液相色谱的定性及定量技术
色谱峰定性
?鉴别每个色谱峰
?通过比较保留值 (通常是保留时间 )的方法，
找到各色谱峰所对应的组份
?大多数情况下用比较保留时间来定性
即所谓：
?保留时间相同，可能是同样的组份
?保留时间不同，肯定不是同样的组份
用保留时间定性
?用“标样”的保留值定出被测组份的位置
0, 0 0
0, 0 5
0, 1 0
0, 1 5
0, 2 0
0, 2 5
0, 3 0
0, 3 5
0, 4 0
0, 0 0 0, 5 0 1, 0 0 1, 5 0 2, 0 0 2, 5 0 3, 0 0 3, 5 0 4, 0 0 4, 5 0 5, 0 0 5, 5 0 6, 0 0 6, 5 0 7, 0 0
A U
M in u t e s
U r a c il
E t h y lp a r a b e n
P r o p y lp a r a b e n
进一步的确认
?标准加入
?同时用其他方法
?其他色谱方法（改变机理，如：用不同的色
谱柱）
?其他检测器
?PDA，光谱图比较、谱库检索
?MS，质谱图解析、谱库检索
?其他仪器方法
标准加入法举例
? 废水样品中五氯苯（ PCP）的分析
梯度曲线 梯度曲线
PCP
4 ppm
3 ppm
2 ppm
1 ppm
峰一致性的确认
?确认色谱峰的纯度
?保证每个色谱峰下只有一个被测的组份
?检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
?色谱峰纯度确认的方法
?用光电二极管矩阵检测器比较光谱图
用二极管矩阵检测器比较光谱图
?苯的色谱及光谱图
2 4 0, 0 0
2 6 0, 0 0
2 8 0, 0 0
0, 0 0
0, 1 0
0, 2 0
0, 3 0
0, 4 0
0, 4 0 0, 8 0 1, 2 0 1, 6 0 2, 0 0 2, 4 0 2, 8 0
定量分析的具体内容
?确定样品的类型，主要成分 /痕量成分
?使分析条件的分离度（ R）大于,1.5
?色谱峰的定性，峰一致性测定
?检测限及定量限：确定灵敏度及线性范围
?用标样建立标准曲线
?检查方法的准确度及精确度
?用标样定期检查方法
准确度的衡量
?色谱方法是相对定量方法, 如不考虑损失
及杂质干扰等的因素, 其结果同, 标样,
的准确程度关系密切
?一般的衡量方法是做回收率实验或不同方
法之间的比较
准确度的影响因素
?标样的可靠性及其配制的准确度
?色谱方法的可靠性
?色谱泵的精确度
?进样器的准确度，进样技术
常用的定量方法
?峰面积百分比法
?由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用
?外标法
?在液相色谱中用的最多
?内标法
?准确，但是麻烦
?在标准方法中用的最多
色谱峰定性
?鉴别每个色谱峰
?通过比较保留值 (通常是保留时间 )的方法，
找到各色谱峰所对应的组份
?大多数情况下用比较保留时间来定性
即所谓：
?保留时间相同，可能是同样的组份
?保留时间不同，肯定不是同样的组份
用保留时间定性
?用“标样”的保留值定出被测组份的位置
0, 0 0
0, 0 5
0, 1 0
0, 1 5
0, 2 0
0, 2 5
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0, 3 5
0, 4 0
0, 0 0 0, 5 0 1, 0 0 1, 5 0 2, 0 0 2, 5 0 3, 0 0 3, 5 0 4, 0 0 4, 5 0 5, 0 0 5, 5 0 6, 0 0 6, 5 0 7, 0 0
A U
M in u t e s
U r a c il
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进一步的确认
?标准加入
?同时用其他方法
?其他色谱方法（改变机理，如：用不同的色
谱柱）
?其他检测器
?PDA，光谱图比较、谱库检索
?MS，质谱图解析、谱库检索
?其他仪器方法
标准加入法举例
? 废水样品中五氯苯（ PCP）的分析
梯度曲线 梯度曲线
PCP
4 ppm
3 ppm
2 ppm
1 ppm
峰一致性的确认
?确认色谱峰的纯度
?保证每个色谱峰下只有一个被测的组份
?检查是否有共流出的物质（杂质）干扰
?色谱峰纯度确认的方法
?用光电二极管矩阵检测器比较光谱图
用二极管矩阵检测器比较光谱图
?苯的色谱及光谱图
2 4 0, 0 0
2 6 0, 0 0
2 8 0, 0 0
0, 0 0
0, 1 0
0, 2 0
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0, 4 0 0, 8 0 1, 2 0 1, 6 0 2, 0 0 2, 4 0 2, 8 0
定量分析的具体内容
?确定样品的类型，主要成分 /痕量成分
?使分析条件的分离度（ R）大于,1.5
?色谱峰的定性，峰一致性测定
?检测限及定量限：确定灵敏度及线性范围
?用标样建立标准曲线
?检查方法的准确度及精确度
?用标样定期检查方法
准确度的衡量
?色谱方法是相对定量方法, 如不考虑损失
及杂质干扰等的因素, 其结果同, 标样,
的准确程度关系密切
?一般的衡量方法是做回收率实验或不同方
法之间的比较
准确度的影响因素
?标样的可靠性及其配制的准确度
?色谱方法的可靠性
?色谱泵的精确度
?进样器的准确度，进样技术
常用的定量方法
?峰面积百分比法
?由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用
?外标法
?在液相色谱中用的最多
?内标法
?准确，但是麻烦
?在标准方法中用的最多
