18遗传疾病的诊断
Diagnosis of Genetic Disease
第一节 遗传病的常规诊断一、遗传疾病诊断的主要内容
（一）病史采集
（二）症状与体症
（三）家系分析
（四）染色体检查
1．染色体检查的指征 2．染色体检查技术
（五）生化检查二、对已出现症状的患者的诊断
了解和掌握了遗传病的诊断方法，就可以有针对性的对遗传病患者进行诊断。对于大多数的遗传病，下一个明确的临床诊断不难办到，但有很多已经明确诊断的疾病，
确定其遗传规律还需要进一步的研究分析。
三、携带者的检出
携带者概念已经扩大，具体指：①携带有隐性致病基因，本人表现正常的个体；②
携带有显性致病基因，但没有外显的正常个体；③携带有致病基因，迟发个体；④
染色体平衡易位或倒位的个体。
四、产前诊断
产前诊断主要从三个方面进行：
①遗传学检查，如细胞培养、染色体检查、
分子诊断等；
②生化检查，如特殊蛋白质、酶、代谢底物、中间产物和终产物等；
③物理诊断，如 B超,X线、胎儿镜、电子监护等。
四、产前诊断
根据遗传病的严重程度和发病率的高低，可将产前诊断的对象排列如 下：
①夫妇之一有染色体畸变，特别是平衡易位携带者，或者夫妇染色体 正常，但出生过染色体异常的患儿的夫妇；
② 35岁以上的高龄孕妇；
③夫妇之一有开放性神经管畸形，或出生过这种畸形患儿的夫妇；
④夫妇之一有先天性代谢缺陷，或出生过这种患儿的夫妇；
⑤ X连锁遗传病基因携带者孕妇；
⑥原因不明的习惯性流产的孕妇；
⑦羊水过多的孕妇；
⑧夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇；
⑨具有遗传病家族史，又系近亲婚配的孕妇。虽然具备了上述条件，
但如果出现先兆流产、妊娠时间过长、有出血倾向者，则不宜做产前 诊断，另外应拒绝仅要求仅做胎儿性别的检查。
四、产前诊断
取胎儿细胞和羊水方法有：
（一）羊膜穿刺法四、产前诊断
取胎儿细胞和羊水方法有：
（二）绒毛取样法四、产前诊断
取胎儿细胞和羊水方法有：
（三）脐带穿刺
（四）胎儿镜检查
（五）孕妇外周血胎儿细胞富集第二节 分子诊断一、分子诊断学的发展
从第一代遗传标志（ RFLP）到第二代遗传标志（ STR），信息量不断增加；而第三代遗传标志（ SNP）已经浮出水面，它被认为是目前信息量最大的遗传标志，必将在基因诊断中发挥巨大的作用。
二、分子诊断的策略和常用技术
（一）基因诊断的策略
目前的分子诊断（基因和蛋白的诊断）主要集中在结构和种类诊断上，也就是说进行基因突变的检测。
mRNA检测也是基因诊断的一个方面
基因连锁检测方法
基因诊断除了应用于遗传病外，后天基因突变引起的疾病也可以进行二、分子诊断的策略和常用技术
（二）基因诊断的基本技术
1．核酸杂交
2．聚合酶链反应
3,DNA测序
4．基因芯片技术
5．其它常用的技术
（ 1） PCR-RFLP （ 2） PCR-ASO
（ 3） PCR-SSCP
二、分子诊断的策略和常用技术
（二）基因诊断的基本技术
PCR-RFLP是将聚合酶链反应与 RFLP方法结合的一种检测技术。由于 DNA序列的差异，造成了内切酶位点的变化，或是新的酶切位点的产生；或是原酶切位点的消失等，通过酶切后电泳图谱的判断，
达到确定检测结果。该方法包括① PCR。即利用一对或数对特异性引物，将目标 DNA扩增；②酶切。
即利用某些限制性内切酶消化 PCR产物，如 PCR产物中含有相应的酶切位点序列,DNA链则被切开；
③电泳。即利用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶分离酶切后的 PCR产物，根据电泳图谱判断结果。
二、分子诊断的策略和常用技术?
（
二
）
基因诊断的基本技术
PC
R-
AS
O
二、分子诊断的策略和常用技术?
（
二
）
基因诊断的基本技术
PC
R-
SS
CP
三、分子诊断技术的应用
（一）基因诊断在遗传病中的应用
1．镰状细胞贫血的基因诊断
2．血友病 A的基因诊断三、分子诊断技术的应用
（二）基因诊断在肿瘤中的应用
1,ras基因突变的检测
2,p53基因的检测三、分子诊断技术的应用
（ 三 ） DNA分型
DNA分型也分子诊断的重要内容,特别是在研究检测 HLA类型,T细胞受体类型等方面具有重要意义,而分型的结果对研究疾病关联的基因类型和疾病易感性基因等方面具有较大的价值 。
三、分子诊断技术的应用
（四）帕金森病基因诊断的研究进展
1,家系研究
2,连锁基因的研究
（ 1） 4号染色体相连锁的呈常染色体显性遗传的 PD（ PARKI） （ 2） 6号染色体相连锁的呈常染色体隐性遗传的少年型 PD
（ PARK2） （ 3） 第 2号染色体相连锁的呈常染色体显性遗传的 PD（ PARK3）,
3,散发性 PD遗传易感性的研究四、疾病分子诊断的展望
未来的分子诊断将朝着三个主要方向发展；
①胚胎着床前诊断 — 在囊胚 8个细胞期，通过对其中一个细胞的染色体核型分折和原位杂交，从而将人类的遗传缺陷控制在最早期阶段；
②母体外周血中胎儿细胞分析技术；
③对常见病、多发病如心血管系统疾病、糖尿病、
精神疾病、神经系统疾病、恶性肿瘤、哮喘、近视眼等进行分子诊断。
五、疾病分子诊断所带来的问题
分子诊断存在的问题主要是其准确性、稳定性和复杂性。
仅以女性常见的乳腺癌为例,1996年美国的 Myriad
Cenetics公司向市场推出了检测乳腺癌易感基因 DRCA1
和 BRCA2携带者的试剂盒 BRCA Analysis，深受欢迎。但实践发现，这种预测并非万无一失，研究表明，携带乳腺癌基因并有家族史的女性，罹患乳腺癌的风险最多只有 50
％，而不是通常认为的 85％。另外，分子诊断可能引起的基因歧视问题不容忽视，一个人的基因组信息，应属个人隐私，其中的致病基因或易感基因查出后，其结果可能被泄露出去，如果没有相应的法律加以保护，被检对象就可能在就业、婚姻、保险等方面受到歧视。随着分子诊断的广泛应用和社会制度的不断完善，相信这些问题会得到解决。
Diagnosis of Genetic Disease
第一节 遗传病的常规诊断一、遗传疾病诊断的主要内容
（一）病史采集
（二）症状与体症
（三）家系分析
（四）染色体检查
1．染色体检查的指征 2．染色体检查技术
（五）生化检查二、对已出现症状的患者的诊断
了解和掌握了遗传病的诊断方法，就可以有针对性的对遗传病患者进行诊断。对于大多数的遗传病，下一个明确的临床诊断不难办到，但有很多已经明确诊断的疾病，
确定其遗传规律还需要进一步的研究分析。
三、携带者的检出
携带者概念已经扩大，具体指：①携带有隐性致病基因，本人表现正常的个体；②
携带有显性致病基因，但没有外显的正常个体；③携带有致病基因，迟发个体；④
染色体平衡易位或倒位的个体。
四、产前诊断
产前诊断主要从三个方面进行：
①遗传学检查，如细胞培养、染色体检查、
分子诊断等；
②生化检查，如特殊蛋白质、酶、代谢底物、中间产物和终产物等；
③物理诊断，如 B超,X线、胎儿镜、电子监护等。
四、产前诊断
根据遗传病的严重程度和发病率的高低，可将产前诊断的对象排列如 下：
①夫妇之一有染色体畸变，特别是平衡易位携带者，或者夫妇染色体 正常，但出生过染色体异常的患儿的夫妇；
② 35岁以上的高龄孕妇；
③夫妇之一有开放性神经管畸形，或出生过这种畸形患儿的夫妇；
④夫妇之一有先天性代谢缺陷，或出生过这种患儿的夫妇；
⑤ X连锁遗传病基因携带者孕妇；
⑥原因不明的习惯性流产的孕妇；
⑦羊水过多的孕妇；
⑧夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇；
⑨具有遗传病家族史，又系近亲婚配的孕妇。虽然具备了上述条件，
但如果出现先兆流产、妊娠时间过长、有出血倾向者，则不宜做产前 诊断，另外应拒绝仅要求仅做胎儿性别的检查。
四、产前诊断
取胎儿细胞和羊水方法有：
（一）羊膜穿刺法四、产前诊断
取胎儿细胞和羊水方法有：
（二）绒毛取样法四、产前诊断
取胎儿细胞和羊水方法有：
（三）脐带穿刺
（四）胎儿镜检查
（五）孕妇外周血胎儿细胞富集第二节 分子诊断一、分子诊断学的发展
从第一代遗传标志（ RFLP）到第二代遗传标志（ STR），信息量不断增加；而第三代遗传标志（ SNP）已经浮出水面，它被认为是目前信息量最大的遗传标志，必将在基因诊断中发挥巨大的作用。
二、分子诊断的策略和常用技术
（一）基因诊断的策略
目前的分子诊断（基因和蛋白的诊断）主要集中在结构和种类诊断上，也就是说进行基因突变的检测。
mRNA检测也是基因诊断的一个方面
基因连锁检测方法
基因诊断除了应用于遗传病外，后天基因突变引起的疾病也可以进行二、分子诊断的策略和常用技术
（二）基因诊断的基本技术
1．核酸杂交
2．聚合酶链反应
3,DNA测序
4．基因芯片技术
5．其它常用的技术
（ 1） PCR-RFLP （ 2） PCR-ASO
（ 3） PCR-SSCP
二、分子诊断的策略和常用技术
（二）基因诊断的基本技术
PCR-RFLP是将聚合酶链反应与 RFLP方法结合的一种检测技术。由于 DNA序列的差异，造成了内切酶位点的变化，或是新的酶切位点的产生；或是原酶切位点的消失等，通过酶切后电泳图谱的判断，
达到确定检测结果。该方法包括① PCR。即利用一对或数对特异性引物，将目标 DNA扩增；②酶切。
即利用某些限制性内切酶消化 PCR产物，如 PCR产物中含有相应的酶切位点序列,DNA链则被切开；
③电泳。即利用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶分离酶切后的 PCR产物，根据电泳图谱判断结果。
二、分子诊断的策略和常用技术?
（
二
）
基因诊断的基本技术
PC
R-
AS
O
二、分子诊断的策略和常用技术?
（
二
）
基因诊断的基本技术
PC
R-
SS
CP
三、分子诊断技术的应用
（一）基因诊断在遗传病中的应用
1．镰状细胞贫血的基因诊断
2．血友病 A的基因诊断三、分子诊断技术的应用
（二）基因诊断在肿瘤中的应用
1,ras基因突变的检测
2,p53基因的检测三、分子诊断技术的应用
（ 三 ） DNA分型
DNA分型也分子诊断的重要内容,特别是在研究检测 HLA类型,T细胞受体类型等方面具有重要意义,而分型的结果对研究疾病关联的基因类型和疾病易感性基因等方面具有较大的价值 。
三、分子诊断技术的应用
（四）帕金森病基因诊断的研究进展
1,家系研究
2,连锁基因的研究
（ 1） 4号染色体相连锁的呈常染色体显性遗传的 PD（ PARKI） （ 2） 6号染色体相连锁的呈常染色体隐性遗传的少年型 PD
（ PARK2） （ 3） 第 2号染色体相连锁的呈常染色体显性遗传的 PD（ PARK3）,
3,散发性 PD遗传易感性的研究四、疾病分子诊断的展望
未来的分子诊断将朝着三个主要方向发展；
①胚胎着床前诊断 — 在囊胚 8个细胞期，通过对其中一个细胞的染色体核型分折和原位杂交，从而将人类的遗传缺陷控制在最早期阶段；
②母体外周血中胎儿细胞分析技术；
③对常见病、多发病如心血管系统疾病、糖尿病、
精神疾病、神经系统疾病、恶性肿瘤、哮喘、近视眼等进行分子诊断。
五、疾病分子诊断所带来的问题
分子诊断存在的问题主要是其准确性、稳定性和复杂性。
仅以女性常见的乳腺癌为例,1996年美国的 Myriad
Cenetics公司向市场推出了检测乳腺癌易感基因 DRCA1
和 BRCA2携带者的试剂盒 BRCA Analysis，深受欢迎。但实践发现，这种预测并非万无一失，研究表明，携带乳腺癌基因并有家族史的女性，罹患乳腺癌的风险最多只有 50
％，而不是通常认为的 85％。另外，分子诊断可能引起的基因歧视问题不容忽视，一个人的基因组信息，应属个人隐私，其中的致病基因或易感基因查出后，其结果可能被泄露出去，如果没有相应的法律加以保护，被检对象就可能在就业、婚姻、保险等方面受到歧视。随着分子诊断的广泛应用和社会制度的不断完善，相信这些问题会得到解决。
