生物反应器的检测及控制
?生化过程主要参数
?常用检测方法及仪器
? 主要参数检测原理及仪器
? 发酵液中营养成分与产物的分析
?生物传感器的研究开发与应用
? 生物传感器的类型及结构原理
生物反应过程及反应器的检测控制中应考虑的问题：
（ 1）进行检测的目的；
（ 2）有多少必须检测的状态参数，参变量能否检测；
（ 3）参数能否在线检测，其响应滞后是否太长；
（ 4）利用检测结果怎样判断生物反应器及生物细胞本身的状态；
（ 5）需控制的主要参变量是哪些。
生物反应器的检测及控制
参数名称 测试方法 意义、主要作用
温度 传感器 维持生长、合成
罐压 压力表 维持正压、增加 DO
空气流量 传感器 供氧、排泄废气、提高 KLa
搅拌速率 传感器 物料混合、提高 KLa
粘度 粘度计 反映细胞生长,KLa
液面 传感器 反映操作稳定性、生产率
浊度 传感器 反映细胞生长情况
泡沫 传感器 反映发酵代谢、操作稳定性
传质系数 间接计算，在线检测 反映供氧效率
加糖速率 传感器 反映耗氧情况
加消泡剂速率 传感器 反映泡沫情况
加其它基质速率 传感器 反映基质利用情况
生化过程各参数及其测试概况
（ a）物理、工程参数
参数名称 测试方法 意义、主要作用
细胞浓度 取样 了解生长情况
细胞中 ATP,ADP 取样 了解细胞的能量代谢活力
细胞中 NADH2 在线荧光法 了解细胞的合成能力
溶解氧浓度 传感器 反映供氧情况
排气 O2浓度 传感器 了解耗氧情况
溶解 CO2浓度 传感器 了解 CO2对发酵的影响
排气 CO2浓度 传感器（红外吸收） 了解细胞的呼吸情况
酸碱度 传感器 反映细胞的代谢途径
产物浓度 取样（传感器） 产物合成情况
基质浓度 取样 了解基质的利用情况
生化过程各参数及其测试概况
（ b）生物、化学参数
生化工程用传感器应具有的要求：
（ 1）传感器能经受高压蒸汽灭菌；
（ 2）传感器及其二次仪表具有长期稳定性；
（ 3）最好能在过程中随时校正；
（ 4）探头材料不易老化，使用寿命长；
（ 5）探头安装使用和维修方便；
（ 6）解决探头敏感部位被物料（反应液）粘住、堵塞问题；
（ 7）价格合理，便于推广使用。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?取样系统
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?温度的测定
检测仪表有：热电阻检测器 （ resistance thermal detector,RTD）,
半导体热敏电阻、热电偶、玻璃温度计。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?热量的测定
热交换器发酵热测量
微热量测量装置：绝热式微量热计、热流量热计、流通式量热计。
热交换器发酵热测量
量热计
反应 平衡
零检测器 不平衡信号
计算器 记录器
不平衡
信号
标定
t反 t平
绝热式微量热计原理图
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?热量的测定
热流量热计 流通式量热计
Calvet微量热器 流通式量热计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?罐压检测：
隔膜式压力表；
压力信号转换器：电阻式、电感式、电容式和半导体式等。
测压点和控制点的选择应考虑的因素：
1）防止染菌，避免死角，防止固形物的堆积；
2）注意气源波动对压力的影响。
电极
参比电极
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?液位的检测
检测方法：电容法、压力法和电导法等。
电容式液面计示意图
? 电容法
△P 1 △P 2
计算
A
B
C
↑
↓
↑
↓
△ H
H
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?液位的检测
? 压差法
H
p
p
H ??
?
?
?
1
2
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?液位的检测
? 液位探针
?泡沫高度的检测
常用检测方法：电极探针测定法和声波法。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?培养基和液体流量测定
椭圆流量计工作原理图
? 椭圆流量计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?培养基和液体流量测定
? 科里奥利质量流量计（ CMF）
利用流体在直线运动的同时处于一旋转系中，产生与质量流量成
正比的科里奥利力原理制成的一种直接式质量流量仪表。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?培养基和液体流量测定
? 电磁流量计（ EMF）
利用法拉第电磁感应定律制成的一种测量导电液体体积流量的仪表。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?常用 培养基和液体 流量计
动画演示
动画演示
动画演示
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?气体流量测量
根据作用原理，流量计可分为：体积流量型和质量流量型。
? 体积流量型
根据流体动能的转换以及流体流动类型的改变而设计的测量
装置。主要类型有同心孔板压差流量计和转子流量计。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 质量流量型
根据流体的固有性质（如质量、导电性、电磁感应性、离子化和热传导
性能）等设计的气体流量计。主要类型有同心孔板压差流量计和转子流量计。
气体热质量流量传感器
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?发酵液黏度的检测
常用的黏度测定仪有：振动式黏度传感仪、毛细管黏度计、回转式黏
度计和涡轮旋转黏度计等。
振动式黏度计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?发酵液黏度的检测
毛细管黏度计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?发酵液黏度的检测
回转式黏度计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 搅拌转速和搅拌功率
搅拌转速的检测常用方法：磁感应式、光感应式和测速发电机等。
搅拌功率的常用方法：功率表测定电动机进线功率；
搅拌功率的精确检测方法：电机反转矩测定法、轴功率和应变片法；
多数采用测定力矩来得功率，其计算公式为：
nMP ?2?
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
常用 pH检定仪为复合 pH电极，具有结构紧凑，可蒸汽加热灭菌的优点。
工作原理,利用玻璃电极与参比电极浸泡于某一溶液时具有一定的电
位，其 pH可表示为：
? ?
RT
EEFPH ?? 043.0
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 溶氧浓度的检测
常用检测方法为溶氧电极法。
阴极还原, O2+2H2O+4e-?4OH-
阳极氧化, 4Ag+4Cl-?4Ag++4Cl-+4e-
总反应, O2+2H2O+4Ag+4Cl-?4OH-+4AgCl
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 溶氧浓度的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 溶氧浓度的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?溶解 CO2浓度的测定
? ?
2
3
lglg CO
H C O
aKpH ?
? ??
?
?
?
?
?
?
?
??
?
溶解 CO2浓度的检测原理是
利用对 CO2分子有特殊选择渗
透性的微孔膜，并使扩散通过
的 CO2进入饱和碳酸钠缓冲液
中，平衡后显示的 pH与溶解的
CO2浓度成正比，由此可测出
溶解 CO2浓度。
CO2电极结构
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?氧化还原电位（ ORP）的检测
ORP的检测原理是基于溶液中的金属电极上进行的电子交换达到
平衡时，具有相应的氧化还原电位值。表示式为：
? ?????? HFRTpoFRTaaFRTEE
R
lnln4ln4 200
?排气的氧分压的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
气体中氧浓度的检测方法主
要有磁氧分析、极谱电位法和
质谱法。
被检测排气的磁化率为：
? ? BOBoM C ???? ???? 100 22
在均匀磁场与无磁场的空间存
在压强差：
MHp ??
2
02
1??
?排气的 CO2分压的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
20
0
/lg CCLII ????
?
?
???
?
排气中 CO2浓度常用检测仪有
红外线二氧化碳测定仪和 二氧化
碳电极。
CO2气体在红外 2.6～ 2.9× 103和
4.1～ 4.5× 103nm之间有吸收峰，
根据朗伯－比尔定律：
?细胞浓度的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?全细胞浓度的测定
细胞浓度在线检测浊度计
?细胞浓度的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?活细胞浓度的测定
荧光测量活细胞装置图
生物发酵溶液中营养成分与产物的分析
类别 检测物质 发酵液待检测的物质成分
微生物
细胞
营养基质 葡萄糖、麦芽糖、乳糖、醋酸,BOD等
产物及副产物 乙醇、氨、蛋白质、抗生素、氨基酸、有机酸、酶、
CH4、氢等
营养盐生长因子 无机盐 (K+,Ca2+,NH+,NO3-等 )、生物素、维生素
动物
细胞
营养基质 葡萄糖、氨基酸等
产物及副产物 蛋白质类（ t-PA,GCSF,EPO,INF等 )、乳酸、氨
生长因子 维生素、激素、抗生素
植物
细胞
营养基质 糖类、醋酸、硝酸盐、氨基酸等
产物及副产物 次生代谢产物（植物色素、皂甙等）、氨,CO2
生长素 维生素、植物激素（ 2,4-D,NAA,6-BA等）
生物传感器
( Biosensor)
传感器, 能感受 (或响应 )一种信息并变换成可测
量信号 (一般指电学量 )的器件 。
生物传感器, 将生物体的成份（酶、抗原、抗
体、激素）或生物体本身（细胞、细胞器、组织）
固定化在一器件上作为敏感元件的传感器称为生物
传感器。
生物传感器的基本组成
组成,敏感元件（分子识别元件）和信号转换器件
生物传感器的工作原理
? 将 化学信号转变成电信号
? 将热能变化转换为电信号
? 将光效应转换为电信号
? 直接产生电信号
生物传感器的工作原理
根据输出信号方式分类
a,生物亲合型传感器
被测物质与分子识别元件上的敏感物质具有生物亲合作用,
即二者能特异地相结合, 同时引起敏感材料的分子结构和 /或固
定介质发生变化 。 例如：电荷温度光学性质等的变化 。 反应式
可表示为：
S（底物） +R（受体） = SR
生物传感器的分类
b,代谢型或催化型传感器
底物 （ 被测物 ） 与分子识别元件上的敏感物质相作用并生
成产物, 信号转换器将底物的消耗或产物的增加转变为输出信
号, 这类传感器称为代谢型或催化型传感器, 其反应形式可表
示为：
S（底物）＋ R（受体） = SR→P （生成物）
生物传感器的分类
根据分子识别元件上的敏感物质分类
生物传感器中分子识别元件上所用的敏感物质有
酶, 微生物, 动植物组织, 细胞器, 抗原和抗体等；
根据所用的敏感物质可将生物传感器分为酶传感
器, 微生物传感器, 组织传感器, 细胞器传感器, 免
疫传感器等 。
生物传感器的分类
根据信号转换器分类
生物传感器的信号转换器有：电化学电极, 离子
敏场效应晶体管, 热敏电阻, 光电转换器等, 据此又
将生物传感器分为电化学生物传感器, 半导体生物传
感器, 测热型生物传感器, 测光型生传感器, 测声型
生物传感器等,
生物传感器的分类
生物传感器的分类
生物传感器的特点
(1) 由选择性好的主体材料构成的分子 —— 识别元件，
一般不需进行样品的预处理；
(2) 利用优异的选择性把样品中被测组分的分离和检测
统一为一体；测定时一般不需另加其它试剂；
(3) 由于它的体积小、可以实现连续在位监测；
(4) 响应快、样品用量少，且由于敏感材料是固定化的，
可以反复多次使用。
(5) 传感器连同测定仪的成本远低于大型的分析仪器，
因而便于推广普及。
生物传感器的信号转换器
生物传感器中的信号转换器是将分子识别元件进行
识别时所产生的化学的或物理的变化转换成可用信号
的装置 。 常用的生物传感器换能器件有电化学电极,
热敏器件, 半导体器件, 光电原理器件等, 目前以电
化学电极应用最广且比较成熟 。
电化学电极可用作生物传感器的信号转换器的电化
学电极一般可以分为两种类型 。 电位型电极 和 电流型
电极,
? 电位型电极
离子选择电极
离子选择性电极是一类对特定的阳离子或阴离子呈选择
性响应的电极, 具有快速, 灵敏, 可靠, 价廉等优点, 因
此应用范围很广, 离子选择性电极作为生物传感器的信号
转换器只是它的一种应用, 在生物医学领域也常直接用它
测定体液中的一些成分 （ 如 H+,K+,Na+,Ca2+等 ） 。
生物传感器的信号转换器
生物传感器的信号转换器
氧化还原电极
生物传感器的信号转换器
生物传感器的信号转换器
? 电流型电极
电化学生物传感器中采用电流型电极为信号转换器的趋势
日益增加，这是因为这类电极和电位型电极相比有以下优点：
（ 1）电极的输出直接和被测物的浓度呈线性关系，而电位型
电极那样和被测物浓度的对数呈线性关系；
（ 2）电极输出值的读数误差所对应的待测物浓度的相对误差
比电位型电极的小；
（ 3）电极的灵敏度比电位型电极的高。
生物传感器的信号转换器
? 生物热敏器件
基于温度测量原理，把生物功
能材料和高性能检测器件结合而
成，如酶热敏电阻。
酶热敏电阻可分为密接型和反
应器型。
酶热敏电阻检测系统
生物传感器的信号转换器
? 离子敏场效应晶体管
传感器应具有以下特点：
（ l） 小型化, 便于携带, 易于使用, 非专业人员也能操作；
（ 2） 响应快, 可应用于微小区域, 如生物细胞内成分的测定；
（ 3） 能同时完成多种成分测定；
（ 4） 能够直接连接在计算机的输入端；
（ 5） 输出阻抗低, 可避免外界感应以及下级电路的干扰 。
由于绝缘栅场效应管的应用, 制造具有以上特点的离子敏
感元件及生物敏感元件已成为现实,
敏场效应晶体管的结构和工作原理
离子敏场效应晶体管 （ ISFET）,
它与常用的绝缘栅型场效应晶体管构造相同．在输入栅极做
了一些改进，以能与特定的化学物质反应，产生电位的敏感膜
取代金属极．让敏感膜直接与溶液接触，由于敏感膜对溶液中
的离子有选择作用，从而调制 ISFET的漏电流变化，利用这个
特性就能检测一溶液中的离子活度。
生物传感器的信号转换器
Ion-sensitive field-effect transistor(ISFET)
敏场效应晶体管的结构和工作原理
生物传感器的信号转换器
生物传感器的信号转换器
? 光生物电极
光生物电极的测量原理：①生物发光反应的测量原理；②
生物物质的光吸收、光激发；③生物反应物质对光传播对干
扰原理。
竞争结合型、光吸收型、荧光淬灭型、指示剂型、生物发
光型和光传递干扰型。
敏感器件（分子识别元件 )
? 酶电极
酶电极结构原理示意图
敏感器件（分子识别元件 )
? 微生物电极
呼吸性测定型微生物传感器 代谢产物测定型微生物传感器
?免疫传感器 (Immunosensor)
? 免疫电极
敏感器件（分子识别元件 )
酶标记免疫传感器原理示意图
?组织传感器
以动植物组织薄片材料作为生物敏感膜的电化学传
感器称为组织电极，此系酶电极的衍生型电极．动植
物组织中的酶是反应的催化剂．与酶电极比较，组织
电极具有如下优点：
1.酶活性较离析酶高,
2.酶的稳定性增大,
3.材料易于获得,
植物组织膜电极结构图解
a一水瓜,b一果皮,
c-中果皮,d-内果皮
1-中果皮组织薄片
2-固定化骨架
3-透气健,4-垫圈
5-内电解质
6-复合 PH电极
7-塑料电极体
3-7为二氧化碳气敏电极结构
?组织传感器
生物传感器的应用
? 微生物发酵过程检测上的应用
? 动植物细胞培养过程检测上的应用
检测参数：细胞浓度、基质浓度、产物浓度、溶氧浓度,pH
等；检测胞内 pH,RNA,DNA,ATP,NADP等。
流式细胞计数法（ FCM)：流式细胞仪
生物传感器的应用
发
酵
罐
p H
溶 氧
培养温度
加热器
泵
过
滤
器
→
↑
培
养
基
贮
罐
称
空气压缩机
消泡剂
酸或碱
O 2 C O 2 浓度
→
→
冷却水
排气
↑
泵
序列信息
DA 变换
数 码 输 出
AD 变换
C PU
WS 或 PC
过程控制器
↓
↓
↓
→
→
↑↑ ↑↑ ↑
→←
生化过程的控制
生化过程的控制
酸 碱
pH记 录
及调节器
pH测 量电极组? 温度的控制
? pH的控制
调节器
消泡剂
生化过程的控制
? 溶氧的控制
? 泡沫的控制
生化过程的控制
生化过程的控制
生化过程的控制
?生化过程主要参数
?常用检测方法及仪器
? 主要参数检测原理及仪器
? 发酵液中营养成分与产物的分析
?生物传感器的研究开发与应用
? 生物传感器的类型及结构原理
生物反应过程及反应器的检测控制中应考虑的问题：
（ 1）进行检测的目的；
（ 2）有多少必须检测的状态参数，参变量能否检测；
（ 3）参数能否在线检测，其响应滞后是否太长；
（ 4）利用检测结果怎样判断生物反应器及生物细胞本身的状态；
（ 5）需控制的主要参变量是哪些。
生物反应器的检测及控制
参数名称 测试方法 意义、主要作用
温度 传感器 维持生长、合成
罐压 压力表 维持正压、增加 DO
空气流量 传感器 供氧、排泄废气、提高 KLa
搅拌速率 传感器 物料混合、提高 KLa
粘度 粘度计 反映细胞生长,KLa
液面 传感器 反映操作稳定性、生产率
浊度 传感器 反映细胞生长情况
泡沫 传感器 反映发酵代谢、操作稳定性
传质系数 间接计算，在线检测 反映供氧效率
加糖速率 传感器 反映耗氧情况
加消泡剂速率 传感器 反映泡沫情况
加其它基质速率 传感器 反映基质利用情况
生化过程各参数及其测试概况
（ a）物理、工程参数
参数名称 测试方法 意义、主要作用
细胞浓度 取样 了解生长情况
细胞中 ATP,ADP 取样 了解细胞的能量代谢活力
细胞中 NADH2 在线荧光法 了解细胞的合成能力
溶解氧浓度 传感器 反映供氧情况
排气 O2浓度 传感器 了解耗氧情况
溶解 CO2浓度 传感器 了解 CO2对发酵的影响
排气 CO2浓度 传感器（红外吸收） 了解细胞的呼吸情况
酸碱度 传感器 反映细胞的代谢途径
产物浓度 取样（传感器） 产物合成情况
基质浓度 取样 了解基质的利用情况
生化过程各参数及其测试概况
（ b）生物、化学参数
生化工程用传感器应具有的要求：
（ 1）传感器能经受高压蒸汽灭菌；
（ 2）传感器及其二次仪表具有长期稳定性；
（ 3）最好能在过程中随时校正；
（ 4）探头材料不易老化，使用寿命长；
（ 5）探头安装使用和维修方便；
（ 6）解决探头敏感部位被物料（反应液）粘住、堵塞问题；
（ 7）价格合理，便于推广使用。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?取样系统
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?温度的测定
检测仪表有：热电阻检测器 （ resistance thermal detector,RTD）,
半导体热敏电阻、热电偶、玻璃温度计。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?热量的测定
热交换器发酵热测量
微热量测量装置：绝热式微量热计、热流量热计、流通式量热计。
热交换器发酵热测量
量热计
反应 平衡
零检测器 不平衡信号
计算器 记录器
不平衡
信号
标定
t反 t平
绝热式微量热计原理图
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?热量的测定
热流量热计 流通式量热计
Calvet微量热器 流通式量热计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?罐压检测：
隔膜式压力表；
压力信号转换器：电阻式、电感式、电容式和半导体式等。
测压点和控制点的选择应考虑的因素：
1）防止染菌，避免死角，防止固形物的堆积；
2）注意气源波动对压力的影响。
电极
参比电极
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?液位的检测
检测方法：电容法、压力法和电导法等。
电容式液面计示意图
? 电容法
△P 1 △P 2
计算
A
B
C
↑
↓
↑
↓
△ H
H
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?液位的检测
? 压差法
H
p
p
H ??
?
?
?
1
2
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?液位的检测
? 液位探针
?泡沫高度的检测
常用检测方法：电极探针测定法和声波法。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?培养基和液体流量测定
椭圆流量计工作原理图
? 椭圆流量计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?培养基和液体流量测定
? 科里奥利质量流量计（ CMF）
利用流体在直线运动的同时处于一旋转系中，产生与质量流量成
正比的科里奥利力原理制成的一种直接式质量流量仪表。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?培养基和液体流量测定
? 电磁流量计（ EMF）
利用法拉第电磁感应定律制成的一种测量导电液体体积流量的仪表。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?常用 培养基和液体 流量计
动画演示
动画演示
动画演示
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?气体流量测量
根据作用原理，流量计可分为：体积流量型和质量流量型。
? 体积流量型
根据流体动能的转换以及流体流动类型的改变而设计的测量
装置。主要类型有同心孔板压差流量计和转子流量计。
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 质量流量型
根据流体的固有性质（如质量、导电性、电磁感应性、离子化和热传导
性能）等设计的气体流量计。主要类型有同心孔板压差流量计和转子流量计。
气体热质量流量传感器
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?发酵液黏度的检测
常用的黏度测定仪有：振动式黏度传感仪、毛细管黏度计、回转式黏
度计和涡轮旋转黏度计等。
振动式黏度计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?发酵液黏度的检测
毛细管黏度计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?发酵液黏度的检测
回转式黏度计
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 搅拌转速和搅拌功率
搅拌转速的检测常用方法：磁感应式、光感应式和测速发电机等。
搅拌功率的常用方法：功率表测定电动机进线功率；
搅拌功率的精确检测方法：电机反转矩测定法、轴功率和应变片法；
多数采用测定力矩来得功率，其计算公式为：
nMP ?2?
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
常用 pH检定仪为复合 pH电极，具有结构紧凑，可蒸汽加热灭菌的优点。
工作原理,利用玻璃电极与参比电极浸泡于某一溶液时具有一定的电
位，其 pH可表示为：
? ?
RT
EEFPH ?? 043.0
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? pH的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 溶氧浓度的检测
常用检测方法为溶氧电极法。
阴极还原, O2+2H2O+4e-?4OH-
阳极氧化, 4Ag+4Cl-?4Ag++4Cl-+4e-
总反应, O2+2H2O+4Ag+4Cl-?4OH-+4AgCl
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 溶氧浓度的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
? 溶氧浓度的检测
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?溶解 CO2浓度的测定
? ?
2
3
lglg CO
H C O
aKpH ?
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溶解 CO2浓度的检测原理是
利用对 CO2分子有特殊选择渗
透性的微孔膜，并使扩散通过
的 CO2进入饱和碳酸钠缓冲液
中，平衡后显示的 pH与溶解的
CO2浓度成正比，由此可测出
溶解 CO2浓度。
CO2电极结构
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?氧化还原电位（ ORP）的检测
ORP的检测原理是基于溶液中的金属电极上进行的电子交换达到
平衡时，具有相应的氧化还原电位值。表示式为：
? ?????? HFRTpoFRTaaFRTEE
R
lnln4ln4 200
?排气的氧分压的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
气体中氧浓度的检测方法主
要有磁氧分析、极谱电位法和
质谱法。
被检测排气的磁化率为：
? ? BOBoM C ???? ???? 100 22
在均匀磁场与无磁场的空间存
在压强差：
MHp ??
2
02
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?排气的 CO2分压的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
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排气中 CO2浓度常用检测仪有
红外线二氧化碳测定仪和 二氧化
碳电极。
CO2气体在红外 2.6～ 2.9× 103和
4.1～ 4.5× 103nm之间有吸收峰，
根据朗伯－比尔定律：
?细胞浓度的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?全细胞浓度的测定
细胞浓度在线检测浊度计
?细胞浓度的测定
生化过程常用检测方法及仪器
?主要参数检测原理及仪器
?活细胞浓度的测定
荧光测量活细胞装置图
生物发酵溶液中营养成分与产物的分析
类别 检测物质 发酵液待检测的物质成分
微生物
细胞
营养基质 葡萄糖、麦芽糖、乳糖、醋酸,BOD等
产物及副产物 乙醇、氨、蛋白质、抗生素、氨基酸、有机酸、酶、
CH4、氢等
营养盐生长因子 无机盐 (K+,Ca2+,NH+,NO3-等 )、生物素、维生素
动物
细胞
营养基质 葡萄糖、氨基酸等
产物及副产物 蛋白质类（ t-PA,GCSF,EPO,INF等 )、乳酸、氨
生长因子 维生素、激素、抗生素
植物
细胞
营养基质 糖类、醋酸、硝酸盐、氨基酸等
产物及副产物 次生代谢产物（植物色素、皂甙等）、氨,CO2
生长素 维生素、植物激素（ 2,4-D,NAA,6-BA等）
生物传感器
( Biosensor)
传感器, 能感受 (或响应 )一种信息并变换成可测
量信号 (一般指电学量 )的器件 。
生物传感器, 将生物体的成份（酶、抗原、抗
体、激素）或生物体本身（细胞、细胞器、组织）
固定化在一器件上作为敏感元件的传感器称为生物
传感器。
生物传感器的基本组成
组成,敏感元件（分子识别元件）和信号转换器件
生物传感器的工作原理
? 将 化学信号转变成电信号
? 将热能变化转换为电信号
? 将光效应转换为电信号
? 直接产生电信号
生物传感器的工作原理
根据输出信号方式分类
a,生物亲合型传感器
被测物质与分子识别元件上的敏感物质具有生物亲合作用,
即二者能特异地相结合, 同时引起敏感材料的分子结构和 /或固
定介质发生变化 。 例如：电荷温度光学性质等的变化 。 反应式
可表示为：
S（底物） +R（受体） = SR
生物传感器的分类
b,代谢型或催化型传感器
底物 （ 被测物 ） 与分子识别元件上的敏感物质相作用并生
成产物, 信号转换器将底物的消耗或产物的增加转变为输出信
号, 这类传感器称为代谢型或催化型传感器, 其反应形式可表
示为：
S（底物）＋ R（受体） = SR→P （生成物）
生物传感器的分类
根据分子识别元件上的敏感物质分类
生物传感器中分子识别元件上所用的敏感物质有
酶, 微生物, 动植物组织, 细胞器, 抗原和抗体等；
根据所用的敏感物质可将生物传感器分为酶传感
器, 微生物传感器, 组织传感器, 细胞器传感器, 免
疫传感器等 。
生物传感器的分类
根据信号转换器分类
生物传感器的信号转换器有：电化学电极, 离子
敏场效应晶体管, 热敏电阻, 光电转换器等, 据此又
将生物传感器分为电化学生物传感器, 半导体生物传
感器, 测热型生物传感器, 测光型生传感器, 测声型
生物传感器等,
生物传感器的分类
生物传感器的分类
生物传感器的特点
(1) 由选择性好的主体材料构成的分子 —— 识别元件，
一般不需进行样品的预处理；
(2) 利用优异的选择性把样品中被测组分的分离和检测
统一为一体；测定时一般不需另加其它试剂；
(3) 由于它的体积小、可以实现连续在位监测；
(4) 响应快、样品用量少，且由于敏感材料是固定化的，
可以反复多次使用。
(5) 传感器连同测定仪的成本远低于大型的分析仪器，
因而便于推广普及。
生物传感器的信号转换器
生物传感器中的信号转换器是将分子识别元件进行
识别时所产生的化学的或物理的变化转换成可用信号
的装置 。 常用的生物传感器换能器件有电化学电极,
热敏器件, 半导体器件, 光电原理器件等, 目前以电
化学电极应用最广且比较成熟 。
电化学电极可用作生物传感器的信号转换器的电化
学电极一般可以分为两种类型 。 电位型电极 和 电流型
电极,
? 电位型电极
离子选择电极
离子选择性电极是一类对特定的阳离子或阴离子呈选择
性响应的电极, 具有快速, 灵敏, 可靠, 价廉等优点, 因
此应用范围很广, 离子选择性电极作为生物传感器的信号
转换器只是它的一种应用, 在生物医学领域也常直接用它
测定体液中的一些成分 （ 如 H+,K+,Na+,Ca2+等 ） 。
生物传感器的信号转换器
生物传感器的信号转换器
氧化还原电极
生物传感器的信号转换器
生物传感器的信号转换器
? 电流型电极
电化学生物传感器中采用电流型电极为信号转换器的趋势
日益增加，这是因为这类电极和电位型电极相比有以下优点：
（ 1）电极的输出直接和被测物的浓度呈线性关系，而电位型
电极那样和被测物浓度的对数呈线性关系；
（ 2）电极输出值的读数误差所对应的待测物浓度的相对误差
比电位型电极的小；
（ 3）电极的灵敏度比电位型电极的高。
生物传感器的信号转换器
? 生物热敏器件
基于温度测量原理，把生物功
能材料和高性能检测器件结合而
成，如酶热敏电阻。
酶热敏电阻可分为密接型和反
应器型。
酶热敏电阻检测系统
生物传感器的信号转换器
? 离子敏场效应晶体管
传感器应具有以下特点：
（ l） 小型化, 便于携带, 易于使用, 非专业人员也能操作；
（ 2） 响应快, 可应用于微小区域, 如生物细胞内成分的测定；
（ 3） 能同时完成多种成分测定；
（ 4） 能够直接连接在计算机的输入端；
（ 5） 输出阻抗低, 可避免外界感应以及下级电路的干扰 。
由于绝缘栅场效应管的应用, 制造具有以上特点的离子敏
感元件及生物敏感元件已成为现实,
敏场效应晶体管的结构和工作原理
离子敏场效应晶体管 （ ISFET）,
它与常用的绝缘栅型场效应晶体管构造相同．在输入栅极做
了一些改进，以能与特定的化学物质反应，产生电位的敏感膜
取代金属极．让敏感膜直接与溶液接触，由于敏感膜对溶液中
的离子有选择作用，从而调制 ISFET的漏电流变化，利用这个
特性就能检测一溶液中的离子活度。
生物传感器的信号转换器
Ion-sensitive field-effect transistor(ISFET)
敏场效应晶体管的结构和工作原理
生物传感器的信号转换器
生物传感器的信号转换器
? 光生物电极
光生物电极的测量原理：①生物发光反应的测量原理；②
生物物质的光吸收、光激发；③生物反应物质对光传播对干
扰原理。
竞争结合型、光吸收型、荧光淬灭型、指示剂型、生物发
光型和光传递干扰型。
敏感器件（分子识别元件 )
? 酶电极
酶电极结构原理示意图
敏感器件（分子识别元件 )
? 微生物电极
呼吸性测定型微生物传感器 代谢产物测定型微生物传感器
?免疫传感器 (Immunosensor)
? 免疫电极
敏感器件（分子识别元件 )
酶标记免疫传感器原理示意图
?组织传感器
以动植物组织薄片材料作为生物敏感膜的电化学传
感器称为组织电极，此系酶电极的衍生型电极．动植
物组织中的酶是反应的催化剂．与酶电极比较，组织
电极具有如下优点：
1.酶活性较离析酶高,
2.酶的稳定性增大,
3.材料易于获得,
植物组织膜电极结构图解
a一水瓜,b一果皮,
c-中果皮,d-内果皮
1-中果皮组织薄片
2-固定化骨架
3-透气健,4-垫圈
5-内电解质
6-复合 PH电极
7-塑料电极体
3-7为二氧化碳气敏电极结构
?组织传感器
生物传感器的应用
? 微生物发酵过程检测上的应用
? 动植物细胞培养过程检测上的应用
检测参数：细胞浓度、基质浓度、产物浓度、溶氧浓度,pH
等；检测胞内 pH,RNA,DNA,ATP,NADP等。
流式细胞计数法（ FCM)：流式细胞仪
生物传感器的应用
发
酵
罐
p H
溶 氧
培养温度
加热器
泵
过
滤
器
→
↑
培
养
基
贮
罐
称
空气压缩机
消泡剂
酸或碱
O 2 C O 2 浓度
→
→
冷却水
排气
↑
泵
序列信息
DA 变换
数 码 输 出
AD 变换
C PU
WS 或 PC
过程控制器
↓
↓
↓
→
→
↑↑ ↑↑ ↑
→←
生化过程的控制
生化过程的控制
酸 碱
pH记 录
及调节器
pH测 量电极组? 温度的控制
? pH的控制
调节器
消泡剂
生化过程的控制
? 溶氧的控制
? 泡沫的控制
生化过程的控制
生化过程的控制
生化过程的控制
