第三章 细菌的生长和遗传变异提纲
生长
细菌群体生长 测定方法 (数量、重量)
间歇、连续式培养 —生长曲线 (数量或重量)
遗传与变异
分子机制
应用 —细菌筛选与驯化
(基因工程法菌种改良 )
第一节 细菌的生长及其特性
生长 —— 细菌群体数量的增长,不是个体体积的增长。
提问,为什么这里不考察细菌个体的生长呢?
个体太小,难观察计量
群体细菌对环境产生影响
各类细菌都是倾向于 群居 (物以类聚)
一山不容二虎
提问,弱势生物的群居优势是什么?
生存状况提高,攻防具佳
(攻) 群居的细菌获得营养的能力大大高于游离的细菌,(防) 群居的细菌不易被天敌伤害,
还能释放类似外激素的调节因子,使群体主动适应环境的变化,可有性生殖;
团结就是力量
外界因素引起的 细菌数量的增加、停滞、衰减等变化。
提问,如何研究呢?
测菌数量变化与外因的关系
细菌群体力量改变环境
通常都是将细菌群体作为研究对象,考察细菌群体的 生长规律 ——“生、老、病、死” 。
提问:细菌群的,生、老、病、死”表现为何呢?
一、细菌生长 (数量) 测定方法
( 1) 直接计数法
借助显微镜观察测定
优点,快速
提问,有哪些缺点?
缺点,不能区分细菌的死活
分四种
1.涂片染色法
0,01 m l 菌液 均匀 涂布,染色面积 1 c m
2
计数 每个视野细菌的平均数量细菌数量 = 视野中的菌液体积
= ××个 / mL
目镜中的视野每个视野的面积由目测微尺的单元格量出,视野中菌液的体积按比例折算
1视野菌液 (ml)= (0.01ml / 1cm2)*视野面积 (cm2)
2.计数器 (血球计数板) 测定法 计数格 =4 × 4=16 大格血球计数板
1 大格 =5 × 5=25 小格
1 小格 =0,05cm × 0,05cm =0,0025cm
2
总体积 =16 × 0,1 × 25 × 0,0025 =0,1cm
3
=0,1m L
每小格深 0,1cm
盖玻片载玻片
0.052cm2× 25
菌液滴 染色 (或不染色)
面积 1c m
2
血球计数板
0.1ml菌液提问,数了 125个小格中有 90个细菌,样品中的细菌浓度是多少?
(90个 ÷ 125) * 400 / 0.1ml =2880个
/ml
适用范围,测定个体较大的细菌或原生动物细菌个体 若 太小,过多,由于每一小格中细菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数 。
数数 细菌(或其他微生物或细胞)数目,( 一般数
125个小格 ),折算 样品细菌浓度;
3.比例计数法
比例 —— 样品菌液与等体积的血液混合,观测二者比例样品溶液与等体积的血液混合 涂片提问,如果 平均每个视野中 细菌数量 /红血球的数量 比例为 5.5,1,则细菌数量 =?
5.5× 400万个 /m l =2.2× 107个 /mL样品
红血球 数已知 (男性 400~500万个/ ml,女性 350~450万个/ ml),
平均 400万个 /ml
细菌红血球
4.比浊计数法
浊 —— 细菌悬浮液的浊度提问,如何定量二者关系呢?
细菌不完全透光,一定范围内 菌溶液的混浊度与菌数量成 正比