课件 002 兽医微生物学教学课件 1






兽医微生物学
(多媒体教学课件 )
天津农学院动科系动物预防医学教研室制作
2003/02/28
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绪言 共六部分,介绍微生物与微生物学的概念,微生物学发展简史,微生
物学理论与技术成就及应用,兽医微生物学的地位、任务与贡献。
细菌总论 共七章,介绍细菌的形态、构造、生理,消毒与灭菌,细菌生态、
致病机理、遗传变异,细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章,介绍抗原抗体,免疫系统,抗感染免疫,变态反应,免
疫调节,免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章,介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、
微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章,介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性,真菌病的诊断与
防治等。
病毒 共十四章,介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养,病毒的致病
性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性,微生物学诊断和防治等。
实验 共十多个,显微镜油镜的使用,细菌形态及构造观察,细菌抹片制备
及染色,培养基的制备,细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药
敏试验,沉淀反应和凝集反应,重要病原菌的认识,真菌与病毒培养测定
等 。




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第十五章 革兰氏阳性球菌
第十六章 肠杆菌科
第十七章 弧菌科
第十八章 巴氏杆菌科及相关属
第十九章 革兰氏阴性需氧杆菌
第二十章 革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌
第二十一章 革兰氏阳性无芽孢杆菌
第二十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌
第二十三章 分支杆菌及相似属
第二十四章 螺旋体
第二十五章 霉形体
第二十六章 立克次体及衣原体
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第十六章 肠杆菌科
第一节 埃希菌属
第二节 沙门氏菌属
第三节 耶尔森菌属
第四节 其他肠道杆菌属
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本科共同特性为:革兰氏阴性, 无芽孢的兼性厌氧
菌 。 共 28属, 110种 。 多为正常肠道菌群成员 。 沙门
氏菌属, 志贺菌属, 以及埃希菌属和耶尔森菌属的
部分成员对人和动物有广泛的致病性, 在公共卫生
和兽医临有重要意义 。
第一节 埃希菌属
本属现有 5个种, 其中最重要的种是大肠埃希菌
(E.coli),俗称大肠杆菌, 下分血清型 。 本菌系人和
温血动物肠道内正常菌群成员之一 。 大肠杆菌常被
用作粪便直接或间接污染的检测指标 。 本菌还是分
子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象 。
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一, 形态染色特性 大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的
杆菌, 大小 0.4-0.7 um× 2-3um,两端钝圆, 散在,
周生鞭毛可运动, 多有菌毛 。
二, 培养及生化特性 本菌为兼性厌氧菌, 在普通培
养基上生长良好, 在营养琼脂上, 形成圆形凸起,
光滑, 湿润, 半透明, 灰白色菌落, 径约 2-3mm;
本菌大多可以 发酵乳糖产酸产气, 麦康凯琼脂 上形
成 红色菌落 ;在 伊红美蓝琼脂 上产生 黑色 带金属闪
光 的菌落;一些致病性菌株在绵羊血平板上呈 β溶血 。
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三, 抗原及血清型 大肠杆菌抗原主要有 O,K和 H三
种, 是本菌血清型鉴定的物质基础 。 已确定的大肠杆
菌 O抗原有 173种, K抗原有 80种, H抗原有 56种 。 大
肠杆菌血清型可高达数万种, 但致病性大肠杆菌的血
清型数量是有限的 。
1,O抗原 121C加热 2h不破坏其抗原性 。 LPS的特异
多糖侧链 。 每个菌株只含有一种 O抗原, 用单因子抗
O血清做玻板或试管凝集试验鉴定之 。
2,K抗原 热不稳定抗原, 为 被膜或荚膜, 菌毛 抗原 。
具有 K抗原菌株不被抗 O血清凝集, 称为 O不凝集性 。
一个菌落可含 1-2种不同 K抗原, 也有无 K抗原的菌株 。
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3,H抗原 是一类不耐热的鞭毛蛋白抗原,加热至
80℃ 或经乙醇处理后即破坏其抗原性。每一有动力
的菌株仅含有一种 H抗原。
大肠杆菌抗原可用 O,K,H排列表示其血清型。
如 O8:K23(L):H19,表示该菌具有 O抗原 8,L型 K
抗原 23,H抗原为 19。
四、致病性 条件性大肠杆菌、病原性大肠杆菌。
与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类:
产肠毒素大肠杆菌 (ETEC)、产类志贺毒素大肠杆
菌 (SLTEC)、肠致病性大肠杆菌 (EPEC)、败血性
大肠杆菌 (SEPEC)及尿道致病性大肠杆菌 (UPEC)。
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1,产肠毒素大肠杆菌 (ETEC) ETEC系一类致人和
幼畜 (初生仔猪黄痢, 犊牛, 羔羊及断奶仔猪腹泻 )
腹泻的最常见的病原性大肠杆菌 。
其毒力因子 主要由 黏附素性菌毛 和 肠毒素 两类
构成 。 初生幼畜被 ETEC感染后常因剧烈水样腹泻
和迅速脱水死亡, 发病率和死亡率均很高 。
黏附性菌毛, 能黏附于宿主的小肠上皮细胞, 故又
称其为黏附素或定居因子, 对其抗原称作黏附素抗
原或定居因子抗原 。
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肠毒素 是 ETEC在体内或体外生长时产生并分泌到胞
外的一种蛋白质性毒素。可分为 不耐热肠毒素 (LT)
和 耐热肠毒素 (ST)二种。可使肠细胞分泌机能亢进,
引起水样腹泻和迅速脱水。
LT对热敏感,有抗原性,65℃ 30min即被灭活。
ST耐热,无抗原性,它耐 100℃ 加热 30min而不失活,
能抵抗多种蛋白酶作用。
2,产类志贺毒素大肠杆菌 (SLTEC) 系一飞在体内或
体外生长时可产生 类志贺毒素 (SLT)的病原性大肠杆
菌。
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在动物 SLTEC可致 猪的水肿病,以头部、肠系膜
和胃壁浆液性水肿为特征,常伴有共济失调、麻痹
或惊厥等神经症状,发病率较低但致死率很高。发
现 SLTEC与 犊牛出血性结肠炎 有关,在致 幼兔腹泻
的大肠杆菌菌株中也查到 SLT。
其毒力因子 包括 粘附性菌毛 和 致水肿病 2型类志
贺毒素。
粘附性菌毛, F18菌毛是猪水肿病的 SLTEC菌株
的一个重要的毒力因子,它有助于细菌在猪肠黏膜
上皮细胞定居和繁殖。
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五、微生物学诊断 分离与鉴定程序可参见图 16-1。
1,采病料分离培养 败血症病例采集 内脏组织 (肝
脾肾等),对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各
段 小肠内容物 或 黏膜刮取物 以及相应肠段的 肠系
膜淋巴结,分别在 麦康凯平板 和 血平板 上划线分
离培养。
2,可疑菌落生化鉴定 挑取麦康凯平板上的 红色菌
落 或血平板上呈 β溶血 (仔猪黄痢与水肿病菌株 )的
典型菌落几个,分别转种三糖铁( TSI)培养基和
普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养。
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3,纯培养物抗原鉴定 将 TSI琼脂反应模式符合埃
希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做
O,K抗原鉴定。
4,检测毒力因子 确定其属于何类致病性大肠杆菌。
六, 防治 目前已有菌苗, 包括抗粘附素的含单价
或多价菌毛抗原的 灭活全菌苗 或 亚单位苗 ;抗肠毒
素的 类毒素苗 ;表达一种或两种粘附素以及同时表
达一种粘附素和肠毒素的 基因工程菌苗 等 。 用这些
菌苗免疫怀孕母畜后, 均能使其后代从初乳中获得
抗体而被动保护 。
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用多种常见 O抗原的鸡大肠杆菌灭活 油佐剂菌苗,
给各种日龄鸡注射后可获得较好的预防效果,免疫
力可达 3-5月不等。对猪水肿病预防,用由几种常
见 O抗原菌株制成的灭活菌苗,小试结果表明,此
苗能较显著减少仔猪群中该诉的发病率,保护率约
60% -70%。
生物学方法 微生态制剂。
抗菌药物 耐药菌株产生,药敏试验。
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第二节 沙门氏菌属
沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌,通常
都以周生鞭毛运动。在三糖铁琼脂上常产生 H2S,
大多沙门氏菌不发酵乳唐。
绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,能引起
人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病,并为
人类食物中毒的主要病原之一,在医学、兽医和公
共卫生上均十分重要。
沙门氏菌血清复杂, 有 2 500种以上 。 几乎包括所
有对人和动物致病的血清型菌株 。
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一、形态及染色特性 形态染色特性与同科其他菌属
相似,呈杆状,0.7-1.5umX2.0-5.0um,革兰氏阴性。
除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外,其余
均有周生鞭毛可运动,大多数有菌毛。
二、培养及生化特性 本属大多数细菌的培养特性
与埃希氏菌属相似。沙门氏菌在肉汤琼脂上 生长贫
瘠,形成较小的菌落。在肠道菌鉴别或选择性培养
基上,大多数菌株因不发酵乳糖而 形成无色菌落 。
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三、抗原及变异 沙门氏菌具有 O,H,K和菌毛四
种抗原。 O和 H抗原是其主要抗原,构成沙门氏菌
血清型抗原。
O抗原 是 耐热 多糖抗原,100℃ 2.5h不被破坏。一
个菌体可有几种 O抗原成分,以数字表示。将有共
同 O抗原 (群因子 )的血清型菌归为一群,以大写英
文字母表示 A-F 。
H抗原 是鞭毛抗原, 有 63种, 不耐热, 60℃ 30-
60min破坏 。 H抗原可分为第 1相和第 2相两种 。
K抗原 是部分沙门氏菌表面包膜抗原, 又称为 Vi抗
原, 不耐热, 60 ℃ 1h破坏 。
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本菌属至少已有 2 500个血清型。对人和动物致
病的血清型绝大多数属于 A-F群,在疾病中经常
出现的却不足 50种。
四、致病性 本属菌均有致病性,具有极其广泛
的动物宿主。感染动物后常导致严重的疾病,并
成为人类沙门氏菌病的传染源之一。因此,沙门
氏菌病是一种重要的 人畜共患病 。
发病 本菌最常侵害幼、青年动物,使之发生败
血症、胃肠炎及其他组织局部炎症。
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对成年动物则引起散发性或局限性沙门氏菌病,
发生败血症的怀孕母畜可表现流产,在一定条件
下亦引起急性流行性暴发。
传播 沙门氏菌常在动物与动物、动物与人、人
与人之间通过直接或间接的途径传 ·播,没有中间
宿主。主要传染途径是消化道。许多环境条件,
如卫生不良、过度拥挤、气候恶乡等均可增加易
感动物发病。
五, 致病性类型 根据对宿主嗜性不同, 可将沙
门氏菌分成三群 。
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第一群 具有高度 专嗜性 沙门氏菌,它们只对人或
某种动物产生特定的疾病。例如 鸡白痢 和 鸡伤寒
沙门氏菌仅使鸡和火鸡发病,马流产, 牛流产 和
羊流产 等沙门氏菌; 猪伤寒 沙门氏菌仅侵害猪。
第二群 是在一定程度适应于特定动物的 偏嗜性 沙
门氏菌, 如 猪霍乱 和 都柏林 沙门氏菌, 分别是猪
和牛羊的致病菌 。
第三群 是 泛嗜性 沙门氏菌, 它们有广泛宿主谱,
能引起人和各种动物的沙门氏菌病, 具有重要的
公共卫生意义 。 如 鼠伤寒 和 肠炎 沙门氏菌等 。
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六、毒力因子 沙门氏菌毒力因子有多种,主要有脂
多糖 (LPS),肠毒素、细胞毒素及毒力基因等。
七、免疫性 体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染
中都很重要。
认为 细胞免疫 在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。
八、微生物学诊断
未污染病料 直接接种 普通琼脂、血琼脂或鉴别培
养基平板分离细菌;
污染材料 如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败
坏组织等,常需要 增菌培养基增菌 后再行分离。
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增菌培养基 最常用的有亮绿 -胆盐 -四硫磺酸钠肉
汤、四硫磺酸盐增菌液、亚硒酸盐增菌液以及亮绿
-胱氨酸 -亚硒酸氢钠增菌液等。这些培养基能抑制
其他杂菌生长而有利于沙门氏菌大量繁殖。
鉴别培养基 麦康凯、伊红美蓝, SS、去氧胆盐钠 -
枸橼酸盐 等琼脂,绝大多数沙门氏菌因不发酵乳糖,
故在这类平板上其菌落颜色与大肠杆菌不同。可以
鉴别。
生化试验 挑可疑菌落分别接种三糖铁 (TSI)琼脂和
尿素琼脂等培养,观察其生化特性。
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血清型分型 鉴定分离菌株的血清型,可应用分群
抗 O血清 (A-F群 )作凝集试验,以鉴定其群别。
也可用直接凝集、免疫荧光,ELISA,PCR等方
法鉴定。
九、防制 目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的
沙门氏菌病,例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的
都柏林等沙门氏菌的灭活菌苗。
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第三节 耶尔森菌属
本菌属由革兰氏阴性、运动或不运动的多形性短
小杆菌组成。除鼠疫菌无鞭毛外,其余成员在 22-
28℃ 培养时有动力,但 37℃ 培养则无动力 。代表菌
种为鼠疫耶尔森菌,简称鼠疫杆菌。
本菌属现有 11个种, 对人和动物有致病性的主要
有三个种,鼠疫耶尔森菌, 假结核耶尔森菌, 小肠
结肠炎耶尔森菌 。
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