华东理工大学：基因工程：jygc 7

3t/ ?<?? [? 3t/ ?<?? [? yy? ?ê ?yvD fòZ ?ê ?yvD fòZ yy? 5 2 3 4 1 6 7 8 9 ×F DNA/ ?Dyy?￥'àQ ×F / ?Dyy?￥'àQ ×F DNA/ ?Dyy?￥'e ? ×F / ?Dyy?￥'e ? ×F DNA/ ? ?3￥'Hq ×F / ? ?3￥'Hq ×F DNA/ ?￥?TV? ×F / ?￥?TV? "￥y￥ X HDyó o￥y "￥y￥ X HDyó o￥y ?÷yv?? )?￥Vr ?÷yv?? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ?÷y??t%?￥Vr ?÷y??t%?￥Vr ?÷yVrát￥s ?B? ?÷yVrát￥s ?B? E ? )￥Vr"d ? )￥Vr"d 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr C ? )￥8"d ? )￥8"d B ? )￥ ó?"d ? )￥ ó?"d A ? )T1Vr?÷y s8 )￥+? ? )T1Vr?÷y s8 )￥+? F ?¨×F? 3áYéf ì ?¨×F? 3áYéf ì D ? )￥?"d ? )￥?"d A ? )T1Vr?÷y s8 )￥+? ? )T1Vr?÷y s8 )￥+? 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ? )￥s ?D+? ? )￥s ?D+? ? )
Yeast
 ^B?[è2 2Z Té?í?N2￥?% ? )

 ^B?[ è2  2 Z Té? í?N2 ￥?% ?? 3t
s ??05 )?
0 5? )
a?0 )?
?0?  ?? 3t
s ?? 05 )?
05? )
a ?0 )?
?0? )
a?? ) ?
??? )

? 56? ?? 500??F?b? )
a ?? ) ?
??? )

? ? ?? ??F?b? T av?? ) ^?÷yK? ?￥ e? 3tVr"d
5? ) ^K T av?? ) ^?÷yK? ?￥ e? 3tVr"d
5? ) ^K ? ?￥?? 3tVr"db ? ?￥?? 3tVr"db A ? )T1Vr?÷y s8 )￥+? ? )T1Vr?÷y s8 )￥+? 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ? )Vr?÷y￥a ] ? )Vr?÷y￥a ] ?yF??
yVr? e ?1?b#
L.?TeL ?yF??
yVr? e ?1?b#
L.?TeL ?|?÷yVráts ?à?!? ?|?÷yVráts ?à?!? μe?% )íE1E￥???aJraFy"d μe?% )íE1E￥???aJraFy"d v??? ? N?òa/ ?? ?ay\e?a?'? ÷ v??? ? N?òa/ ?? ?ay\e?a?'? ÷ ?cμ+s?￥hya?á=y í
 ?S FDAa?1??￥ ?cμ+s?￥hya?á=y í
 ?S a?1??￥ yy? s8"d
Generally Recognized As Safe GRAS
 yy? s8"d

 ? ) ^Ke?￥?? T 3t ? ) ^Ke?￥?? T 3t B ? )￥ ó?"d ? )￥ ó?"d 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr 4ú×F?aVrá q￥lM ó? ) 4ú×F?aVrá q￥lM ó? ) ]???T¨￥lM ó? ) ]???T¨￥lM ó? ) h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) <W¨??÷yVr￥? ó? ) <W¨??÷yVr￥? ó? ) <W¨??÷yVr￥? ó? ) <W¨??÷yVr￥? ó? ) "-X<W¨??÷yVr?ù?￥? ) ?
 "-X<W¨??÷yVr?ù?￥? ) ?
 ? ? ?S??
Saccharomyces cerevisiae
 ? ? ? S??

 X Z?? ? ?? ? X Z??
Kluyveromyces lactis
 X Z?? ? ? ? ? X Z??

 8? ? ?? ?￡8?
Pichia pastoris
 8? ? ? ? ?￡8?

 2? ? ?dY? 2?
Schizosaccharomyces pombe
 2? ? ? dY? 2?

 qà? ? ? ?qà?
Hansenula polymorpha
 qà? ? ?  ?qà?

 ?S??￥L.D?s0 3tDù? K1WD
?? ?￡8? ? S?? ￥L.D?s0 3tDù?K1WD
? ? ?￡8? Vr?÷yK ?Xb Vr?÷yK ?Xb 4ú×F?aVrá q￥lM ó? ) 4ú×F?aVrá q￥lM ó? ) ??áS???×F?aá 4úé ??￥lM ?? ??áS???×F?aá 4úé ??￥lM ?? ssc1 ??×F?as ? á ?0G ??￥ ATP ? ??×F?as ? á ?0G ??￥ ? ssc2 4ú×F?aVr  caFy 4ú×F?aVr  caFy rgr1 4ú×F?aVr  c ￡ü 4ú×F?aVr  c ￡ü ose1 4ú×F?aVr  c ￡ü 4ú×F?aVr  c ￡ü ssc11 ??×F?as ? ?t ? Y ??×F?as ? ?t ? rho - 4ú×F?aVr  c ￡ü - 4ú×F?aVr  c ￡ü lM ?? lM ?? 3tr? 3tr? T¨ê? T¨ê? ]???T¨￥lM ó? ) ]???T¨￥lM ó? ) ?]???￥lM ?? ?]???￥lM ?? mnn ? ] 3t???J? ? ] 3t???J? alg ? ê???§ y??J? ? ê???§ y??J? och ?§ y@F?J? ?§ y@F?J? lM ?? lM ?? 3tr? 3tr? ??? 3t￥?aé? ê???§ y ¤μ*v
 ??? 3t￥?aé? ê???§ y ¤μ*v
 ? ìèè?Y?aé￥ 3t?b ???ê?????§ ? ìèè?Y?aé￥ 3t?b???ê? ?? ? ?§ y ?sF?b y ?sF?b ? )?R?μ?a ? )?R?μ?a é￥?"d
?7 3 é￥?"d
?7 3 ?S??s÷?a￥ ?S??s÷?a￥ ?Q??4 e?
? ?Q??4 e?
? ??`_
yN? ??`_
yN? ??Jédè×1b ??Jédè×1b h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) W ío?￥?aé?3T¨ W ío?￥?aé?3T¨ ?a ?8 ?a ?8 Lys HOOC Ubiquitin 76 aa ubiquitin ligase E3 Lys ubiquitin ligase E3 Lys ??a ??a ??a h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) ? )W íG ???a?3"d￥I ?y ? )W íG ???a?3"d￥I ?y ? )μ 1?W íI ?y
 ? )μ 1?W íI ?y
 UBI 1 I ?W í -?ü %?a 52
CEP52
 ? 3éùVr ×?ù1> I ? W í ?ü %?a

 ? 3éùVr ×?ù1> UBI 2 I ?W í -?ü %?a 52
CEP52
 ? 3éùVr ×?ù1> I ? W í ?ü %?a

 ? 3éùVr ×?ù1> UBI 3 I ?W í -?ü %?a 76
CEP76
 ? 3éùVr ×?ù1> I ? W í ?ü %?a

 ? 3éùVr ×?ù1> UBI 4 I ?W í? 8  ? 3éù1> ×?ùVr I ? W í? 8  ? 3éù1> ×?ùVr ? )μt?W í ?¤ ?y
 ? )μt?W í ?¤ ?y
 UBC 1aUBC 2aUBC 3aUBC 4aUBC 5aUBC 6aUBC 7 h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) h W íG ???a?3T¨￥lM ó? ) W í?3o? ?h￥S?? W í?3o? ?h￥S?? S?? )?
W í?1? UBI 4yVr
 UBI 4 - lMé? S?? )?
W í?1? yVr
 lMé? UBI 4?J?
 ?J?
 ?è 3é
?%=3 ?W ís0￥i17 3é1?¤
 ?è 3é
?%=3 ?W ís0￥i17 3é1?¤
 yN UBI 4?JlMé ^?÷yVr ?X￥ s8 yN ?JlMé ^?÷yVr ?X￥ s8 UBA 1?J?
 ?J?
 UBA1I ?W í ? E1
 UBA1lMé ^á μ?￥
??ê I ? W í ?
 lMé ^á μ?￥
??ê y?J ^dá μ?￥
7O9?dDW ío?￥?a?3 y?J ^dá μ?￥
7O9?dDW ío?￥?a?3 Ubc4 - ubc5 ?lM?
 ?lM?
 t?W í ?¤ ?y￥lM ?h?a?3T¨]"μr t?W í ?¤ ?y￥lM ?h?a?3T¨]"μr C ? )￥8"d ? )￥8"d 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ? ) X HVré ì￥y ? ) X HVré ì￥y ? )?￥7 3?é ì ? )?￥7 3?é ì ? )?￥7 3?é ì ? )?￥7 3?é ì S???￥ 2μìé ì S???￥ ìé ì +? ?μ￥S????cμ 2μ ? y +? ?μ￥S????cμ ? y ]÷×F ]÷×F REP1 RAF STB ori REP2 FLP IR IR A B ìé ì
 J ?r 50à 100?b ìé ì
 J ?r à ?b IRs Q_×ˉ? 
 600 bp
×F Q_×ˉ? 

×F FLP I ?átz? IRs￥]÷×F I ?átz? ￥]÷×F REP I ?át e?é ì￥×?? I ?át e?é ì￥×?? STB REP￥2?ê? ￥2?ê? ¤?? ??￥ pSR1? pSB1
[# ¤?? ??￥ ?
[# X Z?? ??￥ pKD1? (D 2μé X Z?? ??￥ ? (D é ì ? ?b ì ? ?b ? )?￥7 3?é ì ? )?￥7 3?é ì ? ? X Z???￥Lé ì ? ? X Z???￥Lé ì ? ? X Z???cμ ??] ? ? X Z???cμ ??] pGKL1 8.9 kb DNA ? ?y í?a αβ ?f?a γ e ? ? y í?a ?f?a e ￥ ? yLé ì pGKL1? pGKL1 ￥ ? yLé ì ? J ?1 50-100?
sYz{ K1 J ?1 ?
sYz{ K2 ?? P?? )á μ￥y ?? P?? )á μ￥y Q_×ˉ?  Q_×ˉ?  í?aI ?y
α β γ

] Hcμy í?a F?yb í?aI ?y


] Hcμy í?a F?yb ? ) X HVré ì￥y ? ) X HVré ì￥y cμ ARS￥YRpé ì￥y cμ é ì￥y ARS1? )?￥1?ˉ?? 
 0.8-1.5kb
??8  ? 30-40kb 1? )?￥1?ˉ?? 

??8  ? üμB? ARSíqb? )1?ˉ??é ì￥yF? ?ˉ?0aS üμB? íqb? )1?ˉ??é ì￥yF? ? ˉ?0 aS :ya4 X Hê?￥v?? )é ì DNAb :y a4 X Hê?￥v?? ) é ì [ ARS1ˉ?0￥é ì?1 YRp [ 1ˉ?0￥é ì?1  ?  ?é ìS???￥ J ?Kú Vr 200?
??!+}  ?  ?é ìS???￥ J ?Kú Vr ?
??!+} [ 2μé ì ￥ˉ?íq1ˉ?0￥é ì?1 YEp [ é ì ￥ˉ?íq1ˉ?0￥é ì?1 a
é ì￥é > qúr 50%-70%
?1 ^??s￥? ( ?áb a
é ì￥é > qúr
?1 ^??s￥? ( ?áb ? ) X HVré ì￥y ? ) X HVré ì￥y cμ CEN￥YCpé ì￥y cμ é ì￥y CEN1? )??8 DNA D??8 (s￥μ1￥?  1? )??8 D??8 (s￥μ1￥?  | CEN DNA??c ARS￥é ì?
¤￥?8?1 YCp | ??c ￥é ì?
¤￥?8?1 YCpé ì μ?ú￥μ ′s ×??
? J ?oμ 1 - 5? é ì μ?ú￥μ ′s ×??
? J ?oμ ? cμ TEL￥YACé ì￥y cμ é ì￥y ? ) X HVré ì￥y ? ) X HVré ì￥y cμ? )??8 DNA]÷? ￥ YIpé ì￥y cμ? )??8 ]÷? ￥ é ì￥y v?? )é ì F ? )??8 DNA+?? ?S:y
 v?? )é ì F ? )??8 +?? ?S:y
 y ?￥é ì?1 Yipb"￥yVr?Yè???8 DNA+? y ?￥é ì?1 b"￥yVr?Yè???8 +? ? ?
?""￥yü?úr???? )+?￥??8 DNAu× ? ?
?""￥yü?úr???? )+?￥??8 u× D ? )￥?"d ? )￥?"d 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ?é ì?%?￥
 ?é ì?%?￥
 ? )￥??? ? )￥??? ¨??0?ê￥S:y ¨??0?ê￥S:y ? )￥??? ? )￥??? ? )e 3é8?E ? )e 3é8?E *ù? )￥???¨? 1? A?×?￥e 3é8? *ù? )￥???¨? 1? A?×?￥e 3é8? E
 Ca 2+ ? PEG￥i/
?% Vre 3é89 ?￥ 1-2%b E
 ? ￥i/
?% Vre 3é89 ?￥ ?????T?ùé
7O?r q s?e 3é 3 q￥?×?? ?????T?ùé
7O?r q s?e 3é 3 q￥?×?? e 3é8?E￥B?A÷+ ? ^
B? s8% V] H¤, e 3é8?E￥B?A÷+ ? ^
B? s8% V] H¤, ?é ìs0
7O???￥e 3é8]?09 ?￥ 25-33% ?é ìs0
7O???￥e 3é8]?09 ?￥ ? )￥??? ? )￥??? aá ? ?0o?￥? )??%￥? aá ? ?0o?￥? )??%￥? S??￥??%üaá ? ?0
? Li + ?
a PEGa￡¨ X S??￥??%üaá ? ?0
? ?
a a￡¨ X ) ?a
9 Vúr lé ì DNA
7O μ/ +?
 ) ?a
9 Vúr lé ì
7O μ/ +?
  lL? DNA￥? ? üAv?ì DNA
 ?Mμ 80  lL? ￥? ? üAv?ì
 ?Mμ  ?C`1hn ?C`1hn ? )￥??? ? )￥??? ? )è?E ? )è?E ? )e 3é8???% ( VèHq/ lé ì DNA
 ? )e 3é8???% ( VèHq/ lé ì
 ?NV???E ? P¨ PEG
 ? sè￥% μ??v￥μ ?NV???E ? P¨
 ? sè￥% μ??v￥μ T¨bè?￥a? ^?G ?? s8%￥L.+?#?!Hq T¨bè?￥a? ^?G ?? s8%￥L.+?#?!Hq a¨S?<
7O? q Vúr 10 5 / μgDNAb a¨S?<
7O? q Vúr g DNA ?é ì?%?￥
 ?é ì?%?￥
 ? ? y DNA ( V?? )
?? y￥? q ^ ? y￥ 10-30 ? ? y ( V?? )
?? y￥? q ^ ? y￥  cμˉ?0￥? yé ìé?%a
??1?1 ? yiˉ? cμˉ?0￥? yé ìé?%a
??1?1 ? yiˉ? ?cˉ?0￥? yé ìé?%a
?úr1]÷?????8 ?cˉ?0￥? yé ìé?%a
?úr1]÷?????8 ??8=??lM?yF1μ ? ??8=??lM?yF1μ ? X H YIp???é ì ￥?÷y
?Tcμ s8%￥??8 X H ???é ì ￥?÷y
?Tcμ s8%￥??8 DNA￥]÷? 
?? 3ú?]÷??
??0]?09 ￥]÷? 
?? 3ú?]÷??
??0]?09 ?￥ 50-80% ¨??0?ê￥S:y ¨??0?ê￥S:y ¨?? )?0?ê￥S: y?1μ?!?J?o?y? ¨?? )?0?ê￥S:y?1μ ?!?J?o?y ? A?y v ? A?y v ? ?!?J?o?y?1μ?  ??? ? 3t??y
?
 ?!?J?o?y?1μ?  ??? ? 3t??y
?
 LEUaTRPaHISaLYSaURAaADE ??8? ? a
?ê?!?J?￥ s8dè ?4 ??8? ? a
?ê?!?J?￥ s8dè ?4 ?!?J?￥o?y ?!?J?￥o?y ¨??0?ê￥S:y ¨??0?ê￥S:y A?S:y￥I ?áto1 ^y?té￥ F??a A?S:y￥I ?áto1 ^y?té￥ F??a A?S:y A?S:y aph ?M ? F G418 ?M ? F cat o ? íY?M ? F o ? í o ? íY?M ? F o ? í dhfr =_= ??e ? F?JO?ü? =_= ??e ? F?JO?ü? cup1 ^ ?0>?t 0 s^ ?0 ^ ?0>?t 0 s^ ?0 suc2 ?? ? 0 súi? ?? ? 0 súi? ilv2 Y???? ? F ;??"¤4 Y???? ? F ;??"¤4 S:y S:y I ?át I ?át L.V? L.V? E ? )￥Vr"d ? )￥Vr"d 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?Vr￥K?y í ?÷y? )?Vr￥K?y í ? )?0￥ V e? ? )?0￥ V e? ? )Vr"d￥ê4 ? )Vr"d￥ê4 ? )?0￥ V e? ? )?0￥ V e? pho4 TS -PHO5?0
 ?0
 S?? PHO5?0?!?3 ? ?÷{D H??u 7 S?? ?0?!?3 ? ?÷{D H??u 7 PHO4yI ?át ^ PHO5?0￥?? ey0 yI ?át ^ ?0￥?? ey0 yN
  pho4 TS -PHO5?0/3￥?÷y 35￥ H1> yN
  ?0/3￥?÷y ￥ H1> 23￥o?Vr ￥o?Vr ? e???0 ? e???0 PHO4? ù??lMy pho4 TS ￥I ?át 35￥ H > ? ù??lMy ￥I ?át ￥ H > ? )?0￥ V e? ? )?0￥ V e? a – α ??0
 ??0
 S??μ a? α ?? 8
sY? MATa? MATα ??êy %?b α1y0 %? α%+?Vr α2y0E3 a%+?Vr a1-a2E3 α%+?Vr I ? α2y0￥ylM? hmlα2-102?á 3 α2M8
 ?? ? a1
] HE3 a? S??μ ? ?? 8
sY? ? ??êy %?b y0 %? %+?Vr y0E3 %+?Vr E3 %+?Vr I ? y0￥ylM? ?á 3 M8
 ?? ?
] HE3 ? ? e???0 ? e???0 a ??0 ??0 hmlα2-102 MATa 102 MAT a1Sir3-8 TS α??0 ??0 s8%yF ×Fé ì s8%yF ×Fé ì a ??0 ??0 hmlα2-102 MATa 102 MATa a1 Sir3-8 TS α??0 ??0 α2 α1 25￥ 35￥ ? )?0￥ V e? ? )?0￥ V e? S?? S?? ?o???0 ?o???0 GAL1 GAL7 GAL10UASGAL4GAL80 ??o?rT? üA
y? ￡üVr ??o?rT? üA
y? ￡üVr GAL1 GAL7 GAL10UASGAL4GAL80 ??o? H
 GAL4úrVr
 GAL1aGAL1aGAL10?úrVr ??o? H
 úrVr
 ?úrVr GAL10 Promoter ￥?? ￥?? ?¨ ?" ?¨ ?" ? GAL1 ? GAL7? ? GAL10 yI ? yI ? ?÷y? )?Vr￥K?y í ?÷y? )?Vr￥K?y í ?÷y× ? mRNA￥i ?÷y× ? ￥i ?÷y mRNA￥Jr? ?÷y ￥Jr? ? ) á ?0￥ê1? ? ) á ?0￥ê1? S???
ú~￥?aé
??2? -3- ??_ ? S???
ú~￥?aé
??2? ??_ ? GAPDHa ??2 ? PKGaY??_ ? ADH
? 96% a ??2 ? aY??_ ?
? [ ￥? ? ^? 25? á ?0I ?￥ [ ￥? ? ^? ? á ?0I ?￥ ? )Vr"d￥ê4 ? )Vr"d￥ê4 S??￥yVr"dK1 ? ?
 ? c??ú￥?2 S??￥yVr"dK1 ? ?
 ? c??ú￥?2 ? -3- ??_ ?y GAPDHa ??2 ?y PKGaY??_ ? ??_ ?y ??2 ?y aY??_ S??Vr"d S??Vr"d ?y ADH ? ?￥?0
?×F?÷?a¤??Vrb ?y ? ?￥?0
?×F?÷?a¤??Vrb S??Vr"d￥Kvù5 ???? ?
aa P¤ S??Vr"d￥Kvù5? ?? ? ?
aa P¤ μt×F?a
?|óba?a?
D s8%? á2?
7?? μt×F?a
?|óba?a?
D s8%? á2?
7?? v s ?b?B?J V¨dS???￥Vr"d ? ??b v s ?b?B?J V¨dS???￥Vr"d ? ??b ? )Vr"d￥ê4 ? )Vr"d￥ê4 ? ? X Z??￥ ? yìé ì pKD1X$<W¨T×Fs÷ ? ? X Z??￥ ? yìé ì X$<W¨T×Fs÷ ?a 3á￥úrVr×??8
 'Líê4a ?￥Hq/
9 ?a 3á￥úrVr×??8
 'Líê4a ?￥Hq/
9 ? ? X Z??Vr"d ? ? X Z??Vr"d ?×?L. 40}[ b ?×?L. }[ b ? ? X Z??Vrs ??? ds ??￥×F?a
?? (a ? ? X Z??Vrs ??? ds ??￥×F?a
?? (a ?S??Vr"db ?S??Vr"db ? )Vr"d￥ê4 ? )Vr"d￥ê4 ? ?￡8? ^B?J? ! )
?? ÷￥J??!? 3 ? ?￡8? ^B? J?! )
?? ÷￥J??!? 3 ? ?￡8?Vr"d ? ?￡8?Vr"d é
J? Vúro?J?}?o? ?ò ?I ?y￥Vr
yN 3é é
 J? Vúro?J?}?o??ò ?I ?y￥Vr
yN 3é á ?aY?? ?y AOX1 ? ?<?0aVr￥ Vo?? ^? ? á ?aY?? ?y ? ?<?0aVr￥ Vo?? ^? ? ￡8?Vr"d￥?va ]b ￡8?Vr"d￥?va ]b ??? ?￡8? àμ? a ￥1?ˉ??8
 ?[?÷y ??? ?￡8? àμ? a ￥1?ˉ??8
 ?[?÷y ￥Vr? B???? s8￥??8 DNA bNf ?/
?÷y ￥Vr? B???? s8￥??8 bNf ?/
?÷y μü6N′￥×F?a? ?￡ 8?"d?¤??Vrb μü6N′￥×F?a? ?￡ 8?"d?¤??Vrb ￥úrVr?v? | %??? J ?￥*b"-Xμ 20?? ￥úrVr?v? | %??? J ?￥*b"-Xμ ?? ? )Vr"d￥ê4 ? )Vr"d￥ê4 ?qà?9 ^B?J?! )b1?ˉ??  HARSX$ ?qà?9 ^B? J?! ) b1?ˉ??  X$ ?qà?Vr"d ?qà?Vr"d X H
i¨?y X HVr8
 ?D? ?￡8?M ?
?? X H
i¨?y X HVr8
 ?D? ?￡8?M ?
?? 8 s8%μ ′s  HA U?×??b ??]￥ ^
 HARSé ì 8 s8%μ ′s  HA U?×??b ??]￥ ^
 é ì ?ú?1?1?? s8￥??8 DNA 
 .à V[ ???? 100 ?ú?1?1?? s8￥??8 
 .à V[ ????  "-
 ?Y?éV ? Fe =￥ ???÷?a?"d? "-
 ?Y?éV ? Fe =￥ ???÷?a?"d? ? J
yN×F?qà?￥y9 ^?|??￥| {b ? J
yN×F?qà?￥y9 ^?|??￥| {b ¤??Vrb ¤??Vrb F ?¨×F? 3áYéf ì ?¨×F? 3áYéf ì 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr ?Y?éhy
HBV
???￥$ ¤?Y?é ^B??× ? Y?éhy

???￥$ ¤?Y?é ^B??× ￥.?h
 ?M?μ 200￡h| μ§
iμ 3a|?1 HBVz{?
 ￥.?h
 ?M?μ ￡ h| μ§
iμ a|?1 z{?
 ?M?B?s| V??1é?? é′??b"-Y?éhy ?M?B?s| V??1é?? é′??b"-Y?éhy ? àμB?μr￥í 0t
yN úBY?f ì￥ 3á?]hy ? àμB?μr￥í 0t
yN úBY?f ì￥ 3á?]hy ?? μ×v￥ ?rm
7 ?¨ ×F?v? 3áY?f ì1 ?? μ×v￥ ?rm
7 ?¨ ×F?v? 3áY?f ì1 <W?¨4  V L￥￡b <W?¨4  V L￥￡b F ?¨×F? 3áYéf ì ?¨×F? 3áYéf ì 7 ?÷y? )?￥Vr ?÷y? )?￥Vr áYéV ? Fe￥×FS?? áYéV ? Fe￥×FS?? Y?éhy￥2D?é Y?éhy￥2D?é áYéV ? Fe￥×F? ?￡8? áYéV ? Fe￥×F? ?￡8? Y?éhy￥2D?é Y?éhy￥2D?é Yéhy ^B??aU?￥ ? y DNAhy
 μ?? ?￥hy Yéhy ^B??aU?￥ ? y hy
 μ?? ?￥hy Y?éhy￥2 Y?éhy￥2 R ì?o ?
°?1 42 nm
yF?1 3.2 kbbhy R ì￥?1 R ì? o ? 
°?1
yF?1 bhy R ì￥?1 2?a ^hy￥V ? Fet
HBsAg
 St
 ? μ? 2?a ^hy￥ V ? Fe t

 t
 ? μ? ?d? ?? Tb R ì=￥?a?z ??? Fe
HBcAg
 a ?d? ?? Tb R ì=￥?a?z ? ?? Fe

 "N-?
$Yéhy??￥ |￥é#????i dbv ￥ 22 "N-?
$Yéhy??￥ |￥é#????i dbv ￥ hy DNA ? ?a± hy?ab hy ? ? a± hy?a b nm￥ b Tehy R ì
 ?fe? ^? ￥￥ò? ?aFz￥ ￥ b Tehy R ì
  ?fe? ^? ￥￥ò? ?aFz￥ 1000b ?aμ???a
 SaMaLtb  b ?aμ???a
 t b Y?éhy￥2D?é Y?éhy￥2D?é Y?éhy￥ ?aI ?y Y?éhy￥ ?aI ?y ATG ATG ATG TAA 108 aa 55 aa 226 aa preS1 preS2 S S t t 226 aa M t t 281 aa L t t 399 aa Y?éhy￥2D?é Y?éhy￥2D?é Yéhy8?%?!? i??N2
yN?B}￥Yéf Yéhy8?%?!? i??N2
yN?B}￥Yéf .dYéf ì￥?! .dYéf ì￥?! ì ^Vhyz{?￥é%é  4| ?￥b ù???é ?÷￥ ì ^Vhyz{?￥é%é  4| ?￥b ù???é ?÷￥ f ì μ?ú￥ ?fe?
??? e? ￥K?4[v?á<?b f ì μ?ú￥ ?fe?
??? e? ￥K?4[v?á<?b áYéV ? Fe￥×FS?? áYéV ? Fe￥×FS?? 20 W@ 80M} 7 Sê4S??Vr×F HBsAg
?1yT ? W@ M} 7 Sê4S??Vr×F
?1yT ? | St￥I ??? ADH1?0 e?/
?0?Vr μ ?f | t￥I ??? ?0 e?/
?0?Vr μ ?f ?￥×F?a
 ?%4|t? [o???a R ì￥? Ti
ü ?￥×F?a
 ?%4|t? [o???a R ì￥? Ti
ü ( R ì°?1 22 nm
2?? ? (D ¤?Yéhyz{?ób? ( R ì°?1
2?? ? (D ¤?Yéhyz{?ób? ￥hy R ìM]b ￥hy R ìM]b "-
?S?? 3á￥×F HBsAg R ìXT1Yéf ì ?? "-
?S?? 3á￥×F R ìXT1Yéf ì ?? ×Fát￥K?á  Vr%9?a ￥ 1%-2%b ×Fát￥K?á  Vr%9?a ￥ éB?￥ù?V ü
 Mt? Lt S?f ì μA÷￥9rT éB?￥ù?V ü
 t? t ?f ì μA÷￥9rT ¨
???
 ?
?￥ˉ? ?Yéf ì? V[o?*t S F ¨
???
 ?
?￥ˉ? ?Yéf ì? V[o?*t F e?CY?￥|?￥ ?fQ?b e?CY?￥|?￥ ?fQ?b áYéV ? Fe￥×F? ?￡8? áYéV ? Fe￥×F? ?￡8? ???×F? ?￡8?￥y ???×F? ?￡8?￥y PARS2 Bgl II 5’ AOX1 HBsAg PHIS4 3’ AOX1 Bgl II pBSAG151 11 kb Bgl II 5’ AOX1 HBsAg PHIS4 3’ AOX1 his + ￥?0 ￥?0 ×Fs0 ×Fs0 ? his - ￥ s8% ? - ￥ s8% ??8 DNA ??8 áYéV ? Fe￥×F? ?￡8? áYéV ? Fe￥×F? ?￡8? ×F? ?￡8?￥?? ×F? ?￡8?￥?? ??? ?￡8???8 DNA ??μ?=?Y?? ?y ??? ?￡8???8 ??μ?=?Y?? ?y AOX2
 ?[???×F )ˉ?cμJ?￥?!  3éb
 ?[???×F )ˉ?cμJ?￥?!  3éb ×F ) n5cμ?2￥?! ??!
??2{Da
F?J ×F ) n5cμ?2￥?! ??!
??2{Da
F?J ?o? HBsAgVr
K? S?a￥á  Vr% V·??a9 ￥ 3% ?o? Vr
K? ?a￥á  Vr% V·??a9 ￥ v?￥ 3áV??
? ?￡8?y? )B? 240L￥??7 v?￥ 3áV??
? ?￡8?y? )B? ￥??7 ??!
K? V¤ 90 X 22nm￥HBsAg R ì
@?? 900￡zYé ??!
K? V¤ X R ì
@?? ￡z Yé f ìb f ìb