弧 菌 科
检验医学与公共卫生学院 李 超
Vibrionaseae
弧菌科共同生物学特性：
氧化酶阳性
端极鞭毛
动力阳性
弧菌科
弧菌属
气单胞菌属
邻单胞菌属
发光杆菌属
O1群霍乱弧菌
非 O1群霍乱弧菌
副溶血弧菌
拟态弧菌
···
···
分类
弧菌属的共同生物学特性,
氧化酶阳性（麦氏弧菌除外）
发酵葡萄糖
对 O/129敏感
钠离子能刺激其生长
部分菌株嗜盐
弧菌属的致病性：
肠道内感染（胃肠炎）
肠道外感染（伤口感染、中
耳炎、败血症等）
霍 乱 弧 菌
Vibrio cholerae O1 and non-O1
霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的
病原菌，为我国法定传染病（甲类），
俗称 2号病。（ 1号病为鼠疫）
霍乱的流行史
1917-1923 共 6次 印度恒河三角洲 古典生物型
1961 第 7次 印度尼西亚 Eltor
1992.10 马德拉斯、孟加拉湾 O139
O139群霍乱弧菌在亚洲的流行 (1991.1-1994.11)
霍乱的流行史
霍乱弧菌的运动模式图
生物学性状 (米泔水样便 )
描述：
穿梭或
流星样
动力
霍乱弧菌的革兰染色结果
生物学性状 (纯培养革兰染色 )
描述：
革兰阴性，
弯曲弧形
或逗点状，
首尾相接
鱼群样平
行排列
霍乱弧菌的扫描电镜图 （金属镀膜）
生物学性状 (纯培养扫描电镜 )
描述：
弯曲弧
形或逗
点状
霍乱患者小肠粘膜上皮
局部平切电镜图
霍乱弧菌扫描电镜图
（金属镀膜）
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的糖原颗粒 （ *）超薄切片,× 105 000
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的质周体 （ ↑ ） 冰冻蚀刻，负染，× 68 000
生物学性状 (电镜 )
T株霍乱弧菌的增生膜，从一端向外卷成多层泡 （ *）
超薄切片,× 140 000
生物学性状 (电镜 )
T株霍乱弧菌增生的多层外膜泡 （ *）
超薄切片,× 193 000
生物学性状 (电镜 )
T株霍乱弧菌局部外膜上的许多增生层 （ ↑ ）
超薄切片,× 160 000
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的鞭毛 （ ↑ ） 和它可溶解的鞘膜 （ ↑↑ ）
负染,× 3 100
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的鞭毛染色
生物学性状 (特殊染色× 10,000)
生物学性状 (培养特性 )
兼性厌氧
pH7.6～ 8.2 Max:9.2 (耐碱怕酸 )
初次分离用 pH8.5碱性蛋白胨水
经 6～ 9小时液体表面大量繁殖，形成菌膜
选择性培养基：
TCBS（ 硫代硫酸盐 -枸橼酸盐 -胆盐 -蔗糖琼脂平板 ）
含亚碲酸钾的培养基,糖双洗琼脂 庆大霉素琼脂
Eltor生物型在血平板上可形成 β -溶血
生物学性状 (培养特性 )
霍乱弧菌在 TCBS琼脂平板上形成
发酵蔗糖的较大的黄色菌落
生物学性状 (培养特性 )
霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还
原成原子态的碲，形成有灰褐色中心的菌落
生物学性状 (重要的生化反应 )
霍乱弧菌
副溶血弧菌
拟态弧菌 ·
···
··
麦氏弧菌
氧化酶 硝酸盐还原
＋ ＋
＋ ＋
＋ ＋
－ －
生物学性状 (重要的生化反应 )
霍乱弧菌
拟态弧菌
副溶血弧菌
耐盐试验 (%NaCl)
0% 1% 7% 10%
＋ ＋ － －
＋ ＋ － －
－ ＋ ＋ －
生物学性状 (生物型：根据生化反应分型 )
c h a r a c t e r
Classical
biotype
E1-tor
biotype
溶血 （羊 RBC ） ＋ d
血凝 （鸡 RBC ） － ＋
V-P 试验 － ＋
多粘菌素 B 敏感试验 ＋ －
第 IV 组噬菌体裂解试验 ＋ －
第 V 组噬菌体裂解试验 － ＋
生物学性状 (血清型：根据抗原分型 )
是否与 O1 抗血清凝集 O1 群 非 O1 群
稻叶型
( I n aba )
小川型
( O ga w a)
彦岛型
( Hik o jim a )
根据 O 抗原组成不同
AC AB ABC
生物学性状 (变异性 )
H-O变异,培养稍久弧形可变成直杆状，也可发生鞭毛丢失
S-R变异,光滑型 -粗糙型菌落变异，或产生 L型变异
溶血性 变异, Eltor biotype传代 培养后可由非溶血株变成
溶血株，也可由溶血株变成非溶血株
毒力变异,当菌落发生 S-R变异时，常伴有毒力的减弱或消失
生物学性状 (抵抗力 )
河水中,20天 蔬菜水果上,1周 冰内,4天
耐碱怕酸,胃酸中存活 4分钟 pH8.2～ 9.2仍能生长
对庆大霉素耐药,用于制作选择性培养基
多粘菌素 B(50u/ml),Eltro biotype对耐药，
Classic biotype敏感，可作为分型依据
对热、干燥、日光和常用消毒剂敏感,
100℃1 ～ 2min即可杀死
临床意义 (致病因素 )
进入小肠，动力、菌毛、分泌粘液
穿过小肠粘膜表面粘液层
粘附于小肠粘膜上皮细胞刷
状缘的微绒毛上大量繁殖
侵袭力
霍乱弧菌肠毒素（ CE,chloera enterotoxin）
A1:活性亚单位 23000
A2:连接亚单位 5000
B,结合亚单位
MW,80000-90000
临床意义 (致病因素 ) 霍乱肠毒素
霍乱弧菌肠毒素
临床意义 (致病因素 ) 霍乱肠毒素
发病
临床意义
发病
临床意义
发病
临床意义
发病
临床意义
发病
临床意义
演示
发病
临床意义
霍乱弧菌的致病过程
发病
临床意义
霍乱弧菌的致病 (12000ml in 2-3 days) 12000-30000ml1/h*24h或
1/h*72h*3
临床表现
临床意义
剧烈上
吐下泻，严
重脱水、酸
中毒、痉挛、
尿闭、休克、
死亡。
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
演示
发病机理
临床意义
霍乱弧菌在小肠粘膜部位的致病机理
发病机理
临床意义
临床分期
临床意义
1、前驱期：
无明显前驱症状，或轻度腹
鸣、腹胀和不适。
临床分期
临床意义
2、吐泻期：
持续 2～ 3天，因剧烈吐泻造
成大量水分和电解质丧失。
临床分期
临床 意义
3、脱水虚脱期：
脱水貌，洗衣工手；
循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰；
水电解质平衡紊乱导致肌肉痉挛。
4、恢复期：
各种症状趋于缓解，但可出现发热
标
本
的
采
集
微生物学检验
患者的米泔水样便、呕吐物、尸检肠内容物
或携带有病原菌的海产品和污染的水源等
检验方法
（ 1）直接镜硷：取标本涂片 2张，乙醇或甲醇
固定，革兰染色，油镜观察。
（ 2）动力和制动试验：水佯便，悬滴（压滴）；
高倍镜、暗视野观察动力：穿梭似流星状。同
法制备另一标本，加入 1滴不含防腐剂的霍乱多
价诊断血清（效价 >1:64）；可见运动活泼的细
菌运动停止并发生凝集，为制动试验阳性。
（ 3）分离培养：常用 TCBS琼脂，菌落形态和蔗
糖发酵菌落，进一步鉴定。
微生物学检验
检验方法
l） 初步鉴定：与 01群和 O139群抗血清 (多价和
单价 ） 凝集, 菌落和菌体形态, 氧化酶试验等
作出初步报告 。
2）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血
清学分群及分型。
微生物学检验
检验方法
① 初筛试验,
(1)霍乱红试验
(2)O/129敏感试验
② 鉴别试验：
a.多粘菌素 B敏感试验
b,鸡红细胞凝集试验
c.第 IV组霍乱弧菌噬菌体裂解试验
微生物学检验
副溶血弧菌
副溶血弧菌培养于 TCBS中，显示绿色（蔗糖不发酵）菌落。
（ TCBS琼脂,18小时,37℃ ）
检验医学与公共卫生学院 李 超
Vibrionaseae
弧菌科共同生物学特性：
氧化酶阳性
端极鞭毛
动力阳性
弧菌科
弧菌属
气单胞菌属
邻单胞菌属
发光杆菌属
O1群霍乱弧菌
非 O1群霍乱弧菌
副溶血弧菌
拟态弧菌
···
···
分类
弧菌属的共同生物学特性,
氧化酶阳性（麦氏弧菌除外）
发酵葡萄糖
对 O/129敏感
钠离子能刺激其生长
部分菌株嗜盐
弧菌属的致病性：
肠道内感染（胃肠炎）
肠道外感染（伤口感染、中
耳炎、败血症等）
霍 乱 弧 菌
Vibrio cholerae O1 and non-O1
霍乱弧菌是烈性肠道传染病霍乱的
病原菌，为我国法定传染病（甲类），
俗称 2号病。（ 1号病为鼠疫）
霍乱的流行史
1917-1923 共 6次 印度恒河三角洲 古典生物型
1961 第 7次 印度尼西亚 Eltor
1992.10 马德拉斯、孟加拉湾 O139
O139群霍乱弧菌在亚洲的流行 (1991.1-1994.11)
霍乱的流行史
霍乱弧菌的运动模式图
生物学性状 (米泔水样便 )
描述：
穿梭或
流星样
动力
霍乱弧菌的革兰染色结果
生物学性状 (纯培养革兰染色 )
描述：
革兰阴性，
弯曲弧形
或逗点状，
首尾相接
鱼群样平
行排列
霍乱弧菌的扫描电镜图 （金属镀膜）
生物学性状 (纯培养扫描电镜 )
描述：
弯曲弧
形或逗
点状
霍乱患者小肠粘膜上皮
局部平切电镜图
霍乱弧菌扫描电镜图
（金属镀膜）
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的糖原颗粒 （ *）超薄切片,× 105 000
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的质周体 （ ↑ ） 冰冻蚀刻，负染，× 68 000
生物学性状 (电镜 )
T株霍乱弧菌的增生膜，从一端向外卷成多层泡 （ *）
超薄切片,× 140 000
生物学性状 (电镜 )
T株霍乱弧菌增生的多层外膜泡 （ *）
超薄切片,× 193 000
生物学性状 (电镜 )
T株霍乱弧菌局部外膜上的许多增生层 （ ↑ ）
超薄切片,× 160 000
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的鞭毛 （ ↑ ） 和它可溶解的鞘膜 （ ↑↑ ）
负染,× 3 100
生物学性状 (电镜 )
霍乱弧菌的鞭毛染色
生物学性状 (特殊染色× 10,000)
生物学性状 (培养特性 )
兼性厌氧
pH7.6～ 8.2 Max:9.2 (耐碱怕酸 )
初次分离用 pH8.5碱性蛋白胨水
经 6～ 9小时液体表面大量繁殖，形成菌膜
选择性培养基：
TCBS（ 硫代硫酸盐 -枸橼酸盐 -胆盐 -蔗糖琼脂平板 ）
含亚碲酸钾的培养基,糖双洗琼脂 庆大霉素琼脂
Eltor生物型在血平板上可形成 β -溶血
生物学性状 (培养特性 )
霍乱弧菌在 TCBS琼脂平板上形成
发酵蔗糖的较大的黄色菌落
生物学性状 (培养特性 )
霍乱弧菌在含亚碲酸钾的琼脂平板上将碲离子还
原成原子态的碲，形成有灰褐色中心的菌落
生物学性状 (重要的生化反应 )
霍乱弧菌
副溶血弧菌
拟态弧菌 ·
···
··
麦氏弧菌
氧化酶 硝酸盐还原
＋ ＋
＋ ＋
＋ ＋
－ －
生物学性状 (重要的生化反应 )
霍乱弧菌
拟态弧菌
副溶血弧菌
耐盐试验 (%NaCl)
0% 1% 7% 10%
＋ ＋ － －
＋ ＋ － －
－ ＋ ＋ －
生物学性状 (生物型：根据生化反应分型 )
c h a r a c t e r
Classical
biotype
E1-tor
biotype
溶血 （羊 RBC ） ＋ d
血凝 （鸡 RBC ） － ＋
V-P 试验 － ＋
多粘菌素 B 敏感试验 ＋ －
第 IV 组噬菌体裂解试验 ＋ －
第 V 组噬菌体裂解试验 － ＋
生物学性状 (血清型：根据抗原分型 )
是否与 O1 抗血清凝集 O1 群 非 O1 群
稻叶型
( I n aba )
小川型
( O ga w a)
彦岛型
( Hik o jim a )
根据 O 抗原组成不同
AC AB ABC
生物学性状 (变异性 )
H-O变异,培养稍久弧形可变成直杆状，也可发生鞭毛丢失
S-R变异,光滑型 -粗糙型菌落变异，或产生 L型变异
溶血性 变异, Eltor biotype传代 培养后可由非溶血株变成
溶血株，也可由溶血株变成非溶血株
毒力变异,当菌落发生 S-R变异时，常伴有毒力的减弱或消失
生物学性状 (抵抗力 )
河水中,20天 蔬菜水果上,1周 冰内,4天
耐碱怕酸,胃酸中存活 4分钟 pH8.2～ 9.2仍能生长
对庆大霉素耐药,用于制作选择性培养基
多粘菌素 B(50u/ml),Eltro biotype对耐药，
Classic biotype敏感，可作为分型依据
对热、干燥、日光和常用消毒剂敏感,
100℃1 ～ 2min即可杀死
临床意义 (致病因素 )
进入小肠，动力、菌毛、分泌粘液
穿过小肠粘膜表面粘液层
粘附于小肠粘膜上皮细胞刷
状缘的微绒毛上大量繁殖
侵袭力
霍乱弧菌肠毒素（ CE,chloera enterotoxin）
A1:活性亚单位 23000
A2:连接亚单位 5000
B,结合亚单位
MW,80000-90000
临床意义 (致病因素 ) 霍乱肠毒素
霍乱弧菌肠毒素
临床意义 (致病因素 ) 霍乱肠毒素
发病
临床意义
发病
临床意义
发病
临床意义
发病
临床意义
发病
临床意义
演示
发病
临床意义
霍乱弧菌的致病过程
发病
临床意义
霍乱弧菌的致病 (12000ml in 2-3 days) 12000-30000ml1/h*24h或
1/h*72h*3
临床表现
临床意义
剧烈上
吐下泻，严
重脱水、酸
中毒、痉挛、
尿闭、休克、
死亡。
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
发病机理
临床意义
演示
发病机理
临床意义
霍乱弧菌在小肠粘膜部位的致病机理
发病机理
临床意义
临床分期
临床意义
1、前驱期：
无明显前驱症状，或轻度腹
鸣、腹胀和不适。
临床分期
临床意义
2、吐泻期：
持续 2～ 3天，因剧烈吐泻造
成大量水分和电解质丧失。
临床分期
临床 意义
3、脱水虚脱期：
脱水貌，洗衣工手；
循环衰竭、代谢中毒、急性肾衰；
水电解质平衡紊乱导致肌肉痉挛。
4、恢复期：
各种症状趋于缓解，但可出现发热
标
本
的
采
集
微生物学检验
患者的米泔水样便、呕吐物、尸检肠内容物
或携带有病原菌的海产品和污染的水源等
检验方法
（ 1）直接镜硷：取标本涂片 2张，乙醇或甲醇
固定，革兰染色，油镜观察。
（ 2）动力和制动试验：水佯便，悬滴（压滴）；
高倍镜、暗视野观察动力：穿梭似流星状。同
法制备另一标本，加入 1滴不含防腐剂的霍乱多
价诊断血清（效价 >1:64）；可见运动活泼的细
菌运动停止并发生凝集，为制动试验阳性。
（ 3）分离培养：常用 TCBS琼脂，菌落形态和蔗
糖发酵菌落，进一步鉴定。
微生物学检验
检验方法
l） 初步鉴定：与 01群和 O139群抗血清 (多价和
单价 ） 凝集, 菌落和菌体形态, 氧化酶试验等
作出初步报告 。
2）最后鉴定：根据纯培养后全面生化反应、血
清学分群及分型。
微生物学检验
检验方法
① 初筛试验,
(1)霍乱红试验
(2)O/129敏感试验
② 鉴别试验：
a.多粘菌素 B敏感试验
b,鸡红细胞凝集试验
c.第 IV组霍乱弧菌噬菌体裂解试验
微生物学检验
副溶血弧菌
副溶血弧菌培养于 TCBS中，显示绿色（蔗糖不发酵）菌落。
（ TCBS琼脂,18小时,37℃ ）
