染色体
1．重要性,
(1).几乎所有生物细胞中 均存在染色体 ；
(2).各物种染色体均各有其 特定的形态特征,在细胞分裂的中期和早后期最为明显和典型；
(3).中期染色体分散排列在赤道板 上，故通常以这个时期进行染色体形态的识别和研究。
染色体
2,形态,
(1).组成,着丝粒、长臂和短臂、随体；
(2).着丝点 (主缢痕 ),细胞分裂时纺锤丝于着丝粒的区域，对于染色体向两极牵引具有决定性作用；
(3).次缢痕、随体,是识别特定染色体的重要标志；
(4).某些次缢痕具有组成 核仁 的特殊功能。
染色体
3．类别,
各生物的染色体不仅形态 结构相对稳定,
而且其 数目成对 。
同源染色体,形态和结构相同的一对染色体,
含有相同的基因位点；
异源染色体,这一对染色体与另一对形态结构不同的染色体，互称为异源染色体,
含有不同的基因位点。
4.染色体编号人类的 23对染色体及其编号染色质的基本结构
染色体 四级结构模型 理论能够在一定程度上解释染色质状态转化的过程
1,DNA+组蛋白?核小体 +连接丝
2,核小体 +连接丝?螺线体 (solenoid)
3,螺线体?超螺线体 (super-solenoid)
4,超螺线体?染色体
DNA+组蛋白
核小体 +连接丝核小体 +连接丝
螺线体 (solenoid)
螺线体
超螺线体
(super-solenoid)
超螺线体
染色体
S 期
G1期 间期 （ interphase）
细胞周期 G2期前期 (prophase)
M 期 中期 (metaphase)
后期 (anaphase)
末期 (telophase)
家鸽体细胞有丝分裂果蝇唾腺染色体的观察
实验目的
1.熟练掌握果蝇唾腺的剥制及唾腺染色体标本的压片制作方法；
2.熟悉果蝇唾腺染色体的形态特征。
实验原理双翅目昆虫幼虫唾液腺细胞的巨大染色体，由于染色体
DNA经过多次复制，而未发生细胞核分裂，重复复制后的
1000-4000条核蛋白纤丝聚集在一起，因此比一般的染色体大得多。同时，唾腺细胞中的染色体总是处于配对状态，因此在果蝇唾腺细胞只能看到体细胞染色体数目的一半。
普通果蝇（ 2n=2x=8）唾腺染色体的特点表现在：
各染色体着丝点附近异染色质区相互结合形成染色很深的染色中心，第 Ⅱ,Ⅲ 对染色体呈Ｖ形
（中着丝粒），各有两臂，Ｘ染色体呈棒状，第
Ⅳ 对染色体呈粒状，观察时可见五条臂由染色中心向外蜿蜒伸展。
黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster)染色体示意图
三 实验材料果蝇三龄幼虫活体。
四 实验器具、药品试剂显微镜，生化培养箱；果蝇培养瓶，镊子，
解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸等。
0.7％氯化钠（ NaCl）,1mol/L HCl；改良苯酚品红染色液；果蝇培养基等。
五 实验方法挑选生长肥大的三龄幼虫放入表面皿中用 0.7％的生理盐水尽量洗去幼虫体表所沾附的培养基，然后将幼虫置载玻片上，滴１～ 2滴 0.7％生理盐水，找到具有口器的头部
（有一小黑点），一手用解剖针刺入（或压住）头部，将虫固定，一手用摄子夹紧幼虫下半部（尾端 1/3处），轻轻向两端拉开，唾腺随头部拉出。 唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
唾液腺解剖针解剖针
在低倍显微镜下，调节好光亮度观察，可见一对半透明、隐约可见细胞界限的囊状物 —— 唾腺。移去虫体其余部份，用解剖针剔除附在唾腺一侧深色泡沫状的脂肪体，
以保证制片质量。若载片上杂质较多，可用生理盐水适当冲洗，用吸水纸吸去多余的生理盐水。
注意：在整个剥离过程中，不能让载片上的生理盐水干涸，否则唾腺收缩而不易剥离；冲洗残渣和吸去多余水液时，要避免唾腺被吸水纸吸走。
3．解离将剥好的唾腺移到载片中央，加一滴 1
mol/L HCl于腺体上，解离２～３ min，使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色体展开。
4．染色用吸水纸吸去 HCl，加 1滴蒸馏水轻轻冲洗后，小心吸干。加 1～ 2滴改良苯酚品红或其它染液，染色 10～ 15min。
5．压片染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不要使盖片移动。）
6．镜检 在低倍镜选择唾腺细胞多且染色体分散好的视野，换高倍镜仔细观察唾腺染色体的染色中心、染色体臂和横纹以及可能有的疏松区、裴氏环、或因易位而形成的十字形图象和因倒位而形成的倒位环等各种结构。
实验操作,0.7% NaCl + 雌性 /肥大幼虫
解剖幼虫，剥取唾腺
1滴 45% HAc
5″- 7″
1滴 1mol/L HCl
3’- 5’ 剥离脂肪体
1滴蒸馏水
1’- 2’
1-2滴醋酸洋红染液
10′- 20′
压片、观察
小鼠骨髓细胞染色体标本 制作与观察
实验目的掌握动物骨髓染色体标本制备基本过 程，
了解操作步骤的原理
实验原理小鼠骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，
本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，
固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，
可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。
实验原理制备方法包括以下几个要点,
1,用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期,使中期染色体停留在赤道面处
2,用低渗法使将细胞膨胀,以至于在滴片时细胞被胀破,使细胞的染色体铺展到载玻片上
3,空气干燥法可使使细胞的染色体在载片上展平,经 Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象实验用品
1．材料：小白鼠
2．器具：注射器（ 1ml,5ml） 剪刀 镊子 玻璃吸管 10ml刻度的离心管 离心机 载玻片盖玻片 显微镜 滤纸 擦镜纸 纱布 恒温水浴锅
3．药品,0.01%秋水仙素 0.075MKCl 固定液（甲醇：冰醋酸 =3,1） 2%柠檬酸钠 改良石炭酸品红实验步骤预处理 取股骨 冲洗骨髓 离心低渗 离心 固定 离心 滴片染色 观察
1．预处理：实验前 2.5-3小时，按每克体重注射 0.02ml，给小白鼠腹腔注射秋水仙素。
2．取股骨：断颈处死小鼠后，剔去肌肉组织，洗净
3．冲洗骨髓：剪去两端的股骨头，吸取
10ml 2%柠檬酸钠，注射 器针头插入股骨一端,反复冲洗两根股骨，洗液收集到 10ml
的离心管中
4,离心,1000r/min 离心 10 min,弃上清
5,低渗：加入 8ml 0.075mol/LKCl溶液,滴管吹散,37℃ 水浴低渗 30 min,中间（约 15
min ）再吹散一次，使细胞分散，悬浮于溶液中
6．离心,1000r/min离心 10 min，弃上清
7．固定：沉淀加 8ml固定液，并用吸管轻轻吹匀，进行固定，中间（约 15 min ）再吹散一次
8,离心,1000r/min 离心 10 min,留 1 ml
左右上清，轻轻吹打成细胞悬液
9,滴片：用吸管吸取细胞悬液，高度 30-
40 cm，滴在预冷的载玻片上，在酒精灯火焰上微微加热，室温晾干
10,染色：改良石炭酸品红染色 10-20 min
11,观察：低倍 ——— 高倍
1．重要性,
(1).几乎所有生物细胞中 均存在染色体 ；
(2).各物种染色体均各有其 特定的形态特征,在细胞分裂的中期和早后期最为明显和典型；
(3).中期染色体分散排列在赤道板 上，故通常以这个时期进行染色体形态的识别和研究。
染色体
2,形态,
(1).组成,着丝粒、长臂和短臂、随体；
(2).着丝点 (主缢痕 ),细胞分裂时纺锤丝于着丝粒的区域，对于染色体向两极牵引具有决定性作用；
(3).次缢痕、随体,是识别特定染色体的重要标志；
(4).某些次缢痕具有组成 核仁 的特殊功能。
染色体
3．类别,
各生物的染色体不仅形态 结构相对稳定,
而且其 数目成对 。
同源染色体,形态和结构相同的一对染色体,
含有相同的基因位点；
异源染色体,这一对染色体与另一对形态结构不同的染色体，互称为异源染色体,
含有不同的基因位点。
4.染色体编号人类的 23对染色体及其编号染色质的基本结构
染色体 四级结构模型 理论能够在一定程度上解释染色质状态转化的过程
1,DNA+组蛋白?核小体 +连接丝
2,核小体 +连接丝?螺线体 (solenoid)
3,螺线体?超螺线体 (super-solenoid)
4,超螺线体?染色体
DNA+组蛋白
核小体 +连接丝核小体 +连接丝
螺线体 (solenoid)
螺线体
超螺线体
(super-solenoid)
超螺线体
染色体
S 期
G1期 间期 （ interphase）
细胞周期 G2期前期 (prophase)
M 期 中期 (metaphase)
后期 (anaphase)
末期 (telophase)
家鸽体细胞有丝分裂果蝇唾腺染色体的观察
实验目的
1.熟练掌握果蝇唾腺的剥制及唾腺染色体标本的压片制作方法；
2.熟悉果蝇唾腺染色体的形态特征。
实验原理双翅目昆虫幼虫唾液腺细胞的巨大染色体，由于染色体
DNA经过多次复制，而未发生细胞核分裂，重复复制后的
1000-4000条核蛋白纤丝聚集在一起，因此比一般的染色体大得多。同时，唾腺细胞中的染色体总是处于配对状态，因此在果蝇唾腺细胞只能看到体细胞染色体数目的一半。
普通果蝇（ 2n=2x=8）唾腺染色体的特点表现在：
各染色体着丝点附近异染色质区相互结合形成染色很深的染色中心，第 Ⅱ,Ⅲ 对染色体呈Ｖ形
（中着丝粒），各有两臂，Ｘ染色体呈棒状，第
Ⅳ 对染色体呈粒状，观察时可见五条臂由染色中心向外蜿蜒伸展。
黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster)染色体示意图
三 实验材料果蝇三龄幼虫活体。
四 实验器具、药品试剂显微镜，生化培养箱；果蝇培养瓶，镊子，
解剖针，载玻片，盖玻片，吸水纸等。
0.7％氯化钠（ NaCl）,1mol/L HCl；改良苯酚品红染色液；果蝇培养基等。
五 实验方法挑选生长肥大的三龄幼虫放入表面皿中用 0.7％的生理盐水尽量洗去幼虫体表所沾附的培养基，然后将幼虫置载玻片上，滴１～ 2滴 0.7％生理盐水，找到具有口器的头部
（有一小黑点），一手用解剖针刺入（或压住）头部，将虫固定，一手用摄子夹紧幼虫下半部（尾端 1/3处），轻轻向两端拉开，唾腺随头部拉出。 唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
唾液腺解剖针解剖针
在低倍显微镜下，调节好光亮度观察，可见一对半透明、隐约可见细胞界限的囊状物 —— 唾腺。移去虫体其余部份，用解剖针剔除附在唾腺一侧深色泡沫状的脂肪体，
以保证制片质量。若载片上杂质较多，可用生理盐水适当冲洗，用吸水纸吸去多余的生理盐水。
注意：在整个剥离过程中，不能让载片上的生理盐水干涸，否则唾腺收缩而不易剥离；冲洗残渣和吸去多余水液时，要避免唾腺被吸水纸吸走。
3．解离将剥好的唾腺移到载片中央，加一滴 1
mol/L HCl于腺体上，解离２～３ min，使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色体展开。
4．染色用吸水纸吸去 HCl，加 1滴蒸馏水轻轻冲洗后，小心吸干。加 1～ 2滴改良苯酚品红或其它染液，染色 10～ 15min。
5．压片染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。（注意不要使盖片移动。）
6．镜检 在低倍镜选择唾腺细胞多且染色体分散好的视野，换高倍镜仔细观察唾腺染色体的染色中心、染色体臂和横纹以及可能有的疏松区、裴氏环、或因易位而形成的十字形图象和因倒位而形成的倒位环等各种结构。
实验操作,0.7% NaCl + 雌性 /肥大幼虫
解剖幼虫，剥取唾腺
1滴 45% HAc
5″- 7″
1滴 1mol/L HCl
3’- 5’ 剥离脂肪体
1滴蒸馏水
1’- 2’
1-2滴醋酸洋红染液
10′- 20′
压片、观察
小鼠骨髓细胞染色体标本 制作与观察
实验目的掌握动物骨髓染色体标本制备基本过 程，
了解操作步骤的原理
实验原理小鼠骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，
本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，
固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，
可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。
实验原理制备方法包括以下几个要点,
1,用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期,使中期染色体停留在赤道面处
2,用低渗法使将细胞膨胀,以至于在滴片时细胞被胀破,使细胞的染色体铺展到载玻片上
3,空气干燥法可使使细胞的染色体在载片上展平,经 Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象实验用品
1．材料：小白鼠
2．器具：注射器（ 1ml,5ml） 剪刀 镊子 玻璃吸管 10ml刻度的离心管 离心机 载玻片盖玻片 显微镜 滤纸 擦镜纸 纱布 恒温水浴锅
3．药品,0.01%秋水仙素 0.075MKCl 固定液（甲醇：冰醋酸 =3,1） 2%柠檬酸钠 改良石炭酸品红实验步骤预处理 取股骨 冲洗骨髓 离心低渗 离心 固定 离心 滴片染色 观察
1．预处理：实验前 2.5-3小时，按每克体重注射 0.02ml，给小白鼠腹腔注射秋水仙素。
2．取股骨：断颈处死小鼠后，剔去肌肉组织，洗净
3．冲洗骨髓：剪去两端的股骨头，吸取
10ml 2%柠檬酸钠，注射 器针头插入股骨一端,反复冲洗两根股骨，洗液收集到 10ml
的离心管中
4,离心,1000r/min 离心 10 min,弃上清
5,低渗：加入 8ml 0.075mol/LKCl溶液,滴管吹散,37℃ 水浴低渗 30 min,中间（约 15
min ）再吹散一次，使细胞分散，悬浮于溶液中
6．离心,1000r/min离心 10 min，弃上清
7．固定：沉淀加 8ml固定液，并用吸管轻轻吹匀，进行固定，中间（约 15 min ）再吹散一次
8,离心,1000r/min 离心 10 min,留 1 ml
左右上清，轻轻吹打成细胞悬液
9,滴片：用吸管吸取细胞悬液，高度 30-
40 cm，滴在预冷的载玻片上，在酒精灯火焰上微微加热，室温晾干
10,染色：改良石炭酸品红染色 10-20 min
11,观察：低倍 ——— 高倍
