第五章
器官和组织培养
植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体
培养，包括根、茎、叶、花、果实、种子等。
特点：能保持器官所具有的特征性结构。
指形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组
织和各种器官组织以及愈伤组织的培养。
器官培养（ Organ culture ）
组织培养（ Tissue culture）
一、茎的培养
1、类型
茎尖培养：
茎段培养：
嫩茎段常作为快速繁殖的外植体：即当年萌发
或新抽出的尚未完全木质化的枝条，其细胞的
可塑性大，容易离体培养。
10-100?m的茎尖分生组织（脱毒）
带有腋 (侧 )芽或叶柄、长几厘米的
茎节段进行离体培养 （快繁）
将经过表面 消毒的茎段 在无菌条件下，切成几
厘米长 带节的节段,接种在固体培养基上。经
过培养后，在茎段可 直接发生不定芽,或先诱
导形成 愈伤组织,再 脱分化形成再生苗 。把再
生苗进行切割，转接到 生根培养基 上培养，便
可得到完整的小植株。
2、作用
?无性系快速繁殖；
?培养无病毒苗，品种改良；
?理论基础研究。
3、建立无菌材料（ 茎段 ）及培养
图示茎段培养过程
健康植株上选健壮的枝梢
去叶片用自来水冲洗
再生 培养
MS培养基 75%酒精 1分钟
1%次氯酸钠
0.1%升汞
4、茎的培养发育方向
?腋芽萌发
?脱分化后产生胚状体（原球茎）
?脱分化后直接产生不定器官
离体繁殖
建立悬浮系或
分化胚状体及
不定芽
?脱分化后形成愈伤组织
蝴蝶兰腋芽萌发
5、影响发育方向的因素
?外植体大小
?培养条件
?培养基生长调节剂种类和浓度
微形外植体或分生组织易产生愈伤组织
细胞分裂素和生长素的配比是关键。
21-25℃, 12小时光照 /天
举例：影响月季茎段增殖培养的因素
1．腋芽在茎段上的位臵 。每段的一个腋芽培养
在无激素的基本培养基上,23天后，接近枝条
最顶端的和紧挨着枝条基部的芽发育最慢，而
枝条中部的芽发育最快。
2．去茎顶端的作用 。继代培养接种时切去嫩茎
的顶芽后，再转接于新鲜培养基上培养，促进
嫩茎的增殖。
3．嫩茎长度对形成多芽苗的影响 。茎段为 1-10
mm长短时，对形成多芽苗最有效，而且每个茎
段的侧枝数也较多，若切割过短 (小于 1mm)或过
长 (11-15mm)都对茎的增殖不利。
4．植物生长调节剂的影响。
采用适当浓度的植物生长抑制剂三碘苯甲酸可
以促进嫩茎增殖。
6-BA是促进茎增殖最有效的细胞分裂素，浓度
在 1-3mg/L，浓度高会减少茎的伸长，也对下一
步生根起抑制作用。
用 1 mg/L 6-BA配合 1mg/L NAA，虽然使茎的增
殖略有降低，但可使茎得到伸长。赤霉素抑制
月季茎的增殖。
二、根的培养
离体根由于具有生长迅速、代谢活跃及在已知条
件下培养，可根据需要增减培养基中的成分等优
点，对离体根的培养多用于探索植物根系的生理
及其代谢活动。
在离体根培养中，自然条件下生长在土壤中的根
要解决消毒问题，是非常困难的，常用无菌苗的
根作为培养材料。
番茄根的培养过程
番茄种子常规表面消毒，在无菌条件下，在培养
基上萌发。
胚根长至 30-40 mm后，从根尖一端切取 10 mm长
接种于固体培养基中。
暗条件下培养 4天有侧根发生,7天后又可以切下
侧根的根尖作为新的培养材料再进行扩大培养。
由单个直根衍生，并经继代培养而保持遗传性一
致的根的培养物，称为离体根的无性系。
?硫胺素 (维生素 B1)和吡哆醇 (维生素 B6)对离体
根培养的作用明显。
?碘有利于番茄根的生长。
?硼对离体根的生长也具有重要的影响，缺硼会
降低根尖细胞的分裂速度，阻碍细胞伸长等。
?生长素对不同植物的根离体培养三种反应：
生长素 促进 离体根的生长 (如玉米、小麦等 )；
离体根的生长 依赖 于生长素的作用 (如黑麦 )；
生长素 抑制 离体根的生长（樱桃，番茄）。
三、叶的培养
很多植物（非洲紫罗兰、香叶、天竺葵、
秋海棠等）的叶片具有很强的 再生能力,
由于取材方便,数量多 且 均一性 较强，
可以作为适宜的外植体。
基本培养过程
取叶片 表面消毒 平放在固体培养基上培养
大多植物的叶组织在离体培养条件下先形成愈伤
组织，再分化出胚状体、茎、叶和根。
1.将叶表面洗干净,70％乙醇浸泡 30秒表面消毒，
用 0.1％升汞 浸泡数分钟 。
2.叶片在培养基上的生长状况大多依赖于 离体时
的成熟程度,幼叶比近成熟的叶生长潜力大。
叶片 ?诱导丛生芽 ?生根培养 ?移栽。
非洲紫罗兰嫩叶,70％酒精略蘸一下，再 0.1％升
汞溶液消毒 5-8 min，无菌水冲洗数次，切成 0.5-1
cm的小块接种于
MS + 1 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA
光照条件下培养,35天后叶片直接分化出丛生芽。
小丛生芽转接于 1/2 MS + 0.2 mg/L IBA的培养基
上,10天后，主茎叶片明显增大，诱导根分化，
接种 15天后即可移栽。
举例：非洲紫罗兰嫩叶离体培养的过程
思考题
? 茎的培养基本过程
? 根的培养基本过程
? 叶的培养基本过程
器官和组织培养
植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体
培养，包括根、茎、叶、花、果实、种子等。
特点：能保持器官所具有的特征性结构。
指形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组
织和各种器官组织以及愈伤组织的培养。
器官培养（ Organ culture ）
组织培养（ Tissue culture）
一、茎的培养
1、类型
茎尖培养：
茎段培养：
嫩茎段常作为快速繁殖的外植体：即当年萌发
或新抽出的尚未完全木质化的枝条，其细胞的
可塑性大，容易离体培养。
10-100?m的茎尖分生组织（脱毒）
带有腋 (侧 )芽或叶柄、长几厘米的
茎节段进行离体培养 （快繁）
将经过表面 消毒的茎段 在无菌条件下，切成几
厘米长 带节的节段,接种在固体培养基上。经
过培养后，在茎段可 直接发生不定芽,或先诱
导形成 愈伤组织,再 脱分化形成再生苗 。把再
生苗进行切割，转接到 生根培养基 上培养，便
可得到完整的小植株。
2、作用
?无性系快速繁殖；
?培养无病毒苗，品种改良；
?理论基础研究。
3、建立无菌材料（ 茎段 ）及培养
图示茎段培养过程
健康植株上选健壮的枝梢
去叶片用自来水冲洗
再生 培养
MS培养基 75%酒精 1分钟
1%次氯酸钠
0.1%升汞
4、茎的培养发育方向
?腋芽萌发
?脱分化后产生胚状体（原球茎）
?脱分化后直接产生不定器官
离体繁殖
建立悬浮系或
分化胚状体及
不定芽
?脱分化后形成愈伤组织
蝴蝶兰腋芽萌发
5、影响发育方向的因素
?外植体大小
?培养条件
?培养基生长调节剂种类和浓度
微形外植体或分生组织易产生愈伤组织
细胞分裂素和生长素的配比是关键。
21-25℃, 12小时光照 /天
举例：影响月季茎段增殖培养的因素
1．腋芽在茎段上的位臵 。每段的一个腋芽培养
在无激素的基本培养基上,23天后，接近枝条
最顶端的和紧挨着枝条基部的芽发育最慢，而
枝条中部的芽发育最快。
2．去茎顶端的作用 。继代培养接种时切去嫩茎
的顶芽后，再转接于新鲜培养基上培养，促进
嫩茎的增殖。
3．嫩茎长度对形成多芽苗的影响 。茎段为 1-10
mm长短时，对形成多芽苗最有效，而且每个茎
段的侧枝数也较多，若切割过短 (小于 1mm)或过
长 (11-15mm)都对茎的增殖不利。
4．植物生长调节剂的影响。
采用适当浓度的植物生长抑制剂三碘苯甲酸可
以促进嫩茎增殖。
6-BA是促进茎增殖最有效的细胞分裂素，浓度
在 1-3mg/L，浓度高会减少茎的伸长，也对下一
步生根起抑制作用。
用 1 mg/L 6-BA配合 1mg/L NAA，虽然使茎的增
殖略有降低，但可使茎得到伸长。赤霉素抑制
月季茎的增殖。
二、根的培养
离体根由于具有生长迅速、代谢活跃及在已知条
件下培养，可根据需要增减培养基中的成分等优
点，对离体根的培养多用于探索植物根系的生理
及其代谢活动。
在离体根培养中，自然条件下生长在土壤中的根
要解决消毒问题，是非常困难的，常用无菌苗的
根作为培养材料。
番茄根的培养过程
番茄种子常规表面消毒，在无菌条件下，在培养
基上萌发。
胚根长至 30-40 mm后，从根尖一端切取 10 mm长
接种于固体培养基中。
暗条件下培养 4天有侧根发生,7天后又可以切下
侧根的根尖作为新的培养材料再进行扩大培养。
由单个直根衍生，并经继代培养而保持遗传性一
致的根的培养物，称为离体根的无性系。
?硫胺素 (维生素 B1)和吡哆醇 (维生素 B6)对离体
根培养的作用明显。
?碘有利于番茄根的生长。
?硼对离体根的生长也具有重要的影响，缺硼会
降低根尖细胞的分裂速度，阻碍细胞伸长等。
?生长素对不同植物的根离体培养三种反应：
生长素 促进 离体根的生长 (如玉米、小麦等 )；
离体根的生长 依赖 于生长素的作用 (如黑麦 )；
生长素 抑制 离体根的生长（樱桃，番茄）。
三、叶的培养
很多植物（非洲紫罗兰、香叶、天竺葵、
秋海棠等）的叶片具有很强的 再生能力,
由于取材方便,数量多 且 均一性 较强，
可以作为适宜的外植体。
基本培养过程
取叶片 表面消毒 平放在固体培养基上培养
大多植物的叶组织在离体培养条件下先形成愈伤
组织，再分化出胚状体、茎、叶和根。
1.将叶表面洗干净,70％乙醇浸泡 30秒表面消毒，
用 0.1％升汞 浸泡数分钟 。
2.叶片在培养基上的生长状况大多依赖于 离体时
的成熟程度,幼叶比近成熟的叶生长潜力大。
叶片 ?诱导丛生芽 ?生根培养 ?移栽。
非洲紫罗兰嫩叶,70％酒精略蘸一下，再 0.1％升
汞溶液消毒 5-8 min，无菌水冲洗数次，切成 0.5-1
cm的小块接种于
MS + 1 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA
光照条件下培养,35天后叶片直接分化出丛生芽。
小丛生芽转接于 1/2 MS + 0.2 mg/L IBA的培养基
上,10天后，主茎叶片明显增大，诱导根分化，
接种 15天后即可移栽。
举例：非洲紫罗兰嫩叶离体培养的过程
思考题
? 茎的培养基本过程
? 根的培养基本过程
? 叶的培养基本过程
