第六章 家畜的人工授精技术
Chapter 6 Artificial Insemination（ AI）
基本内容,
人工授精的意义, 发展概况；采精技术；精液品质的检
查, 稀释, 保存；精液冷冻保存原理, 技术；输精的要求
和技术 。
基本要求,
1,了解人工授精的意义, 发展概况；
2,掌握采精要求, 技术；液态精液保存原理；精液稀释
液的主要成分, 作用；
3,熟练掌握精液外观, 活率, 密度的检查方法；稀释液
的配制, 稀释方法；
4,掌握精液冷冻保存原理, 技术程序；掌握输精前的准
备, 输精要求和方法 。
第六 章 家畜的人工授精技术
Chapter 6 Artificial insemination（ AI）
第一节 概述 Introduction
第二节 采精 Semen collection
第三节 精液品质检查 Semen quality
examination
第四节 精液的稀释 Semen extend and
extenders
第五节 精液保存 Semen Storage
第六节 输精 Insemination
第一节 概述 Section 1 Introduction of AI
一,AI概念
二、人工授精在畜牧生产中的意义
三、人工授精的发展简况
一, AI概念（记忆，书 P143）
利用器械采集公畜的精液，经检查和处理后,
再用器械将精液输入到母畜生殖道的适当部位,
使之妊娠，以此来代替公母畜自然交配一种科学
配种方法。
二,AI在畜牧生产中的意义 （记忆，书 P143）
1、提高良种公畜配种效能； （后表 )
2、提高母畜受胎率；
3、防止疾病的传染；
4、克服公母畜体格差异使交配不易的困难 ;
5、采用冷冻精液技术，使种公畜的利用不 受地
域限制，同时也加快了育种步伐；
6、降低饲养管理费用；
7、推广繁殖新技术的一项基础措施。
人工授精的效率
三,AI的发展简况
（一）试验阶段
Experimental stage
（二）实用阶段
Application stage
（三）冷冻精液阶段
Freezing semen stage
（四）我国 AI的情况
40年代未,开始试验在牛和绵羊进行 AI（在新疆、
内蒙、广西等地）； 50年代,在猪（广西），马。
目前,（ 1）奶牛的 AI率为 90％左右，本地黄牛
的杂交改良在河南、河北、山东、安徽、东三省、
内蒙、新疆等省开展得较好。
（ 2）水牛的 AI和杂交改良在云南开展得较好，
广西福建和贵州也有一定的基础。尤其，广西这
两年大量投入，黄牛和水牛的杂交改良迅速发展。
（ 3）猪的 AI主要在南方各省开展得较好，如广
西、湖南、福建、江苏、浙江、四川等省。普及
率约为 40％ ~50％。 瘦肉型猪 AI目前在广东、广
西福建等南方省市开展得较好，估计达 50~60%，
广西达 70~80%。本地母猪 AI在广西可达 300万头
次。
第二节 采精 Section 2 Semen collection
一、采精前的准备
Preparations
二,采精技术
Collecting technique
三、采精频率
Frequency of semen collection
一、采精前的准备 Preparations
（一）采精场地 Collection yard
? 使公畜建立良好的性反射并防止精液污染,
并能使采精工作易于进行。采精场内设有 采精架
以保定台畜,或设立 假台畜 。
? 采精场可分为室内和室外两种，室内采精
场一般为 10310m2。
马采精横木架及母马保定
（二）台畜的准备 Dummies and mounts
采精时可以用假台畜，也可以用活台畜，但
要进行训练，并且其尾根、外阴、肛门等部位
要清洗，擦干净。
（三）公畜的准备
1、公畜体况：必须选用体质健康的公畜。
2、公畜的调教与采精前准备
外激素法,于假台畜后躯涂抹发情母畜尿液，或
阴道粘液。
空爬跨,采精前先让公畜空爬几次，可以增强性
欲和提高精液品质。
真假法,在假台畜身旁放一发情母畜。
观摩法（隔栏学习法）,看已调教好的公畜爬跨
假台畜采精。
二、采精技术 Collecting technique
有一定的技术要求
（一）假阴道法 Artificial vagina
（二）手握法和筒握法 A gloved hand
（三）按摩法采精 Massage method
（四）电刺激采精法 Electroejaculation
（五）其他采精法
（一）假阴道法 Artificial vagina （用于牛、
马）
原理,利用人工模拟发情母畜的阴道环境，诱导
公畜在其中射精的方法。
1,假阴道的结构和安装
（１）结构：内胎、外壳、漏斗、集精瓶（杯）、
充气和水孔、固定胶圈
2、假阴道的准备
应 满足三个条件,温度、压力和润滑度
适宜的温度：加入温水（保持在 38-40℃ ）；
适当的压力：冲入气体
一定的润滑度：涂抹石蜡油
不太理想的状态（但可以用） 牛羊假阴道安装充气后理想的状态
3、采精操作 Procedures（实习中学习）
（ 1）可以将假阴道置于假台畜后躯内，并
使假阴道纵轴方向与公畜阴茎伸出方向
在同一直线上。
（ 2）采精员也可以站在台畜右侧，手持假
阴道采精，当公畜爬跨阴茎勃起伸出时，
将阴茎导入假阴道。
（二）手握法 和筒握法采精 （ 仅用于公猪）
1,手握法采精,采精员戴上手套握住勃起并已
突出包皮的公猪龟头，缓缓顺势拉出，并有节
律的松紧握手，就能采到公猪的精液。此法在
南方全年和在北方夏季都可采用。
2,筒握法采精,用普通的假阴道，但前端未装
集精瓶，当公猪阴茎插入假阴道后，在假阴道
漏斗部握住公猪龟头采精的方法。
（三）按摩法
采精 （ Massage
method）
采精员用手经直肠
壁找到公畜的精囊
腺和壶腹腺，轻柔
按摩。可达到使公
畜阴茎部分勃起而
射精。
?该法适用于牛、
犬和家禽。
（四）电刺激采精法 Electroejaculation
通过电极隔直肠壁选择一定的频率通电，
刺激输精管壶腹，使公畜阴茎勃起并射
出精液。一般在麻醉状态下进行。
?这一方法一般用于未经采精训练或胆小
不易控制的动物，如各种 野生动物和丧
失交配能力 但 种用价值高 的公畜。
电
刺
激
采
精
装
置
（四）其他采精法（书,P146-147）
1、阴道内采精
2、附睾内采精
三、采精频率 Frequency of semen collection
定义（记忆）,指在一定时间内（通常为次／周）
采精的次数。
公牛,每周 2-3/次周
猪、马,因为射精量大，隔日一次,
绵、山羊,配种季节内，每天可采精多次，并连续
数周
?一般在观察到精子尾部有 未脱落的原生质小滴,
说明采精频率过高，此时应减少或停止采精。
采精频率是以雄性生产精子的能力来决定。
eg,每克睾丸组织每天产生 2500万精子
一头公猪的一对睾丸重 1000克
一次射精量为 250ml
每 ml精子数为 2亿
则 2500万 31000克 3 7日＝ 1750亿精子 /周
每次射精精子数＝ 250ml 3２＝ 500亿
每周采精次数为 1750亿 e500亿＝ 2.5次
?采精频率 过低则经济上不划算，过高则阻碍公
畜的生长发育和缩短其使用寿命 。
第三节 精液品质检查 Semen quality evaluation
目的,是了解精液质量高低、种公畜配种负担
能力、精液稀释倍数、采精时精液是否受到
污染和采精技术好坏程度的工作。
包括,
外观检查
显微镜检查（精子活率、密度、形态）
微生物检查
精子代谢能力检查
其他检查（受胎效果）
一、精液外观性状检查法
（一） 精液量 (ml) （记忆，书 P147）
奶牛,5-10； 肉牛,4-8； 绵羊,0.8-1.2 ；
猪,150-300；山羊,0.5-1.5； 马,30-100
0
50
100
150
200
250
奶牛 水牛 马 猪 绵羊 山羊
射精量
（二）颜色与气味
一般为 乳白色活灰白色 。正常牛羊精液呈乳白
色或乳黄色，猪、马的精液呈淡乳白色或浅灰
白色。
正常精液特征 依从浓到稀：乳黄 -乳白 -白色 -灰白
淡红（鲜红） 生殖道下段出血或龟头出血
淡红（暗红） 副性腺或生殖道出血
绿 副性腺或尿生殖道化脓
褐 混有尿液
(三 )云雾状
浓份精液因精子密度大、活力强，使精液翻腾
呈现旋涡云雾状。（ >15亿 / ml）
（四） pH值
牛、羊精液 pH值为 6.5-6.9,猪、马为 7.4-7.5。
一般同种精液 pH值较低的品质较好,pH与生
存活率相关系数为 -0.47，但稀释的精液其 pH
与品质无太大关系。
（五）杂质
如被毛、脱落上皮、炎性分泌物、灰尘、纤
丝。
二、精子活率检查
精子活率（记忆）,在显微镜下观察，在一个视
野内向直线运动的精子占全部精子总数的百分率。
?一般在 37-38°C温度下进行评定，牛、羊精
液尚需用生理盐水作稀释后才能评定。
?活力一般用 0-1.0的 10级评分，一般新鲜采精
液活率应该为 0.7~0.8左右。
精子活动,mpg
三、精子密度的检查
精子密度（记忆）, 是指单位体积（ ml）精液内
所含有的精子数。
畜种 牛 羊 猪 马 鸡
密度
亿 /ml 8-12 20-30 2-3 1.5-3 30-50
0
10
20
30
40
牛 羊 猪 马 鸡
亿/ m l
(一）估测法,在低倍显微镜下根据精子之
间的距离来定，分为密、中和稀三等。
（二）血细胞计数法,取 1ul精液或其稀释
液渗入血细胞计数板内，计数精子数目并根
据倍数算出精液密度。
（三）光电比色法,是根据精子的透光性而测定精
子数的方法。透光性越高，则精子数越少，透光性
越差，则精子数越多。现在甚至可与计算机联接，
立即知道被测精液的活率和密度。
四,精子的形态检查
1、精子畸形率,头部、颈部、尾部，观
察 200个精子，求出比例。用于输精
的精子畸形率 不得超过 20%。
头部,巨大，细小，缺失，双头，轮廓不
明显，皱缩
颈部,臌大，纤细，弯曲，不全，原生质
滴
尾部,屈折，带原生质滴，双尾，折断，
纤细
双头和双尾精子
2、精子顶体异常率
顶体与精子受精能力直接有关，牛超过 14%，猪超
过 4.3%，显著降低受精率。
五、精子代谢能力检查
（一）精子生存时间和生存指数
精子生存时间（记忆）,指精子在体外一定条件
下（稀释液、稀释倍数、保存温度和方法等）的
总生存时间。
具体算法：所有间隔时间累加后减去最后两次间
隔时间的一半即为精子的存活时间。
精子生存指数（记忆）,相邻两次检查的间隔时
间与平均活力的积之和。
?是精子存活时间与精子活率下降变化的一项综
合指标。
?精子生存时间越长，则生存指数越大，说明精
子生活力越强，品质越好。
检查时间 间隔时
间 (h)
活率 2次检查平均
活率
h3平均
活率 日 /月 时间
20/3 6 0 0.8 —
14 8 0.6 0.7 5.6
22 8 0.5 0.55 4.4
21/3 6 8 0.3 0.4 3.2
14 8 0.2 0.25 2.0
22 8 0.1 0.15 1.2
22/3 6 8 摆动 0.05 0.4
∑= 48 ∑= 16.8
存活时间,48-8/2=44h
存活指数,h3平均活率 =16.8
（二）美蓝褪色试验
美蓝是氧化还原剂，氧化呈蓝色，还原呈
无色，精子在美蓝溶液中，呼吸时氧化脱氢，
美蓝获得 H+后便使蓝色还原为无色。因此，
根据美蓝褪色时间可测知精液中存活精子数
量多少，判定精子的活率和密度高低。
（三）精液果糖分解测定
精液果糖分解能力与精子活力密切相关，
因此测定一亿精子每小时消耗果糖的 mg数来
表示 精子的果糖分解能力，甚至反映精子活
率和密度的高低。
第四节 精液的稀释
Section 4 Semen dilution
一、精液稀释的目的
Aims of semen dilution
二、稀释液的成分及作用
Composition of extenders (diluents)
三、稀释液的种类和配制
Types and make-up of extenders (diluents)
四、精液稀释方法和稀释倍数
Methods and multiple of semen dilution
一、精液稀释的目的
1、精液稀释
定义（记忆）,往精液中加入适宜精子体
外存活，并保持精子受精能力的一定量稀
释保护液。
2,精液稀释目的 （记忆，见书 P154）
（ 1）扩大精液量 — 增加可配 ♀ 数；
（ 2）延长存活时间；
（ 3）便于运输和保存。
二,稀释液的成分及作用
（一）稀释剂 —— 扩大容量
一般配制与精液具有等渗压的氯化钠、葡
萄糖或奶类液体。
（二）营养剂 —— 供能
糖类、奶类和卵黄均可。 如果糖、葡萄糖,
乳糖和蔗糖等。
（三）保护剂 —— 中和、缓冲精清对精子
保存的不良影响，防止精子受“低温打
击”，创造精子生存的环境和抑制细菌
等 。
1、缓冲物质,保证精液适宜 pH值，利于精子的
存活,如柠檬酸钠、磷酸二氢钾,Tris。
2、非电解质,延长精子在体外存活时间。 如各种
非电解质或弱电解质，糖类或甘氨酸。
3、防 冷休克 物质,在精液在冷冻或解冻过程中，
精子内外环境的水分，将经历液态和固态的
转化过程，对精子危害较大。 抗冷物质中卵
磷脂和乳脂的双向亲和性对保护精子不受或
减弱冷打击。 常用 卵黄或奶 类。
4、抗冻物质,抗冻剂有提高精液冰点，少量渗入
精子可降低冷冻损伤（减少冰晶形成），从
而达到抗冻作用。 常用 甘油或二甲基亚砜
(DMSO)。
5、抗菌物质,抑制精液中和操作中带入的微生物
的繁殖。 如青链霉素、磺胺等。
（四）其他添加剂
1,酶类, H2O2酶, 分解精子代谢过程中产生
的 H2O2,消除其危害, 利于维持精子活率 。
β-淀粉酶能促进精子获能, 提高受胎率 。
2,激素,OT,PG等, 促进母畜生殖道的蠕动 。
3,维生素,VB1,VB2,VC,利于精子存活 。
4,其他,CO2,乙酸, 植物汁等, 可降低稀释
液的 pH值, 有助于精子保存 。
三、稀释液的种类和配置
（一）稀释液的种类
1、现用稀释液
奶类和等渗糖类为主。
2、常温保存稀释液
用于常温保存精液,pH较低 。
3、低温保存稀释液
用于低温保存精液，含有 卵黄和奶类等抗冷
休克物质。
4、冷冻保存稀释液
用于冷冻保存精液，含 抗冻物质如甘油、
DMSO 。
（二）稀释液的配制
1、各种成分的准备
（ 1）蒸馏水,现制、灭菌。
（ 2）化学药品,成分要纯净，溶解过滤后消毒，
高温变性药品应用细菌滤膜过滤。
（ 3）奶类,新鲜，不含其它物质。于（ 90~95℃ ）
水浴 10min，去除奶皮。
（ 4）卵黄,取自新鲜鸡蛋，用前对蛋壳消毒。
（ 5）抗生素、酶类、激素、维生素等,于稀释液消毒冷却后加入。
2、配制稀释液注意事项（书 P155）
（ 1）所用物品认真清、消毒、干燥；
（ 2）如配制液状稀释液，最好现用现配，不要
长时间保存（预混除外）。
四、精液稀释方法与稀释倍数
（一） 精液稀释方法
1、新采集的精液于 30℃ 稀释，防止精子
冷休克；
2、采精后及时检查、稀释，时间长后精
子容易死亡；
3、稀释液与精液温度应该一致；
4、稀释时,将稀释液沿容器壁缓慢倒入
精液,高倍稀释时分次进行；
5、稀释后立即镜检活力，以确保操作正
确。
（二）稀释倍数
稀释倍数 = 稀释液的量 /精液量
1:1稀释,1:2稀释
如何精确计算一份精液的稀释倍数？
首先要考虑以下几个因素,猪
1、该份精液总量 250ml
2、精子密度 2亿 /ml
3、有效精子数（保存后使用前精子活率） 0.6
4、每次输入有效精子数 10亿
5、每次输精量 20ml
该份精液的有效精子数,
250ml3230.6=300亿
则分成的份数,
300亿 /10亿 =30份
则稀释后总量,
30320=600ml
则稀释倍数,
600-250/250=1.4
现行的精液保存方式有三种（记忆）,
常温保存（ 15-25 ℃ ）
低温保存（ 0-5 ℃ ）
冷冻保存（ -79 ℃ 或 -196 ℃ ）
第五节 精液的保存
Section 5 Semen Storage
液态保存
固态保存
一、常温保存 （ 15-25 ℃ ）,变温保存
1、原理（记忆）,是利用一定范围的酸性环
境，抑制精子的活动，使精子保持可逆的静止状
态而不丧失受精能力。 （方法见 P157）
2、稀释液,
（ 1）能量物：如葡萄糖 ；
（ 2）缓冲体系：如柠檬酸钠、碳酸氢钠 ；
（ 3）抗生素：如青、链霉素等。
3、方法,天热时，尽可能降低保存温度如放入
水井、水缸，天冷时，放在有暖气的室内。
适合猪精液保存
（ 15～ 17℃ ）
二、低温保存 （ 0-5 ℃ ）
1、原理（记忆）,利用较低的温度来减
弱精子的活动和代谢，从而延长精子的
生命。
2、低温保存稀释液,除室温保存液应具
有的成分外（不充 CO2），在牛用的稀
释液还需用加 卵黄或牛奶 。
3、保存前的处理
（ 1）稀释分装,低温保存的精液通常用玻璃或
塑料瓶分装，瓶内尽量不留空气，然后封口 ;
（ 2）降温处理,通常按 0.2℃ /min降至保存温度 ;
（ 3）保存方法,牛羊精液置于 0~5 ℃,猪精液
须特殊改造的冰箱或用泡沫盒内放冰块，精
液用一块泡沫垫在上面； （看后图）
（ 4）低温保存精液的利用,低温保存的精液在
使用前应该用水浴升温至 30℃ 。
4、液态精液的运输
（ 1）包装好、做好标记（种类、品种、畜号、
时间）；
（ 2）运输中避光、防震并保持温度。
三、精液冷冻保存 (-79 ℃ 或 -196 ℃)
定义（记忆，书 P159）,是 利用液态氮
（ -196 ℃ ） 或干冰 （ -79 ℃ ）,作为冷
源，将精子和精液冷冻成固体，并在液态
氮或干冰中作超低温永久保存。
意义（熟悉）,
（１）提高优良种♂的配种效能；
（２）便于冷冻精液的自动化生产；
（３）便于引种；
（４）加快改良和育种；
（５）推进繁殖新技术的应用；
（６）建立动物基因库。
（一） 精液冷冻保存原理（记忆）
目前关于精液冷冻的原理普遍倾向于玻璃化
学说。
原理,利用超低温使精液和精子快速冷冻,
快速越过 形成冰晶的温度范围（ 0-60 ℃ ）,
精液或精子中的水分不形成冰晶，而是 形成
玻璃化 。 同时在 抗冻剂 的存在下使精子免受
冻伤，在温度上升至体温精液解冻后精子能
够保持完整的形态结构、功能和受精能力。
液态 → 固态
结晶态：缓慢降温形成。水分子有
序形成冰晶对精子有害：机械和渗
透压损伤。
玻璃态：快速降温形成。水分子无
序形成玻璃样的超微粒结晶，对精
子无害。
（ 0～ -60℃ ）（ -15～ -25℃ ）
（ -60～ -250 ℃ ）
玻璃化是可逆的，不稳定的，当缓慢升温时又可能形成冰晶化。
1、冷冻时细胞的损伤
? 冰晶,在 0～ -60℃ 低温区，缓慢降温条件下形
成的，降温越慢，冰晶越大,-15～ -25℃ 对精
子危害最大。冰晶的形成对精子造成的机械损
伤和渗透压损伤是引起精子死亡的主要物理因
素 （记忆，书 P160） 。
? 玻璃化,在 -60～ -250 ℃ 超低温区，从冰晶化
区域内开始，就快速降温，迅速越过冰晶化进
入玻璃化阶段，此阶段对精子无害。
2、添加冷冻保护剂（甘油,DMSO等）
? 作用,增强精子抗冻能力，并对防止冰晶发
生起到重要作用。
（二）精液冷冻保存稀释液
除与精液低温保存液相同外，尚需用加 抗
冻剂 。
1、牛用,主要有卵黄 -柠檬酸钠 -甘油液，
卵黄 -糖类 -甘油液，奶类 -甘油液等 3种。
甘油浓度以 5%-7%为宜。
2、猪用,一般采用以葡萄糖、乳糖、蔗
糖、甘油为主要成分的稀释液，甘油浓度
以 1%-3%为宜。
（三）精液冷冻保存技术 （熟悉）
1、精液品质检查, 活率 0.8以上才能用于冷
冻
2、精液稀释,
一次稀释,一次性将精液与稀释液和抗冻剂混合
两次稀释,低温下加入含有甘油的另一半稀释液
3、精液分装 （目前多用细管分装）
（ 1）颗粒精液（ pellet semen）：约 0.2ml一粒，
似小黄豆大
（ 2）细管精液（ straw semen),0.25ml和 0.5ml
（ 3）安瓶和袋装：用于公猪和公马精液的冷冻
4、降温和平衡
（ 1）降温,指精液采出稀释后由 30℃ 以上温
度经 1~2h缓慢降至 5 ℃, 以防低温打击。
（ 2）平衡,指加含甘油稀释液对精子作用的
时间。
?平衡 目的是 使精子有一段适应低温的时间,
使甘油充分渗透进入精子体内，达到渗透的活
性物质平衡，产生抗冻作用。
?一般将降温至 5 ℃ 的精液于这一温度下平衡 1-
2h或 3-5h。
5,精液冻结
（ 1）干冰埋藏法
5 ℃ 平衡的精液置于干冰中，在其上再覆盖上
干冰。
（ 2）液氮熏蒸法
于液氮平面以上 1-3cm温度为 -80~-100 ℃ 范围
之处，进行精液的冷冻 5~10min，然后倒入液氮
即可。
?目前有自动控制的精液冷冻仪，通过控制液氮
的喷量，将精液或细管的温度下降（ 5~-60 ℃ )控
制在 4 ℃ /min, -60 ℃ 以下尽快降至 -196 ℃ 。
牛细管精液
6、解冻与检查
（ 1）解冻液（颗粒精液用）
2.9％柠檬酸钠液或 2.9％柠檬酸钠液与 5%葡萄糖
液各半混合。
（ 2）解冻（ thawing)
（ 3）检查
（ 1）颗粒精液解冻后取一小滴检查活力；
（ 2）细管精液可推出一点检查活力，如平时都
按常规操作亦可不检。
?我国规定牛冻精解后的活率在 0.4，水牛在 0.3
以上才能用于 AI。
（ 4）解冻后的精液处理
应尽快用于输精，不能长时间保存，更不能再
次冷冻。
7、冷冻精液保存与运输
（ 1） 冻精保存
合格的冻精, 包装妥善并做好标记 （ 站名,
家畜品种, 种畜号, 冻精日期, 剂型批号,
精子活率, 数量等 ）, 置入液氮罐内, 保存
过程中, 温度恒定, 精液品质不变, 才能达
到长期保存的目的 。
（ 2） 冻精运输
专人负责, 用液氮容器盛装, 内充满液氮,
有保护外套, 小心轻放 。 装在车上要安放平
稳, 拴牢, 严防撞击和倾倒 。 切不可斜放,
叠放或压入其他物品 。 避免暴晒和强烈震动,
如长途运输, 要及时补充液氮 。
液氮罐结构
1、内外壳体
2、内槽
3、夹层
4、颈管
5、罐盖塞
6、提筒
从
液
氮
罐
取
冻
精
一、输精前的准备 Preparations
二、输精的基本要求 Requirements
三、输精方法 Methods
四、影响人工授精受胎率的因素
Factors influencing the fertility by AI
第六节 输 精 Insemination
一、输精前的准备 Preparations
1、母畜的准备,
通常将母畜置于输精架内或用脚绊保
定，母猪不需要 保定,输精前要对阴户 清洗
干净。
2、输精器材的准备,
输精用具一般在用前要彻底洗涤并 消,
输精管内壁用前经 稀释液冲冼 。 每头母畜使
用一支输精管,不能相互共用。
各种当前使用的一次性输精器
通常的 100ml精液瓶
蒋氏公猪精液瓶和袋
精液瓶与精液袋配合时的情况
各种牛用输精器实物外观图
蒋氏输精枪和外套扩大图
3、精液的准备
新鲜采集的精液，必须检验合格才能使
用,常温或低温保存的精液 必须升高温度至
35 ℃ 左右, 镜检活率不 低于 0.6,冷冻精液
解冻 后镜检 活率不低于 0.3,才能使用。根据
不同的畜种确定精液需要量后进行输精。
4,输精人员的准备,
主要是剪短并磨平指甲，用 75%酒精消
毒，再于手臂上涂上润滑剂。目前已经使用
长手套。
二,输精要求 Requirements
?í ?￡ ?? ?￡ é? ?? áí
?? ò1 ?′ Dí ò1 ì? ?? ?3 ?? ?3 ò1 ì? ò1 ì?
ê? ?? à? ( ml) 30 - 40 0,2- 1 0,2- 1 0,05 - 0,1 15 - 30
óD D§?? 3ó ( òú ) 20 - 50 0,1- 0,2 0,1- 0,2 0.5 2,5- 5
ê ò? ê? ?? 2￠ ?é 1? 19- 2￠ ?é 1? 10- 2￠ ?é 1? 10- 2￠ ?é 1? 10- 2￠ ?é μú ?t
ê±? ? (h ) 30 h￡ ? o? ?? 20 h￡ ? o? ? 20 h￡ ? o? ? 36 h ìì ?a ê? ·?
±3 1? 8- 12 h á? ?° 10 - 20 á? ?° 10 - 20 è? òo ′?
ê? ?? ′? êy 1~ 3 1~ 2 1~ 2 1~ 2 1~ 2 o? ·ü ?′
ê? ?? ?? ·? 12 ~ 18 h 8~ 10 h 8~ 10 h 8~ 10 h 24 ~ 48 h
ê? ?? 2? ?o 3ó ?? ?ú 3ó ?? ?ú 3ó ?? ?ú 3ó ?? ?±? ú 3ó ?? ?ú
三、输精方法 Methods
（一）母牛和母水牛的输精方法
1、开膣器输精法：目前已经不用
2,直肠把握子宫颈输精法
于直肠内隔直肠壁握住子宫颈外端，另一只手
持输精导管插入阴门避开尿道口，插入子宫颈口
进行子宫输精。
优点,
（ 1）用具简单，操作安全，不易感染；
（ 2）母牛无痛感；
（ 3）输精部位深，受胎率较高；
（ 4）可防止误给孕牛输精而引起流产。
牛和水牛的输精方法和要求（记忆）,
（ 1）方法,直肠把握法
（ 2）输精剂量：冷冻精液 0.2-1ml
（ 3）输入有效精子数,0.1-0.12亿
（ 4）输精时间,发情开始后 10-12h，或排卵
前 10-20h
（ 5）输精次数,间隔 8～ 10h两次
（ 6）输精部位,子宫内
正确的牛直肠把握输精图
直
肠
检
查
直肠
把握
子宫
颈输
精
牛
AI
视
频
（二）母猪输精方法（记忆）
１、方法,直接插入法输精 （与母猪的生
殖道结构特点有关）。 （见后）
２、输精时间：发情开始后 1~1.5d或接受
“压背试验”后 8~12h。
３、输精次数：间隔 12-18h 两次
４、输精量
本地,20~30ml； 外来,80~100ml
５、每次精子数
本地,10～ 20亿；外来,30～ 50亿
6、输精部位：子宫内
?由于母猪 子宫颈与阴道联接处无明显的界限和皱折, 输
精时一般直接将输精器通过阴门插入阴道，避开尿道开口，进入子宫颈。
母猪自然交配与输精
母猪输精示意图
四、影响人工授精受胎率的因素
Factors influencing the fertility by AI
1、精液品质
2、适时输精
3、技术水平
Chapter 6 Artificial Insemination（ AI）
基本内容,
人工授精的意义, 发展概况；采精技术；精液品质的检
查, 稀释, 保存；精液冷冻保存原理, 技术；输精的要求
和技术 。
基本要求,
1,了解人工授精的意义, 发展概况；
2,掌握采精要求, 技术；液态精液保存原理；精液稀释
液的主要成分, 作用；
3,熟练掌握精液外观, 活率, 密度的检查方法；稀释液
的配制, 稀释方法；
4,掌握精液冷冻保存原理, 技术程序；掌握输精前的准
备, 输精要求和方法 。
第六 章 家畜的人工授精技术
Chapter 6 Artificial insemination（ AI）
第一节 概述 Introduction
第二节 采精 Semen collection
第三节 精液品质检查 Semen quality
examination
第四节 精液的稀释 Semen extend and
extenders
第五节 精液保存 Semen Storage
第六节 输精 Insemination
第一节 概述 Section 1 Introduction of AI
一,AI概念
二、人工授精在畜牧生产中的意义
三、人工授精的发展简况
一, AI概念（记忆，书 P143）
利用器械采集公畜的精液，经检查和处理后,
再用器械将精液输入到母畜生殖道的适当部位,
使之妊娠，以此来代替公母畜自然交配一种科学
配种方法。
二,AI在畜牧生产中的意义 （记忆，书 P143）
1、提高良种公畜配种效能； （后表 )
2、提高母畜受胎率；
3、防止疾病的传染；
4、克服公母畜体格差异使交配不易的困难 ;
5、采用冷冻精液技术，使种公畜的利用不 受地
域限制，同时也加快了育种步伐；
6、降低饲养管理费用；
7、推广繁殖新技术的一项基础措施。
人工授精的效率
三,AI的发展简况
（一）试验阶段
Experimental stage
（二）实用阶段
Application stage
（三）冷冻精液阶段
Freezing semen stage
（四）我国 AI的情况
40年代未,开始试验在牛和绵羊进行 AI（在新疆、
内蒙、广西等地）； 50年代,在猪（广西），马。
目前,（ 1）奶牛的 AI率为 90％左右，本地黄牛
的杂交改良在河南、河北、山东、安徽、东三省、
内蒙、新疆等省开展得较好。
（ 2）水牛的 AI和杂交改良在云南开展得较好，
广西福建和贵州也有一定的基础。尤其，广西这
两年大量投入，黄牛和水牛的杂交改良迅速发展。
（ 3）猪的 AI主要在南方各省开展得较好，如广
西、湖南、福建、江苏、浙江、四川等省。普及
率约为 40％ ~50％。 瘦肉型猪 AI目前在广东、广
西福建等南方省市开展得较好，估计达 50~60%，
广西达 70~80%。本地母猪 AI在广西可达 300万头
次。
第二节 采精 Section 2 Semen collection
一、采精前的准备
Preparations
二,采精技术
Collecting technique
三、采精频率
Frequency of semen collection
一、采精前的准备 Preparations
（一）采精场地 Collection yard
? 使公畜建立良好的性反射并防止精液污染,
并能使采精工作易于进行。采精场内设有 采精架
以保定台畜,或设立 假台畜 。
? 采精场可分为室内和室外两种，室内采精
场一般为 10310m2。
马采精横木架及母马保定
（二）台畜的准备 Dummies and mounts
采精时可以用假台畜，也可以用活台畜，但
要进行训练，并且其尾根、外阴、肛门等部位
要清洗，擦干净。
（三）公畜的准备
1、公畜体况：必须选用体质健康的公畜。
2、公畜的调教与采精前准备
外激素法,于假台畜后躯涂抹发情母畜尿液，或
阴道粘液。
空爬跨,采精前先让公畜空爬几次，可以增强性
欲和提高精液品质。
真假法,在假台畜身旁放一发情母畜。
观摩法（隔栏学习法）,看已调教好的公畜爬跨
假台畜采精。
二、采精技术 Collecting technique
有一定的技术要求
（一）假阴道法 Artificial vagina
（二）手握法和筒握法 A gloved hand
（三）按摩法采精 Massage method
（四）电刺激采精法 Electroejaculation
（五）其他采精法
（一）假阴道法 Artificial vagina （用于牛、
马）
原理,利用人工模拟发情母畜的阴道环境，诱导
公畜在其中射精的方法。
1,假阴道的结构和安装
（１）结构：内胎、外壳、漏斗、集精瓶（杯）、
充气和水孔、固定胶圈
2、假阴道的准备
应 满足三个条件,温度、压力和润滑度
适宜的温度：加入温水（保持在 38-40℃ ）；
适当的压力：冲入气体
一定的润滑度：涂抹石蜡油
不太理想的状态（但可以用） 牛羊假阴道安装充气后理想的状态
3、采精操作 Procedures（实习中学习）
（ 1）可以将假阴道置于假台畜后躯内，并
使假阴道纵轴方向与公畜阴茎伸出方向
在同一直线上。
（ 2）采精员也可以站在台畜右侧，手持假
阴道采精，当公畜爬跨阴茎勃起伸出时，
将阴茎导入假阴道。
（二）手握法 和筒握法采精 （ 仅用于公猪）
1,手握法采精,采精员戴上手套握住勃起并已
突出包皮的公猪龟头，缓缓顺势拉出，并有节
律的松紧握手，就能采到公猪的精液。此法在
南方全年和在北方夏季都可采用。
2,筒握法采精,用普通的假阴道，但前端未装
集精瓶，当公猪阴茎插入假阴道后，在假阴道
漏斗部握住公猪龟头采精的方法。
（三）按摩法
采精 （ Massage
method）
采精员用手经直肠
壁找到公畜的精囊
腺和壶腹腺，轻柔
按摩。可达到使公
畜阴茎部分勃起而
射精。
?该法适用于牛、
犬和家禽。
（四）电刺激采精法 Electroejaculation
通过电极隔直肠壁选择一定的频率通电，
刺激输精管壶腹，使公畜阴茎勃起并射
出精液。一般在麻醉状态下进行。
?这一方法一般用于未经采精训练或胆小
不易控制的动物，如各种 野生动物和丧
失交配能力 但 种用价值高 的公畜。
电
刺
激
采
精
装
置
（四）其他采精法（书,P146-147）
1、阴道内采精
2、附睾内采精
三、采精频率 Frequency of semen collection
定义（记忆）,指在一定时间内（通常为次／周）
采精的次数。
公牛,每周 2-3/次周
猪、马,因为射精量大，隔日一次,
绵、山羊,配种季节内，每天可采精多次，并连续
数周
?一般在观察到精子尾部有 未脱落的原生质小滴,
说明采精频率过高，此时应减少或停止采精。
采精频率是以雄性生产精子的能力来决定。
eg,每克睾丸组织每天产生 2500万精子
一头公猪的一对睾丸重 1000克
一次射精量为 250ml
每 ml精子数为 2亿
则 2500万 31000克 3 7日＝ 1750亿精子 /周
每次射精精子数＝ 250ml 3２＝ 500亿
每周采精次数为 1750亿 e500亿＝ 2.5次
?采精频率 过低则经济上不划算，过高则阻碍公
畜的生长发育和缩短其使用寿命 。
第三节 精液品质检查 Semen quality evaluation
目的,是了解精液质量高低、种公畜配种负担
能力、精液稀释倍数、采精时精液是否受到
污染和采精技术好坏程度的工作。
包括,
外观检查
显微镜检查（精子活率、密度、形态）
微生物检查
精子代谢能力检查
其他检查（受胎效果）
一、精液外观性状检查法
（一） 精液量 (ml) （记忆，书 P147）
奶牛,5-10； 肉牛,4-8； 绵羊,0.8-1.2 ；
猪,150-300；山羊,0.5-1.5； 马,30-100
0
50
100
150
200
250
奶牛 水牛 马 猪 绵羊 山羊
射精量
（二）颜色与气味
一般为 乳白色活灰白色 。正常牛羊精液呈乳白
色或乳黄色，猪、马的精液呈淡乳白色或浅灰
白色。
正常精液特征 依从浓到稀：乳黄 -乳白 -白色 -灰白
淡红（鲜红） 生殖道下段出血或龟头出血
淡红（暗红） 副性腺或生殖道出血
绿 副性腺或尿生殖道化脓
褐 混有尿液
(三 )云雾状
浓份精液因精子密度大、活力强，使精液翻腾
呈现旋涡云雾状。（ >15亿 / ml）
（四） pH值
牛、羊精液 pH值为 6.5-6.9,猪、马为 7.4-7.5。
一般同种精液 pH值较低的品质较好,pH与生
存活率相关系数为 -0.47，但稀释的精液其 pH
与品质无太大关系。
（五）杂质
如被毛、脱落上皮、炎性分泌物、灰尘、纤
丝。
二、精子活率检查
精子活率（记忆）,在显微镜下观察，在一个视
野内向直线运动的精子占全部精子总数的百分率。
?一般在 37-38°C温度下进行评定，牛、羊精
液尚需用生理盐水作稀释后才能评定。
?活力一般用 0-1.0的 10级评分，一般新鲜采精
液活率应该为 0.7~0.8左右。
精子活动,mpg
三、精子密度的检查
精子密度（记忆）, 是指单位体积（ ml）精液内
所含有的精子数。
畜种 牛 羊 猪 马 鸡
密度
亿 /ml 8-12 20-30 2-3 1.5-3 30-50
0
10
20
30
40
牛 羊 猪 马 鸡
亿/ m l
(一）估测法,在低倍显微镜下根据精子之
间的距离来定，分为密、中和稀三等。
（二）血细胞计数法,取 1ul精液或其稀释
液渗入血细胞计数板内，计数精子数目并根
据倍数算出精液密度。
（三）光电比色法,是根据精子的透光性而测定精
子数的方法。透光性越高，则精子数越少，透光性
越差，则精子数越多。现在甚至可与计算机联接，
立即知道被测精液的活率和密度。
四,精子的形态检查
1、精子畸形率,头部、颈部、尾部，观
察 200个精子，求出比例。用于输精
的精子畸形率 不得超过 20%。
头部,巨大，细小，缺失，双头，轮廓不
明显，皱缩
颈部,臌大，纤细，弯曲，不全，原生质
滴
尾部,屈折，带原生质滴，双尾，折断，
纤细
双头和双尾精子
2、精子顶体异常率
顶体与精子受精能力直接有关，牛超过 14%，猪超
过 4.3%，显著降低受精率。
五、精子代谢能力检查
（一）精子生存时间和生存指数
精子生存时间（记忆）,指精子在体外一定条件
下（稀释液、稀释倍数、保存温度和方法等）的
总生存时间。
具体算法：所有间隔时间累加后减去最后两次间
隔时间的一半即为精子的存活时间。
精子生存指数（记忆）,相邻两次检查的间隔时
间与平均活力的积之和。
?是精子存活时间与精子活率下降变化的一项综
合指标。
?精子生存时间越长，则生存指数越大，说明精
子生活力越强，品质越好。
检查时间 间隔时
间 (h)
活率 2次检查平均
活率
h3平均
活率 日 /月 时间
20/3 6 0 0.8 —
14 8 0.6 0.7 5.6
22 8 0.5 0.55 4.4
21/3 6 8 0.3 0.4 3.2
14 8 0.2 0.25 2.0
22 8 0.1 0.15 1.2
22/3 6 8 摆动 0.05 0.4
∑= 48 ∑= 16.8
存活时间,48-8/2=44h
存活指数,h3平均活率 =16.8
（二）美蓝褪色试验
美蓝是氧化还原剂，氧化呈蓝色，还原呈
无色，精子在美蓝溶液中，呼吸时氧化脱氢，
美蓝获得 H+后便使蓝色还原为无色。因此，
根据美蓝褪色时间可测知精液中存活精子数
量多少，判定精子的活率和密度高低。
（三）精液果糖分解测定
精液果糖分解能力与精子活力密切相关，
因此测定一亿精子每小时消耗果糖的 mg数来
表示 精子的果糖分解能力，甚至反映精子活
率和密度的高低。
第四节 精液的稀释
Section 4 Semen dilution
一、精液稀释的目的
Aims of semen dilution
二、稀释液的成分及作用
Composition of extenders (diluents)
三、稀释液的种类和配制
Types and make-up of extenders (diluents)
四、精液稀释方法和稀释倍数
Methods and multiple of semen dilution
一、精液稀释的目的
1、精液稀释
定义（记忆）,往精液中加入适宜精子体
外存活，并保持精子受精能力的一定量稀
释保护液。
2,精液稀释目的 （记忆，见书 P154）
（ 1）扩大精液量 — 增加可配 ♀ 数；
（ 2）延长存活时间；
（ 3）便于运输和保存。
二,稀释液的成分及作用
（一）稀释剂 —— 扩大容量
一般配制与精液具有等渗压的氯化钠、葡
萄糖或奶类液体。
（二）营养剂 —— 供能
糖类、奶类和卵黄均可。 如果糖、葡萄糖,
乳糖和蔗糖等。
（三）保护剂 —— 中和、缓冲精清对精子
保存的不良影响，防止精子受“低温打
击”，创造精子生存的环境和抑制细菌
等 。
1、缓冲物质,保证精液适宜 pH值，利于精子的
存活,如柠檬酸钠、磷酸二氢钾,Tris。
2、非电解质,延长精子在体外存活时间。 如各种
非电解质或弱电解质，糖类或甘氨酸。
3、防 冷休克 物质,在精液在冷冻或解冻过程中，
精子内外环境的水分，将经历液态和固态的
转化过程，对精子危害较大。 抗冷物质中卵
磷脂和乳脂的双向亲和性对保护精子不受或
减弱冷打击。 常用 卵黄或奶 类。
4、抗冻物质,抗冻剂有提高精液冰点，少量渗入
精子可降低冷冻损伤（减少冰晶形成），从
而达到抗冻作用。 常用 甘油或二甲基亚砜
(DMSO)。
5、抗菌物质,抑制精液中和操作中带入的微生物
的繁殖。 如青链霉素、磺胺等。
（四）其他添加剂
1,酶类, H2O2酶, 分解精子代谢过程中产生
的 H2O2,消除其危害, 利于维持精子活率 。
β-淀粉酶能促进精子获能, 提高受胎率 。
2,激素,OT,PG等, 促进母畜生殖道的蠕动 。
3,维生素,VB1,VB2,VC,利于精子存活 。
4,其他,CO2,乙酸, 植物汁等, 可降低稀释
液的 pH值, 有助于精子保存 。
三、稀释液的种类和配置
（一）稀释液的种类
1、现用稀释液
奶类和等渗糖类为主。
2、常温保存稀释液
用于常温保存精液,pH较低 。
3、低温保存稀释液
用于低温保存精液，含有 卵黄和奶类等抗冷
休克物质。
4、冷冻保存稀释液
用于冷冻保存精液，含 抗冻物质如甘油、
DMSO 。
（二）稀释液的配制
1、各种成分的准备
（ 1）蒸馏水,现制、灭菌。
（ 2）化学药品,成分要纯净，溶解过滤后消毒，
高温变性药品应用细菌滤膜过滤。
（ 3）奶类,新鲜，不含其它物质。于（ 90~95℃ ）
水浴 10min，去除奶皮。
（ 4）卵黄,取自新鲜鸡蛋，用前对蛋壳消毒。
（ 5）抗生素、酶类、激素、维生素等,于稀释液消毒冷却后加入。
2、配制稀释液注意事项（书 P155）
（ 1）所用物品认真清、消毒、干燥；
（ 2）如配制液状稀释液，最好现用现配，不要
长时间保存（预混除外）。
四、精液稀释方法与稀释倍数
（一） 精液稀释方法
1、新采集的精液于 30℃ 稀释，防止精子
冷休克；
2、采精后及时检查、稀释，时间长后精
子容易死亡；
3、稀释液与精液温度应该一致；
4、稀释时,将稀释液沿容器壁缓慢倒入
精液,高倍稀释时分次进行；
5、稀释后立即镜检活力，以确保操作正
确。
（二）稀释倍数
稀释倍数 = 稀释液的量 /精液量
1:1稀释,1:2稀释
如何精确计算一份精液的稀释倍数？
首先要考虑以下几个因素,猪
1、该份精液总量 250ml
2、精子密度 2亿 /ml
3、有效精子数（保存后使用前精子活率） 0.6
4、每次输入有效精子数 10亿
5、每次输精量 20ml
该份精液的有效精子数,
250ml3230.6=300亿
则分成的份数,
300亿 /10亿 =30份
则稀释后总量,
30320=600ml
则稀释倍数,
600-250/250=1.4
现行的精液保存方式有三种（记忆）,
常温保存（ 15-25 ℃ ）
低温保存（ 0-5 ℃ ）
冷冻保存（ -79 ℃ 或 -196 ℃ ）
第五节 精液的保存
Section 5 Semen Storage
液态保存
固态保存
一、常温保存 （ 15-25 ℃ ）,变温保存
1、原理（记忆）,是利用一定范围的酸性环
境，抑制精子的活动，使精子保持可逆的静止状
态而不丧失受精能力。 （方法见 P157）
2、稀释液,
（ 1）能量物：如葡萄糖 ；
（ 2）缓冲体系：如柠檬酸钠、碳酸氢钠 ；
（ 3）抗生素：如青、链霉素等。
3、方法,天热时，尽可能降低保存温度如放入
水井、水缸，天冷时，放在有暖气的室内。
适合猪精液保存
（ 15～ 17℃ ）
二、低温保存 （ 0-5 ℃ ）
1、原理（记忆）,利用较低的温度来减
弱精子的活动和代谢，从而延长精子的
生命。
2、低温保存稀释液,除室温保存液应具
有的成分外（不充 CO2），在牛用的稀
释液还需用加 卵黄或牛奶 。
3、保存前的处理
（ 1）稀释分装,低温保存的精液通常用玻璃或
塑料瓶分装，瓶内尽量不留空气，然后封口 ;
（ 2）降温处理,通常按 0.2℃ /min降至保存温度 ;
（ 3）保存方法,牛羊精液置于 0~5 ℃,猪精液
须特殊改造的冰箱或用泡沫盒内放冰块，精
液用一块泡沫垫在上面； （看后图）
（ 4）低温保存精液的利用,低温保存的精液在
使用前应该用水浴升温至 30℃ 。
4、液态精液的运输
（ 1）包装好、做好标记（种类、品种、畜号、
时间）；
（ 2）运输中避光、防震并保持温度。
三、精液冷冻保存 (-79 ℃ 或 -196 ℃)
定义（记忆，书 P159）,是 利用液态氮
（ -196 ℃ ） 或干冰 （ -79 ℃ ）,作为冷
源，将精子和精液冷冻成固体，并在液态
氮或干冰中作超低温永久保存。
意义（熟悉）,
（１）提高优良种♂的配种效能；
（２）便于冷冻精液的自动化生产；
（３）便于引种；
（４）加快改良和育种；
（５）推进繁殖新技术的应用；
（６）建立动物基因库。
（一） 精液冷冻保存原理（记忆）
目前关于精液冷冻的原理普遍倾向于玻璃化
学说。
原理,利用超低温使精液和精子快速冷冻,
快速越过 形成冰晶的温度范围（ 0-60 ℃ ）,
精液或精子中的水分不形成冰晶，而是 形成
玻璃化 。 同时在 抗冻剂 的存在下使精子免受
冻伤，在温度上升至体温精液解冻后精子能
够保持完整的形态结构、功能和受精能力。
液态 → 固态
结晶态：缓慢降温形成。水分子有
序形成冰晶对精子有害：机械和渗
透压损伤。
玻璃态：快速降温形成。水分子无
序形成玻璃样的超微粒结晶，对精
子无害。
（ 0～ -60℃ ）（ -15～ -25℃ ）
（ -60～ -250 ℃ ）
玻璃化是可逆的，不稳定的，当缓慢升温时又可能形成冰晶化。
1、冷冻时细胞的损伤
? 冰晶,在 0～ -60℃ 低温区，缓慢降温条件下形
成的，降温越慢，冰晶越大,-15～ -25℃ 对精
子危害最大。冰晶的形成对精子造成的机械损
伤和渗透压损伤是引起精子死亡的主要物理因
素 （记忆，书 P160） 。
? 玻璃化,在 -60～ -250 ℃ 超低温区，从冰晶化
区域内开始，就快速降温，迅速越过冰晶化进
入玻璃化阶段，此阶段对精子无害。
2、添加冷冻保护剂（甘油,DMSO等）
? 作用,增强精子抗冻能力，并对防止冰晶发
生起到重要作用。
（二）精液冷冻保存稀释液
除与精液低温保存液相同外，尚需用加 抗
冻剂 。
1、牛用,主要有卵黄 -柠檬酸钠 -甘油液，
卵黄 -糖类 -甘油液，奶类 -甘油液等 3种。
甘油浓度以 5%-7%为宜。
2、猪用,一般采用以葡萄糖、乳糖、蔗
糖、甘油为主要成分的稀释液，甘油浓度
以 1%-3%为宜。
（三）精液冷冻保存技术 （熟悉）
1、精液品质检查, 活率 0.8以上才能用于冷
冻
2、精液稀释,
一次稀释,一次性将精液与稀释液和抗冻剂混合
两次稀释,低温下加入含有甘油的另一半稀释液
3、精液分装 （目前多用细管分装）
（ 1）颗粒精液（ pellet semen）：约 0.2ml一粒，
似小黄豆大
（ 2）细管精液（ straw semen),0.25ml和 0.5ml
（ 3）安瓶和袋装：用于公猪和公马精液的冷冻
4、降温和平衡
（ 1）降温,指精液采出稀释后由 30℃ 以上温
度经 1~2h缓慢降至 5 ℃, 以防低温打击。
（ 2）平衡,指加含甘油稀释液对精子作用的
时间。
?平衡 目的是 使精子有一段适应低温的时间,
使甘油充分渗透进入精子体内，达到渗透的活
性物质平衡，产生抗冻作用。
?一般将降温至 5 ℃ 的精液于这一温度下平衡 1-
2h或 3-5h。
5,精液冻结
（ 1）干冰埋藏法
5 ℃ 平衡的精液置于干冰中，在其上再覆盖上
干冰。
（ 2）液氮熏蒸法
于液氮平面以上 1-3cm温度为 -80~-100 ℃ 范围
之处，进行精液的冷冻 5~10min，然后倒入液氮
即可。
?目前有自动控制的精液冷冻仪，通过控制液氮
的喷量，将精液或细管的温度下降（ 5~-60 ℃ )控
制在 4 ℃ /min, -60 ℃ 以下尽快降至 -196 ℃ 。
牛细管精液
6、解冻与检查
（ 1）解冻液（颗粒精液用）
2.9％柠檬酸钠液或 2.9％柠檬酸钠液与 5%葡萄糖
液各半混合。
（ 2）解冻（ thawing)
（ 3）检查
（ 1）颗粒精液解冻后取一小滴检查活力；
（ 2）细管精液可推出一点检查活力，如平时都
按常规操作亦可不检。
?我国规定牛冻精解后的活率在 0.4，水牛在 0.3
以上才能用于 AI。
（ 4）解冻后的精液处理
应尽快用于输精，不能长时间保存，更不能再
次冷冻。
7、冷冻精液保存与运输
（ 1） 冻精保存
合格的冻精, 包装妥善并做好标记 （ 站名,
家畜品种, 种畜号, 冻精日期, 剂型批号,
精子活率, 数量等 ）, 置入液氮罐内, 保存
过程中, 温度恒定, 精液品质不变, 才能达
到长期保存的目的 。
（ 2） 冻精运输
专人负责, 用液氮容器盛装, 内充满液氮,
有保护外套, 小心轻放 。 装在车上要安放平
稳, 拴牢, 严防撞击和倾倒 。 切不可斜放,
叠放或压入其他物品 。 避免暴晒和强烈震动,
如长途运输, 要及时补充液氮 。
液氮罐结构
1、内外壳体
2、内槽
3、夹层
4、颈管
5、罐盖塞
6、提筒
从
液
氮
罐
取
冻
精
一、输精前的准备 Preparations
二、输精的基本要求 Requirements
三、输精方法 Methods
四、影响人工授精受胎率的因素
Factors influencing the fertility by AI
第六节 输 精 Insemination
一、输精前的准备 Preparations
1、母畜的准备,
通常将母畜置于输精架内或用脚绊保
定，母猪不需要 保定,输精前要对阴户 清洗
干净。
2、输精器材的准备,
输精用具一般在用前要彻底洗涤并 消,
输精管内壁用前经 稀释液冲冼 。 每头母畜使
用一支输精管,不能相互共用。
各种当前使用的一次性输精器
通常的 100ml精液瓶
蒋氏公猪精液瓶和袋
精液瓶与精液袋配合时的情况
各种牛用输精器实物外观图
蒋氏输精枪和外套扩大图
3、精液的准备
新鲜采集的精液，必须检验合格才能使
用,常温或低温保存的精液 必须升高温度至
35 ℃ 左右, 镜检活率不 低于 0.6,冷冻精液
解冻 后镜检 活率不低于 0.3,才能使用。根据
不同的畜种确定精液需要量后进行输精。
4,输精人员的准备,
主要是剪短并磨平指甲，用 75%酒精消
毒，再于手臂上涂上润滑剂。目前已经使用
长手套。
二,输精要求 Requirements
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?? ò1 ?′ Dí ò1 ì? ?? ?3 ?? ?3 ò1 ì? ò1 ì?
ê? ?? à? ( ml) 30 - 40 0,2- 1 0,2- 1 0,05 - 0,1 15 - 30
óD D§?? 3ó ( òú ) 20 - 50 0,1- 0,2 0,1- 0,2 0.5 2,5- 5
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±3 1? 8- 12 h á? ?° 10 - 20 á? ?° 10 - 20 è? òo ′?
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ê? ?? ?? ·? 12 ~ 18 h 8~ 10 h 8~ 10 h 8~ 10 h 24 ~ 48 h
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三、输精方法 Methods
（一）母牛和母水牛的输精方法
1、开膣器输精法：目前已经不用
2,直肠把握子宫颈输精法
于直肠内隔直肠壁握住子宫颈外端，另一只手
持输精导管插入阴门避开尿道口，插入子宫颈口
进行子宫输精。
优点,
（ 1）用具简单，操作安全，不易感染；
（ 2）母牛无痛感；
（ 3）输精部位深，受胎率较高；
（ 4）可防止误给孕牛输精而引起流产。
牛和水牛的输精方法和要求（记忆）,
（ 1）方法,直肠把握法
（ 2）输精剂量：冷冻精液 0.2-1ml
（ 3）输入有效精子数,0.1-0.12亿
（ 4）输精时间,发情开始后 10-12h，或排卵
前 10-20h
（ 5）输精次数,间隔 8～ 10h两次
（ 6）输精部位,子宫内
正确的牛直肠把握输精图
直
肠
检
查
直肠
把握
子宫
颈输
精
牛
AI
视
频
（二）母猪输精方法（记忆）
１、方法,直接插入法输精 （与母猪的生
殖道结构特点有关）。 （见后）
２、输精时间：发情开始后 1~1.5d或接受
“压背试验”后 8~12h。
３、输精次数：间隔 12-18h 两次
４、输精量
本地,20~30ml； 外来,80~100ml
５、每次精子数
本地,10～ 20亿；外来,30～ 50亿
6、输精部位：子宫内
?由于母猪 子宫颈与阴道联接处无明显的界限和皱折, 输
精时一般直接将输精器通过阴门插入阴道，避开尿道开口，进入子宫颈。
母猪自然交配与输精
母猪输精示意图
四、影响人工授精受胎率的因素
Factors influencing the fertility by AI
1、精液品质
2、适时输精
3、技术水平
