第二章 核 酸
一:核酸的一般概述
二:核酸的化学组成
三:核酸的分子结构
四:核酸的理化性质第一节:核酸的一般概述
DNA(脱氧核糖核酸 ) RNA(核糖核酸)
分布 98%于细胞核中,少量存于线粒体和叶绿体中
90%cell质中,10%
细胞核中,其中:
tRNA15%,
mRNA5%,rRNA80%
生物功能 遗传物质基础(主要)
含基因传递遗传物质,指导蛋白质合成,有时 RNA也是遗传物质核糖碱基磷酸
D- 2-脱氧核糖
A,C,G,T
磷酸
D-核糖
A,C,G,U
磷酸核酸的种类
核酸分为两大类,?
脱氧核糖核酸( DNA)
Deoxyribonucleic Acid?
核糖核酸( RNA)
Ribonucleic Acid。
脱氧核糖核酸( DNA)
DNA分子含有生物物种的所有遗传信息,分子量一般都很大。
DNA为双链分子,其中大多数是链状结构大分子,也有少部分呈环状结构。
核糖核酸( RNA)
RNA主要是负责 DNA遗传信息的 翻译和表达,分子量要比 DNA小得多。 RNA为单链分子。
根据 RNA功能,可以分为 mRNA( Messenger
RNA),tRNA( Transfer RNA) 和 rRNA
( Ribosome RNA) 三种。
第二节:核酸的化学组成
核酸( DNA和 RNA)是一种线性多聚核苷酸,它的基本结构单元是 核苷酸 。
核苷酸 本身由 核苷 和 磷酸 组成,
而 核苷 则由 戊糖 和 碱基 形成。
DNA与 RNA结构相似,但在组成成份上略有不同。
( 1)组成核甘的碱基
腺嘌呤 Ademine
鸟嘌呤 Guanine
尿嘧啶 Uracil
胞嘧啶 Cytosine
胸腺嘧啶 Thymine
腺嘌呤 Adenine
N
N
N
H
N
N H
2
鸟嘌呤 guanine
N H
N
N
H
N
O
N H
2
尿嘧啶 uracil
N H
N
H
O
O
胞嘧啶 cytosine
N
N
H
N H
2
O
胸腺嘧啶 thymine
N H
N
H
O
O
( 2)组成核甘的戊糖
组成核酸的戊糖有两种。 DNA所含的糖为 β -D-
2-脱氧核糖; RNA所含的糖则为 β -D-核糖。
O
H
H
O H
H
O H
O H
H
H O C H 2 H O C H
2
O
H
H
O H
H
H
O H
H
D- 核糖 D - 2 - 脱氧核糖
( 3)核甘
糖与碱基之间的 C-N键,称为 C-N糖苷键胞嘧啶核苷 尿嘧啶核苷鸟嘌呤核苷腺嘌呤核苷
N
N
O H
H O
N
N
N H 2
H O
N
N
O H
H 2 N
N
N
N
N
N
N
N H 2
O
H
H
O H
H
O H
H
H O C H 2 H O C H 2
O
H
H
O H
H
O H
H
O
H
H
O H
H
O H
H
H O C H 2
O
H
H
O H
H
O H
H
H O C H 2
( 4)核甘酸
核苷酸是核苷的磷酸酯。作为 DNA或 RNA结构单元的核苷酸分别是 5′ -磷酸 -脱氧核糖核苷和
5′ -磷酸 -核糖核苷。
O
B
O H O H
O H 2 CP
O H
H O
O
B= 腺嘌呤,鸟嘌呤,胞嘧啶,尿嘧啶或胸腺密啶核糖核苷酸
O H 2 CP
O H
H O
O
O
B
O H
脱氧核糖核苷酸第三节:核酸的分子结构
一,DNA的分子结构
二,RNA的分子结构一,DNA的分子结构
( 一) DNA的一级结构
概念,DNA的一级结构是指 DNA分子中脱氧核苷酸的排列顺序。
不同的 DNA分子(或片段)其一级结构不同,即脱氧核苷酸排列顺序不同,也就是碱基排列顺序不同。
意义,遗传信息
基本结构单位,脱氧核糖核苷酸
连接键,3’,5’-磷酸二酯键
书写及阅读方向,从 5端到 3端
( 二) DNA的二级结构概念,DNA的二级结构是指 DNA的双螺旋结构。
DNA的二级结构
1953年,J,Watson
和 F,Crick 在前人研究工作的基础上,
根据 DNA结晶的 X-衍射图谱和分子模型,
提出了著名的 DNA双螺旋结构模型,并对模型的生物学意义作出了科学的解释和预测
DNA双螺旋结构的特点
DNA分子由两条 DNA单链组成。
DNA的双螺旋结构是分子中两条 DNA单链之间基团相互识别和作用的结果。
双螺旋结构是 DNA二级结构的最基本形式 。
DNA双螺旋结构的要点
( 1) DNA分子由两条多聚脱氧核糖核苷酸链 (简称
DNA单链 )组成 。 两条链沿着同一根轴平行盘绕,形成右手双螺旋结构。螺旋中的两条链方向相反,即其中一条链的方向为 5′→3′,而另一条链的方向为 3′→5′ 。
DNA双螺旋结构的要点
( 2) 嘌呤碱和嘧啶碱基位于螺旋的内侧,磷酸和脱氧核糖基位于螺旋外侧。碱基环平面与螺旋轴垂直,糖基环平面与碱基环平面成 90° 角
( 3) 螺旋横截面的直径约为 2 nm,每条链相邻两个碱基平面之间的距离为 3.4 nm,每 10个核苷酸形成一个螺旋,其螺矩
(即螺旋旋转一圈)高度为 34 nm。
( 4) 两条 DNA链相互结合以及形成双螺旋的力是链间的碱基对所形成的氢键。碱基的相互结合具有 严格的配对规律,即腺嘌呤( A)与胸腺嘧啶( T)结合,鸟嘌呤( G)与胞嘧啶
( C)结合,这种配对关系,称为碱基互补。 A和 T之间形成两个氢键,G与 C之间形成三个氢键。
在 DNA分子中,嘌呤碱基的总数与嘧啶碱基的总数相等 。
DNA双螺旋的稳定性
DNA双螺旋结构在生理条件下是很稳定的。
维持这种稳定性的因素包括:两条 DNA链之间形成的氢键。
由于双螺旋结构内部形成的疏水区,消除了介质中水分子对碱基之间氢键的影响;介质中的阳离子(如 Na+,K+和 Mg2+)中和了磷酸基团的负电荷,
降低了 DNA链之间的排斥力、范德华引力等。
改变介质条件和环境温度,将影响双螺旋的稳定性。
(三) DNA的三级结构概念,DNA的三级结构是指双螺旋进一步扭曲形成的更高层次的空间结构,也就是比双螺旋更为复杂的构象。 DNA的三级结构包括线状 DNA形成的纽结、超螺旋和多重螺旋以及环状的结、超螺旋和连环等多种类型,其中超螺旋是最常见的三级结构 。
二,RNA的结构特点
(一) RNA的一级结构特点
(二) RNA的高级结构特点
mRNA一级结构的特点
真核细胞 mRNA的 3‘ -末端有一段长达 200个核苷酸左右的聚腺苷酸 (polyA),称为? 尾结构?,
5’ -末端有一个甲基化的鸟苷酸,称为? 帽结构? 。
(一) RNA一级结构的特点
(二) RNA的高级结构特点
RNA是单链分子,因此,在 RNA分子中,并不遵守碱基种类的数量比例关系,即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数 。
RNA分子中,部分区域也能形成双螺旋结构,
不能形成双螺旋的部分,则形成突环 。 这种结构可以形象地称为? 发夹型? 结构 。
在 RNA的双螺旋结构中,碱基的配对是 A与 U,G
与 C,但配对情况不象 DNA中严格 。 G 除了可以和 C 配对外,也可以和 U 配对 。 G-U 配对形成的氢键较弱 。 不同类型的 RNA,其二级结构有明显的差异 。
tRNA中除了常见的碱基外,还存在一些稀有碱基,这类碱基大部分位于突环部分,
RNA的二级结构
tRNA的二级结构都呈
三叶草? 形状,
在结构上具有某些共同之处,一般可将其分为五臂四环:包括氨基酸接受区、反密码区、二氢尿嘧啶区、
T?C区和可变区。除了氨基酸接受区外,
其余每个区均含有一个突环和一个臂。
tRNA的三级结构
在三叶草型二级结构的基础上,突环上未配对的碱基由于整个分子的扭曲而配成对,目前已知的 tRNA的三级结构均为 倒 L型 。
第四节:核酸的理化性质
一、核酸的紫外吸收
二、变性与复性
三、两性解离
四、核酸的物理性质一、核酸的紫外吸收
在核酸分子中,由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系,因而具有独特的紫外线吸收光谱,一般在
260nm左右有最大吸收峰,可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据二、核酸的变性与复性
( 1) 核酸的变性
核酸的变性是指核酸双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂,变成单链结构的过程。变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂,所以它的一级结构 (碱基顺序 )保持不变。
能够引起核酸变性的因素很多。温度升高、酸碱度改变、甲醛和尿素等的存在均可引起核酸的变性。
RNA本身只有局部的双螺旋区,所以变性行为所引起的性质变化没有 DNA那样明显。
利用紫外吸收的变化,可以检测核酸变性的情况。
而 RNA变性后,约增加 1.1%。这种现象称为增色效应。
DNA变性
( 2)核酸的复性
变性 DNA在适当的条件下,两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构,这一过程称为复性。 DNA
复性后,一系列性质将得到恢复,但是生物活性一般只能得到部分的恢复。
DNA复性的程度、速率与复性过程的条件有关。
将热变性的 DNA骤然冷却至低温时,DNA不可能复性。
但是将变性的 DNA缓慢冷却时,可以复性。 分子量越大复性越难。浓度越大,复性越容易。此外,DNA的复性也与它本身的组成和结构有关。
DNA复性三、核酸的两性解离
核酸的两性性质及等电点
与蛋白质相似,核酸分子中既含有酸性基团(磷酸基)
也含有碱性基团(氨基),因而核酸也具有两性性质。
由于核酸分子中的磷酸是一个中等强度的酸,而碱性
(氨基)是一个弱碱,所以核酸的等电点比较低。如
DNA的等电点为 4~ 4.5,RNA的等电点为 2~ 2.5。
RNA的等电点比 DNA低的原因,是 RNA分子中核糖基
2′ -OH通过氢键促进了磷酸基上质子的解离。 DNA没有这种作用。
四、核酸的物理性质
DNA为白色纤维状固体,RNA为白色粉末状固体,它们都微溶于水,其钠盐在水中的溶解度较大。
核酸小结
本章要求,熟悉核酸的种类,分布与功能;掌握核酸的化学组成,核酸的分离及其理化性质;
核酸的分子结构。
重点,核酸的分子结构。
难点,DNA的双螺旋结构及 tRNA的三叶结构。
思考题?
1,在一个 DNA分子中,若 A所占摩尔数为 32.8%,
则 G的摩尔多少?
2,核甘酸除去磷酸基后称为 __?
3,碱基与戊糖间是 C- C连接的是 ___ 核甘?
4,tRNA的二级结构是 ___ 型,三级结构是 __
型?
5,DNA的三级结构是以 ___ 形式连而成,此结构形式是 ___ 的基本结构单位 。