常用层析技术原理、
分类及其应用层析（ chromatography）
原理,待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相）时，根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电核多少及亲和力等，使待分离的蛋白质组分在两相中反复分配，并以不同的速度流经固定相而达到分离蛋白质的目的。
分类
1 流动相和固定相主要采用液相层析法
2 固定相的形状纸层析，薄层层析，柱层析
3 压力快速、低、中、高
(2.02×105Pa,5.05×105Pa,20.2×
105Pa )
分类
4 层析方向轴向流层析、径相流层析
5 分离操作方式洗脱展开、迎头分析、顶替展开
6 分配机理离子交换、凝胶过滤、亲和层析等洗脱法 顶替法 迎头法色谱带与色谱图原理：
利用凝胶粒子（通常称为凝胶过滤介质）为固定相，根据料液中溶质相对分子质量的差别进行分离的液相层析法排阻极限,不能扩散到凝胶网络内部的最小分子的相对分子质量分级范围分类：
葡聚糖凝胶层析 Sephadex
琼脂糖凝胶层析 Sepharose
聚丙烯酰胺凝胶层析 Polyacrylamide Gel
琼脂糖及葡聚糖组成的复合凝胶 Superdex
应用：
脱盐测定分子量（球蛋白）
分离纯化凝胶过滤层析 （ gel filtration chromatography）
凝胶过滤层析 （ gel filtration chromatography）
一般由葡聚糖制成原理：
利用离子交换剂为固定相，是根据荷电溶质与离子交换剂之间静电相互作用力的差别进行溶质分离的洗脱层析法分类：
离子交换纤维素阴离子,强酸型，中强酸型，弱酸型阳离子,强碱型，中强碱型，弱碱型离子交换交联葡聚糖离子交换琼脂糖应用实例,
DEAE-纤维素柱色谱分离人血清蛋白羧甲基纤维素柱色谱分离卵清蛋白离子交换层析（ ion-exchange chromatography）
离子交换层析 （ ion-exchange chromatography）
阴离子交换树脂颗粒 (＋ )
原理：
蛋白质与结合在介质上的配基间的特异亲和力为工作基础应用,
抗体核酸凝集素染料配基固相化金属亲和层析疏水作用层析抗体亲和层析（ antibody－ affinity chromatography）
抗体亲和层析 （ antibody－ affinity chromatography）
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