第二十二章 分支菌属
岳 华
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本属菌在自然界分布广泛, 许多是人和多
种动物的病原菌 。 对动物有致病性的主要
是 结核分支杆菌, 牛分支杆菌, 禽分支杆
菌 及副结核分支杆菌 。 代表种为结核分支
杆菌 。 本节将重点介绍牛分支杆菌与副结
核杆菌 。
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结核杆菌
Mycobacterium tuberculosislung tissue infected with
tuberculosis
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牛分支杆菌
本菌与人的结核分支杆菌 ( 简称结核杆菌 ) 和禽分
支杆菌多特性相近, 本节一并介绍 。
形态与细胞壁组成结核分支杆菌为细长、直或微弯
的杆菌,单在、少数成丛,大小为 0.2~
0.5um× l.5~ 4.0um。牛分支杆菌菌体较短而粗,
禽分支杆菌呈多形性。在陈旧的培养基或干酪性病
灶内的菌体可见分支现象。
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结核杆菌抗酸染色
结核杆菌抗酸染色
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与一般革兰氏阳性菌不同,本菌的细胞壁
不仅有肽聚糖,还有特殊的糖脂。因为糖
脂的影响,致使革兰氏染色不易着染,而
抗酸染色为红色。 糖脂包括阿拉伯半乳糖
脂复合物及分支菌酸等 。糖脂的含量超过
菌体总量的 10%,远远超过其他细菌类脂
的含量。 糖脂成分有效地刺激哺乳动物的
免疫系统,分支杆菌因此被制成免疫佐剂
得到普遍应用。
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致病机理及致病性
本菌的致病过程是以细胞内寄生和形成局部病灶为
特点。 细菌主要通过呼吸道侵入机体肺泡,被巨噬
细胞吞噬,但不被消化降解,相反在其内繁殖,形
成病灶,产生干酪样坏死 。坏死灶被吞噬细胞,T细
胞与 B细胞等包围,形成结核结节。免疫低下者此种
局限性病灶可能破溃,菌体排入支气管,随痰咳出
体外 ;或者病灶液化,扩散进入血流及其他器官,造
成机体死亡。对于免疫正常者而言,局限性病灶在
活化的巨噬细胞作用下,其内细菌停止生长,病灶
钙化而痊愈。
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牛胸膜结核呈现的珍珠状结节
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结核杆菌主要引起人的结核病,灵长类动物、
犬及其他与人接触的动物均可感染 ;实验动
物中以豚鼠、仓鼠力量敏感 ;可使小鼠致病,
山羊和家禽对结核分支杆菌不敏感。
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变异性
该菌可发生多种变异现象。 1~ l0ug/ml异烟肼
可诱导本菌的形态变异产生 L型,胞壁消失,
呈多型性,并产生对异烟肼的耐药性。 在陈旧
培养基上菌落由粗糙型变为光滑型,这种变异
也可导致毒力减弱。 卡氏 (Glmette)和介氏
(Guerin)将牛分支杆菌在培养基上经 13年 230
次传代,便有毒菌株变为毒力减弱菌株,对人、
牛无致病性,成为现在广泛应用的卡介苗
( BCG)。
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免疫性与变态反应
研究较多的是结核杆菌 。 细菌侵入机体
后, 机体主要产生细胞免疫 。 1977年
Lenzin发现结核病的细胞免疫和体液免
疫存在分离现象, 细胞免疫随病情的加
重而减弱, 体液免疫则随病情的加重而
增强 。 凡病情得到控制或康复的动物,
其细胞免疫可达到一定水平, 而血清中
抗体水平较低 。 重症动物的细胞免疫反
应低下, 甚至消失, 血清中特异性抗体
显著增加 。
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结核杆菌在激发机体免疫应答的同时,迟发
性变态反应也随之产生,二者均由 T细胞介导
产生。但诱导产生免疫与变态反应的物质不
同,如将结核菌素与其胞壁成分同时注人机
体,可产生变态反应,但不产生免疫 ;若注射
结核杆菌核蛋白体肝 RNA,机体则产生免疫,
而不产生变态反应。
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原因在于不同抗原成分激活不同的 T细胞,
可产生巨噬细胞移动抑制因子 (MlF)或结核
杆菌生长抑制因子,前者可致变态反应性炎
性反应,后者可特异性地抑制巨噬细胞内的
结核杆菌的繁殖,从而获得免疫。完整的结
核杆菌可刺激 MlF及 MyoIF同时产生,因此检
测机体对结核杆菌是否发生变态反应,即可
判定是否有免疫力,结核菌素试验 正是根据
这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。
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微生物学诊断
1,显微镜检查 取患病器官的结核结节及病变
与非病变交界处组织直接涂片, 抗酸染色后
镜检, 如发现红色成丛杆菌时, 可做出初步
诊断 。
2,分离培养 将病料中加入 6%H2SO4或 4%NaOH
液处理 l5min后, 经中和, 离心, 取少许沉淀
物接种在培养基斜面上, 每份病料接 4~ 6管,
管口封严, 置 37℃ 培养 8周, 每周观察一次,
培养阳性时, 需进行培养特性和生化特性鉴
定 。
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M.bovis BCG
牛型结核杆菌菌落
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3、动物接种 将上述经处理的供分离培养用
的病料接种于动物,皮下或腹腔注射 0.5ml,
禽分支杆菌可使鸡致病 ;结核杆菌对琢鼠有较
强的致病性,皮下注射 3~ 5周可引起明显病变 ;
牛分支杆菌对免有致病性,接种后 3周至 3个月
死亡。
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4、变态反应 采用 PPD皮内注射法,按我国
,动物检疫操作规程, 规定,牛颈部皮内注
射 0.lml(10万 lU/m1)72h后局部炎症反应明
显,皮肿胀厚度差 ≥ 4mm为阳性 ;如局部炎症
不明显,皮肿胀厚度差在 2~ 4mm间,为疑似 ;
如无炎症反应,皮肤肿胀厚度差在 2mm以下,
为阴性。凡判为疑似反应牛,30d后需复检
一次,如仍为疑似,经 30~ 45d再次复检,
如仍为疑似可判为阳性。
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5、血清学检查 鉴于结核病细胞免疫与体液
免疫的分离现象,检测特异性抗体可诊断结
核病。可采用多种方法检测抗体,酶联免疫
吸附试验 (ELISA)是目前较好的方法,此法
敏感性高、特异性强、操作简单。
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免疫与治疗
结核病的免疫是带菌免疫,即所谓传染性免
疫 (infection imnunity),当结核杆菌在机
体消失或死亡后,其免疫也终止。人类广泛
采用卡介苗免疫接种,免疫期达 4~ 5年。犊
牛在 1月龄时也可皮下接种卡介苗 100mg,20d
产生免疫,可维持 12~ 18个月。接种卡介苗
的牛一年后仍维持变态反应阳性,在用结核
菌素检疫时无法与自然感染牛区别,因而不
宜推广应用。
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按规定,饲养牛群不接种卡介苗,每年春、
秋需进行检疫,结核菌素变态反应检测阳性
者,要隔离饲养。 鉴于抗体产生与结核病的
正相关性,在检疫时如能将变态反应与
ELISA结合进行,可提高检出率。对检出的
患结核病动物要扑杀处理。
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由于本菌富含糖脂,造成 DNA分离的困难,
从而影响了本菌的分子水平的研究。尽管如
此,卡介苗能有效地诱导细胞免疫及体液免
疫,对基因工程疫苗的研究有极大吸引力。
已知结核杆菌的热休克基因的启动子在哺乳
动物体内能高效表达,研究者正尝试导入其
他细菌或病毒的保护性抗原基因,可望研制
出以卡介苗为载体的新一代的基因工程疫苗。
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近年来, 某些养鹿场应用卡介苗给初生仔鹿
接种, 在预防鹿结核病工作中获得了满意效
果 。
该病为人畜共患病,凡对人结核病有效的药
物,对动物也有效。但除珍稀或观赏动物外,
不提倡用药物治疗。
附:
禽 结 核 病
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本病是由禽结核分枝杆菌引起
的多种家禽和野禽的慢性接触性传
染病。以内脏出现结核结节及体重
减轻为特征。
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【 流行特点 】
禽结核病
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多种禽对本病有易感染性,其中鸡和火
鸡最易感,且较为严重,其他禽类较轻微。
病菌经过消化道感染,多为散发,发病率极
低,致死率高,病鸡均以死亡而告终。
禽结核病
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【 临床特征 】
禽结核病
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病初无症状,发展到一定程度
即出现精神沉郁,体重减轻
禽结核病
西南民族大学鸡冠、肉髯萎缩、变干,食欲正常鸡冠、肉髯萎缩、变干,但食欲正常
禽结核病
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病鸡消瘦、胸骨弯曲变形
禽结核病
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【 大体病变 】
禽结核病
西南民族大学病鸡消瘦、体形变小
禽结核病
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病鸡肝脏肿胀,有粟粒至大豆大小
黄白色结核结节(日,堀内贞治)
禽结核病
西南民族大学肺脏散布大量黄白色结核结节
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肠道结核结节(杜元钊 )
禽结核病
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【 防制要点 】
病鸡无治疗价值,应
及时淘汰,严格消毒
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