课件 002 兽医微生物学教学课件 1
兽
医
微
生
物
学
兽医微生物学
(多媒体教学课件 )
天津农学院动科系动物预防医学教研室制作
2003/02/28
课件 002 兽医微生物学教学课件 3
绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简
史，微生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务
与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，
细菌生态、致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态
反应，免疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、
致病性、微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病
的诊断与防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病
毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊
断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌
抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、
生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应等。
内
容
简
介
课件 002 兽医微生物学教学课件 4
第一章 细菌的形态与构造
第二章 细菌的生理
第三章 消毒与灭菌
第四章 细菌的微生态
第五章 细菌的致病机理
第六章 细菌的遗传变异
第七章 细菌的分类与命名
课件 002 兽医微生物学教学课件 5
第三章 消毒与灭菌
第一节 物理因素对微生物的影响
第二节 化学因素对微生物的影响
第三节 生物因素对微生物的影响
第四节 微生物的亚致死性损伤及其修复
课件 002 兽医微生物学教学课件 6
第三章 消毒与灭菌
微生物的生命活动极易受外界环境条件影响。了
解外界环境因素对微生物的影响，以便控制外界因
素，达到利用或消灭微生物的目的。
本章着重介绍物理、化学、生物学因素对微生物
的抑制或杀灭作用以及消毒灭菌方法。介绍几个基
本概念。
杀菌作用 指某些物质或因素具有的杀死微生物
的作用。
抑菌作用 指某些物质或因素所具有的抑制微生
物生长繁殖的作用。
课件 002 兽医微生物学教学课件 7
抗菌作用 指某些药物所具有的抑制或杀灭微生
物的作用。
灭菌 指杀灭物体中所有微生物（包括芽孢和孢
子）的方法。
消毒 指杀灭物体中病原微生物的方法。用于消
毒的化学药品叫消毒剂或杀菌剂。
防腐 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。用
于防腐的化学药品叫防腐剂或抑菌剂。
无菌 指在一定空间内没有活微生物的状态。防
止任何微生物进入动物机体或物体的方法，叫 无菌
法 。以无菌法进行的操作称无菌技术或 无菌操作 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 8
第一节 物理因素对微生物的影响
对微生物影响较大的物理因素包括,温度、辐射、
干燥、声波、微波、滤过等 。
一、温 度
适当的温度有利于微生物的生长发育，温度过高
或过低都会影响微生物的新陈代谢和生长发育，甚
至使之死亡。
1,低温 数微生物对低温具有很强的抵抗力。当微
生物处于最低生长温度以下时，其代谢活动降低到
最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力。
常在低温下保存微生物种。
课件 002 兽医微生物学教学课件 9
冷冻保存 动存微生物种时，必须迅速降低温度，
起用时也应迅速融化。防止胞浆水分形成冰晶，破
坏胞浆胶体、胞浆膜和细胞壁。 反复冷冻与融化对
微生物具有很大伤害，应尽力避免。
为了减少细菌在冷冻时的死亡，可于菌液内加入
10％左右甘油、蔗糖、脱脂乳或 5％二甲基亚砜作
为保护剂。
冷冻真空干燥（冻干）法 是保存菌毒种、疫苗、
补体、血清等的良好方法，可保存微生物及生物制
剂数月至数年不失活。 其原理是迅速冷冻，不形成冰晶，
同时抽真空让固体冰中的水分子升华除去，封闭瓶口保存。 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 10
2,高温 高温对微生物具有致死作用，常用于消毒
和灭菌。高温对菌体蛋白质、核酸、酶系统等产生
破坏作用。导致菌体死亡。
高温灭菌法 分 干热灭菌 和 湿热灭菌 两类，湿热传
导性好、穿透力强灭菌效力大。
（ 1）干热灭菌法 包括火焰灭菌和热空气灭菌两类。
火焰灭菌法 是以火焰直接烧灼杀死物体中微生
物的方法。分为 灼烧 和 焚烧 两种。
热空气灭菌 指利用干热灭菌器以干热空气进行
灭菌的方法。用于耐高温物品。灭菌条件,160℃
维持 l-2h，才能杀死所有微生物（芽孢、孢子）。
课件 002 兽医微生物学教学课件 11
（ 2）湿热灭菌法 有 煮沸灭菌, 巴氏消毒,
流通蒸汽灭菌, 高压蒸汽灭菌 几种。
煮沸灭菌 煮沸 10-20min可杀死所有细菌繁
殖体，芽抱常需煮沸 1-2h才被杀死。手术器
械、注射器、针头及食具等可用此法。
巴氏消毒法 以较低温度杀灭液态食品中病
原菌或特定微生物，尽量保持其营养成分和
风味的消毒方法。主要用于葡萄酒、啤酒、
果酒及牛乳等食品的消毒。
课件 002 兽医微生物学教学课件 12
巴氏消毒法具体方法有三种
低温维持巴氏消毒法（ LTH） 63-65℃ 30min；
高温瞬时巴氏消毒法 (HTST) 71-72℃ 15s；
超高温巴氏消毒法 (UHT) 132℃ 1-2s。
消毒后均须迅速冷却至 10℃ 以下，促进细菌死亡，
称为 冷击法 。超高温巴氏消毒的鲜乳在常温下，保存
期可达 6个月。
流通蒸汽灭菌法 是利用蒸汽在流通蒸汽灭菌器内进
行灭菌的方法,100℃ 维持 30min。
间歇灭菌法, 100℃ 维持 30min,37℃ 温箱过夜，
连续进行 3次灭菌和 2次保温，达到完全灭菌目的。 用
于不耐高温的培养基的灭菌。
课件 002 兽医微生物学教学课件 13
高压蒸汽灭菌法 即用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的
方法。是应用最广、最有效的灭菌方法。
原理 给 高压蒸汽灭菌器 加水、放入被灭菌物品、密闭、
加热，蒸汽产生压力，随压力的增大水的沸点升高，温度也升
至 100℃ 以上，以提高灭菌的效果，缩短灭菌时间。
灭菌条件 常用 1.02kg／ cm2 （每平方英寸 15磅）
的压力，在 12l.3℃ 温度下，维持 15-20min，即可杀死
所有微生物，达到完全灭菌的目的。
常用于 如培养基、溶液、器皿、器械、敷料、橡皮
手套、工作服和小实验动物尸体等的灭菌。
灭菌注意 须充分排除灭菌器内原有的冷空气。
课件 002 兽医微生物学教学课件 14
二、辐 射
包括电磁波辐射和粒子辐射, 对微生物作用为：
电离辐射 和 非电离辐射 。 非电离辐射包括可见光,
日光, 紫外线 。
1.可见光 指在红外线和紫外线之间, 肉眼可见的
光线, 波长 400-800nm。 可见光线只有微弱的杀菌
作用 。
2.阳光 直射日光有强烈杀菌作用, 是天然杀菌因
素, 紫外线 是日光杀菌作用的主要因素 。 许多微生
物在直射日光下, 半小时到数小时即可死亡 。 芽抱
的抵抗力强, 经 20h才死亡 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 15
3.紫外线 紫外线中波长 200-300nm部分具有杀菌作用，其
中以 265-266nm段的杀菌力最强，这与 DNA吸收光谱范围一
致。常用的紫外线杀菌灯波长为 253.7nm，杀菌力强而稳定。
缺点 紫外线的穿透力不强，即使是很薄的玻璃
也不能透过，所以只用物体表面消毒。
用途 微生物实验室、无菌室、手术室、传染病
房、种蛋室等的空气消毒。
原理 紫外线照射后, DNA分子吸收约 260nm紫外线, 使
同一条 DNA链上相邻胸腺嘧啶产生共价结合成二聚体, 影响
DNA复制与转录, 引起致死性突变而死亡 。 此外, 紫外线可
使空气中分子氧变为臭氧, 臭氧放出氧化能力强的原子氧,
呈现杀菌作用 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 16
剂量与诱变育种 紫外线的杀菌作用随照射量的
增加而加强。若紫外线照射量不足以致死细菌，则
可引起核酸的部分改变，使其发生突变。因此，紫
外线照射也是一种有效的诱变方法。
4.电离辐射 放射性同位素射线（ α β γ）和 X射线等
可使被照射物质发生电离。
杀菌作用 X射线 （ 波长 0.06-13.6nm）, γ射线 (波
长 0.00l-0.4nm) 的电离辐射微弱 。 α与 β射线的电离辐
射作用较强, 有抑杀菌作用 。
用途 β与 γ射线穿透力强 。 主要是 X, γ和 β射线,
用于消毒, 食品保藏和育种等方面 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 17
三、干 燥和渗透压
作用 微生物在干燥的环境中失去水分，新陈代谢
障碍，菌体蛋白变性，逐渐死亡。微生物对干燥的
抵抗力差异很大。巴氏杆菌、嗜血杆菌、鼻疽杆菌
等在干燥的环境中仅能存活几天，而结核杆菌能耐
受干燥 90d。细菌的芽孢对干燥有强大的抵抗力，
如炭疽杆菌芽孢在干燥条件下可存活数十年。霉菌
的孢子对干燥也有较强的抵抗力。
用途 微生物在干燥环境中不能生长繁殖，常用干
燥法来保存食品、饲料、谷类、皮张、药材等。利
用高浓度的盐水或糖水保存食品，高渗溶液吸取菌
体水分，造成生理干燥而抑菌。
课件 002 兽医微生物学教学课件 18
四、超 声 波 频率在 2万 -20万 hz的声波称为超声波。
细菌和酵母菌在超声波作用下于几十分钟内死亡。小型
病毒、芽抱对超声波有抵抗力。
用途 未应用于消毒灭菌 。 主要用于裂解细胞,
提取细胞组分等 。
五, 微 波 从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线
电波称为微波 。 微波灭菌, 主要是利用微波的加
热作用完成 （ 交变电场, 分子旋转振动, 分子相互作
用产生摩擦力, 分子克服摩擦力产生热量, 使物品升温,
起加热灭菌作用 ） 。
用途 这种灭菌法, 需时短, 加热均匀 。 可用
于非金属医药用品等的灭菌 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 19
六、滤 过
通过机械阻留作用将液体或空气中细菌等微生
物除去的方法。
用途 液体培养基和药物除菌 。 糖培养液、特
殊培养基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、维生
素、氨基酸等不能加热灭菌的液体常用滤器过滤
除菌 （多用蔡氏滤器、更换滤膜滤器或一次性滤器）。
病毒液分离除菌 用于病毒分离 。
空气净化除菌 超净工作台, 无菌隔离器, 无
菌操作室, 实验动物室以及疫苗, 药品, 食品等
生产中洁净厂房的空气过滤除菌 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 20
第二节 化学因素对微生物的影响
许多化学药物能抑制或杀死微生物，已广泛用于
消毒、防腐及治疗疾病。
防腐消毒剂 用于杀灭体外病原微生物的化学药
物称为 消毒剂 ；用于抑制微生物生长繁殖的化学药
物称为 防腐剂或抑菌剂,消毒剂在低浓度时只能抑
菌，而防腐剂在高浓度时也能杀菌，它们之间并没
有严格的界限，统称为 防腐消毒剂 。
化学治疗剂 用于消除宿主体内病原微生物或其
他寄生虫的化学药物。
课件 002 兽医微生物学教学课件 21
二者区别 消毒剂在杀灭病原微生物的同时，对
动物体有损害作用，用于环境的消毒；而化学治疗
剂对宿主和病原微生物具有选择性，它们能阻碍微
生物代谢某些环节，使其生命活动受到抑制或使其
死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。
一、消毒剂的种类及其应用
消毒剂的种类很多，一般可根据用途与消毒剂特
点选择使用。
理想的消毒剂 杀菌力强、无腐蚀性、能长期保
存、对动物毒性很小、无残留污染、价格低等 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 22
消毒剂的分类
（ 1）使菌体蛋白质变性 如酚类、醇类、重金属盐
类、酸碱类、醛类；
（ 2）损伤胞浆膜 如酚类 (低浓度 )、表面活性剂、醇
类等脂溶剂；
（ 3）干扰细菌的酶系统和代谢 如氧化剂、重金属盐
类 (低度 )；
（ 4）改变核酸功能 如染料、烷化剂等。
二、影响消毒剂作用的因素
1.消毒剂的性质、浓度和作用时间 ；
2.微生物的种类与数量 ；
3.温度 温度升高可增强消毒剂的杀菌效果 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 23
4.酸碱度 消毒剂杀菌作用受 pH影响。如新洁尔灭
pH 9时杀菌作用强。
5.有机物 环境中有机物, 可降低消毒剂效果 。
6.药物颉抗 两种消毒剂合用时, 有的能相互颉抗 。
如阴离子剂肥皂与阳离子剂新洁尔灭 。
7,其他因素 湿度, 穿透力, 表面张力等 。
第三节 生物因素对微生物的影响
自然界中，各种微生物之间，或微生物与动植物
之间，经常呈现相互影响的作用，如寄生、共生和
颉抗等现象。
课件 002 兽医微生物学教学课件 24
导致颉抗的原因有抗生素和细菌素、植物杀菌素、
噬菌体等。
一, 抗生素, 细菌素素和植物杀菌
抗生素 某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑
制或杀死另一些微生物的特殊物质 。 如链霉素 （ 放
线菌 ）, 青霉菌 （ 霉菌 ） 和多粘菌素 （ 细菌 ） 。 己发现 2500
多种, 而最常用的只有几十种 。 抗生素的抗菌作用主要是干
扰细菌的代谢过程, 抑制或杀灭微生物 。
细菌素 是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的
蛋白质，只能作用于与它同种不同株的细菌以及与
它亲缘关系相近的细菌。 如大肠菌素，可作用于大肠杆
菌及近缘的志贺菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌和巴氏杆菌等。
课件 002 兽医微生物学教学课件 25
植物杀菌素 某些植物中存在的杀菌物质一般称为
植物杀菌素。 如黄连、黄柏、黄芩、大蒜、金银花、连翘、
鱼腥草、穿心莲、马齿苋、板蓝根等都含有杀菌物质。
二,噬 菌 体
噬菌体是寄生于细菌、霉形体、螺旋体、放线菌
及真菌等的一类病毒，也称微生物病毒。
1,形态结构 外形有蝌蚪形、微球形、杆形和柠檬
形。由蛋白质衣壳内含一分子线状双股 DNA构成。
2,抗原性及抵抗力 噬菌体具有抗原性，能刺激机
体产生相应抗体。抵抗力较强，但对一般消毒剂敏
感。
课件 002 兽医微生物学教学课件 26
3,噬菌体的增殖 噬菌体的增殖过程分为吸附、
侵入、生物合成、成熟和释放四个阶段。与动物病
毒相似。
噬菌体在固体培养基上可使相应细菌裂解而呈现
无细菌生长的区域, 即为 噬菌现象 。 由于噬菌体裂
解使相应菌苔上形成的一个个透亮不长菌的圆斑,
称为 噬菌斑, 亦称 空斑 。
噬菌斑可用于细菌或噬菌体的鉴定和纯种分离 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 27
4,噬菌体与寄主细菌的关系 可分为：溶菌反应
和溶原化两种 。
凡能使寄主细胞裂解引起溶菌反应的噬菌体, 称
为 毒性噬菌体 或 烈性噬菌体 。 侵人寄主细胞后,
将其基因整合于细菌基因组中, 随细菌的分裂而
传给后代, 不形成病毒粒子, 不裂解细菌的现象
叫 溶原化 。 引起溶原化的噬菌体叫 温和噬菌体 或
溶原性噬菌体 。 带有噬菌体基因的细菌叫 溶原性
细菌 。 溶原性细菌可自发地终止其溶原性, 引起
溶菌反应而释出噬菌体 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 28
5,噬菌体的应用
细菌的鉴定和分型 噬菌体的噬菌作用具有种和型
的特异性,即一种噬菌体只能裂解一种（型）相应的细菌。
检测未知细菌 应用噬菌体效价增长试验可检测标
本中的相应细菌 。 若其效价明显升高, 则表明标本中有某
种细菌存在 。
分子生物学工具 噬菌体结构简单，易操作，可作
为研究病毒增殖的模式。 基因较少，已用于研究核酸复
制、转录、重组及基因表达与调控等。还可作为基因载体，
应用于遗传工程研究。
用于生物防治
危害抗生素和发酵工业
课件 002 兽医微生物学教学课件 29
复习思考题
1.何谓灭菌、消毒、防腐?试比较它们的异同，并举例说明。
2.何谓无菌、无菌法，无菌法有何实践意义?
3.列述影响微生物的主要物理因素及其实用价值。
4.试述各种热力灭菌法的方法、条件、原理及用途。
5.根据对微生物的灭活作用，辐射可分为哪些类型?列举常用
的辐射方法及其杀菌原理和应用。
6.试述过滤除菌的概念及其应用。
7.何谓消毒剂、防腐剂、化学治疗剂?试述消毒剂的杀菌机制
及影响消毒剂杀菌作用的因素。
8.何谓抗生素、细菌素，二者的作用原理如何?
9.试述噬菌体、噬菌现象、噬斑的概念及噬菌体的形态结构。
10.试述噬菌体与寄主细菌的关系及其应用。
11.噬菌体有何主要作用?
12.何谓微生物的亚致死性损伤及亚致死性损伤细胞，研究亚
致死性损伤有何实践意义?
课件 002 兽医微生物学教学课件 30
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2003/02/28
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绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简
史，微生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务
与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，
细菌生态、致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态
反应，免疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、
致病性、微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病
的诊断与防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病
毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊
断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌
抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、
生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应等。
内
容
简
介
课件 002 兽医微生物学教学课件 4
第一章 细菌的形态与构造
第二章 细菌的生理
第三章 消毒与灭菌
第四章 细菌的微生态
第五章 细菌的致病机理
第六章 细菌的遗传变异
第七章 细菌的分类与命名
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第三章 消毒与灭菌
第一节 物理因素对微生物的影响
第二节 化学因素对微生物的影响
第三节 生物因素对微生物的影响
第四节 微生物的亚致死性损伤及其修复
课件 002 兽医微生物学教学课件 6
第三章 消毒与灭菌
微生物的生命活动极易受外界环境条件影响。了
解外界环境因素对微生物的影响，以便控制外界因
素，达到利用或消灭微生物的目的。
本章着重介绍物理、化学、生物学因素对微生物
的抑制或杀灭作用以及消毒灭菌方法。介绍几个基
本概念。
杀菌作用 指某些物质或因素具有的杀死微生物
的作用。
抑菌作用 指某些物质或因素所具有的抑制微生
物生长繁殖的作用。
课件 002 兽医微生物学教学课件 7
抗菌作用 指某些药物所具有的抑制或杀灭微生
物的作用。
灭菌 指杀灭物体中所有微生物（包括芽孢和孢
子）的方法。
消毒 指杀灭物体中病原微生物的方法。用于消
毒的化学药品叫消毒剂或杀菌剂。
防腐 指阻止或抑制微生物生长繁殖的方法。用
于防腐的化学药品叫防腐剂或抑菌剂。
无菌 指在一定空间内没有活微生物的状态。防
止任何微生物进入动物机体或物体的方法，叫 无菌
法 。以无菌法进行的操作称无菌技术或 无菌操作 。
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第一节 物理因素对微生物的影响
对微生物影响较大的物理因素包括,温度、辐射、
干燥、声波、微波、滤过等 。
一、温 度
适当的温度有利于微生物的生长发育，温度过高
或过低都会影响微生物的新陈代谢和生长发育，甚
至使之死亡。
1,低温 数微生物对低温具有很强的抵抗力。当微
生物处于最低生长温度以下时，其代谢活动降低到
最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力。
常在低温下保存微生物种。
课件 002 兽医微生物学教学课件 9
冷冻保存 动存微生物种时，必须迅速降低温度，
起用时也应迅速融化。防止胞浆水分形成冰晶，破
坏胞浆胶体、胞浆膜和细胞壁。 反复冷冻与融化对
微生物具有很大伤害，应尽力避免。
为了减少细菌在冷冻时的死亡，可于菌液内加入
10％左右甘油、蔗糖、脱脂乳或 5％二甲基亚砜作
为保护剂。
冷冻真空干燥（冻干）法 是保存菌毒种、疫苗、
补体、血清等的良好方法，可保存微生物及生物制
剂数月至数年不失活。 其原理是迅速冷冻，不形成冰晶，
同时抽真空让固体冰中的水分子升华除去，封闭瓶口保存。 。
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2,高温 高温对微生物具有致死作用，常用于消毒
和灭菌。高温对菌体蛋白质、核酸、酶系统等产生
破坏作用。导致菌体死亡。
高温灭菌法 分 干热灭菌 和 湿热灭菌 两类，湿热传
导性好、穿透力强灭菌效力大。
（ 1）干热灭菌法 包括火焰灭菌和热空气灭菌两类。
火焰灭菌法 是以火焰直接烧灼杀死物体中微生
物的方法。分为 灼烧 和 焚烧 两种。
热空气灭菌 指利用干热灭菌器以干热空气进行
灭菌的方法。用于耐高温物品。灭菌条件,160℃
维持 l-2h，才能杀死所有微生物（芽孢、孢子）。
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（ 2）湿热灭菌法 有 煮沸灭菌, 巴氏消毒,
流通蒸汽灭菌, 高压蒸汽灭菌 几种。
煮沸灭菌 煮沸 10-20min可杀死所有细菌繁
殖体，芽抱常需煮沸 1-2h才被杀死。手术器
械、注射器、针头及食具等可用此法。
巴氏消毒法 以较低温度杀灭液态食品中病
原菌或特定微生物，尽量保持其营养成分和
风味的消毒方法。主要用于葡萄酒、啤酒、
果酒及牛乳等食品的消毒。
课件 002 兽医微生物学教学课件 12
巴氏消毒法具体方法有三种
低温维持巴氏消毒法（ LTH） 63-65℃ 30min；
高温瞬时巴氏消毒法 (HTST) 71-72℃ 15s；
超高温巴氏消毒法 (UHT) 132℃ 1-2s。
消毒后均须迅速冷却至 10℃ 以下，促进细菌死亡，
称为 冷击法 。超高温巴氏消毒的鲜乳在常温下，保存
期可达 6个月。
流通蒸汽灭菌法 是利用蒸汽在流通蒸汽灭菌器内进
行灭菌的方法,100℃ 维持 30min。
间歇灭菌法, 100℃ 维持 30min,37℃ 温箱过夜，
连续进行 3次灭菌和 2次保温，达到完全灭菌目的。 用
于不耐高温的培养基的灭菌。
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高压蒸汽灭菌法 即用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的
方法。是应用最广、最有效的灭菌方法。
原理 给 高压蒸汽灭菌器 加水、放入被灭菌物品、密闭、
加热，蒸汽产生压力，随压力的增大水的沸点升高，温度也升
至 100℃ 以上，以提高灭菌的效果，缩短灭菌时间。
灭菌条件 常用 1.02kg／ cm2 （每平方英寸 15磅）
的压力，在 12l.3℃ 温度下，维持 15-20min，即可杀死
所有微生物，达到完全灭菌的目的。
常用于 如培养基、溶液、器皿、器械、敷料、橡皮
手套、工作服和小实验动物尸体等的灭菌。
灭菌注意 须充分排除灭菌器内原有的冷空气。
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二、辐 射
包括电磁波辐射和粒子辐射, 对微生物作用为：
电离辐射 和 非电离辐射 。 非电离辐射包括可见光,
日光, 紫外线 。
1.可见光 指在红外线和紫外线之间, 肉眼可见的
光线, 波长 400-800nm。 可见光线只有微弱的杀菌
作用 。
2.阳光 直射日光有强烈杀菌作用, 是天然杀菌因
素, 紫外线 是日光杀菌作用的主要因素 。 许多微生
物在直射日光下, 半小时到数小时即可死亡 。 芽抱
的抵抗力强, 经 20h才死亡 。
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3.紫外线 紫外线中波长 200-300nm部分具有杀菌作用，其
中以 265-266nm段的杀菌力最强，这与 DNA吸收光谱范围一
致。常用的紫外线杀菌灯波长为 253.7nm，杀菌力强而稳定。
缺点 紫外线的穿透力不强，即使是很薄的玻璃
也不能透过，所以只用物体表面消毒。
用途 微生物实验室、无菌室、手术室、传染病
房、种蛋室等的空气消毒。
原理 紫外线照射后, DNA分子吸收约 260nm紫外线, 使
同一条 DNA链上相邻胸腺嘧啶产生共价结合成二聚体, 影响
DNA复制与转录, 引起致死性突变而死亡 。 此外, 紫外线可
使空气中分子氧变为臭氧, 臭氧放出氧化能力强的原子氧,
呈现杀菌作用 。
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剂量与诱变育种 紫外线的杀菌作用随照射量的
增加而加强。若紫外线照射量不足以致死细菌，则
可引起核酸的部分改变，使其发生突变。因此，紫
外线照射也是一种有效的诱变方法。
4.电离辐射 放射性同位素射线（ α β γ）和 X射线等
可使被照射物质发生电离。
杀菌作用 X射线 （ 波长 0.06-13.6nm）, γ射线 (波
长 0.00l-0.4nm) 的电离辐射微弱 。 α与 β射线的电离辐
射作用较强, 有抑杀菌作用 。
用途 β与 γ射线穿透力强 。 主要是 X, γ和 β射线,
用于消毒, 食品保藏和育种等方面 。
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三、干 燥和渗透压
作用 微生物在干燥的环境中失去水分，新陈代谢
障碍，菌体蛋白变性，逐渐死亡。微生物对干燥的
抵抗力差异很大。巴氏杆菌、嗜血杆菌、鼻疽杆菌
等在干燥的环境中仅能存活几天，而结核杆菌能耐
受干燥 90d。细菌的芽孢对干燥有强大的抵抗力，
如炭疽杆菌芽孢在干燥条件下可存活数十年。霉菌
的孢子对干燥也有较强的抵抗力。
用途 微生物在干燥环境中不能生长繁殖，常用干
燥法来保存食品、饲料、谷类、皮张、药材等。利
用高浓度的盐水或糖水保存食品，高渗溶液吸取菌
体水分，造成生理干燥而抑菌。
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四、超 声 波 频率在 2万 -20万 hz的声波称为超声波。
细菌和酵母菌在超声波作用下于几十分钟内死亡。小型
病毒、芽抱对超声波有抵抗力。
用途 未应用于消毒灭菌 。 主要用于裂解细胞,
提取细胞组分等 。
五, 微 波 从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线
电波称为微波 。 微波灭菌, 主要是利用微波的加
热作用完成 （ 交变电场, 分子旋转振动, 分子相互作
用产生摩擦力, 分子克服摩擦力产生热量, 使物品升温,
起加热灭菌作用 ） 。
用途 这种灭菌法, 需时短, 加热均匀 。 可用
于非金属医药用品等的灭菌 。
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六、滤 过
通过机械阻留作用将液体或空气中细菌等微生
物除去的方法。
用途 液体培养基和药物除菌 。 糖培养液、特
殊培养基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、维生
素、氨基酸等不能加热灭菌的液体常用滤器过滤
除菌 （多用蔡氏滤器、更换滤膜滤器或一次性滤器）。
病毒液分离除菌 用于病毒分离 。
空气净化除菌 超净工作台, 无菌隔离器, 无
菌操作室, 实验动物室以及疫苗, 药品, 食品等
生产中洁净厂房的空气过滤除菌 。
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第二节 化学因素对微生物的影响
许多化学药物能抑制或杀死微生物，已广泛用于
消毒、防腐及治疗疾病。
防腐消毒剂 用于杀灭体外病原微生物的化学药
物称为 消毒剂 ；用于抑制微生物生长繁殖的化学药
物称为 防腐剂或抑菌剂,消毒剂在低浓度时只能抑
菌，而防腐剂在高浓度时也能杀菌，它们之间并没
有严格的界限，统称为 防腐消毒剂 。
化学治疗剂 用于消除宿主体内病原微生物或其
他寄生虫的化学药物。
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二者区别 消毒剂在杀灭病原微生物的同时，对
动物体有损害作用，用于环境的消毒；而化学治疗
剂对宿主和病原微生物具有选择性，它们能阻碍微
生物代谢某些环节，使其生命活动受到抑制或使其
死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。
一、消毒剂的种类及其应用
消毒剂的种类很多，一般可根据用途与消毒剂特
点选择使用。
理想的消毒剂 杀菌力强、无腐蚀性、能长期保
存、对动物毒性很小、无残留污染、价格低等 。
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消毒剂的分类
（ 1）使菌体蛋白质变性 如酚类、醇类、重金属盐
类、酸碱类、醛类；
（ 2）损伤胞浆膜 如酚类 (低浓度 )、表面活性剂、醇
类等脂溶剂；
（ 3）干扰细菌的酶系统和代谢 如氧化剂、重金属盐
类 (低度 )；
（ 4）改变核酸功能 如染料、烷化剂等。
二、影响消毒剂作用的因素
1.消毒剂的性质、浓度和作用时间 ；
2.微生物的种类与数量 ；
3.温度 温度升高可增强消毒剂的杀菌效果 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 23
4.酸碱度 消毒剂杀菌作用受 pH影响。如新洁尔灭
pH 9时杀菌作用强。
5.有机物 环境中有机物, 可降低消毒剂效果 。
6.药物颉抗 两种消毒剂合用时, 有的能相互颉抗 。
如阴离子剂肥皂与阳离子剂新洁尔灭 。
7,其他因素 湿度, 穿透力, 表面张力等 。
第三节 生物因素对微生物的影响
自然界中，各种微生物之间，或微生物与动植物
之间，经常呈现相互影响的作用，如寄生、共生和
颉抗等现象。
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导致颉抗的原因有抗生素和细菌素、植物杀菌素、
噬菌体等。
一, 抗生素, 细菌素素和植物杀菌
抗生素 某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑
制或杀死另一些微生物的特殊物质 。 如链霉素 （ 放
线菌 ）, 青霉菌 （ 霉菌 ） 和多粘菌素 （ 细菌 ） 。 己发现 2500
多种, 而最常用的只有几十种 。 抗生素的抗菌作用主要是干
扰细菌的代谢过程, 抑制或杀灭微生物 。
细菌素 是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的
蛋白质，只能作用于与它同种不同株的细菌以及与
它亲缘关系相近的细菌。 如大肠菌素，可作用于大肠杆
菌及近缘的志贺菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌和巴氏杆菌等。
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植物杀菌素 某些植物中存在的杀菌物质一般称为
植物杀菌素。 如黄连、黄柏、黄芩、大蒜、金银花、连翘、
鱼腥草、穿心莲、马齿苋、板蓝根等都含有杀菌物质。
二,噬 菌 体
噬菌体是寄生于细菌、霉形体、螺旋体、放线菌
及真菌等的一类病毒，也称微生物病毒。
1,形态结构 外形有蝌蚪形、微球形、杆形和柠檬
形。由蛋白质衣壳内含一分子线状双股 DNA构成。
2,抗原性及抵抗力 噬菌体具有抗原性，能刺激机
体产生相应抗体。抵抗力较强，但对一般消毒剂敏
感。
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3,噬菌体的增殖 噬菌体的增殖过程分为吸附、
侵入、生物合成、成熟和释放四个阶段。与动物病
毒相似。
噬菌体在固体培养基上可使相应细菌裂解而呈现
无细菌生长的区域, 即为 噬菌现象 。 由于噬菌体裂
解使相应菌苔上形成的一个个透亮不长菌的圆斑,
称为 噬菌斑, 亦称 空斑 。
噬菌斑可用于细菌或噬菌体的鉴定和纯种分离 。
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4,噬菌体与寄主细菌的关系 可分为：溶菌反应
和溶原化两种 。
凡能使寄主细胞裂解引起溶菌反应的噬菌体, 称
为 毒性噬菌体 或 烈性噬菌体 。 侵人寄主细胞后,
将其基因整合于细菌基因组中, 随细菌的分裂而
传给后代, 不形成病毒粒子, 不裂解细菌的现象
叫 溶原化 。 引起溶原化的噬菌体叫 温和噬菌体 或
溶原性噬菌体 。 带有噬菌体基因的细菌叫 溶原性
细菌 。 溶原性细菌可自发地终止其溶原性, 引起
溶菌反应而释出噬菌体 。
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5,噬菌体的应用
细菌的鉴定和分型 噬菌体的噬菌作用具有种和型
的特异性,即一种噬菌体只能裂解一种（型）相应的细菌。
检测未知细菌 应用噬菌体效价增长试验可检测标
本中的相应细菌 。 若其效价明显升高, 则表明标本中有某
种细菌存在 。
分子生物学工具 噬菌体结构简单，易操作，可作
为研究病毒增殖的模式。 基因较少，已用于研究核酸复
制、转录、重组及基因表达与调控等。还可作为基因载体，
应用于遗传工程研究。
用于生物防治
危害抗生素和发酵工业
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复习思考题
1.何谓灭菌、消毒、防腐?试比较它们的异同，并举例说明。
2.何谓无菌、无菌法，无菌法有何实践意义?
3.列述影响微生物的主要物理因素及其实用价值。
4.试述各种热力灭菌法的方法、条件、原理及用途。
5.根据对微生物的灭活作用，辐射可分为哪些类型?列举常用
的辐射方法及其杀菌原理和应用。
6.试述过滤除菌的概念及其应用。
7.何谓消毒剂、防腐剂、化学治疗剂?试述消毒剂的杀菌机制
及影响消毒剂杀菌作用的因素。
8.何谓抗生素、细菌素，二者的作用原理如何?
9.试述噬菌体、噬菌现象、噬斑的概念及噬菌体的形态结构。
10.试述噬菌体与寄主细菌的关系及其应用。
11.噬菌体有何主要作用?
12.何谓微生物的亚致死性损伤及亚致死性损伤细胞，研究亚
致死性损伤有何实践意义?
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