药 药 物 物 分 分 析 析 讲 讲 稿 稿 供供 药药 学学 专专 业业 本本 科科 用用 药 物 分 析 绪论 一、药物分析的性质、任务与发展 药物分析的定义 ——用科学的方法判断药物的真伪和质量的优 劣（真伪即鉴别；质量的优劣 即检查和含量测定） 。 药物分析的目的 ——保证人民的用药安全、有效，提高药品的质量， 促进药品生产发展。药物分析的任务 二、药典和药二、药典和药品质量标准 1、中国药典 部颁标准 地方标准 . 2、国外常用药典主要有：英国药典（缩写 BP） 、美国 药典（缩 写 USP） 、欧洲药典（缩写 EuropP） 、日本药局方（缩写 JP） 、国际药 典（缩写 Ph Int） 另外：美国国家处方集（相当于我国的部颁标准） 。 3、药典的内容： 凡例；正文；附录。 4、使用药典需要注意的问题： 1） 、立法作用。 2） 、与化学试剂的标准不能混淆使用。 3） 、符合药典质量标准的药品是合格品而不是优质品。因为 :药典是 药物的最低标准而不是最高标准。 4） 、新版药典生效之日起、旧版药 典即自动失去其法律意义 。 三．药品检验工作的基本程序 取样—— 分析{ 鉴别、检查、含量测定 }——记录、报告。 1、取样的基本原则 ——均匀、合理；有代表性，科学性， 真实性。 2、分析的顺序不能颠倒。 3、记录必须真实、简明、完整、具体。 4、报告应符合有关规定。 四、全面控制药品质量的科学管理 《良好药物实验研究规范》 （GLP ） 《良好药品生产规范》 （ GMP） 《良好药品供应规范》 （ GSP） 《良好药品临床试验规范》 （GCP ） 《 分析工作的质量管理 》 （ AQC） 五、药物分析课程的特点与主要内容 六、药物分析的主要参考书目简介 ((一) 、书籍 1、〈 药物分析〉 、 （第一版） 、 （第二版） 、 （第三版） 、 （第四版） 人民卫生出版社 济南出版社 2、体内药物分析 3、生物药制分析 4、医院药制分析 5、中药制剂分析 6、药典注释 7、中成药分析 （二） 、期刊 〈药学学报〉、〈中国药学杂志〉、〈药物分析杂志〉、《中国中药杂志》、《中草药》、 《中成药》、《中药 材》、〈中国现代应用药学杂志〉、〈中国医院药学杂志〉、〈中国实验方剂学杂 志〉等等。 第一章 药物的鉴别试验 7、中成药分 析 第一节 概述 〈药学学报〉 、〈中国药学杂志〉、〈药物 分 一、鉴别的项目 （一）性状 （二）一般鉴别试验 （三）专属鉴别试验 二、鉴别试验条件 （ 一）溶液的浓度 （二）溶液的温度 （三）溶液的酸碱度 （四）干扰成分的存在 （五）试验时间 三、鉴别试验的灵敏度 （ 一）反应灵敏度和空白试验 （二）提高反应灵敏度的方法 1.加入与水互不相溶的有机溶剂 2.改进观测方法 第二节 药物的一般鉴别试验 一、鉴别方法 （一）化学鉴别法 1. 干法 2. 湿法 （二）光谱鉴别法 (三) 色谱鉴别法 1.薄层色谱鉴别法 瑞士 CAMAG SCANNER 3 薄层扫描仪 岛津 CS-9000 双波长薄层扫描仪 2.高效液相色谱鉴别法 3.气 相色谱鉴别法 4.纸色谱法 二、鉴别试验与原理 （一） 有机氟化物 1.鉴别试验 （二）有机酸盐 1.水杨酸盐 2.苯甲酸盐 3.乳酸盐 4.枸橼酸盐 5.酒石酸盐 6.醋酸盐 （（ 三三 ）） 无无 机机 金金 属属 盐盐 1.钠钠 盐盐 2.钾钾 盐盐 3.铵铵 盐盐 4.钙钙 盐盐 5.镁镁 盐盐 6.钡钡 盐盐 7.锂锂 盐盐 8.铁铁 盐盐 （（ 1）） 亚亚 铁铁 盐盐 （（ 2）） 铁铁 盐盐 9.汞汞 盐盐 （（ 1）） 汞汞 盐盐 （（ 2）） 亚亚 汞汞 盐盐 10.银银 盐盐 11.铜铜 盐盐 12.铋铋 盐盐 13.锌锌 盐盐 14.锑锑 盐盐 15.铝铝 盐盐 16.亚亚 锡锡 盐盐 三、折光率测定法 定义： 利用测定物质的折光率来进行定性定量的分析方法， 叫折光法。 折光率是用折光计来测定的，常用阿贝折光计测定。 （一） 折光的一般原理：光线自一 种透明介质进入另一个透明介 质的时候，由于两种介质密度不同， 光进行的速度发生变化， 所以，光线就发生如图折射。 i γ 光疏物质 （Ι ） 光密物质 （ Π） 界面 法线 入射线 折射线 i为入射角 γ为折射角 v 1 为在（ Ι） 中 的传播速度 V2为在 （ Π） 中的传播速度 折光的一般原理 n= ________ = ______ Sinⅰ Sinγ v 1 v 2 i = 90 0 γ c 入射线 折射线 临界角 法线 入入 射射 角角 的的 正正 弦弦 sini v 1 nn= --------------- = ---------------- = 阿贝折射仪的原理 n= ________ = _______ 1 Sinγ c Sin90 0 Sinγc 折折 射射 角角 的的 正正 弦弦 Sin r v 2 1、r ↑ n ↓ 2、λ↑ n（二） 、影响折光率的因素 ↓ 3、压力（对于液体和固体影响不显著) 4、与溶液的浓度有关（C ↑ n ↑） （三） 、折光计 1、其准确度可达 ± 0. 0002 2、测定折光率的范围在 1. 3000~1.7000 3、测定用的折光计需能 读数至 0 .0001 。 （四） 、折光法在药物分析中的应用 1、 鉴别与纯度检查 2、 定量 1）、 标准曲线法 2）、 折光率测定法 C =（n--n 。） / FC 药物溶液的浓渡（g/ml ， %） ; n 一定温度下（通常为 20℃ ）测得的折光率; n。 为同温度下水的折光率; （20℃时 n。= 1.3330 ） F 为折光率因素----药物溶液的浓度每增减 1 %时， 其折光率的 增减数。 折光率测定法： 标准曲线法 α 4 α 5 α x α 3 α 2 α 1 0 C 1 c 2 c 3 c 4 c x c 5 c α 旋光法的定量方法 ------- 标准曲线法 例 1： KCl 溶液，在于 20 ℃时测得其折光率为 1.3564 ，溶剂（水）在 20 ℃ 的折光率为 1.3330 。已知 KCl 的折光率因素 （F ）为 0.00117 求 KCl 溶液的浓度。 解： 1.3564 - 1.3330 C = ————————— =20 （g /ml ，% ） 0.00117 答：KCL 溶液的浓度为 20% 。 采用同温度溶剂的折光率来校正折光率： 例 2：在 26℃测得 KI 溶 液的折光率为 1.3460 。 已知： KI 的 F 为 0.00131 求其浓度。 解：查 26 ℃时水的折光率为 1.3324 。 1.3460 - 1.3324 C = _________________________ = 10.38（% ） 0.00131 答：碘化钾浓度为 10.38 % 。 采用温度每增加 1 ℃ 时，溶液折光率的差数来校正： 根据实验测定的结果，一般药物的水溶液，若以 20 ℃ 为标准，温度每升 高 1 ℃ ，其折光率较 2 0 ℃时减小 0.0001；每降低 1 ℃，折光率较 20 ℃时 增加 0.0001, 故水溶液可用此进行校正。 例如：在 26 ℃时测得 KI 溶液的折光率为 1.3460 ， 已知：KI 的 F 为 0.00131,求溶液中 KI 的浓度。 解：将 26℃时的折光率换为 20℃时的折光率 26 --20 = 6 ℃ 每增高 1 ℃ ，折光率较 20 ℃时减小 0 .0001 。增高 6 ℃时折光率减少 0.0001 × 6 = 0.0006 故 20 ℃时折光率为 1.3460 + 0.0006 =1.3466 1.3466 －1.3330 C = ________________________ = 10.380.00131答: KI 溶液 的浓度为 10.38% 复方制剂的测定 ： （ n - n 。）-- （C 1 F 1 +C 2 F 2 + ? ? ? ? ? ?） C= ______________________________________________ F C 表示混合药物溶液中被测成分的浓度 (%). F 表示混合药物溶液中被测成分的折光率因素。 C 1 ， C 2 表示混合药 物溶液中（ 除被测成分外）其它成分的浓度% 。 F 1 、 F 2 表示混合药物溶液中 （除被测成分外） ， 其它成分的折光率因素。 n 表示混合药物溶 液的总折光率 （ 20 ℃测定） 。 n。表示水的折光率， 20℃时为 1.3330。 例如 ： 用折光法测定右旋糖酐注射液（含右旋糖酐及葡萄糖）中右旋糖酐的 含量，先测得此注射液的总折光率 5 次平均值为 1.3480（20℃），又用碘量法测 得含水葡萄糖的含 量为 5.00% ，已知含水葡萄糖的折光率为 0.00128 ，右旋 糖 酐的折光因素为 0.00144, 求供试品 液中右糖酐 的含量。 解： （1.3480 - 1.3330） - 5.00 ×0.00128 C = ——————————————— = 5.97 (% ) 0.00144 答 : 供试液中右旋糖酐的含量为 5.97 % 。 四、旋光度测定法 ： 具有旋光性的物质一般分为两大类： 1）、具有晶格的物质。 2）物质的分子具有不对称结构。 （一）：旋光性与比旋光度（或称比旋度）： 偏振面沿顺时针方向旋转的旋光物质,叫右旋。通常以“+” 或 “d ” 表示。沿 反时针方向旋转的旋光物质叫左旋，通常以“ — ” 或 “l ” 表示。 此种旋转在一定的条件下，有一定度数，称为“ 旋光度” ，用符号“a” 表示。 旋光度 ——直线偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋 光现象，使偏振光的平面向左或者向右旋转，此种旋转在一定的条件下,有一定 的度数称之。（符号“a” ）。 旋光度 ——直线偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时，能引起旋 光现象，使偏振光的平面向左或者向右旋转，此种旋转在一定的条件下,有一定 的度数称之。（符号“a” ）。 比旋度 ——偏振光透过长 1d m 并 每 1ml 含有旋光性 物质 1g 的溶液，在一定的波长与温度下测得的旋光度称之。（符号 [a] 自自 然然 光光 偏偏 振振 光光 片片 偏偏 振振 光光 供供 试试 品品 管管 偏偏 振振 面面 转转 或或 称称 尼尼 科科 （（ 含含 旋旋 光光 性性 物物 质质 的的 溶溶 液液 ）） 过过 了了 一一 定定 尔尔 棱棱 镜镜 的的 角角 度度 （二） 、影响旋光度因素 1、温度 [α] t 2、波长 [α] λ 3、溶剂 4、浓度 5、液层厚度 （三） 、旋光法在药物分析中应用 1 、定性与杂质检查 2 、溶液的含量测定 1）标准曲线法 2）比旋光度法 α 4 α 5 α x α 3 α 2 α 1 0 C 1 c2 c3 3 c4 cx c5 c α 旋光法的定量方法 -------标准曲线法 分式计算，即得供试品的比旋度。 2）比旋光度法 α 对液体样品 ： [ α ] D t = ———— Ld 100 α 对固体样品： [α ] D t = —————— LC 式中： [ α] =比旋光度 D=钠光谱的 D 线 t = 测定时的温度 L=测定管长度的 dm 数 a =测得的旋光度 d=液体的密度 C = 每 100ml 溶液中含有溶液的重量（g ） （按干燥品计算） 例如：用 2 分米长测定管，在 20 ℃时测葡萄糖注射液的旋光度为+9.80 。 计算该 葡萄糖注射液的浓度。 解：按药典规定葡萄糖（无水品）的比旋度为[ α ] D 20 =52 .75 。 （取+52.50 。 ~ 53.00 。 的平均值） 现已知 L =2dm α= 9.80 。 则 ： 100 a 100× 9.80 C = —————— = —————— = 9.29(%) [a] D 20 × L 52 .75× 2 计算所得含水葡萄糖的浓度 ,葡萄糖注射含量是按结晶葡萄糖 （C 6 H 12 O 6 ? H 2 O）计算的。 故下列计算结果应为： M C 6H 12O6 ? H2O 198 .17 9.29 × —————— = 9.29 × ————— =10.22（ %） M C6H12O6 180 . 17 即: 葡萄糖注射液中含葡萄糖的含量为 10.22% 。 直按取样测定时，本题计算也可按中国药典 规定，将 a 乘以 1.0426 即得供试品中每 100ml 含 C 6 H 12 O 6 ? H 2 O 的克数 : 9.8 × 1.0426 = 10.22 （% ）。 第二章 药物的杂质检查 药药 物物 的的 纯纯 度度 要要 求求 杂质—— 指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效甚 至对人体的健康有害的物质。 对药物质量的评价 ： 三效：高效、长效、速效 ; 三小：毒性、用量、副作用小。 一、药物的纯度 通常可以从（１）药物的结构，（２）外观性状，（３）理化常数，（４）杂质检查，（５）含 量测定等方面作为一个有联系的整体来表明和评定药物的纯度。所以在药物的质量标准中就 规定药物的纯度要求。 但但 是是 杂杂 质质 多多 了了 ：： １１ ）） 药药 物物 的的 理理 化化 常常 数数 变变 化化 ２２ ）） 外外 观观 性性 状状 变变 化化 ３３ ）） 稳稳 定定 性性 下下 降降 ４４ ）） 含含 量量 下下 降降 、、 活活 性性 下下 降降 ５５ ）） 毒毒 副副 作作 用用 上上 升升 第二节 药物中杂质的来源 （一）、来源于制备——原料、溶剂 、试剂、中间产品、副产品、器械等等。 （二）、来源于外界条件——包装、运输、保管不妥（受光线、温度、空气、微 生物的影响等等）。 一般杂质与特殊杂质的概念： 一般杂质——自然界分布较广泛，在多种药物生产和贮存过程中容易引入杂 质（它们在药典附录中加以规定）称为一般杂质。如：酸、碱、水分、氯化物、 硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等。 特殊杂质——由于药物的品种不同，生产过程中使用不同的原料和试剂 ； 同一种药物可采用不同的生产工艺路线；药物在贮存过程中也有不同的分解变化 产物。所以特殊杂质是指该药物的生产和贮存过程中根据其生产工艺或性质有可 能引入的杂质。 第三节 药物的限量检查 一、 药物的限量检查的方法：比色法或比浊法 依法处理 A、 取一定量供试品—————— 结果（产生色或浑浊） 同上处理 B、取一定量与被检杂质相同的纯物质或其他对照品标准液） ———— 结果 （色或浑浊 ） 然后比较 A 和 B： 当 A > B 时 ：本项不合格。 当 A < B 时： 本项合格。 当 A = B 时： 重做。 由于以上的原因，因此，药物的杂质检查又称纯度检查，限度（限量）检查。 二、 药物纯度控制及其限度计算方法： （一） 、没有必要把药物中的杂质完全除去： （二） 、药物中杂质允许最大限度的原则： 杂质限量 —— 指药物中所含杂质的最大容许量。 （三） 、杂质限量表示法：百分之几（ %） 百万分之几 百万分之几：以 ppm 表示（ Par ts per million 的缩写） 三、杂质限量的计算： 杂质的量 杂质限量（L ）= ——————— × 100% 供试品量（S ） 标准溶液的体积（V ） ×标准溶液的浓度（C ） 杂质限量 = × 100% 供试品量（S ） V × C L = ————— × 100% S 四、应注意问题： 1、有些药物用灵敏度来控制杂质的限量。 2、药物的杂质检查一般不包括掺入的杂质。 3、某些药物在药典规定的检查项目下，有的被检项目不属杂质，而属药物的效用或与效用有 关的物理指标检查。 4、药典中在药物项下未规定检查的项目，主要是因为在正常生产和贮存过程中不可能引入， 或虽可引入的杂质，但含量甚微，对人体无不良影响，也不影响药物质量，故不予检查。 5、有的药物，对某些杂质限量要求较宽，现有产品均能达到，也无提高标准或检查该项杂质 的必要。 6、有的药物中可能含有某种杂质，但从生产实践到检验方法，对其认识尚不够，有待积累资 料，也可暂缓订入检查项下。 7、凡药典未规定检查的杂质，一般不需要检查, 但遇特殊情况，如检验某药物时发现外观性状 不正常，检验时反应不正常，应根据需要对问题进一步追踪检查。 第三节 一般杂质及其检查方法 一、氯化物检查法 稀 HNO 3 1、原理： CI - AgCl （微量时浑浊 ） AgNO 3 2、方法：比浊法 依依 法法 处处 理理 A、取一定量供试品 产生 AgCl(浑浊) 稀稀 HNO 3 AgNO 3 B、取一定量标准 NaCI 液 同上 （标准 NaCI 浓度 C= 0.01 mg CI - /ml ） （如 A 浊度比 B 小则本项合格）。 3、注意点： （1 ）加HNO 3 目的； A、AgCI 不溶于 HNO 3 可在HNO 3 中 产生最好的乳化浑浊； B、加速 AgCI ˉ的 产生； C、防止产生Ag 2 0 ˉ， Ag 3 PO 4 ˉ , Ag 2 CO 3 ˉ 因为这些 ↓ 溶于HNO 3 这 样就可以防止CO 3 2 - ，OH - ， PO 4 3 - 干扰。 （2）加HNO 3 的量要合适 （3）CI - 浓度 （4）温度 （5 ）严格按照操作顺序进行 （6 ）有干扰物必须消除。 A、如：（有色） 取两分等量供试品： a、 一份做供试液（A 管）——— 依法检查 加稀 HNO 3 过滤 b、另一份 AgCI ˉ 滤液（B 管加入 AgNO 3 规定量的标准 NaCI 溶液作为对照管）。 B、用滤纸过滤时，滤纸中如含有氯化物，可预先用含有硝酸的水溶液洗净后使用。 C、Br - 、I - 与 AgNO 3 作用均能生成 AgX（卤化银）硫氰酸盐能与 AgNO 3 作用生 成硫氰酸银 以上均有干扰。因此，必须排除。 D、存在于有机物结构中的氯化物检查。 方法：必须使结状态的氯变为游离状态的氯。 如 有机破坏的方法： 某些药物含有有机氯杂质可以采用本法 。 Cl Cl - （7 ）、溶于水的有机药物（如有机酸碱金 属盐）按药典附录方法直接检查氯化物。不溶于水的有机药物，多数加水振摇，使所含氯化 物溶解，滤过，取滤液依法检查（也有用丙酮溶解后检查的）。 二、硫酸盐的检查 原理： HCl SO 4 2 - BaSO 4 ˉ （ SO 4 2 - 微量时浑浊） 25% BaCI 2 2、 方法：比浊法 依法处理 A、供试品一定量 产生 BaSO 4 的浑浊 HCl，25% BaCI 2 同上 B、取一定量 K 2 SO 4 标准液 同上 注意点： （1 ） 加 HCI 要 适量, 防止 BaCO 3 ˉ ,Ba 3 （PO 4 ） 2 ˉ 等 的生成。 （2 ） 本法适宜比浊浓度为 0.1~0.5 mgSO 4 2- /50 ml。 （3 ） BaCl 2 试液浓度在 10% ~25% 范围内。 （4 ） 供试液如需滤过，应先用盐酸使成酸性的蒸馏水洗净滤纸中硫酸盐。 （5 ） 有色供试品溶液的处理及其他注意事项与氯化物检查法相同。 三、铁盐检查法： （一）硫氰酸盐法 1、 原理——铁盐在盐酸酸性溶液中与 硫氰酸铵 生成硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶 液用同法处理后进行比色。 ２、方法：比色法 H + Fe 3+ + 6 SCN - [ Fe（ SCN） 6 ] 3— 移移 至至 50mI 纳纳 氏氏 稀稀 HCI 4mI（１）供试品 ＋水２５ mI 比比 色色 管管 过过 硫硫 酸酸 铵铵 50mg 加水稀释或约 35mI 后 加硫氰酸铵溶液 （30 100 ） 3 mI，再加水适量稀释成 50mI，摇均 如显色与标准溶液比较。 按上法 （2 ）标准铁溶液 处理 显色 （3 ）注意点： 1）加 HCI 防止铁盐水解 2）） 加加 过过 硫硫 酸酸 铵铵 [（（ NH4）） 2S2O8] 氧氧 化化 剂剂 ，， 氧氧 化化 供供 试试 品品 中中 Fe 2+ 生成 Fe 3+ ; 防防 止止 光光 线线 使使 硫硫 氰氰 酸酸 铁铁 还还 原原 或或 分分 解解 退退 色色 。。 3）） 有有 干干 扰扰 要要 排排 除除 。。 （二）巯基醋酸法 （ “巯” 音“ 球 ”） BP 采用巯基醋酸法检查药物中铁盐。巯基醋酸还原 Fe 3+ 为 Fe 2+ ，在 氨碱性溶液中作用生成红色配位离子， 与一定量标准铁溶液经同法处 理后产生的颜色进行比较。 四四 、、 重重 金金 属属 检检 查查 法法 ：： 1、、 原原 理理 H + （（ 1）） Pb 2+ PbS ˉ（（ 量量 少少 时时 ，， 呈呈 色色 黄黄 黑黑 ）） H 2 S （（ 2）） 、、 凡凡 溶溶 于于 碱碱 不不 溶溶 于于 稀稀 酸酸 的的 药药 物物 ，， 如如 磺磺 胺胺 类类 ，， 巴巴 比比 妥妥 类类 等等 ，， 均均 在在 碱碱 性性 溶溶 液液 中中 以以 硫硫 化化 钠钠 试试 液液 为为 显显 色色 剂剂 。。 OH - Pb 2+ PbS ˉ Na 2 S （3 ）含芳环或杂环的有机药物，先进行结构破坏，使共价的铅变为游离的铅，再采取上述 的（1 ）或者（2 ）法检查。 中国药典（2000 年版）重金属法一共收载有四法： 第一法又称硫代乙酰胺法 CH 3 CSNH 2 +H 2 O CH 3 CONH 2 +H 2 SpH3.5H 2 S+Pb 2+ PbS ˉ +2H + 第二法是将供试品炽灼破坏后检查或取炽灼残渣项下遗留的残渣进行检查的方法。 第三法是取规定量的供试品，加氢氧化钠试液 5ml 和水 20ml 使溶解后，加硫化钠试液 5 滴， 再与一定量标准铅溶液经同样处理后的颜色进行比较。 第四法又称微孔滤膜法。本法适用于含 2～5 μ g 重金属的检查。 2、方法（比色法）： 依法处理 A、一定量供试品 PbSˉ HAC、H 2 S 同上 B、取一定标准铅液 PbSˉ Pb(NO 3 ) 2 3、注意点： pH：HAC——pH3~3.5 在此条件下沉淀完全 ；不溶于 HAC 的检品在 OH - 中进行。 A、 加 HNO 3 目的： 水解 盐 + H 2 O 酸 + 碱 中和 B、临用前配制：溶液愈释愈易水解，所以临用前稀释。 （3 ）排除干扰物质 （4 ）含芳环或杂环有机物，按药典二法先炽灼破环使有机物分子结合的重金属游离，再依 法检查。 （5 ）微孔滤膜过滤法 。 图接下页 五、砷盐检查法： 主要采用古蔡氏（Gutzeit ）法和二乙基二硫代氨基甲酸银法（Silver diethyldithio-carbamate ）。 （ 一） 、古蔡氏法 １、 原理： Zn + HCI ASO 3 3 - （亚砷酸盐） ASH 3 - ————— 新新 生生 态态 H2 HgBr 2 试试 纸纸 砷斑： As（ HgBr） 3 棕色 AsH（ HgBr） 2 黄色 图接下页 加 KI 的目的： （1 ）使 As 5+ As 3 + （2 ）抑制锑化氢生成 （3 ） I - 与 Z n 2+ 形成络合物 4 I - + Z n 2+ Z n I 4 使生成砷化氢不 断进行。 加 SnCI 2 目的： （1 ） I 2 I - （2 ）氢化亚锡并与锌作用，在锌粒表面形成锌锡齐起去极化作用从而使氢 气均匀而连续地发生。 ２、 方法： 比色法 依法处理 a、供试液 砷斑 同上 b、取一定量标准砷液 砷斑 一定量标准砷液：2 ml 标准液 1 μ gAs / ml 标准砷斑含 As 2 μg 如以 As 2 O 3 计算 1μg As 相当于 As 2 O 3 1.32 μg 3、注意点： （1 ）氢气发生的速度，反应液的酸度，酸性氯化亚锡试液用量，锌粒的大小与用量及反应 温度。 （2 ）标准砷液临用新配 4、含锑药物： SbH 3 + HgBr 2 SbH 2 （ HgBr ） + HBr （二）白田道夫法 原理为氯化亚锡在盐酸中能将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液用同法处理 后的颜色进行比较，即可判断供试品的含砷量。 2A S 3+ + 2SnCl + 6HCl 2AS ˉ + 2SnCl 4 + 6H + （三）二乙基二硫代氨基甲酸银比色法（ A g（ DDC） ）法。 本法的原理为砷化氢与 Ag（DDC ）吡啶溶液作用，使 Ag（DDC ）中的银还原为红色胶态 银。 图接下页 六、溶液颜色检查法 溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质含量的方法。有的药 物在生产过程中可能引入有色的杂质， 有的在贮藏过程中产生有色杂 质。 七、易炭化物检查法 易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈 色的微量有机杂质。此类杂质中，多数的结构是未知的，用硫酸呈色 的方法可以简便地控制此类杂质的总量。 八、溶液澄清度检查法 某些药物（特别是用作注射剂的原料药物） 中存在的不溶性杂质，影 响药物溶液的澄清度。因此，应对其作澄清度检查。 九、炽灼残渣检查法 高温 浓 H 2 SO 4 有机物 残留物 炽灼至完全炭化 700~800 0 c 硫 酸盐（ 炽灼残渣） 十、干燥失重测定法 1、常压恒温干燥法：本法适用于受热稳定的药物（温度 105 ℃） 2、干燥剂干燥法：本法适用于受热易分解或挥发的药物。 药典用干燥剂：（1 ）硅胶 ( 吸水力大于硫酸, 使用方便, 价廉, 变色, 可以反复使用） （2 ）硫酸（吸水次之，较便宜） （3 ）五氧化二磷（吸水力强，但价高） 3、减压干燥法：适用于熔点低，受热不稳定及水分难赶除的药物。 4、热分析法：2000 年版药典收载，参考美国药典 23 版。 恒重：最后两次重量 < 0.3 mg （分析化学 0..2 mg ） 十一、有机 溶剂残留量测定法 第五节 特殊杂质及其检查方法 一、利用药物和杂质在物理 性质上的差异 （一）臭味及挥发性的差异 （二）颜色的差异 （三）溶解行为的差异 （四）旋光性质的差异 （五）对光吸收性质的差异 （六）吸附或分配性质的差异 二、利用药物和杂质在化学性质上的差异 （一）酸碱性的差异 （二）氧化还原性的差异 （三）杂质与一定试剂反应产生沉淀 （四）杂质与一定试剂反应产生颜色 （五）杂质与一定试剂反应产生气体 （六）药物经过有机试破坏后检查杂质 第三章 定量分析样品前处理与测定方法的效能 指标 第一节 定量分析样品的前处理方法 一、概述 含金属的有机药物：金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸及 酚的金属盐或配位化合物。 有机金属药物：金属原子直接与碳原子以共价键相连接，结合状态比 较较牢。 二、不经有机破坏的方法 （一）直接测定法 （二）经水解后测定法 1、直接回流后测定法原理 2、用硫酸水解后测定法 （三）经氧化还原后测定法 1、 碱性还原后测定 2、酸性还原后测定法 3、汞齐化法 4、利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量 （1 ）含锑药物 （2 ）含铁药物 三、经有机破坏的分析方法 （一）湿法破坏 1、硝酸 -高氯酸法 2、硝酸 -硫酸法 3、硫酸 -硫酸盐法 4、其它湿法 （二）干法破坏 （三）氧瓶燃烧法 1、仪器装置 2、称样 3、燃烧分解操作法 4、吸收液的选择 5、应当注意的 第二节 生物样品分析的前处理技术 一、 常用样品的种类、 采集和贮藏 生物样品包括各种体液和组织， 但实际上最常用的是比较容易 得到的血液（血浆、血清、全血） 、尿液、唾液。在一些特定的情况 下选用乳汁、脊髓液、精液等。 二、生物样品分析前处理技术 （一）去除蛋白质 1、加入与水相混溶的有机溶剂 2、加入中性盐 3、加入强酸 4、加入含锌盐及铜盐的沉淀剂 5、酶解法 （二）缀合物的水解 （三）分离、纯化与浓集 1、液 -液提取法 第三节 测定方法的效能指标 2、液 -固提取法 任何一种分析测定方法，根据其使用的对象和 要求，都应有相应的效能指标。一般常用的分析指标包括： 精密度、准确度、检测限、定量限、选择性、线性与范围、 重现性、耐用性、与参比方法测得结果的相关程度的比较 第四 章 巴比妥类药物的分析 第一节 基本结构与特征 一、巴比妥类药物的基本结构与一般性质 （一） 、理化性质与鉴别方法 . 1、 性状：一般为白色结晶性粉末。熔点在 96 ~ 205 ℃范围内，在鉴定中无变化，加热 能升华。不溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂中。含硫巴比妥类药物有不适之臭。 2、理化 性质： 本类药物的环状酰脲类结构上具有 1， 3—二酰亚胺基团，在水溶液中可以发生二 级电离，其弱酸性及其它化学性质多基于酰亚胺基团的结构特性。 二、巴比妥类药物的特征 （一）弱酸性： （二） 水解反应 ： 巴比妥类药物基本结构中具有酰亚胺结构，与碱溶液共沸即 水解产生氨气，可使红色石蕊试纸变蓝。 （三）与重金属离子反应： 1.与钴盐的反应 2.与铜盐的反应 3.与银盐反应： 4.与汞盐的反应：与硝酸汞或氯化汞试液反应，生成白色汞盐沉淀，沉淀能溶于氯试液中。 （四）与香草醛（ vanillin）反应 因巴比妥类药物分子结构中具活泼氢，可与香 草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，产生棕红色产物。 （五）紫外吸收光谱特征 （六）薄层色谱行为特征 （七）显微结晶 1.药物本身的晶形 2.反应产物的晶形 （八）衍生物的制备 第二节 鉴别试验 一、丙二酰脲类鉴别试验 二、熔点测定 （一）苯巴比妥钠的鉴别 （二）司可巴比妥钠的鉴别 三、钠盐的鉴别试验 四、利用特殊取代或元素的鉴别试验 （一）利用不饱和取代基的鉴别试验 （二）利用芳香取代基的鉴别试验 （三）利用硫元素的鉴别试验 第三节 特殊杂质检查 一、苯巴比妥的特殊杂质检查 （一）酸度 （二）乙醇溶液的澄清度 （三）中性或碱性物质 二、司可巴比妥钠的特殊杂质检查 （一）溶液的澄清度 （二）中性或碱性物质 第四节 含量测定方法 一、银量法 二、溴量法 三、酸碱滴定法 （一）在水－乙醇混合溶剂中的滴定法 （二）在胶束水溶液中进行的滴定法 （三）非水滴定法 四、紫外分光光度法 （一）经提取分离后的紫外分光光度法 （二）直接紫外分光光度法 （三）差示紫外分光光度法 第十一章 抗生素类药物的分析 第一节 概述 第二节 β -内酰胺类抗生素 一、化学结构与性质 1、化学结构 2、性质 （1 ）溶解度性质 （2 ）旋光性 （3 ）紫外吸收特性 （4 ）β -内酰胺环的不稳定性 二、鉴别试验 （一）钾、钠盐的火焰反应 （二）呈色反应 1、羟肟酸铁反应 2、硫酸 -----呈色反应 3、茚三酮反应 4、与斐林试剂反应 （三）沉淀反应 （四）光谱法 （五）色谱法 三、含量测定 （一）碘量法 （二）汞量法 （三）酸碱滴定法 （四）可见-紫外分光光度法 1、酸水解法（铜盐法） 2、硫酸汞盐法 （五）高效液相色谱法 第三节 氨基糖甙类抗生素 一、链霉素（即链霉素 A） (一)化学结构与性质 1、结构 2、结构特点 3、性质 （二）鉴别试验 1、茚三酮反应 2、N- 甲基葡萄糖胺反应 3、麦芽酚（ Maltol）反应 4、坂口（ Sakguchi）反应 5、硫酸盐反应 6、薄层色谱法 （三）链霉素 B 杂质检查 （四）含量测定 二、庆大霉素 （一）化学结构与性质 1、结构 2、结构特点 3、性质 （二）鉴别试验 1、茚三酮反应 2、N- 甲基葡萄糖胺反应 3、紫外分光光度法 4、薄层色谱法 5、高效液相色谱法 6、红外光谱法 7、硫酸盐反应 （三）检查— 庆大霉素 C 组分测定 （四）含量测定 （五）血清中庆大霉素的高效液相色测定法 第四节 四环素类抗生素 一、化学结构与性质 1、结构 2、结构特点 母核上有下列官能团：C4 位上的二甲氨基 [—N（CH3 ）2] 、 C2 位上的酰氨基（ —CONH2 ）、 C10 位上的酚羟基（ —OH） ；有两 个含有酮基和烯基和烯基的共轭双键系统。 3、性质 （1 ）差向异构化性质 （2 ）降解性质 1）酸性降解 2）碱性降解 3）与金属离子形成配位化合物的反应 二、鉴别反应 （一）浓硫酸反应 （二）三氯化铁反应 （三）氯化物反应 （四）紫外分光光度法 （五）荧光法 （六）薄层扫描法 （七）其它方法 三、盐酸四环素中特殊杂质检查 四、含量测定 一、比色法 1、标准测定液的配制 2、样品测定液的配制 3、空白对照液的配制 4、测定法 （二）高效液相色谱法 1、稀释溶剂 2、流动相 3、标准溶液 4、样品溶液 5、预试溶液 6、色谱系统 第五节 抗生素类药物的质量考察研究 一、青霉素中致敏杂质的分离制备 （一）凝胶过滤法 （二）GDX104 柱色谱 二、杂质的研究 （一）光谱法 （二）色谱法 （三）生物法 第十二章 药物制剂分析 第一节 药物制剂分析的特点 制剂分析： 利用物理、 化学、 物理化学、甚至微生物测定方法，对不同剂型的药物制剂进 行分析，以检验被测的制剂是否符合质量标准规定的要求。 第二节 片剂和注射剂的常规检查法 一、一般检查 （一）片剂的一般检查 1、外观、色泽和硬度 （1 ）重量差异的检查 （2 ）检查法 （3 ）注意事项 3、崩解时限的检查 （1 ）检查装置 （2 ）检查方法 （二）注射剂的一般检查 1、注射液的装量检查 2、注射用无菌粉末的装量差异检查 3、注射剂的澄清度检查 4、无菌检查 5、pH 值检查 二、片剂含量均匀度和溶出度的检查 （一）片剂含量均匀度的检查 （二）片剂 溶 出度的检查 三、注射剂中不 溶 性微粒和油溶剂的检查 （一）注射剂中不溶性微粒的检查 （二）注射剂中游离溶剂的检查 第三节 药物制剂中常见附加剂的干扰及排除 （一）糖类 （二）硬脂酸镁 1.对配位滴定法的干扰及其排除 2.对非水滴定法的干扰及其排除 （三）滑石粉等 二、注射剂中常见附加剂的干扰及其排除 1.加入掩蔽剂法 常用的掩蔽剂有丙酮和甲醛 （一）抗氧剂 2.加酸分解法 3.加入弱氧化剂氧化法 4.提取分离法 5.利用注射液中主药和抗氧剂的紫外吸收光谱的差异法 （二） 等渗溶液 （三）溶剂油 1.有机溶剂稀释法 2.空白对照法 3.排除溶剂油干扰的测定方法 （1 ）柱色谱法 （2 ）高效液相色谱法 （3 ）滴定法 （四）其它 1.稳定剂的干扰及其排除 2.防腐剂的干扰及其排除 3.溶剂水的干扰及其排除 第四节 复方制剂分析 一、复方制剂分析的特点 二、复方制剂分析示例 （一）复方阿司匹林片剂分析 1.滴定分析法 （1 ）阿司匹林的测定 （2 ）非那西丁的测定 （3 ）咖啡因的测定 2.分光光度法 （1 ）阿司匹林的测定 （2 ）非那西丁的测定 （3 ）咖啡因的测定 （4 ）复方阿司匹林制剂中各组分同时测定法 3.柱分配色谱法 3. 高效液相色谱法 第十三章 生化药物分析概论 第一节 概述 一、生化药物的定义 二、生化药物的种类 （一）氨基酸及其衍生物类药物 1.单氨基酸 2.氨基酸衍生物 3.复合氨基酸注射液 （二）药用活性多肽 1.垂体多肽 2.消化道多肽 3.下丘脑多肽 4.脑多肽 5.激肽类 6.其它肽类 （三）药用蛋白 （四）药用酶和辅酶 1.助消化酶类 2.蛋白酶及抗栓酶类 3.凝血酶及抗栓酶 4.抗肿瘤酶类 5.其它酶类 6.辅酶 （五）核酸及其降解物和衍生物类药物 （六）药用多糖和脂类药物 1.多糖类药物 2.脂类药物 （七）基因工程 DNA 重组药物 三、生化药物的特点 1.分子量不是定值 2.需检查生物活性 3.需做安全性检查 4.需做效价测定 5.结构确证难 第二节 质量检验的基本程序与方法 一、鉴别实验 1.化学反应法 2.紫外分光光度法 3.酶法 4.电泳法 5.生物法 二、杂质检查 1.一般杂质检查 2.特殊杂质检查 三、安全性检查 1.热原检查法（家兔法） （1 ）检查法 （2 ）结果判断 2.异常毒性试验 3.过敏试验 4.降压物质检查法 5.无菌检查法 （1 ）无菌检查的基本步骤 （2 ）注意事项 四、含量（效价）测定 第三节 常用定量分析法与应用 一、酶法 （一）酶活力测定法 1.基本概念 2.酶促反应的条件 （1 ）底物 （2 ）pH （3 ）温度 （4 ）辅助因子 （5 ）空白和对照 3.酶活力的测定方法 （1 ）取样测定法 （2 ）连续滴定法 1）紫外- 分光光度法 2）荧光分光分析法 3）旋光度法 4）酶偶联测定法 5）其他 4.测定过程中应注意的问题 （1 ）产物的测定 （2 ）反应速度的测定 （3 ）测定要达到的要求 （二）酶分析法 1.动力学分析法 （1 ）被测定物是酶的底物 （2 ）被测定物是辅酶 （3 ）被测定物为活化剂 （4 ）被测定物是抑制剂 2.总变量分析法 （三）酶分析法应用示例 影响效价测定的因素 （1 ）酶浓度 （2 ）温度 （3 ）底物 二、电泳法 （一）电泳法的基本原理和分类 （二）常用电泳法的类型及其应用 1.纸电泳法 （1 ）缓冲液的选择 （2 ）滤纸的裁剪 （3 ）点样方法 （4 ）电泳及区带显示 （5 ）定量测定 2.醋酸纤维素薄膜电泳法 3.聚丙烯酰胺凝胶电泳法 4.SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（简称 SDS-PAGE） 5.琼脂糖凝胶电泳法 （1 ）制胶 （2 ）标准品溶液及供试品溶液的制备 （3 ）点样与电泳 （4 ）染色与脱色 （5 ）定量 （6 ）应用 三、生物检定法 （一）概述 （二）生物检定法的应用范围 1.药物的效价测定 2.微量生理活性物质 的测定 3.中药质量的控制 4.某些有害杂质的限度检查 四、理化法 （一）重量法 1、提取法 2、挥发法 3、沉淀法 （二）滴定法 （三）比色法 （四）紫外分光光度法 （五）高效液相色谱法 1、反相高效液相色谱法（ RP-HPLC） 2、高效离子交换色谱法（ HPIEC） 1）蛋白质、多肽的分离是根据 其相应的离子化程度而进行的。 2）分离过程是以盐浓度增大的梯度洗脱法进行的。 3）柱效中等并具有较高质量的活性回收。 3 高效凝胶过滤色谱法（HPGFC） 1）活性蛋白质可得以回收 2）分离是在固定比例的水溶液中进行的。 3） 分离是根据蛋白质或多肽在溶液中相应的有效粒径而进行的。 中药制剂分析 普通高等教育中医药类规划教材 （供中药类专业用） 主 编 魏璐雪 副主编 袁昌鲁 主 审 施顺清 上 海 科 学 技 术 出 版 社 第一章 绪 论 中药制剂分析 （ Analysis of Chinese Medicine Preparation) 是以中医药理论为指导， 运用现代分析理论和方法研究中药制剂质量 的一门应用学科。 第一节 概 述 一、中药制分 析的目的与意义 二、中药制剂分析的特点 （一）任何一种中药的化学成分都是十分复杂的。 （二）中药制剂的剂型种类较多，因制备方法不一，存在状态不同， 各有特点，所以在含量测定方法上除了考虑方法的专属性、 灵敏性外， 尚需注意辅料对测 定的影响及各成分间的干扰。 （三）中药制剂的药 味组成是以中医理论和用药原则为指导， 在进行质量分析时首先考虑 进行组方分析，按功能主治分出主、辅、从、次药味和药群，选择某 一合适的化学成分为指标来说明其与质量的关系。 （四）在进行制剂成品分析时，不必重复原料药的所有的检测项目。 三、影响中药制剂质量的因素 （一）原料药材的品种、规格、产地、药用部位、采收季节、加工方 法的影响。 （二）炮制方法的影响 （三）生产工艺的影响 （四）中药制剂的包装、贮藏、保管的影响 四、中药制剂质量控制的状况和历史发展 五、中药制剂分析的展望 一个理想的中药制剂质量标准应该能够说明质量与疗效， 即疗效 与物质基础的关系，其分析检测方法应该包括理化指标、生物指标和 疗效指标。方法应简便、快速，具有准确性和专属性的特点。只要有 成品生产销售与使用，就需要有质量标准的监测和保证。 第二节 中药制剂分析工作的基本程序 中药制剂分析是药品质量控制的一个重要组成部分， 其分析检测 程序一般可分为取样、测试样品溶液的制备和测定（包括定性鉴别、 杂质检查、含量测定）等。 一、取样 二、测试样品溶液的制备 （一）中药制剂样品的提取 1、冷浸法 2、连续回流法 3、超声波提取法 （二）中药制剂样品的预处理 1、液 —液萃取法 2、沉淀法 3、蒸馏法 4、色谱法 三、定性鉴别、检查和含量测定 （一）定性鉴别 中药制剂的定性鉴别是利用其各单味药材的形态、 组织学特证及 所有含有的化学成分的结构特性、主要化学反应、光谱特性、色谱特 性及某些物理化学常数来鉴别中药制剂中各单 味药的真伪及有无存 在的情况。 （二）检查 药典中所规定的杂质必须进行检查。按 我国药典要求，中药制剂需要检查的 项目大至可分为三种类型： 1、污染型 2、特殊杂质型 3、剂型的要求检查型 （ 三）含量测定 1、对有效成分明确的中药制剂要进行有效成分的含量测定。 2、中药制剂中某些药材，大致明确有效成分的，可测定这些有 效成分的含量。 3、对有效成分已知但尚无理想的测定方法的中药制、通过测定 其中某些化学成分的含量来间接 地控制有效成分的含量。 4、对 有效成分不明确的中药制剂可采用以下方法： 选择一个或几个认为可 能的有效成分或主要成分（指示性成分）进行含量测定；测定药物的 总固体量，也就是浸出物量，例如水浸出物量、醇浸出物量、乙醚浸 出物量，此方法尚不能真正控制有效成分的含量；选择在原料加工炮 制时， 或制备、贮藏过程中易损失、 破坏的成分进行含量或限度测定。 5、中药制剂含有剧毒性成分则要测定其含量。 6、贵重药材如西洋参、人参、牛黄在制剂中料量应加以测定，以 便确定制剂质量优劣。 中药制质量分析工作， 目前尚存在的困难概括起来有以下三个方 面：一是成分的复杂性；二是药理作用的多方面性；三是现代医学观 点和中医理论之间的不一致性。要解决中药制剂质量标准问题，需要 多学科的大力协作，除理化分析外，尚可根据中医用药理论和药物的 综合效应来设计与临床效果并行的生物测定， 在统一原料， 统一处方， 统一工艺的基础上，应用植物学、中药鉴定学、中药化学、现代分析 方法学、药理学、毒理学等手段综合分析，不断地实践，认识，再认 识，以解决中药制剂质量的标准化问题。 第二章 中药制定量分析方法 第一节 可见 - 紫外光谱法 一、双波长测定法 （一）等吸收波长法 1、基本原理 选出两个波长λ 1 与λ 2 则是干扰组分a 在λ 1 、 λ 2 处吸收度相等， 即A λ 1 a =Aλ 2 a 。而待测组分 B在λ 1 、 λ 2 处的差吸收度Δ A应比较大。再在 λ 1 、 λ 2 处 测混合组分溶液的差吸收度 ΔA。设λ 1 为参比波长， λ 2 为测量波长， 则： ΔA=Aλ 2 a+b —Aλ 1 a+b =（A λ 2 a + Aλ 2 b ） —（A λ 1 a + Aλ 1 b ） 因 为 Aλ 1 a =Aλ 2 a 所以 ΔA=Aλ 2 b —Aλ 1 b =（C λ 2 b —Cλ 1 b ） C b LΔA与待测组分浓度 C b 成 正比，而与干扰组分浓度无关。这正是等吸收波长在干扰物质存在下 对待测组分定量的依据。 3、应用举例 喉痛消炎丸中靛蓝、靛玉红的测定：靛蓝在 540nm、 634.4nm 处 有合适的等吸收波长；靛玉红却是在 514.2nm、 566nm 处有等吸收波 长, 故可选用 : 测靛蓝: λ R1 =514.2nm λ S1 =566nm 测靛玉红: λ R2 =634.4nm λ S2 =540nm （二）系数倍率法 1、基本原理 2、分析步骤 二、三波长测定法 （一）基本原理 （二）三个测定波长的选择 1、等吸收点法 2、计算法 三、差示光谱法 （一）基本原理 （二）应用举例 四、导数光谱法 （一）导数光谱及其特征 （二）基本原理 若吸收光谱服从 Beer 定律： A= E · C · L 根据导数光谱的定义，对上式求导，则： dA dε dλ d λ 在一定条件下（特定波长），导数值与被测组分的浓度呈线性关系，这是该法定量的理论依 据。 第三章 中药制剂的定性鉴别 中药制剂的定性鉴别是制剂质量 标准中的一项重要内容，目的是 检定制剂的真实性。目前，用于定性鉴别的方法主要有显微鉴别法和 理化鉴别法二大类，后者又可分为一般化学反应、升华法、荧光法、 光谱法和色谱法等。 一、显微定性鉴别的特点和应用实例 显微定性鉴别是利用显微镜对中药制剂中药味的组织碎片、 细胞 或内容物等特征进行鉴别的一种方法。 一般凡以药材细粉直接制成或添加有部分药材细粉的制剂都可 以采用本法进行鉴别。本法操作简便，准确可靠，耗费少，应用范围 广。可以采用显微鉴别法的制剂有散剂、丸剂 、片剂、胶囊剂、锭 剂和部分冲剂等。 （一）特点 中药制剂 进行显微鉴别比中药粉 末的显微鉴别更为复杂；与剂型及制作过程有关。 （二）制片方法 （三）应用实例 实例 1 六味地黄丸的显微定 性鉴别 [处方 ] 熟地黄 160g，山茱萸（制） 80g，牡丹皮 60g，山药 80g， 茯苓 60g，泽泻 80g。 [制法 ] 以上 6 味药粉碎成细粉，过筛，混匀 。每 100g 粉末加炼 蜜 35~50g，与适量的水、泛丸，干燥；或加炼蜜 80~110g 制成小蜜 丸或大蜜丸即得。 [显微鉴别 ] 每味药各选取一个显微特征。 实例 2 银翘解毒片的显微定性鉴别 [处方 ] 金银花 200g，连翘 200g，薄荷 120g，荆芥 80g，淡豆豉 100g，牛蒡子（炒） 120g，桔梗 120g，淡竹 80g，甘草 100g。 [制法 ] 以上 9 味药、除金银花、桔梗粉碎成细粉外，薄荷、荆芥提 取挥发油；其余均用水提法。 [显微鉴别 ] 取本品置显微镜下观察 （1 ）花粉粒 （此为鉴别金银花） 。 （2 ）连结乳管 （此为鉴别桔梗） 。 二、一般化学反应法 一般中药制剂含有多种化学成分，有的属于有效成分，有的属于 特征成分，在鉴别处方药味组成时，这两类成分都可以考虑选择作为 鉴别的对象 。。 鉴别方法的建立要重视文献资料的研究、并结合该 制剂研制过程中有关植化部分的工作 对制剂所含的成分以及理化性 质有个初步了解，此在基础上选择适宜的化学反应和试剂，从反应后 颜色的变化、沉淀的生成等现象鉴别中药制剂 。 实例 1 牛黄解毒 片中大黄、黄芩的定性反应 取本品 6 片（包衣者除去包衣），研细，加乙醇 10ml，温热 10 分钟，过滤，滤液作如下反应： （1）取滤液 5ml，加镁粉少量与盐酸 0.5ml，加热，即显红色（此为鉴别黄芩的 黄酮类成分）。 （2）另取滤液 4ml，加氢氧化钠试液，即显红色；加 30%过氧化 氢溶液，加热，红色不消失；加酸成酸性、则红色变为黄色（此为鉴别大黄的蒽 醌类成分）。 三、升华法 本法是利用升华的方法将具有升华性质的成分， 在一定温度下从 制剂中分离出来， 并以升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴定的 依据。如观察所得升华物的晶型、颜色、或在紫外灯下观察所得升华 物的荧光或与适宜的试剂作用后观察所发生的变化。 制剂中若有 2 种 以上的药味都含有升华物，而且升华的温度不同，则可控制加热的温 度分段收集升物，分别进行鉴定。如牛黄解毒丸。 必要时，升华物出可用显微熔点测定仪测定其熔点，或用其他分 析方法作定性分析 实例 2 牛黄解毒丸微量升华鉴别 取本品进行微量升华，先得白色升华物后，继得黄色升华物。将 升华物分别置显微镜下观察：白色升华物呈不定型的无色片状结晶， 加新制的 1%香草醛硫酸溶液，渐显紫红色；黄色升华物呈黄色针状 结晶或羽状结晶，遇碱显红色，遇酸变为黄色。 四、荧光法 有些中药材中含有能产生荧光的化学成分， 这些成分有的在可 见光或紫外光照射下能发出荧光，有的须经试剂处理后能发出荧光。 含有这类药材的中药制剂可用荧光法进行鉴别。 通常的操作方法是取 制剂的提取液点在滤纸上或试纸上，置紫外光灯下（ 365nm）观察， 有时则是加一定的试剂后再进行观察。 五、光谱法 （一）可见紫外分光光度法 中药材中有些化学成分在可见紫外光区有选择性吸收， 显示特征 吸收光谱曲线。不同的药材所含的成分不同，在一定条件下吸收光谱 的特征可用于鉴别药材。 （二）红外光谱法 红外光谱法已广泛用于合成药的鉴别， 但用于中药制剂的鉴别还 存在不少困难。主要是因为中药制剂所含的成分复杂，组分吸收峰的 相互叠加， 难以对吸收光谱的归属作出说明， 专属性、 重现性不理想。 六、色谱法 中药制剂可以用色谱法进行鉴定，其中包括薄层色谱法、z 氏色 谱法、气相色谱法和高效液相色谱法。 （一）薄层色谱法 1. 样品应作适当的预处理 2. 展开剂的选择 3. 对照品的选择 4. 薄层色谱的扫描定性鉴别 实例 1 银翘解毒片的薄层定性鉴别 实例 2 香连丸的薄层定性鉴别 实例 3 香砂六君丸的薄层定性鉴别 （二）纸色谱法 （三）气相色谱法 （三） 高效液相色谱法 七、其他方法----X 射线衍射法 第四章 中药制剂的检查 第一节 中药制剂中的杂质检查 一、杂质及其来源 二、杂质限量的控制 三、一般杂质的检查方法 （一） 重鑫属检查法 （二）砷盐检查法 1.古蔡法 2.二乙基二硫代甲酸银法 （ Ag-DDC 法 ） （三）铁盐检查法 1 硫氰酸按法 （ 1）原理： 2 巯基醋酸法 （四）硫酸盐检查法 1 原理 2 测定方法及试液配制 3 注意事项及讨论 四、出口中药制剂重金属的检查 1 试样分解必须完全 2 试样分解过程中待测组分不应损失 3 试样分解过程中不能引入被测成分和干扰物质 （一）铅（ Pb）的检查法 （二）镉（ Cd）的检查法 2,6-溴苯并噻唑偶氮萘酚比色法 （三）铜（ Cu）的检查法 （四）锡（ Sn）的检查法 1、比色法 （五）锑（ Sb）的检查法 1、比色法 第二节 药典规定中药制剂的检查项目 一、干燥失重测定法（附水分测定法） 1、常压恒温干燥法 2、干燥剂干燥法 3、减压干燥法 第五章 中药制剂中各类化学成分分析 第一节 含生物碱类成分的分析 一、含生物碱类成分中药制剂的定性鉴别 （一）生物碱的沉淀反应 （二）生物碱的显色反应 （三）生物碱的色谱鉴别 1 、薄层色谱法 2 、纸色谱法 3 、高效液相色谱法 4 、气相色谱法 二、含生物碱类成分中药制剂的含量测定 （一）经典化学方法 1、重量法 2、溶量法 （二）光谱法 1、可见分光光度法（比色法） （ 1） 雷氏盐比色法 （2 ）酸性染料比色法 （3 ）苦味酸盐法 2、紫外分光光度法及其新技术 （二）光谱法 1 、可见分光光度法（比色法） （ 1） 雷氏盐比色法 （2 ）酸性染料比色法 （3 ）苦味酸盐法 2 、紫外分光光度法及其新技术 三、应用实例 （一）含小檗碱的中药制剂分析 （二）含麻黄碱的中药制剂分析 （三）含延胡索乙素的中药制剂分析 （四）含乌头碱的中药制剂分析 第二节 黄酮类制剂的分析 一 、含黄酮类成分的定性鉴别 （一）化学显色反应 1、还原反应 2、与金属盐类试剂的络合反应 （二）纸色谱法 （三）薄层色谱法 1、 硅胶薄层色谱 2、 聚酰胺薄层色谱 3 、纤维素薄层色谱曲 纤维素薄层色谱可用于分离黄酮甙类较 好，原理与纸色谱相同，色谱流动相 可套用纸色谱所有的流动相。 二、黄酮类成分定量分析 （一）比色法 （二）紫外分光光度法 （三）薄层色谱法 （四）高效液相色谱法 （五）极谱法与库仑滴定法 第五章 中药制剂中各类化学成分分析 第一节 含生物碱类成分的分析 一、含生物碱类成分中药制剂的定性鉴别 （一）生物碱的沉淀反应 （二）生物碱的显色反应 （三）生物碱的色谱鉴别 1 、薄层色谱法 2 、纸色谱法 3 、高效液相色谱法 4 、气相色谱法 （一）经典化学方法 1、重量法 2、容量法 （二）光谱法 1、可见分光光度法（比色法） （ 1） 雷氏盐比色法 （2 ）酸性染料比色法 （3 ）苦味酸盐法 2、紫外分光光度法及其新技术 （三）色谱法 1 高效液相色谱 2 薄层色谱法 三、应用实例 （一）含小檗碱的中药制剂分析 （二）含麻黄碱的中药制剂分析 （三）含延胡索乙素的中药制剂分析 （四）含乌头碱的中药制剂分析 第二节 黄酮类制剂的分析 一 、含黄酮类成分的定性鉴别 （一）化学显色反应 1、 还原反应 2 、与金属盐类试剂的络合反应 （二）纸色谱法 （三）薄层色谱法 1、 硅胶薄层色谱 2、 聚酰胺薄层色谱 3 、纤维素薄层色谱曲 纤维素薄层色谱可用于分离黄酮甙类较 好，原理与纸色谱相同，色谱流动相 可套用纸色谱所有的流动相。 二、黄酮类成分定量分析 （一）比色法 （二）紫外分光光度法 （三）薄层色谱法 （四）高效液相色谱法 （五）极谱法与库仑滴定法 三、应用实例 （一）含黄芩中药制剂的分析 （二）含淫羊藿中药制剂的分析 （三）含葛根中药制剂的分析 （四）含陈皮中药制剂的分析 第三节 醌类成分的分析 中药中的醌类成分有蒽醌、萘醌、菲醌、苯醌等类型。 一、蒽醌类成分的定性分析 （一）化学显色反应 （二）薄层色谱法 薄层色谱法是鉴别含蒽醌类成分的中药制剂的最主要的定性方 法。 吸附剂多用硅胶，氧化铝因吸附能力太大，现已很少使用。 （三）升华法 二、蒽醌类成分的定量分析 （一）比色法 1 游离蒽醌的测定 2 结合蒽醌的测定 3 比色法分析实例 （二）薄层色谱法 三、应用实例 （一）含大黄中药制剂的分析 （二）含何首乌中药制的分析 四、萘醌、菲醌类成分的分析 （一）含紫草中药制剂的分析 （二）含丹参中药制剂的分析 第四节 皂甙类制剂的分析 皂甙是一类比较复杂的甙类化合物。其水溶液易引起肥皂样泡 沫，且具有溶血和与胆固醇形成复合物等特征。皂甙的这些物理及生 物学性质，构成了皂甙的经典含义。皂甙按其皂甙元结构，可分为甾 体皂甙和三萜皂甙。 一、皂甙类成分的定性分析 （一）泡沫反应 （二）显色反应 （三）薄层色谱 二、皂甙类成分的定量分析 （一）比色法 （二）薄层色谱法 （三）高效液相色谱法 三、应用实例 （一）含人参中药制剂的分析 （二）含甘草中药制剂的分析 第五节 含挥发性成分制剂的分析 一、挥发油类成分的定性分析 （一）化学反应法 （二）薄层色谱法 （三）气相色谱法 挥发油类成分的定量分析 （一）气相色谱法 （二）薄层色谱法 三、应用实例 （一） 含薄荷中药制剂的分析 （二） 含丁香中药制剂的分析 1 气相色谱法 牙痛水中丁香酚的测定 2 紫外分光光度法 康齿宁乳膏中丁香酚的测定 （三）含冰片中药制剂的分析 中药制剂中冰片的定性鉴别方法有升华法、显色法、薄层色谱和 气相色谱法和气相色谱法；定量方法则以气相色谱法为主，另有薄层 色谱法、重量法、红外导数分光光度法等 。 （四） 含樟脑中 药制剂的分析 1、定性分析 2、气相色谱法定量分析 （1 ）风油精中樟脑、薄荷脑、水杨酸甲酯的测定 ---内标法 （2 ）十滴水中樟脑的测定----外标法：十滴水由樟脑、干姜、大黄、 小茴香、肉桂、桉油等组成。 （3 ）紫外分光光度法 复方樟脑涂剂中樟脑与苯酚的测定 ----导数 分光光度法 第六节 含其他类型中药制剂的分析 一、含有机酸类制剂的分析 有机酸结构中含有羧基， 无论是脂肪酸、 芳香酸都表现出弱酸性， 或受结构中其他基团的影响产生不同的酸性， 往往利用其羧基与某些 显色剂产生颜色反应进行鉴别和含量测定。 （一）人参蜂王浆中蜂王酸的测定 人参蜂王浆具有促进新陈代谢，增强人体免疫，抗衰老等功能。 王浆中蜂王酸（王浆酸，反式 -10-羟基 -2-癸烯酸，简称 10-HAD）其 含有量在 1.4%以上, 为王浆中特征的活性成分之一 ,多种含王浆的中 药制剂多以测定 10-HAD 作为评价产品质量的优劣, 有关其含量测定 方法讨论如下 :蜂王酸的含量测定方法有薄层间接和直接定量法、高 效液相色谱法和气相色谱法等。 1 薄层间接定量法 2 薄层扫描定量法 3 高效液相色谱法 4 气相色谱法 （二）桂皮浸膏中肉桂酸的测定 桂皮的主要化学成分为桂皮醛、桂皮酸，大多测定其桂皮醛的含 量作为评价桂皮的质量，但在出口中药制剂产品中，国外要求测定桂 皮酸的含量。 （三）益心口服液中阿魏酸与桂皮酸的分析 益心口服液由肉桂、川芎、丹参、白芍、三七等十余味中药组成 的复方制剂，有活血化痰的功效，可治疗冠心病。 1 阿魏酸的定性鉴别 2 桂皮酸的含量测定 3 其它含有桂皮酸的中药制剂 （四）含绿原酸中药制剂的分析 1 舒肝消积丸中绿原酸的测定 2 感冒舒中绿原酸的测定 （五）抗病毒胶囊中齐墩果酸的测定 二、含环烯醚萜类制剂的分析 传统中药栀子、地黄、玄参、龙胆等常作为原料药材，配制成各 种制剂应用于临床。如黄胆等的主要化学成分，此类成分是由两个异 戊二烯构成含 10 个碳原子的单萜类化合物，其母核都为环状，具有 烯键和醚键，大多数为白色结晶，具苦味，大多数易溶于水和甲醇、 对酸敏感，成甙后甙键易为酸水解断裂，甙元结构中 C 1 位的羟基和 C 2 位的氧是一个半缩醛的结构，化学性质活泼，易发生进一步氧化 聚合等反应，尤其在酸碱作用下更易变化，因此自中药制剂中分离， 分析这类成分难度较大， 但仍可利用环烯醚萜类遇氨基酸并在加热的 情况下， 显蓝色的性质作为植物药或某些中成药中初步鉴别此类成分 存在的线索，再进一步进行分离分析 。中成药金黄散外肝于扭伤，敷 药后皮肤呈青色，中药地黄、玄参在采收加工时变黑色都与此类成分 有关。 （一）含栀子中药制剂的分析 栀子为茜草科植物（ Gardenia jasminoides Eills.)的果实，是传统 中药，具苦寒清降，凉血解毒的功效。在中医处方中应用甚广，有致 泻、抑菌、降压等药理作用。栀子的化学成分已分离出多种环烯醚萜 甙类化合物如栀子甙（geniposide) 、栀子甙酸（ geniposidic acid)、羟 基栀子甙（garderoside) 、京尼平-1- β -龙胆双糖甙(genipin-1- β -gebtiobioside)等 ,其中栀子甙是致泻的有效成分 ,常作为评价栀子及其 制剂质量的一种指标性成分 . 1 定性鉴别 2 含量测定 (二) 含龙胆中药制剂的分析 三、含木脂素类成分中药制剂的分析 （一）生脉散中五味子成分的分析 1 生脉散中五味子醇甲、醇乙的含量测定 （二）利肝冲剂中总木脂素成分的测定 主要组成 五味子、茵陈、黄芩、枳壳等。 （三）藿香正气水中厚朴酚、和厚朴酚的含量测定 藿香正气水的组成 姜厚朴、苍术、陈皮、白芷、茯苓、生半夏等十 味药组成。 （二）化毒丸的分析 主要组成 主要为芍药 （三）复方白芍片的含量测定 复方白芍片主要组成为白芍、人参。利用薄层扫描法测定芍药中 芍药甙的含量。 （四） 14 种含芍药甙肿药制剂的分析 五、含二萜类成分的分析 （一）含芫花制剂的分析 （二）含雷公藤中药制剂的分析 （三）含穿心莲中药制剂的分析 1 穿心莲总内酯的测定 2 穿心莲内酯的测定 第六章 动物药、矿物药的分析 第一节 含动物药中药制剂的分析 一、牛黄及其制剂的分析 （一）胆汁酸的化学反应 1 Pettenkofer 反应 2 Gregory Pascoe 反应 此反应原理与上述 Pettenkofer 反应相 似，采用试剂为 0.3%糠醛。 3 Hammarsten 反应 （二）胆红素的化学反应 胆红素能与重氮化试剂（对氨基苯磺酸重氮盐）即偶氮试剂产生 颜色，其颜色深浅与浓度成比，此反应可用来比色测定含量。 （三）人工牛黄的定性鉴别 （1 ）取人工牛黄粉末适量，分为 2 份， 1 份加硫酸显污绿色，另 1 份加硝酸显红色。 （2 ） 人工牛黄在可见光下λ max CHCl 3 453±2nm 波长处有最在吸收 . （3 ）人工牛黄具有特征的红外吸收光谱. （4 ）薄层色谱鉴别 : 胆酸的鉴别 胆红素的鉴别 (四) 人工牛黄的含量测定 1、胆酸的含量测定 2、总胆酸的含量测定 3、胆红素的含量测定 4、HPLC 法测定胆红素的含量 (五) 含牛黄制剂的分析 1、牛黄珍珠胶囊中胆红素的测定 2、牛黄降压丸中胆酸和去氧胆酸的测定 3、六神丸中胆酸、猪去氧胆酸的测定 二、麝香及其制剂的分析 麝香（ moschos)是鹿科动物林麝、马麝、厚麝中雄体香囊中的分 泌物，是贵重香料和急救必需品。具有抗炎、强心、雄性激素样等作 用，是多种中成药的组成之一，如安宫牛黄丸、六神丸、苏合香丸等。 麝香的化学成分复杂，主要成分为麝香酮（ muscone)。一般含量为 2%～4% 。 (一) 定性鉴别 (二) 含量测定 1、麝香中麝香酮的含量测定 2、麝香风湿片中麝香酮的测定 三、熊胆及其制剂的分析 熊胆（ Fel Ursi）为名贵中药材，是棕熊（ Ursus artos L.)或黑熊 （Selenaaectors ethbtanus G. Curier)的干燥胆汁。具有清热利胆、平肝 明目、镇痛、健胃等功效，可治疗多种疾病。自本世纪 40 年代以后， 天然熊胆资源日益缺乏，供不应求， 价格昂贵，出现很多伪品，或以 次充好，或采用熊以外其他动物胆囊人工灌入引流熊胆，充作药用熊 胆。通过性状和经验鉴别等方法，对熊胆的鉴别有一定作用，但不能 全面控制熊胆质量，特别对中药制剂中掺伪的熊胆，更需要用现代方 法加以鉴别。 熊胆中胆汁酸的成分为牛磺熊去氧胆酸， （taurourdsodeoxycholic acid)简称（TUDCA ） ，经碱水解后得熊去氧胆酸性成分。此外熊胆中 尚含有少量的鹅去氧胆酸、去氧胆酸和胆酸，以结合形式存在于熊胆 汁中。牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸是差向异构体，同时存在。 （一）熊胆中熊去氧胆酸的定性鉴别 （二）熊胆中结合胆汁酸含量测定 四、蛇胆及其制剂的分析 蛇胆汁为眼镜蛇科，游蛇科或蝰科动物多种蛇的胆汁，为一种常 用中药。蛇胆的药用常采用复方蛇胆制剂的方式如 “三蛇胆川贝末 ”， “蛇胆陈皮末” ， “蛇胆川贝口服液 ”等。蛇胆汁中含有胆汁酸、甘氨胆 酸和牛磺胆酸的无固定比例的混合物和胆固醇等。 其中胆汁酸是蛇胆 汁中最有特征性的成分，同时蛇胆汁中还有微量元素 Zn、 Cu、 Fe 及 Ca，Mg 等。 （一）十种蛇胆胆汁酸成分的薄层色谱 五、蟾酥及其制剂的分析 蟾酥为蟾蜍耳后腺及皮腺分泌的白色浆液，经加工干燥而成，化 学成分复杂。主要含有具有强心作用的蟾酥甾二烯类，强心甾烯蟾毒 类和吲哚碱类，蟾酥配基类和精氨酸等结合的酯类。这类成分往往在 干燥加工或提取过程中分解为蟾酥配基类。 （一）定性鉴别 1、显色反应 2、纸色谱法 3、薄层色谱法 4、紫外和红外吸收光谱法 （二）定量分析 1、分光光度法和比色法 2、薄层扫描法 3、气相色谱法 （三）应用实例 实例 1 喉症丸中蟾酥总蟾毒内酯的含量测定 实例 2 肖金丹中三个蟾毒内酯成分的含量测定 实例 3 六应丸中总蟾毒内酯的含量测定 实例 4 梅花点舌丸中三个蟾毒内酯成分的含量测定 第二节 矿物药中药制剂的分析 在植、动、矿物三大类中药中，常用矿物药约 20 多种，约占常 用中药的 5% 。矿物药广泛用于中药制剂并具有多种生理功能。矿物 类药材，简称矿物药，包括可供药用的天然矿物、生物化石、加工品 及纯粹化学制品等。其主要为无机化合物，帮又可称为无机类药材。 依据矿物药中所含最主要的或含量最 多的元素和化合物类别可分为 下列十类即：砷类药（如雄黄） ；汞类药（如朱砂）；铅类药（如密陀 僧） ；铜类药（如胆矾） ；铁类药（如赭石） ；钙类药（如石膏） ；硅类 药（如滑石） ；硫类药（如芒硝）；氯类药（如大青盐）；其他矿物药 （如白矾、炉甘石、硼砂） 。矿物药肯有药源丰富，加工炮制方法比 较简便、功用确切、疗效迅速、具有多种医疗作用的特点。但矿物药 品种复杂特别是砷、汞、铅等类药物具有毒性，安全范围较小，因此 对中药制剂中矿物药的质量控制更具有重要的意义。 矿物药分析的基本程序是： 取样 ——试样的分解—— 定性——定 量。其中试样的分解是将待测组分转入溶液中的重要步骤。一般要求 试样分解必须完全；试样分解过程中待测组分不应损失。试样分解过 程中不能引入被测组分或干扰组分。常用的分解方法可分为：溶解法 （湿法）和熔融法（干法）两种。 一、雄黄及其制剂的分析 在含砷矿物药中比较重要的有雄黄、 雌黄 （As 2 s 3 )、砒石（ As 2 O 3 )。 其中以雄黄应用最多。雄黄（ realgar)为硫化物类矿物雄黄族雄黄，主 含二硫化二砷（ As 2 s 2 ）辛温、有毒、有燥湿、杀虫、解毒之功效。 砷服用过量易引起中毒，所以砷类药中的砷既是有效成分，又是有毒 成分，尤其是进出口中药制剂及中药材更要求准确定量。因此必须进 行定量的测定。 很多砷化合物具有挥发性，因此测定砷的试样时不应任意的灼 烧。雄黄、雌黄等含砷的硫化物常用硝酸、硫酸等酸性溶剂分解，也 可采用碱熔法分解： 3As 2 S 2 + 22HNO 3 + 4H 2 O === 6H 3 AsO 4 + 6H 2 SO 4 + 2NO As 2 S 2 + 7H 2 SO 4 === 2H 3 AsO 3 + 9SO 2 +4H 2 O As 2 S 2 + 11Na 2 O 2 + 16Na 2 CO 3 === 2Na 3 AsO 4 + 2Na 2 SO 4 + 22Na 2 O + 16CO 2 2As 2 S 2 + 9H 2 SO 4 + 9H 2 O 2 === 4H 3 AsO 4 + 13SO 2 + 12H 2 O As 2 S 2 + 3H 2 SO 4 + 6KNO 3 === 2H 3 AsO 4 + 2SO 2 + 6NO + 3K 2 SO 4 (一 ) 定性鉴别 As 2 S 2 + 2KClO 3 + 3HNO 3 KAsO 3 + 2H 2 SO 4 +Cl 2 + NO 2 H 2 SO 4 + BaCl 2 BaSO 4 + 2HCl As 2 S 2 + 7O 2 △ 2As 2 O 3 + O 3 + SO 2 As 2 O 3 + 3H 2 O Δ 3H 3 AsO 3 3H 3 AsO 3 + 3H 2 S H+ As 2 S 3 + 6H 2 O （二）雄黄的含量测定（碘量法） （三）牛黄解毒片中雄黄含量测定 （四）中药雄黄中 As 2 O 3 的含量测定 二、朱砂及其制剂的分析 （一）汞的定性鉴别 Hg 2+ + 2OH - HgO + H 2 O (二) 朱砂中汞的含量测定 （三）中药制剂信中药材中微量汞的测定 1、双硫腙比色法 试样用硝酸- 硫酸- 高氯酸消化。在 pH1-2 溶 液中， 高价汞与双硫腙作用生成橙色，可用四氯化碳提取后进行双色， 其最大吸收在 492 nm 波长处 . 2、朱砂及含朱砂中药制剂中游离汞的测定 蒸馏 ---冷原子吸收 光谱法 详见第二章 . 3、中药制剂中可溶性汞的测定 用人工胃液浸取中成药中的可 溶性汞, 用冷原子吸收光谱法进行测定 . 三、其他矿物药的分析 （一）铜类药的分析 铜类矿物药在中医典籍中早有记载，具有催吐、杀虫、收敛的功 效，常用的为胆矾（ CuSO 4 ·5H 2 0)、铜绿[CuCO 3 · Cu(OH) 2 ]等 . 1、定性鉴别 (1)铜盐与氨水生成蓝色的碱式铜盐沉淀 ,易溶于过量的氨水, 形 成深蓝色的铜氨络离子. 2Cu 2+ + SO 4 2- + 2NH 3 ·H 2 0 Cu(OH) 2 SO 4 + 2NH 4+ Cu 2 (OH) 2 SO 4 + 8NH 3 2Cu(NH 3 ) 4 2+ + SO 4 2- + 2OH - (2)铜盐在中 性或酸性溶液中与亚铁氰化钾反应 ,生成红棕色的亚铁氰化铜沉淀 ,并 能溶于氨水 ,形成 Cu(NH 3 ) 4 2+ 离子. 它也能被碱金属的氢氧化物所分解 . 2Cu 2+ + Fe(CN) 6 4- Cu 2 Fe(CN) 6 2CuFe(CN) 6 + 4OH - 2Cu(OH) 2 + Fe(CN) 6 4- 2、定量分析 碘量法是测定铜的经典方法，由于干扰元素少，因此 即使是比较复杂的试样也可应用。此法测定铜的范围较宽，对高含量 的铜的测定尤为适用。碘量法测定铜是以碘化钾将铜（Ⅱ）还原为铜 （Ⅰ） 的反应为基础的， 还原时析出难溶于稀酸的碘化亚铜和游离碘。 2Cu 2 + 4I - Cu 2 I 2 + I 2 析出的碘用硫代硫酸钠标准溶液 滴定。 I 2 + 2S 2 O 3 2- 2I - + S 4 O 6 2- （二）铁类药的分析 铁类药主要用作强壮补血药、安神镇静药、并有催吐、止泻等作 用。常为铁及其氧化物、硫化物、硫酸盐等，并有低铁与高铁之分。 常用铁类药为磁石（ Fe 3 O 4 ),赭石（Fe 2 O 3 )，自然铜（FeS 2 )等。 1、定性鉴别 亚铁盐的鉴别： （ 1） Fe 2+ 与铁氰化钾作用生成深蓝色沉淀，通常称为滕氏蓝或 邓布尔蓝。 Fe 2+ + [Fe(CN) 6 ] 3- + K + K[Fe 2 (CN) 6 ] （2 ）Fe 2+ 与 1%邻二氮菲的乙醇溶液数滴，即显粉红色。 2、定量方法 测定铁的方法很多，如高锰 酸钾容量法，硫酸铈容量 法、重铬酸钾容量法。以重铬酸钾容 量法应用最广，具有快速、简便， 准确的特点，也是沿用至今的经典方法。 在盐酸（或硫酸）溶液中，用氯化亚锡将三价铁还原为二价铁， 过量的氯化亚锡用氯化汞除去，然后在硫磷混合酸存在下，以二苯胺 磺酸钠为指示剂， 用重铬酸钾标准溶液滴定二价铁到出现稳定的蓝紫 色即为终点。反应如下； 2Fe 2+ + Sn 2+ + 6Cl - 2Fe 3+ + SnCl 6 2- Sn 2+ + 4Cl - + 2HgCl 2 SnCl 4 2- + Hg 2 Cl 2 6Fe 2+ + Cr 2 O 7 2- + 14H + 6Fe 3+ + 2Cr 3+ + 7H 2 O 3、磁石中含铁量的测定 （1 ）酸溶法； （2 ）碱熔法： 4、磁朱丸中磁石的成分测定 （三）铝类药的分析 铝类药主要有白矾、枯矾。测定常量铝多用 EDTA 滴定法。由于铝离子与 EDTA 的配 位反应速成度较慢，帮故采用回滴法，即在铝盐溶液中，加入准确过量的 EDTA 标准溶液， 加热促使络合反应进行完全，然后再用标准锌盐溶液回滴剩余的 EDTA。滴定时溶液的 pH 值一般控制在 5-6，指示剂可以用双硫腙或二甲酚橙，终点时变化均非常敏锐。 1、白矾中铝的测定（EDTA 法） 2、白矾中铝的测定（二甲酚橙指示剂法） 3、安胃片中枯矾的成分测定 （四）硼砂类药的分析 硼砂主含四硼酸二钠〔Na 2 [B 4 O 5 (OH) 4 ]·8H 2 O 〕 , 常写作 Na 2 B 4 O 7 ·10H 2 O,可组成复方入药如冰硼散。用作配制冰硼酸的煅硼 砂，由于传统经验炮制方法无温度与时间的严格控制，大部分未煅制 透，结晶水失散不等 ,因而影响实际的含量. 含硼试样中如不含干扰物质 (如碳酸盐, 铵盐等非中性杂质) 时 ,可 用标准酸直接进行滴定. B 4 O 7 2- + 2H + + 5H 2 O 4B(OH) 3 硼砂的含量测定 第七章 各种类型中药制剂的分析 为数众多的中药剂型，各有不同的制备方法和存在形式。散剂、 片剂、丸剂、冲剂、搽剂、锭剂、栓剂等都是固体状态的中药制剂。 1、汤剂、口服液、酊剂、酒剂、注射剂都属于液体制剂。 2、浸膏、流浸膏、糖浆剂、煎膏剂属于半固体制剂。 3、膏药、软膏剂、橡皮膏、栓剂均系外用制剂。 4、研究和设计中药制剂的分析方法， 应根据剂型的特点、被测成分 的理化性质、存在状态、以及各种成分之间相互产生干扰的程度等进 行综合考虑。 对含药材粉末的制剂， 显微检定检查法可做为重要方法， 含量测定时，须将被测成分全部提取 出来。常用的提取法有冷浸、回 流提取、超声提取等。 第一节 液体中药制剂的分析 液体中药制剂包括合剂、口服液、酒剂、酊剂和注射剂等。 一、液体制剂质量的一般要求 （一）外观性状 （二）相对密度 （三）pH （四） 装量差异 （五） 乙醇量 二、液体制剂定量分析的特点 定量分析的目的是控制制剂的品质优良度。 当处方中所含药味较 少而且有效成分明确时，可选用主要有效成分作为控制指标，对于药 味较多的处方，则可选择一个或几个有代表性的成分作为质控指标。 对于处方中药味较多，成分复杂，选择质控指标成分目前尚有困难的 酒剂，可有测定药酒中含总固体量的方法控制其质量。液体中药制剂 定量分析需根据被测成分的理化性质、 杂质的性质， 选择合理的分离、 净化方法，消除其他成分或杂质的干扰，提高测定的可靠程度。制剂 中所含杂质的种类和数量，除与原料药材关系密切外，还与所用的溶 剂性质有关。 （一）合剂、口服液 1、例 实例 1 小青龙合剂 实例 2 西洋参精口服液 主要组成：西洋参、蔗糖、蜂蜜。 2、防腐剂的测定 含水较多的中药制剂容易被污染物污染，特别是含糖、含营养物 质较多的口服液、糖浆等剂型更为突出。染菌后长霉、发酵，不但严 重影响制剂的稳定性，甚至还能引起 玻璃容器的爆裂，造成事故。常 用的措施之一就是在制剂中加入一定量的防腐剂。 口服液体中药制剂 中常用的防腐剂有苯甲酸钠、对羟基苯甲酸酯、山梨酸等。这些防腐 剂在液体制剂中的用量较低，一般只有 0.2%左右。测定制剂中防腐 剂的含量，也容易受到制剂中其他成分的干扰，所以，选择测定方法 时，既要有考试应具有较高的灵敏度，又要有较好的选择性。实践表 明，防腐剂在规定限量下使用是安全的，但也有动物实验提示，大量 摄入防腐剂是有害的， 因此， 研究如何鉴定控制制剂中防腐剂的用量， 已日渐为人们所重视。 (1)山梨酸（ CH 3 CH=CHCH=CHCOOH) (2)苯甲酸：（ COOH ） 3 相对密度的测定 （1 ）比重瓶法： 供试品重量 供试品的相对密度 =_______________ 水重量 （2 ） 韦氏比重秤法：本法原理是根据一定体积的物体（如比重秤的玻 璃重锥）在各种液体中所受的浮力与该液体的密度成正比。 （二）酒剂和酊剂 1 实例 （1 ）颠茄酊： （2 ）姜酊： （3 ）冯了性风湿跌打药酒： 2 酒剂和酊剂含醇量分析 （ 1）中药制剂中含醇量测定：中 药制剂中含醇量的测定曾采用 蒸馏法。 （ 2）蒸馏酒、乙醇的质量和几种 主要杂质检查：对蒸馏酒和药 用乙醇的质量有严格要求，蒸馏酒外观应无色 透明，无沉淀杂质，无 异臭，甲醇含量每 100ml 不得超过 0.12g，杂醇油每 100ml 不得超过 0.15g，氰化物每 100ml 不得超过 0.2-0.5mg；铅每 100ml 不得超过 0.1mg。 乙醇要检查酸度、水不溶性物质、杂醇油、甲醇、易氧化物、丙 酮、异丙醇、戊醇或不挥发的易碳化物，不挥发物等。 第二节 半固体中药制剂的分析 属于半固体中药制剂的有浸膏、流浸膏、糖浆剂和煎膏剂。 一、半固体制剂质量的一般要求 除另有规定外，流浸膏每 ml 原药 1g 相于原药材 2～5g。流浸膏 中的含醇量与提取过程中有效成分的溶出程度有关， 又与成品质量的 稳定有关，应作检查，检查方法与酊剂、酒剂相同。 二、半固休制剂的质量分析 （一）药典收载浸膏、流浸膏质量分析 实例 1 甘草浸膏 主要成分 甘草。 实例 2 大黄流浸膏 主要组成 大黄。 （二）糖浆剂、煎膏剂的质量分析 实例 1 养阴清肺膏 实例 2 养血当归精 主要组成 当归、川芎等。 （三）蜂蜜的分析 1、外观性状 2、相对密度 3、酸度 4、 淀粉与糊精 5、 含量测定 蜂蜜主要含葡萄糖和果糖，约占 70%，两者含量 相近。优质蜂蜜中含果糖的比例较高些。药典用碱性酒石酸铜试液按 容量法测定蜂蜜中葡萄糖和果糖中的 总量，统称为还原糖的含量。 本法是根据葡萄糖和果糖具有还原性， 都能在煮沸条件下与碱性 酒石酸铜试液作用，生成氧化亚铜。 第三节 固体中药制剂 固体中药制剂包括丸剂、片剂、散剂、冲剂、栓剂等。这些制剂 的被分析成分都存在于固态的剂型中，分析前必须选择合适的溶剂， 将被测成分完全提取出来， 再根据其理化特性和共存的其他成分的性 质以及其干扰程度，设法分离精制，使其适应分析方法的要求，其中 丸剂、散剂和部分片剂由于直接使用粉碎的药材，被分析成分存在于 植物细胞中，要提取完全更困难。因此，固体中药制剂的分析过程中 样品的提取分离是非常重要的步骤，应倍加注意。此外，赋形剂的干 扰不能忽视，丸剂、冲剂中含有多量的糖，都有可能影响分析。含有 药材细粉的中药制剂，其中主要药材 的鉴别可以采用粉末镜检法，通 过检视特征组织碎片，确定其是否存在。 一、丸剂的质量分析 （一）丸剂的质量要求 （二）丸剂质量分析的特点 1、 样品的预处理 2、 样品溶液制备 3、 丸剂的理化鉴别 4、 丸剂中主要成分的定量分析 丸剂样品经提取、净化分离后 即可进行定量分析，由于被分析成分往往含量很低，而且经净化后的 样品多数仍是混合物。所以较常用的分析方法有分光光度法、薄层扫 描法、高效液相色谱法、气相色谱法等。具体条件的选择，主要根据 被测定成分的化学结构类型， 参考原料药中相同成分的测定条件进行 试验。 （三）应用实例 1、 定坤丹 2、 防风通圣丸 3、 石斛夜光丸 二、片剂的质量分析 （一）片剂的质量要求 片剂的质量检查项目包括化学、物理及微生物三个方面，详见中 药制剂学。 （二）片剂质量分析的特点 片剂的质量要求的含量常以每片中含被测成分的重量表示。 若有 效成分明确、结构已知，规格具体，则常采用按标示量计算的百分含 量，以此表示每片中有效成分测得的实际含量与标示量的符合程度。 片剂生产中，不可能做到每个药片的重量完全一致，因此，常用平均 片重作为片重进行含量测定的计算。为了改善分析取样的代表性，应 取用若干个药片，精密称出总重，研细，混匀后，从中精密称取适量， 作为每次分析用的样品。按标示量计算百分含量的算式如下： 样品中 测成分测得的实际重量×平均片重 标示量% = ×100% 样品重×标示量 (三)应用实例 1、 华山参片 2、 更年安片 3、 北豆根片 三、颗粒剂（冲剂）的质量 分析 （一）颗粒剂（冲剂）的质量要求 冲剂的质量一般要求从外观、性状、粒度、水分、溶化性、硬度、 重量差异等五个方面进行考查，详见中药制剂学。 （二）冲剂质量分析的特点 生产冲剂用的原料药材经过提取、浓缩除去了大部分杂质，有的 还用乙醇沉淀作进一步的精制，有利于分析前样品的处理工作。但冲 剂中常常加入数量较多的辅料，如糖、糊精等。这些物质有时对分析 有干扰，应注意设法排除。 （三）应用实例 1 板蓝根冲剂 主要组成 板蓝根、大青叶。 鉴别 含量测定 （1 ）靛玉红的测定—— 薄层紫外分光光度法： （2 ）总氨基酸的测定 ——分光光度法： （3 ）总氮的测定：本测定法俗称凯氏定氮法，全部测定过程分 为三个步骤，即消解、蒸馏和测氮。 2 五味子冲剂 主要组成 五味子。 含量测定 总木脂素的测定—— 分光光度法： 四、散剂的质量要求 （二）散剂分析的特点 （三）应用实例 1、 九分散 2、 七厘散 3、 紫雪散 五、栓剂的质量分析 栓剂系指药物与适宜基质制成供腔道给药的固体制剂。 它不仅用 于局部治疗而且还可通过直肠吸收起全身作用。 中药栓剂中的药物可 以用药材细粉或药材浸取物。供栓剂用的基质种类较多，分为脂肪性 基质和亲水性基质两大类。 基质的性能关系到药物疗效的发挥和制剂 的稳定性，应根据药物的性质和栓剂的用途加以选择，目前使用较多 的亲水性基质有甘油明胶，聚乙二醇，吐温-61 ，脂肪性基质有半合 成的椰子油酯，半合成山苍子油酯，半合成棕榈酸酯。脂肪性基质在 有合适的熔点（37℃附近), 室温下有一定的硬度 ,酸价小 (1 左右), 碘价 低(2 左右 )。 (一)栓剂的质量要求 按制剂质量要求检查的项目有重量差异、 融变时限等详见中药制 剂学。 （二）栓剂分析的特点 栓剂的质量分析应包括物理的和化学的二个方面， 物理方面的指 标有熔点（脂肪性基质的栓剂） 、硬度、融变时限等。有关化学测定 方面的除主药或主要成分的鉴定和含量测定外， 还应注意有效成分的 释放度试验、基质的刺激性试验。在进行成分分析时一方面要注意附 加剂的干扰，另一方面要根据被测成分和基质各自的理化性质，设法 使二者完全分离。如脂肪性基质与水溶性成分制成的栓剂，可将栓剂 与适量的水共热，提取，此时基质受 热融化，被测成分溶于水，如此 反复多次后，水溶性被测成分则可与基质完全分离。又如脂肪性基质 与生物碱制成的栓剂，可将栓剂溶于适量的氯仿，然后用酸水反复萃 取，则生物碱溶于酸水而基质留在氯 仿中，两者可完全分离。 （三）应用实例 1、 小儿解热栓 2、 洋金花栓剂 第四节 软膏剂、膏剂、橡皮膏剂的分析 这类中药制剂都是关固体或固体制剂， 专供外用。一般都是取一 定量的药材细粉或药材提取物与适量基质混合而成。 这类制剂的质量 控制不仅要进行成分分析，对基质的质量也要重点检查，如这类基质 应该有合适的稠度，膏剂和橡皮膏剂的基质对皮肤有很好的贴着性， 无刺激性。设计这类制剂的成分分析方法，要特别注意被测成分与基 质的分离方法。 一、软膏剂的质量分析 软膏剂系指药物与适宜的基质制成适当稠度的膏状外用制剂， 其 中乳剂剂型基质亦称乳膏剂。软膏剂常用的基质材料有凡士林、液状 石蜡、蜂蜡、植物油、单硬脂酸甘油酯、高级醇、聚乙二醇、乳化剂 等及其混合物。必要时可添加适量的防腐剂、搞氧剂以增加稳定性。 软膏剂应均匀，细腻，涂于皮肤上应无不良刺激性，并应有适当的粘 稠性，易涂于皮肤或粘膜上而不融化，但能软化。软膏剂应无酸败、 异臭、 变色等变质现象。 由于软膏剂中基质的存在而且占的比例很大， 有时会将被测成分包住，妨碍其测定，可以根据被测成分，基质的理 化性质和分析方法的要求，参考下列方法先将基质分离后，再进行测 定。 （1 ）滤除基质测定法：取软膏一定量，加入适宜的溶剂，加热，使 软膏液化，再放冷，待基质重新凝固后，滤除基质或将基质拨开，如 此重复数次，合并滤液后测定。 （ 2）提取分离法：在适宜的酸性或碱性介质中，先用不混溶的有机 溶剂将基质提取后除去，而后进行测定。 （ 3）灼烧法：如软膏中被测成分为无机化合物，经灼烧，基质分解 除尽，然后对灼烧后的无机化合物进行测定。 应用实例 1 松萝酸软膏 2 老鹳草软膏 主要组成 老鹳草。 3 肤疾灵软膏 主要组成 轻粉。 二、橡胶膏剂的质量分析 中药橡胶膏剂系指药物与橡胶等基质混合后， 涂布于布上的外用 制剂，所用的药物有药材细粉也有药 材提取物。基质中作橡胶外，尚 有部分的凡士林、羊手脂、氧化锌和松香等。 （一）橡胶膏剂的质量要求 1 外观 2 含膏量 3 耐热试验 （二）橡胶膏剂的分析特点 （三）应用实例 1 伤湿止痛膏 2 麝香活血化瘀膏 三、膏药的质量分析 膏药系指药物、食用植物油与红丹炼制而成的外用制剂。药典要 求膏药外观要乌黑光亮、油润细腻、老嫩适度、摊涂均匀，无红斑、 无下边缺口，加温后能粘贴于皮肤上，且不移动。贴于患部不瘙痒及 重量差异检查等项目，详见中药制剂学。 膏药的质量分析首先应设法排除基质的干扰。膏药制备时，处方 中的一部分粗料药，在下丹成膏前与植物油一起 “熬枯去渣” ，还有一 部分细料药的细粉是在下丹成膏后，再向膏中兑入、混匀。细料药大 多为主要药物，是质量分析的重要对 象。因膏药基质易溶于氯仿，所 以可先用氯仿处理样品，将将膏药中的基质溶去，剩余的残渣即可用 显微鉴别法鉴别各细料药物；细料药物中所含不溶于氯肪的成分，也 可用适当的理化方法从残渣中检出，用作判定真伪的依据。 实例 骨刺止痛膏 第五节 其他中药制剂质量分析 一、胶丸 胶丸属软胶囊剂， 系指一定量的药材提取物密封于球形或椭圆形 的软质囊材中的一种中药改进剂型， 其制备方法有滴制法和压制法两 种。软质囊材常用的是由胶囊用明胶和甘油制成。 （一）胶丸的质量要求 1 外观性状 2 装量差异 3 崩解时限 （二）含挥发油胶丸的分析 含挥发油胶丸的含量测定， 大多采用水蒸气蒸馏法测定总挥发油 的含量， 而挥发油能否定量在被蒸出是影响测定结果准确度的关键之 一，实践中发现，胶丸在贮存过程中囊材逐渐发生变化，囊壳色泽变 深，溶解困难，以致在水蒸 气蒸馏时不能在规定时间内全部破裂，挥 发油不以顺利全部蒸出，使含 量测定产生误差。若改用醋酸溶解（ 1 10）代替蒸馏水，作为胶丸含量测定时的溶剂，则能较好的解决上述 囊壳老化问题。 实例 牡荆油胶丸 二、胶剂 胶剂系指动物皮、骨、甲或角，用水煎胶质，浓缩成稠胶状，经 干燥后制成的固体块状内服制剂。多数胶剂在生产中，还加有少量植 物油、冰糖、黄酒等辅料，作矫味和辅助成型用。胶剂应为色泽均匀， 无异常臭味的半透明固体，能溶于热水，水溶液近于澄明。 胶剂的品种较多，外观相近，如何进行鉴别和质量评定，是个十 分重要的问题。近年，在外观经验评定的基础上，逐步增加一些检查 项目，这对提高胶剂的质量有着积极的作用 。但是，胶剂的鉴别，特 别是作用相近，可以相互代用的一些品种的鉴别，以及胶剂内在质量 的定量分析等方面仍缺少有效的分析手段。 最近几年来曾采用化学试 验、纸上色谱等方法，对多种市售胶剂设计出一些检验项目，例如， 灰分颜色、灰分与稀盐酸的作用、灰分中锰的分析，胶剂在稀乙醇中 的溶解度，在稀丙酮中的溶解度，蛋白质的含量，无机磷的含量等等 用于胶剂的鉴别，有一定的参考价值。还有利用运动粘度测定法，改 进的蛋白质等电点测定法和旋光性测定法等，对纯驴皮胶、黄明胶、 猪皮胶、水牛胶、杂皮胶，以及加有辅料的商品驴皮胶和一批伪品胶 进行了研究和比较， 为阿胶的真伪鉴别和内在质量的研究提供了新的 思路和手段。 实例 阿胶 阿胶是驴皮经煎煮、浓缩制成的固体胶。黑色，有光泽。质硬而 脆，断面光亮，碎片对光照视呈棕色半透明。 1、检查 2、总灰分 3、重金属 4、砷盐 5、挥发性碱性物质 三、微型胶囊 微型胶囊系指药物微粒或药液微粒被天然的或合成的高分子材 料包裹而成的微型囊状物（直 径从数微米至数千微米不等） 。可用作 制备散剂、胶囊剂、冲剂、片剂、注射剂、软膏剂等各种制剂的基础 材料。 在微型胶囊中，药物颗粒被囊膜所包裹，造成成分分析工作出现 不少困难，分析前必须设法将被测成分完全提取出来，否则分析的准 确性。提取分离的方法可根据囊膜材料和被子测成分的性质，灵活选 择。例如，形成囊膜的材料以明胶为主，则可先用胃蛋白酶或胰蛋白 酶将囊膜消化破坏，然后再根据药物的性质，选用适宜的溶剂将被测 成分提取出来，若药物是挥发油类物 质，则可选用水蒸气蒸馏法。又 如囊膜材料是易为水渗透的乙基纤维素，而主要成分又可溶于水时， 则可直接用水为溶剂加热提取。也可在撮时用超声波处理，提高提取 效率。 微型胶囊的成分分析工作中存在的另一个问题是微囊中含药量 的一致性差，若不注意将造成分析结果的误差增大。因为微囊中的含 药量与制备方法关系密切，不同的制备方法生产的产品，含量不同。 含药量还与工艺条件的控制有关， 因而同一批产品囊粒之间的含药量 也存在差异，如果粒径分布很宽，则差异更大。所以，在进行含量测 定时， 常用适当增大样品的取用量和适当增加测定次数来提高分析结 果的可靠性。 作为微型胶囊剂的质量控制，除成分分析外，还应作溶出速率， 生物利用度以及囊粒大小的测定。 实例 大蒜油微囊 四、胶囊 胶囊剂有硬胶囊和软胶囊之分，软胶囊即本节已介绍过的胶丸。 硬胶囊系指将一定量的药材提取物与药粉或辅 料制成均匀的粉末或 颗粒充填于空心胶囊中制成。 或将药材粉末直接分装于空心胶囊中制 成。 空心胶囊是由明胶或其他适宜的药用材料加辅料制成并且具有弹 性的两节圆筒，而且能互相紧密套合。 中药胶囊装入的药物主要有药材的浸膏、提纯物或药材粉末。根 据处方分析以及药物所含成分的理化性质， 选定被分析成分和所能采 用的分析方法。还可以参考浸膏剂和散剂的特点，设计分离和排除干 扰的方法。进行分析时，主要是定量分析时须将药物从胶囊中全部取 出，不能疏忽。 胶囊外观应整洁，不得有粘结、变形或破裂现象，并应无异臭， 内容物应干燥、疏松，混合均匀。内容物所含水分，降另有规定外， 不得超过 9.0%。装量差异检查和崩解时限检查可参看本节的胶丸。 实例 1 七味散胶囊 2 抗衰灵胶囊 主要组成 何首乌、枸杞子、山楂、黄芪、黄精。 五、气雾剂的质量分析 气雾剂系指药物和抛射剂同装封于带有阀门的耐压容器中， 使用 时借抛射剂产生的压力，能定量的将药物以雾状喷出的制剂。喷出的 药物经呼吸道吸入，作用于全身或局部治疗。或供皮肤和粘膜局部使 用，也可用于空间消毒和杀虫。 气雾剂对容器有特殊要求，这点与其他剂型不同。容器必须不为 内容物腐蚀，不易破损、不泄漏。 还应做内压力检查，定量阀门剂量 检查和雾粒大小检查，以保证制剂能正常发挥疗效，为了保证用药安 全还应作杂菌限度检查。 中药气雾剂与其他剂型相比，药物的纯度相对较高，杂质含量较 少。 进行成分分析前，首先应将药物与抛射剂分离， 然后再取样分析。 由于抛射剂的易挥发性， 所以一般采用微孔排气法从容器中排出抛射 剂。余下的药物可视其所含成分的性质和相互干扰的程度，选用适当 的方法分离后，进行鉴定和含量测定。如芸香草油气雾剂作鉴别时， 用加热法将稀释剂乙醇蒸除； 而用分光光度法测定其有效成分胡椒酮 时，由于乙醇不干扰测定，所以不必分离，可直接稀释后进行含量测 定。 实例 芸香草气雾剂 主要组成 芸香草油。 第六节 中药注射剂 中药注射剂系指中药材经提取、 精制后制成的供注入体内的灭菌 溶液、 乳状液和混悬液、 以及供临床前配成溶液或混悬液的无菌粉末。 从现有的生产工艺来看， 不论是由单味药材还是由复方制成的中 药注射剂，都已经过提取、纯化过程，药液中所含杂质的种类和数量 都大为减少。这一点对制剂的分析鉴定较为有利，但大多数的中药注 射剂仍然是含有多种成分的混事物。此外，为了改善溶解度、增加稳 定性，注射剂中常需加入一些附加剂，所以中药注射剂的组成还是相 当复杂的。 中药注射剂是直接注入人体的制剂， 显效快，毒副反应也快，对 其质量无疑必须严格要求，应该按照药典要求对其进行无菌检查、热 源检查、澄明度检查、注射液装量检查和注射用无菌粉末装量差异检 查等等。关于成分分析，一方面要对有效成分进行鉴别和含量测定， 确保疗效，另一方面要根据原料特点、制备工艺等，对其可能存在的 特有杂质进行限量检查，保证质量。 一、中药注射剂的鉴别和含量测定 大多数中药注射剂成分复杂，有的有效成分明确， 有的尚不清楚。 所以在选择鉴别和含量测定的方法上存在较多的困难， 对于有效成分 尚不清楚的注射剂，可从该药液所含的化学成分中，适当选择一类或 二类通常认为有生理活性的成分（如生物碱类、黄酮甙类、皂甙类或 挥发油类）作为指标性分析对象。鉴别方法一般以化学法和薄层色谱 法用得较多，化学法比较简单、易行，薄层色谱法有很好的分离能力 可排除其他成分的干扰，专属性好。能鉴别处方药味的特征图谱也可 选用。静脉注射剂各组分的鉴别，均应列为质量标准项目。含量测定 方法，一般多选用仪器分析法，如分光光度法和薄层扫描法。前者灵 敏度高，精密度也好，但专属性不好。后者分离能力好，专属性好， 但重现性稍差。高效液相色谱法正在逐步推广使用，其灵敏度、分离 能力、重现性都较好，但试验条件和设备要求较高。如果被分析成分 的含量较高，也可选用精密度好的化学分析如容量分析法。也可采用 适当的生物检定法，直接测定其生物活性，其结果与药效之间的关系 更为密切。此法更适用于干扰严重而且分离又困难的品种。与口服中 药制剂相比较，控制中药注射剂的品 质优良度应该有更高的要求。部 颁中药注射剂研制指导原则（ 1993 年 4 月制订发布）规定中药注射 剂含量测定应按下述原则处理。 （1 ）总固体量测定 （ 2）根据有效部位的理化性质， 研究该有效部位的含量测定方 法，选择重复性好的方法，并应作方法学考察试验。 （ 3）以净药材为组分配制的注射 剂应研究测定代表性的指标成 分，选择重复性好的方法，并作方法学考察试验。 （ 4）含量测定 均以标示量的上下限作为合格范围。 （5 ）含有剧毒药味时，必须制订该有毒成分的限量。 （6 ） 对含量测定方法的研究除理化方法外， 也可采用生物测定法 或其他方法。 （7） 组分中含有化学药品时，应单独测定化学药品的含量，由总 固体内扣除、不计算在含量测定的总比例数内。 （ 8）组分中的净药材及相应的半 成品，其含测成分量均应控制 在一暄范畴内， 使与成品的含量测定相适应， 用数据列出三者的关系， 必要时均应作为质量 标准项目，以保证处方的准确性及成品的质量 稳定。 （ 9）生产用药品的含量限（幅） 度指标，应根据实测数据（至 少有 10 批样品、 20 个数据制订） 。 二、中药注射剂中特有杂质的检查 1、 pH 测定 2、 重金属检查 3、 砷盐检查 4、 蛋白质检查 5、 鞣质检查 6、 炽烧残渣 7、 钾离子检查 8、 草酸盐检查 9、 树脂 三、实例 1 益母草注射液 主要组成 益母草。 2 丹参注射液 主要组成 丹参。 3 清开灵注射液 主要组成 胆酸、猪胆酸、水牛角、珍珠母、黄芩素、金银花提 取物、栀子、板蓝根。 第八章 生物样品内中药制剂化学成分的测定 第一节 概述 一、生物样品内中药制剂化学成分测定的意义和目的 二、生物样品内化学成分测定的特点 （1 ）样品复杂 （ 2）被子测定物浓度很低，要求 测定方法具有较高的灵敏度， 并且具有较高和稳定的回收率。 （ 3）要求建立选择性高的分离、 分析方法和合理的样品净化手 段。 （4 ）能求解出具有实验和临床上有意义的数据。 三、生物样品的种类和性质 （1 ）血样 （2 ）尿样 （3 ）唾液 （ 4）除以上样品外，在一些特定 目的或动物药理试验，可采取 其他体液，如泪液、乳汁、胆汁或各种脏器组织制成匀浆等。 （5 ）样品要具有代表性 （6 ）取样品后最好立即进行分析 第二节 样品制备 一、除去蛋白质的方法 （1 ）利用蛋白质脱水沉淀 （2 ）利用蛋白质形成不溶性盐沉淀 （3 ）其他方法 二、水解 水解使待测成分从结合物或缀合物中游离出来。 （1 ）酸水解 （2 ）酶水解 三、样品的提取和内标物的加入 （一）液相提取法 1 溶剂的选择 2 酸碱度的选择 （二）离子对提取法 （三）液 -固提取法 （四）生物样品直接进样法 四、待测成分的富集 第三节 中药制剂内化学成分的代谢 在进行血药浓度、尿药浓度等生物样品的测定时，了解和掌握待测成分的游离原型物， 或与蛋白结合的原型物及有治疗活性的代谢产物是非常必要的。中药制剂内化学成分在生物 内作为一个异物，由于身体内的自卫功能，通过酶的作用使成分代谢，或者通过生物化学元 素反应转变成低毒或无毒物质排出体外。绝大多数有效成分单体经肝酶或胃肠消化液的作 用，改变了化学结构和药理作用，再与内源性物质结合而排出体外。肝脏是药物代谢的加工 厂，药物经肝酶代谢分以下两个不同途径： 一、氧化反应 受肝微粒体酶促进的氧化反应（羟基化、去烷基、 形成氧化物、去硫作用、去卤素作用、醇、醛的氧化、去氨基作用） ； 还原反应和水解反应。 （1 ）中药川芎中主要化学成分之一川芎嗪碱的代谢。 （2 ）中药吴茱萸中主要化学成分之一吴茱萸新碱的代谢。 （3 ）中药肉桂中主要化学成分桂皮醛的代谢。 （4 ）中药天麻中主要化学成分之一天麻甙的代谢。 （5 ）中药大丁草中主要化学成分之一大丁甙的代谢。 二、结合反应 在肝可溶性线粒体作用下的结合反应， 此时化学成分与葡萄醛酸 或硫酸结合，以及发生甲基化和酰化作用。 （1 ）中药黄芩中主要成分黄芩甙、黄芩素的代谢。 （2 ）中药甘草中甘草素的代谢。 （3 ）中药陈皮中陈皮甙的代谢。 三、中药吴茱萸代谢产物的分离 四、中药黄芩代谢产物的分离 第四节 测定方法 生物样品的测定常用的方法有以下几方面。 一、分光光度法及荧光光度法 当待测成分在 200～700nm 有吸收峰的都可选用，或与薄层色谱 或液相色谱方法结合应用。分光光度法检出灵敏性不够，适用范围不 大。 二、气相色谱法 选择适当的固定相使待测成分与各代谢物及干扰杂质以在同一 色谱柱上分离，测定。如待测成分的挥发性小，则需制成易挥发的衍 生物，如将 GC 仪联用一个质量碎片检测器，以含稳定同位素的同一 成分作内标，不但分离完全，且检测限可达 0.001ng。在生物样品中 每 1ml 可测出 50pg～1ng 的物质。 三、高效液相色谱法 对挥发性小，对热不稳定的待测成分 ，高效液相色谱法有分离效 率高，适用范围广的优点，近来又有灵敏度高、选择性强的检测器的 开发和应用， 本法已成为分析体内成分及其代谢产物不可缺少的手段 之一。 四、薄层色谱法 一、薄层层析法 （一）特点 （二）操作过程 （三）定性原理 １、 概述 ①可见光下定位 2、定位方法 ②荧光下定位 ③显色定位 （四）定量原理 斑点面积与样品量关系 ① ㏒ w ∝ A ② W ∝ A ③togW ∝ A ④W ∝ A ⑤togw ∝ tog A（五）定量方法 1、薄层洗脱定 2、薄层上直接定量 （1 ）目测法 （2 ）测面积法 （3 ）仪器测定法 ------薄层扫描法 二、薄层扫描法 （一）基本原理 薄层吸收扫描法是用可见光或紫外线的单色光照射展开后的 薄层色谱板，测定薄层色谱斑点（简称斑点）的吸光度（ A）随展开 距离（L ）的变化，而获得 A-L 或 A-Rf 曲线，即薄层色谱扫描图（简 称扫描图） 。曲线上的色谱峰峰面积可用于定量分析。由于薄层板存 在着明显的散射现象， 而使斑点中物质的浓度与吸光度的关系不服从 Beer 定律，而用 Kubelka-Munk（古柏尔- 曼克）理论来描述。该议程 式是薄层扫描法的定量分析基础。 （二）测定方法 1、分类 （1 ）以检测方式分类 可见光 分光光度法 紫外光 ① 光学检测 ？测定法 荧光测定法 荧光？（减退法） 放射性检测 ②非光学检测法 火焰离子化检测器定量法 （2 ）以测量方式分类 ①反射法 ②透射法 ③透射----反射法 2、操作方法 （1 ）样品制备 （2 ）铺层 定容毛细管 点样器 （3 ）点样 微量注射器 点样台 （4 ）展开 ——展开缸、边缘效应、饱和 （5 ）显色、定位 （6 ）扫描测定 锯齿型 ①扫描方式 ？线型 ②单光束扫描 ③双光束扫描 ④单波长、双波长扫描λ S λ R （六） 定量计算 A 样 （ 1）外标点法 C 样 = ×C 标 外标法 A标 （2 ）外标二点法 C 2 － C 1 C = b＋a 式中： b = A 2 －A 1 A = 1/2(C 1 +C 2 ) －1/2b(A 1 +A 2 ) 解： C 1 = bA 1 + a ………① C 2 = bA 2 + a ………② ② －①式： C 2 － C 1 = b(A 2 －A 1 ) ② ＋①式： C 2 ＋ C 1 = b(A 2 ＋A 1 )+2a a = 1/2(C 1 +C 2 ) －1/2b(A 1 +A 2 ) 追行点样：标准液点两个不同体积 C 标样品点一种浓度即可。 （四）影响薄层扫描定量因素 1、吸附剂性能吸薄层质量 2、点样 3、展开 4、显色 5、薄层扫描定量 （五）常用薄层扫描仪 （六）薄层扫描法在药分中应用 1、检查、定性 2、定量 五、其他方法 放射免疫法、酶免疫法、荧光免疫法及游离基免疫法。比较广泛 应用的是放射免疫法。免疫分析法。免疫分析法可直接检测血清中的 组分，不必从血样中分离，操作简便，灵敏度及特异性高。原子吸取 光谱法适用测定生物样品中的微量元素，例如血清中锌盐的测定等。 表-8-4-1 测定方法的灵敏度 方法 检出限度 10 -9 g 质量碎片检测器 0.001 高效液相色谱法 紫外检测器 1 荧光检测器 0.1 电化学检测器 0.01 免疫法 放射免疫 0.001 酶免疫法 0.001 荧光免疫法 0.001 游离基免疫法 0.001 方法 检出限度 10 -9 g 紫外分光法 100 荧光分光法 10 原子吸收光谱法 1 薄层扫描光密度法 紫外检测器 10 荧光检测器 1 气相色谱法 氢焰检测器 1 氮检测器 0.1 电子捕获检测器 0.01 第五节 实 例 一、血浆中小檗碱的测定 二、血浆中延胡索乙素的测定 三、血浆中川芎嗪碱的测定 四、血浆中阿魏酸的测定 五、甘草附子煎剂的体内分析 第九章 中药制剂质量标准的制定 第一节 制定中药制剂质量标准的目的、意义和原则 1984 年 9 月 20 日，我国颁布了《中华人民共和国药品管理法》 并于 1985 年 7 月 1 日实施, 这就从法律上确认了对药品质量监督管理 的权力. 世界卫生组织为了保证药品质量 ,提出了 “药品生产和质量控 制规范 ”.(Good practice in the manufacture and quality control of drugs) 简称“GMP” 正式作为世界各国药品质量的共同规范. 药品标准是国家对药品质量及其检验方法所作的技术规定 ,是药 品生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的法定依据。凡 正式批准生产的药品（包括中药饮片及制剂） ，辅料和基质都要制定 质量标准。 1985 年国家卫生部公布了《新药审批办法》规定了研制新药必 须按照规定 ,报送工艺研究、质量标准、药效学、毒理学等有关研究 资料，经批准后方可进入临床试验。明确要求制定临床研究用及生产 用质量标准。 新药的质量标准是控制新药的基本手段。它不仅要体现 “安全有 效，技术先进，经济合理 ”的原则，而且在通过审批转正后还具有国 家标准的法定地位，对指导磨擦药生产、 销售和使用， 保证用药安全、 有效及作为药品监督管理的技术依据， 促进对外贸易和对老药再评价 等方面均具有非常重要的意义。 第二节 我国现有的药品质量标准 （一）法定标准 1 药典（ Pharmacopoeia) (1)中华人民共和国药典 （2 ）其他国家药典 英国药典于 1864 年出第一版，最新为 1993 年版；美国药典于 1820 年出第一版， 1990 年出第 22 修订版， 1995 年出第 23 版；日本 药典（日本药局方）于 1886 年出第一版，最新版为 1992 年的第 12 版。 国际药典（The International Pharmacopoeia) 是世界卫生组织编制 的药典，供成员国制订药品标准进参考或采用。采用国在有关法规上 明文规定后，才肯有法定效力。 现行第三版分若干卷陆续出版。第一至四卷的出版时间分别为 1979、 1981、 1988 和 1994 年，第五卷正在编制。由于各卷出版时间 间隔较长，其凡例、通则和分析通法 均随技术进步而不断修改。 第三卷修订版增订了 HPLC 方法，并建议了仪器的操作通法。第 四卷暗补了原子发射和吸收光谱法以及各制剂 通则项下相应的检查 或测定法。 关于植物药，WHO 也通过一些文件。 2、卫生部药品标准（部颁标准） 该标准亦系药典委员会编纂出 版， 由卫生部颁布执行， 属于卫生部药品标准， 相当于国外的副药典。 其收载的品种有三部分： 第一部分，为疗效较好，在国内广泛应用，准备过渡到药典的品 种。 第二部分，为一些虽不准备上升到一版药典的品种，但因国内有 许多处生产，必须制定统一的质量标准以便共同遵守执行。 第三部分 ，为少数由上一版药典降格成为部颁标准品种。 目前已有 1400 种中成药已分别收载于部颁标准中。新药被批准 后其生产用质量标准再经过二年试行期即直接转为部颁标准。 （二）地方标准 （三）企业标准 一般有两种情况，一种为检验方法尚不成熟，但能达支某种程度 的质量控制；一种为高于法定标准要求，主要指多增加了检测项目或 提高限度标准，仅在企业内部执行。 第三节 制定中药制剂质量标准的主要内容 中药制剂的质量标准必须在处方（药味、用量）固定、原料质量 稳定、 制备工艺稳定的前提下， 方可制订。 质量标准的内容一般包括： 名称、汉语拼音、处方、制法、性状、鉴别、检查、浸出物、含量测 定、功能与主治、用法与用量、禁忌、注意、规格、贮藏方法、使用 期限等项目，依次予以说明 。 一、名称 汉语拼音、拉丁名，铵新药审批方法《补充规定》附件中《命名 的技术要求》和卫生部下发的《中药命名原则》制定。 二、处方 （1 ） 凡中国药典、 部标准收载的药材， 一律采用最新版规定的名称。 地方药品标准收载的品种与国家药品 标准名称不同而来源相同的， 应 采用国家药品标准的名称。 地方药品标准收载的品种与国家药品标准 名称相同而来源不同的，应另起名称 ；国家药品标准收载的药材，可 采用地方药品标准收载的名称，并注明出处。 （2 ）处方中药味的基源，均应符合质量标准各项的规定。药味的排 列次序，应根据中医药理论，按“ 君臣佐使” 顺序排列或按药品作用主 次排列。 （3 ）处方中凡需炮制的药材，均需用括号注 明，与药典方法不同的， 应另加注明。 （4 ）处方中药味的用量一律用法定计量单位，重量以 “g”、容量以 “ml”表示。处方的总量一般在 500～1500g 范围内。片剂、液体制剂 等总出药量一般以 1000 片、 1000ml 计算。实际应用时，可按比例增 减折算。 （ 5）处方中药味仅为药典附录中收 载者，应补充制定标准；如为 省级炮制规范中收载者，应按省级药 品标准要求补充相应资料。 三、制法 （ 1）在质量标准的制法项下可根据 制备工艺写出简明的工艺全过 程，对质量有影响的关键工艺应列出控制的技术条件。 （ 2）在起草说明中说明该制备工 艺全过程的每一步骤的意义， 解释关键工艺的各项技术要求的含义 及关键关成品的质量标准。 列出 在工艺研究中各种技术条件及方法的对比数据 及确定最终制备工艺 及其技术条件的理由。 四、性状 一种制剂的性状往往与投料的原料质量及工艺品有关。 原料质量 保证，工艺恒定则成品的性状应该是基本一致的，故质量标准中规定 制剂的性状，能初步反映其质量状况。 制剂的性状指成品的颜色、形态、形状、气味等。片剂、丸剂有 包衣的还应描述除支包衣后的片芯。丸芯的颜色及气味，硬胶囊剂应 写明除去胶囊后内容物的性状、制剂色泽如以二种色调组合的，描写 时以后者为主，如棕红色，以红色为 主，书写时颜色、形态后用分号 （；） 小量研制品与中试或大量生产的 成品，其色泽等可能不完全一 致，故制订制剂质量标准应根据中试或大量生产的产品为依据，并至 少观察３～５批样品，有的中药制剂在贮藏期间颜色会变深，因此可 根据实际观察情况规定幅度。 （一）丸剂 （二）散剂 （三）片剂 （四）颗粒剂（冲剂） （五）锭剂 （六）煎膏剂（膏滋） （七）糖浆剂 （八）合剂（口服液） （九）滴丸剂 （十）胶囊剂 （十一）酒剂 （十二）酊剂 （十三）流浸膏及浸膏剂 １ 流浸膏 ２ 浸膏 （十四）膏药 （十五）橡皮膏剂 五、鉴别 指中药制剂的定性鉴别，以确认成品的真实性，一般包括显微鉴别、理化鉴别和色谱 鉴别。采用哪种方法进行鉴别多根据处方组成、剂型及原料情况而定。在鉴定复方中药制剂 时，处方药味从两三味到几十味不等，一般不要求逐个进行鉴别，在鉴别药物的选择上，应 依处方原则首选君药和臣药和臣药进行；贵重药虽量小，但有时起重要作用，加强质量监督 也是很必要的；含剧毒药物也需要鉴别；更需规定含量或限度。选择鉴别药味也应结合药物 本身的基础研究工作情况，如其成分不清楚，或通过试验摸索干扰成分难以排除，则也可选 择其他药味，但应在起草说明中写明理由。 六、检查 主要指控制药材或制剂中可能引入的杂质或与药品质量有关的 项目。检查项目按照药典附录各有关通则（如丸剂、散剂、片剂）项 下规定的检查项目进行检查，并列出具体的数据和结果。检查项目可 分为三类： （一）质量参数类型 与质量直接有关的特殊杂质项目 （二）剂型所要求类型 制剂的不同剂型有不同的质量要求，如固体制剂要求测水分；酊 剂、酒剂要求测含醇量，总固体、相对密度、 Ph 值等；片剂、胶囊 要求测重量差异、崩解度，近代已发 展要求测均匀度、溶出度，这是 重量差异与崩解度的延伸。 药典附录根据有关剂型分别要求检查不同 项目。 注射剂要求比较严格，在研制过程中对澄明度、 pH 值、蛋白质、 鞣质、重金属、砷盐、草酸盐、钾盐子、树脂、炽灼残渣、热原、无 菌等项均应做检查，有些如呈阴性或 限度极低，在标量测定项下，以 此量为基础，计算所含有关成分的量。 （三）污染的控制类型 １、异物污染 ２、昆虫及微生物污染 ３、化学污染 可能来自土壤、化肥、化学除草剂、农药、药材 熏蒸、杀虫剂、水源等所致。药材污染有害金属汞、铝、镉、铬等国 内也有报道。有时因水质欠佳，洗涤药材后污染了铬、钾。又如使用 含砷量高的硫黄作熏蒸剂，使贝母、金银花等含砷量高。 如新加坡和马来西亚二国及中国香港 地区对砷、汞等元素限度规定 为： 砷 铜 铅 汞（ ppm) 新加破 ５ １５０ ２０ 0.5 马来西亚 ６ ２０ １０ 0.5 香港地区 １０ ５０ 新药的研制均应砷与重金属检查， 检出量极低的在正文中可不做 规定。 中药制剂亦可制订浸出物量以控制质量。 必须具有针对性的控制 质量的意义。 对含糖类等辅料比较多的中药制剂，如选择水、乙醇、甲醇为浸 出溶剂则建立浸出物测定意义不大，因难以反映内在质量，故选溶剂 时，还要考虑中药制剂中辅料对测定结果的影响。如处方中含挥发性 成分，可以用乙醚等溶剂，测定挥发性浸出物，例如中国药典 1990 年测定正丁醇浸出物。 七、含量测定 （一）含量测定选定原则 １、项目与药味的选定 ２、测定成分的选定 （二）含量测定方法 含量测定方法很多，常用的如经典分析方法（容量法、重量法） 。 比色法、分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法、薄层色谱法， 以及生物测定法等等。 （三）方法学考察 １、提取条件的选定 ２、分离纯化 ３、测定条件的选择 ４、空白试验 ５、样品浓度与响应值如吸收度、色谱峰面积（或峰高）之间的 线性关系考察 紫外分光光度法或比色法须制备标准曲线， 用以确定 取样量并计算含量。色谱法一般均采用对照品比较法、外标法或内标 法测定，但也必须进行线性考察。