微 生 物 学 第 四 章微生物的营养和培养基
微生物的六种营养要素微生物的营养类型营养物质进入细胞的方式培养基
Cncnc-micro
第四章 微生物的营养和培养基微生物的六种营养 (nutrition)要素碳源 ( carbon source)
氮源 ( nitrogen source)
生长因子 ( growth factor)
无机盐 ( mineral salts)
水 ( wahtor)
Cncnc-micro
能源 ( energy source)
凡能构成微生物细胞或代谢产物中碳架来源的营养物质都称为碳 源 。
碳源 (carbon source)
Cncnc-micro
碳源功能碳源种类
C素构成细胞及代谢产物的骨架
C素是大多数微生物代谢所需的能量来源碳源功能
Cncnc-micro
无机 C源,CO2、碳酸盐,只能被自养微生物利用有机 C源:各种糖类,其次是有机酸、醇类、
脂类和烃类化合物碳源种类
Cncnc-micro
凡是可以构成微生物细胞和代谢产物中氮素来源的营养物质都称为氮源 。
氮源 (nitrogin source)
Cncnc-micro
氮源功能氮源种类为微生物提供合成细胞物质代谢产物的原料,氮源一般不做能源,只有硝化细菌利用铵盐,亚硝酸盐作氮源,同时也作能源 。 同时也做能源 。
氮源功能
Cncnc-micro
分子态氮:固氮微生物以分子氮为唯一氮源无机态氮:硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用有机态氮:蛋白质及其降解产物
a速性氮源:实验室常用牛肉膏、蛋白质、酵母膏做氮源
b迟速性氮源:生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等。
分子态氮:固氮微生物以分子氮为唯一氮源氮源种类
Cncnc-micro
构成微生物细胞的组成成分调解微生物细胞的渗透压,PH值和氧化还原电 位有些无机盐如 S,Fe还可做为自养微生物的能源构成酶活性基的组成成分,维持 E活性。
Mg,Ca,K是多种 E的激活剂无机盐( mineral salts)
无机盐功能
Cncnc-micro
构成微生物细胞以 C,H,O,N,P,S六种元素为主,约占细胞干重的 95% 以上;
Ca,K,Mg,Fe为大量元素,以无机盐阳离子形式被吸收,配培养基进要加磷酸盐,硫酸盐 。
Zn,Ca,Mn,Co,Mo等微量元素,在微生物培养中有 0.1PPM就可以了,自来水原料中以够用,不需另加 。
无机盐种类
Cncnc-micro
微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生长因素。
维生素氨基酸碱 基生长因素( growth factor)
Cncnc-micro
有的微生物自己不能合成维生素,
需要外加,主要是 B族维生素、硫胺素、
叶酸、泛酸、核黄素等,如生产味精需加生物素(是 B族中的一种即 VH)。
维生素
Cncnc-micro
有些微生物自己不能合成某种 AA,
必须给予补充,如赖 AA发酵所用的黄色短杆菌不能合成环丝 AA,为环丝 AA缺陷型菌株,在培养基中必须添加含环丝
AA的氮源 。 如豆饼水解液或毛发水解液等 。
氨基酸
Cncnc-micro
各种菌合成 AA的能力有很大差别,
一般 G- 菌强于 G+,大肠杆菌自己能合成全部 AA,沙门氏菌能合成大部分 AA,
有的菌合成 AA能力极弱,如肠道串珠菌需从外界补充 19种 AA。
Cncnc-micro
嘧啶和嘌呤是核酸和辅 E的重要组分,是许多微生物必须的生长因素。
有些微生物不仅不能合成嘧啶和嘌呤,
而且不能将补充的嘧啶和嘌呤结合在核苷酸上,还必须供给核苷酸,有的菌需补充卟啉或其衍生物,还有的菌需供给
( 低碳 ) 脂肪酸等 。
嘧啶和嘌呤是核酸和辅 E的重要组分,是许多微生物必须的生长因素。
碱基
Cncnc-micro
水微生物细胞含水约占细胞鲜重的 70- 90%,
d ddd水作用是多方面的 。
Cncnc-micro
水的功能水活度的表示方法是细胞中生化反应的良好介质;营养物质和代谢产物都必须溶解在水里,才能被吸收或排出体 ( 细胞 ) 外 。
水的比热高,能有效的吸收代谢过程中放出的热量,不致使细胞的温度骤然上升 。
维持细胞的膨压 ( 控制细胞形态 ) 。
水的功能
Cncnc-micro
微生物可利用的水用水活度来表示 ( Qw),
Qw是指在相同的温度和压力下,溶液中水的蒸气压和纯水的蒸气压的比即 an=P溶液 /P纯水微生物生长所需的水活度通常在 0.63- 0.99之间,细菌水活度较高为 0.8,酵母菌次之,耐旱的微生物水活度为
0.6,水中溶质越高水活度越低 。
水活度的表示方法
Cncnc-micro
自养微生物光能自养微生物 ( 光无机营养型 )
化能自养微生物 ( 化能无机营养型 )
异养微生物光能异养微生物 ( 光能有机营养型 )
化能异养微生物 ( 化能有机营养型 )
微生物的营养类型
Cncnc-micro
完全在无机环中生存,以 CO2,碳酸盐为碳源,以铵盐和硝酸盐为氮源来合成细胞质的微生物称为自养微生物 。
自养微生物
Cncnc-micro
可在完全无机的环境中生长,以 CO2
为碳源,光做能源,无机物为供 H体还原
CO2合成细胞有机物质的微生物叫光能自养微生物。
H2O+ CO2 (CH2O)+ O2
2H2S+ CO2 (CH2O) + H2O+ 2S
Na2S2O3+2 CO2+3 H2O
(CH2O) +Na2SO4+H2SO4
光能自养微生物(光能无机营养型)
Cncnc-micro
在完全无机的环境中生长发育,以无机化合物氧化为时释放的能量为能源,以
CO2或碳盐为碳源,合成细胞物质的微生物叫化能自养微生物 。
这类细菌包括硫细菌,硝化细菌,H细菌,铁细菌等,硫细菌和硝化细菌与生产密切相关 。
化能自养微生物
Cncnc-micro
如 FeO硫杆菌可把 FeO氧化成 Fe,Fe
氧化率达 95- 100%并放出能量
Fe2+ Fe3+ + e+ Q
用氧化亚铁硫杆菌氧化黄铁矿时,可以生成硫酸和硫酸高铁,硫酸高铁是强氧化剂和溶剂可以和硫酸高铁,硫酸高铁是强氧化剂和溶剂可以溶解矿物,如溶解铜矿析出铜元素,用这类微生物来开矿冶金称为细菌冶金,是开采贫矿和尾矿的有效办法,用细菌浸出 Fe的速度比完全氧化快 56- 60倍 。
Cncnc-micro
在完全无机环境中生长繁殖,以含碳有机物为碳源,含氮有机物或无机物为氮源,合成细胞物质,称为异养微生物 。
异养微生物(有机营养型)
Cncnc-micro
这类微生物具有光合色素 。 能利用光做能源,
以有机化合物为供 H体,还原 CO2,合成细胞物质的微生物,称光能异养微生物 。
光能异养微生物能利用 CO2,但必须在有机物存在的条件下,才能生长,人工培养还需供给生长因素 。 目前已用这类微生物,如红螺菌来净化高浓度有机废水,这对处理污水,净化环境,很有发展前途 。
光能异养微生物
Cncnc-micro
这类微生物 以有机化合物为碳源,利用有机化合物氧化过程中产生的能量为能源,以有机或无机含氮化合物为氮源,合成细胞物质 。 这类微生物称为化能异养微生物 。
由于栖息场所和摄取养料不同,可将异养微生物分为腐生型和寄生型两大类 。
腐生型:利用无生命的有机物获得营养物质 。
寄生型:从活的寄生体内获取营养物质,如 d
病毒,。
中间类型 ( 兼性腐生或兼性寄生 ) 如结核杆 地菌,痢疾杆菌就是兼性寄生菌 。
化能异养微生物(化能有机营养型)
Cncnc-micro
以上四种营养类型划分不是绝对的红螺菌既可利用光能,也可利用(黑暗)
氢单胞菌是异养和自养的过渡型(称兼性自养型)
自养与异养的区别不再能否利用 CO2,而在于是否以 CO2式,碳酸盐为唯一的碳源 。 自养型以无机碳化物为碳源,异养型虽然也可利用 CO2,
但必须在有机碳存在情况下 。
Cncnc-micro
微生物的营养类型单纯扩散 ( simplediffusion)
促进扩散 ( facilitateddiffusion)
主动运输 (activetransport)
基团移位 (grouptranslocation)
营养物质进入细胞的方式
Cncnc-micro
自由扩散物质进入细胞的动力是细胞内外的浓度差。
这种运输方式不消耗能量没有特异性,被运输物质不与膜上物质发生任何反应,物质不发生化学变化 。

单纯扩散 (simple diffusion)特点促进扩散 (facilitated diffusion)
膜载体(载体蛋白)特点有很强的特异性在运输过程中,本身不发生变化。
能加快物质运输的速度。
促进扩散 (facilitated diffusion)过程:
膜载体在膜外与营养物质亲合力强,与这种物质结合,进入细胞后亲合力降低释放营养物质 。 像渡船一样,膜外装货,膜内卸货,这种扩散方式比单纯扩散速度快 。
膜内外亲合力的改变与载体分子构型改变有关 。
Cncnc-micro
促进扩散特点物质运输动力是细胞外的浓度差 。
运输过程不消耗能量 。
有膜载体参加,膜载体 ( 渗透酶 ) 有特异性 。
运输葡萄糖的载体只运输葡萄糖 。 这种运输方式多发生在真核微生物,原核生物少见 。
Cncnc-micro
主动运输 (active transport)
ATP
ADP + Pi
恢复原构像膜上膜外 膜内移位被运送的物质可逆 浓度梯度进入细胞内要消耗能量,必需 有能量参加。
有膜载体参加,膜 载体发生构型变化被运送物质不发生 任何变化 。
主动运输特点基团转位:是在研究糖的运输时发现的一种主动运输方式。
运输过程中需要能量,被运输的物质发生化学变化的运输叫基团移位。
许多糖就是靠基团移位进行运输的。
这种运输方式是微生物通过磷酸转移酶系统来运输营养物质的。
基团移位 (group translocation)
Cncnc-micro
Group Translocation
膜外 内
EⅡ c
糖糖 -P
FⅢ
FⅢ -P
P-HPr
HPr PEP
丙酮酸
EⅠ糖基团移位磷酸转移 E系统( PTS)
酶 Ⅰ (非特异性)
酶 Ⅱ,酶 Ⅱ c,酶 Ⅱ a,酶 Ⅱ b
热稳定蛋白 HPr(特异性)
PEP+ HPr Mg+2,酶 Ⅰ 磷酸 — HPr + 丙酮酸
(在细胞质中进行 )
磷酸 — HPr+糖 Mg+2,酶 Ⅱ 糖 — 磷酸脂+ HPr
( 在细胞膜上进行 )
F Ⅲ + 3磷酸- HPr FⅢ - 3磷酸+ 3 HPr
FⅢ - 3磷酸+ 3乳糖 Mg++酶 Ⅱ 3乳糖- 3磷酸+ F

Cncnc-micro
基团转移运输特点:
需要磷酸酶系统进行催化被运输的物质发生化学变化,被磷酸化需要能量
Cncnc-micro
由人工配制供微生物生长繁殖或积累代谢产物所用的营养物质叫营养基,科研生产中培养微生物都需要配制培养基 。
培养基
Cncnc-micro
配制培养基的原则培养基的类型及应用适合微生物的营养特点按微生物需要量调好营养配比控制微生物的培养条件
PH值:
调节氧和 CO2的浓度调节培养基的渗透压配制培养基的原则
Cncnc-micro
培养基的类型及应用
Cncnc-micro
根据微生物的种类按培养基的成分按培养的用途按培养基的物理状态根据微生物的种类分类细菌培养基放线菌培养基霉菌培养基酵母培养基
Cncnc-micro
按培养基的成分合成培养基天然培养基半合成培养基
Cncnc-micro
按培养的用途基本培养基加富培养基选择培养基鉴别不同微生物的培养基保藏菌种培养基
Cncnc-micro
基本培养基:
按大多数微生物的营养需要配制一种培养基,称为基本培养基 。 再根据各种微生物的不同需要加入一,二种应用较广 。
如培养某种营养缺陷型菌株,先配制基本培养基,之后再加入缺陷型菌珠,需要的那种营养成分即可 。
Cncnc-micro
加富培养基是在培养基中加入血,血清,动植物组织提取 。 用来培养要求较苛刻的某些异养微生物 。
Cncnc-micro
选择培养基纤维分解菌含石蜡的培养基用蛋白质做唯一的氮源的培养基缺氮培养基可分离到固氮微生物选择培养基
Cncnc-micro
鉴别不同微生物的培养基如大肠杆菌,接种到葡萄糖 肉汤,麦芽糖肉汤和乳糖肉汤中,它们可以分解这几种糖,并产酸产气 。 如在这三种培养基中接种伤寒杆菌 。
伤寒杆菌只能发酵葡萄糖和麦芽糖,不发酵乳糖,只产酸不产气 。 这样就把大肠杆菌和伤寒杆菌区别开,产气由产生的气泡观察到,产酸可由指示剂的颜色变化观察到 。
Cncnc-micro
检查乳品和饮用水中是否含有肠道致病菌,所用的伊红美兰培养基,也是一种鉴别培养基 。 将大肠杆菌接种在伊红-美兰培养基上,当大肠杆菌发酵乳糖时,能使伊红-美兰培养基上,当大肠杆菌发酵乳糖时,能使伊红-美兰结合成黑色化合物,所以在这种培养基上长出来的大肠杆菌,
呈紫黑色并带我金属光泽的小菌落,而产气杆菌在这种培养基上长出的是较大的棕色菌落 。
Cncnc-micro
保藏菌种培养基对于生产中使用的菌种保藏培养基,
要求比较丰富的氮源,以防止菌种退化变质 。
Cncnc-micro
按培养基的物理状态固体培养基半固体培养基液体培养基
Cncnc-micro
固体培养基琼脂固体培养基明胶培养基硅胶固体培养基天然固体基质
Cncnc-micro
琼脂固体培养基:
琼脂是由红藻门石花菜江蓠等藻类地区 中提取的胶体多糖 。
琼脂的化学成分为多聚半乳糖硫酸上下 酯,熔点 96℃,凝固点是 40- 50℃ 。
琼脂培养基可反复溶化凝固而不改一落 变性质 。
绝大多数微生物不水解琼脂 。
Cncnc-micro
液体培养基不加凝固剂的培养基,营养物质分布均匀,微生物能与营养物质充分接触,利用适合积累代谢产物 。 多用于生理研究和发酵工业生产中 。
另外,病毒与立克氏体,衣原体不活细胞专性寄生微生物,常用鸡胚培养法和动物培养法进行培养 。
Cncnc-micro