1
组织学
与胚胎学
教学课件
西 安 交 通 大 学 医 学 院
人体解剖与组织胚胎学系
2
Dr,Jinsong Zhou
绪论 (Introduction)
I,什么是组织学
(Histology)?
组织学是研究人体 正常
细微 结构及其相关功能
的科学。
A,微观结构,
1,光学显微镜 (Light
microscope,LM),计量单
位是 微米 (μm )。
(1 μ m =0.001 mm) 。
2,电子显微镜 (Electron
microscope,EM),计量单
位是 纳 米 (nm )。
(1 nm =0.001 μ m) 。
3
光学显微镜基本结构,
1,照明灯 (Lamp)
2,聚光器 (Condenser)
3,载物台和切片夹
(Mechanical stage and
specimen retainer)
4,推进器 (Mechanical stage
adjustment knob)
5,物镜 (Objectives)
6,粗细螺旋 (Course and
fine focus knob)
7,目镜 (Oculars)
8,照相机等接口
(Connection to camera,etc.)
4
B,相关功能, 微观结构和其功能 相适应, 反之亦然 。
C,人体结构的 4个层次,
1,细胞 (Cell),人体结构的基本结构和功能单位。
2,组织 (Tissue),由一群结构和功能相同或相似的细胞 (及其
细胞间质 )构成。人体内有 4种基本组织:上皮组织,结缔
组织,肌组织和神经组织。
3,器官 (Organ),由组织有机地结合起来而构成。
4,系统 (System),由结构相似且功能相关的器官构成。
5
II,为什么要学习组织学?
1,组织学又叫 微观解剖学
(Microanatomy),是 解剖学 知识
的进一步完善。
2,结构是功能的基础,学好组
织学是学好 生理学 (Physiology)
的基础。
3,只有了解正常结构,才能学
习其异常变化。因此组织学是
病理学 (Pathology)的基础。
4,组织学成绩不及格,必须补
考,重修和留级。
6
III,怎样学习组织学?
A,LM技术,
分辨率 (Resolution)是指能够
分辨相邻两点之间的 最小距
离 。 LM的分辨率约为 200μm
。
1,切片 (Section),将组织切薄
使 光线可以透过 。
a,固定 (Fixation),为 保存 新鲜
组织的微观结构,尽快将组
织浸入到酒精,甲醛,苦味
酸,Bouin’s 液或 Zenker’s液
等固定剂中。
7
b,石蜡包埋 (Paraffin
embedding):
* 脱水 (Dehydration),用浓度
逐渐升高的 酒精 (70~100%)
将组织中的水完全置换出
来。
* 透明 (Clearing),用 二甲苯
完全置换出酒精。
* 浸蜡 (Infiltration),在
60~62?C时,用 液态石蜡 完
全置换出二甲苯。室温时
石蜡凝固 成固态,内含待
切组织。
8
c,切片, 用切片机将组织切成 1~20μm厚 的蜡片,然后将其 放
到温水上,待其完全展开后,裱到 有粘附剂的载玻片上。
9
除切片外,还有其他处理组织的方法:
* 铺片 (Whole mount),用于很薄的组织,如肠系膜。
* 磨片 (Ground section),用于很坚硬的组织,如骨和牙。
* 涂片 (Smear),用于液态组织,如血液,精液和唾液。
10
2,染色 (Staining),染料可以将微观结构显示不同的颜色
以便观察鉴别。在染色前,需要 脱蜡入水,因为染料
是水溶性的。
11
a,最常用的染料是 苏木素 (Hematoxylin,H)和 伊红 (Eosin,E)。
* 苏木素是 碱性 染料,蓝紫色,可以使细胞核等着色。被苏木
素着色的结构本身为 酸性,具有 嗜碱性 (Basophilic)。
12
* 伊红是 酸性染料, 粉红色 。可以将大多数细胞的细胞质染
成红色。 被伊红着色的结构本身为 碱性,具有 嗜酸性
(Acidophilic)。
* 不易被苏木素和伊红着色的结构具有 嗜中性 (Neutrophilic)。
13
肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝 (一种蓝色染料 )染成紫红色
b,如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同,该结
构具有 异染性 (Metachromasia)。
c,如果某结构能将银离子还原成银原子,并吸附银原子
而使自身显示棕黑色,该结构具有 嗜银性 (Argyrophilic)。
14网状纤维具有嗜银性,因此可以用银盐染色来显示。
15
H&E染色的中等动静脉
d,不同的染色方法,其结果不同。
16醛复红染色的中等动静脉
17
在染色后,重新进入酒精和二甲苯,最后用中性树胶
封片,以便长期保存。
* 切片, 固定 → 梯度酒精 → 二甲苯 → 石蜡。
* 染色, 石蜡 → 二甲苯 → 梯度酒精 → 水。
* 保存, 水 → 梯度酒精 → 二甲苯 → 中性树胶。
18
B,EM技术,
1,EM可分为 透射电
镜 (TEM)和 扫描电镜
(SEM)2类。
2,EM的原理和 LM相
似,但用 电子束 代替
光线,磁场 代替玻璃
透镜。分辨率约为
0.2 nm。
19
3,EM的组织的制备与 LM的相似,但有以下不同,
a,通常使用戊二醛和四氧化锇作 双重固定 。
b,切片 超薄 (厚度小于 90nm),塑胶 包埋。
c,用 重金属盐 如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此,所有
原始的电镜图片都是 黑白 的。
20SEM显示巨噬细胞表面
21
TEM显示胰腺腺泡
细胞内部结构。
22
C,特殊的染色方法,
1,组织化学 (Histochemistry,细胞化学 )法, 通过生物化学的
方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物,来显示
微细结构的位置,然后用显微镜观察。
PAS 反应, 用来显示 多糖 的分布。先用过碘酸 (Periodic
acid )将多糖氧化,在多糖表面形成戊二醛结构,然后
用无色亚硫酸品红 ( Schiff试剂 ) 还原戊二醛形成 紫红色
沉淀 。
23肝脏的 PAS染色
24
2,免疫细胞化学 (Immunocytochemistry)染色法,
a,待测结构或化学物质被看作抗原 (Antigen),通过非常敏感
和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体 (Antibody)结合,
然后显示标记物,在原位产生不溶有色的反应产物,最后
用显微镜观察。
25
b,2种基本染色法,
* 直接法, 第一抗体被标记。
* 间接法, 第一抗体也被看作抗原,而第二抗体被标记。因
为信号被放大,因此更加敏感。
3,放射自显影 (Autoradiography),给细胞所要代谢的物质分
子上标记放射性物质如 I125等,间隔照相,从而追踪该物质
代谢途径。
26
D,学习组织学应注意的问题,
1,体内结构为立体的,三维的,而课本、讲义和显微镜
下的结构均为平面的,二维的。
2,学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合。
组织学
与胚胎学
教学课件
西 安 交 通 大 学 医 学 院
人体解剖与组织胚胎学系
2
Dr,Jinsong Zhou
绪论 (Introduction)
I,什么是组织学
(Histology)?
组织学是研究人体 正常
细微 结构及其相关功能
的科学。
A,微观结构,
1,光学显微镜 (Light
microscope,LM),计量单
位是 微米 (μm )。
(1 μ m =0.001 mm) 。
2,电子显微镜 (Electron
microscope,EM),计量单
位是 纳 米 (nm )。
(1 nm =0.001 μ m) 。
3
光学显微镜基本结构,
1,照明灯 (Lamp)
2,聚光器 (Condenser)
3,载物台和切片夹
(Mechanical stage and
specimen retainer)
4,推进器 (Mechanical stage
adjustment knob)
5,物镜 (Objectives)
6,粗细螺旋 (Course and
fine focus knob)
7,目镜 (Oculars)
8,照相机等接口
(Connection to camera,etc.)
4
B,相关功能, 微观结构和其功能 相适应, 反之亦然 。
C,人体结构的 4个层次,
1,细胞 (Cell),人体结构的基本结构和功能单位。
2,组织 (Tissue),由一群结构和功能相同或相似的细胞 (及其
细胞间质 )构成。人体内有 4种基本组织:上皮组织,结缔
组织,肌组织和神经组织。
3,器官 (Organ),由组织有机地结合起来而构成。
4,系统 (System),由结构相似且功能相关的器官构成。
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II,为什么要学习组织学?
1,组织学又叫 微观解剖学
(Microanatomy),是 解剖学 知识
的进一步完善。
2,结构是功能的基础,学好组
织学是学好 生理学 (Physiology)
的基础。
3,只有了解正常结构,才能学
习其异常变化。因此组织学是
病理学 (Pathology)的基础。
4,组织学成绩不及格,必须补
考,重修和留级。
6
III,怎样学习组织学?
A,LM技术,
分辨率 (Resolution)是指能够
分辨相邻两点之间的 最小距
离 。 LM的分辨率约为 200μm
。
1,切片 (Section),将组织切薄
使 光线可以透过 。
a,固定 (Fixation),为 保存 新鲜
组织的微观结构,尽快将组
织浸入到酒精,甲醛,苦味
酸,Bouin’s 液或 Zenker’s液
等固定剂中。
7
b,石蜡包埋 (Paraffin
embedding):
* 脱水 (Dehydration),用浓度
逐渐升高的 酒精 (70~100%)
将组织中的水完全置换出
来。
* 透明 (Clearing),用 二甲苯
完全置换出酒精。
* 浸蜡 (Infiltration),在
60~62?C时,用 液态石蜡 完
全置换出二甲苯。室温时
石蜡凝固 成固态,内含待
切组织。
8
c,切片, 用切片机将组织切成 1~20μm厚 的蜡片,然后将其 放
到温水上,待其完全展开后,裱到 有粘附剂的载玻片上。
9
除切片外,还有其他处理组织的方法:
* 铺片 (Whole mount),用于很薄的组织,如肠系膜。
* 磨片 (Ground section),用于很坚硬的组织,如骨和牙。
* 涂片 (Smear),用于液态组织,如血液,精液和唾液。
10
2,染色 (Staining),染料可以将微观结构显示不同的颜色
以便观察鉴别。在染色前,需要 脱蜡入水,因为染料
是水溶性的。
11
a,最常用的染料是 苏木素 (Hematoxylin,H)和 伊红 (Eosin,E)。
* 苏木素是 碱性 染料,蓝紫色,可以使细胞核等着色。被苏木
素着色的结构本身为 酸性,具有 嗜碱性 (Basophilic)。
12
* 伊红是 酸性染料, 粉红色 。可以将大多数细胞的细胞质染
成红色。 被伊红着色的结构本身为 碱性,具有 嗜酸性
(Acidophilic)。
* 不易被苏木素和伊红着色的结构具有 嗜中性 (Neutrophilic)。
13
肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝 (一种蓝色染料 )染成紫红色
b,如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同,该结
构具有 异染性 (Metachromasia)。
c,如果某结构能将银离子还原成银原子,并吸附银原子
而使自身显示棕黑色,该结构具有 嗜银性 (Argyrophilic)。
14网状纤维具有嗜银性,因此可以用银盐染色来显示。
15
H&E染色的中等动静脉
d,不同的染色方法,其结果不同。
16醛复红染色的中等动静脉
17
在染色后,重新进入酒精和二甲苯,最后用中性树胶
封片,以便长期保存。
* 切片, 固定 → 梯度酒精 → 二甲苯 → 石蜡。
* 染色, 石蜡 → 二甲苯 → 梯度酒精 → 水。
* 保存, 水 → 梯度酒精 → 二甲苯 → 中性树胶。
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B,EM技术,
1,EM可分为 透射电
镜 (TEM)和 扫描电镜
(SEM)2类。
2,EM的原理和 LM相
似,但用 电子束 代替
光线,磁场 代替玻璃
透镜。分辨率约为
0.2 nm。
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3,EM的组织的制备与 LM的相似,但有以下不同,
a,通常使用戊二醛和四氧化锇作 双重固定 。
b,切片 超薄 (厚度小于 90nm),塑胶 包埋。
c,用 重金属盐 如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此,所有
原始的电镜图片都是 黑白 的。
20SEM显示巨噬细胞表面
21
TEM显示胰腺腺泡
细胞内部结构。
22
C,特殊的染色方法,
1,组织化学 (Histochemistry,细胞化学 )法, 通过生物化学的
方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物,来显示
微细结构的位置,然后用显微镜观察。
PAS 反应, 用来显示 多糖 的分布。先用过碘酸 (Periodic
acid )将多糖氧化,在多糖表面形成戊二醛结构,然后
用无色亚硫酸品红 ( Schiff试剂 ) 还原戊二醛形成 紫红色
沉淀 。
23肝脏的 PAS染色
24
2,免疫细胞化学 (Immunocytochemistry)染色法,
a,待测结构或化学物质被看作抗原 (Antigen),通过非常敏感
和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体 (Antibody)结合,
然后显示标记物,在原位产生不溶有色的反应产物,最后
用显微镜观察。
25
b,2种基本染色法,
* 直接法, 第一抗体被标记。
* 间接法, 第一抗体也被看作抗原,而第二抗体被标记。因
为信号被放大,因此更加敏感。
3,放射自显影 (Autoradiography),给细胞所要代谢的物质分
子上标记放射性物质如 I125等,间隔照相,从而追踪该物质
代谢途径。
26
D,学习组织学应注意的问题,
1,体内结构为立体的,三维的,而课本、讲义和显微镜
下的结构均为平面的,二维的。
2,学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合。