真菌学概论
P226适用教材《医学微生物学》第五版
陆德源主编 人卫 2002年 8月
第 21章 真菌学概述
病毒界
原核生物界
原生生物界
真菌界
植物界
动物界
自然生物分类 (6界 ) 接合菌门担子菌门
子囊菌门
壶菌门
(原半知菌亚门归入前 3门中 )
分类,界、门、纲、目、科、属、种
真菌 (fungus)
? 真菌 是一种真核细胞形微生物。有典型和完
善的细胞器。不含叶绿素、无根、茎、叶的分
化。
? 广泛分布、种类繁多,多数无害、少数有益
(食用蕈、生产抗菌素、酿酒)
? 致病真菌:致病、条件致病、产毒、致癌等
? 感染率上升原因:菌群失调(滥用抗菌素)、
免疫低下(激素、抗癌药物)
第一节 真菌的生物学性状
? 真菌分单细胞和多细胞两类:
?单细胞真菌 呈圆形或椭圆形,称为酵母菌
( yeast) 或类酵母菌(如隐球菌、念珠
菌)。
?多细胞真菌 由菌丝和孢子组成,菌丝分枝
交织成团形成菌丝体,称丝状菌 ( filarmentous
fungus), 并长有各种孢子,这类真菌即一
般称为霉菌 ( Mold) 。
二相性真菌 ( dimorphic)
? 有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现
两种形态,称二相性真菌。
?即在机体内或含动物蛋白的培养中 37℃ 孵
育,呈现酵母型菌落,而在沙保氏培养基
上室温或 25℃ 孵育,则形成丝状菌落。
(如球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。)
一、真菌的形态与结构
一、真菌的形态与结构
? 真菌比细菌大几倍至几十倍。
? 细胞结构比细菌复杂,细胞壁缺乏肽聚糖,其坚韧性主
要依赖于多聚 N-乙酰基葡萄糖构成的甲壳质 (Chitin)
( 75%) 和蛋白质( 25%)。
? 由于不含肽聚糖,真菌不受青霉素或头孢菌素的作
用。
? 真菌的细胞膜 与细菌的细胞膜区别在于前者 有固醇
(sterol)而后者无。
? 细胞内有较为典型的核结构和细胞器。
一、真菌的形态与结构
A.单细胞真菌
? 单细胞真菌 呈圆形或卵圆形,常见于酵母和类
酵母菌,对人类有致病的主要有:新生隐球菌
的白假丝酵母菌。
? 这类真菌 以出芽方式繁殖,
芽生孢子脱落后形成新的
独立个体。
一、真菌的形态与结构
? 多细胞真菌能长出菌丝,菌丝延伸分
枝,并可以长出孢子。
? 菌丝和孢子的形
态 不同,常作为
鉴别多细胞真菌
的重要标志 。
B.多细胞真菌
一、真菌的形态与结构
1、菌丝 ( hypha)
? 真菌的孢子以出芽方式繁殖,在适宜的环境下
由孢子长出芽管,芽管延长呈丝状,称菌丝。
? 菌丝又可长出许多分枝,交织成团称为菌丝体。
?按功能分
? 营养菌丝
? 气生菌丝
? 生殖菌丝
一、真菌的形态与结构
1、菌丝
? 按物理性 状分
?有隔菌 丝
?无隔菌 丝
? 按形态分
?螺旋状
?球拍状
?结节状
?鹿角状
?梳状
? 孢子系真菌的繁殖结构,按形成方式
分为有性孢子和无性孢子两种
?有性孢子
?无性孢子
? 真菌孢子与细菌芽胞的区别 (P227/P24)
2、孢子 ( spore)
一、真菌的形态与结构
? 由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成,
也可在菌丝侧面出芽形成。
?按形态分:
?大分生孢子
?小分生孢子
无性孢子 (1)分生孢子
一、真菌的形态与结构
图示:石膏样小孢子菌的梭状大分生孢子
? 由菌丝内细胞直接形成
? 芽生孢子,菌丝体细胞出芽生成(假菌丝)
? 厚膜孢子:菌丝体内胞浆浓缩,胞壁增厚,环境
不利形成。环境转好,厚膜孢子又可以出芽生殖。
? 关节孢子:陈旧的培养物中,菌丝细胞变厚,形
成长方形的节段,呈链状排列。
无性孢子 (2)叶状孢子
一、真菌的形态与结构
芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子
? 菌丝的末端膨大成孢子囊,内含许多小孢子,
孢子成熟则破囊而出。多见于毛霉、根霉等。
无性孢子 (3)孢子囊孢子
一、真菌的形态与结构
二、培养特性
? 沙保弱培养基,
? 皮肤癣菌生长较慢,1-4周,腐生性真菌生长较快,
<24小时。
? 成分,1%蛋白胨 4%葡萄糖 2%琼脂 pH5.5
? 抑菌剂:放线菌酮和氯霉素
? 前者抑制污染真菌,后都抑制普通细菌
? 但放线菌酮可以抑制部分致病性真菌如白假丝酵母
菌、组织孢浆菌、新生隐球菌等的生长,故初次分
离上述真菌,需使用不加放线菌酮的培养基。
二、培养特性
1、酵母型菌落
? 酵母型菌落,为单细胞真菌的菌落形态,菌落光滑
湿润,柔软而致密。与一般细菌菌落相似,如新生
隐球菌。
? 酵母样菌落(类酵母菌落),部分单细胞真菌在出
芽繁殖后,芽管延长不与母细胞脱落,形成假菌丝。
假菌丝由菌落向下生长,伸入培养基中,这样的菌
落称酵母样菌落,如白假丝酵母菌。
二、培养特性
酵母型菌落、酵母样菌落
? 是多细胞真菌的菌落形式,由许多疏松的菌
丝体构成。菌落呈棉絮状、绒毛状或粉末状,
菌落正背两面呈不同颜色。
? 其形态、结构、颜色常作为鉴定真菌的参考。
? 丝状真菌有形成圆形菌落的倾向,所以临床
癣类疾病常表现为环形或多环形。
? 小培养
2、丝状菌落
二、培养特性
棉絮状菌落、环癣、小培养
三、抵抗力
? 真菌对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有
较强的抵抗力。
? 对常用的抗细菌感染的抗生素均不敏感。对
部分消毒剂敏感。
? 灰黄霉素、制霉菌素、二性霉素、克霉唑、
酮康唑、咪康唑、伊曲康唑,5-氟胞嘧啶等
对多种真菌有良好的抑菌作用。
三、抵抗力
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 致病条件
? 1、毒力:具有内毒素样活性的胞壁糖蛋白,烟曲
霉、黄曲霉致组织出血坏死。
? 2、粘附力:白假细酵母菌,芽管形成,粘附力增
强
? 3、抗吞噬作用:新生隐球菌 荚膜可有效抵抗吞噬
细胞的吞噬作用。
? 4、改变宿主细胞功能:烟曲 霉和白假细酵母菌的
热休克蛋白 HSP90可与宿主细 胞和血清蛋白结合使
之功能改变。
致病形 式
? 1、致病性真菌感染:多见于外源性真菌感染。浅部
真菌病如皮癣。
? 2、条件致病性真菌感染:多见于内源性真菌感染。
深部真菌病如肺假丝酵母菌病。多见于机体抵抗力
下降患者。
? 3、真菌超敏反应性疾病:食入或吸入某此真菌的孢
子或菌丝体时引发的各种超敏反应。如荨麻疹、变
应性皮炎、哮喘等。
第二节 真菌的致病性与免疫性
皮癣、肺真菌病、荨麻疹
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 4、真菌性中毒症:摄入真菌或其产生的毒素
后引起急、慢性中毒。可引起肝肾功能损伤,
或造血系统抑制,或神经系统功能紊乱。
? 5、真菌毒素与肿瘤的关系:黄曲霉
双呋喃氧杂萘邻酮的衍化物,毒性强,与
致癌有密切关系
致病形式
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 1、固有免疫:主要指机体粘膜的天然屏障作
用,如果屏障机制不完善或被破坏,则易引
发真菌感染。
? 如插管、破损、创伤
? 免疫力低下
? 菌群失调
? 儿童皮脂腺分泌不饱和和不饱和脂肪酸的水平较低,易
患头癣;成人手足汗较多,且掌跖部缺乏皮指腺,故易
患手癣。
免疫性
第二节 真菌的致病性与免疫性
头癣和手癣
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 2、获得性免疫:因真菌细胞壁厚,所以感染
后形成的抗体滴度较低,且很难发挥中和抗
体的杀菌作用。但特异性抗体可阻止真菌转
为菌丝体从而提高吞噬率,并抑制真菌粘附
于体表。
? 主要是靠细胞免疫:抗原刺激 → 特异性淋巴细胞
增殖 → 释放 IFN-γ, IL-2 → 激活巨噬细胞,NK细
胞,CTL细胞 → 杀伤真菌
? 播散性真菌病多见于 T细胞功能抑制。
免疫性
第二节 真菌的致病性与免疫性
第三节 真菌的微生物学检验法 (P231)
? 各种真菌的形态和结构有一定的特殊性,
一般可用
直接镜检
分离培养
两种方法进行鉴定
一、标本采集
? 浅部真菌,75%乙醇棉球擦拭局部后取皮屑、
毛发、指(趾)甲屑等
? 深部真菌:根据病情取痰、血液、脑脊液等
第三节 真菌的微生物学检验法
方法:
二、直接镜检和意义
10%KOH
皮肤癣菌:湿片,不染色;
假丝酵母菌:革兰染色;
隐球菌:墨汁染色
第三节 真菌的微生物学检验法
? 意义:
1、直接阳性有诊断意义,但阴性并不能排除感染
2、组织中的分隔分枝菌丝为曲霉;粗大不分隔或不分枝
菌丝多为毛霉;假丝酵母菌有假菌丝表示有活动性
3、皮肤癣菌菌丝肥大、粗长,提示活动状态
4、酵母型和二相真菌在组织内常呈现为孢子
二、直接镜检和意义
第三节 真菌的微生物学检验法
刷子培养物的制备、头皮刷子样品的培
养物,显示从刷子上每一点产生的菌落
受皮肤癣菌感染皮肤的 KOH标本。菌丝
的宽度是规则的,具有分隔并可有分枝
第三节 真菌的微生物学检验法
由犬小孢子菌引起的小孢子
发外型和发内型感染的头发
第三节 真菌的微生物学检验法
被石膏样毛癣菌穿孔的毛发
在 30%KOH中显示菌丝
和酵母细胞的皮肤
第三节 真菌的微生物学检验法
短帚霉引起的甲感染和
帚霉感染的典型厚壁分生孢子的甲的 KOH涂片
第三节 真菌的微生物学检验法
多个出芽的 酵母革兰染色和新生隐球菌墨汁染色
第三节 真菌的微生物学检验法
三、分离培养
? 皮肤、毛发、甲屑等标本经 70%乙醇或 2%石炭
酸浸泡 2-3min杀死杂菌,再用无菌生理盐水洗
净后接种于沙保弱培养基中。
? 阴道、口腔粘膜标本接种于血平板上。
? 血液标本先增菌,脑脊液取沉淀物接种于血平
板上。
? 疑为假丝酵母菌,需先做芽管生成试验。
第三节 真菌的微生物学检验法
? 大部分真菌基本都是通过孢子传播,因
此阻断孢子的传播途径,破坏孢子的萌
发环境犹为重要。
? 表皮破损、潮湿温暖环境、直接或间接
接触。
? (黄曲霉的毒素作用)
第四节 真菌感染的预防 (P232)
真菌感染的治疗
? 局部用药(表浅局部感染)
? 全身用药(深部或全身感染)
?皮肤科用药,5%硫磺软膏、咪康唑软膏、克霉唑
软膏,0.5%碘伏
?口服抗真菌药:二性霉素、制霉菌素、咪康唑、
酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等
(灰黄霉素对小鼠有致癌作用,需慎用。)
? 本学期我上课内容 (所有 powerpoint讲义 )均已上传至
下列网址,大家可以自由下载学习 (5月 20日后至考试
结束 )
? http://huadiwancomtypeb.51.net/wsw.htm
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要用于除学习之外的用途。
? 谢谢同学们的合作!!
? 李超 2004.5.20
P226适用教材《医学微生物学》第五版
陆德源主编 人卫 2002年 8月
第 21章 真菌学概述
病毒界
原核生物界
原生生物界
真菌界
植物界
动物界
自然生物分类 (6界 ) 接合菌门担子菌门
子囊菌门
壶菌门
(原半知菌亚门归入前 3门中 )
分类,界、门、纲、目、科、属、种
真菌 (fungus)
? 真菌 是一种真核细胞形微生物。有典型和完
善的细胞器。不含叶绿素、无根、茎、叶的分
化。
? 广泛分布、种类繁多,多数无害、少数有益
(食用蕈、生产抗菌素、酿酒)
? 致病真菌:致病、条件致病、产毒、致癌等
? 感染率上升原因:菌群失调(滥用抗菌素)、
免疫低下(激素、抗癌药物)
第一节 真菌的生物学性状
? 真菌分单细胞和多细胞两类:
?单细胞真菌 呈圆形或椭圆形,称为酵母菌
( yeast) 或类酵母菌(如隐球菌、念珠
菌)。
?多细胞真菌 由菌丝和孢子组成,菌丝分枝
交织成团形成菌丝体,称丝状菌 ( filarmentous
fungus), 并长有各种孢子,这类真菌即一
般称为霉菌 ( Mold) 。
二相性真菌 ( dimorphic)
? 有些真菌在不同寄生环境和培养条件下出现
两种形态,称二相性真菌。
?即在机体内或含动物蛋白的培养中 37℃ 孵
育,呈现酵母型菌落,而在沙保氏培养基
上室温或 25℃ 孵育,则形成丝状菌落。
(如球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、皮炎芽生菌等。)
一、真菌的形态与结构
一、真菌的形态与结构
? 真菌比细菌大几倍至几十倍。
? 细胞结构比细菌复杂,细胞壁缺乏肽聚糖,其坚韧性主
要依赖于多聚 N-乙酰基葡萄糖构成的甲壳质 (Chitin)
( 75%) 和蛋白质( 25%)。
? 由于不含肽聚糖,真菌不受青霉素或头孢菌素的作
用。
? 真菌的细胞膜 与细菌的细胞膜区别在于前者 有固醇
(sterol)而后者无。
? 细胞内有较为典型的核结构和细胞器。
一、真菌的形态与结构
A.单细胞真菌
? 单细胞真菌 呈圆形或卵圆形,常见于酵母和类
酵母菌,对人类有致病的主要有:新生隐球菌
的白假丝酵母菌。
? 这类真菌 以出芽方式繁殖,
芽生孢子脱落后形成新的
独立个体。
一、真菌的形态与结构
? 多细胞真菌能长出菌丝,菌丝延伸分
枝,并可以长出孢子。
? 菌丝和孢子的形
态 不同,常作为
鉴别多细胞真菌
的重要标志 。
B.多细胞真菌
一、真菌的形态与结构
1、菌丝 ( hypha)
? 真菌的孢子以出芽方式繁殖,在适宜的环境下
由孢子长出芽管,芽管延长呈丝状,称菌丝。
? 菌丝又可长出许多分枝,交织成团称为菌丝体。
?按功能分
? 营养菌丝
? 气生菌丝
? 生殖菌丝
一、真菌的形态与结构
1、菌丝
? 按物理性 状分
?有隔菌 丝
?无隔菌 丝
? 按形态分
?螺旋状
?球拍状
?结节状
?鹿角状
?梳状
? 孢子系真菌的繁殖结构,按形成方式
分为有性孢子和无性孢子两种
?有性孢子
?无性孢子
? 真菌孢子与细菌芽胞的区别 (P227/P24)
2、孢子 ( spore)
一、真菌的形态与结构
? 由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成,
也可在菌丝侧面出芽形成。
?按形态分:
?大分生孢子
?小分生孢子
无性孢子 (1)分生孢子
一、真菌的形态与结构
图示:石膏样小孢子菌的梭状大分生孢子
? 由菌丝内细胞直接形成
? 芽生孢子,菌丝体细胞出芽生成(假菌丝)
? 厚膜孢子:菌丝体内胞浆浓缩,胞壁增厚,环境
不利形成。环境转好,厚膜孢子又可以出芽生殖。
? 关节孢子:陈旧的培养物中,菌丝细胞变厚,形
成长方形的节段,呈链状排列。
无性孢子 (2)叶状孢子
一、真菌的形态与结构
芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子
? 菌丝的末端膨大成孢子囊,内含许多小孢子,
孢子成熟则破囊而出。多见于毛霉、根霉等。
无性孢子 (3)孢子囊孢子
一、真菌的形态与结构
二、培养特性
? 沙保弱培养基,
? 皮肤癣菌生长较慢,1-4周,腐生性真菌生长较快,
<24小时。
? 成分,1%蛋白胨 4%葡萄糖 2%琼脂 pH5.5
? 抑菌剂:放线菌酮和氯霉素
? 前者抑制污染真菌,后都抑制普通细菌
? 但放线菌酮可以抑制部分致病性真菌如白假丝酵母
菌、组织孢浆菌、新生隐球菌等的生长,故初次分
离上述真菌,需使用不加放线菌酮的培养基。
二、培养特性
1、酵母型菌落
? 酵母型菌落,为单细胞真菌的菌落形态,菌落光滑
湿润,柔软而致密。与一般细菌菌落相似,如新生
隐球菌。
? 酵母样菌落(类酵母菌落),部分单细胞真菌在出
芽繁殖后,芽管延长不与母细胞脱落,形成假菌丝。
假菌丝由菌落向下生长,伸入培养基中,这样的菌
落称酵母样菌落,如白假丝酵母菌。
二、培养特性
酵母型菌落、酵母样菌落
? 是多细胞真菌的菌落形式,由许多疏松的菌
丝体构成。菌落呈棉絮状、绒毛状或粉末状,
菌落正背两面呈不同颜色。
? 其形态、结构、颜色常作为鉴定真菌的参考。
? 丝状真菌有形成圆形菌落的倾向,所以临床
癣类疾病常表现为环形或多环形。
? 小培养
2、丝状菌落
二、培养特性
棉絮状菌落、环癣、小培养
三、抵抗力
? 真菌对干燥、阳光、紫外线及一般消毒剂有
较强的抵抗力。
? 对常用的抗细菌感染的抗生素均不敏感。对
部分消毒剂敏感。
? 灰黄霉素、制霉菌素、二性霉素、克霉唑、
酮康唑、咪康唑、伊曲康唑,5-氟胞嘧啶等
对多种真菌有良好的抑菌作用。
三、抵抗力
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 致病条件
? 1、毒力:具有内毒素样活性的胞壁糖蛋白,烟曲
霉、黄曲霉致组织出血坏死。
? 2、粘附力:白假细酵母菌,芽管形成,粘附力增
强
? 3、抗吞噬作用:新生隐球菌 荚膜可有效抵抗吞噬
细胞的吞噬作用。
? 4、改变宿主细胞功能:烟曲 霉和白假细酵母菌的
热休克蛋白 HSP90可与宿主细 胞和血清蛋白结合使
之功能改变。
致病形 式
? 1、致病性真菌感染:多见于外源性真菌感染。浅部
真菌病如皮癣。
? 2、条件致病性真菌感染:多见于内源性真菌感染。
深部真菌病如肺假丝酵母菌病。多见于机体抵抗力
下降患者。
? 3、真菌超敏反应性疾病:食入或吸入某此真菌的孢
子或菌丝体时引发的各种超敏反应。如荨麻疹、变
应性皮炎、哮喘等。
第二节 真菌的致病性与免疫性
皮癣、肺真菌病、荨麻疹
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 4、真菌性中毒症:摄入真菌或其产生的毒素
后引起急、慢性中毒。可引起肝肾功能损伤,
或造血系统抑制,或神经系统功能紊乱。
? 5、真菌毒素与肿瘤的关系:黄曲霉
双呋喃氧杂萘邻酮的衍化物,毒性强,与
致癌有密切关系
致病形式
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 1、固有免疫:主要指机体粘膜的天然屏障作
用,如果屏障机制不完善或被破坏,则易引
发真菌感染。
? 如插管、破损、创伤
? 免疫力低下
? 菌群失调
? 儿童皮脂腺分泌不饱和和不饱和脂肪酸的水平较低,易
患头癣;成人手足汗较多,且掌跖部缺乏皮指腺,故易
患手癣。
免疫性
第二节 真菌的致病性与免疫性
头癣和手癣
第二节 真菌的致病性与免疫性
? 2、获得性免疫:因真菌细胞壁厚,所以感染
后形成的抗体滴度较低,且很难发挥中和抗
体的杀菌作用。但特异性抗体可阻止真菌转
为菌丝体从而提高吞噬率,并抑制真菌粘附
于体表。
? 主要是靠细胞免疫:抗原刺激 → 特异性淋巴细胞
增殖 → 释放 IFN-γ, IL-2 → 激活巨噬细胞,NK细
胞,CTL细胞 → 杀伤真菌
? 播散性真菌病多见于 T细胞功能抑制。
免疫性
第二节 真菌的致病性与免疫性
第三节 真菌的微生物学检验法 (P231)
? 各种真菌的形态和结构有一定的特殊性,
一般可用
直接镜检
分离培养
两种方法进行鉴定
一、标本采集
? 浅部真菌,75%乙醇棉球擦拭局部后取皮屑、
毛发、指(趾)甲屑等
? 深部真菌:根据病情取痰、血液、脑脊液等
第三节 真菌的微生物学检验法
方法:
二、直接镜检和意义
10%KOH
皮肤癣菌:湿片,不染色;
假丝酵母菌:革兰染色;
隐球菌:墨汁染色
第三节 真菌的微生物学检验法
? 意义:
1、直接阳性有诊断意义,但阴性并不能排除感染
2、组织中的分隔分枝菌丝为曲霉;粗大不分隔或不分枝
菌丝多为毛霉;假丝酵母菌有假菌丝表示有活动性
3、皮肤癣菌菌丝肥大、粗长,提示活动状态
4、酵母型和二相真菌在组织内常呈现为孢子
二、直接镜检和意义
第三节 真菌的微生物学检验法
刷子培养物的制备、头皮刷子样品的培
养物,显示从刷子上每一点产生的菌落
受皮肤癣菌感染皮肤的 KOH标本。菌丝
的宽度是规则的,具有分隔并可有分枝
第三节 真菌的微生物学检验法
由犬小孢子菌引起的小孢子
发外型和发内型感染的头发
第三节 真菌的微生物学检验法
被石膏样毛癣菌穿孔的毛发
在 30%KOH中显示菌丝
和酵母细胞的皮肤
第三节 真菌的微生物学检验法
短帚霉引起的甲感染和
帚霉感染的典型厚壁分生孢子的甲的 KOH涂片
第三节 真菌的微生物学检验法
多个出芽的 酵母革兰染色和新生隐球菌墨汁染色
第三节 真菌的微生物学检验法
三、分离培养
? 皮肤、毛发、甲屑等标本经 70%乙醇或 2%石炭
酸浸泡 2-3min杀死杂菌,再用无菌生理盐水洗
净后接种于沙保弱培养基中。
? 阴道、口腔粘膜标本接种于血平板上。
? 血液标本先增菌,脑脊液取沉淀物接种于血平
板上。
? 疑为假丝酵母菌,需先做芽管生成试验。
第三节 真菌的微生物学检验法
? 大部分真菌基本都是通过孢子传播,因
此阻断孢子的传播途径,破坏孢子的萌
发环境犹为重要。
? 表皮破损、潮湿温暖环境、直接或间接
接触。
? (黄曲霉的毒素作用)
第四节 真菌感染的预防 (P232)
真菌感染的治疗
? 局部用药(表浅局部感染)
? 全身用药(深部或全身感染)
?皮肤科用药,5%硫磺软膏、咪康唑软膏、克霉唑
软膏,0.5%碘伏
?口服抗真菌药:二性霉素、制霉菌素、咪康唑、
酮康唑、氟康唑、伊曲康唑等
(灰黄霉素对小鼠有致癌作用,需慎用。)
? 本学期我上课内容 (所有 powerpoint讲义 )均已上传至
下列网址,大家可以自由下载学习 (5月 20日后至考试
结束 )
? http://huadiwancomtypeb.51.net/wsw.htm
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? 谢谢同学们的合作!!
? 李超 2004.5.20