第二章 中药制剂的理化鉴别
（ Physicochemical Identification）
第一节 必备知识
第二节 一般化学反应法
第三节 升华鉴别法
第四节 荧光鉴别法
第五节 薄层色谱鉴别法
第六节 气相色谱鉴别法
第七节 高效液相色谱鉴别法
第一节 必备知识
一, 理化鉴别的意义
中药制剂的理化鉴别是利用其药味 (原料药 )中的
某种或某类指标性成分的理化性质, 通过化学分析方
法和仪器分析方法, 检测有关成分在制剂中是否存在,
进而对所含药味与处方的一致性做出判断, 达到鉴定
药品真伪之目的 。
药品真实性的检定是药品质量控制的重要内容,
是评价药品质量的重要依据 。 如果药品缺乏真实性,
则可判定为不合格药品, 并以假药论处 。
二、理化鉴别的特点
理化鉴别是以制剂药味中的 指标性成分 （主要为
有效成分或特征性成分）为检测对象，故可以更加
客观深刻地评价药品的真实性。对于液体制剂或其
它不含原料药粉的制剂，理化鉴别则显得为重要。
三、理化鉴别的方法
目前中国药典收载的 理化鉴别方法有,一般
化学鉴别法、微量升华法、荧光鉴别法、分光光
度法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱
法等。
其中色谱法尤其是 薄层色谱法 得到广泛的应
用，这主要是由于色谱法具有 分离分析双重功能,
从而大大提高了鉴别工作的灵敏度和专属性，并
成为今后中药制剂鉴别的发展方向 。
,中国药典, （ 2005）新增中成药
（ 116种）鉴别方法
鉴别方法 应用品种 说 明
薄层色谱 114
高效液相色谱 4
气相色谱 3 主要鉴别挥发性成分
分光光度法 0
一般化学反应法 2
荧光鉴别法 0
微量升华法 0
显微鉴别法 29 适用于含药粉的剂型
第二节 一般化学反应法
（ General Chemical Reaction）
一, 原理
一般化学反应法是利用检测试剂与制剂中的
指标性成分发生化学反应, 根据所产生的颜
色, 沉淀或气体等现象, 来判断某些成分或
某些药味的有无 。 由此可见, 所谓一般化学
反应法即通常所说的显色反应和沉淀反应 。
二, 特点
1.一般化学反应法具有操作简便, 适用性较强
等特点 。
2.其否定功能往往强于肯定功能,专属性较差 。
3.易发生假阳性或假阴性反应
假阳性或假阴性反应克服方法如下：
① 对样品进行预处理, 除去干扰性成分, 富集被检成分 。
② 选用专属性较强的检测试剂 。
③ 必要时做阳性或阴性对照试验加以验证, 保证其专属
性和灵敏度 。
三、常用的一般化学反应
主要用于制剂中 生物碱、黄酮类、蒽醌类、皂
苷、香豆素、萜类以及各种矿物类成分 的鉴别
（一）生物碱
1,碘化铋钾反应 产生红棕色沉淀
2,碘化汞钾反应 产生类白色沉淀
3,硅钨酸反应 产生白色沉淀
4,苦味酸反应 产生黄色结晶性沉淀
需在 酸性条件 下进行。注意事先 排除其它成分
的干扰 。 少数生物碱不与上述通用沉淀试剂反应,
而具有专属性较强的其它反应。
（二）黄酮类化合物
最多使用的检识反应为 盐酸 — 镁粉反应, 呈紫
红色。大山楂丸（山楂）、抗骨增生丸（淫羊
藿）、参茸保胎丸（黄芩）等。此外,黄芩提取
物 采用 二氯氧锆 -盐酸 显色反应进行检识。
（三）蒽醌类化合物
主要应用碱液反应（ Borntrager反应）,阳性反
应呈红色，加酸红色褪去呈黄色。例如大黄流浸
膏。
（四）皂苷
常用的定性鉴别反应有：
① 泡沫反应 样品水溶液振摇后，产生持久性泡
沫。
② 醋酐 — 浓硫酸反应 甾体皂苷呈现污绿色，三
萜皂苷呈现红、红紫色。
③ 浓硫酸反应 呈现红、红紫色 。
④ 三氯化锑或五氯化锑反应 氯仿液呈紫兰色 。
⑤ 氯仿 — 浓硫酸反应 氯仿层出现红色或兰色，
并具绿色荧光。
例：地奥心血康胶囊（黄山药和穿山龙薯蓣的
提取物）、养心定悸膏（甘草、红参、麦冬）。
（五）香豆素、内酯类和酚类
常用的检识反应有：
① 氯亚氨基 -2,6-二氯醌 -四硼酸钠反应
（ Gibbs反应）,呈现蓝色。
② 异羟肟酸铁反应 呈红色。
应用品种有：养阴清肺膏（牡丹皮）、前列
舒丸（牡丹皮）等。
（六）挥发性成分
主要使用 香草醛 — 浓硫酸 反应检识此类成分，
正反应呈红、红紫色。应用品种主要有：万应锭
（冰片）、牛黄解毒片（冰片）、养心定悸膏
（桂枝、生姜）等。
（七）矿物药
朱砂、石膏、雄黄等为中成药中常见的矿药。
1.朱砂（主含 HgS） 主要采用铜片反应。
HgS+2HCl+Cu→CuCl 2+Hg（白 △ ↑ ） +H2S
天王补心丹等中成药中朱砂的鉴定。
2.石膏、牡蛎、海螵蛸等 此类药物均富含 钙盐,主要采用草
酸铵反应 。
CaSO4+(NH4)2C2O4→CaC 2O4（白） ↓ +(NH4)2SO4
CaC2O4溶于盐酸，难溶于醋酸。
CaC2O4+2HCl→CaCl 2+H2C2O4
止咳桔红口服液（石膏）、安胃片（海螵蛸）、龙牡壮骨颗
粒（牡蛎、龙骨、乳酸钙、葡萄糖酸钙等）
3.雄黄（主含 As2S2）
（ 1） 氯化钡沉淀法（检出硫）
As2S2+KClO3+4HNO3 2K3AsO3+H2SO4+Cl2↑+4NO↑
H2SO4+BaCl2 BaSO4↓ （白）
牙痛一粒丸
（ 2） 硫化氢反应（检出砷）
2As2S2+7O2 2As2O3+4SO2↑
As2O3+3H2O 2H3AsO3
2H3AsO3+3H2S As2S3(黄 )+6H2O
As2S3在盐酸中析出黄色沉淀，并溶于碳酸铵中
4As2S3+12(NH4)2CO3 4(NH4)3AsO3+4(NH4)3AsS3+12CO2↑
小儿惊风散等。
[o]
（八）动物药
常含有较多的蛋白质或氨基酸、故鉴别此类药物，
常使用 茚三酮 反应，正反应呈 红紫色 。
例如：龟龄集（鹿茸、海马、等）、参茸保胎
丸（阿胶、鹿茸）等。
四、操作方法
（ 1）供试液的制备（见前述）
（ 2）操作方式
大多为试管反应,或在检测试纸上、或在蒸发皿（坩
埚）中进行反应
五、结果判断
将反应现象或结果与药品标准对照，若一致则符合
规定。若不一致则判定为不符合规定。
六、注意事项
① 试管反应一般使用 2× 10cm试管, 取供试液 1~2ml。 加入
检测试液时, 试管应稍倾斜, 试液应沿试管内壁逐滴加入,
滴管下口不得触及内壁 。
② 加入反应试液后一般需振摇试管, 使之与供试液混匀 。 振
摇时应缓缓摇摆振摇, 不得上下振摇, 手指不允许堵塞试管
口, 若需层反应, 则不得振摇试管 。
③ 一般需在白色背景下观察反应所产生的颜色或沉淀, 若沉
淀为白色或类白色则需在黑色背景下观察 。
④ 如果反应需加热, 一般在水浴中加热 。 用试管夹夹持试管,
内容物不得超过容积的 2/3,试管应倾斜 45度, 试管口不得
闭塞, 并不得朝向人 。 加热有机溶液绝对不允许使用明火热
源 。
⑤ 如果反应需无水条件, 必须保持试管, 蒸发皿等容器的干
燥, 例如醋酐 — 浓硫酸反应 。
七、应用实例
1.千柏鼻炎片
2.小儿清热止咳口服液
3.茴香橘核丸
4.地奥心血康胶囊
5.养阴清肺膏
6.安胃片
7.天王补心丹
8.牙痛一粒丸
9.中风回春片
第三节 升华鉴别法
（ Sublimation）
一, 原理
本法是利用某些成分的 升华性, 在一定
温度下将其从制剂中升华分离出来, 并以
升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴
别的依据 。
二, 特点
升华法具有 简便, 实用 等特点, 由于升
华性仅为少数中药化学成分所具有且升华
物纯度较高, 故该法专属性亦较好 。
三, 操作方法
大多采用 微量升华法,少数使用坩埚法
或蒸发皿法，在此，仅介绍微量升华 。
六味地黄丸中冰片升华物
六味地黄丸中冰片升华物显微镜下观
六味地黄丸中冰片升华物香草醛浓硫酸显色
四, 注意事项
① 升华时应缓缓加热, 温度过高, 易使药粉焦化, 在载玻片上产
生焦油状物, 影响对升华物的观察或检识 。 温度的控制可通过调整
酒精灯火焰与石棉板的间距来实现 。
② 样品粉末用量一般约 0.5g,过少不易产生足够量的升华物 。
③ 可在载玻片上滴加少量水降温, 促使升华物凝集析出 。
④ 无金属片, 可用载玻片代替 。
五、应用实例（ P58）
(一 ) 万应锭的鉴别
（ 二 ） 小儿惊风散的鉴别 （ 反应机理 ）
（ 三 ） 明目地黄丸的鉴别
第四节 荧光鉴别法
（ Fluorescence）
一, 原理
荧光鉴别法是利用制剂中某些成分, 如
黄酮类, 蒽醌类, 香豆素类等在 可见光或
紫外光照射下能产生一定颜色荧光 的性质,
对中药制剂进行鉴别 。 有的成分本身不具
荧光性, 但加酸, 碱处理后, 或经其它化
学方法处理后也可产生荧光供鉴别用 。
二, 特点
本法操作 简便, 灵敏, 具有一定的专
属性 。 例如大黄和土大黄, 前者显棕色
至棕红色荧光, 而后者显亮蓝色荧光,
很容易区分 。
三, 操作方法
取中成药的提取液点加于滤纸上或加入蒸发皿中,
臵紫外光灯 （ 365nm） 下约 10cm处观察所产生的荧
光 。 必要时可在供试品上加酸, 碱或其它试剂, 再观
察荧光及其变化 。
四、注意事项
① 荧光强度较弱, 故一般需在暗室中观察荧光 。
② 供试液一般用毛细管吸取, 少量多次点加在滤纸上, 使
斑点集中且具有一定浓度 。
③ 紫外光对人的眼睛和皮肤有损伤, 操作者应避免与紫外
光较长时间接触 。
五、应用实例（ P59）
（一）元胡止痛片
（二）五味麝香丸
（三）热炎宁颗粒
第五节 薄层色谱鉴别法
（ Thin Layer Chromatography TLC）
一, 原理
基于相同物质在同一的色谱条件下, 表现出 相同的色谱
行为 这一基本规律, 在同一块薄层板上点加供试品和对照
物, 在相同条件下展开, 显色检出色谱斑点后, 将所得供
试品与对照物的色谱图进行对比分析, 从而对药品进行定
性鉴别 。
二、特点
（一）简便、快速、易普及、具有分离和分析双重功
能，且采用 共薄层对照分析法,故专属性亦较强。
（二）系统适用性试验。 (05版药典新增 )
1.检测灵敏度
2.分离度
3.重复性
1.检测灵敏度
主要用于限量检查,采用供试品溶液和对照品
溶液与稀释若干倍（ 10倍）的对照品溶液在规
定的色谱条件下，于同一块薄层板上点样、展
开、检视，后者应显示清晰的斑点。
2.分离度
用于鉴别时，对照品溶液与供试品溶液中相
应的主斑点，应显示两个清晰分离的斑点。用
于限量检查和含量测定时，要求定量峰与相邻
峰之间有较好的分离度，除另有规定外,分离
度应大于 1.0。
分离度 （ R） 的计算公式为：
R=2(d2-d1)/W1+W2
式中 d1为相邻两峰中后一峰与原点的距离；
d2为相邻两峰中前一峰与原点的距离；
W1 及 W2为相邻两峰各自的峰宽；
A B
W1 W2
d1
d2
3.重复性
主要用于含量测定,即同一供试品溶液在同一块薄
层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的 相对
标准偏差 (RSD)应 不大于 3.0%；需显色后测量的相
对标准偏差应不大于 5.0%。
（ 三 ） 对照物的设臵
对照物分为 对照品 （ 主要为有效成分和特征性成分的
单体 ）, 对照药材 和 对照提取物 三种 。
对照物的设臵有四种方式：
① 设臵一种或数种对照品
② 设臵对照提取物
③ 设臵一种或数种对照药材
④ 同时设臵对照品和对照药材 (“双对照, ),它要求
样品色谱图中的主斑点应与对照品和对照药材色谱图中的
有关斑点相一致, 从而大大提高了薄层色谱鉴别法的专属
性和整体性, 可有效地检出药品是否使用了假冒药材,
（ 四 ） TLC已广泛用于中药材及其制剂的检验, 成为中药
鉴别的重要方法和鲜明特色 。
（ 五 ） 中国药典大多数品种采用硅胶薄层色谱法, 少数
使用聚酰胺薄层色谱法和氧化铝色谱法 。
薄层色谱法还可用于药品的 杂质检查 和 含量测定 。
三, 影响薄层色谱鉴别的主要因素
影响因素较多, 例如供试液的净化程度, 吸附剂
的性能和薄层板的质量, 点样 （ 原点 ） 的质量, 展
开剂的组成和饱和情况, 对照品的纯度, 展开的距
离, 相对湿度和温度等 。 重点介绍 展开剂, 相对湿
度, 温度和 pH值 的影响 。
四、仪器与材料
（ 一 ） 薄层板
1.市售薄层板 （ 亦称预制薄层板 ）
除另有规定外, 一般要求使用市售薄层板 。
市售薄层板分普通 薄层板 和 高效薄层板 两种 。
常用的有硅胶薄层板, 硅胶 GF254薄层板, 聚
酰胺薄层板, 氧化铝薄层板等 。
2.自制薄层板
在保证色谱质量的前提下, 如需对薄层板进行处理和化学改
性, 以适应供试品分离的要求时, 也可用实验室自制的薄层板,
除另有规定外, 玻板可用 10cm× 10cm, 10cm× 15cm,
20cm× 10cm,20cm× 20cm不同规格的, 最常用的固定相有
硅胶 G,硅胶 GF254,硅胶 H,硅胶 HF254等 。 其颗粒大小,
一般要求直径为 10~40μm 。 薄层板采用湿法制备, 即使用涂
布器将制好的固定相糊均匀涂布于玻板上 。 所用涂布器应能使
固定相在玻板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层 。 涂布器有
手动, 半自动, 全自动等类型 。
不同规格的薄层板
铺制薄层板
（ 二 ） 点样器材
为了增强药品定性鉴别的 可比性, 中国药典规
定采用定量点样 。 最常用的是 微升毛细管 （ 定容
毛细管 ）, 为了提高点样效率和质量, 还可用点
样辅助设备, 如点样支架, 半自动或自动点样器
。
（ 三 ） 展开容器
应使用专用的展开缸, 展开缸有 水平式 及 直
立式 两种类型 。 上行展开一般使用直立展开缸
,它又分为平底式和双槽式, 双槽展开缸具有
节省溶剂, 便于预平衡, 可控制展开箱内的湿
度等优点 。
展开缸盖子应能密闭, 体积应与薄层板大小
相适应 。 不能用生物标本缸等其它玻璃器皿作
为展开缸, 否则影响展开质量 。
全自动点样仪
微升毛细管 双槽展开缸
（ 四 ） 显色 （ 检视 ） 装臵
展开后的薄层板, 一般需采用相应的显色 （ 检视 ）
方法使板上的被检成分斑点显色 。
喷雾显色 应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器, 要求用压
缩气体使显色剂呈均匀雾状喷出；
浸渍显色 可用专用玻璃器皿或适宜的展开缸做为浸渍
槽；
蒸气熏蒸显色 可在双槽展开缸或大小适宜的干燥器中
进行；荧光检视装臵为装有可见光, 254nm及 365nm紫外
光源和相应滤光片的暗箱, 可附加摄像设备供拍照图像用
,暗箱内光源应有足够的光照度 。
喷雾显色
荧光显色
五, 操作方法
一般操作步骤为：
薄层板制备 （ 制板 ） → 点样 → 展开 → 显色与检视
（ 一 ） 薄层板制备
1.市售薄层板
临用前一般应在 １１０ ℃ 活化３０分钟 。 聚酰胺薄膜不需
活化 。 如在贮放期间被空气中杂质污染, 使用前可用三氯甲烷
,甲醇或二者的混合溶剂在展开缸中上行展开预洗, 110℃ 活化
,放干燥器中备用 。
2.自制薄层板
除另有规定外, 将 1份固定相和 3份水 （ 或 0.2﹪ ～
0.5﹪ 羧甲基纤维素钠水溶液 ） 在研钵中向同一方向研
磨混合, 去除表面的气泡后, 倒入涂布器中, 在玻璃
板上平稳地移动涂布器进行涂布, 取下涂好薄层的玻
璃板, 臵水平台上室温下晾干后, 在 １１０ ℃ 烘 30分
钟活化, 立即臵干燥器中备用 。 薄层板一般要求新鲜
制备, 当天使用 。 使用前应在反射光及透射光下检查
其质量, 若板面不均匀, 不平整或有麻点, 有气泡,
有破损及污染等情况, 应弃去不用 。
（ 二 ） 点样
1.供试品溶液的制备
主要采用 浸渍法, 回流以及超声等方法 提取, 液液萃取法或
固液萃取 法进行精制 。 有的成分在药品中是以苷或酯等结合态
存在, 检验前需水解成游离态再与相应的对照品一同展开分离
,鉴别 。
如万应锭中熊胆的鉴别, 定坤丹中人参和三七的鉴别和牛黄
上清丸中大黄的鉴别 。
2.原点的点加
除另有规定外, 在干燥洁净的环境, 用专用毛细管
或半自动, 自动点样器械点样于薄层板上形成原点 。
原点一般为圆点状或窄细的条带状 。 原点基线距板底
边 10~15mm,高效板原点基线离底边 8~10mm。 圆点
状原点直径一般不大于 3mm；条带状的宽度一般为
5~10mm。 高效板条带宽度为 4~8mm,原点间距离可
视斑点扩散情况以不影响检出为宜, 一般不少于 8mm
,高效板样品间隔不少于 5mm。 毛细管接触点样时应
少量多次点加, 才能保证原点小而圆 。 还需注意勿损
伤薄层表面, 点加条带原点时应注意条带的均匀性,
用喷雾状条带点样器, 可保证点样的质量 。
≥8mm原点起
始线
≥5mm
8~15cm
1~1.5cm
溶剂前沿
展开剂
液面
（ 三 ） 展开
点样后的薄层板放入加有展开剂的展开缸中, 密闭, 一般采
用 上行一次展开 。 薄层板浸入展开剂的深度以液面距原点 5mm
为宜, 溶剂前沿达到规定的展距后, 取出薄层板, 晾干, 待检
测 。 一般上行 展开 8~15cm,高效板上行展开 5～ 8cm。 必要时
可进行二次展开或双向展开 。
例如, 益气养血口服液中陈皮的薄层鉴别即采用二次展开,
先以乙酸乙酯－甲醇－水－吡啶 （ 100︰ 17︰ 13︰ 5） 展至 3cm
,取出晾干；再以甲苯－乙酸乙酯－甲醇－水 （ 20︰ 10︰ 1︰ 1
上层 ） 展至 8cm,取出晾干 。
展开前一般需用展开剂对展开缸进行预平衡, 即使
缸内展开剂气液两相达到动态平衡, 该过程亦称, 饱
和, 。 为此可在展开缸内加入适量展开剂, 密闭, 保
持 15~30分钟 。 预平衡后, 迅速将薄层板放入展开缸
中, 立即密闭, 展开 。 若薄层板需同时预平衡, 可将
点样后的薄层板放入双槽展开缸的一侧槽中, 另一侧
槽中加入展开剂, 如上法预平衡后, 再将展开剂移入
放有薄层板的槽中, 展开 。 展开剂要求 新鲜配制, 不
要多次反复使用 。 展开剂配制后若分层, 则应按要求
放臵分层后取需要的一相 （ 上层或下层 ） 使用 。
（ 四 ） 显色与检视
1.颜色较深 的成分可直接在日光下检视其斑点 。
2.无色或浅色 的成分多用喷雾法或浸渍法以适宜的 显色剂 显
色, 或再加热使之显色, 在日光下检视 。
3.有 荧光的物质 或遇某些试剂可激发荧光的物质可在紫外灯
（ 365nm） 下观察荧光色谱 。
4.有的成分可用试剂的 蒸气熏蒸 （如碘蒸气、氨蒸气）显色
。
5.某些无色有紫外吸收且不产生荧光的成分可用 荧光淬灭法
显色 。 即在含有荧光剂的硅胶板 （ 如硅胶 GF254板 ）, 在紫外
光灯 （ 254nm） 下观察板面上该成分形成的荧光淬灭色谱 。
GF254薄层板
GF254薄层板在荧光灯下
荧光淬灭法的 GF254薄层板
六、记录
薄层色谱图象可采用摄像设
备拍照，以光学照片或电子
图象的形式保存。也可以用
扫描仪记录相应的色谱图。
薄层色谱数码
相机成像系统
七、结果判断
供试品色谱中，在与对照品、对照药材或对
照提取物色谱的相应的位臵上，显相同颜色或
荧光的斑点，则判断为符合规定。
八, 应用实例
（一）六味地黄丸中牡丹皮的鉴别
1.丹皮酚； 2~5.六味地黄丸
1~12.一捻金； 13.人参二醇 +人参三醇
（二）一捻金中人参的鉴别
（ 三 ） 龟龄集中人参的鉴别
1~4.龟龄集； 5.人参对照药材；
6.人参皂苷 Rb1(S1),Re(S2),Rg1(S3)
（四）万氏牛黄清心丸中黄连的鉴别
1~5.万氏牛黄清心丸；
6.黄连对照药材； 7.小檗碱
（五）华佗再造丸薄层色谱图
（喷显色剂前的） （喷显色剂后的）
1.12.吴茱萸对照药材； 2.11.川芎对照药材； 3～ 10.华佗再造丸
第五节 紫外 -可见光谱鉴别法
(Ultraviolet and Visible Spectroscopy)
一、原理
某些中药或中成药经适当处理后，所得 紫外吸收光谱是由其
各组分的特征吸收叠加而成的。 若将中药制剂作为一个特定的
整体，在一定测试条件下，只要各药味及其成分的组成与含量
相对稳定，则其紫外吸收光谱具有一定的特征性和重现性，可
以用于定性鉴别。
两组分的加和紫外吸收光谱
二, 特点
分光光度鉴别法简便, 灵敏, 易普及 。
但由于紫外光谱分辨率较低, 图谱简单, 某些不同的样品
可能给出极其相似的光谱图, 使其在实际工作中受到一定的
限制 。 如果对样品进行前处理, 除去干扰成分, 则可有效地
提高该法的专属性 。
中国药典仅有少数中成药品种收
载了分光光度鉴别法，例如，木
香槟榔丸等。
中国药典规定以 最大吸收波长
（ λmax ）做为鉴别参数。样
品吸收峰波长应在该品种项下
规定的波长 ± 2nm以内。
复方丹参片紫外谱线组图
三、操作方法（ P77 自学）
四、注意事项（ P77 自学）
五, 结果判断
将供试品最大吸收波长和药品标准的规定进行
比较, 二者如果一致, 则判定为符合规定 。
六, 应用实例
木香槟榔丸
处方：木香, 槟榔, 枳壳, 陈皮, 青皮 （ 醋炒 ）,
香附 （ 醋制 ）, 三棱 （ 醋制 ）, 莪术 （ 醋制 ）
取本品粉末 4g,臵蒸馏瓶中, 加水 10ml,使供试品
湿润后, 水蒸汽蒸馏, 收集馏液约 100ml,照紫外分
光光度法 （ 中国药典附录 V A） 测定, 在 253nm波长
处有最大吸收 。 （ 检出挥发性成分 ）
第六节 气相色谱鉴别法
(Gas Chromatography GC)
一、原理
在一定的色谱条件下,相同的物质应具有相同的色谱特性
（分配系数）和色谱行为（保留值） 。因此，在同一色谱条
件下，将供试品溶液和对照品溶液分别注入气相色谱仪，对
二者的气相色谱图进行比对，根据供试品是否给出与对照品
保留时间相同的色谱峰，从而对样品作出定性分析。这种方
法可称为 保留时间比较法,中国药典即采用此法对某些中成
药进行真伪鉴别。保留时间（ tR）系指从进样开始，到该组
分色谱峰顶点的时间间隔。
色谱峰示意图
二, 特点
气相色谱法具有高分辨率, 高灵敏度, 快速,
准确等特点, 尤其适合分析制剂中的挥发性成分,
如麝香酮, 薄荷醇, 冰片, 水杨酸甲酯等 。 一般情
况下气相色谱不适合分析蒸汽压较低的也即挥发性
较小的成分, 因此该法在实际工作中具有一定的局
限性 。
三, 操作方法 （ 自学 ）
四, 注意事项 （ 自学 ）
气 相 色 谱 仪
五、结果判断
比较供试品与对照品色谱图，供试品呈现与对照品
保留时间相同的色谱带，则判断为符合药品标准规定。
所谓保留时间相同是指基本相同，彼此相差百分之几
秒是允许的。
六、应用实例
（一）少林风湿跌打膏
（二）安宫牛黄丸中麝香的鉴别
----麝香酮
—安宫牛黄丸
第七节 高效液相色谱鉴别法
（ High Performance Liquid Chromatography HPLC)
一, 原理
高效液相色谱法鉴别在原理和操作上与气相色谱鉴别法有许
多相似之处 。 中国药典采用 保留时间比较法, 即在相同的色谱
条件下, 比较样品和对照品的色谱峰的保留时间 （ tR） 是否一
致, 从而对被检成分 （ 药味 ） 的存在情况做出判断 。 例如, 六
味地黄丸中芍药苷和四君子丸中甘草酸的鉴别 。
六味地黄丸中芍药苷的高效液相色谱图 (a.芍药苷 )
A.芍药苷对 照品 B.六味地黄丸供试品标准品
二、特点
高效液相色谱法 不受样品挥发性的限制，固定相、流动相
的选择范围较宽，检测手段多样，加之高效快速，微量，自
动化程度高等特点,所以在药物分析工作中比气相色谱法应
用更为广泛，在中药制剂鉴别中的应用也日益增多。不过，
目前在中药制剂质量标准中，一般很少单独使用该法做鉴别，
而是多与含量测定结合进行。
三, 操作方法
四, 注意事项
五, 应用实例
（ 一 ） 龙牡壮骨颗粒中维生素 D2鉴别 （ P82）
（ 二 ） 百令胶囊的鉴别 （ 05版新增内容 ）
本品系由发酵虫草菌粉（ CS-C-Q80）制成。采用高
效液相色谱法鉴别其中的核苷类成分。
核苷类成分的鉴别：
样品先用乙醚脱脂，再用 0.5﹪ 磷酸溶液超声波提取制成核
苷供试液。用反相高效液相色谱法测定，以乙腈为流动相 A，
以 0.04mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相 B,梯度洗脱,供试品色
谱应呈现与对照药材色谱保留时间相同的六个主色谱峰，与腺
苷、尿苷对照品保留时间相同的色谱峰。
时间 （ 分钟 ） 流动相 A（ ﹪ ） 流动相 B（ ﹪ ）
0~15 0 100
15~45 0→ 15 100→ 85
（ Physicochemical Identification）
第一节 必备知识
第二节 一般化学反应法
第三节 升华鉴别法
第四节 荧光鉴别法
第五节 薄层色谱鉴别法
第六节 气相色谱鉴别法
第七节 高效液相色谱鉴别法
第一节 必备知识
一, 理化鉴别的意义
中药制剂的理化鉴别是利用其药味 (原料药 )中的
某种或某类指标性成分的理化性质, 通过化学分析方
法和仪器分析方法, 检测有关成分在制剂中是否存在,
进而对所含药味与处方的一致性做出判断, 达到鉴定
药品真伪之目的 。
药品真实性的检定是药品质量控制的重要内容,
是评价药品质量的重要依据 。 如果药品缺乏真实性,
则可判定为不合格药品, 并以假药论处 。
二、理化鉴别的特点
理化鉴别是以制剂药味中的 指标性成分 （主要为
有效成分或特征性成分）为检测对象，故可以更加
客观深刻地评价药品的真实性。对于液体制剂或其
它不含原料药粉的制剂，理化鉴别则显得为重要。
三、理化鉴别的方法
目前中国药典收载的 理化鉴别方法有,一般
化学鉴别法、微量升华法、荧光鉴别法、分光光
度法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱
法等。
其中色谱法尤其是 薄层色谱法 得到广泛的应
用，这主要是由于色谱法具有 分离分析双重功能,
从而大大提高了鉴别工作的灵敏度和专属性，并
成为今后中药制剂鉴别的发展方向 。
,中国药典, （ 2005）新增中成药
（ 116种）鉴别方法
鉴别方法 应用品种 说 明
薄层色谱 114
高效液相色谱 4
气相色谱 3 主要鉴别挥发性成分
分光光度法 0
一般化学反应法 2
荧光鉴别法 0
微量升华法 0
显微鉴别法 29 适用于含药粉的剂型
第二节 一般化学反应法
（ General Chemical Reaction）
一, 原理
一般化学反应法是利用检测试剂与制剂中的
指标性成分发生化学反应, 根据所产生的颜
色, 沉淀或气体等现象, 来判断某些成分或
某些药味的有无 。 由此可见, 所谓一般化学
反应法即通常所说的显色反应和沉淀反应 。
二, 特点
1.一般化学反应法具有操作简便, 适用性较强
等特点 。
2.其否定功能往往强于肯定功能,专属性较差 。
3.易发生假阳性或假阴性反应
假阳性或假阴性反应克服方法如下：
① 对样品进行预处理, 除去干扰性成分, 富集被检成分 。
② 选用专属性较强的检测试剂 。
③ 必要时做阳性或阴性对照试验加以验证, 保证其专属
性和灵敏度 。
三、常用的一般化学反应
主要用于制剂中 生物碱、黄酮类、蒽醌类、皂
苷、香豆素、萜类以及各种矿物类成分 的鉴别
（一）生物碱
1,碘化铋钾反应 产生红棕色沉淀
2,碘化汞钾反应 产生类白色沉淀
3,硅钨酸反应 产生白色沉淀
4,苦味酸反应 产生黄色结晶性沉淀
需在 酸性条件 下进行。注意事先 排除其它成分
的干扰 。 少数生物碱不与上述通用沉淀试剂反应,
而具有专属性较强的其它反应。
（二）黄酮类化合物
最多使用的检识反应为 盐酸 — 镁粉反应, 呈紫
红色。大山楂丸（山楂）、抗骨增生丸（淫羊
藿）、参茸保胎丸（黄芩）等。此外,黄芩提取
物 采用 二氯氧锆 -盐酸 显色反应进行检识。
（三）蒽醌类化合物
主要应用碱液反应（ Borntrager反应）,阳性反
应呈红色，加酸红色褪去呈黄色。例如大黄流浸
膏。
（四）皂苷
常用的定性鉴别反应有：
① 泡沫反应 样品水溶液振摇后，产生持久性泡
沫。
② 醋酐 — 浓硫酸反应 甾体皂苷呈现污绿色，三
萜皂苷呈现红、红紫色。
③ 浓硫酸反应 呈现红、红紫色 。
④ 三氯化锑或五氯化锑反应 氯仿液呈紫兰色 。
⑤ 氯仿 — 浓硫酸反应 氯仿层出现红色或兰色，
并具绿色荧光。
例：地奥心血康胶囊（黄山药和穿山龙薯蓣的
提取物）、养心定悸膏（甘草、红参、麦冬）。
（五）香豆素、内酯类和酚类
常用的检识反应有：
① 氯亚氨基 -2,6-二氯醌 -四硼酸钠反应
（ Gibbs反应）,呈现蓝色。
② 异羟肟酸铁反应 呈红色。
应用品种有：养阴清肺膏（牡丹皮）、前列
舒丸（牡丹皮）等。
（六）挥发性成分
主要使用 香草醛 — 浓硫酸 反应检识此类成分，
正反应呈红、红紫色。应用品种主要有：万应锭
（冰片）、牛黄解毒片（冰片）、养心定悸膏
（桂枝、生姜）等。
（七）矿物药
朱砂、石膏、雄黄等为中成药中常见的矿药。
1.朱砂（主含 HgS） 主要采用铜片反应。
HgS+2HCl+Cu→CuCl 2+Hg（白 △ ↑ ） +H2S
天王补心丹等中成药中朱砂的鉴定。
2.石膏、牡蛎、海螵蛸等 此类药物均富含 钙盐,主要采用草
酸铵反应 。
CaSO4+(NH4)2C2O4→CaC 2O4（白） ↓ +(NH4)2SO4
CaC2O4溶于盐酸，难溶于醋酸。
CaC2O4+2HCl→CaCl 2+H2C2O4
止咳桔红口服液（石膏）、安胃片（海螵蛸）、龙牡壮骨颗
粒（牡蛎、龙骨、乳酸钙、葡萄糖酸钙等）
3.雄黄（主含 As2S2）
（ 1） 氯化钡沉淀法（检出硫）
As2S2+KClO3+4HNO3 2K3AsO3+H2SO4+Cl2↑+4NO↑
H2SO4+BaCl2 BaSO4↓ （白）
牙痛一粒丸
（ 2） 硫化氢反应（检出砷）
2As2S2+7O2 2As2O3+4SO2↑
As2O3+3H2O 2H3AsO3
2H3AsO3+3H2S As2S3(黄 )+6H2O
As2S3在盐酸中析出黄色沉淀，并溶于碳酸铵中
4As2S3+12(NH4)2CO3 4(NH4)3AsO3+4(NH4)3AsS3+12CO2↑
小儿惊风散等。
[o]
（八）动物药
常含有较多的蛋白质或氨基酸、故鉴别此类药物，
常使用 茚三酮 反应，正反应呈 红紫色 。
例如：龟龄集（鹿茸、海马、等）、参茸保胎
丸（阿胶、鹿茸）等。
四、操作方法
（ 1）供试液的制备（见前述）
（ 2）操作方式
大多为试管反应,或在检测试纸上、或在蒸发皿（坩
埚）中进行反应
五、结果判断
将反应现象或结果与药品标准对照，若一致则符合
规定。若不一致则判定为不符合规定。
六、注意事项
① 试管反应一般使用 2× 10cm试管, 取供试液 1~2ml。 加入
检测试液时, 试管应稍倾斜, 试液应沿试管内壁逐滴加入,
滴管下口不得触及内壁 。
② 加入反应试液后一般需振摇试管, 使之与供试液混匀 。 振
摇时应缓缓摇摆振摇, 不得上下振摇, 手指不允许堵塞试管
口, 若需层反应, 则不得振摇试管 。
③ 一般需在白色背景下观察反应所产生的颜色或沉淀, 若沉
淀为白色或类白色则需在黑色背景下观察 。
④ 如果反应需加热, 一般在水浴中加热 。 用试管夹夹持试管,
内容物不得超过容积的 2/3,试管应倾斜 45度, 试管口不得
闭塞, 并不得朝向人 。 加热有机溶液绝对不允许使用明火热
源 。
⑤ 如果反应需无水条件, 必须保持试管, 蒸发皿等容器的干
燥, 例如醋酐 — 浓硫酸反应 。
七、应用实例
1.千柏鼻炎片
2.小儿清热止咳口服液
3.茴香橘核丸
4.地奥心血康胶囊
5.养阴清肺膏
6.安胃片
7.天王补心丹
8.牙痛一粒丸
9.中风回春片
第三节 升华鉴别法
（ Sublimation）
一, 原理
本法是利用某些成分的 升华性, 在一定
温度下将其从制剂中升华分离出来, 并以
升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴
别的依据 。
二, 特点
升华法具有 简便, 实用 等特点, 由于升
华性仅为少数中药化学成分所具有且升华
物纯度较高, 故该法专属性亦较好 。
三, 操作方法
大多采用 微量升华法,少数使用坩埚法
或蒸发皿法，在此，仅介绍微量升华 。
六味地黄丸中冰片升华物
六味地黄丸中冰片升华物显微镜下观
六味地黄丸中冰片升华物香草醛浓硫酸显色
四, 注意事项
① 升华时应缓缓加热, 温度过高, 易使药粉焦化, 在载玻片上产
生焦油状物, 影响对升华物的观察或检识 。 温度的控制可通过调整
酒精灯火焰与石棉板的间距来实现 。
② 样品粉末用量一般约 0.5g,过少不易产生足够量的升华物 。
③ 可在载玻片上滴加少量水降温, 促使升华物凝集析出 。
④ 无金属片, 可用载玻片代替 。
五、应用实例（ P58）
(一 ) 万应锭的鉴别
（ 二 ） 小儿惊风散的鉴别 （ 反应机理 ）
（ 三 ） 明目地黄丸的鉴别
第四节 荧光鉴别法
（ Fluorescence）
一, 原理
荧光鉴别法是利用制剂中某些成分, 如
黄酮类, 蒽醌类, 香豆素类等在 可见光或
紫外光照射下能产生一定颜色荧光 的性质,
对中药制剂进行鉴别 。 有的成分本身不具
荧光性, 但加酸, 碱处理后, 或经其它化
学方法处理后也可产生荧光供鉴别用 。
二, 特点
本法操作 简便, 灵敏, 具有一定的专
属性 。 例如大黄和土大黄, 前者显棕色
至棕红色荧光, 而后者显亮蓝色荧光,
很容易区分 。
三, 操作方法
取中成药的提取液点加于滤纸上或加入蒸发皿中,
臵紫外光灯 （ 365nm） 下约 10cm处观察所产生的荧
光 。 必要时可在供试品上加酸, 碱或其它试剂, 再观
察荧光及其变化 。
四、注意事项
① 荧光强度较弱, 故一般需在暗室中观察荧光 。
② 供试液一般用毛细管吸取, 少量多次点加在滤纸上, 使
斑点集中且具有一定浓度 。
③ 紫外光对人的眼睛和皮肤有损伤, 操作者应避免与紫外
光较长时间接触 。
五、应用实例（ P59）
（一）元胡止痛片
（二）五味麝香丸
（三）热炎宁颗粒
第五节 薄层色谱鉴别法
（ Thin Layer Chromatography TLC）
一, 原理
基于相同物质在同一的色谱条件下, 表现出 相同的色谱
行为 这一基本规律, 在同一块薄层板上点加供试品和对照
物, 在相同条件下展开, 显色检出色谱斑点后, 将所得供
试品与对照物的色谱图进行对比分析, 从而对药品进行定
性鉴别 。
二、特点
（一）简便、快速、易普及、具有分离和分析双重功
能，且采用 共薄层对照分析法,故专属性亦较强。
（二）系统适用性试验。 (05版药典新增 )
1.检测灵敏度
2.分离度
3.重复性
1.检测灵敏度
主要用于限量检查,采用供试品溶液和对照品
溶液与稀释若干倍（ 10倍）的对照品溶液在规
定的色谱条件下，于同一块薄层板上点样、展
开、检视，后者应显示清晰的斑点。
2.分离度
用于鉴别时，对照品溶液与供试品溶液中相
应的主斑点，应显示两个清晰分离的斑点。用
于限量检查和含量测定时，要求定量峰与相邻
峰之间有较好的分离度，除另有规定外,分离
度应大于 1.0。
分离度 （ R） 的计算公式为：
R=2(d2-d1)/W1+W2
式中 d1为相邻两峰中后一峰与原点的距离；
d2为相邻两峰中前一峰与原点的距离；
W1 及 W2为相邻两峰各自的峰宽；
A B
W1 W2
d1
d2
3.重复性
主要用于含量测定,即同一供试品溶液在同一块薄
层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的 相对
标准偏差 (RSD)应 不大于 3.0%；需显色后测量的相
对标准偏差应不大于 5.0%。
（ 三 ） 对照物的设臵
对照物分为 对照品 （ 主要为有效成分和特征性成分的
单体 ）, 对照药材 和 对照提取物 三种 。
对照物的设臵有四种方式：
① 设臵一种或数种对照品
② 设臵对照提取物
③ 设臵一种或数种对照药材
④ 同时设臵对照品和对照药材 (“双对照, ),它要求
样品色谱图中的主斑点应与对照品和对照药材色谱图中的
有关斑点相一致, 从而大大提高了薄层色谱鉴别法的专属
性和整体性, 可有效地检出药品是否使用了假冒药材,
（ 四 ） TLC已广泛用于中药材及其制剂的检验, 成为中药
鉴别的重要方法和鲜明特色 。
（ 五 ） 中国药典大多数品种采用硅胶薄层色谱法, 少数
使用聚酰胺薄层色谱法和氧化铝色谱法 。
薄层色谱法还可用于药品的 杂质检查 和 含量测定 。
三, 影响薄层色谱鉴别的主要因素
影响因素较多, 例如供试液的净化程度, 吸附剂
的性能和薄层板的质量, 点样 （ 原点 ） 的质量, 展
开剂的组成和饱和情况, 对照品的纯度, 展开的距
离, 相对湿度和温度等 。 重点介绍 展开剂, 相对湿
度, 温度和 pH值 的影响 。
四、仪器与材料
（ 一 ） 薄层板
1.市售薄层板 （ 亦称预制薄层板 ）
除另有规定外, 一般要求使用市售薄层板 。
市售薄层板分普通 薄层板 和 高效薄层板 两种 。
常用的有硅胶薄层板, 硅胶 GF254薄层板, 聚
酰胺薄层板, 氧化铝薄层板等 。
2.自制薄层板
在保证色谱质量的前提下, 如需对薄层板进行处理和化学改
性, 以适应供试品分离的要求时, 也可用实验室自制的薄层板,
除另有规定外, 玻板可用 10cm× 10cm, 10cm× 15cm,
20cm× 10cm,20cm× 20cm不同规格的, 最常用的固定相有
硅胶 G,硅胶 GF254,硅胶 H,硅胶 HF254等 。 其颗粒大小,
一般要求直径为 10~40μm 。 薄层板采用湿法制备, 即使用涂
布器将制好的固定相糊均匀涂布于玻板上 。 所用涂布器应能使
固定相在玻板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层 。 涂布器有
手动, 半自动, 全自动等类型 。
不同规格的薄层板
铺制薄层板
（ 二 ） 点样器材
为了增强药品定性鉴别的 可比性, 中国药典规
定采用定量点样 。 最常用的是 微升毛细管 （ 定容
毛细管 ）, 为了提高点样效率和质量, 还可用点
样辅助设备, 如点样支架, 半自动或自动点样器
。
（ 三 ） 展开容器
应使用专用的展开缸, 展开缸有 水平式 及 直
立式 两种类型 。 上行展开一般使用直立展开缸
,它又分为平底式和双槽式, 双槽展开缸具有
节省溶剂, 便于预平衡, 可控制展开箱内的湿
度等优点 。
展开缸盖子应能密闭, 体积应与薄层板大小
相适应 。 不能用生物标本缸等其它玻璃器皿作
为展开缸, 否则影响展开质量 。
全自动点样仪
微升毛细管 双槽展开缸
（ 四 ） 显色 （ 检视 ） 装臵
展开后的薄层板, 一般需采用相应的显色 （ 检视 ）
方法使板上的被检成分斑点显色 。
喷雾显色 应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器, 要求用压
缩气体使显色剂呈均匀雾状喷出；
浸渍显色 可用专用玻璃器皿或适宜的展开缸做为浸渍
槽；
蒸气熏蒸显色 可在双槽展开缸或大小适宜的干燥器中
进行；荧光检视装臵为装有可见光, 254nm及 365nm紫外
光源和相应滤光片的暗箱, 可附加摄像设备供拍照图像用
,暗箱内光源应有足够的光照度 。
喷雾显色
荧光显色
五, 操作方法
一般操作步骤为：
薄层板制备 （ 制板 ） → 点样 → 展开 → 显色与检视
（ 一 ） 薄层板制备
1.市售薄层板
临用前一般应在 １１０ ℃ 活化３０分钟 。 聚酰胺薄膜不需
活化 。 如在贮放期间被空气中杂质污染, 使用前可用三氯甲烷
,甲醇或二者的混合溶剂在展开缸中上行展开预洗, 110℃ 活化
,放干燥器中备用 。
2.自制薄层板
除另有规定外, 将 1份固定相和 3份水 （ 或 0.2﹪ ～
0.5﹪ 羧甲基纤维素钠水溶液 ） 在研钵中向同一方向研
磨混合, 去除表面的气泡后, 倒入涂布器中, 在玻璃
板上平稳地移动涂布器进行涂布, 取下涂好薄层的玻
璃板, 臵水平台上室温下晾干后, 在 １１０ ℃ 烘 30分
钟活化, 立即臵干燥器中备用 。 薄层板一般要求新鲜
制备, 当天使用 。 使用前应在反射光及透射光下检查
其质量, 若板面不均匀, 不平整或有麻点, 有气泡,
有破损及污染等情况, 应弃去不用 。
（ 二 ） 点样
1.供试品溶液的制备
主要采用 浸渍法, 回流以及超声等方法 提取, 液液萃取法或
固液萃取 法进行精制 。 有的成分在药品中是以苷或酯等结合态
存在, 检验前需水解成游离态再与相应的对照品一同展开分离
,鉴别 。
如万应锭中熊胆的鉴别, 定坤丹中人参和三七的鉴别和牛黄
上清丸中大黄的鉴别 。
2.原点的点加
除另有规定外, 在干燥洁净的环境, 用专用毛细管
或半自动, 自动点样器械点样于薄层板上形成原点 。
原点一般为圆点状或窄细的条带状 。 原点基线距板底
边 10~15mm,高效板原点基线离底边 8~10mm。 圆点
状原点直径一般不大于 3mm；条带状的宽度一般为
5~10mm。 高效板条带宽度为 4~8mm,原点间距离可
视斑点扩散情况以不影响检出为宜, 一般不少于 8mm
,高效板样品间隔不少于 5mm。 毛细管接触点样时应
少量多次点加, 才能保证原点小而圆 。 还需注意勿损
伤薄层表面, 点加条带原点时应注意条带的均匀性,
用喷雾状条带点样器, 可保证点样的质量 。
≥8mm原点起
始线
≥5mm
8~15cm
1~1.5cm
溶剂前沿
展开剂
液面
（ 三 ） 展开
点样后的薄层板放入加有展开剂的展开缸中, 密闭, 一般采
用 上行一次展开 。 薄层板浸入展开剂的深度以液面距原点 5mm
为宜, 溶剂前沿达到规定的展距后, 取出薄层板, 晾干, 待检
测 。 一般上行 展开 8~15cm,高效板上行展开 5～ 8cm。 必要时
可进行二次展开或双向展开 。
例如, 益气养血口服液中陈皮的薄层鉴别即采用二次展开,
先以乙酸乙酯－甲醇－水－吡啶 （ 100︰ 17︰ 13︰ 5） 展至 3cm
,取出晾干；再以甲苯－乙酸乙酯－甲醇－水 （ 20︰ 10︰ 1︰ 1
上层 ） 展至 8cm,取出晾干 。
展开前一般需用展开剂对展开缸进行预平衡, 即使
缸内展开剂气液两相达到动态平衡, 该过程亦称, 饱
和, 。 为此可在展开缸内加入适量展开剂, 密闭, 保
持 15~30分钟 。 预平衡后, 迅速将薄层板放入展开缸
中, 立即密闭, 展开 。 若薄层板需同时预平衡, 可将
点样后的薄层板放入双槽展开缸的一侧槽中, 另一侧
槽中加入展开剂, 如上法预平衡后, 再将展开剂移入
放有薄层板的槽中, 展开 。 展开剂要求 新鲜配制, 不
要多次反复使用 。 展开剂配制后若分层, 则应按要求
放臵分层后取需要的一相 （ 上层或下层 ） 使用 。
（ 四 ） 显色与检视
1.颜色较深 的成分可直接在日光下检视其斑点 。
2.无色或浅色 的成分多用喷雾法或浸渍法以适宜的 显色剂 显
色, 或再加热使之显色, 在日光下检视 。
3.有 荧光的物质 或遇某些试剂可激发荧光的物质可在紫外灯
（ 365nm） 下观察荧光色谱 。
4.有的成分可用试剂的 蒸气熏蒸 （如碘蒸气、氨蒸气）显色
。
5.某些无色有紫外吸收且不产生荧光的成分可用 荧光淬灭法
显色 。 即在含有荧光剂的硅胶板 （ 如硅胶 GF254板 ）, 在紫外
光灯 （ 254nm） 下观察板面上该成分形成的荧光淬灭色谱 。
GF254薄层板
GF254薄层板在荧光灯下
荧光淬灭法的 GF254薄层板
六、记录
薄层色谱图象可采用摄像设
备拍照，以光学照片或电子
图象的形式保存。也可以用
扫描仪记录相应的色谱图。
薄层色谱数码
相机成像系统
七、结果判断
供试品色谱中，在与对照品、对照药材或对
照提取物色谱的相应的位臵上，显相同颜色或
荧光的斑点，则判断为符合规定。
八, 应用实例
（一）六味地黄丸中牡丹皮的鉴别
1.丹皮酚； 2~5.六味地黄丸
1~12.一捻金； 13.人参二醇 +人参三醇
（二）一捻金中人参的鉴别
（ 三 ） 龟龄集中人参的鉴别
1~4.龟龄集； 5.人参对照药材；
6.人参皂苷 Rb1(S1),Re(S2),Rg1(S3)
（四）万氏牛黄清心丸中黄连的鉴别
1~5.万氏牛黄清心丸；
6.黄连对照药材； 7.小檗碱
（五）华佗再造丸薄层色谱图
（喷显色剂前的） （喷显色剂后的）
1.12.吴茱萸对照药材； 2.11.川芎对照药材； 3～ 10.华佗再造丸
第五节 紫外 -可见光谱鉴别法
(Ultraviolet and Visible Spectroscopy)
一、原理
某些中药或中成药经适当处理后，所得 紫外吸收光谱是由其
各组分的特征吸收叠加而成的。 若将中药制剂作为一个特定的
整体，在一定测试条件下，只要各药味及其成分的组成与含量
相对稳定，则其紫外吸收光谱具有一定的特征性和重现性，可
以用于定性鉴别。
两组分的加和紫外吸收光谱
二, 特点
分光光度鉴别法简便, 灵敏, 易普及 。
但由于紫外光谱分辨率较低, 图谱简单, 某些不同的样品
可能给出极其相似的光谱图, 使其在实际工作中受到一定的
限制 。 如果对样品进行前处理, 除去干扰成分, 则可有效地
提高该法的专属性 。
中国药典仅有少数中成药品种收
载了分光光度鉴别法，例如，木
香槟榔丸等。
中国药典规定以 最大吸收波长
（ λmax ）做为鉴别参数。样
品吸收峰波长应在该品种项下
规定的波长 ± 2nm以内。
复方丹参片紫外谱线组图
三、操作方法（ P77 自学）
四、注意事项（ P77 自学）
五, 结果判断
将供试品最大吸收波长和药品标准的规定进行
比较, 二者如果一致, 则判定为符合规定 。
六, 应用实例
木香槟榔丸
处方：木香, 槟榔, 枳壳, 陈皮, 青皮 （ 醋炒 ）,
香附 （ 醋制 ）, 三棱 （ 醋制 ）, 莪术 （ 醋制 ）
取本品粉末 4g,臵蒸馏瓶中, 加水 10ml,使供试品
湿润后, 水蒸汽蒸馏, 收集馏液约 100ml,照紫外分
光光度法 （ 中国药典附录 V A） 测定, 在 253nm波长
处有最大吸收 。 （ 检出挥发性成分 ）
第六节 气相色谱鉴别法
(Gas Chromatography GC)
一、原理
在一定的色谱条件下,相同的物质应具有相同的色谱特性
（分配系数）和色谱行为（保留值） 。因此，在同一色谱条
件下，将供试品溶液和对照品溶液分别注入气相色谱仪，对
二者的气相色谱图进行比对，根据供试品是否给出与对照品
保留时间相同的色谱峰，从而对样品作出定性分析。这种方
法可称为 保留时间比较法,中国药典即采用此法对某些中成
药进行真伪鉴别。保留时间（ tR）系指从进样开始，到该组
分色谱峰顶点的时间间隔。
色谱峰示意图
二, 特点
气相色谱法具有高分辨率, 高灵敏度, 快速,
准确等特点, 尤其适合分析制剂中的挥发性成分,
如麝香酮, 薄荷醇, 冰片, 水杨酸甲酯等 。 一般情
况下气相色谱不适合分析蒸汽压较低的也即挥发性
较小的成分, 因此该法在实际工作中具有一定的局
限性 。
三, 操作方法 （ 自学 ）
四, 注意事项 （ 自学 ）
气 相 色 谱 仪
五、结果判断
比较供试品与对照品色谱图，供试品呈现与对照品
保留时间相同的色谱带，则判断为符合药品标准规定。
所谓保留时间相同是指基本相同，彼此相差百分之几
秒是允许的。
六、应用实例
（一）少林风湿跌打膏
（二）安宫牛黄丸中麝香的鉴别
----麝香酮
—安宫牛黄丸
第七节 高效液相色谱鉴别法
（ High Performance Liquid Chromatography HPLC)
一, 原理
高效液相色谱法鉴别在原理和操作上与气相色谱鉴别法有许
多相似之处 。 中国药典采用 保留时间比较法, 即在相同的色谱
条件下, 比较样品和对照品的色谱峰的保留时间 （ tR） 是否一
致, 从而对被检成分 （ 药味 ） 的存在情况做出判断 。 例如, 六
味地黄丸中芍药苷和四君子丸中甘草酸的鉴别 。
六味地黄丸中芍药苷的高效液相色谱图 (a.芍药苷 )
A.芍药苷对 照品 B.六味地黄丸供试品标准品
二、特点
高效液相色谱法 不受样品挥发性的限制，固定相、流动相
的选择范围较宽，检测手段多样，加之高效快速，微量，自
动化程度高等特点,所以在药物分析工作中比气相色谱法应
用更为广泛，在中药制剂鉴别中的应用也日益增多。不过，
目前在中药制剂质量标准中，一般很少单独使用该法做鉴别，
而是多与含量测定结合进行。
三, 操作方法
四, 注意事项
五, 应用实例
（ 一 ） 龙牡壮骨颗粒中维生素 D2鉴别 （ P82）
（ 二 ） 百令胶囊的鉴别 （ 05版新增内容 ）
本品系由发酵虫草菌粉（ CS-C-Q80）制成。采用高
效液相色谱法鉴别其中的核苷类成分。
核苷类成分的鉴别：
样品先用乙醚脱脂，再用 0.5﹪ 磷酸溶液超声波提取制成核
苷供试液。用反相高效液相色谱法测定，以乙腈为流动相 A，
以 0.04mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相 B,梯度洗脱,供试品色
谱应呈现与对照药材色谱保留时间相同的六个主色谱峰，与腺
苷、尿苷对照品保留时间相同的色谱峰。
时间 （ 分钟 ） 流动相 A（ ﹪ ） 流动相 B（ ﹪ ）
0~15 0 100
15~45 0→ 15 100→ 85
