第十七章 肠杆菌科
岳 华
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肠杆菌科成员广
泛存在于自然界,
多为人和动物的肠
道菌,其中部分有
致病性。共性
是,…………
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第一节 埃希菌属 (Eschrichia)
本属现有 5个种,其中最重要的种是大肠埃
希菌 (E·coli),俗称大肠杆菌,下分血清型。
本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一,
人和动物出生后数小时即可经口进入消化道后
既大量繁殖而定居,终生伴随,并经粪便不断
散播于周围环境。故大肠杆菌在环境卫生和食
品卫生学上,常被用作粪便直接或间接污染的
检测指标。本菌还是分子生物学和基因工程中
重要的实验材料和研究对象。
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形态及染色特性
大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的直杆菌,
大小 0·4 ~ 0.7umx2~ 3um,两端钝圆,散在或
成对,大多数菌株以周生鞭毛运动,但也有无
鞭毛或丢失鞭毛的无动力变异株。一般均有 1
型菌毛,少数菌株兼具性菌毛,多数对人和动
物致病的菌株还常有与毒力相关的特殊菌毛。
除少数菌株外,通常无可见荚膜,但常有微荚
膜。碱性染料对本菌有良好着色性,菌体两端
偶尔略深染。
西南民族大学大肠杆菌工程菌 —— PBI121
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培养及生化特性
本菌为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长
良好,最适生长温度为 37℃,最适生长 pH为
7.2~ 7.4。 S型菌株在肉汤中培养 18~ 24h,呈
均匀浑浊,管底有黏性沉淀,液面管壁有菌环。
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在营养琼脂上生长 24h后,形成圆形凸起、
光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,直径约
2~ 3nm,麦康凯琼脂上形成红色菌落 ;在伊红
美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落 ; 在 SS
琼脂上一般不生长或生长较差,生长者呈红色。
一些致病性菌株在绵羊血平板上呈 B溶血。
本菌能发酵多种碳水化合物产酸产气。 大多
数菌株可迅速发酵乳糖。
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抗原及血清型
大肠杆菌抗原主要有 O,K和 H三种,它们是
本菌血清型鉴定的物质基础。迄今,已确定的
大肠杆菌 O抗原有 173种,K抗原有 80种,H抗原
有 56种。因此,有人认为自然界中可能存在的
大肠杆菌血清型可高达数万种,但致病性大肠
杆菌的血清型数量是有限的。
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O抗原 是 S型菌的一种耐热菌体抗原,121℃ 加
热 2h不破坏其抗原性。它的抗原特异性决定于
LPS的特异多糖侧链的结构。
K抗原 是菌体表面的一种热不稳定抗原,多存在于
被膜或荚膜中,个别位于菌毛中。具有 K抗原的
菌株不会被其相应的抗 O血清凝集,称为 O不凝集
性。
H抗原 是一类不耐热的鞭毛蛋白抗原,加热至 80℃
或经乙醇处理后即可破坏其抗原性。每一有动力
的菌株仅含有一种 H抗原,且无两相变异。无鞭
毛菌株或丢失鞭毛的变种则不含 H抗原。 H抗原能
刺激机体产生高效价凝集抗体。
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根据对大肠杆菌抗原的鉴定,可用 O:K:H排
列表示其血清型(抗原结构式)。 如 O8:K23
( L),Hl9,即表示该菌具有 O抗原 8,L型 K抗原
23,H抗原为 19。对致人和幼畜腹泻的产肠毒素
大肠杆菌 (ETEC),除含酸性多糖 K抗原外,还可
含有蛋白质性黏附素抗原。故这类菌株的黏附素
抗原应并列写于酸性多糖 K抗原之后。如 O8:K87,
K88:Hl9中 K88即为黏附素抗原 F4。
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致病性
大肠杆菌在人和动物的肠道内,大多数于正
常条件下是不致病的共栖菌,在特定条件下 (如
移位侵入肠外组织或器官 )可致大肠杆菌病
(Colibacilosis)。但少数大肠杆菌与人和动物
的大肠杆菌病密切相关,它们是病原性大肠杆菌,
正常情况下极少存在于健康机体内。
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致病性
根据毒力因子与发病机制的不同,Gyles认为
与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类,
产肠毒素大肠杆菌 (ETEC),产类志贺毒素大肠
杆菌 (SLTEC),肠致病性大肠杆菌 (EPEC),败
血性大肠杆菌 (SEPEC)及尿道致病性大肠杆菌
(UPEC)。其中研究的最清楚的是前二类。
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产肠毒素大肠杆菌 (ETEC)
ETEC系一类致人和幼畜 (初生仔猪、犊牛、
羔羊及断奶仔猪 )腹泻最常见的病原性大肠杆
菌,其致病力主要由黏附素性菌毛和肠毒素两
类毒力因子构成,二者密切相关且缺一不可。
初生幼畜被 ETEC感染后常因剧烈水样腹泻和迅
速脱水死亡,发病率和死亡率均很高。
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粘附素性菌毛 系人和动物 ETEC的一类特有菌毛,
因其能粘附于宿主的小肠上皮细胞,故又称其为
粘附素 或定居因子,对其抗原亦相应称作粘附素
抗原或定居因子抗原 (CFA)。迄今,在动物 ETEC
中已发现的黏附素主要有 F4(K88),F5(Kgg),F6
(987P)和 F41,其次为 F42和 F17。
肠毒素是 ETEC在体内或体外生长时产生并分泌到
胞外的一种蛋白质性毒素,按其对热的耐受性不
同可分为不耐热肠毒素 (LT)和耐热肠毒素 (ST)二
种。在动物 ETEC中,只有猪源 F4+株能同时产生
LT和 ST,其他菌株仅产 ST。
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产类志贺毒素大肠杆菌 (SLTEC)
又称产 Vero细胞毒素大肠杆菌 (VTEC),系
一类在体内或体外生长时可产生类志贺毒素
的病原性大肠杆菌。引起婴、幼儿腹泻的 EPEC
以及引起人出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征
的肠出血性大肠杆菌 (EHEC)都产生这类毒素。
在动物,SLTEC可致猪的水肿病,以头部、肠
系膜和胃壁浆液性水肿为特征,常伴有共济失
调、麻痹或惊厥等神经症状,发病率较低但致
死率很高。
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引起猪水肿病的 SLTEC有两类毒力因子 。
粘附性菌毛 在 1990年 Bertsching等首次报道,
从致猪水肿病的大肠杆菌分离 。是猪水肿病
的 SLTEC菌株的一个重要的毒力因子,它有助
于细菌在猪肠黏膜上皮细胞定居和繁殖。
水肿病 2型类志贺毒素 (SLT-2e或 SLT-2v)
系引起猪水肿病的 SLTEC所产生的一种蛋白质
性细胞毒素。
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微生物学诊断
动物致病性大肠杆菌的分离与鉴定程序可
参见图 16-1。对败血症病例可无菌采集其病变
的内脏组织,直接在血琼脂或麦康凯平板上划
线分离培养。对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取
其各段小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段
的肠系膜淋巴结,分别在麦康凯平板和血平板
上划线分离培养。挑取麦康凯平板上的红色菌
落或血平板上呈 B溶血 (仔猪黄痢与水肿病菌
株 )的典型菌落几个,分别转种三糖铁 (TSI)
培养基和普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培
养。纯培养物做 O抗原鉴定。在此基础上,通
过对毒力因子的检测便可确定其属于何类致病
性大肠杆菌。
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对 ETEC各种粘附素性抗原的鉴定,应先将
待检菌株于粘附素专用培养基上 37℃ 培养
24h(F4培养基为 TSA,F5和 F41为 Minca,F6为
Slanetz),培养物用已知的各种粘附素单因子
血清或单克隆抗体,作玻板凝集,或用免疫荧
光,ELISA等其他血清学方法鉴定之,也可用
MRHA及其抑制试验 (MRHI)以及体外肠上皮细胞
吸附与吸附抑制试验加以鉴定。
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防治
目前国内外已有多种多样预防幼畜腹泻的实
验性或商品化菌苗 。 大体上可包括以抗粘附素免
疫为基础的含单价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗
或亚单位苗 ;以抗肠毒素免疫为主的类毒素苗或
LT-B亚单位苗 ;表达一种或两种粘附素以及同时
表达一种粘附素和 LT-B的基因工程菌苗等 。
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附:
禽大肠杆菌病
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禽大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些血
清型所引起的一类疾病的总称。包括心包炎、
气囊炎、败血症、脐炎、眼炎、卵黄性腹膜炎
或慢性肿瘤样肉芽肿。
禽大肠杆菌病
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【 流行特点 】
禽大肠杆菌病
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本病可通过消化道、呼吸道传播。当各
种应激因素造成机体免疫功能下降时,就会
发生感染,因此,本病常成为某些传染病的
并发或继发性疾病。各种年龄的家禽均可感
染,幼鸡最易感。
禽大肠杆菌病
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【 症状及眼观病变 】
禽大肠杆菌病
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常继发于呼吸道疾病,病鸡咳嗽和呼吸困难
禽大肠杆菌病
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本病多见于 5~ 12周龄的幼鸡,
6~ 9周龄为发病高峰。
1 气囊炎、肝周炎、心包炎
禽大肠杆菌病
西南民族大学剖检可见气囊壁增厚
禽大肠杆菌病
西南民族大学纤维素性心包炎、肝周炎
禽大肠杆菌病
西南民族大学纤维素性心包炎
禽大肠杆菌病
西南民族大学严重的纤维素性心包炎
禽大肠杆菌病
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2 幼雏脐带炎
禽大肠杆菌病
西南民族大学脐孔周围皮肤红肿(鸭)
禽大肠杆菌病
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3 卵巢炎及卵黄性腹膜炎
禽大肠杆菌病
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卵巢感染发炎,卵泡变形(鸭)
禽大肠杆菌病
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或引起腹膜炎,致使肠粘连,稍后卵黄凝固
禽大肠杆菌病
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4 输卵管炎
禽大肠杆菌病
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小鸡输卵管膨大,内有灰白色干酪样渗出物
禽大肠杆菌病
西南民族大学成年产蛋母禽输卵管明显膨大
禽大肠杆菌病
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鹌鹑输卵管内有白色干酪
样物,黏膜充血、出血
禽大肠杆菌病
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5 肉芽肿
禽大肠杆菌病
西南民族大学头部皮下结缔组织肉芽肿
禽大肠杆菌病
西南民族大学肠系膜肉芽肿 (日,崛内贞治)
禽大肠杆菌病
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6 肠炎
禽大肠杆菌病
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鸽直肠黏膜充血、出血,充满绿色粪便
禽大肠杆菌病
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7 禽蜂窝织炎
禽大肠杆菌病
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是肉鸡腹部的一种慢性皮肤病,病变见
于腹中线和大腿之间,皮肤发红、破损
禽大肠杆菌病
西南民族大学皮下有黄白色干酪样坏死物
禽大肠杆菌病
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【 防治要点 】
禽大肠杆菌病
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加强饲养管理,定期消毒,消除本病诱因,
如饲养密度过大、通风不良等,可有效降低本
病发病率。禽大肠杆菌病血清型众多,免疫原
性差,在本病流行严重地区,可使用自家疫苗,
有一定保护作用。发病鸡群可用广谱抗菌药物
如新霉素、氯霉素、磺胺、诺氟沙星等进行治
疗,但由耐药菌株的普遍存在,最好根据药敏
试验结果确定用药,才能取得满意疗效。
禽大肠杆菌病
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第二节 沙门氏菌属 (Salmonella)
沙门氏菌属是一群寄生于人和动物肠道内的无芽
孢直杆菌,革兰氏阴性,生化特性和抗原结构
相似,兼性厌氧。除极少数外,通常都以周生
鞭毛运动。绝大多数发酵葡萄糖产酸产气,也
偶尔有不产气的。在三糖铁琼脂上常产生 H2S。
DNA中 G+Cmol%为 50~ 53%。
绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引起
人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,
并为人类食物中毒的主要病原之一,在医学、
兽医和公共卫生上均十分重要。
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形态及染色特性
沙门氏菌的形态和染色特性与同科的大多
数其他菌属相似,呈直杆状 0.7~ 1.5um× 2.0~
5.0um,革兰氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏
菌无鞭毛不运动外,其余各菌均以周生鞭毛运
动,且绝大多数具有 l型菌毛。
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Rod-shaped Bacterium(causes salmonellosis),
Salmonella typhimurium (SEM x20,800)
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Rod-shaped Bacterium(causes
salmonellosis),Salmonella enteritidis
(SEM x40,020)
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培养及生化特性
本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属
相似。只有鸡白痢、鸡伤寒羊流产和甲型副伤
寒等沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠,形成较
小的菌落。在肠道杆菌婴别或选择性培养基上,
大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色菌落。本
菌属在培养基上也有 S-R变异。
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抗原及变异
沙门氏菌具有 O,H,K和菌毛四种抗原 。 O和 H抗原是
其主要抗原, 构成绝大部分沙门氏菌血清型鉴定的
物质基础, 其中 O抗原又是每个菌株必有的成分 。
O抗原是沙门氏菌细胞壁表面的耐热多糖抗原,
100C2.5h不被破坏,它的特异性依赖于 LPS多糖侧
链的组成,而其决定簇又由该侧链上末端单糖及多
糖链上单糖的排列顺序所决定。一个菌体可有几种
O抗原成分,以小写阿拉伯数字表示。将具有共同 O
抗原 (群因子 )的各个血清型菌归入一群,以大写
英文字母表示。因此目前已发现的全部沙门氏菌可
分为 A,B,Cl~ C4,D1~ D3,El~ E4,F,Gl~ G2、
H……Z 和 O5l~ O63以及 O65~ O67计 51个 O群,包括
58种 O抗原。
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H抗原是本属菌的蛋白质性鞭毛抗原,计有 63
种,60℃30 ~ 6Omin及酒精作用均破坏其抗原性,
但甲醛不能。 H抗原可分为第 1相和第 2相两种。 第
l相 H抗原以小写英文字母表示,其特异性高,常
为一部分血清型菌株所具有,故曾称为特异相。
第 2相抗原用阿拉伯数字表示但少数是用小写英文
字母表示的,其特异性低,常为许多沙门氏菌所
共有,曾称为非特异相。多数沙门氏菌具有第 1和
第 2两相 H抗原,称作双相菌,常发生位相变异。
少数沙门氏菌只有其中一相 H抗原,称为单相菌。
同一 O群的沙门氏菌又根据它们的 H抗原的不同再
细分成许多不同的血清型菌。
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K抗原 是伤寒、丙型副伤寒和部分都柏林沙门氏
菌表面包膜抗原,功能上相当于大肠杆菌 K抗
原,但一般认为其与毒力有关,故称为 Vi抗原。
沙门氏菌的抗原有时可发生变异,除 H-O和 S-R变
异外,在菌型鉴定中最多见的是 H抗原的位相
变异。
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用已知的沙门氏菌 O和 H单因子血清作玻板凝集试
验,可确定一个沙门氏菌分离物的血清型或抗原
式,对可能有 Vi抗原的菌株还须用 Vi抗血清鉴定
之。 本属菌的血清型表示方法是 O抗原,第 l相 H抗
原,第 2相 H抗原。例如鼠伤寒沙门氏菌血清型为 1,
4,[5],12:i:1,2,即表示该菌具有 O抗原 1,4,
[5],12,第 l相 H抗原为 i,第 2相 H抗原 1,2,括
号中抗原表示该抗原可能无。如有 Vi抗原可写在 O
抗原之后,如伤寒沙门氏菌血清型为 9,12,
Vi:d:-。迄今,本菌属至少已有 2500个血清型。
对人和温血动物致病的血清型绝大多数分属于 A—
F群,在疾病中经常出现的却不足 50种。
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致病性
本属菌均有致病性,具有极其广泛的动物
宿主。感染动物后常导致严重的疾病,并成为
人类沙门氏菌病的传染源之一。因此,沙门氏
菌病是一种重要的人畜共患病。本菌最常侵害
幼、青年动物,便之发生败血症、胃肠炎及其
他组织局部炎症。对成年动物则往往引起散发
性或局限性沙门氏菌病,发生败血症的怀孕母
畜可表现流产,在一定条件下亦偶尔引起急性
流行性暴发。在一个发病的畜禽群中,具有一
定比例的个体是隐性感染或康复带菌者,并间
歇地排菌,成为主要传染来源。
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致病性类型
根据对宿主适应性或嗜性不同,可将沙门氏菌
分成三群。 第一群具有高度适应性或专嗜性,它
们只对人或某种动物产生特定的疾病。 属于这群
的不多。例如鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和
火鸡发病,马流产、牛流产和羊流产等沙门氏菌
分别致马、牛、羊的流产等 ;猪伤寒沙门氏菌仅侵
害猪 ;伤寒与甲、乙、丙三型副伤寒以及仙台等血
清型是高度适应于人类的沙门氏菌,对动物不引
起自然感染。
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第二群是在一定程度适应于特定动物的偏
嗜性沙门氏菌,仅个别血清型,如猪霍乱和都
柏林沙门氏菌,分别是猪和牛羊的强适应性菌
型,多在各自宿主中致病,但也能感染其他动
物。现在常可从羔羊腹泻中分离到亚利桑那沙
门氏菌,并认为这型菌正在适应于羊。
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第三群是非适应性或泛嗜性沙门氏菌,它
们具有广泛感染的宿主谱,能引起人和各种动
物的沙门氏菌病,具有重要的公共卫生意义。
这群血清型占本属的大多数,鼠伤寒和肠炎沙
门氏菌是其中的突出代表。常见的危害人和动
物的泛嗜性沙门氏菌约 20余种,加上专嗜性和
偏嗜性菌型不过仅 30余种。
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免疫性
体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。
动物接触环境中沙门氏菌或在注射疫苗后,其体液
免疫应答主要是 IgM抗体。 其血清抗体水平与动
物抗人工感染的保护力之间并无相关性。
细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。 细胞
免疫反应性与大剂量沙门氏菌攻击动物的保护性
通常呈现很好的相关性。目前已将巨噬细胞移走
抑制因子 (MIF)试验作为判断动物是否具有细胞
免疫应答的一个很好的体外指标。
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微生物学诊断
对末污染的被检组织可直接在普通琼脂、
血琼脂或鉴别培养基平板上划线分离,但已污
染的被检材料如饮水、粪便、饲料、肠内容物
和已败坏组织等,因含杂菌数远超过沙门氏菌,
故常需要增菌培养基增菌后再行分离。
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防制
目前应用的兽用疫苗多限于预防各种家畜
特有的沙门氏菌病,例如猪副伤寒、马流产以
及牛、羊的都柏林等沙门氏菌的灭活菌苗,在
国内外均已应用,两次接种即可预防孕畜流产
或幼畜感染。据报道,用减毒或无毒活菌注射
或口服免疫动物,效果优于灭活菌苗,但有些
国家禁用。药用广谱抗菌素。
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鸡 白 痢
附:
鸡 白 痢
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本病是由鸡白痢沙门氏菌引起的各种年龄鸡
均可发生的传染病,以急性败血性经过或慢性、
隐性感染为特征。
鸡 白 痢
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【 流行特点 】
鸡 白 痢
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本病主要经卵传播,如种鸡场白痢净化不
好,雏鸡在胚胎期即感染,出壳雏多衰弱并成
为传染源散播病原。
鸡 白 痢
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本病可通过消化道、呼吸道传播,死亡率
可达 30%以上,育成鸡和成鸡也可感染发病,严
重影响生长发育、产蛋鸡产蛋率不高,死淘率
升高,其危害贯穿整个养鸡周期,造成严重经
济损失。本病四季均可发生,死亡率和造成的
经济损失与种鸡场的净化程度、鸡群饲养管理
水平以及防制措施是否得当有密切关系。
鸡 白 痢
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【 临床特征 】
鸡 白 痢
西南民族大学雏鸡衰弱、不食,被毛逆立
鸡 白 痢
西南民族大学病鸡下痢,粪便呈白色黏液状
鸡 白 痢
西南民族大学肛周羽毛被污染,有时堵塞肛门不能排便
鸡 白 痢
西南民族大学白痢引起肺炎时可见呼吸难
鸡 白 痢
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白痢引起关节炎时关节肿胀变形
鸡 白 痢
西南民族大学病鸡出现跛行或卧地不起
鸡 白 痢
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有时可引起全眼球炎,角膜混浊呈云雾状
鸡 白 痢
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成年鸡感染时,常无明显症状,
有时可见精神沉郁,食欲减退,
鸡冠萎缩、乌紫
鸡 白 痢
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鸡 白 痢
产蛋率下降,蛋品质下降,可见
薄壳蛋、白壳蛋,破损率增加
西南民族大学
【 大体病变 】
鸡 白 痢
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雏鸡 肝脏肿胀、出血呈斑驳样鸡
白 痢
西南民族大学较大雏鸡肝脏表面有多量灰白色坏死点
鸡 白 痢
西南民族大学有时坏死斑呈地图样
鸡 白 痢
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脾脏肿胀、出血、坏死,胆囊肿大充盈
鸡 白 痢
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肺脏有灰白色脓性、肉芽性坏死灶
鸡 白 痢
西南民族大学卵黄吸收不良,呈灰绿色
鸡 白 痢
西南民族大学卵黄吸收不良,卵黄囊充血
鸡 白 痢
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卵黄干酪化
鸡 白 痢
西南民族大学心脏有白色隆起的坏死灶
鸡 白 痢
西南民族大学肌胃、肠管浆膜面和黏膜面有大小不等的白色坏死灶
鸡 白 痢
西南民族大学盲肠肿大,内有干酪样凝结物
鸡 白 痢
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鸡 白 痢
盲肠内有干酪样凝结物
西南民族大学
盲肠、直肠增粗,直肠壁增生变厚,
黏膜出血性炎症,导致病鸡排便困难
鸡 白

西南民族大学盲肠增粗、脾脏肿胀,肾脏肿胀,有尿酸盐沉积
鸡 白 痢
西南民族大学产蛋鸡卵泡萎缩、变形,呈浓黄色
鸡 白 痢
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卵泡萎缩、变形,呈灰绿色
鸡 白 痢
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或卵泡萎缩、变形,呈土黄色
鸡 白 痢
西南民族大学腹腔内有卵黄液,脾脏肿胀有坏死点
鸡 白 痢
西南民族大学输卵管炎,黏膜坏死,有灰白色分泌物
鸡 白 痢
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【 防治要点 】
鸡 白 痢
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切断传播途径,搞好种鸡场净化工作,加
强卫生消毒,防止孵化感染,可有效防止鸡白
痢的发生。出壳雏鸡开食时用敏感抗菌药物如
恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、氯霉素、新
霉素等饮水或拌料,连续使用 3~ 5天,可取得
较好的预防效果。
鸡 白 痢
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发病鸡群的治疗最好在药敏试验的基
础上,选择高敏药物使用,并注意穿梭用药,
以避免产生耐药性。
鸡 白 痢