子真实性和品种纯度。 真实性和品种纯度鉴定，可用种子、纯苗或植株。通常，把种子与标准样品的种子进行比较，或将幼苗和植株与同期邻近种植在同一环境条件下的同一发育阶段的标准样品的幼苗和植株进行比较。 当品种的鉴定性状比较一致时(如自花授粉作物)，则对异作物、异品种的种子、幼苗或植株进行计数；当品种的鉴定性状一致性较差时(如异花授粉作物)，则对明显的变异株进行计数，并作出总体评价。 具体方法应符合GB/T 3543.5的规定。 5.4 水分测定 测定送验样品的种子水分，为种子安全贮藏、运输等提供依据。 种子水分测定必须使种子水分中自由水和束缚水全部除去，同时要尽最大可能减少氧化、分解或其他挥发性物质的损失。 具体方法应符合GB/T 3543.6的规定。 5.5 其他项目检验 5.5.1 生活力的生化(四唑)测定 在短期内急需了解种子发芽率或当某些样品在发芽末期尚有较多的休眠种子时，可应用生活力的生化法快速估测种子生活力。 生活力测定是应用2，3，5-三苯基氯化四氮唑(简称四唑，TTC)无色溶液作为一种指示剂，这种指示剂被种子活组织吸收后，接受活细胞脱氢酶中的氢，被还原成一种红色的、稳定的、不会扩散的和不溶于水的三苯基甲 。据此，可依据胚和胚乳组织的染色反应来区别有生活力和无生活力的种子。 除完全染色的有生活力种子和完全不染色的无生活力种子外，部分染色种子有无生活力，主要是根据胚和胚乳坏死组织的部位和面积大小来决定，染色颜色深浅可判别是键全的，还是衰弱的或死亡的。 5.5.2 重量测定 测定送验样品每1 000粒种子的重量。 从净种子中数取一定数量的种子，称其重量，计算其1 000粒种子的重量，并换算成国家种子质量标准水分条件下的重量。 5.5.3 种子健康测定 通过种子样品的健康测定，可推知种子批的健康状况，从而比较不同种子批的使用价值，同时可采取措施，弥补发芽试验的不足。 根据送验者的要求，测定样品是否存在病原体、害虫，尽可能选用适宜的方法，估计受感染的种子数。已经处理过和种子批，应要求送验者说明处理方式和所用的化学药品。 5.5.4 包衣种子检验 包衣种子是泛指采用某种方法将其他非种子材料包裹在种子外面的各种处理的种子。包括丸化种子、包膜种子、种子带和种子毯等。由于包衣种子难以按GB/T 3543.2-3543.6所规定的方法直接进行测定，为了获得包衣种子有重演性播种价值的结果，就此作出相应的规定。 以上内容(5.5.1-5.5.4)的具体检测方法应符合GB/T 3543.7的规定。 ? 6 容许误差 容许误差是指同一测定项目两次检验结果所容许的最大差距，超过此限度则足以引起对其结果准确性产生怀疑或认为所测的条件存在着真正的差异。 6.1 同一实验室同一送验样品重复间的容许差距。 a.净度分析(见GB/T 3543.3表2)。 b.其他植物种子数目测定(见GB/T 3543.3表6)。 c.发芽试验(见GB/T 3543.4表3)。 d.生活力测定(见GB/T 3543.7表2)。 6.2 从同一种子批扦取的同一或不同送验样品，经同一或另一检验机构检验，比较两次结果是否一致。 a.净度分析(见GB/T 3543.3表3)。 b.其他植物种子数目测定(见GB/T 3543.3表6)。 c.发芽试验(见GB/T 3543.4表5)。 6.3 从同一种子批扦取的第二个送验样品，经同一或另一个检验机构检验，所得结果较第一次差，如净种子重量百分率低、发芽率低、其他植物种子数目多。 a.净度分析(见GB/T 3543.4表4)。 b.其他植物种子数目测定(见GB/T 3543.3表7)。 c.发芽试验(见GB/T 3543.3表4)。 6.4 抽检、统检、仲裁检验、定期等与种子质量标准、合同、标签等规定值比较。 a.净度分析(见GB/T 3543.3表5)。 b.发芽试验(见GB/T 3543.4表6)。 c.纯度鉴定(商品种，见GB/T 3543.5表2)。 d.纯度鉴定(育种家、原种等种子，见GB/T 3543.5表3)。 ? 7 结果报告 种子检验结果单是按照本标准进行扦样与检测而获得检验结果的一种证书表格。 7.1 签发结果报告单的条件 签发种子检验结果单的机构除需要作好填报的事项外，还要： a.该机构目前从事这项工作； b.被检种属于本规程所列举的一个种； c.种子批是与本规程的要求相符合； d.送验样品是按本规程要求扦取和处理的； e.检验是按本规程规定方法进行的。 7.2 结果报告单 检验项目结束后，检验结果应按GB/T 3543.3-3543.7中的结果计算和结果报告的有关章条规定填报种子检验结果报告单(见下表)。如果某些项目没有测定而结果报告单上是空白的，那么应在这些空格内填上“未检验”字样。 种子检验结果报告单 字第 号 送验单位 ? 产地 ?  作物名称 ? 代表数量 ?  品种名称 ? ? ?  净 度 分 析 净种子，% 其他植物种子，% 杂质，%   ? ? ?   其他植物种子的种类及数目： 完全/有限/简化检验 杂质的种类： ?  发 芽 试 验 正常幼苗% 硬实% 新鲜不发芽种子% 不正常幼苗% 死种子%   ? ? ? ? ?   发芽床 ；温度 ；试验持续时间 ；发芽前处理和方法 。  纯 度 实验室方法 ；品种纯度 % 。 田间小区鉴定 ；本品种 % ；异品种 % 。   水分 水分 %   其 他 测 定 项 目 ? ? 生活力 %； ? 重量（千粒） g。 ? 健康状况：  检验单位（盖章）： 检验员（技术负责人）： 复核员： 填报日期： 年 月 日 若扦样是另一个检验机构或个人进行的，应在结果报告单上注明只对送验样品负责。 若在检验结束前急需了解某一测定项目的结果，可签发临时结果报告单，即在结果报告单上附有“最后结果报告单将在检验结束时签发”的说明。 本规程未而需要数字修约的，执行GB 8170 的规定。 完整的结果报告单须报告下列内容： a.签发站名称； b.扦样及封缄单位的名称； c.种子批的正式记号及印章； d.来样数量、代表数量； e.扦样日期； f.检验站收到样品日期； g.样品编号； i.检验日期。 结果报告单不得涂改。 ? ? ? 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农作物种子标准化技术委员会归口。 本标准由全国种子总站、浙江农业大学、四川省、黑龙江省、天津市种子公司(站)、南京农业大学、北京市、湖南省种子公司负责起草。 本标准主要起草人支巨振、毕辛华、杜克敏、常秀兰、杨淑惠、任淑萍、吴志行、李仁凤、赵菊英。 本标准首次发布于1983年3月。 本标准参照采用国际种子检验规程(ISTA，1993版)。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T 3543.2-1995 农 作 物 种 子 检 验 规 程 扦 样 代替 GB 3543-83 Rules for agricultural seed testing -Sampling 1 主题内容与适用范围 本标准规定了种子批的扦样程序，实验室分样程序和样品保存的要求。 本标准适用于农作物种子质量的检测。 ? 2 引用标准 GB/T 3543.3 农作物种子检验规程 净度分析 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 GB/T 3543.5 农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定 GB 7414 主要农作物种子包装 GB 7415 主要农作物种子贮藏 ? 3 术语 3.1 种子批 seed lot 同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、在规定数量之内的种子。 3.2 初次样品 primary sample 从种子批的一个扦样点上所扦取的一小部分种子。 3.3 混合样品 composite sample 由种子批内扦取的全部初次样品合而成。 3.4 送验样品 submitted sample 送到种子检验机构检验、规定数量(见5.5.1)的样品。 3.5 试验样品(简称试样) working sample 在实验室中从送验样品中分出的部分样品，供测定某一检验项目之用。 3.6 封缄 sealed 把种子装在容器内，封好后如不启封，无法把种子取出。如果容器本身不具备密封性能，每一容器加正式封印或不易擦洗掉的标记或不能撕去重贴的封条。 ? 4 仪器设备 4.1 扦样器 4.1.1 袋装扦样器； a.单管扦样器； b.双管扦样器。 4.1.2 散装扦样器 a.长柄短筒圆锥形扦样器； b.双管扦样器(比袋装双管扦样器长度要长)； c.圆锥形扦样器。 4.2 分样器 a.钟鼎式(圆锥形)分样器； b.横格式分样器。 4.3 天平和其他器具 a.感量1g，称量1-5kg天平； b.感量0.1g天平； c.分样板、样品罐或样品袋、封条等。 ? 5 种子批的扦样程序 扦样只能由受过扦样训练、具有实践经验的扦样员(检验员)担任，按如下规定扦取样品。 5.1 扦样前的准备 扦样员(检验员)应向种子经营、生产、使用单位了解该批种子堆装混合、贮藏过程中有关种子质量的情况。 5.2 划分种子批 5.2.1 种子批的大小 一批种子不得超过表1所的重量，其容许差距为5%。若超过规定重量时，须分成几批，分别给以批号。 ? 表1 农作物种子批的最大重量和样品最小重量 种（变种）名 学 名 种子批的 最大重量 kg 样品最小重量，g     送验样品 净度分析 试样 其他植物种 子计数试样  1．洋葱 Allium cepa L. 10 000 80 8 80  2．葱 Allium fistulosum L. 10 000 50 5 50  3．韭葱 Allium porrum L. 10 000 70 7 70  4．细香葱 Allium schoenoprasum L. 10 000 30 3 30  5．韭菜 Allium tuberosum Rottl. Ex Spreng. 10 000 100 10 100  6．苋菜 Amaranthus tricolor L. 5 000 10 2 10  7．芹菜 Apium graveolens L. 10 000 25 1 10  8．根芹菜 Apium graveolens L. var. Rapaceum DC. 10 000 25 1 10  9．花生 Arachis hypogaea L. 25 000 1 000 1 000 1 000  10．牛蒡 Arctium lappa L. 10 000 50 5 50  11．石刁柏 Asparagus officinalis L. 20 000 1 000 100 1 000  12．紫云英 Astragalus sinicus L. 10 000 70 7 70  13．裸燕麦 (莜麦) Avena nuda L. 25 000 1 000 120 1 000  14．普通燕麦 Avena sativa L. 25 000 1 000 120 1 000  15．落葵 Basella spp.L. 10 000 200 60 200  16．冬瓜 Benincasa hispida (Thunb.) Cogn. 10 000 200 100 200  17．节瓜 Benincasa hispida Cogn. Var.chieh-qua How. 10 000 200 100 200  18．甜菜 Beta vulgaris L. 20 000 500 50 500  19．叶甜菜 Beta vulgaris var. Cicla 20 000 500 50 500  20．根甜菜 Beta vulgaris var. Rapacea 20 000 500 50 500  21．白菜型油菜 Brassica campestris L. 10 000 100 10 100  22．不结球白菜 （包括白菜、乌塌菜、紫菜薹、薹菜、菜薹） Brassica campestris L. ssp.chinensis (L.) 10 000 100 10 100  23．芥菜型油菜 Brassica juncea Czern. Et Coss. 10 000 40 4 40  24．根用芥菜 Brassica juncea Coss. Var. megarrhiza Tsen et Lee 10 000 100 10 100  25．叶用芥菜 Brassica juncea Coss. var. Foliosa Bailey 10 000 40 4 40  26．茎用芥菜 Brassica juncea Coss. var.tsatsai Mao 10 000 40 4 40  27．甘蓝型油菜 Brassica napus L. Ssp.pekinensis (Lour.) Olsson 10 000 100 10 100  28．芥蓝 Brassica oleracea L. var.alboglabra Bailey 10 000 100 10 100  29．结球甘蓝 Brassica oleracea L. var.capitata L. 10 000 100 10 100  30．球茎甘蓝 (苤蓝) Brassica oleracea L. var.caulorapa DC. 10 000 100 10 100  31．花椰菜 Brassica oleracea L. var.bortytis L. 10 000 100 10 100  32．抱子甘蓝 Brassica oleracea L. var.gemmifera Zenk. 10 000 100 10 100  33．青花菜 Brassica oleracea L. var.italica Plench 10 000 100 10 100  34．结球白菜 Brassica campestris L. ssp.pekinensis(Lour.) Olsson 10 000 100 4 40  35．芜菁 Brassica rapa L. 10 000 70 7 70  36．芜菁甘蓝 Brassica napobrassica Mill. 10 000 70 7 70  37．木豆 Cajanus cajan (L.)Millsp. 20 000 1 000 300 1 000  38．大刀豆 Canavalia gladiata (Jacq.)DC. 20 000 1 000 1 000 1 000  39．大麻 Cannabis sativa L. 10 000 600 60 600  40．辣椒 Capsicum frutescens L. 10 000 150 15 150  41．甜椒 Capsicum frutescens var.grossum 10 000 150 15 150  42．红花 Carthamus tinctorius L. 25 000 900 90 900  43．茼蒿 Chrysanthemum coronarium var.spatisum 5 000 30 8 30  44．西瓜 Citrullus lanatus. (Thunb.)Matsum.et Nakai 20 000 1 000 250 1 000  45．薏苡 Coix lacryna-jobi L. 5 000 600 150 600  46．圆果黄麻 Corchorus capsularis L. 10 000 150 15 150  47．长果黄麻 Corchorus olitorius L. 10 000 150 15 150  48．芜荽 Coriandrum sativum L. 10 000 400 40 400  49．柽麻 Crotalaria juncea L. 10 000 700 70 700  50．甜瓜 Cucumis melo L. 10 000 150 70 150  51．越瓜 Cucumis melo L. var. conomon Makino 10 000 150 70 150  52．菜瓜 Cucumis melo L. var. Flexuosus Naud. 10 000 150 70 150  53．黄瓜 Cucumis sativus L. 10 000 150 70 150  54．笋瓜 （印度南瓜） Cucurbita maxima. Duch.ex Lam 20 000 1 000 700 1 000  55．南瓜 （中国南瓜） Cucurbita moschata (Duchesne)Duchesne ex Poiret 10 000 350 180 350  56．西葫芦 （美洲南瓜） Cucurbita pepo L. 20 000 1 000 700 1 000  57．瓜尔豆 Cyamopsis tetragonoloba (L.) Taubert 20 000 1 000 100 1 000  58．胡萝卜 Daucus carota L. 10 000 30 3 30  59.扁豆 Dolichos lablab L. 20 000 1 000 600 1 000  60.龙爪稷 Eleusine coracana(L.)Gaertn. 10 000 60 6 60  61.甜荞 Fagopyrum esculentum Moench 10 000 600 60 600  62.苦荞 Fagopyrum tataricum (L.)Gaertn. 10 000 500 50 500  63.茴香 Foeniculum vulgare Miller 10 000 180 18 180  64.大豆 Glycine max(L.)Merr. 25 000 1 000 500 1 000  65.棉花 Gossypium spp. 25 000 1 000 350 1 000  66.向日葵 Helianthus annuus L. 25 000 1 000 200 1 000  67.红麻 Hibiscus cannabinus L. 10 000 700 70 700  68.黄秋葵 Hibiscus esculentus L. 20 000 1 000 140 1 000  69.大麦 Hordeum vulgare L. 25 000 1 000 120 1 000  70.蕹菜 Ipomoea aquatica Forsskal 20 000 1 000 100 1 000  71.莴苣 Lactuca sativa L. 10 000 30 3 30  72.瓠瓜 Lagenaria siceraria(Molina)Standley 20 000 1 000 500 1 000  73.兵豆（小扁豆） Lens culinaris Medikus 10 000 600 60 600  74.亚麻 Linum usitatissimum L. 10 000 150 15 150  75.棱角丝瓜 Luffa acutangula(L).Roxb. 20 000 1 000 400 1 000  76.普通丝瓜 Luffa cylindrica(L.)Roem. 20 000 1 000 250 1 000  77.番茄 Lycopersicon lycopersicum (L.)Karsten 10 000 15 7 15  78.金花菜 Medicago polymor pha L. 10 000 70 7 70  79.紫花苜蓿 Medicago sativa L. 10 000 50 5 50  80.白香草木樨 Melilotus albus Desr. 10 000 50 5 50  81.黄香草木樨 Melilotus officinalis(L.)Pallas 10 000 50 5 50  82.苦瓜 Momordica charantia L. 20 000 1 000 450 1 000  83.豆瓣菜 Nasturtium officinale R.Br. 10 000 25 0.5 5  84.烟草 Nicotiana tabacum L. 10 000 25 0.5 5  85.罗勒 Ocimum basilicum L. 10 000 40 4 40  86.稻 Oryza sativa L. 25 000 400 40 400  87.豆薯 Pachyrhizus erosus (L.)Urban 20 000 1 000 250 1 000  88.黍（糜子） Panicum miliaceum L. 10 000 150 15 150  89.美洲防风 Pastinaca sativa L. 10 000 100 10 100  90.香芹 Petroselinum crispum (Miller)Nyman ex A.W.Hill 10 000 40 4 40  91.多花菜豆 Phaseolus multiflorus Willd. 20 000 1 000 1 000 1 000  92.利马豆（莱豆） Phaseolus lunatus L. 20 000 1 000 1 000 1 000  93.菜豆 Phaseolus vulgaris L. 25 000 1 000 700 1 000  94.酸浆 Physalis pubescens L. 10 000 25 2 20  95.茴芹 Pimpinella anisum L. 10 000 70 7 70  96.豌豆 Pisum sativum L. 25 000 1 000 900 1 000  97.马齿苋 Portulaca oleracea L. 10 000 25 0.5 5  98.四棱豆 Psophocar pus tetragonolobus (L.)DC. 25 000 1 000 1 000 1 000  99.萝卜 Raphanus sativus L. 10 000 300 30 300  100.食用大黄 Rheum rhaponticum L. 10 000 450 45 450  101.蓖麻 Ricinus communis L. 20 000 1 000 500 1 000  102.鸦葱 Scorzonera hispanica L. 10 000 300 30 300  103.黑麦 Secale cereale L. 25 000 1 000 120 1 000  104.佛手瓜 Sechium edule(Jacp.)Swartz 20 000 1 000 1 000 1 000  105.芝麻 Sesamum indicum L. 10 000 70 7 70  106.田菁 Sesbania cannabina(Retz.)Pers. 10 000 90 9 90  107.粟 Setaria italica(L.)Beauv. 10 000 90 9 90  108.茄子 Solanum melongena L. 10 000 150 15 150  109.高粱 Sorghum bicolor(L.)Moench 10 000 900 90 900  110.菠菜 Spinacia oleracea L. 10 000 250 25 250  111.黎豆 Stizolobium ssp. 20 000 1 000 250 1 000  112.番杏 Tetragonia tetragonioides(Pallas)Kuntze 20 000 1 000 200 1 000  113.婆罗门参 Tragopogon porrifolius L. 10 000 400 40 400  114.小黑麦 X Triticosecale Wittm. 25 000 1 000 120 1 000  115.小麦 Triticum aestivum L. 25 000 1 000 120 1 000  116.蚕豆 Vicia faba L. 25 000 1 000 1 000 1 000  117.箭舌豌豆 Vicia sativa L. 25 000 1 000 140 1 000  118.毛叶苕子 Vicia villosa Roth 20 000 1 080 140 1 080  119.赤豆 Vigna angularis(Willd)Ohwi & Ohashi 20 000 1 000 250 1 000  120.绿豆 Vigna radiata(L.)Wilczek 20 000 1 000 120 1 000  121.饭豆 Vigna umbellata(Thunb.)Ohwi & Ohashi 20 000 1 000 250 1 000  122.长豇豆 Vigna unguiculata W.ssp. sesquipedalis(L.)Verd. 20 000 1 000 400 1 000  123.矮豇豆 Vigna unguiculata W.ssp. Unguiculata (L.)Verd. 20 000 1000 400 1000  124.玉米 Zea mays L. 40 000 1000 900 1000  ? 5.2.2 种子批的均匀度 被扦的种子批应在扦样前进行适当混合、掺匀和机械加工处理，使其均匀一致。扦样时，若种子包装物或种子批没有标记或能明显地看出该批种子在形态或文件记录上有异质性的证据时，应拒绝扦样。如对种子批的均匀度发生怀疑，按附录A(补充件)中所述方法测定异质性。 5.2.3 容器及种子批的标记及封口 种子批的被扦包装物(如袋、容器)都必须封口，并符合GB 7414-7415的规定。 被扦包装物应贴有标签或加以标记。 种子批的排列应该使各个包装物或该批种子的各部分便于扦样。 5.3 扦取初次样品 5.3.1 袋装扦样法 根据种子批袋装(或容量相似而大小一致的其他容器)的数量确定扦样袋数，表2的扦样袋数应作为最低要求： ? ? ? ? ? 表2 袋装的扦样袋（容器）数 种子批的袋数 （容器数） 扦取的最低袋数 （容器数）  1-5 每袋都扦取，至少扦取5个初次样品  6-14 不少于5袋  15-30 每3袋至少扦取1袋  31-49 不少于10袋  50-400 每5袋至少扦取1袋  401-560 不少于80袋  561以上 每7袋至少扦取1袋  ? 如果种子装在小容器(如金属罐、纸盒或小包装)中，用下列方法扦取： 100kg种子作为扦样的基本单位。小容器合并组成的重量为100kg的作为一个“容器”(不得超过此重量)，如小容器为20kg，则5个小容器为一“容器”，并按表2规定进行扦样。 袋装(或容器)种子堆垛存放时，应随机选定取样的袋，从上、中、下各部位设立扦样点，每个容器只需扦一个部位。不是堆垛存放时，可平均分配，间隔一定袋数扦取。 对于装在小型或防潮容器(如铁罐或塑料袋)中的种子，应在种子装入容器前扦取，否则应把规定数量的容器打开或穿孔取得初次样品。 用合适的扦样器，根据扦样要求扦取初次样品。单管扦样器适用于扦取中小粒种子样品，扦样时用扦样器的尖端先拨开包装物的线孔，再把凹槽向下，自袋角处尖端与水平成30°向上倾斜地插入袋内，直至到达袋的中心，再把凹槽旋转向上，慢慢拔出，将样品装入容器中。双管扦样器适用于较大粒种子，使用时须对角插入袋内或容器中，在关闭状态插入，然后开启孔口，轻轻摇动，使扦样器完全装满，轻轻关闭，拔出，将样品装入容器中。 扦样所造成的孔洞，可用扦样器尖端对着孔洞相对方向拔几下，使麻线合并在一起，密封纸袋可用粘布粘贴。 5.3.2 散装扦样法 根据种子批散装的数量确定扦样点数，扦样点数见表3。 ? 表3 散装的扦样点数 种子批大小，kg 扦样点数  50以上 不少于3点  51-1 500 不少于5点  1 501-3 000 每300kg至少扦取1点  3 001-5 000 不少于10点  5 001-20 000 每500kg至少扦取1点  20 001-28 000 不少于40点  28 001-40 000 每700kg至少扦取1点  ? 散装扦样时应随机从各部位及深度扦取初次样品。每个部位扦取的数量应大体相等。 使用长柄短筒圆锥形扦样器时，旋紧螺丝，再以30°的斜度插入种子堆内，到达一定深度后，用力向上一拉，使活动塞离开进谷门，略微振动，使种子掉入，然后抽出扦样器。双管扦样器垂直插入，操作方法如同袋装扦样（见5.3.1）。圆锥形扦样器垂直或略微倾斜插入种子堆中，压紧铁轴，使套筒盖盖住套筒，达到一定深度后，拉上铁轴，使套筒盖升起，略微振动，然后抽出扦样器。 5.4 配制混合样品 如初次样品基本均匀一致，则可将其合并混合成混合样品。 5.5 送验样品的取得 5.5.1 送验样品的重量 a.水分测定 需磨碎的种类为100g，不需磨碎种类为50g。 b.品种纯度鉴定 按GB/T 3543.5的规定。 c.所有其他项目测定 按表1送验样品规定的最小重量。但大田作物和蔬菜种子的特殊品种、杂交种等的种子批可以例外，较小的送验样品数量是允许的。如果不进行其他植物种子的数目测定，送验样品至少达到表1净度分析所规定的试验样品的重量，并在结果报告单上加以说明。 5.5.2 送验样品的分取 送验样品可按6.2中的方法，将混合样品减到规定的数量。若混合样品的大小已符合规定，即可作为送验样品。 5.6 送验样品的处理 样品必须包装好，以防在运输过程中损坏。只有在下列两种情况下，样品应装入防湿容器内：一是供水分测定用的送验样品；二是种子批水分较低，并已装入防湿容器内。在其他情况下，与发芽试验有关的送验样品不应装入密闭防湿容器内，可用布袋或纸袋包装。 样品必须由扦样员(检验员)尽快送到种子检验机构，不得延误。经过化学处理的种子，须将处理药剂的名称送交种子检验机构。每个送验样品须有记号(这记号最好能把种子批与样品联系起来)，并附有扦样证明书。 6 实验室分样程序 6.1 试验样品的最低重量 试验样品的最低重量已在GB/T 3543.3-3543.7 各项测定的有关章条中作了规定。 6.2 试验样品的分取 检验机构接到送验样品后，首先将送验样品充分混合，然后用分样器经多次对分法或抽取递减法分取供各项测定用的试验样品，其重量必须与规定重量相一致。 重复样品须独立分取，在分取第一份试样后，第二份试样或半试样须将送验样品一分为二的另一部分中分取。 6.2.1 机械分样器法 使用钟鼎式分样器时应先刷净，样品放入漏斗时应铺平，用手很快拨开活门，使样品迅速下落，再将两个盛接器的样品同时倒入漏斗，继续混合2-3次，然后取其中一个盛接器按上述方法继续分取，直至达到规定重量为止。使用横格式分样器时，先将种子均匀地散布在倾倒盘内，然后沿着漏斗长度等速倒入漏斗内。 6.2.2 四分法 将样品倒在光滑的桌上或玻璃板上，用分样板将样品先纵向混合，再横向混合，重复混合4-5次，然后将种子摊平成四方形，用分样板划两条对角线，使样品分成4个三角形，再取两个对顶三角形内的样品继续按上述方法分取，直到两个三角形内的样品接近两份试验样品的重量为止。 7 样品保存 送验样品验收合格并按规定要求登记后，应从速进行检验，如不能及时检验，须将样品保存在凉爽，通风的室内，使质量的变化降到最低限度。 为便于复验，应将保留样品在适宜条件(低温干燥)下保存一个生长周期。 ? ? 附录 A 多容器种子批异质性测定 (补充件) ? A1 适用范围 适用于检查种子批是否存在显著的异质性。 A2 测定程序 异质性测定是将从种子批中抽出规定数量的若干个样品所得的实际方差与随机分布的理论方差相比较，得出前者超过后者的差数。每一样品取自各个不同的容器，容器内的异质性不包括在内。 A2.1 种子批的扦样 扦样的容器数应不少于表A1的规定。 ? 表A1 扦取容器数与临界H值(1%概率) 种子批的容器数 扦取的容器数 临界H值  5 5 2．58  6 6 2．02  7 7 1．80  8 8 1．64  9 9 1．51  10 10 1．41  11-15 11 1．32  16-25 15 1．08  26-35 17 1．00  36-49 18 0．97  50或以上 20 0．90  ? 扦样的容器应严格随机选择。从容器中取出样品必须代表种子批的各部分，应从袋的顶部、中部和底部扦取种子。每一容器扦取的重量应不少于GB/T 3543.2 中表1送验样品栏所规定的一半。 A2.2 测定方法 异质性可用下列项目表示。 A2.2.1 净度任一成分的重量百分率 在净度分析时，如能把某种成分分离出来(如净种子、其他植物种子或禾本科的秕粒)，则可用该成分的重量百分率表示。试样的重量应估计其中含有1 000粒种子，将每个试验样品分成两部分，即分析对象部分和其余部分。 A2.2.2 种子粒数 能计数的成分可以用种子计数来表示，如某一植物种或所有其他植物种。每份试样的重量估计大约含有10 000粒种子，并计算其中所挑出的那种植物种子数。 A2.2.3 发芽试验任一记载项目的百分率 在标准发芽试验中，任何可测定的种子或幼苗都可采用，如正常幼苗、不正常幼苗或硬实等。从每一袋样中同时取100粒种子按GB/T 3543.4 表2的条件下进行发芽试验。 A3 H值的计算 ? 式中；N—扦取袋样的数目； n—每个样品中的种子估计粒数(如净度分析为1 000粒，发芽试验为100粒)； X—某样品中净度分析任一成分的重量百分率或发芽率； X—从该种子批测定的全部X值的平均值； W—该检验项目的样品期望(理论)方差； V—从样品中求得的某检验项目的实际方差； H—异质性值。 如N小于10，X计算到小数点后两位；如N等于10或大于10，则计算到小数点后三位。 A3.2 指定的种子数 W=X V和H的计算与A3.1相同。 式中：X指从每个样品挑出的该类种子数。 如果N小于10， 计算到小数点后一位；如N等于10或大于10，则计算到小数点后两位。 A4 结果报告 表A1表明当种子批的成分呈随机分布时，只有1%概率的测定结果超过H值。 若求得的H值超过表A1的临界H值时，则该种子批存在显著的异质性；若求得的H值小于或等于临界H值时，则该种子批无异质现象；若求得的H值为负值时，则填报为零。 异质性的测定结果应填报如下： X、N、该种子批袋数、H及一项说明“这个H值表明有(无)显著的异质性”。 如果 超出下列限度，则不必计算或填报H值； 净度分析的任一成分：高于99.8%或低于0.2%； 发芽率：高于99%或低于1%； 指定某一植物种的种子数：每个样品小于两粒。 ? ? 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农作物种子标准化技术委员会归口。 本标准由全国种子总站、浙江农业大学、四川省、黑龙江省、天津市种子公司(站)、南京农业大学、北京市、湖南省种子公司负责起草。 本标准主要起草人支巨振、毕辛华、杜克敏、常秀兰、杨淑惠、任淑萍、吴志行、李仁凤、赵菊英。 本标准首次发布于1983年3月。 本标准参照采用国际种子检验规程(ISTA，1993版)第二部分 扦样。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 中华人民共和国国家标准 GB/T 3534.3—1995 农 作 物 种 子 检 验 规 程 净 度 分 析 代替 GB 543-83 Rules for agricultual seed testing -Purity analysis ? ? 1 主题内容与适用范围 本标准规定了种子净度分析(包括其他植物种子数目的测定)的测定方法。 本标准适用于农作物种子质量的检测。 2 引用标准 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 3 术语 3.1 净种子 pure seed 送验者所叙述的种(包括该种子的全部植物学变种和栽培品种)符合附录A(补充件)要求的种子单位或构造。 3.2 其他植物种子 other seeds 除净种子以外的任何植物种子单位，包括杂草种子和异作物种子。 3.3 杂质 inert matter 杂净种子和其他植物种子外的种子单位和所有其他物质和构造。 4 仪器 a.净度分析台。 b.钟鼎式分样器、横格式分样器。 c.不同孔径的套筛(包括振荡器)、吹风机，甜菜复胚种子采用的筛子规格见附录A(补充件)。 d.手持放大镜或双目显微镜等。 e.天平：感量为0.1，0.01，0.001g和0.1mg。 5 测定程序 5.1 重型混杂物的检查 在送验样品(或至少是净度分析试样重量的10倍)中，若有与供检种子在大小或重量上明显不同且严重影响结果的混杂物，如土块、小石块或小粒种子中混有大粒种子等，应先挑出这些重型混杂物并称重，再将重型混杂物分离为其他植物种子和杂质。 5.2 试验样品的分取 净度分析的试验样品应按规定的方法(见GB/T 3543.2的6.2条)从送验样品中分取。试验样品应估计至少含有2 500个种子单位的重量或不少于GB/T3543.2表1的规定。 净度分析可用规定重量的一份试样，或两份半试样(试样重量的一半)进行分析。 试验样品须称重，以克表示，精确至表1所规定的小数位数，以满足计算各种成分百分率达到一位小数的要求。 ? ? ? ? ? ? 表1 称重与小数位数 试样或半试样及其成分重量，g 称重至下列小数位数  1.000以下 4  1．000—9.999 3  10.00—99.99 2  100.0—999.9 1  1 000或1 000以上 0  ? 5.3 试样的分离 a.试样称重后，按附录A(补充件)的规定，将试样分离成净种子、其他植物种子和杂质三种成分。 b.分离时可借助于放大镜、筛子、吹风机等器具(见第4章)，或用镊子施压，在不损伤发芽力的基础上进行检查。 c.分离时必须根据种子的明显特征，对样品中的各个种子单位进行仔细检查分析，并依据形态学特征、种子标本等加以鉴定。当不同植物种之间区别困难或不可能区别时，则填报属名，该属的全部种子均为净种子，并附加说明。 d.种皮或果皮没有明显损伤的种子单位，不管是空瘪或充实，均作为净种子或其他植物种子；若种皮或果皮有一个裂口，检验员必须判断留下的种子单位部分是否超过原来大小的一半，如不能迅速地作出这种决定，则将种子单位列为净种子或其他植物种子。 e.分离后各成分分别称重，以克表示，折算为百分率。 6 其他植物种子数目的测定 根据送验者的不同要求，其他植物种子数目的测定可采用完全检验、有限检验和简化检验。 6.1 完全检验 试验样品不得小于25000个种子单位的重量或GB/T 3543.2表1所规定的重量。 借助于放大镜、筛子和吹风机等器具，按附录A(补充件)的规定逐粒进行分析鉴定，取出试样中所有的其他植物种子，并数出每个种的种子数。当发现有的种子不能准确确定所属种时，允许鉴定到属。 6.2????????? 6.2????????? 有限检验 有限检验的检验方法同完全检验(6.1)，但只限于从整个试验样品中找出送验者指定的其他植物种的种子。如送验者只要求检验是否存在指定的某些种，则发现一粒或数粒种子即可。 6.3 简化检验 如果送验者所指定的种难以鉴定时，可采用简化检验。 简化检验是用规定试验样品(见6.1)重量的五分之一(最少量)对该种进行鉴定。 简化检验的检验方法同完全检验(6.1) 7??结果计算和表示 7.1 结果计算 7.1.1 核查分析过程的重量增失 不管是一份试样还是两份半试样，应将分析后的各种成分重量之和与原始重量比较，核对分析期间物质有无增失。若增失差超过原始重量的5%，则必须重做，填报重做的结果。 7.1.2 计算各成分的重量百分率 试样分析时，所有成分(即净种子、其他植物种子和杂质三部分)的重量百分率应计算到一位小数。半试样分析时，应对每一份半试样所有成分分别进行计算，百分率至少保留到两位小数，并计算各成分的平均百分率。 百分率必须根据分析后各种成分重量的总和计算，而不是根据试验样品的原始重量计算。 其他植物种子和杂质均不再分类计算百分率。 7.1.3 检查重复间的误差 7.1.3.1 两份半试样 如果分析两份半试样，分析后任一成分的相差不得超过表2所示的重复分析间的容许差距，表2中所指的有稃壳种子种类见附录B(补充件)。若所有成分的实际差距都在容许范围内，则计算每一成分的平均值。如实际差距超过容许范围，则下列程序进行： ? 表2 同一实验室内同一送验样品净度分析的容许差距 (5%显著水平的两尾测定) 两次分析结果平均 不同测定之间的容许差距  50%以上 50%以下 半试样 试样    无稃壳种子 有稃壳种子 无稃壳种子 有稃壳种子  99.95-100.00 99.90-99.94 99.85-99.89 99.80-99.84 99.75-99.79 0.00-0.04 0.05-0.09 0.10-0.14 0.15-0.19 0.20-0.24 0.20 0.33 0.40 0.47 0.51 0.23 0.34 0.42 0.49 0.55 0.1 0.2 0.3 0.3 0.4 0.2 0.2 0.3 0.4 0.4  99.70-99.74 99.65-99.69 99.60-99.64 99.55-99.59 99.50-99.54 0.25-0.29 0.30-0.34 0.35-0.39 0.40-0.44 0.45-0.49 0.55 0.61 0.65 0.68 0.72 0.59 0.65 0.69 0.74 0.76 0.4 0.4 0.5 0.5 0.5 0.4 0.5 0.5 0.5 0.5  99.40-99.49 99.30-99.39 99.20-99.29 99.10-99.19 99.00-99.09 0.50-0.59 0.60-0.69 0.70-0.79 0.80-0.89 0.90-0.99 0.76 0.83 0.89 0.95 1.00 0.80 0.89 0.95 1.00 1.06 0.5 0.6 0.6 0.7 0.7 0.6 0.6 0.7 0.7 0.8  98.75-98.99 98.50-98.74 99.25-98.49 98.00-98.24 97.75-97.99 1.00-1.?????? 1.00-1.?????? 24 1.25-1.49 1.50-1.74 1.75-1.99 2.00-2.24 1.07 1.19 1.29 1.37 1.44 1.15 1.26 1.37 1.47 1.54 0.8 0.8 0.9 1.0 1.0 0.8 0.9 1.0 1.0 1.1  97.50-97.74 97.25-97.49 97.00-97.24 96.50-96.99 96.00-96.49 2.25-2.49 2.50-2.74 2.75-2.99 3.00-3.49 3.50-3.99 1.53 1.60 1.67 1.77 1.88 1.63 1.70 1.78 1.88 1.99 1.1 1.1 1.2 1.3 1.3 1.2 1.2 1.3 1.3 1.4  95.50-95.99 95.00-95.49 94.00-94.99 93.00-93.99 92.00-92.99 4.00-4.49 4.50-4.99 5.00-5.99 6.00-6.99 7.00-7.99 1.99 2.09 2.25 2.43 2.59 2.12 2.22 2.38 2.56 2.73 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 1.5 1.6 1.7 1.8 1.9  91.00-91.99 90.00-90.99 88.00-89.99 86.00-87.99 84.00-85.99 8.00-8.99 9.00-9.99 10.00-11.99 12.00-13.99 14.00-15.99 2.74 2.88 3.08 3.31 3.52 2.90 3.04 3.25 4.49 3.71 1.9 2.0 2.2 2.3 2.5 2.1 2.2 2.3 2.5 2.6  82.00-83.99 80.00-81.99 78.00-79.99 76.00-77.99 74.00-75.99 16.00-17.99 18.00-19.99 20.00-21.99 22.00-23.99 24.00-25.99 3.69 3.86 4.00 4.14 4.26 3.90 4.07 4.23 4.37 4.50 2.6 2.7 2.8 2.9 3.0 2.8 2.9 3.0 3.1 3.2  72.00-73.99 70.00-71.99 65.00-69.99 60.00-64.99 50.00-59.99 26.00-27.99 28.00-29.99 30.00-34.99 35.00-39.99 40.00-49.99 4.37 4.47 4.61 4.77 4.89 4.61 4.71 4.86 5.02 5.16 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.3 3.3 3.4 3.6 3.7  ? a.再重新分析成对样品，直到一对数值在容许范围内为止(但全部分析不必超过四对)。 b.凡一对间的相差超过容许差距两倍时，均略去不计。 c.各种成分百分率的最后记录，应从全部保留的几对加权平均数计算。 7.1.3.2 两份或两份以上试样 如果在某种情况下有必要分析第二份试样时，那么两份试样各成分实际的差距不得超过表2中所示的容许差距，表2中所指的有稃壳种子种类见附录B(补充件)。若所有成分都在容许范围内，则取其平均值；若超过，则再分析一份试样；若分析后的最高值和最低值差异没有大于容许误差两倍时，则填报三者的平均值。如果其中的一次或几次显然是由于差错造成的，那么该结果须去除。 7.1.4 修约 各种成分的最后填报结果应保留一位小数。 各种成分之和应为100.0%，小于0.05%的微量成分在计算中应除外。如果其和是99.9%或100.1%，那么从最大值(通常是净种子部分)增减0.1%。如果修约值大于0.1%，那么应检查计算有无差错。 7.1.5 有重型混杂物结果换算 净种子： P2(%)=P1×[(M-x)/m] 其他植物种子： OS2(%)=OS1×[(M-m)/M]+(m1/M) ×100 杂质： I2(%)=I1×[(M-m)/M]+(m2/M) ×100 ? 式中：M—送验样品的重量，g； m—重型混杂物的重量，g； m1—重型混杂物中的其他植物种子重量，g； m2—重型混杂物中的杂质重量，g； P1—除去重型混杂物后的净种子重量百分率，%； I1—除去重型混杂物后的杂质重量百分率，%； OS1—除去重型混杂物后的其他植物种子重量百分率，%。 最后应检查：（P2+I2+OS2）%=100.0%。 7.2 结果表示 净度分析结果以三种成分的重量百分率表示。 进行其他植物种子数目测定时，结果用测定中发现的种(或属)的种子数来表示，也可折算为每单位重量(如每千克)的种子数。表6可用来判断两个测定结果是否有显著差异。但在比较时，两个样品的重量须大致相当。 8 结果报告 净度分析的结果应保留一位小数，各种成分的百分率总和必须为100%。成分小于0.05%的填报为“微量”，如果一种成分的结果为零，须填“—0.0—”。 当测定某一类杂质或某一种其他植物种子的重量百分率达到或超过1%时，该种类应在结果报告单上注明。 进行其他植物种子数目测定时，将测定种子的实际重量、学名和该重量中找到的各个种的种子数应填写在结果报告单上，并注明采用完全检验、有限检验或简化检验。 ? 表3 同一或不同实验室内来自不同送验样品间 净度分析的容许差距 （1%显著水平的一尾测定） 两次结果平均 容许差距  50%以上 50%以上 无稃壳种子 有稃壳种子  99.95-100.00 99.90-99.94 99.85-99.89 99.80-99.84 99.75-99.79 0.00-0.?????? 0.00-0.?????? 04 0.05-0.09 0.10-0.14 0.15-0.19 0.20-0.24 0.2 0.3 0.3 0.4 0.4 0.2 0.3 0.4 0.5 0.5  99.70-99.74 99.65-99.69 99.60-99.64 99.55-99.59 99.50-99.54 0.25-0.29 0.30-0.34 0.35-0.39 0.40-0.44 0.45-0.49 0.5 0.5 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.7 0.7 0.7  99.40-99.49 99.30-99.39 99.20-99.29 99.10-99.19 99.00-99.09 0.50-0.59 0.60-0.69 0.70-0.79 0.80-0.89 0.90-0.99 0.7 0.7 0.8 0.8 0.9 0.8 0.9 0.9 1.0 1.0  98.75-98.99 98.50-98.74 98.25-98.49 98.00-98.24 97.75-97.99 1.00-1.?????? 1.00-1.?????? 24 1.25-1.49 1.50-1.74 1.75-1.99 2.00-2.24 0.9 1.0 1.1 1.2 1.3 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5  97.50-97.74 97.25-98.49 97.00-97.24 96.50-96.99 96.00-96.49 2.25-2.49 2.50-2.74 2.75-2.99 3.00-3.49 3.50-3.99 1.3 1.4 1.5 1.5 1.6 1.6 1.6 1.7 1.8 1.9  95.50-95.99 95.00-95.49 94.00-94.99 93.00-93.99 92.00-92.99 4.00-4.49 4.50-4.99 5.00-5.99 6.00-6.99 7.00-7.99 1.7 1.8 2.0 2.1 2.2 2.0 2.2 2.3 2.5 2.6  91.00-91.99 90.00-90.99 88.00-89.99 86.00-87.99 84.00-85.99 8.00-8.99 9.00-9.99 10.00-11.99 12.00-13.99 14.00-15.99 2.4 2.5 2.7 2.9 3.0 2.8 2.9 3.1 3.4 3.6  82.00-83.99 80.00-81.99 78.00-79.99 76.00-77.99 74.00-75.99 16.00-17.99 18.00-19.99 20.00-21.99 22.00-23.99 24.00-25.99 3.2 3.3 3.5 3.6 3.7 3.7 3.9 4.1 4.2 4.3  72.00-73.99 70.00-71.99 65.00-69.99 60.00-64.99 50.00-59.99 26.00-27.99 28.00-29.99 30.00-34.99 35.00-39.99 40.00-49.99 3.8 3.8 4.0 4.1 4.2 4.4 4.5 4.7 4.8 5.0  ? 表4 同一或不同实验室内进行第二次检验时，两个 不同送验样品间净度分析的容许差距 （1%显著水平的两尾测定） 两次结果平均 容许差距  50%以上 50%以下 无稃壳种子 有稃壳种子  99.95-100.00 99.90-99.94 99.85-99.89 99.80-99.84 99.75-99.79 0.00-0.?????? 0.00-0.?????? 04 0.05-0.09 0.10-0.14 0.15-0.19 0.20-0.24 0.18 0.28 0.34 0.40 0.44 0.21 0.32 0.40 0.47 0.53  99.70-99.74 99.65-99.69 99.60-99.64 99.55-99.59 99.50-99.54 0.25-0.29 0.30-0.34 0.35-0.39 0.40-0.44 0.45-0.49 0.49 0.53 0.57 0.60 0.63 0.57 0.62 0.66 0.70 0.73  99.40-99.49 99.30-99.39 99.20-99.29 99.10-99.19 99.00-99.09 0.50-0.59 0.60-0.69 0.70-0.79 0.80-0.89 0.90-0.99 0.68 0.73 0.78 0.83 0.87 0.79 0.85 0.91 0.96 1.01  98.75-98.99 98.50-98.74 98.25-98.49 98.00-98.24 97.75-97.99 1.00-1.?????? 1.00-1.?????? 24 1.25-1.49 1.50-1.74 1.75-1.99 2.00-2.24 0.94 1.04 1.12 1.20 1.26 1.10 1.21 1.31 1.40 1.47  97.50-97.74 97.25-98.49 97.00-97.24 96.50-96.99 96.00-96.49 2.25-2.49 2.50-2.74 2.75-2.99 3.00-3.49 3.50-3.99 1.33 1.39 1.46 1.54 1.64 1.55 1.63 1.70 1.80 1.92  95.50-95.99 95.00-95.49 94.00-94.99 93.00-93.99 92.00-92.99 4.00-4.49 4.50-4.99 5.00-5.99 6.00-6.99 7.00-7.99 1.74 1.83 1.95 2.10 2.23 2.04 2.15 2.29 2.46 2.62  91.00-91.99 90.00-90.99 88.00-89.99 96.00-87.99 84.00-85.99 8.00-8.99 9.00-9.99 10.00-11.99 12.00-13.99 14.00-15.99 2.36 2.48 2.65 2.85 3.02 2.76 2.92 3.11 3.35 3.55  82.00-83.99 80.00-81.99 78.00-79.99 76.00-77.99 74.00-75.99 16.00-17.99 18.00-19.99 20.00-21.99 22.00-23.99 24.00-25.99 3.18 3.32 2.45 3.56 3.67 3.74 3.90 4.05 4.19 4.31  72.00-73.99 70.00-71.99 65.00-69.99 60.00-64.99 50.00-59.99 26.00-27.99 28.00-29.99 30.00-34.99 35.00-39.99 40.00-49.99 3.76 3.84 3.97 4.10 4.21 4.42 4.51 4.66 4.82 4.95  ? 表5 净度分析与标准规定值比较的容许差距 （5%显著水平的一尾测定） 标准规定值 容许差距  50%以上 50%以下 无稃壳种子 有稃壳种子  99.95-100.00 99.90-99.94 99.85-99.89 99.80-99.84 99.75-99.79 0.00-0.04 0.05-0.09 0.10-0.14 0.15-0.19 0.20-0.24 0.10 0.14 0.18 1.21 0.23 0.11 0.16 0.21 0.24 0.27  99.70-99.74 99.65-99.69 99.60-99.64 99.55-99.59 99.50-99.54 0.25-0.29 0.30-0.34 0.35-0.39 0.40-0.44 0.45-0.49 0.25 0.27 0.29 0.30 0.32 0.30 0.32 0.34 0.35 0.38  99.40-99.49 99.30-99.39 99.20-99.29 99.10-99.19 99.00-99.09 0.50-0.59 0.60-0.69 0.70-0.79 0.80-0.89 0.90-0.99 0.34 0.37 0.40 0.42 0.44 0.41 0.44 0.47 0.50 0.52  98.75-98.99 98.50-98.74 98.25-98.49 98.00-98.24 97.75-97.99 1.00-1.24 1.25-1.49 1.50-1.74 1.75-1.99 2.00-2.24 0.48 0.52 0.57 0.61 0.63 0.57 0.62 0.67 0.72 0.75  97.50-97.74 97.25-98.49 97.00-97.24 96.50-96.99 96.00-96.49 2.25-2.49 2.50-2.74 2.75-2.99 3.00-3.49 3.50-3.99 0.67 0.70 0.73 0.77 0.82 0.79 0.83 0.86 0.91 0.97  95.50-95.99 95.00-95.49 94.00-94.99 93.00-93.99 92.00-92.99 4.00-4.49 4.50-4.99 5.00-5.99 6.00-6.99 7.00-7.99 0.87 0.90 0.97 1.05 1.12 1.02 1.07 1.15 1.23 1.31  91.00-91.99 90.00-90.99 88.00-89.99 96.00-87.99 84.00-85.99 8.00-8.99 9.00-9.99 10.00-11.99 12.00-13.99 14.00-15.99 1.18 1.24 1.33 1.43 1.51 1.39 1.46 1.56 1.67 1.78  82.00-83.99 80.00-81.99 78.00-79.99 76.00-77.99 74.00-75.99 16.00-17.99 18.00-19.99 20.00-21.99 22.00-23.99 24.00-25.99 1.59 1.66 1.73 1.78 1.84 1.87 1.95 2.03 2.10 2.16  72.00-73.99 70.00-71.99 65.00-69.99 60.00-64.99 50.00-59.99 26.00-27.99 28.00-29.99 30.00-34.99 35.00-39.99 40.00-49.99 1.83 1.92 1.99 2.05 2.11 2.21 2.26 2.33 2.41 2.48  ? 表6 其他植物种子数目测定的容许差距 (5%显著水平的两尾测定) 两次测定结果的平均值 容许差距 两次测定结果的平均值 溶许差距  3 5 152-160 35  4 6 161-169 36  5-6 7 170-178 37  7-8 8 179-188 38  9-10 9 189-198 39  11-13 10 199-209 40  14-15 11 210-219 41  16-18 12 220-230 42  19-22 13 231-241 43  23-25 14 242-252 44  26-29 15 253-264 45  30-33 16 265-276 46  34-37 17 277-288 47  38-42 18 289-300 48  43-47 19 301-313 49  48-52 20 314-326 50  53-57 21 327-339 51  58-63 22 340-353 52  64-69 23 354-366 53  70-75 24 367-380 54  76-81 25 381-394 55  82-88 26 395-409 56  89-95 27 410-424 57  96-102 28 425-439 58  103-110 29 440-454 59  111-117 30 455-469 60  118-125 31 470-485 61  126-133 32 486-501 62  134-142 33 502-518 63  143-151 34 519-534 64  ? ? ? ? 表7 其他植物种子数目测定的容许差距 (5%显著水平的一尾测定) 两次测定结果的平均值 容许差距 两次测定结果的平均值 容许差距  3-4 5 153-162 30  5-6 6 163-173 31  7-8 7 174-186 32  9-11 8 187-198 33  12-14 9 199-210 34  15-17 10 211-223 35  18-21 11 224-235 36  22-25 12 236-249 37  26-30 13 250-262 38  31-34 14 263-276 39  35-40 15 277-290 40  41-45 16 291-305 41  46-52 17 306-320 42  53-58 18 321-336 43  59-65 19 337-351 44  66-72 20 352-367 45  73-79 21 368-386 46  80-87 22 387-403 47  88-95 23 404-420 48  96-104 24 421-438 49  105-113 25 439-456 50  114-122 26 457-474 51  123-131 27 475-493 52  132-141 28 494-513 53  142-152 29 514-532 54  ? ? 533-552 55  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 附录A 净种子定义(PSD) (补充件) A1 术语 A1.1 种子单位 seed unit 通常所见的传播单位，包括真种子、瘦果、颖果、分果和小花等。 A1.2 瘦果 achene,achenium 干燥、不开裂、含有一粒种子果实，果皮与种皮分离。 A1.3 颖果 caryopsis 种皮与果皮紧密结合在一起的果实，如禾本科裸粒果实。 A1.4 小花 floret 禾本科中指包着雄雌蕊的内外稃或成熟的颖果。本标准中的小花是指有或无不孕外稃的可育小花。 A1.5 可育小花 fertile floret 具有功能性器官(即有颖果)的小花。 A1.6 不育小花 sterile floret A1.7 小穗 spikelet 由一个或一个以上小花组成的禾本科花序单位，基部被一至二片不育颖片包着。本标准中所指的小穗不仅包括可育小花，而且还包括一个或更多的可育小花或完全不育的小花或颖片。 A1.8 分果 schizocarp 在成熟时可分离为两个或两个以上单位(分果 )的干果。 A1.9 分果 mericarp 分果的一部分，如伞形科的分果可以分离为两个分果 。 A1.10 荚果 pod 开裂的干果，如豆科。 A1.11 种球 cluster 一种密集着生的花序，在甜菜属中，为花序的一部分。 A1.12 小坚果 nutlet 一种小型的、不开裂的、内含一粒种子的干果。 A1.13 附属器官 A1.13.1 芒 awn,arista 一种细长，直立或弯曲的刺毛。在禾本科中，通常是外稃或颖片中肋的延长物。 A1.13.2 喙 beak 果实的尖锐延长部分。 A1.13.3 苞片 bract 一种退化的叶或鳞片状构造，它将花包着或将禾本科的小穗包在轴上。 A1.13.4 颖片（护颖） glume 指禾本科小穗基部的两片通常不育的苞片之一。 A1.13.5 外稃 lemma 禾本科小花的外部(下部)苞片。也称花的颖片或外部(下部)内稃。包在颖果外侧的苞片。 A1.13.6 内稃 palea 禾本科小花的内部(上部)苞片。也称内部或上部稃壳。包在颖果内侧(腹向)的苞片。 A1.13.7 小总苞 involucre 包围着花序基部的一群环状苞片或刺毛。 A1.13.8 花被 perianth 花的两种包被(花萼和花冠)，或其中任何一种。 A1.13.9 花萼 calyx,calyces 由萼片组成的外花被。 A1.13.10 花梗 pedicel 花序上花的短柄。 A1.13.11 种阜 caruncle 珠孔近旁的小型突起物。 A1.13.12 绒毛 hair 一种表皮上的单细胞或多细胞的长出物。 A1.13.13 冠毛 pappus 一种环状细毛，有时呈羽毛状或鳞片状密生在瘦果上。 A1.13.14 小穗轴 rachilla,rhachilla 次生穗轴。在禾本科中专指着生小花的轴。 A1.13.15 穗轴 rachis,rhachis,rachides 花序的主轴。 A1.13.16 柄 stalk 任何植物器官的茎。 A2 净种子、其他植物种子和杂质区分总则 A2.1 净种子 A2.1.1 下列构造凡能明确地鉴别出它们是属于所分析的种(已变成菌核、黑穗病孢子团或线虫瘿除外)，即使是未成熟的、瘦小的、皱缩的、带病的或发过芽的种子单位都应作为净种子。 a.完整的种子单位(详见A3)。在禾本科中，种子单位如是小花须带有一个明显含有胚乳的颖果或裸粒颖果(缺乏内外稃)。 b.大于原来大小一半的破损种子单位。 A2.1.2 根据上述原则，在个别的属或种中有一些例外： a.豆科、十字花科，其种皮完全脱落的种子单位应列为杂质。 b.即使有胚芽和胚根的胚中轴，并超过原来大小一半的附属种皮，豆科种子单位的分离子叶也列为杂质。 c.甜菜属复胚种子超过一定大小的种子单位列为净种子。 d.在燕麦属、高粱属中，附着的不育小花不须除去而列为净种子。 A2.2 其他植物种子 其鉴定原则与净种子相同，但甜菜属种子单位作为其他植物种子时不必筛选，可用遗传单胚的净种子定义(见A3.14)。 A2.3 杂质 a.明显不含真种子的种子单位。 b.甜菜属复胚种子单位大小未达到净种子定义最低大小的。 c.破裂或受损伤种子单位的碎片为原来大小的一半或不及一半的。 d.按该种的净种子定义，不将这些附属物作为净种子部分或定义中尚未提及的附属物。 e.种皮完全脱落的豆科、十字花科的种子。 f.脆而易碎、呈灰白色、乳白色的菟丝子种子。 g.脱下的不育小花、空的颖片、内外稃、稃壳、茎叶、球果、鳞片、果翅、树皮碎片、花、线虫瘿、真菌体(如麦角、菌核、黑穗病孢子团)、泥土、砂粒、石砾及所有其他非种子物质。 A3 净种子定义细则 A3.1 大麻属(Cannabis)、茼蒿属(Chrysanthemum)、菠菜属(Spinacia) 瘦果，但明显没有种子的除外。 超过原来大小一半的破损瘦果，但明显没有种子的除外。 果皮/种皮部分或全部脱落的种子。 超过原来大小一半，果皮/种皮部分或全部脱落的破损种子。 A3.2 荞麦属(Fagopyrum)、大黄属(Rheum) 有或无花被的瘦果，但的显没有种子的除外。 超过原来大小一半的破损瘦果，但明显没有种子的除外。 果皮/种皮部全部脱落的种子。 超过原来大小一半，果皮/种皮部分或全部脱落的破损种子。 A3.3 红花属(Carthamus)、向日葵属(Helianthus)、莴苣属(Lactuca)、雅葱属(Scorzonera)、婆罗门参属(Tragopogon) 有或无喙(冠毛或喙和冠毛)的瘦果(向日葵属仅指有或无冠毛)，但明显没有种子的除外。 超过原来大小一半的破损瘦果，但明显没有种子的除外。 果皮/种皮部分或全部脱落的种子。 超过原来大小一半，果皮/种皮部分或全部脱落的破损种子。 A3.4 葱属(Allium)、苋属(Amaranthus)、花生属(Arachis)、石刁柏属(Asparagus)、黄芪属(紫云英属)(Astragalus)、冬瓜属(Benincasa)、芸苔属(Brassica)、木豆属(Cajanus)、刀豆属(Canavalia)、辣椒属(Capsicum)、西瓜属(Citrullus)、黄麻属(Corchorus)、猪屎豆属(Crotalaria)、甜瓜属(Cucumis)、南瓜属(Cucubita)、扁豆属(Dolichos)、大豆属(Glycine)、木槿属(Hibiscus)、甘薯属(Ipomoea)、葫芦属(Lagenaria)、亚麻属(Linum)、丝瓜属(Luffa)、番茄属(Lycopersicon)、苜蓿属(Medicago)、草木樨属(Melilotus)、苦瓜属(Momordica)、豆瓣菜属(Nastartium)、烟草属(Nicotiana)、菜豆属(Phaeolus)、酸浆属(Physalis)、豌豆属(Pisum)、马齿苋属(Portulaca)、萝卜属(Raphanus)、芝麻属(Sesamum)、田菁属(Sesbania)、茄属(Solanum)、巢菜属(Vicia)、豇豆属(Vigna) 有或无种皮的种子。 超过原来大小一半，有或无种皮的破损种子。 豆科、十字花科，其种皮完全脱落的种子单位应列为杂质。 即使有胚中轴、超过原来大小一半以上的附属种皮，豆科种子单位的分离子叶也列为杂质。 A3.5 棉属(Gossypium) 有或无种皮、有或无绒毛的种子。 超过原来大小一半，有或无种皮的破损种子。 A3.6 蓖麻属(Ricimus) 有或无种皮、有或无种阜的种子。 超过原来大小一半，有或无种皮的破损种子。 A3.7 芹属(Apium)、芫荽属(Coriandrum)、胡萝卜属(Daucus)、茴香属(Foeniculum)、欧防风属(Pastinaca)、欧芹属(Petroselinum)、茴芹属(Pimpinella) 有或无花梗的分果/分果 ，但明显没有种子的除外。 超过原来大小一半的破损分果 ，但明显没有种子的除外。 果皮部分或全部脱落的种子。 超过原来大小一半，果皮部分或全部脱落的破损种子。 A3.8 大麦属(Hordeum) 有内外稃包着颖果的小花，当芒长超过小花长度时，须将芒除去。 超过原来大小一半，含有颖果的破损小花。 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。 A3.9 黍属(Panicum)、狗尾草属(Setaria) 有颖片、内外稃包着颖果的小穗，并附有不孕外稃。 有内外稃包着颖果的小花。 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。 A3.10 稻属(Oryza) 有颖片、内外稃包着颖果的小穗，当芒长超过小花长度时，须将芒除去。 有或无不孕外稃、有内外稃包着颖果的小花，当芒长超过小花长度时，须将芒除去。 有内外稻包着稃果的小花，当芒长超过小花长度时，须将芒除去。 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。 A3.11 黑麦属(Secale)、小麦属(Triticum)、小黑麦属(Triticosecale)、玉米属(Zea) 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。 A3.12 燕麦属(Avena) 有内外包着颖果的小穗，有或无芒，可附有不育小花。 有内外稃包着颖果的小花，有或无芒。 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。 注：①由两个可育小花构成的小穗，要把它们分开。 ②当外部不育小花的外稃部分地包着内部可育小花时，这样的单位不必分开。 ③从着生点除去小柄。 ④把仅含有子房的单个小花列为杂质。 A3.13 高粱属(Sorghum) 有颖片、透明状的外稃或内稃(内外稃也可缺乏)包着颖果的小穗，有穗轴节片、花梗、芒，附有不育或可育小花。 有内外稃的小花，有或无芒。 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。 A3.14 甜菜属(Beta) 复胚种子：用筛孔为1.5mm×20mm的200mm×300mm的长方形筛子筛理1 min后留在筛上的种球或破损种球(包括从种球突出程度不超过种球宽度的附着断柄)，不管其中有无种子。 遗传单胚：种球或破损种球(包括从种球突出程度不超过种球宽度的附着断柄)，但明显没有种子的除外。 果皮/种皮部分或全部脱落的种子。 超过原来大小一半，果皮/种皮部分或全部脱落的破损种子。 注：当断柄突出长度超过种球的宽度时，须将整个断柄除去。 A3.15 薏苡属(Coix) 包在珠状小总苞中的小穗(一个可育，两个不育)。 颖果。 超过原来大小一半的破损颖果。 A3.16 罗勒属(Ocimum) 小坚果，但明显无种子的除外。 超过的来大小一半的破损小坚果，但明显无种子的除外。 果皮/种皮部分或完全脱落的种子。 超过原来大小一半，果皮/种皮部分或完全脱落的破损种子。 A3.17 番杏属(Tetragonia) 包有花被的类似坚果的果实，但明显无种子的除外。 超过原来大小一半的破损果实，但明显无种子的除外。 果皮/种皮部分或完全脱落的种子。 超过原来大小一半，果皮/种皮部分或完全脱落的破损种子。 ? 附录B 有稃壳种子的构造和种类 (补充件) 有稃壳的种子是由下列构造或成分组成的传播单位： a.易于相互粘连或粘在其他物体上(如包装袋、扦样器和分样器)。 b.可被其他植物种子粘连，反过来也可粘连其他植物种子。 c.不易被清选、混合或扦样。 如果稃壳构造(包括稃壳杂质)占一个样品的三分之一或更多，则认为是有稃的种子。 本标准表2、表3、表4和表5中，有稃壳种子的种类包括芹属(Apium)、花生属(Arachis)、燕麦属(Avena)，甜菜属(Beta)，茼蒿属(Chrysanthemum)，薏苡属(Coix)，胡萝卜属(Daucus)，荞麦属(Fagopyrum)，茴香属(Foeniculum)，棉属(Gossypium)，大麦属(Hordeum)，莴苣属(Lactuca)，番茄属(Lycopersicon)，稻属(Oryza)，黍属(Panicum)，欧防风属(Pastinaca)，欧芹属(Petroselinum)，茴芹属(Pimpinella)，大黄属(Rheum)，鸦葱属(Scorzonera)，狗属草属(Setaria)，高粱属(Sorghum)，菠菜属(Spinacia)。 ? 附录C 棉花种子健籽率的测定 (参考件) 健籽率是指经净度测定后的净种子样品中除去嫩籽、小籽、瘦籽等成熟度差的棉籽，留下的健壮种子数占样品总籽数的百分率。其测定方法可用下列方法之一进行测定。 B1 剪籽法 从净度分析后的净种子中，取试样4份，每份100粒，逐粒用剪刀剪(或用刀切)开，然后观察，根据色泽、饱满程度进行鉴别。色泽新鲜、油点明显、种仁饱满者为健籽；色泽浅褐、深褐、油点不明显、种仁瘪细者为非健籽。 健籽率(%)= 供检棉籽数-非健籽数 ×100   供检棉籽数   B2 开水烫种法 从净度分析后的净种子中，取试样4份，每份100粒，将试样分别置于小杯中，用开水浸烫，并搅拌5min，待棉籽短绒浸湿后，取出放在白瓷盘中，根据颜色的差异进行鉴别。呈深褐色或深红色的为成熟籽即健籽；呈浅褐色、浅红色或黄白色的为不成熟籽。 健籽率(%)= 供检棉籽数-不成熟籽数 ×100   供检棉籽数    附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农作物种子标准化技术委员会归口。 本标准由全国种子总站、浙江农业大学、四川省、黑龙江省、天津市种子公司(站)、南京农业大学、北京市、湖南省种子公司负责起草。 本标准主要起草人支巨振、毕辛华、杜克敏、常秀兰、杨淑惠、任淑萍、吴志行、李仁凤、赵菊英。 本标准首次发布于1983年3月。 本标准等效采用国际种子检验规程(ISTA，1993版)第三、第四部分 净度分析和其他植物种子数目的测定。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 中华人民共和国国家标准 农作物种子检验规程 发芽试验 Rules for agricultural seed testing -Germination test ? 1 主题内容与适用范围 本标准规定了种子发芽试验的方法。 本标准适用于农作物种子质量的检测。 2 引用标准 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB/T 3543.3 农作物种子检验规程 净度分析 3 术语 3.1 发芽 germination 在实验室内幼苗出现和生长达到一定阶段，幼苗的主要构造表明在田间的适宜条件下能否进一步生长成为正常的植株。 3.2 发芽率 Percentage germination 在规定的条件和时间内(见表1)长成的正常幼苗数占供检种子数的百分率。 3.3 幼苗的主要构造 the essential seedling structures 因种而异，由根系、幼苗中轴(上胚轴、下胚轴或中胚轴)、顶芽、子叶和芽鞘等构造组成。 3.4 正常幼苗 normal seedling 在良好土壤及适宜水分、温度和光照条件下，具有继续生长发育成为正常植株的幼苗。 3.5 不正常幼苗 abnormal seedling 生长在良好土壤及适宜水分、温度和光照条件下，不能继续生长发育成为正常植株的幼苗。 3.6 复胚种子单位 multigerm seed units 能够产生一株以上幼苗的种子单位，如伞形科未分离的分果，甜菜的种球等。 3.7 未发芽的种子 ungerminated seeds 在表1规定的条件下，试验末期仍不能发芽的种子，包括硬实、新鲜不发芽种子、死种子(通常变软、变色、发霉，并没有幼苗生长的迹象)和其他类型(如空的、无胚或虫蛀的种子)。 3.8 新鲜不发芽种子 fresh ungerminated seeds 由生理休眠所引起，试验期间保持清洁和一定硬度，有生长成为正常幼苗潜力的种子。 4 发芽床 按表1规定，通常采用纸和砂作为发芽床。除6.2条所述的特殊情况外，土壤或其他介质不宜用作初次试验的发芽床。 湿润发芽床的水质应纯净、无毒无害，pH值为6.0-7.5。 4.1 纸床 4.1.1 一般要求 具有一定的强度、质地好、吸水性强、保水性好、无毒无菌、清洁干净，不含可溶性色素或其他化学物质，pH值为6.0-7.5。 可以用滤纸、吸水纸等作为纸床。 4.1.2 生物毒性测定 利用梯牧草、红顶草、弯叶画眉草、紫羊茅和独行菜等种子发芽时对纸中有毒物质繁感的特性，将品质不明和品质合格的纸进行发芽比较试验，依据幼苗根的生长情况进行鉴定。在表1规定的第一次计数时或提前观察根部症状。若根缩短(有时出现根尖变色，根从纸上翘起，根毛成束)或(禾本科)幼苗的芽鞘扁平缩短等症状，则表示该纸含有有毒物质。 4.2 砂床 4.2.1 一般要求 砂粒大小均匀，其直径为0.05-0.80mm。无毒无菌无种子。持水力强，pH值为6.0-7.5。使用前必须进行洗涤和高温消毒。 化学药品处理过的种子样品发芽所用的砂子，不再重复使用。 4.2.2 生物毒性测定 同4.1.2所述的方法进行测定。 4.3 土壤 土质疏松良好、无大颗粒、不含种子、无毒无菌、持水力强、pH值为6.0-7.5。使用前，必须经过消毒，一般不重复使用。 5 仪器与试剂 5.1 仪器 5.1.1 数种设备 数粒板、活动数粒板、真空数种器或电子自动数粒仪等。 5.1.2 发芽器具 a.发芽箱：有光照、控温范围10-40℃。 b.雅可勃逊发芽器。 c.发芽室：室内具有可调节温度和光照的条件。 d.发芽器皿：发芽皿、发芽盘等。 5.1.3 冰箱 5.2 试剂 硝酸、硝酸钾、赤霉酸、双氧发。 6 试验程序 6.1 数取试验样品 从经充分混合的净种子中，用数种设备或手工随机数取400粒。 通常以100粒为一次重复，大粒种子或带有病原菌的种子，可以再分为50粒、甚至25粒 为一副重复。 复胚种子单位可视为单粒种子进行试验，不需弄破(分开)，但芫荽例外。 6.2 选用发芽床 各种作物的适宜发芽床已在表1中作了规定。通常小粒种子选用纸床；大粒种子选用砂 床或纸间；中粒种子选用纸床、砂床均可。 6.2.1 纸床 纸床包括纸上和纸间。 纸上(TP)是将种子放在一层或多层纸上发芽，纸可放在： a.培养皿内。 b.光照发芽箱内，箱内的相对湿度接近饱和。 c.雅可勃逊发芽器上。 纸间(BP)是将种子放在两层纸中间。可用下列方法： a.另外用一层纸松松地盖在种子上。 b.纸卷，把种子均匀置放在湿润的发芽纸上，再用另一张同样大小的发芽纸覆盖在种子 上，然后卷成纸卷，两端用皮筋扣住，竖放。 纸间可直接放在保湿的发芽箱盘内。 6.2.2 砂床 砂床包括： a.砂上(TS)：种子压入砂的表面。 b.砂中(S)：种子播在一层平整的湿砂上，然后根据种子大小加盖10-20mm厚度的松散砂。 6.2.3 土壤 当在纸床上幼苗出现植物中毒症状或对幼苗鉴定发生怀疑时，为了比较或有某些研究目 的，才采用土壤作为发芽床。 6.3 置床培养 按6.2的要求，将数取的种子均匀地排在湿润的发芽床上，粒与粒之间应保持一定的距离。 在培养器具上贴上标签，按表1规定的条件进行培养。发芽期间要经常检查温度、水分和通 气状况。如有发霉的种子应取出冲洗，严重发霉的应更换发芽床。 ? 表1 农作物种子的发芽技术规定 种（变种）名 学名 发芽床 温度，℃ 初次计数天数，d 末次计数 天数，d 附加说明，包括破除休眠的建议  1．洋葱 Allium cepa L. TP;BP;S 20;15 6 12 预先冷冻  2．葱 Allium fistulosum L. TP;BP;S 20;15 6 12 预先冷冻  3．韭葱 Alium porrum L. TP;BP;S 20;15 6 14 预先冷冻  4．细香葱 Allium schoenoprasum L. TP;BP;S 20;15 6 14 预先冷冻  5．韭菜 Allium tuberosum Rottl.ex Spreng. TP 20-30;20 6 14 预先冷冻  6．苋菜 Amaranthus tricolor L. TP 20-30;20 4-5 14 预先冷冻；KNO3  7．芹菜 Apium graveolens L. TP 15-25;20;15 10 21 预先冷冻；  8．根芹菜 Apium graveolens L.var. rapaceum DC TP 15-25;20;15 10 21 预先冷冻；  9．花生 Arachis hypogaea L. BP;S 20-30;25 5 10 去壳；预先加温（40）  10．牛蒡 Arctium lappa L. TP;BP 20-30;20 14 35 预先冷冻；四唑染色  11．石刁柏 Asparagus officinalis L. TP;BP;S 20-30;25 10 28 ?  12．紫去英 Astragalus sinicus L. TP;BP 20 6 12 机械去皮  13．裸燕麦（莜麦） Avena nuda L. BP;S 20 5 10 ?  14．普通燕麦 Avena satiiva L. BP;S 20 5 10 预先加温（30-35）  15．落葵 Basella spp. L. TP;BP 30 10 28 预先冷冻；GA3  16．冬瓜 Benincasa hispida (Thub.) Cogn. Benincasa hispida Cogn. Var. Chich-qua How. TP;BP 20-30;30 7 14 ?  17．节瓜 Beta vulgaris L. TP;BP 20-30;30 7 14 ?  18．甜菜 Beta vulgaris var.cicla TP;BP;S 20-30;15-15-20 4 14 预先洗涤  19．叶甜菜 Beta vulgaris var.rapacea TP;BP;S 20-30;15-15-20 4 14 ?  20．根甜菜 Beta vulgaris var.rapacea TP;BP;S 20-30;15-25;30 4 14 ?  21．白菜型油菜 Brassica campestris L. TP 15-25;20 5 7 ?  22．不结球白菜（包括白菜、乌塌菜、紫菜薹、薹菜、菜薹） Brassica campestris L.ssp.chinensis (L.) Makino. TP 15-25;20 5 7 预先冷冻  23．芥菜型油菜 Brassica juncea Czern.et Coss. TP 15-25;20 5 7 预先冷冻；KNO3  24．根用芥菜 15-25;20 TP 15-25;20 5 7 ?  25．叶用芥菜 15-25;20 TP 15-25;20 5 7 ?  26．茎用芥菜 15-25;20 TP 15-25;20 5 7 ?  27．甘蓝型油菜 15-25;20 TP 15-25;20 5 7 ?  28．芥蓝 15-25;20 TP 15-25;20 5 7 ?  29．结球甘蓝 15-25;20 TP 15-25;20 5 10 ?  30．球茎甘蓝（苤蓝） 15-25;20 TP 15-25;20 5 10 ?  31．花椰菜 15-25;20 TP 15-25;20 5 10 ?  32．抱子甘蓝 Brassica oleracea L. var.gemmifera Zenk. TP 15-25;20 5 10 ?  33．青花菜 Brassica oleracea L.var.italica Plench TP 15-25;20 5 10 ?  34．结球白菜 Brassica campestris L.ssp.pekinensis (Lour). Olsson TP 15-25;20 5 7 ?  35．芜菁 Brassica rapa L. TP 15-25;20 5 7 ?  36．芜菁甘蓝 Brassica napobrassica Mill. TP 15-25;20 5 14 ?  37．木豆 Cajanus cajan (L.) Millsp. BP;S 20-30;25 4 10 ?  38．大刀豆 Canavalia gladiata (Jacq.) DC BP;S 20 5 8 ?  39．大麻 Cannabis sativa L. TP;BP 20-30;20 3 7 ?  40．辣椒 Capsicum frutescens L. TP;BP;S 20-30;30 7 14 ?  41．甜椒 Capsicum frutescens var.grossum TP;BP;S 20-30;30 7 14 ?  42．红花 Carthamus tinctorius L. TP;BP;S 20-30;25 4 14 ?  43．茼蒿 Chrysanthemum coronarium var.spatisum TP;BP 20-30;15 4-7 21 ?  44．西瓜 Citrullus lanatus (Thunb.) Matsum.et Nakai BP;S 20-30;30;25 5 14 ?  45．薏苡 Coix lacryna-jobi L. BP 20-30 7-10 21 ?  46．圆果黄麻 Corchorus capsularis L. TP;BP 30 3 5 ?  47．长果黄麻 Corchorus olitorius L. TP;BP 30 3 5 ?  48．芜荽 Coriandrum sativum L. TP;BP 20-30;20 7 21 ?  49．柽麻 Crotalaria juncea L. BP;S 20-30 4 10 ?  50．甜瓜 Cucumis melo L. BP;S 20-30;25 4 8 ?  51．越瓜 Cucumis melo L.var.conomon Makino BP;S 20-30;25 4 8 ?  52．菜瓜 Cucumis melo L.var.flexuosus Naud. BP;S 20-30;25 4 8 ?  53．黄瓜 Cucumis sativus L. TP;BP;S 20-30;25 4 8 ?  54．笋瓜 （印度南瓜） Cucurbita maxima Duch.ex Lam BP;S 20-30;25 4 8 ?  55．南瓜 （中国南瓜） Cucurbita moschata (Duchesne) Duchesne ex Poiret BP;S 20-30;25 4 8 ?  56．西葫芦 （美洲南瓜） Cucurbita pepo L. BP;S 20-30;25 4 8 ?  57．瓜尔豆 Cyamopsis tetragonoloba (L.) Taubert BP 20-30 5 14 ?  58．胡萝卜 Daucus carota L. TP;BP 20-30;20 7 14 ?  59．扁豆 Dolichos lablab L. BP;S 20-30;20;25 4 10 ?  60．龙爪稷 Eleusine coracana (L.) Gaertn. TP 20-;30 4 8 ?  61．甜荞 Fagopyrum esculentum Moench TP;BP 20-30;20 4 7 ?  62．苦荞 Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn. TP;BP 20-30;20 4 7 ?  63．茴香 Foeniculum vulgare Miller TP;BP;TS 220-30;20 7 14 ?  64．大豆 Glycine max (L.) Merr. BP;S 20-30;20 5 8 ?  65．棉花 Gossypium spp. BP;S 20-30;30;25 4 12 ?  66．向日葵 Helianthus annuus L. BP;S 20-30;25;20 4 10 ?  67．红麻 Hibiscus cannabinus L. BP;S 20-30;25 4 8 ?  68．黄秋葵 Hibiscus esculentus L. TP;BP;S 20-30 4 21 ?  69．大麦 Hordeum vulgare L. BP;S 20 4 7 ?  70．蕹菜 Ipomoea aquatica Forsskal BP;S 30 4 10 ?  71．莴苣 Lactuca sativa L. TP;BP 20 4 7 ?  72．瓠瓜 Lagenaria siceraria (Molina) Standley BP;S 20-30 4 14 ?  73．兵豆（小扁豆） Lens culinars Medikus BP;S 20 5 10 ?  74．亚麻 Linum usitatissimum L. TP;BP 20-30;20 3 7 ?  75．棱角丝瓜 Luffa acutangula (L.) Roxb. BP;S 30 4 14 ?  76．普通丝瓜 Luffa cylindrica (L.) Roem. BP;S 20-30;30 4 14 ?  77．番茄 Lycopersicon lycopersicum (L.) Karsten TP;BP;S 20-30;25 5 14 ?  78．金花菜 Medicago polymorpha L. TP;BP 20 4 14 ?  79．紫花苜蓿 Medicago sativa L. TP;BP 20 4 10 ?  80．白香草木樨 Melilotus albus Desr. TP;BP 20 4 7 ?  81．黄香草木樨 Melilotus officinalis (L.) Pallas TP;BP 20 4 7 ?  82．苦瓜 Momordica charantia L. BP;S 20-30;30 4 14 ?  83．豆瓣菜 Nasturtium officinale R. Br. TP;BP 20-30 4 14 ?  84．烟草 Nicotiana tabacum L. TP 20-30 7 16 ?  85．罗勒 Ocimum basilicum L. TP;BP 20-30;20 4 14 ?  86．稻 Oryza sativa L. TP;BP;S 20-30;30 5 14 ?  87．豆薯 Pachyrhizus erous (L.) Urban BP;S 20-30;30 7 14 ?  88．黍（糜子） Panicum muliaceum L. TP;BP 20-30;25 3 7 ?  89．美洲防风 Pastinaca sativa L. TP;BP 20-30 6 28 ?  90．香芹 Petroselinum crispum (Miller) Nyman ex A.W.Hill TP;BP 20-30 10 28 ?  91．多花菜豆 Phaseolus multiflorus Willd. BP;S 20-30;20 5 9 ?  92．利马豆（莱豆） Phaseolus lunatus L. BP;S 20-30;25;20 5 9 ?  93．菜豆 Phaseolus vulgaris L. BP;S 20-30;25;20 5 9 ?  94．酸浆 Physalis pubescens L. TP 20-30 7 28 ?  95．茴芹 Pimpinella anisum L. TP;BP 20-30 7 21 ?  96．豌豆 Pisum sativum L. BP;S 20 5 8 ?  97．马齿苋 Portulaca oleracea L. TP;BP 20-30 5 14 ?  98．四棱豆 Psophocar pus tetragonolobus (L.) DC. BP;S 20-30;30 4 14 ?  99．萝卜 Raphanus sativus L. TP;BP;S 20-30;20 4 10 ?  100．食用大豆 Rheum rhaponticum L. TP; 20-30 7 21 ?  101．蓖麻 Ricinus communis L. BP;S 20-30 7 14 ?  102．鸦葱 Scorzonera his panica L. TP;BP;S 20-30;20 4 8 ?  103．黑麦 Secale cereale L. TP;BP;S 20 4 7 ?  104．佛手瓜 Sechium edule (Jacp.) Swartz BP;S 20-30;20 5 10 ?  105．芝麻 Sesamum indicum L. TP 20-30 3 6 ?  106．田菁 Sesbania cannabina (Retz.)Pers. TP;BP 20-30;25 5 7 ?  107．粟 Setaria italica (L.) Beauv. TP;BP 320-30 4 10 ?  108．茄子 Solanum melongena L. TP;BP;S 20-30;30 7 14 ?  109．高粱 Sorghum bicolor (L.) Moench TP;BP 20-30;25 4 10 ?  110．菠菜 Spinacia oleracea L. TP;BP 15;10 7 21 ?  111．黎豆 Stizolobium ssp. BP;S 20-30;20 5 7 ?  112．香杏 Tetragonia tetragonioides (Pallas) Kuntze BP;S 20-30;20 7 35 ?  113．婆罗门参 Tragopogon porrifolius L. TP;BP 20 5 10 ?  114．小黑麦 X Triticosecale Wittm. TP;BP;S 20 4 8 ?  115．小麦 Triticum aestivum L. TP;BP;S 20 4 8 ?  116．蚕豆 Vicia faba L. BP;S 20 4 14 ?  117．箭舌豌豆 Vicia sativa L. BP;S 20 5 14 ?  118．毛叶苕子 Vicia villosa Roth BP;S 20 5 14 ?  119．赤豆 Vigna angularis (Willd) Ohwi & Ohashi BP;S 20-30 4 10 ?  120．绿豆 Vigna radiata (L.) Wilczek BP;S 20-30;25 5 7 ?  121．饭豆 Vigna umbellata (Thunb.) Ohwi & Ohashi BP;S 20-30;25 5 7 ?  122．长豇豆 Vignaunguiculata W.ssp.sesquipedalis (L.) Verd. BP;S 20-30;25 5 8 ?  123．矮豇豆 Vigna unguiculata W.ssp.unguiculata (L.) Verd. BP;S 20-30;25 5 8 ?  124．玉米 Zea mays L. BP;S 20-30;25;20 4 7 ?  注：表中符号代表：TP——纸上，BP——纸间，S——砂，TS——砂上。 6.4 控制发芽条件 6.4.1 水分和通气 根据发芽床和种子特性决定发芽床的加水量。如砂床加水为其饱和含水量的60%-80%(禾谷类等中小粒种子为60%，豆类等大粒种子为80%)；如纸床，吸足水分后，沥去多余水即可；如用土壤作发芽床，加水至手握土粘成团，再手指轻轻一压就碎为宜。 发芽期间发芽床必须始终保持湿润。 发芽应使种子周围有足够的空气，注意通气。尤其是在纸卷和砂床中应注意：纸卷须相当疏松；用砂床和土壤试验时，覆盖种子的砂或土壤不要紧压。 6.4.2 温度 发芽应按表1规定的温度进行，发芽器、发芽箱、发芽室的温度在发芽期间应尽可能一致。表1规定的温度为最高限度，有光照时，应注意不应超过此限度。仪器的温度变幅不应超过±1℃。 当规定用变温时，通常应保持低温16h及高温8h。对非休眠的种子，可以在3h内逐渐变温。如是休眠种子，应在1h或更短时间内完成急剧变温或将试验移到另一个温度较低的发芽箱内。 6.4.3 光照 表1中大多数种的种子可在光照或黑暗条件下发芽，但一般采用光照。需光种子的光照强度为750-1 250勒克司(Lx)，如在变温条件下发芽，光照应在8h高温时进行。 6.5 休眠种子和处理 当试验结束还存在硬实或新鲜不发芽种子时，可采用下列一种或几种方法进行处理(详见表1)。 6.5.1 破除生理休眠的方法 a.预先冷冻：试验前，将各重复种子放在湿润的发芽床上，在5-10℃之间进行预冷处理，如麦类在5-10℃处理3d，然后在规定温度下进行发芽。 b.硝酸处理：水稻休眠种子可用硝酸溶液[c(HNO3)=0.1mol/L]浸种16-24h，然后置床发芽。 c.硝酸钾处理：硝酸钾处理适用于禾谷类、茄科等许多种子。发芽开始时，发芽床可用0.2%(m/V)的硝酸钾溶液湿润。在试验期间，水分不足时可加水湿润。 d.赤霉酸(GA3)处理：燕麦、大麦、黑麦和小麦种子用0.05%(m/V)GA3溶液湿润发芽床。当休眠较浅时用0.02(m/V)浓度，当休眠深时须用0.1%(m/V)浓度。芸苔属可用0.01%或0.02%(m/V)浓度的溶液。 e.双氧水处理：可用于小麦、大麦和水稻休眠种子的处理。用浓双氧水[29%(V/V)]处理时：小麦浸种5min，大麦浸种10-20min，水稻浸种2h。用淡双氧水处理时，小麦用1%(V/V)浓度，大麦用1.5%(V/V)浓度，水稻用3%(V/V)浓度，均浸种24h。用浓双氧水处理后，须马上用吸水纸吸去沾在种子上的双氧水，再置床发芽。 f.去稃壳处理：水稻用出糙机脱去稃壳；有稃大麦剥去胚部稃壳(外稃)；菠菜剥去果皮或切破果皮；瓜类嗑开种皮。 g.加热干燥：将发芽试验的各重复种子放在通气良好的条件下干燥，种子摊成一薄层。各种作物种子加热干燥的温度和时间见表2。 ? ? ? ? ? ? 表2 各种作物种子加热干燥的温度和时间 作物名称 温度，℃ 时间,d  大麦，小麦 30-35 3-5  高粱 30 2  水稻 40 5-7  花生 40 14  大豆 30 0．5  向日葵 30 7  棉花 40 1  烟草 30-40 7-10  胡罗卜、芹菜、菠菜、洋葱、黄瓜、甜瓜、西瓜 30 3-5  ? 6.5.2 破除硬实的方法 a.开水烫种：适用于棉花和豆类的硬实，发芽试验前将种子用开水烫种2min，再行发芽。 b.机械损伤：小心地把种皮刺穿、削破、锉伤或砂皮纸摩擦。豆科硬实可用针直接刺入子叶部分，也可用刀片切去部分子叶。 6.5.3 除去抑制物质的方法 甜菜、菠菜等种子单位的果皮或种皮内有发芽抑制物质时，可把种子浸在温水或流水中预先洗涤，甜菜复胚种子洗涤2h，遗传单胚种子洗涤4h，菠菜种子洗涤1-2h。然后将种子干燥，干燥最高温度不得超过25℃。 6.6 幼苗鉴定 6.6.1 试验持续时间 每个种的试验持续时间详见表1。试验前或试验间用于破除休眠处理所需时间不作为发芽试验时间的一部分。 如果样品在规定试验时间内只有几粒种子开始发芽，则试验时间可延长7d，或延长规定时间的一半。根据试验情况，可增加计数的次数。反之，如果在规定试验时间结束前，样品已达到最高发芽率，则该试验可提前结束。 6.6.2 鉴定 每株幼苗都必须按附录A(补充件)规定的标准进行鉴定。鉴定要在主要构造已发育到一定时期进行。根据种的不同，试验中绝大部分幼苗应达到：子叶从种皮中伸出(如莴苣属)、初生叶展开(如菜豆属)、叶片从胚芽鞘中伸出(如小麦属)。尽管一些种如胡萝卜属在试验末期，并非所有幼苗的子叶都从种皮中伸出，但至少在末次计数时，可以清楚地看到子叶基部的“颈”。 在计数过程中，发育良好的正常幼苗应从发芽床中拣出，对可疑的或损伤、畸形或不均衡的幼苗，通常到末次计数。严重腐烂的幼苗或发霉的种子应从发芽床中除去，并随时增加计数。 复胚种子单位作为单粒种子计数，试验结果用至少产生一个正常幼苗的种子单位的百分率表示。当送验者提出要求时，也可测定100个种子单位所产生的正常幼苗数，或产生一株、两株及两株以上正常幼苗的种子单位数。 6.7 重新试验 当试验出现下列情况进，应重新试验。 a.怀疑种子有休眠(即有较多的新鲜不发芽种子)，可采用表2或6.5所述的方法进行试验，将得到的最佳结果填报，应注明所用的方法。 b.由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可采用砂床或土壤进行试验。如有必要，应增加种子之间的距离。 c.当正确鉴定幼苗数有困难时，可采用表1中规定的一种或几种方法在砂床或土壤上进行重新试验。 d.当发现实验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样方法进行重新试验。 e.当100粒种子重复间的差距超过表3最大容许差距时，应采用同样的方法行重新试验。如果第二次结果与第一次结果相一致，即其差异不超过表4中所示的容许差距，则将两次试验的平均数填报在结果单上。如果第二次结果与第一次结果不相符合，其差异超过表4所示的容许差距，则采用同样的方法进行第三次试验，填报符合要求的结果平均数。 表3 同一发芽试验四次重复间的最大容许差距 (2.5%显著水平的两尾测定) 平均发芽率 最大容许差距  50%以上 50%以下   99 2 5  98 3 6  97 4 7  96 5 8  95 6 9  93-94 7-8 10  91-92 9-10 11  89-90 11-12 12  87-88 13-14 13  84-86 15-17 14  81-83 18-20 15  78-80 21-23 16  73-77 24-28 17  67-72 29-34 18  56-66 35-45 19  51-55 46-50 20  ? 表4 同一或不同实验室来自相同或不同送验样品间 发芽试验的容许差距 (2.5%显著水平的两尾测定) 平均发芽率 最大容许差距  50%以上 50%以下   98-99 2-3 2  95-97 4-6 3  91-94 7-10 4  85-90 11-16 5  77-84 17-24 6  60-76 25-41 7  51-59 42-50 8  ? 7 结果计算和表示 试验结果以粒数的百分率表示。当一个试验的四次重复(每个重复以100粒计，相邻的副重复合并成100粒的重复)正常幼苗百分率都在最大容许差距内(表3)，则其平均数表示发芽百分率。不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的百分率按四次重复平均数计算。正常幼苗、不正常幼苗和未发芽种子百分率的总和必须为100，平均数百分率修约到最近似的整数，修约0.5进入最大值中。 ? 8 结果报告 填报发芽结果时，须填报正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的百分率。假如其中任何一项结果为零，则将符号“-0-”填入该格中。 同时还须填报采用的发芽床和温度、试验持续时间以及为促进发芽所采用的处理方法。 表5 同一或不同实验室不同送验样品间 发芽试验的容许差距 (5%显著水平的一尾测定) 平均发芽率 最大容许差距  50%以上 50%以下   99 2 2  97-98 3-4 3  94-95 5-7 4  91-93 8-10 5  87-90 11-14 6  82-86 15-19 7  76-81 20-25 8  70-75 26-31 9  60-69 32-41 10  51-59 42-50 11  ? 表6 发芽试验与规定值比较的容许误差 （5%显著水平的一尾测定） ? 规定发芽率 容许差距  50%以上 50%以下   99 2 1  96-98 3-5 2  92-95 6-9 3  87-91 10-14 4  80-86 15-21 5  71-79 22-30 6  58-70 31-43 7  51-57 44-50 8  ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 附录A 正常幼苗与不正常幼苗的划分 (补充件) ? A1 术语 A1.1 初生根 primary root 由胚根发育而来的幼苗主根。 A1.2 次生根 secondary root 除初生根外的其他根。 A1.3 种子根 seminal roots 在禾谷类植物中，由初生根和胚中轴上长出的数条次生根所形成的幼苗根系。 A1.4 残缺根 stunted root 不管根的长度如何，缺少根尖或根尖有缺陷的根。 A1.5 粗短根 stubby root 虽根尖完整，但根缩短呈棒状，是幼苗中毒症状所特有的根。 A1.6 停滞根 retarded root 通常具有完整根尖，但异常短小而细弱，与幼苗的其他构造相比失去均衡。 A1.7 上胚轴 epicotyl 子叶以上至第一片真叶或一对真叶以下的部分苗轴。 A1.8 中胚轴 mesocotyl 在禾本科一些高度分化的属中，盾片着生点至胚芽之间的部分苗轴。 A1.9 下胚轴 hypocotyl 初生根以上至子叶着生点以下的部分苗轴。 A1.10 扭曲构造 twisted structure 沿着幼苗伸长主轴、下胚轴、芽鞘等幼苗构造发生扭曲状。包括轻度扭曲(loosely twisted)和严重扭曲(tightly twisted)。 A1.11 环状构造 looped structure 改变了原来的直线形，下胚轴、芽鞘等幼苗构造完全形成环状或圆圈形。 A1.12 出土型发芽 epigeal germination 由于下胚轴伸长而使子叶和幼苗中轴伸出地面的一种发芽习性。 A1.13 留土型发芽 hypogeal germination 子叶或变态子叶(盾片)留在土壤和种子内的一种发芽习性。 A1.14 子叶 cotyledon 胚和幼苗的第一片叶或第一对叶。 A1.15 腐烂 decay 由于微生物的存在而引起的有机组织溃烂。 A1.16 变色 discolouration 颜色改变或褪色。 A1.17 向地性 geotropism 植物生长对重力的反应，包括向地下生长的正向地性(positive geotropism)和向上生长的负向地性(negative geotropism)生长。 A1.18 芽鞘 coleoptile 在禾本科中，胚或幼苗芽鞘的鞘状保护构造。 A1.19 感染 infection 病原菌侵入活体(如幼苗主要构造)并蔓延，引起病症和腐烂。包括初生感染(primary infection)(种子本身携带病原菌)和次生感染(secondary infection)(其他种子或幼苗蔓延而被感染)。 A1.20 初生叶 primary leaf 在子叶后所出现的第一片叶或第一对叶。 A1.21 鳞叶 scale leaves 通常紧缩在轴上(如石刁柏、豌豆属)的一种退化叶片。 A1.22 盾片 scutellum 在禾本科某些属中所特有的变态子叶，其功能是从胚乳吸收养分输送到胚部的一种盾形构造。 A1.23 顶芽 terminal bud 由数片分化程度不同的叶片所包裹着的幼苗顶端。 A1.24 50%规则 50%-rule 如果整个子叶组织或初生叶有一半或一半以上的面积具有功能，则这种幼苗可列为正常幼苗；如果一半以上的组织不具备功能（如缺失|坏死|变色或腐烂），则为不正常幼苗。当从子叶着生点到下胚有损伤和腐烂的迹象时，这时不能采用50%规则。在鉴定有缺陷的初生叶时可以应用，但初生叶形状正常，只是叶片面积较小时则不能应用。 A2 正常幼苗 凡符合下列类型之一者为正常幼苗。 A2.1 完整幼苗 幼苗主要构造生长良好、完全、匀称和健康。 因种不同，应具有下列一些构造。 A2.1.1 发育良好的根系，其组成如下： a.细长的初生根，通常长满根毛，末端细尖。 b.在规定试验时期内产生的次生根。 c在燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属中，由数条种子根代替一条初生根。 A2.1.2 发育良好的幼苗中轴，其组成如下： a.出土型发芽的幼苗，应具有一个直立、细长并有伸长能力的下胚轴。 b.留土型发芽的幼苗，应具有一个发育良好的上胚轴。 c.在有些出土型发芽的一些属(如菜豆属、花生属)中，应同时具有伸长的上胚轴和下胚轴。 d.在禾本科的一些属(如玉米属、高粱属)中，应具有伸长的中胚轴。 A2.1.3 具有特定数目的子叶： a.单子叶植物具有一片子叶，子叶可为绿色和呈圆管状(葱属)，或变形而全部或部分遗留在种子内(如石刁柏、禾本科)。 b.双子叶植物具有二片子叶，在出土型发芽的幼苗中，子叶为绿色，展开呈叶状；在留土型发芽的幼苗中，子叶为半球形和肉质状，并保留在种皮内。 A2.1.4 具有展开、绿色的初生叶： a.在互生叶幼苗中有一片初生叶，有时先发生少数鳞状叶，如豌豆属、石刁柏属、巢菜属。 b.在对生叶幼苗中有两片初生叶，如菜豆属。 A2.1.5 具有一个顶芽或苗端。 A2.1.6 在禾本科植物中有一个发育良好、直立的芽鞘，其中包着一片绿叶延伸到顶端，最后从芽鞘中伸出。 A2.2 带有轻微缺陷的幼苗 幼苗主要构造出现某种轻微缺陷，但在其他方面能均衡生长，并与同一试验中的完整幼苗相当。 有下列缺陷则为带有轻微缺陷的幼苗。 A2.2.1 初生根： a.初生根局部损伤，或生长稍迟缓。 b.初生根有缺陷，但次生根发育良好，特别是豆科中一些大粒种子的属(如菜豆属、豌豆属、巢菜属、花生属、豇豆属和扁豆属)、禾本科中的一些属(如玉米属、高粱属和稻属)、葫芦科所有属(如甜瓜属、南瓜属和西瓜属)和锦葵科所有属(如棉属)。 c.燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属中只有一条强壮的种子根。 A2.2.2 下胚轴、上胚轴或中胚轴局部损伤。 A2.2.3 子叶(采用“50%规则”)： a.子叶局部损伤，但子叶组织总面积的一半或一半以上仍保持着正常的功能，并且幼苗顶端或其周围组织没有明显的损伤或腐烂。 b.双子叶植物仅有一片正常子叶，但其幼苗顶端或其周围组织没有明显的损伤或腐烂。 A2.2.4 初生叶： a.初生叶局部损伤，但其组织总面积的一半或一半以上仍保持着正常的功能(采用“50%规则”)。 b.顶芽没有明显的损伤或腐烂，有一片正常的初生叶，如菜豆属。 c.菜豆属的初生叶形状正常，大于正常大小的四分之一。 d.具有三片初生叶而不是两片，如菜豆属(采用“50%规则”)。 A2.2.5 芽鞘： a.芽鞘局部损伤。 b.芽鞘从顶端开裂，但其裂缝长度不超过芽鞘的三分之一。 c.受内外稃或果皮的阻挡，芽鞘轻度扭曲或形成环状。 d芽鞘内的绿叶，没有延伸到芽鞘顶端，但至少要达到芽鞘的一半。 A2.3 次生感染的幼苗 由真菌或细菌感染引起，使幼苗主要构造发病和腐烂，但有证据表明病源不来自种子本身。 A3 不正常幼苗 不正常幼苗有三种类型： a.受损伤的幼苗：由机械处理、加热、干燥、昆虫损害等外部因素引起，使幼苗构造残缺不全或受到严重损伤，以致于不能均衡生长者。 b.畸形或不匀称的幼苗：由于因素引起生理紊乱，幼苗生长细弱，或存在生理障碍，或主要构造畸形，或不匀称者。 c.腐烂幼苗：由初生感染(病源来自种子本身)引起，使幼苗主要构造发病和腐烂，并妨碍其正常生长者。 在实际过程中，凡幼苗带有下列一种或一种以上的缺陷则列为不正常幼苗。 A3.1 根 A3.1.1 初生根： a.残缺； b.短粗； c.停滞； d.缺失； e.破裂； f.从顶端开裂； g.缩缢； h.纤细； i.卷缩在种皮内； j.负向地性生长； k.水肿状； l.由初生感染所引起的腐烂。 3.1.2 种子根： 没有或仅有一条生长力弱的种子根。 注：次生根或种子根带有上述一种或数种缺陷者列为不正常幼苗，但是对具有数条次生根(见A2.2.1b.)或至少具有一条强壮种子根(见A2.2.1c.)的幼苗应列入正常幼苗。 A3.2 下胚轴、上胚轴或中胚轴 a.缩短而变粗； b.深度横裂或破裂； c.纵向裂缝(开裂)； d.缺失； e.缩缢； f.严重扭曲； g.过度弯曲； h.形成环状或螺旋形； i.纤细； j.水肿状； k.由初生感染所引起的腐烂。 A3.3 子叶(采用“50%规则”) A3.3.1 除葱属外所有属的子叶缺陷： a.肿胀卷曲； b.畸形； c.断裂或其他损伤； d.分离或缺失； e.变色； f.坏死； g.水肿状； h.由初生感染所引起的腐烂。 注：在子叶与苗轴着生点或与苗端附近处发生损伤或腐烂的幼苗就列入不正常幼苗，这时不考虑“50%规则”。 A3.3.2 葱属子叶的特定缺陷： a.缩短而变粗； b.缩缢； c.过度弯曲； d.形成环状或螺旋形； e.无明显的“膝”； f.纤细。 A3.4 初生叶(采用“50%规则”) a.畸形； b.损伤； c.缺失； d.变色； e.坏死； f.由初生感染所引起的腐烂； h.虽形状正常，但小于正常叶片大小的四分之一。 A3.5 顶芽及周围组织 a.畸形； b.损伤； c.缺失； d.由初生感染所引起的腐烂。 注：假如顶芽有缺陷或缺失，即使有一个或两个已发育的腋芽(如菜豆属)或幼梢(如豌豆属)，也列为不正常幼苗。 A3.6 胚芽鞘和第一片叶(禾本科) A3.6.1 胚芽鞘： a.畸形； b.损伤； c.缺失； d.顶端损伤或缺失； f.严重过度弯曲； g.形成环状或螺旋形； h.严重扭曲； i.裂缝长度超过从顶端量起的三分之一； j.基部开裂； k.纤细； l.由初生感染所引起的腐烂。 A3.6.2 第一叶： a.延伸长度不到胚芽鞘的一半； b.缺失； c.撕裂或其他畸形。 A3.7 整个幼苗 a.畸形； b.断裂； c.子叶比根先长出； d.两株幼苗连在一起； e.黄化或白化； f.纤细； g.水肿状； h.由初生感染所引起的腐烂。 ? ? 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农作物种子标准化技术委员会归口。 本标准由全国种子总站、浙江农业大学、四川省、黑龙江省、天津市种子公司(站)、南京农业大学、北京市、湖南省种子公司负责起草。 本标准主要起草人支巨振、毕辛华、杜克敏、常秀兰、杨淑惠、任淑萍、吴志行、李仁凤、赵菊英。 本标准首次发布于1983年3月。 本标准等效采用国际种子规程(ISTA，1993版)第五部分 发芽试验。 ? ? ? 中华人民共和国国家标准 GB/T 3543.5-1995 农 作 物 种 子 检 验 规 程 代替GB 35343.-83 真实性和品种纯度鉴定 Rules for agricultural seed testing -Verification of genuineness and cultivar ? ? ? 1 主题内容与适用范围 本标准了测定种子真实性品种纯度的方法。 本标准规定适用于农作物种子质量的检测。 ? 2 引用标准 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 ? 3 术语 3.1 种子真实性 genuineness of seed 供检品种与文件记录(如标签等)是否相符。 3.2 品种纯度 varietal purity 品种在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。 3.3 变异株 off-type 一个或多个性状(特征特性)与原品种育成者所描述的性状明显不同的植株。 3.4 育种家种子 breeder seed 育种家育成的遗传性状稳定的品种或亲本种子的最初一批种子，用于进一步繁殖原种种子。 3.5 原种 basic seed 用育种家种子繁殖的第一代至第三代，或按原种生产技术规程生产的达到原种质量标准的种子，用于进一步繁殖良种种子。 3.6 良种 certified seed 用常规种原种繁殖的第一代至第三代和杂交种达到良种质量标准的种子，用于大田生产。 ? 4 试剂 苯酚、愈创木酚、过氧化氢、氢氧化钾、氢氧化钠、氯化氢。 5 仪器和设备 其仪器和设备也随方法的差异而不同。 a.在实验室中测定 配备适宜的仪器(如体视显微镜、扩大镜、解剖镜)与试剂，以供种子形态、生理及细胞学的检查、化学测定及种子发芽之用。 b.在温室和培养室中测定 配备能调节环境条件的设备(如生长箱)，以利诱导鉴别性状的发育。 c.在田间小区里鉴定 需具有能使鉴定性状正常发育的气候、土壤及栽培条件，并对防治病虫害有相对的保护措施。 ? 6 测定程序 6.1 送验样品的重量 品种纯度测定的送验样品的最小重量应符合表1的规定。 ? 表1 品种纯度测定的送验样品重量 种 类 限于实验室测定 田间小区及实验室测定  豌豆属、菜豆属、蚕豆属、玉米属、大豆属及种子大小类似的其他属 1000 2000  水稻属、大麦属、燕麦属、小麦属、黑麦属及种子大小类似的其他属 500 1000  甜菜属及种子大小类似的其他属 250 500  所有其他属 100 250  ? 6.2 种子鉴定 6.2.1 形态鉴定法 随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每个重复不超过100粒种子。 根据种子的形态特征，必要时可借助扩大镜等进行逐粒观察，必须备有标准样品或鉴定图片和有关资料。 水稻种子根据谷粒形状、长宽比、大小、稃壳和稃尖色、稃毛长短、稀密、柱头夹持率等；大麦种子根据籽粒形状、外稃基部皱褶、籽粒颜色、腹沟基刺、腹沟展开程度、外稃侧背脉纹齿状物及脉色、外稃基部稃壳皱褶凹陷、小穗轴茸毛多少、鳞被(浆片)形状及茸毛稀密等；大豆种子可根据种子大小、形状、颜色、光泽、光滑度、蜡粉多少及种脐形状颜色等；葱类可根据种子大小、形状、颜色、表面构造及脐部特征等。 6.2.2 快速测定法 随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复每个重复不超过100粒种子。 a.苯酚染色法 小麦、大麦、燕麦：将种子浸入清水中经18-24h，用滤纸吸干表面水分，放入垫有已经1%苯酚溶液湿润滤纸的培养皿内(腹沟朝下)。在室温下，小麦保持4h，燕麦2h，大麦24h后即可鉴定染色深浅。小麦观察颖果染色情况，大麦、燕麦评价种子内外稃染色情况。通常颜色分为五级即浅色、淡褐色、褐色、深褐色和黑色。将与基本颜色不同的种子取出作为异品种。 水稻：将种子浸入清水中经6h，倒去清水，注入1%(m/V)苯酚溶液，室温下浸12h取出用清水洗涤，放在滤纸上经24h，观察谷粒或米粒染色程度。谷粒染色分为不染色、淡茶褐色、茶褐色、黑褐色和黑色五级；米粒染色分不染色、淡茶褐色、褐色或紫色三级。 b.大豆种皮愈创木酚染色法 将每粒大豆种子的种皮剥下，分别放入小试管内，然后注入1ml蒸馏水，在30℃下浸提1h，再在每支试管中加入10滴0.5%愈创木酚溶液，10min后，每支试管加入1滴0.1%过氧化氢溶液。1min后，计数试管内种皮浸出液呈现红棕色的种子数与浸出液呈无色的种子数。 c.高粱种子氢氧化钾-漂白粉测定法 配制1：5(m/V)氢氧化钾和新鲜普通漂白粉(5.25%漂白粉)的混合液[即1g氧化钾(KOH)加入5.0mL漂白液]，通常准备100mL溶液，贮于冰箱中备用。将种子放入培养皿内，加入氢氧化钾-漂白液(测定前应置于室温一段时间)以淹没种子为度。棕色种皮浸泡10min。浸泡中定时轻轻摇晃使溶液与种子良好接触，然后把种子倒在纱网上，用自来水慢慢冲洗，冲洗后把种子放入在纸上让其气干，待种子干燥后，记录黑色种子数与浅色种子数。 d.燕麦种子荧光测定法 应用波长360A紫外光照射，在暗室内鉴定。将种子排列在黑纸上，置于距紫外光下10-15cm处，照射数秒至数分钟后即可根据内外稃有无荧光发出进行鉴定。 e.燕麦种子氯化氢测定法 将燕麦种子放入早已配好的氯化氢溶液[1份38%(V/V)盐酸(HCI)和4份水]的玻璃器皿中浸泡6h，然后取出放在滤纸上让其气干1h。根据棕褐色(荧光种子)或黄色(非荧光种子)来鉴别种子。 f.小麦种子的氢氧化钠测定法 当小麦种子红白皮不易区分(尤其是经杀菌剂处理的种子)时，可用氢氧化钠测定法加以区别。数取400粒或更多的种子，先用95%(V/V)甲醇浸泡15min，然后让种子干燥30min，在室温下将种子浸泡在5M/L NaOH溶液中5min，然后将种子移至培养皿内，不可加盖，让其在室温下干燥，根据种子浅色和深色加以计数。 6.2.3 小麦、大麦醇溶蛋白的酸性聚丙烯酰胺电泳法见附录A(参考件)。 6.3 幼苗鉴别 随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每重复为100粒种子。在培养室或温室中，可以用100粒。二次重复。 幼苗鉴定可以通过两个主要途径：一种途径是提供给植株以加速发育的条件(类似于田间小区鉴定，只是所需时间较短)，当幼苗达到适宜评价的发育阶段时，对全部或部分幼苗进行鉴定；另一种途径是让植株生长在特殊的逆境条件下，测定不同品种对逆境的不同反应来鉴别不同品种。 禾谷类：禾谷类作物的芽鞘、中胚轴有紫色与绿色两大类，它们是受遗传基因控制的。将种子播在砂中(玉米、高粱种子间隔1.0cm×4.5cm，燕麦、小麦种子间隔2.0cm×4.0cm， 播种深度1.0cm)，在25℃恒温下培养，24h光照。玉米、高粱每天加水，小麦、燕麦每隔4d施加缺磷的Hoagland 1号培养液，在幼苗发育到适宜阶段时，高粱、玉米14d，小麦7d，燕麦10-14d，鉴定芽鞘的颜色。 注：缺磷的Hoagland 1号培养液配方：在1L蒸馏水中加入4mL1M/L硝酸钙溶液[Ca(NO3)2]、2mL1 M/L硫酸镁溶液(MgSO4)和6mL 1M/L硝酸钾溶液(KNO3)。 大豆：把种子播于砂中(种子间隔2.5cm×2.5cm，播种深度2.5cm)，在25℃下培养，24h光照，每隔4d施加Hoagland1号培养液，至幼苗各种特征表现明显时，根据幼苗下胚轴颜色(生长10-14d)、茸毛颜色(21d)、茸毛在胚轴上着生的角度(21d)、小叶形状(21d)等进行鉴定。 注：Hoagland1号培养液配方：在1L蒸馏水中加入1mL 1M/L磷酸二氢钾溶液(KH2PO4)、5mL1 M/L硝酸钾溶液(KNO3)、5mL1 M/L硝酸钙溶液(Ca(NO3)2)和2mL1 M/L硫酸镁溶液(MgSO4)。 莴苣：将莴苣种子播在砂中(种子间隔1.0cm×4.0cm，播种深度1cm)，在25℃恒温下培养，每隔4d施加Hoaglandl号培养液，3周后(长有3-4片叶)根据下胚轴颜色、叶色、叶片卷曲程度和子叶等形状行鉴别。 甜菜：有些栽培品种可根据幼苗颜色(白色、黄色、暗红色或红色)来区别。将种球播在培养皿湿砂上，置于温室的柔和日光下，经7d后，检查幼苗下胚轴的颜色。根据白色与暗红色幼苗的比例，可在一定程度上表明糖用甜菜及白色饲料甜菜栽培品种的真实性。 6.4 田间小区种植鉴定1) 田间小区种植是鉴定品种真实性和测定品种纯度的最为可靠、准确的方法。为了鉴定品种真实性，应在鉴定的各个阶段与标准样品进行比较。对照的标准样品为栽培品种提供全面的、系统的品种特征特性的现实描述，标准样品应代表品种原有的特征特性，最好是育种家种子。标准样品的数量应足够多，以便能持续使用多年，并在低温干燥条件下贮藏，更换时最好从育种家处获取。 注：1)本节等效采用国际贸易中种子流通的OECD品种认证方案《小区鉴定方法指南》(OECD1982)。 为使品种特征特性充分表现，试验的设计和布局上要选择气候环境条件适宜的、土壤均匀、肥力一致、前茬无同类作物和杂草的田块，并有适宜的栽培管理措施。 行间及株间应有足够的距离，大株作物可适当增加行株距，必要时可用点播和点栽。 为了测定品种纯度百分率，必须与现行发布实施的国家标准种子质量标准相联系起来。试验设计的种植株数要根据国家标准种子质量标准的要求而定，一般来说，若标准为(N-1)×100%/N，种植株数4N即可获得满意结果，如标准规定纯度为98%，即N为50，种植200株即可达到要求。 检验员应拥用丰富的经验，熟悉被检品种的特征特性，能正确判别植株是属于本品种还是变异株。变异同株应是遗传变异，而不是受环境影响所引起的变异。 许多种在幼苗期就有可能鉴别出品种真实性和纯度，但成熟期(常规种)、花期(杂交种)和食用器官成熟期(蔬菜种)是品种特征特性表现时期，必须进行鉴定。 良种品种纯度是否达到国家标准种子质量标准、合同和标签的要求，可利用表2进行判别。 ? 表 2 品种纯度的容许差距 (5%显著水平的一尾测定) 标准规定值 样本株数、苗数或种子粒数  50%以上 50%以下 50 75 100 150 200 400 600 1000  100 0 0 0 0 0 0 0 0 0  99 1 2.3 1.9 1.6 1.3 1.2 0.8 0.7 0.5  98 2 3.3 2.7 2.3 1.9 1.6 1.2 0.9 0.7  97 3 4.0 3.3 2.8 2.3 2.0 1.4 1.2 0.9  96 4 4.6 3.7 3.2 2.6 2.3 1.6 1.3 1.0  95 5 5.1 4.2 3.6 2.9 2.5 1.8 1.5 1.1  94 6 5.5 4.5 3.9 3.2 2.8 2.0 1.6 1.2  93 7 6.0 4.9 4.2 3.4 3.0 2.1 1.7 1.3  92 8 6.3 5.2 4.5 3.7 3.2 2.2 1.8 1.4  91 9 6.7 5.5 4.7 3.9 3.3 2.4 1.9 1.5  90 10 7.0 5.7 5.0 4.0 3.5 2.5 2.0 1.6  89 11 7.3 6.0 5.2 4.2 3.7 2.6 2.1 1.6  88 12 7.6 6.2 5.4 4.4 3.8 2.7 2.2 1.7  87 13 7.9 6.4 5.5 4.5 3.9 2.8 2.3 1.8  86 14 8.1 6.6 5.7 4.7 4.0 2.9 2.3 1.8  85 15 8.3 6.8 5.9 4.8 4.2 3.0 2.4 1.9  84 16 8.6 7.0 6.1 4.9 4.3 3.0 2.5 1.9  83 17 8.8 7.2 6.2 5.1 4.4 3.1 2.5 2.0  82 18 9.0 7.3 6.3 5.2 4.5 3.2 2.6 2.0  81 19 9.2 7.5 6.5 5.3 4.6 3.2 2.6 2.1  80 20 9.3 7.6 6.6 5.4 4.7 3.3 2.7 2.1  79 21 9.5 7.8 6.7 5.5 4.8 3.4 2.7 2.1  78 22 9.7 7.9 6.8 5.6 4.8 3.4 2.8 2.2  77 23 9.8 8.0 7.0 5.7 4.9 3.5 2.8 2.2  76 24 10.0 8.1 7.1 5.8 5.0 3.5 2.9 2.2  75 25 10.1 8.3 7.1 5.8 5.1 3.6 2.9 2.3  74 26 10.2 8.4 7.2 5.9 5.1 3.6 3.0 2.3  73 27 10.4 8.5 7.3 6.0 5.2 3.7 3.0 2.3  72 28 10.5 8.6 7.4 6.1 5.2 3.7 3.0 2.3  71 29 10.6 8.7 7.5 6.1 5.3 3.8 3.1 2.4  70 30 10.7 8.7 7.6 6.2 5.4 3.8 3.1 2.4  69 31 10.8 8.8 7.6 6.2 5.4 3.8 3.1 2.4  68 32 10.9 8.9 7.7 6.3 5.5 3.8 3.2 2.4  67 33 11.0 9.0 7.8 6.3 5.5 3.9 3.2 2.5  66 34 11.1 9.0 7.8 6.4 5.5 3.9 3.2 2.5  65 35 11.1 9.1 7.9 6.4 5.6 3.9 3.2 2.5  64 36 11.2 9.1 7.9 6.5 5.6 4.0 3.2 2.5  63 37 11.3 9.2 8.0 6.5 5.6 4.0 3.3 2.5  62 38 11.3 9.2 8.0 6.5 5.7 4.0 3.3 2.5  61 39 11.4 9.3 8.1 6.6 5.7 4.0 3.3 2.5  60 40 11.4 9.3 8.1 6.6 5.7 4.0 3.3 2.5  59 41 11.5 9.4 8.1 6.6 5.7 4.1 3.3 2.6  58 42 11.5 9.4 8.2 6.7 5.8 4.1 3.3 2.6  57 43 11.6 9.4 8.2 6.7 5.8 4.1 3.3 2.6  56 44 11.6 9.5 8.2 6.7 5.8 4.1 3.4 2.6  55 45 11.6 9.5 8.2 6.7 5.8 4.1 3.4 2.6  54 46 11.6 9.5 8.2 6.7 5.8 4.1 3.4 2.6  53 47 11.6 9.5 8.2 6.7 5.8 4.1 3.4 2.6  52 48 11.7 9.5 8.3 6.7 5.8 4.1 3.4 2.6  51 49 11.7 9.5 8.3 6.7 5.8 4.1 3.4 2.6  50 ? 11.7 9.5 8.3 6.7 5.8 4.1 3.4 2.6  ? 国家标准种子质量标准规定纯度要求很高的种子，如育种家种子、原种，是否符合要求，可利用淘汰值。淘汰值是在考虑种子生产者利益和有较少可能判定失误的基础上，把在一个样本内到的变异株数与质量标准比较，作出接受符合要求的种子批或淘汰该种子批观察，其可靠程度与样本大小密切相关(见表3)。 ? 表3 不同样本大小符合标准99.9%接收含有变异株种子批的可靠程度 样本大小 （株数） 淘汰值 接受种子批的可靠程度，%    1．5/1000 2/1000 3/1000  1 000 4 93 85 65  4 000 9 85 59 16  8 000 14 68 27 1  12 000 19 56 13 0.1  注：1)是指每1 000株中所实测到的变异株。 不同规定标准与不同样本大小下的淘汰值见表4，如果变异株大于或等于规定的淘汰值，就应淘汰该种子批。 ? ? ? ? 表4 不同规定标准与不同样本大小的淘汰值 规定标准 % 不同样本（株数）大小的淘汰值   4 000 2 000 1 400 1 000 400 300 200  99.9 9 6 5 4 - - -  99.7 19 11 9 7 4 - -  99.0 52 29 21 16 9 7 6  ? 注：下方有“—”的数字或“—”均表示样本的数目太少。 7 结果计算和表示 7.1 种子和幼苗 用种子或幼苗鉴定时，用本品种纯度百分率表示。 供检种子粒数(幼苗数)-异品种种子粒数(幼苗数) 品 种纯 度（%）= ×100 供检种子粒数(幼苗数) ? 7.2 田间小区鉴定 将所鉴定的本品种、异品种、异作物和杂草等均以所鉴定植株的百分率表示。 8 结果报告 在实验室、培养室所测定的结果须填报种子数、幼苗数或植株数。 田间小区种植鉴定结果除品种纯度外，可能时还填报所发现的异作物、杂草和其他栽培品种的百分率。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 附录A 聚丙烯酰胺电泳法测定大麦、小麦种子纯度 (参考件) ? A1 原理 从种子中提取的醇溶蛋白在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应组成作用下得到良好的分离，通过显色显示蛋白质谱带类型。不同品种由于遗传不同，种子内所含的蛋白质种类有差异，这种差异可利用电泳图谱加以鉴别，从而对品种真实性和纯度进行鉴定。 A2 仪器和试剂 A2.1 仪器 电泳仪(满足稳压500V)，离心机，垂直板电泳槽，钳子，5mL、10mL移液管，微量进样器，聚丙烯离心管。 A2.2 试剂 尿素、乙醇、甘氨酸、甲基绿、三氯乙酸、冰乙酸、过氧化氢、硫酸亚铁、抗坏血酸、α-巯基乙醇、丙烯酰胺、考马斯亮蓝R-250，甲叉双丙烯酰胺、α-氯乙醇。 A3 程序 A3.1 药剂配制 A3.1.1 蛋白质提取液 小麦：0.05g甲基绿溶于25mLα-氯乙醇中，加蒸馏水至100mL。低温保存。 大麦：0.05g甲基绿溶于20mLα-氯乙醇中，加入18g尿素，再加入1mLα-巯基乙醇，加蒸馏水至100mL。低温保存。 A3.1.2 电极缓冲液 0.4g甘氨酸加蒸馏水溶解，加4mL冰乙酸，加蒸馏水至1000mL。低温保存。 A3.1.3 凝胶缓冲液 1.0g甘氨酸加蒸馏水溶解，加入20mL冰乙酸，定容至1000mL。低温保存。 A3.1.4 0.6%过氧化氢 30%过氧化氢2mL加蒸馏水定容至100mL。低温保存。 A3.1.5 染色液 0.25g考马斯亮蓝加25mL无水乙醇溶解，加入50g三氯乙酸，加水至500mL。 A3.1.6 凝胶液 丙烯酰胺20g，甲叉双丙烯酰胺0.8g，尿素12g，硫酸亚铁0.01g，抗坏血酸0.2g，用凝胶缓冲液溶解并定容至200mL。低温保存。 A3.2 样品提取 一般每个样品测定100粒种子，若更准确地估测品种纯度，则需更多的种子。如果分析结果要与某一纯度标准值比较，可采用顺次测定法(sequential testing)来确定，即50粒作为一组，必要时可连续测定数组，以减少工作量。如果只鉴定真实性，可用50粒。 取小麦或大麦种子，用钳子逐粒夹碎(夹种子时，最好垫上小片清洁的纸，以便于清理钳头和防止样品之间的污染)，置1.5mL离心管中，加入蛋白质提取液(小麦0.2mL，大麦0.3mL)，充分摇动混合，在室温下提取24h，然后在18000×g条件下离心15min。取其上清液用于电泳。 A3.3 凝胶制备 从冰箱中取出凝胶溶液和过氧化氢溶液，吸取10mL凝胶溶液，加1滴0.6%过氧化氢，摇匀后迅速倒入封口处，稍加晃动，使整条缝口充满胶液，让其在5-10min聚合封好。 吸取45mL凝胶溶液，加3滴0.6%过氧化氢，迅速摇匀，倒入凝胶板之间，马上插好样品梳，让其在5-10min内聚合。 A3.4 进样 小心抽出样品梳，将玻璃板夹在电泳槽上，用滤纸或注射器吸去样品槽中多余的水分，然后用微量进样器吸取10-20μL样品加入样品槽中。 A3.5 电泳 在前后槽注入电极液，前槽接正极，后槽接负极。然后打开电源，逐渐将电压增加到500V。电泳时，要求在15-20℃温度下进行。电泳时间一般为60-80min，具体时间可按甲基绿迁移时间来推算，电泳时间为甲基绿移至前沿所需时间的2-2.5倍。 A3.6 染色 将胶板小心地取下，在染色液中染色1-2d。一般情况不需要脱色，但为使谱带清晰，可用清水冲洗。 A3.7 鉴定 谱带命名可采用相对迁移率法或电泳程式法。根据醇溶蛋白谱带的组成和带型的一致性，并与标准样品电泳图谱相比较，鉴定种子真实性以及测定品种纯度。 ? ? 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农作物种子标准化技术委员会归口。 本标准由全国种子总站、浙江农业大学、四川省、黑龙江省、天津市种子公司(站)、南京农业大学、北京市、湖南省种子公司负责起草。 本标准主要起草人支巨振、毕辛华、杜克敏、常秀兰、杨淑惠、任淑萍、吴志行、李仁凤、赵菊英。 本标准首次发布于1983年3月。 本标准参照采用国际种子检验规程(ISTA，1993版)第八部分 种及栽培品种的鉴定。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 中华人民共和国国家标准 GB/T 3543.6-1995 农 作 物 种 子 检 验 规 程 代替 GB 3543-83 水 分 测 定 Rules for agricultual seed testing -Determination of moisture content ? 1 主题内容与适用范围 ? 本标准规定了农作物种子水分的测定方法。 本标准适用于农作物种子质量的检测。 ? 2 引用标准 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 ? 3 术语 水分 moisture content 按规定程序把种子样品烘干所失去的重量，用失去重量占供检样品原始重量的百分率表示。 ? 4 仪器设备 a.恒温烘箱：装有可移动多孔的铁丝网架和可测到0.5℃的温度计。 b.粉碎(磨粉)机：备有0.5，1.0和4.0mm的金属丝筛子。 c.样品盒、干燥器、干燥剂等。 d.天平：感量达到0.001g。 ? 5 测定程序 由于自由水易受外界环境条件的影响，所以应采取一些措施尽量防止水分的丧失。如送验样品必须装在防湿容器中，并尽可能排除其中的空气；样品接收后立即测定；测定过程中的取样、磨碎和称重须操作迅速；避免磨碎蒸发等。不磨碎种子这一过程所需的时间不得超过2min。 5.1 低恒温烘干法 5.1.1 适用种类 葱属(Allium spp.)，花生(Arachis hypogaea)，芸苔属(Brassica spp.)，辣椒属(Capsicum spp.)，大豆(Glycine max)，棉属(Gossypium spp.)，向日葵(Helianthus annuus)，亚麻(linum usitatissimum)，萝卜(Raphanus sativus)，蓖麻(Ricinus communis)，芝麻(Sesamum indicum)，茄子(Solanum melongena)。 该法必须在相对湿度70%以下的室内进行。 5.1.2 取样磨碎 供水分测定的送验样品必须符合GB/T 3543.2的要求。用下列一种方法进行充分混合，并从此送验样品取15-25g。 a.用匙在样品罐内搅拌。 b.将原样品罐的罐口对准另一个同样大小的空罐口，把种子在两个容器间往返倾倒。 烘干前必须磨碎的种子种类及磨碎细度见表1。 ? 表1 必须磨碎的种子种类及磨碎细度 作物种类 磨碎细度  燕麦(Avena spp.) 水稻(Oryza sativa L.) 甜荞(Fagopyrum esculentum) 苦荞(Fagopyrum tataricum) 黑麦(Secale cereale) 高粱属(Sorghum spp.) 小麦属(Triticum spp.) 玉米（Zea mays） 至少有50%的磨碎成分通过0.5mm筛孔的金属丝筛，而留在1.0mm筛孔的金属丝筛子上不超过10%。  大豆(Glycine max) 菜豆属(Phaseolus spp.) 豌豆(Pisum sativum) 西瓜(Citrullus lanatus) 巢菜属（Vicia spp.） 需要粗磨，至少有50%的磨碎成分通过4.0mm筛孔  棉属(Gossypium spp.) 花生(Arachis hypogaea) 蓖麻(Ricinus communis) 磨碎或切成薄片   进行测定需取二个重复的独立试验样品。必须使试验样品在样品盒的分布为每平方厘米不超过0.3g。 取样勿直接用手触摸种子，而应用勺或铲子。 5.1.3 烘干称重 先将样品盒预先烘干、冷却、称重，并记下盒号，取得试样两份(磨碎种子应从不同部位取得)，每份4.5-5.0g，将试样放入预先烘干和称重过的样品盒内，再称重(精确至0.001g)。使烘箱通电预热至110-115℃，将样品摊平放入烘箱内的上层，样品盒距温度计的水银球约2.5cm处，迅速关闭烘箱门，使箱温在5-10min内回升至103±2℃时开始计算时间，烘8h。用坩埚钳或戴上手套盖好盒盖(在箱内加盖)，取出后入干燥器内冷却至室温，约30-45min后再称重。 5.2 高温烘干法 适用于下列种子种类：芹菜(Apium graveolens)，石刁柏(Asparagus officinalis)，燕麦属(Auenaspp.)，甜菜(Beta vulgaris)，西瓜(Citrullus lanatus)，甜瓜属(Cucumis spp.)，南瓜属(Cucurbita spp.)，胡萝卜(Daucus carota)，甜荞(Fagopyrum esculentum)，苦荞(Fagopyrum tataricum)，大麦(Hordeum vulgare)，莴苣(Lactuca sativa)，番茄(Lycopersicon lycopersicum)，苜蓿属(Medicago spp.)，草木樨属(Melilotus spp.)，烟草(Nicotiana tabacum)，水稻(Oryza sativa)，黍属(Panicum spp.)，菜豆属(Phaseolus spp.)，豌豆(Pisum sativum)，鸦葱(Scorzonera hispanica)，黑麦(Secale cereale)，狗尾草属(Setaria spp.)，高粱属(sorghum spp.)，菠菜(Spinacia oleracea)，小麦属(Triticum spp.)，巢菜属(Vicia spp.)，玉米(Zea mays)。 其程序与低恒温烘干法相同。必须磨碎的种子种类及磨碎细度见表1。 首先将烘箱预热至140-145℃，打开箱门5-10min后，烘箱温度须保持130-133℃，样品烘干时间为1h。 5.3 高水分预先烘干法 需要磨碎的种子，如果禾谷类种子水分超过18%，豆类和油料作物水分超过16%，必须采用预先烘干法。 称取两份样品各25.00±0.02g，置于直径大于8cm的样品盒中，在103±2℃烘箱中预烘30min(油料种子在70℃预烘1h)。取出后放在室温冷却和称重。此后立即将这两个半干样品分别磨碎，并将磨碎物各取一份样品按5.1或5.2条所规定的方法进行测定。 ? 6 结果计算 6.1 结果计算 根据烘后失去的重量计算种子水分百分率，按式(1)计算到小数点后一位： 种子水分(%)=[（M2-M3）/（M2-M1）] ×100 式中：M1—样品盒和盖的重量，g； M2—样品盒和盖及样品的烘前重量，g； M3—样品盒和盖及样品的烘后重量，g。 若用预先烘干法，可从第一次(预先烘干)和第二次按上述公式计算所得的水分结果换算样品的原始水分，按式(2)计算。 种子水分(%)=S1+S2-（S1×S2）/100 式中：S1—第一次整粒种子烘后失去的水分，%； S2—第二次磨碎种子烘后失去的水分，%。 6.2 容许差距 若一个样品的两次测定之间的差距不超过0.2%，其结果可用两次测定值的算术平均数表示。否则，重做两次测定。 ? 7 结果报告 结果填报在检验结果报告的规定空格中，精确度为0.1%。 ? ? 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农作物种子标准化技术委员会归口。 本标准由全国种子总站、浙江农业大学、四川省、黑龙江省、天津市种子公司(站)、南京农业大学、北京市、湖南省公司种子负责起草。 本标准主要起草人支巨振、毕辛华、杜克敏、常秀兰、杨淑惠、任淑萍、吴志行、李仁凤、赵菊英。 本标准首次发布于1983年3月。 本标准参照采用国际种子检验规程(ISTA，1993版)第九部分 水分测定。 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 中华人民共和国标准 GB/T 3543.7-1995 农 作 物 种 子 检 验 规 程 代替 GB 3543-83 其 他 项 目 检 验 Rules for agrivultual seed testing -Other testing ? ? 1 主题内容与适用范围 本标准规定了种子生活力的生化(四唑)测定、种子健康测定、种子重量测定和包衣种子质量检验方法。 本标准适用于农作物种子质量的检测。 ? 2 引用标准 GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB/T 3543.3 农作物种子检验规程 净度分析 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 ? 3 术语 3.1 种子生活力 seed viability 种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力。 3.2 种子健康状况 seed health 种子是否携带病原菌(如真菌、细菌及病毒)、有害动物(如线虫及害虫)。 3.3 培养 incubation 将种子保持在有利于病原体发育或病症发展的环境下进行培养。 3.4 千粒重 the weight of 1000 seeds 国家种子质量标准规定水分的1000粒种子的重量，以克为单位。 3.5 丸化种子 seed pellets 为精量播种，整批种子通常做成在大小和形状上没有明显差异的单粒球状种子单位。丸化种子添加的丸粒物质可能含有杀虫剂、染料或其他添加剂。 3.6 包膜种子 encrusted seed 种子形状类似于原来的种子单位，其大小和重量变化范围可大可小。包衣物质可能含有杀虫剂、杀菌剂、染料或其他添加剂。 3.7 种子毯 seed mats 种子随机成条状，簇状或散布在整片用宽而薄的毯状材料(如纸或其他低级材料制成)上。 3.8 种子带 seed tapes 种子随机成簇状或单行排列在狭带的材料(如纸或其他低级材料制成)上。 3.9 处理种子 treated seed 种子用杀虫剂、染料或其他添加剂处理，不引起其大小和形状的显著变化或增加原来的重量。处理种子仍可按GB/T 3543.1-3543.6 的规定方法进行测定。 ? ? 第一篇??? 第一篇??? 生活力的生化(四唑)测定 4 试剂 应用四唑的0.1%-1.0%(m/V)溶液，1.0%溶液用于不切开胚的种子染色，而0.1%-0.5%溶液可用于已经切开胚的种子染色。配成的溶液须贮存在黑暗处或棕色瓶里。 如果用蒸馏水配制溶液的pH值不在6.5-7.5范围内，则采用磷酸缓冲液来配制。 磷酸缓冲液的配制方法如下： 溶液I：称取9.078g磷酸二氢钾(KH2PO4)溶解于1000mL蒸馏水中。 溶液II：称取9.472g磷酸氢二钠(Na2HPO4)或11.876g磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)溶解于1000mL的蒸馏水中。 取溶液Ⅰ2份和溶液Ⅱ3份混合即成缓冲液。 在该缓冲液中溶解准确数量的四唑盐类，以获得准确的浓度。如每100mL缓冲液中溶入1g四唑盐类即得1%浓度的溶液。 ? 5 仪器、设备 5.1 控温设备 a.电热恒温箱或发芽箱； b.冰箱。 5.2 观察器具 a.体视显微镜或手持放大镜； b.光线充足柔和的灯光。 5.3 容器 a.棕色定量加液器； b.不同规格的染色盘。 5.4 切刺工具 单面刀片、矛状解剖针、小针等。 5.5 预湿物品 滤纸、吸水纸和毛巾等。 5.6 天平 天平感量为0.001g。 5.7 其他 镊子、吸管等。 ? 6 测定程序 6.1 试验样品的数取 每次至少测定200粒种子，从经净度分析后并充分混合的净种子中，随机数取每重量100粒或少于100粒的若于副重复。如是测定发芽末期休眠种子的生活力，则单用试验末期的休眠种子。 6.2 种子的预措预湿 预措是指有些种子在预湿前须先除去种子的外部附属物(包括剥去果壳)和在种子非要害部位弄破种皮，如水稻种子脱去内外稃，刺破硬实等。 为加快充分吸湿、软化种皮，便于样品准备，以提高染色的均匀度，通常种子在染色前要进行预湿。根据种的不同，预湿的方法有所不同。一种是缓慢润湿，即将种子放在纸上或纸间吸湿，它适用于直接浸在水中容易破裂种子(如豆科大粒种子)，以及许多陈种子和过分干燥种子；另一种是水中浸渍，即将种子完全浸在水中，让其达到充分吸胀，它适用于直接浸入水中而不会造成组织破裂损伤的种子。不同种类种子的具体预湿温度和时间可参见表1。 表1 农作物种子四唑染色技术规定 种（变种）名 学名 预湿方式 预湿时间h 染色前的准备 溶液浓度% 35℃染色时间，h 鉴定前的处理 有生活力种子允许不染色、较弱或坏死的最大面积 备注  小麦 大麦 黑麦 Triticumaestivum L. Hordeum vulgare L. Secale cereale L 纸间或水中 30°C恒温水浸种3-4h，或纸间12h a.纵切胚和四分之三胚乳。 b.分离带质片的胚 0.1 0.5-1 a.观察切面 b.观察胚和盾片 a.盾片上下任一端三分之一不染色。 b.胚根大部分不染色，但不定根原始体必须染色 盾片中央有不染色组织，表明受到热损伤  普通燕麦 裸燕麦 Auena sativa L. Avena nuda L. 纸间或水中 同上 a.除运河稃壳，纵切胚和四分之三胚乳。 b.在胚部附近横切 0.1 同上 ? ? ?  玉米 Zea mays L. 纸间或水中 同上 a.除运河稃壳，纵切胚和四分之三胚乳。 b.在胚部附近横切 0.1 同上 a.观察切面 b.沿胚纵切 同上 同上  黍粟 Panicum miliaceum L. Setaria italica Beauv. 纸间或水中 同上 纵切胚和大部分胚乳 0.1 同上 切开或撕开，使胚露出 胚根；盾片上下任一端三分之一不染色 同上  高粱 Sorghum bicolor (L.) Moench 纸间或水中 同上 纵切胚和大部分胚乳 0.1 同上 观察切面 a.胚根顶端三分之二不染色。 b.盾片上下任一端三分之一不染色 ?  水稻 Oryza L. 纸间或水中 12 纵切胚和四分之三胚乳 0.1 同上 观察切面 胚根顶端三分之二不染色 必要时可除运河内外稃  棉花 Gossypium spp. 纸间 12 a.纵切二分之一种子。 b.切运河部分种皮。 c.运河掉胚乳遣迹 0.5 2-3 纵切 a.胚根顶端三分之一不染色。 b.子叶表面有小范围的坏死或子叶顶端三分之一不染色 有硬实应划破种皮  甜荞 ? 苦荞 Fagopyrum esculentum Moench Fagopyrum tataricum (L.) Gaertn. 纸间 6-8 无须准备 1.0 3-4 切开或除运河种皮，掰手子叶，露出胚芽 a.胚根顶端三分之一不染色。 b.子叶表面有小范围的坏死 ?  菜豆 豌豆 绿豆 ? 花生 大豆 豇豆 ? 扁豆 蚕豆 Phaseolus vulgaris L. Pisum sativum L. Vigna radiata (L.) Wilczek Arachis hypogaea L. Glycine mac (L.) Merr. Vigna unguiculata Walp. Dolichos lablab L. Vicia faba L. 纸间 6-8 无须准备 1.0 3-4 切开或除运河种皮，掰开子叶，露出胚芽 a.胚根顶端不染色，花生为三分之一，蚕豆为三分之二，其他种为二分之一。 b.子叶顶端不杂花，花生为四分之一，蚕豆为三分之一，其他为二分之一 c.除蚕豆外，胚芽顶部不染色四分之一 ?  南瓜 ? 丝瓜 黄瓜 西瓜 ? 冬瓜 ? 苦瓜 甜瓜 瓠瓜 Cucurbita moschata Duchesne ex Poiinet Luffa spp. Cucumis sativus L. Citrullus lanatus Masum.et Nakai Benincase hispida Cogn. Momordica charantia L. Cucumis melo L. Lagenaria siceraria Stand. 纸间或水中 在20-30°C水中浸6-8h或纸间24h ? ? ? a.纵切二分之一种子。 b.剥去种皮。 c.西瓜用干燥布或纸揩擦，除运河表面粘液 1.0 2-3h，但甜瓜1-2h 除去种皮和内膜 a.胚根顶端不染色二分之一。 b.子叶顶端不染色二分之一 ?  白菜型油菜 不结球白菜 ? 结球白菜 ? ? 甘蓝型油菜 甘蓝 ? 花椰菜 ? 萝卜 芥菜 Brassica campestri L. ? Brassica campestris L.ssp.chinensis (L.) Makino Brassica campestri L.ssp.pekinensis (Lour.) Olsson Brassica napus L. ? Brassica oleracea var.capitata L. Brassica oleracea L.var.botruytis L. Raphanus sativus L. Brassica juncea Coss. 纸间或水中 30°C温水中浸种植-4h或纸间5-6h a.剥去种皮。 b.切去部分种皮。 1.0 2-4 a.纵切种子使胚中轴露出。 b.切运河部分种皮使胚中轴露出 a.胚根顶端三分之一不染色。 b.子叶顶端有部分坏死。 ?  葱属（洋葱、韭菜、葱、韭葱、细香葱） Allium spp. 纸间 12 a.沿扁平面纵切，但不完全切开，基部相连。 b.切去子叶两端，但不损伤胚根及子叶。 0.2 0.5-1.5 a.担开切口，露出胚。 b.切运河一薄层胚乳，使胚露出 a.种胚和胚乳完全染色。 b.不与胚相连的胚乳有少量不染色 ?  辣椒 甜椒 ? 茄子 番茄 Capsicum frutescens L. Capsicum frutescens var.grossum Solanum melongena L. Lycopersicon lycopersium (L) Karsten 纸间水中 在20-30°C水中3-4h，或纸间12h a.在种子中心刺破种皮和胚乳。 b.切去种子末端，包括一小部分子叶 0.2 0.5-1.5 a.撕开胚乳，使胚露出。 b.纵切种子使胚露出 胚和胚乳全部染色 ?  芜菜 芹菜 胡萝卜 茴香 Coriandrum sativum L. Apium graveolens L. Daucus carota L. Foeniculum vulgare Mill. 水中 在20-30°C水中3h a.纵切种子一半，并撕开胚乳，使胚露出。 b.切去种子末端四分之一或三分之一 0.1-0.5 6-24 a.进一步撕开切口，使胚露出。 b.纵切种子露出胚和胚乳 胚和胚乳全部染色 ?  苜蓿属 草木樨属 紫云英 Medicago ssp. Melilotus ssp. Astragalus sinicus L. 水中 22 无须准备 0.5-1.0 6-24 除运河种皮使胚露出 a.胚根顶端三分之一不染色。 b.子叶顶端三分之一，如在表面可二分之一不染色。 ?  莴苣 茼蒿 Lactuca sativa L. Chrysanthemum coronarium var.spatisum 水中 在30°C水中浸2-4h a.纵切种子上半部（非胚根端）。 b.切去种子末端包括一部分子叶 0.2 2-3 a.切运河种皮子叶使胚露出。 b.切开种子末端轻轻挤压，使胚露出。 a.胚根顶端三分之一不染色。 b.子叶顶端三分之一表面不染色，或三分之一弥漫不染色 ?  向日葵 Helianthus annuus L. 水中 3-4 纵切种子上半部或除去果壳 1.0 3-4 除去果壳 a.胚根顶端三分之一不染色。 b.子叶顶端表面二分之一不染色。 ?  甜菜 Beta vulgaris L. 水中 18 a.除去盖着种胚的帽状物。 b.沿胚与胚乳之界线切开 0.1-0.5 扯开切口，使胚露出 ? ? ?  菠菜 Spinacia oleracea L. 水中 3-4 a.在胚与胚乳之边界刺破种皮。 b.在胚根与子叶之间横切。 0.5-1.5 a.纵切种子，使胚露出。 b.掰开切口，使胚露出。 ? ? ?  6.3 染色 前的 准 备 为了使胚的主要构造和活的营养组织暴露出来，便于四唑溶液快速而充分地渗入和观察鉴定，经软化的种子应进行样品准备。准备方法因种子构造和胚的位置不同而异(详见表1)，如禾谷类种子沿胚纵切，伞形科种子近胚纵切，葱属沿种子扁平面纵 切等。西瓜等种子预湿后表面有粘液，可采用种子表面干燥或把种子夹在布或纸间揩擦清除掉。 6.4 染色 将已准备好的种子样品放入染色盘中，加入适宜浓度的四唑溶液(表1)以完全淹没种子，移置一定温度的黑暗控温设备内或弱光下进行染色反应。所用染色时间因四唑溶液度、温度、种子种类、样品准备方法等因素的不同而有差异。一般来说，四唑溶液浓度高，染色快；温度高，染色时间短，但最高不超过45℃。到达规定时间或染色已很明显时，倒去四唑溶液，用清水冲洗。 6.5 鉴定前处理 为便于观察鉴定和计数，将已染色的种子样品，加以适当处理使胚主要构造和活的营养组织明显暴露出来，如一些豆类沿胚中轴纵切，瓜类剥去种皮和内膜等。不同种类种子的处理方法详见表1。 6.6 观察鉴定 大中粒种子可直接用肉眼或手持放大镜进行观察鉴定，对小粒种子最好用10-100倍体视显微镜进行观察。 观察鉴定时，确定种子是否具有生活力，必须根据胚的主要构造和有关活营养组织的染色情况进行正确的判断。一般的鉴定原则是：凡胚的主要构造或有关活营养组织(如葱属、伞形科和茄科等种子的胚乳)全部染成有光泽的鲜红色或染色最大面积大于表1规定，且组织状态正常的为正常有生活力的种子；否则为无生活力的种子。根据种类的不同，具体鉴定标准详见表1。 依据鉴定标准，将各部分分开和计数。 ? 7 结果表示与报告 计算各个重复中有生活力的种子数，重复间最大容许差距不得超过表2的规定，平均百分率计算到最近似的整数。 表2 生活力测定重复间的最大容许差距 平均生活力百分率 % 重复间容许的最大差距  1 2 4次重复 3次重复 2次重复  99 2 5 - -  98 3 6 5 -  97 4 7 6 6  96 5 8 7 6  95 6 9 8 7  93-94 7-8 10 9 8  91-92 9-10 11 10 9  90 11 12 11 9  89 12 12 11 10  88 13 13 12 10  87 14 13 12 11  84-86 15-17 14 13 11  81-83 18-20 15 14 12  78-80 21-23 16 15 13  76-77 24-25 17 16 13  73-75 26-28 17 16 14  71-72 29-30 18 16 14  69-70 31-32 18 17 14  67-68 33-34 18 17 15  64-66 35-37 19 17 15  56-63 38-45 19 18 15  55 46 20 18 15  51-54 47-50 20 18 16  ? 在GB/T 3543.1的结果报告单“其他测定项目”栏中要填报“四唑测定有生活力的种子—%”。 对豆类、棉籽和蕹菜等需增填“试验中发现的硬实百分率”，硬实百分率应包括在所填报有生活力种子的百分率中。 ? 第二篇 种子健康测定 8 仪器设备 a.显微镜(60倍双目显微镜)； b.培养箱； c.近紫外灯； d.冷冻冰箱； e.高压消毒锅、培养皿等。 ? 9 测定程序 9.1 未经培养的检验(不能说明病原菌的生活力) a.直接检查 适用于较大的病原体或杂质外表有明显症状的病害，如麦角、线虫瘿、虫瘿、黑穗病孢子、螨类等。必要时，可应用双目显微镜对试样进行检查，取出病原体或病粒，称其重量或计算其粒数。 b.吸胀种子检查 为使子实体、病症或害虫更容易观察到或促进孢子释放，把试验样品浸入水中或其他液体中，种子吸胀后检查其表面或内部，最好用双目显微镜。 c.洗涤检查 用于检查附着在种子表面的病菌孢子或颖壳上的病原线虫。 分取样品两份，每份5g，分别倒入100mL三角瓶内，加无菌水10mL，如使病原体洗涤更彻底，可加入0.1%润滑剂(如磺化二羧酸酯)，置振荡机上振荡，光滑种子振荡5min，粗糙种子振荡10min。将洗涤液移入离心管内，在1000-1500×g离心3-5min。用吸管吸去上清液，留1mL的沉淀部分，稍加振荡。用干净的细玻璃棒将悬浮液分别滴于5片载玻片上。盖上盖玻片，用400-500倍的显微镜检查，每片检查10个视野，并计算每视野平均孢子数，据此可计算病菌孢子负荷量，按式(1)计算： N=n1×n2×n3/n4 （1） 式中：N—每克种子的孢子负荷量； n1—每视野平均孢子数； n2—盖玻片面积上的视野数； n3—1mL水的滴数； n4—供试样品的重量。 d.剖粒检查 取试样5-10g(小麦等中粒种子5g，玉米、豌豆大粒种子10g)用刀剖开或切开种子的被害或可疑部分，检查害虫。 e.染色检查 高锰酸钾染色法：适用于检查隐蔽的米象、谷象。取试样15g，除去杂质，倒入铜丝网中，于30℃水中浸泡1min，再移入1%高锰酸钾溶液中染色1min。然后用清水洗涤，倒在白色吸水纸上用放大镜检查，挑出粒面上带有直径0.5mm的斑点即为害虫籽粒。计算害虫含量。 碘或碘化钾染色法：适用于检验豌豆象。取试样50g，除去杂质，放入铜丝网中或用纱布包好，浸入1%碘化钾或2%碘酒溶液中1-1.5min。取出放入0.5%的氢氧化钠溶液中，浸30s，取出用清水洗涤15-20s，立即检验，如豆粒表面有1-2mm直径的圆斑点，即为豆象感染。计算害虫含量。 f.比重检验法 取试样100g，除去杂质，倒入食盐饱和溶液中(含盐35.9g溶于1000mL水中)，搅拌10-15min，静止1-2min，将悬浮在上层的种子取出，结合剖粒检验(见9.1d.)，计算害虫含量。 g.软X射线检验 用于检查种子内隐匿的虫害(如蚕豆象、玉米象、麦蛾等)，通过照片或直接从荧光屏上观察。 9.2 培养后的检查 试验样品经过一定时间培养后，检查种子内外部和幼苗上是否存在病原菌或其症状。常用的培养基有三类： a.吸水纸法 吸水纸法适用于许多类型种子的种传真菌病害的检验，尤其是对于许多半知菌，有利于分生孢子的形成和致病真菌在幼苗上的症状的发展。 稻瘟病(Pyriculana oryzae Cav.) 取试样400粒种子，将培养皿内的吸水纸用水湿润，每个培养皿播25粒种子，在22℃下用12h黑暗和12h近紫外光照的交替周期培养7d。在12-50倍放大镜下检查每粒种子上的稻瘟病分生孢子。一般这种真菌会在颖片上产生小而不明显、灰色至绿色的分生孢子，这种分生孢子成束地着生在短而纤细的分生孢子梗的顶端。菌丝很少覆盖整粒种子。如有怀疑，可在200倍显微镜下检查分生孢子来核实。典型的分生孢子是倒梨形，透明，基部钝圆具有短齿，分两隔，通常具有尖锐的顶端，大小为(20-25)μm×(9-12)μm。 水稻胡麻叶斑病(Drechslera oryzae Subram & Jain) 取试样400粒种子，将培养皿里的吸水纸用水湿润，每个培养皿播25粒种子。在22℃下用12h黑暗和12h近紫外光照的交替周期培养7d。在12-50倍放大镜下检查每粒子上的胡麻叶斑病的分生孢子。在种皮上形成分生孢子梗和淡灰色气生菌丝，有时病菌会蔓延吸水纸上。如有怀疑可在200倍显微镜下检查分生孢子来核实。其分生孢子为月牙形，(35-170)μ×(11-17)μm，淡棕色至棕色，中部或近中部最宽，两端渐渐变细变圆。 十字花科的黑胫病(Leptosphaeria maculans Ces. & de Not.)即甘蓝黑腐病(Phoma lingam Desm.) 取试样1000粒种子，每个培养皿垫入三层滤纸，加入5mL0.2%(m/V)的2，4-二氯苯氧基乙酸钠盐(2，4-D)溶液，以抑制种子发芽。沥去多余的2，4-D溶液，用无菌水洗涤种子后，每个培养皿播0粒种子。在20℃用12h光照和12h黑暗交替周期下培养11d。经6d后，在25倍放大镜下，检查长在种子和培养基上的甘蓝黑腐病松散生长的银白色菌丝和分生孢子器原基。经11d后，进行第二次检查感染种子及期周围的分子孢子器。记录已长有的甘蓝黑腐病分生孢子器的感染种子。 b.砂床法 适用于某些病原体的检验。用砂时应去掉砂中杂质并通过1mm孔径的筛子，将砂粒清洗，高温烘干消毒后，放入培养皿内加水湿润，种子排列在砂床内，然后密闭保持高温，培养温度与纸床相同，待幼苗顶到培养皿盖时进行检查(约经7～10d)。 c.琼脂皿法 主要用于发育较慢的致病真菌潜伏在种子内部的病原，也可用于检验种子外表的病原菌。 小麦颖枯病(Septoria nodorum Berk.) 先数取试样400粒，经1%(m/m)的次 氯酸钠消毒10min后，用无菌水洗涤。在含0.01%硫酸链霉素的麦芽或马铃薯左旋糖琼脂的培养基上，每个培养皿播10粒种子于琼脂表面，在20℃黑暗条件下培养7d。用肉眼检查每粒种子上缓慢长成圆形菌落的情况，该病菌菌丝体为白色或乳白色，通常稠密地覆盖着感染的种子。菌落的背面呈黄色或褐色，并随其生长颜色变深。 豌豆褐斑病(Ascochyta pisi Lib) 先数取试样400粒，经1%(m/m)的次氯酸钠消毒10min后，用无菌水洗涤。在麦芽或马铃薯葡萄糖琼脂的培养基上，每个培养皿播10粒种子于琼脂表面，在20℃黑暗条件下培养7d。用肉眼检查每粒种子外部盖满的大量白色菌丝体。对有怀疑的菌落可放在25倍放大镜下观察，根据菌落边缘的波状菌丝来确定。 9.3 其他方法 大麦的散黑穗病菌可用整胚检验。 大麦散黑穗病(Ustilago nuda Rostr.) 两次重复，每次重复试验样品为100-120g(根据千粒重推算含有2000-4000粒种子)。先将试验样品放入1L新配制的5%(V/V)NaOH溶液中，在20℃下保持24h。用温水洗涤，使胚从软化的果皮里分离出来。收集胚在1mm网孔的筛子里，再用网也较大的筛子收集胚乳和稃壳。将胚放入乳酸苯酚(甘油、苯酚和乳酸各三分之一)和水的等量混合液里，使胚和稃壳能进一步分离。将胚移置盛有75mL清水的烧杯中，并在通风柜里，保持在沸点大约30s，以除去乳酸苯酚，并将其洗净。然后将胚移到新配制的微温甘油中，再放在16-25倍放大镜下，配置适当的台下灯光，检查大麦散黑穗病所特有的金褐色菌丝体，每次重复检查1000个胚。 测定样品中是否存在细菌、真菌或病毒等，可用生长植株进行检查，可在供检的样品中取出种子进行播种，或从样品中取得接种体，以供对健康幼苗或植株一部分进行感染试验。应注意植株从其他途径传播感染，并控制各种条件。 ? 10 结果表示与报告 以供检的样品重量中感染种子数的百分率或病原体数目来表示结果。 填报结果要填报病原菌的学名，同时说明所用的测定方法，包括所用的预措方法，并说明用于检查的样品部分样品的数量。 ? 第三篇 重量测定 11 仪器设备 a.数粒仪或供发芽试验用的数种设备。 b.感量为0.1，0.01g的天平。 12 测定程序 12.1 试验样品 将净度分析后的全部净种子均匀混合，分出一部分作为试验样品。 12.2 测定方法 任选下列方法之一进行测定。 a.百粒法 用手或数种器从试验样品中随机数取8个重复，每个重复100粒，分别称重(g)，小数位数与GB/T 3543.3的规定相同。 计算8个重复的平均重量、标准差及变异系数，按式(2)、(3)计算： n(∑X2)-( ∑X)2 标准差（S）= n(n-1) (2) ? 式中：X─各重复重量，g； n─重复次数。 变异系数=（S/X）×100 （3） ? 式中：S—标准差； X—100粒种子的平均重量，g。 如带有稃壳的禾本科种子[见GB/T 3543.3附录B(补充件)]变异系数不超过6.0，或其他种类种子的变异系数不超过4.0，则可计算测定的结果。如变异系数超过上述限度，则应再测定8个重复，并计算16个重复的标准差。凡与平均数之差超过两倍标准差的重复略去不计。 b.千粒法 用手或数粒仪从试验样品中随机数取两个重复，大粒种子数500粒，中小粒种子数1000粒，各重复称重(g)，小数位数与GB/T 3543.3的规定相同。 两份的差数与平均数之比不应超过5%，若超过应再分析第三份重复，直至达到要求，取差距小的两份计算测定结果。 c.全量法 将整个试验样品通过数粒仪，记下计数器上所示的种子数。计数后把试验样品称重(g)，小数位数与GB/T 3543.3的规定相同。 13 结果表示与报告 如果是用全量法测定的，则将整个试验样品重量换算成1000粒种子的重量。 如果是用百粒法测定的，则从8个或8个以上的每个重复100粒的平均重量(X)，再换算成1000粒种子的平均重量(即10×X)。 根据实测千粒重和实测水分，按GB 4404-4409和GB 8079-8080种子质量标准规定的种子水分，折算成规定水分的千粒重。计算方法如下： 实测千粒重（g）×[1-实测水分（%）] 千粒重（规定水分，g）= （4） 1-规定水分（%） 其结果按测定时所用的小数位数表示(见12章)。 在GB/T 3543.1的种子检验结果报告单“其他测定项目”栏中，填报结果。 ? 第四篇 包衣种子检验 14 仪器设备 a.发芽仪器(同GB/T 3543.4的规定)。 b.数种设备(同GB/T 3543.4的规定)。 c.筛选机。 ? 15 扦样 除下列规定外，其他应符合GB/T 3543.2的规定。 15.1 种子批的大小 如果种子批无异质性，种子批的最大重量可与GB/T3543.2扦样中所规定的最大重量相同，种子批重量(包括各种丸衣材料或薄膜)不得超过42000kg(即40000kg，再加上5%的容许差距)。种子粒数最大为1×10 9粒(即10000个单位，每单位为100000粒种子)。以单位粒数划分种子批大小的，应注明种子批重量。 15.2 送验样品的大小 送验样品不得少于表3和表4所规定的丸粒数或种子粒数。种子带按GB/T 3543.2所规定的方法随机扦取若干包或剪取若干片断。如果成卷的种子带所含种子达到2×10 6粒，就可组合成一个基本单位(即视为一个容器)。如果样品较少，应在报告上注明。 表3 丸化与包膜种子的样品大小(粒数) 项目 送验样品不得少于 试验样品不得不于  净度分析 7500 2500  重量测定 7500 净丸化种子  发芽试验 7500 400  其他植物种子数目测定 ? ?   丸化种子 10000 7500   包膜种子 25000 25000  大小分级 10000 2000  ? 表4 种子带的样品大小（粒数） 项目 送验样品不得少于 试验样品不得不于  种的鉴定 2500 100  发芽试验 2500 400  净度分析 2500 2500  其他植物种子数目测定 10000 7500  ? 15.3 送验样品的取得 由于包衣种子送验样品所含的种子数比无包衣种子的相同样品要少一些，所以在扦样时必须特别注意所扦的样品能保证代表种子批。在扦样、处理及运输过程中，必须注意避免对包衣材料的脱落，并且必须将样品装在适当容器内寄送。 15.4 试验样品的分取 试验样品不应少于表3和表4所规定的丸化粒数或种子数。如果样品较少，则应在报告上注明。 丸化种子可用GB/T 3543.2所述的分样器进行分样，但种子距离落下决不能超过250mm。 ? 16 净度分析的测定程序 严格地说，丸化种子和种子带内的种子的净度分析并不是规定要做的。如送验者提出要求，可用脱去丸衣的种子或从带中取出种子进行净度分析。 16.1 试验样品 丸化种子的净度分析应按 GB/T 3543.2的规定从送验样品中分取试验样品，其大小已在表3和表4种作了规定。净度分析可用该规定丸化粒数的一个试验样品或这一重量一半的两个半试样。试样或半试样称重，以克表示，小数位数达到 GB/T 3543.3规定的要求。 16.2 脱去丸化物 可将试样不超过2500粒放入细孔筛里浸在水中振荡，以除去丸化物。所用筛孔建议上层筛用1.00mm，下层筛用0.5mm。丸化物质散布在水中，然后将种子放在滤纸上干燥过夜，再放在干燥箱中干燥。 16.3 分离三种成分 称重后按下列规定将丸化种子的试验样品分为三种成分：净丸化种子、未丸化种子及杂质，并分别测定各种成分的重量百分率。 净丸化种子应包括： a.含有或不含有种子的完整丸化粒； b.丸化物质面积表面覆盖占种子表面一半以上的破损丸化粒，但明显不是送验者所述的植物种子或不含有种子的除外。 未丸化种子应包括： a.任何植物种的未丸化种子； b.可以看出其中含有一粒非送验者所述种的破损丸化种子； c.可以看出其中含有送验者所述种，而它又未归于净丸化种子中的破损丸化种子。 杂质包括： a.脱下的丸化物质； b.明显没有种子的丸化碎块； c.按GB/T 3543.3规定作为杂质的任何其他物质。 16.4 种的鉴定 尽可能鉴定所有全部其他植物种子所属的种和每种杂质。如需填报，则以测定重量的百分率表示。 为了核实丸化种子中所含种子是确实属于送验者所述的种，必须经净度分析的净度分析的净丸化部分中或从剥离(或溶化)种子带中取出100颗，除去丸化物质，然后测定每粒种子所属的植物种。丸化物质可冲洗掉哐在干燥情况下除去。 16.5 其他植物种子的数目测定 其他植物种子数目测定的试验样品不应少于表3和表4所规定的数量，试验样品应分为两个半试样。按上述方法除支丸化物质，但不一定要干燥。须从半试样中找出所有其他植物种子或按送验者要求找出某个所述种的种子。 16.6 结果计算和表示 应符合GB/T 3543.3的规定。 ? 17 发芽试验的测定程序 发芽试验须用从净度测定后的净丸化种子部分进行，须将净丸种子充分混合，随机数取400粒丸化种子，每个重复100粒。 发芽床、温度、光照条件和特殊处理应采用GB/T 3543.4所规定的方法进行发芽。纸、砂可作为发芽床，有时也可用土壤。建议丸化种子用皱褶纸，尤其是发芽结果不能令人满意时，用纸间的方法可获得满意结果。 有新鲜不发芽种子时，可采用GB/T 3543.4破除生理休眠的方法进行处理。 根据丸化材料和种子种类的不同，供给不同的水分。如果丸化材料粘附在子叶上，可在计数时用水小心喷洗幼苗。 试验时间可能比GB/T 3543.4所规定的时间要长。但发芽缓慢可能表明试验条件不是最适宜的，因此需做一个脱去包衣材料的种子发芽试验作为核对。 正常幼苗与不正常幼苗的鉴定标准仍按GB/T 3543.4的规定进行，一颗丸化种子，如果至少能产生送验者所叙述种的一株正常幼苗，即认为是具有发芽力的。如果不是送验者所叙述的种，即使长成正常幼苗也不能包括在发芽率内。 幼苗的异常情况可能由于丸化物质所引起，当发生怀疑时，用土壤进重新的试验。 复粒种子构造可能在丸化种子中发生，或者在一颗丸化种子中发现一粒以上种子。在这种情况下，应把这些颗粒作为单粒种子试验。试验结果按一个构造或丸化种子至少产生一株正常幼苗的百分率表示。对产生两株或两株以上正常幼苗的丸化种子要分别计数其颗数。 结果计算与报告按GB/T 3543.4的规定。 ? 18 丸化种子的重量测定和大小分级 重量测定按第三篇所规定的程序进行。 对甜菜和丸化种子大小分级测定：所需送验样品至少250g，分取两个试样各50g(不少于45g，不大于55g)，然后对每个试样进行筛理。其圆孔筛的规格是：筛孔直径比种子大小的规定下限值小0.25mm的筛子一只。在种子大小范围内以相差0.25mm为等分的筛子若干个比种子大小的规定上限大0.25mm的筛子一只。将筛下的各部分称重，保留两位小数。各部分的重量以占总重量的百分率表示，保留一位小数。两份试样之间的容许差距不得超过1.5%，否则再分析一份试样。 ? ? ? 附加说明： 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农作物种子标准化技术委员会归口。 本标准由全国种子总站、浙江农业大学、四川省、黑龙江省、天津市种子公司(站)、南京农业大学、北京市、湖南省种子公司负责起草。 本标准主要起草人支巨振、毕辛华、杜克敏、常秀兰、杨淑惠、任淑萍、吴志行、李仁凤、赵菊英。 本标准首次发布于1983年3月 本标准参照采用国际种子检验规程(ISTA，1993版)第六、七、十、十一部分。 ? 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