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第九章 水果作物的
组织培养
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目的要求,
（ 1） 掌握草莓微茎尖培养的大
致过程，了解鉴定草莓无毒病苗
的方法；
（ 2） 掌握葡萄的组织培养过程。
（ 3）掌握无花果的组织培养
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第一节 草莓的组织培养
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一、形态特性和生物学特性
草莓为重要的浆果植物，栽培分布很广，
其总产量在浆果类中仅次于葡萄，居世
界第二位。草莓果实柔软多汁，含丰富
的糖、酸、矿物质，维生素等。草莓可
鲜食，也可加工成果酱，果酒等。其颜
色鲜艳，是良好的配餐食品。
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草莓繁殖容易，结果早，收效快。尤
其是近年的促成栽培，利用塑料大棚、
日光温室，使草莓的成熟期大大缩短，
从 11月份到次年的 6月份，都有新鲜
的草莓上市，填补了水果的淡季市场。
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1,形态特性
草莓属多年生草本植物，植株矮小，
呈半平卧丛状生长，须根系，在土
壤中分布较浅。草莓的茎呈短缩状，
分地上和地下部分，地上短缩茎节
间极短，节密集，其上密集轮生叶
片，叶腋部位着生腋芽。
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地下短缩茎为多年生，是贮藏营养物质
的器官，也可发育成不定根。匍匐茎是
草莓的特殊地上茎，是其营养繁殖器官，
茎细，节间长，一般座果后期发生。叶
属于基生三出复叶，呈螺旋状排列，在
当年生新茎上总叶柄部与新茎连接部分，
有两片托叶顶端膨大，圆锥形且肉质化。
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离生雄蕊 20~35枚。雌蕊离生，呈
螺旋状排列在花托上，数目从
60~600不等。花序为二歧聚伞花序
至多歧聚伞花序。果实为假果，主
要是花托膨大肉质化形成，瘦果以
聚合果形成生于花托上。果实成熟
时果肉红色，粉红色或白色。
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2,生物学习性
草莓根系在土壤温度达到 2℃ 时开始活动，
在 10℃ 时开始形成新根，根系生长的最适
温度为 15~20℃,秋季温度降低到 7~8℃
时生长减弱。春季气温达 5℃ 时植株开始
萌芽，茎叶开始生长。草莓的根系分布较
浅，加上植株矮小，叶片较大，因此蒸发
量大。在整个生长季节，叶片几乎都在不
断地进行老叶死亡、新叶发生的过程，叶
片更新频繁。
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草莓是喜光植物但又比较耐阴。
光照充足，植物生长旺盛，叶片颜
色深，花芽发育好，能获得较高的
产量。相反光照不良，植株生长势
弱，叶柄及花序柄细。叶片色浅，
花朵小，果实小，着色不良。
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这些特点，决定了草莓对水分要求较高，但在
不同的生长发育时期，对水分的要求不同。开
花期土壤的含水量应不低于最大田间持水量的
70%。果实膨大及成熟期土壤含水量应不低
于 80%，而秋季 9,10月份，土壤持水量达
60%即可，草莓不耐涝，要求土壤既有充足
的水分供应，又要有良好的通气条件。草莓对
土壤适应性强，在各种土壤上都能生长。但由
于是浅根性作物，要求肥沃、疏松、透水、通
气的中性微酸性或微碱性土壤。
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二、草莓脱毒苗的培养
1.热处理脱毒
将草莓植株在 40~41℃ 温度下
处理 4~6周，然后取微茎尖培
养。
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2,微茎尖脱毒
(1) 初代培养,下午取草莓匍匐茎上的
顶芽，用自来水流水冲洗 2~4h，然后剥
去外层叶片，在无菌条件下，用 0.5%次
氯酸钠溶液表面消毒 5min，并不停地搅
动促进药液的渗透。在无菌条件和解剖
显微镜下剥取茎尖分生组织，以带有一
个叶原基的茎尖为度。 0.2mm的茎尖无
病毒率可达到 100%，但接种后的成活
率下降，并延长培养时间。
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茎尖分离后，迅速接入
MS+BA0.25+NAA0.25或
MS+BA0.5+NAA0.2培养基中。培养条
件为 22~25℃,光照 16~18h,3000lx。
经 2~3个月的培养，可生长分化出芽丛。
注意在低温和短日照下，茎尖有可能进
入休眠，所以较高的温度和充足的光照
时间必须保证。
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(2) 继代培养 把芽丛割成芽丛小块，
转入 MS+BA0.5+NAA0.01 培养基中,
待苗长大到 1~2cm时，可将芽丛小
块分成单株，再转入前述的分化培
养基中，又会重复上述过程，达到
扩大繁殖的目的。
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(3) 生根培养 1/2MS+IBA0.1生根。
(4) 驯化,用镊子把草莓苗从试管瓶中
取出，洗掉根系附带琼脂培养基。事先
备好 8× 8cm或 6× 6cm的塑料营养钵，
内装等量的腐殖土和河砂。栽前压实，
浇透水，用竹签在钵中央打一小孔，将
试管苗插入其中，压实苗基部周围基质，
栽后轻浇薄水，以利幼苗基部和基质密
合。 要, 深栽浅埋,,即根要深栽、根
茎略高于地面。
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栽后的试管苗要培养在湿度较大的空间
内，一般加设小拱棚保湿，并经常浇水，
以增加棚内湿度，以见到塑料薄膜内表
面分布均匀的小水珠为宜。约过 7~10d
后。当检查有一定的根系生出，可逐渐
降低湿度和土壤含水量，进入正常幼苗
的生长发育管理阶段。
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3．花药培养
花药培养操作简单，因经愈伤组
织途径，再分化得到的即为无病
毒苗，所以可免去病毒鉴定工作。
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（ 1） 取材与培养
取花粉发育单核期的花蕾，臵于洁净培
养皿中，内放一层滤纸，滴蒸馏水数滴
保湿。将处理放入 3~4℃ 冰箱中低温保
存 3~4d。经预处理的花蕾先在 70%酒精
中浸泡半分钟，取出放入新配制的饱和
漂白粉上清液中消毒 10min，用无菌水冲
洗 3次。然后在超净工作台上剥取花药，
立即接种。花粉发育时期可采用醋酸洋
红压片鉴定。
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培养基为 MS+2,4-D0.4+IAA2。
去分化阶段培养条件为 24~26℃,
10h/d,1500lx,20d后可产生乳白色的愈
伤组织。
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（ 2） 植株分化
将诱导出的花药愈伤组织转移到 1/2MS基
本培养基，添加 GA0.5,BA0.5和三十烷
醇 4。愈伤组织经培养后很快转绿，以后
微带淡紫红色,15d后在表面分化出半球
形小突起，转为绿色。 20d后分化出幼叶、
幼茎，并有不少突起物，以后陆续分化
出新梢。
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四、草莓无病毒苗的鉴定
草莓花药培养得到的为无病毒苗，
而用生长点培养得到的植株，则必
须经过病毒鉴定，确定其不带病毒，
才可以大量繁殖，用于生产。
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1,草莓病毒的种类
草莓病毒主要有四种，为 斑驳病毒，
皱叶病毒，脉结病毒和轻型黄边病
毒。
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2,草莓病毒的鉴定方法
因草莓的病毒通过汁液接种不感染，
所以通常采用 小叶嫁接法 来进行鉴定。
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首先从被鉴定的草莓采集长成不久的新叶，除
去两边的小叶，中央的小叶带 1~1.5cm的叶柄，
把它削成楔形作接穗。而指示植物则除去中间
的小叶，在叶柄的中央用刀切入 1~1.5cm，再
插入接穗，用线把接合部位包扎好。为了防止
干燥，在接合部位涂上少量的凡士林。为保证
成活，在 2周内，可罩上塑料袋，臵于半见光
的场所。约经 2周时间，撤去塑料袋。若带有
病毒，嫁接后 1~2个月，在新展开的叶、匍匐
茎或老叶上会出现病症。
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指
示
植
物
待
鉴
定
植
物
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嫁接后的植物
指
示
植
物
接
穗
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五、草莓无病毒苗的繁殖和利用
1,防止蚜虫的危害
草莓无病毒苗的繁殖重要的是要防止无病毒苗的再
度污染。由于草莓病毒主要是蚜虫传播的，所以要
搞好防蚜虫工作。草莓病毒通过蚜虫吸吮汁液而得
到传播，短时间即可完成。防治时可使用马拉松乳
剂，氧化乐果乳剂等接触杀虫剂，防治期 5~6月，
9~10月，特别是 9~10月一次，可防止蚜虫的越冬。
为保证种苗的无病毒，在原种种苗生产阶段，应在
隔离网室中进行。传播草莓病毒的蚜虫较小，可以
通过大于 1mm网眼，故应采用 0.4~0.5mm大小的规
格，其中以 300号防虫网为好。
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2．繁殖程序及提高繁殖率的措施
草莓无病毒苗的繁殖程序可分五步，包括：脱
病毒鉴定生产出无毒苗、原种种苗培养、原种
种苗繁殖、良种种苗繁殖，生产用苗繁殖和栽
培苗繁殖，前四步在隔离室中进行，后一步在
露地进行。为提高无病毒母株的繁殖株数可采
用赤霉素处理和摘蕾的方法。在 5月上旬和 6
月上旬分两次进行。摘蕾可减轻母株的营养负
担，促进匍匐茎的大量发生，田间地每一株可
繁殖 150~200株。
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第二节 葡萄的组织培养
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组
培
苗
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一、形态特征和生物学习性
葡萄在全世界的果品生产中，产量及栽
培面积一直居于首位。其果实除作为鲜
果食用外，主要用于酿酒，还可制成葡
萄汁、葡萄干和罐头等加工品。葡萄不
仅味美可口，而且营养价值较高。成熟
的浆果中含有 15%~25%的葡萄糖和果
糖以及多种对人体有益的矿物质和维生
素。
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(1) 形态特性。葡萄属落叶木质藤本植物，
葡萄地上部分的茎细长柔弱，髓部较大，
组织较疏松。节上具有卷须，使新梢可
以缠绕其他树木或支架上向上攀援。叶
近圆型或卵型,3~5裂，基部心形。圆
锥花序。
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(2) 生物学习性：葡萄是深根性作物，大多数情况下，
根系垂直分布最密集的范围，是在 20~80cm的深度
内，但在不同的栽培管理条件下，根系的分布也将
随着发生变化。葡萄的根富含肉质，髓射线发达，
能贮藏大量的有机营养物质，如糖、蛋白质和单宁
等。葡萄的枝蔓上很容易产生不定根，故在生产上
多采用扦插法繁殖。在大气潮湿的情况下，枝蔓上
往往长出气生根。葡萄原产于温带地区，不太抗寒。
葡萄的根系抗寒力很弱，大部分欧洲种葡萄的根系
在－ 5~－ 7℃ 时即受冻，某些美洲种能忍受－ 11~－
12℃ 左右的低温。
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二、葡萄的组织培养
1.选材接种 从田间生长旺盛的葡萄新梢
顶端取 1~2㎝ 的茎尖。除去幼叶后在 5%
次氯酸钠溶液中浸泡 2~3min，消毒灭菌，
以后用无菌水冲洗 3次，再在 0.1%升汞
溶液中浸泡约 2min，以后用无菌水冲洗
4次。在无菌条件下分离出约 2㎜ 长的茎
尖，接种到培养基上。
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2.培养基 葡萄茎尖分化培养基以 MS
培养基（无机盐减半为好），再添
加 BA1~2,NAA0.01,LH100，蔗
糖 2%，琼脂 0.6%。
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3.茎尖的分化 葡萄 1~2㎜ 茎尖接种后成活率
较高，接种成活的茎尖 1个月左右开始分化幼
叶和侧芽,2个月左右，由于侧芽的不断增生，
形成芽丛。由于不同品种对 BA和 NAA的反应
不同，故生长有明显区别，巨峰、大粒白香
蕉、赤霞珠等品种，由于顶端优势强，侧芽
生长势弱，故增殖率低，但成苗率高；白羽、
贵人香等大多数品种侧芽分生能力强，可在
幼茎上多次分枝，故成苗率低。
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4.茎尖苗的生长 在茎尖分化培养中产生
的成苗率低和成苗困难，密集生长的芽丛，
可将分化培养基中的 BA浓度减低至 0.5，
同时添加 GA30.2，则经 1个月的培养，就
可长成 2~3㎝ 高的幼茎。此外黑暗处理对
幼茎的伸成，提高成苗率，也有明显的效
果。
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5、生根与移栽 切取 2~3cm的茎尖苗，
接种到 MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中，
进行生根培养,1~~2周后幼苗开始生
根,1个月形成完整的根系，同时具备
5~6片新叶。移栽时洗去根上的培养基，
栽到蛭石基质内，使根系具有良好的通
气条件，盖上塑料薄膜，经 7~10d锻炼
适应后可去掉，移栽成活率在 90%左右。
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提高葡萄试管苗移栽成活率要注意：
1、幼苗生长要健壮； 2、要保持空
气湿度； 3、根际通气良好； 4、要
尽量减少杂菌污染； 5、浇灌的溶液
浓度不能过高。
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三、葡萄无病毒苗的培养
葡萄受到 26种病毒的危害。由于病毒的危害，葡萄
的长势减弱，产量降低，果实的糖分含量减少，风
味变劣。葡萄卷叶病是危害最大的病毒病，在不同
品种上表现不同，但多数叶片变红，自基部起向内
卷，似革质增厚，粗糙易脆；有的叶脉绿色，叶肉
黄色；有的品种则表现矮化。此病可减产 10~50%，
造成果实糖分含量降低，成熟期推迟 2周，紫葡萄
果色变绿。现在已广泛用茎尖组织培养和热处理结
合的方法来培育葡萄无病毒苗。茎尖脱毒的方法也
兼有短期大量繁殖的作用，所以应用上具有很大的
意义。
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1、热处理理脱毒
2、组织培养脱毒技术
从被病毒感染的植株上取材，在 5℃ 下冷藏保
存。以后在 25℃,相对湿度 80%,16h的长
日照条件下水培。再从长出新芽经消毒后切
取茎尖进行培养，大小约 0.2~0.3mm（带一
个叶原基）。实验结果以 1/2MS，添加
NAA0.1,BA1.0,Kt0.5，腺嘌呤 4.0，蔗糖
30g/L，琼脂 6.0,pH5.8为好。
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无病毒苗的大量繁殖
处于小叶展开期的材料，茎叶常集中
在一起，成为丛状，可以一个个进行
分离，再接种到 1/2MS培养基上，添
加 IAA0.2,BA1,KT0.6，腺嘌呤 4.0，
蔗糖 15g/L的培养基,即可使小叶展
开、伸长，得到植株。这样反复继代
培养，可繁殖得到大量的无病毒苗。
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第三节 无花果的组织培养
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新疆无花果
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一,特性和生物学习性
1、形态特征
无花果为桑科、无花果属的落小乔木，
是一种亚热带果树，叶掌状 3~5裂，大
而粗糙，背面被柔毛。花单性，隐于囊
状总花花托内，果实由总花托和其他花
器官组成，呈扁圆状或卵形，成熟后顶
端开裂，肉质柔软，味甜。具有观赏和
药用兼备的价值。
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2、生物学特性
用无性繁殖法繁殖的无花果，通常于栽
植后 2~3年开始结果。 6~7年进入盛果
期。以后树冠不断扩大，产量逐渐增长，
经济年限可延续 40~70年，甚至 100年。
无花果的生长势很强。幼树的新梢或徒
长枝年生长量可达到 2m以上。无花果不
耐寒，冬季温度达 -12℃ 时新梢顶端就开
始受冻死亡。无花果能耐较高的温度而
不致受害
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二．无花果的茎段培养
由于无花果扦插繁殖成活率低，用带腋芽的茎
段培养成完整植株，可以为大量繁殖提供途径。
无花果繁殖的方法是将采来的健壮的嫩茎削去
大叶片，留下带腋芽的茎段，切成 3~4cm长
的小段，用流水冲洗 3h,以清除表面污染物。
然后放入 75%酒精中，再用 0.1%氯化汞消毒
7~10分钟，最后用无菌水冲洗 4~5次，在无
菌条件下将茎段横切成长约 1 cm，按原生长方
向接种到 MS+BA0.5~1.0长芽培养基中。
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8天后外植体接触培养基的一端切口周围长出
嫩绿色、质地紧密的愈伤组织，同时腋芽展开，
愈伤组织和腋芽的诱导率均为 100%。丛生芽
增殖培养基 MS+BA1~2+NAA0.1-0.2中。腋芽
萌生成绿色簇生状，每个腋芽上可生出 15~28
个芽丛，逐渐长成苗丛。当一部分芽长高至
2~3cm时，切取单苗转移到生根培养基上
MS+NAA0.2上,11天左右开始生根。 20d左右
长成具有根系的完整植株，这时可取出移栽，
成活率达 98%。
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培养温度 23~31℃, 12~14h/d，光
照强度为 1700~2400LX左右。若要
继代培养，只需将小苗剪下，用茎
尖或带腋芽的茎段接种到丛生芽增
殖培养基上，即可得到以上的结果。
第九章 水果作物的
组织培养
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目的要求,
（ 1） 掌握草莓微茎尖培养的大
致过程，了解鉴定草莓无毒病苗
的方法；
（ 2） 掌握葡萄的组织培养过程。
（ 3）掌握无花果的组织培养
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第一节 草莓的组织培养
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一、形态特性和生物学特性
草莓为重要的浆果植物，栽培分布很广，
其总产量在浆果类中仅次于葡萄，居世
界第二位。草莓果实柔软多汁，含丰富
的糖、酸、矿物质，维生素等。草莓可
鲜食，也可加工成果酱，果酒等。其颜
色鲜艳，是良好的配餐食品。
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草莓繁殖容易，结果早，收效快。尤
其是近年的促成栽培，利用塑料大棚、
日光温室，使草莓的成熟期大大缩短，
从 11月份到次年的 6月份，都有新鲜
的草莓上市，填补了水果的淡季市场。
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1,形态特性
草莓属多年生草本植物，植株矮小，
呈半平卧丛状生长，须根系，在土
壤中分布较浅。草莓的茎呈短缩状，
分地上和地下部分，地上短缩茎节
间极短，节密集，其上密集轮生叶
片，叶腋部位着生腋芽。
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地下短缩茎为多年生，是贮藏营养物质
的器官，也可发育成不定根。匍匐茎是
草莓的特殊地上茎，是其营养繁殖器官，
茎细，节间长，一般座果后期发生。叶
属于基生三出复叶，呈螺旋状排列，在
当年生新茎上总叶柄部与新茎连接部分，
有两片托叶顶端膨大，圆锥形且肉质化。
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离生雄蕊 20~35枚。雌蕊离生，呈
螺旋状排列在花托上，数目从
60~600不等。花序为二歧聚伞花序
至多歧聚伞花序。果实为假果，主
要是花托膨大肉质化形成，瘦果以
聚合果形成生于花托上。果实成熟
时果肉红色，粉红色或白色。
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2,生物学习性
草莓根系在土壤温度达到 2℃ 时开始活动，
在 10℃ 时开始形成新根，根系生长的最适
温度为 15~20℃,秋季温度降低到 7~8℃
时生长减弱。春季气温达 5℃ 时植株开始
萌芽，茎叶开始生长。草莓的根系分布较
浅，加上植株矮小，叶片较大，因此蒸发
量大。在整个生长季节，叶片几乎都在不
断地进行老叶死亡、新叶发生的过程，叶
片更新频繁。
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草莓是喜光植物但又比较耐阴。
光照充足，植物生长旺盛，叶片颜
色深，花芽发育好，能获得较高的
产量。相反光照不良，植株生长势
弱，叶柄及花序柄细。叶片色浅，
花朵小，果实小，着色不良。
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这些特点，决定了草莓对水分要求较高，但在
不同的生长发育时期，对水分的要求不同。开
花期土壤的含水量应不低于最大田间持水量的
70%。果实膨大及成熟期土壤含水量应不低
于 80%，而秋季 9,10月份，土壤持水量达
60%即可，草莓不耐涝，要求土壤既有充足
的水分供应，又要有良好的通气条件。草莓对
土壤适应性强，在各种土壤上都能生长。但由
于是浅根性作物，要求肥沃、疏松、透水、通
气的中性微酸性或微碱性土壤。
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二、草莓脱毒苗的培养
1.热处理脱毒
将草莓植株在 40~41℃ 温度下
处理 4~6周，然后取微茎尖培
养。
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2,微茎尖脱毒
(1) 初代培养,下午取草莓匍匐茎上的
顶芽，用自来水流水冲洗 2~4h，然后剥
去外层叶片，在无菌条件下，用 0.5%次
氯酸钠溶液表面消毒 5min，并不停地搅
动促进药液的渗透。在无菌条件和解剖
显微镜下剥取茎尖分生组织，以带有一
个叶原基的茎尖为度。 0.2mm的茎尖无
病毒率可达到 100%，但接种后的成活
率下降，并延长培养时间。
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茎尖分离后，迅速接入
MS+BA0.25+NAA0.25或
MS+BA0.5+NAA0.2培养基中。培养条
件为 22~25℃,光照 16~18h,3000lx。
经 2~3个月的培养，可生长分化出芽丛。
注意在低温和短日照下，茎尖有可能进
入休眠，所以较高的温度和充足的光照
时间必须保证。
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(2) 继代培养 把芽丛割成芽丛小块，
转入 MS+BA0.5+NAA0.01 培养基中,
待苗长大到 1~2cm时，可将芽丛小
块分成单株，再转入前述的分化培
养基中，又会重复上述过程，达到
扩大繁殖的目的。
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(3) 生根培养 1/2MS+IBA0.1生根。
(4) 驯化,用镊子把草莓苗从试管瓶中
取出，洗掉根系附带琼脂培养基。事先
备好 8× 8cm或 6× 6cm的塑料营养钵，
内装等量的腐殖土和河砂。栽前压实，
浇透水，用竹签在钵中央打一小孔，将
试管苗插入其中，压实苗基部周围基质，
栽后轻浇薄水，以利幼苗基部和基质密
合。 要, 深栽浅埋,,即根要深栽、根
茎略高于地面。
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栽后的试管苗要培养在湿度较大的空间
内，一般加设小拱棚保湿，并经常浇水，
以增加棚内湿度，以见到塑料薄膜内表
面分布均匀的小水珠为宜。约过 7~10d
后。当检查有一定的根系生出，可逐渐
降低湿度和土壤含水量，进入正常幼苗
的生长发育管理阶段。
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3．花药培养
花药培养操作简单，因经愈伤组
织途径，再分化得到的即为无病
毒苗，所以可免去病毒鉴定工作。
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（ 1） 取材与培养
取花粉发育单核期的花蕾，臵于洁净培
养皿中，内放一层滤纸，滴蒸馏水数滴
保湿。将处理放入 3~4℃ 冰箱中低温保
存 3~4d。经预处理的花蕾先在 70%酒精
中浸泡半分钟，取出放入新配制的饱和
漂白粉上清液中消毒 10min，用无菌水冲
洗 3次。然后在超净工作台上剥取花药，
立即接种。花粉发育时期可采用醋酸洋
红压片鉴定。
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培养基为 MS+2,4-D0.4+IAA2。
去分化阶段培养条件为 24~26℃,
10h/d,1500lx,20d后可产生乳白色的愈
伤组织。
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（ 2） 植株分化
将诱导出的花药愈伤组织转移到 1/2MS基
本培养基，添加 GA0.5,BA0.5和三十烷
醇 4。愈伤组织经培养后很快转绿，以后
微带淡紫红色,15d后在表面分化出半球
形小突起，转为绿色。 20d后分化出幼叶、
幼茎，并有不少突起物，以后陆续分化
出新梢。
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四、草莓无病毒苗的鉴定
草莓花药培养得到的为无病毒苗，
而用生长点培养得到的植株，则必
须经过病毒鉴定，确定其不带病毒，
才可以大量繁殖，用于生产。
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1,草莓病毒的种类
草莓病毒主要有四种，为 斑驳病毒，
皱叶病毒，脉结病毒和轻型黄边病
毒。
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2,草莓病毒的鉴定方法
因草莓的病毒通过汁液接种不感染，
所以通常采用 小叶嫁接法 来进行鉴定。
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首先从被鉴定的草莓采集长成不久的新叶，除
去两边的小叶，中央的小叶带 1~1.5cm的叶柄，
把它削成楔形作接穗。而指示植物则除去中间
的小叶，在叶柄的中央用刀切入 1~1.5cm，再
插入接穗，用线把接合部位包扎好。为了防止
干燥，在接合部位涂上少量的凡士林。为保证
成活，在 2周内，可罩上塑料袋，臵于半见光
的场所。约经 2周时间，撤去塑料袋。若带有
病毒，嫁接后 1~2个月，在新展开的叶、匍匐
茎或老叶上会出现病症。
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指
示
植
物
待
鉴
定
植
物
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嫁接后的植物
指
示
植
物
接
穗
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五、草莓无病毒苗的繁殖和利用
1,防止蚜虫的危害
草莓无病毒苗的繁殖重要的是要防止无病毒苗的再
度污染。由于草莓病毒主要是蚜虫传播的，所以要
搞好防蚜虫工作。草莓病毒通过蚜虫吸吮汁液而得
到传播，短时间即可完成。防治时可使用马拉松乳
剂，氧化乐果乳剂等接触杀虫剂，防治期 5~6月，
9~10月，特别是 9~10月一次，可防止蚜虫的越冬。
为保证种苗的无病毒，在原种种苗生产阶段，应在
隔离网室中进行。传播草莓病毒的蚜虫较小，可以
通过大于 1mm网眼，故应采用 0.4~0.5mm大小的规
格，其中以 300号防虫网为好。
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2．繁殖程序及提高繁殖率的措施
草莓无病毒苗的繁殖程序可分五步，包括：脱
病毒鉴定生产出无毒苗、原种种苗培养、原种
种苗繁殖、良种种苗繁殖，生产用苗繁殖和栽
培苗繁殖，前四步在隔离室中进行，后一步在
露地进行。为提高无病毒母株的繁殖株数可采
用赤霉素处理和摘蕾的方法。在 5月上旬和 6
月上旬分两次进行。摘蕾可减轻母株的营养负
担，促进匍匐茎的大量发生，田间地每一株可
繁殖 150~200株。
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第二节 葡萄的组织培养
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组
培
苗
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一、形态特征和生物学习性
葡萄在全世界的果品生产中，产量及栽
培面积一直居于首位。其果实除作为鲜
果食用外，主要用于酿酒，还可制成葡
萄汁、葡萄干和罐头等加工品。葡萄不
仅味美可口，而且营养价值较高。成熟
的浆果中含有 15%~25%的葡萄糖和果
糖以及多种对人体有益的矿物质和维生
素。
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(1) 形态特性。葡萄属落叶木质藤本植物，
葡萄地上部分的茎细长柔弱，髓部较大，
组织较疏松。节上具有卷须，使新梢可
以缠绕其他树木或支架上向上攀援。叶
近圆型或卵型,3~5裂，基部心形。圆
锥花序。
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(2) 生物学习性：葡萄是深根性作物，大多数情况下，
根系垂直分布最密集的范围，是在 20~80cm的深度
内，但在不同的栽培管理条件下，根系的分布也将
随着发生变化。葡萄的根富含肉质，髓射线发达，
能贮藏大量的有机营养物质，如糖、蛋白质和单宁
等。葡萄的枝蔓上很容易产生不定根，故在生产上
多采用扦插法繁殖。在大气潮湿的情况下，枝蔓上
往往长出气生根。葡萄原产于温带地区，不太抗寒。
葡萄的根系抗寒力很弱，大部分欧洲种葡萄的根系
在－ 5~－ 7℃ 时即受冻，某些美洲种能忍受－ 11~－
12℃ 左右的低温。
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二、葡萄的组织培养
1.选材接种 从田间生长旺盛的葡萄新梢
顶端取 1~2㎝ 的茎尖。除去幼叶后在 5%
次氯酸钠溶液中浸泡 2~3min，消毒灭菌，
以后用无菌水冲洗 3次，再在 0.1%升汞
溶液中浸泡约 2min，以后用无菌水冲洗
4次。在无菌条件下分离出约 2㎜ 长的茎
尖，接种到培养基上。
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2.培养基 葡萄茎尖分化培养基以 MS
培养基（无机盐减半为好），再添
加 BA1~2,NAA0.01,LH100，蔗
糖 2%，琼脂 0.6%。
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3.茎尖的分化 葡萄 1~2㎜ 茎尖接种后成活率
较高，接种成活的茎尖 1个月左右开始分化幼
叶和侧芽,2个月左右，由于侧芽的不断增生，
形成芽丛。由于不同品种对 BA和 NAA的反应
不同，故生长有明显区别，巨峰、大粒白香
蕉、赤霞珠等品种，由于顶端优势强，侧芽
生长势弱，故增殖率低，但成苗率高；白羽、
贵人香等大多数品种侧芽分生能力强，可在
幼茎上多次分枝，故成苗率低。
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4.茎尖苗的生长 在茎尖分化培养中产生
的成苗率低和成苗困难，密集生长的芽丛，
可将分化培养基中的 BA浓度减低至 0.5，
同时添加 GA30.2，则经 1个月的培养，就
可长成 2~3㎝ 高的幼茎。此外黑暗处理对
幼茎的伸成，提高成苗率，也有明显的效
果。
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5、生根与移栽 切取 2~3cm的茎尖苗，
接种到 MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中，
进行生根培养,1~~2周后幼苗开始生
根,1个月形成完整的根系，同时具备
5~6片新叶。移栽时洗去根上的培养基，
栽到蛭石基质内，使根系具有良好的通
气条件，盖上塑料薄膜，经 7~10d锻炼
适应后可去掉，移栽成活率在 90%左右。
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提高葡萄试管苗移栽成活率要注意：
1、幼苗生长要健壮； 2、要保持空
气湿度； 3、根际通气良好； 4、要
尽量减少杂菌污染； 5、浇灌的溶液
浓度不能过高。
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三、葡萄无病毒苗的培养
葡萄受到 26种病毒的危害。由于病毒的危害，葡萄
的长势减弱，产量降低，果实的糖分含量减少，风
味变劣。葡萄卷叶病是危害最大的病毒病，在不同
品种上表现不同，但多数叶片变红，自基部起向内
卷，似革质增厚，粗糙易脆；有的叶脉绿色，叶肉
黄色；有的品种则表现矮化。此病可减产 10~50%，
造成果实糖分含量降低，成熟期推迟 2周，紫葡萄
果色变绿。现在已广泛用茎尖组织培养和热处理结
合的方法来培育葡萄无病毒苗。茎尖脱毒的方法也
兼有短期大量繁殖的作用，所以应用上具有很大的
意义。
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1、热处理理脱毒
2、组织培养脱毒技术
从被病毒感染的植株上取材，在 5℃ 下冷藏保
存。以后在 25℃,相对湿度 80%,16h的长
日照条件下水培。再从长出新芽经消毒后切
取茎尖进行培养，大小约 0.2~0.3mm（带一
个叶原基）。实验结果以 1/2MS，添加
NAA0.1,BA1.0,Kt0.5，腺嘌呤 4.0，蔗糖
30g/L，琼脂 6.0,pH5.8为好。
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无病毒苗的大量繁殖
处于小叶展开期的材料，茎叶常集中
在一起，成为丛状，可以一个个进行
分离，再接种到 1/2MS培养基上，添
加 IAA0.2,BA1,KT0.6，腺嘌呤 4.0，
蔗糖 15g/L的培养基,即可使小叶展
开、伸长，得到植株。这样反复继代
培养，可繁殖得到大量的无病毒苗。
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第三节 无花果的组织培养
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新疆无花果
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一,特性和生物学习性
1、形态特征
无花果为桑科、无花果属的落小乔木，
是一种亚热带果树，叶掌状 3~5裂，大
而粗糙，背面被柔毛。花单性，隐于囊
状总花花托内，果实由总花托和其他花
器官组成，呈扁圆状或卵形，成熟后顶
端开裂，肉质柔软，味甜。具有观赏和
药用兼备的价值。
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2、生物学特性
用无性繁殖法繁殖的无花果，通常于栽
植后 2~3年开始结果。 6~7年进入盛果
期。以后树冠不断扩大，产量逐渐增长，
经济年限可延续 40~70年，甚至 100年。
无花果的生长势很强。幼树的新梢或徒
长枝年生长量可达到 2m以上。无花果不
耐寒，冬季温度达 -12℃ 时新梢顶端就开
始受冻死亡。无花果能耐较高的温度而
不致受害
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二．无花果的茎段培养
由于无花果扦插繁殖成活率低，用带腋芽的茎
段培养成完整植株，可以为大量繁殖提供途径。
无花果繁殖的方法是将采来的健壮的嫩茎削去
大叶片，留下带腋芽的茎段，切成 3~4cm长
的小段，用流水冲洗 3h,以清除表面污染物。
然后放入 75%酒精中，再用 0.1%氯化汞消毒
7~10分钟，最后用无菌水冲洗 4~5次，在无
菌条件下将茎段横切成长约 1 cm，按原生长方
向接种到 MS+BA0.5~1.0长芽培养基中。
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8天后外植体接触培养基的一端切口周围长出
嫩绿色、质地紧密的愈伤组织，同时腋芽展开，
愈伤组织和腋芽的诱导率均为 100%。丛生芽
增殖培养基 MS+BA1~2+NAA0.1-0.2中。腋芽
萌生成绿色簇生状，每个腋芽上可生出 15~28
个芽丛，逐渐长成苗丛。当一部分芽长高至
2~3cm时，切取单苗转移到生根培养基上
MS+NAA0.2上,11天左右开始生根。 20d左右
长成具有根系的完整植株，这时可取出移栽，
成活率达 98%。
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培养温度 23~31℃, 12~14h/d，光
照强度为 1700~2400LX左右。若要
继代培养，只需将小苗剪下，用茎
尖或带腋芽的茎段接种到丛生芽增
殖培养基上，即可得到以上的结果。
