第三篇 细菌学各论
第十六章 主要病原菌
第一节 葡萄球菌
一、葡萄球菌的一般特性
1、分类与分型
? 根据生化反应和产
生色素不同,分为
金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
腐生葡萄球菌
2、毒素和酶
? 血浆凝固酶,
? 溶血素
? 杀白细胞素
? 肠毒素
? 透明质酸
二、金黄色葡萄球菌
1、生物学性状
? 形态染色:球形,排列成葡萄状,无鞭毛,
不能运动。无芽胞,除少数菌株外一般不形
成荚膜。易被常用的碱性染料着色,革兰氏
染色为阳性。
? 培养特性:营养要求不高,在普通培养基
上生长良好,在含有血液和葡萄糖的培养基
中生长更佳,需氧或兼性厌氧。在肉汤培养
基中 24小时后呈均匀混浊生长在琼脂平板上
形成圆形凸起,边缘整齐。
表面光滑,湿润,不透时的菌落。能产生
溶性色素。有的菌株菌落周围形成明显 β
溶血,凡溶血性菌株大多具有致病性。
? 生化特性:多数葡萄球菌能分解葡萄糖、
麦芽糖和蔗糖,产酸不产生气。致病菌株
能分解甘露醇。
2、致病性
?金黄色葡萄球菌常常引起家畜家禽
?的各种化脓性疾病;内脏器官感
?染;创伤感染;慢性乳房炎、关节
?炎、皮炎及食物中毒等。全身感染
?如败血症、脓毒血症等,多由金葡
?菌引起。
第二节 链球菌
主要生物学性状
? 形态染色:球形或卵圆形,
呈链或长链状排列,幼令培
养物大多可见到透明质酸形
成的荚膜。革兰氏染色阳性。
? 培养特性,营养要求较高。血琼脂平
板上形成灰白、光滑、园形突起小菌
落,不同菌株有不同溶血现象。
? 生化反应,不被胆汗或 1%去氧胆酸
钠所溶解,可用来鉴定甲型溶血型链
球菌和肺炎球菌。
二、常见致病性链球菌
? 致病性链球菌:主要生物学特性
? 马腺疫链球菌,引起马腺疫
? 无乳链球菌:能形成长链,均不形成荚膜
? 停乳链球菌:菌链较短
? 乳房链球菌:菌链最短或两菌相连
? 猪链球菌,引起猪链球菌病
? 化脓性链球菌:各种创伤感染及多种疾病
第三节肠道杆菌
共同特性
? 形态与结构,中小等大小两端钝圆的革兰
氏阴性杆菌,无芽胞,多数有鞭毛,大多
有菌毛,少数有荚膜或包膜。
? 培养特性,需氧或兼性厌氧菌,在普通培
养基上生长良好,为中等大小的光滑型菌
落。有些菌在血琼平板上出现 β型溶血,
在液体培养中呈均匀混浊生长。
? 生化反应,活泼,乳糖发酵试验在初步鉴
别肠道致病和非致病菌时有重要意义。
二、大肠杆菌微生物学检查法
标本的采集:
?肠道外感染取中段尿、
?血液、脓液、脑脊液
?等,腹泻者取粪便。
分离培养与鉴定:
? 粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血
液需先经肉汤增菌,再转种血琼脂平板。其他
标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性
培养基。 37℃ 孵育 18~ 24小时后,观察菌落
并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴
定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。
必要时检定肠霉毒素。
三、沙门氏菌微生物学诊断
? 标本采集:急性肠炎取患者吐泻物和
剩余食物败血症取血液作培养。
? 分离培养与鉴定:血液应先接种胆汗
肉汤增菌;粪便和经离心的尿沉渣可
直接接种肠道杆菌选择性培养基。
37℃ 经 18~ 24小时培养后,挑选无色半
透明的不发酵乳糖的菌落涂片、染色、
镜检,并接种双糖含铁或三糖含铁培
养基进一步鉴定。
第四节炭疽杆菌
炭疽杆菌微生物学检查:
? 采集皮肤炭疽的脓液、渗出
物,吸入性炭疽的咯痰,肠
炭疽的粪便以及病人的的血
液等送检,
? 兽尸禁止解剖,可割取耳朵
或舌尖一片送检。
? 将标本直接涂片,沙黄荚膜染色镜检,观
察形态及荚膜特征,可以初步帮助诊断,确
诊应进行血平板分离培养,37℃ 孵育 12~ 15
小时,钩取可疑菌落,进行青霉素串珠试
验,噬菌体裂解试验,碳酸氢钠平板二氧化
碳培养。荚膜肿胀试验和小白鼠致病力试验
等与其他需氧芽胞杆菌进行鉴别确定。
第五节 布氏杆菌
布氏杆菌微生物学检验:
? 分离培养:急性期采集血液,慢性期采取
骨髓,接种于双相肝浸液培养基置 37℃ 10%
CO2环境中培养,每隔 2天检查一次,如无细
菌生长则摇荡培养基,使液体浸过斜面上,
有细菌生长,可依鉴定项目确定是否为布氏
杆菌。经一月培养无细菌生长,可报告阴性
? 血清学检查:通常作凝集试
验,判定凝集效价 1,50可疑,
1,100以上为阳性。效价增高 4
倍以上时,更有诊断价值。
第六节绿脓杆菌
微生物学检查诊断
? 标本可取创面渗出物、脓汁、尿、血等。分离
培养,根据菌落特征、色素以及生化反应予以
鉴定。必要时可用血清学试验确诊。治疗选用
青霉素类、氨基甙类、头胞类等抗生素。联合
用药可减少耐药菌株的产生。
第七节分枝杆菌
微生物学检验
? 分离培养:结核杆菌生长缓慢,
37℃ 培养 4~ 6周后检查结果。根
据生长缓慢,菌落干燥、颗粒状、
乳酪色象菜花状,菌体染色抗酸性
强,多数为结核杆菌。
? 动物试验:常用豚鼠或地鼠鉴别凝似结核
杆菌的分离培养物和毒力测定。取经浓缩集
菌处理的标本 1.0毫升注射于豚鼠腹股沟皮
下,经 3~ 4周饲养观察,如出现局部淋巴结
肿大,消瘦或结核菌素试验阳性,可及时剖
检:若观察 6~ 8周后,仍未见发病者,也要
剖检。剖检时应注意观察淋巴结、肝、脾、
肺等脏器有无结核病变。
第十六章 主要病原菌
第一节 葡萄球菌
一、葡萄球菌的一般特性
1、分类与分型
? 根据生化反应和产
生色素不同,分为
金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
腐生葡萄球菌
2、毒素和酶
? 血浆凝固酶,
? 溶血素
? 杀白细胞素
? 肠毒素
? 透明质酸
二、金黄色葡萄球菌
1、生物学性状
? 形态染色:球形,排列成葡萄状,无鞭毛,
不能运动。无芽胞,除少数菌株外一般不形
成荚膜。易被常用的碱性染料着色,革兰氏
染色为阳性。
? 培养特性:营养要求不高,在普通培养基
上生长良好,在含有血液和葡萄糖的培养基
中生长更佳,需氧或兼性厌氧。在肉汤培养
基中 24小时后呈均匀混浊生长在琼脂平板上
形成圆形凸起,边缘整齐。
表面光滑,湿润,不透时的菌落。能产生
溶性色素。有的菌株菌落周围形成明显 β
溶血,凡溶血性菌株大多具有致病性。
? 生化特性:多数葡萄球菌能分解葡萄糖、
麦芽糖和蔗糖,产酸不产生气。致病菌株
能分解甘露醇。
2、致病性
?金黄色葡萄球菌常常引起家畜家禽
?的各种化脓性疾病;内脏器官感
?染;创伤感染;慢性乳房炎、关节
?炎、皮炎及食物中毒等。全身感染
?如败血症、脓毒血症等,多由金葡
?菌引起。
第二节 链球菌
主要生物学性状
? 形态染色:球形或卵圆形,
呈链或长链状排列,幼令培
养物大多可见到透明质酸形
成的荚膜。革兰氏染色阳性。
? 培养特性,营养要求较高。血琼脂平
板上形成灰白、光滑、园形突起小菌
落,不同菌株有不同溶血现象。
? 生化反应,不被胆汗或 1%去氧胆酸
钠所溶解,可用来鉴定甲型溶血型链
球菌和肺炎球菌。
二、常见致病性链球菌
? 致病性链球菌:主要生物学特性
? 马腺疫链球菌,引起马腺疫
? 无乳链球菌:能形成长链,均不形成荚膜
? 停乳链球菌:菌链较短
? 乳房链球菌:菌链最短或两菌相连
? 猪链球菌,引起猪链球菌病
? 化脓性链球菌:各种创伤感染及多种疾病
第三节肠道杆菌
共同特性
? 形态与结构,中小等大小两端钝圆的革兰
氏阴性杆菌,无芽胞,多数有鞭毛,大多
有菌毛,少数有荚膜或包膜。
? 培养特性,需氧或兼性厌氧菌,在普通培
养基上生长良好,为中等大小的光滑型菌
落。有些菌在血琼平板上出现 β型溶血,
在液体培养中呈均匀混浊生长。
? 生化反应,活泼,乳糖发酵试验在初步鉴
别肠道致病和非致病菌时有重要意义。
二、大肠杆菌微生物学检查法
标本的采集:
?肠道外感染取中段尿、
?血液、脓液、脑脊液
?等,腹泻者取粪便。
分离培养与鉴定:
? 粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基。血
液需先经肉汤增菌,再转种血琼脂平板。其他
标本可同时接种血琼脂平板和肠道杆菌选择性
培养基。 37℃ 孵育 18~ 24小时后,观察菌落
并涂片染色镜检。采用一系列生化反应进行鉴
定。肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。
必要时检定肠霉毒素。
三、沙门氏菌微生物学诊断
? 标本采集:急性肠炎取患者吐泻物和
剩余食物败血症取血液作培养。
? 分离培养与鉴定:血液应先接种胆汗
肉汤增菌;粪便和经离心的尿沉渣可
直接接种肠道杆菌选择性培养基。
37℃ 经 18~ 24小时培养后,挑选无色半
透明的不发酵乳糖的菌落涂片、染色、
镜检,并接种双糖含铁或三糖含铁培
养基进一步鉴定。
第四节炭疽杆菌
炭疽杆菌微生物学检查:
? 采集皮肤炭疽的脓液、渗出
物,吸入性炭疽的咯痰,肠
炭疽的粪便以及病人的的血
液等送检,
? 兽尸禁止解剖,可割取耳朵
或舌尖一片送检。
? 将标本直接涂片,沙黄荚膜染色镜检,观
察形态及荚膜特征,可以初步帮助诊断,确
诊应进行血平板分离培养,37℃ 孵育 12~ 15
小时,钩取可疑菌落,进行青霉素串珠试
验,噬菌体裂解试验,碳酸氢钠平板二氧化
碳培养。荚膜肿胀试验和小白鼠致病力试验
等与其他需氧芽胞杆菌进行鉴别确定。
第五节 布氏杆菌
布氏杆菌微生物学检验:
? 分离培养:急性期采集血液,慢性期采取
骨髓,接种于双相肝浸液培养基置 37℃ 10%
CO2环境中培养,每隔 2天检查一次,如无细
菌生长则摇荡培养基,使液体浸过斜面上,
有细菌生长,可依鉴定项目确定是否为布氏
杆菌。经一月培养无细菌生长,可报告阴性
? 血清学检查:通常作凝集试
验,判定凝集效价 1,50可疑,
1,100以上为阳性。效价增高 4
倍以上时,更有诊断价值。
第六节绿脓杆菌
微生物学检查诊断
? 标本可取创面渗出物、脓汁、尿、血等。分离
培养,根据菌落特征、色素以及生化反应予以
鉴定。必要时可用血清学试验确诊。治疗选用
青霉素类、氨基甙类、头胞类等抗生素。联合
用药可减少耐药菌株的产生。
第七节分枝杆菌
微生物学检验
? 分离培养:结核杆菌生长缓慢,
37℃ 培养 4~ 6周后检查结果。根
据生长缓慢,菌落干燥、颗粒状、
乳酪色象菜花状,菌体染色抗酸性
强,多数为结核杆菌。
? 动物试验:常用豚鼠或地鼠鉴别凝似结核
杆菌的分离培养物和毒力测定。取经浓缩集
菌处理的标本 1.0毫升注射于豚鼠腹股沟皮
下,经 3~ 4周饲养观察,如出现局部淋巴结
肿大,消瘦或结核菌素试验阳性,可及时剖
检:若观察 6~ 8周后,仍未见发病者,也要
剖检。剖检时应注意观察淋巴结、肝、脾、
肺等脏器有无结核病变。