土壤脱氢酶活性测定
测定步骤
1 称取4克鲜土于50ml三角瓶中,加入4ml(0.5%TTC+0.5%葡萄糖)-Tris缓冲溶液(pH7.6),(2ml 1%TTC-Tris缓冲溶液,2ml 1%葡萄糖),置37℃暗室培养24hr。
2 取出后用少量甲醇提取后过滤,再用50ml容量瓶或比色管定容。
3 滤液马上用485nm波长下分光光度计测定。
pH7.6 Tris缓冲液的配制:
A:0.2M三-(羟甲基)-氨基甲烷溶液(1000 ml含24.23克)
B:0.2M HCl
100 ml A+76.8ml B,加水稀释至400 ml,准确调节pH为7.6。
TBF标准曲线的制备:准确称取10mg TPF溶于250 ml甲醇中,得到40 mg/L的母液。从中吸取0,1,2,3,4,5 ml于50ml容量瓶中,用甲醇定容,得到0,40,80,120,160,200ug TPF的标准曲线。
参考文献
Casida LC Jr,Klein DA,Santoro T(1964) Soil dehydrogenase activity,Soil Science 98,371-376.
H.Y.Chu,J.G.Zhu,Z.B.Xie,H.Y.Zhang,Z.H.Cao and Z.G.Li(2003) Effects of lanthanum on dehydrogenase activity and carbon dioxide evolution in a Haplic Acrisol,Australian Journal of Soil Research 41,731-739.
H.Y.Chu,
测定步骤
1 称取4克鲜土于50ml三角瓶中,加入4ml(0.5%TTC+0.5%葡萄糖)-Tris缓冲溶液(pH7.6),(2ml 1%TTC-Tris缓冲溶液,2ml 1%葡萄糖),置37℃暗室培养24hr。
2 取出后用少量甲醇提取后过滤,再用50ml容量瓶或比色管定容。
3 滤液马上用485nm波长下分光光度计测定。
pH7.6 Tris缓冲液的配制:
A:0.2M三-(羟甲基)-氨基甲烷溶液(1000 ml含24.23克)
B:0.2M HCl
100 ml A+76.8ml B,加水稀释至400 ml,准确调节pH为7.6。
TBF标准曲线的制备:准确称取10mg TPF溶于250 ml甲醇中,得到40 mg/L的母液。从中吸取0,1,2,3,4,5 ml于50ml容量瓶中,用甲醇定容,得到0,40,80,120,160,200ug TPF的标准曲线。
参考文献
Casida LC Jr,Klein DA,Santoro T(1964) Soil dehydrogenase activity,Soil Science 98,371-376.
H.Y.Chu,J.G.Zhu,Z.B.Xie,H.Y.Zhang,Z.H.Cao and Z.G.Li(2003) Effects of lanthanum on dehydrogenase activity and carbon dioxide evolution in a Haplic Acrisol,Australian Journal of Soil Research 41,731-739.
H.Y.Chu,