第六章 酶 一、填空题 1.全酶由________________和________________组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中________________决定酶的专一性和高效率，________________起传递电子、原子或化学基团的作用。 2.酶是由________________产生的，具有催化能力的________________。 3.酶的活性中心包括________________和________________两个功能部位，其中________________直接与底物结合，决定酶的专一性，________________是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。 4.常用的化学修饰剂DFP可以修饰________________残基，TPCK常用于修饰________________残基。 5.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法)，得到的直线在横轴上的截距为________________，纵轴上的截距为________________。 6.磺胺类药物可以抑制________________酶，从而抑制细菌生长繁殖。 7.谷氨酰胺合成酶的活性可以被________________共价修饰调节；糖原合成酶、糖原磷酸化酶等则可以被________________共价修饰调节。 二、是非题 1.[ ]对于可逆反应而言，酶既可以改变正反应速度，也可以改变逆反应速度。 2.[ ]酶活性中心一般由在一级结构中相邻的若干氨基酸残基组成。 3.[ ]酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。 4.[ ]Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。 5.[ ]当[S]>> Km时，v 趋向于Vmax，此时只有通过增加[E]来增加v。 6.[ ]酶的最适温度与酶的作用时间有关，作用时间长，则最适温度高，作用时间短，则最适温度低。 7.[ ]增加不可逆抑制剂的浓度，可以实现酶活性的完全抑制。 8.[ ]正协同效应使酶促反应速度增加。 9.[ ]竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。 10.[ ]酶反应的最适pH只取决于酶蛋白本身的结构。 三、选择题 1.[ ]利用恒态法推导米氏方程时，引入了除哪个外的三个假设？ A.在反应的初速度阶段，E+P→ES可以忽略 B.假设［S］>>［E］，则［S］-［ES］≈［S］ C.假设E+S→ES反应处于平衡状态 D.反应处于动态平衡时，即ES的生成速度与分解速度相等 2.[ ]用动力学的方法可以区分可逆、不可逆抑制作用，在一反应系统中，加入过量S和一定量的I，然后改变［E］，测v，得v～［E］曲线，则哪一条曲线代表加入了一定量的可逆抑制剂？  A.1 B.2 C.3 D.不可确定 3.[ ]在一反应体系中，［S］过量，加入一定量的I，测v～［E］曲线，改变［I］，得一系列平行曲线，则加入的I是： A.竞争性可逆抑制剂 B.非竞争性可逆抑制剂 C.反竞争性可逆抑制剂 D.不可逆抑制剂 4.[ ]竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列哪种因素无关？ A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D.酶与抑制剂的亲和力的大小 E.酶与底物的亲和力的大小 5.[ ]酶的竞争性可逆抑制剂可以使： A.Vmax减小，Km减小 B.Vmax增加，Km增加 C.Vmax不变，Km增加 D.Vmax不变，Km减小 E.Vmax减小，Km增加 6.[ ]溶菌酶在催化反应时，下列因素中除哪个外，均与酶的高效率有关？ A.底物形变 B.广义酸碱共同催化 C.邻近效应与轨道定向 D.共价催化 7.[ ]丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于： A.反馈抑制 B.底物抑制 C.竞争性可逆抑制 D.非竞争性可逆抑制 E.反竞争性可逆抑制 8.[ ]酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？ A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E.甘氨酸 9.[ ]测定酶活性时，通常以底物浓度变化小于多少时测得的速度为反应的初速度？ A.0.1% B.0.5% C.1% D.2% E.5% 10.[ ]在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？ A.His的咪唑基 B.Lys的ε氨基 C.Arg的胍基 D.Cys的巯基 E.Trp的吲哚基 四、问答与计算 1. 什么是酶？为何说酶的本质示蛋白质？ 2. 酶作为生物催化剂有何特点？ 3. 何谓酶分子的必需基团？其作用如何？常见的必需基团有那些？ 4. 何谓寡聚酶？何谓变构酶？ 5.影响酶促反应的因素有哪些？用曲线表示它们的影响？为什么会产生这些影响？ 6.米氏方程的基本形式是什么？Km的意义及用途如何？ 7. 酶为什么能加速化学反应的进程？ 8. 酶促反应中有哪些常见的亲核基团和亲电子基团？酶分子中既能作为质子供体，又能作质子受体的最有效、最活泼的基团是什么？ 9. 辅基和辅酶的作用是什么？并用代号写出其作用机理。 10. 何谓竞争性抑制和非竞争性抑制？二者有何异同？ 11. 有机磷农药为何能杀死害虫？ 12. 国际酶委会把酶分为哪几类？写出其催化反应通式。 13.试述 TDP、FAD、FMN、NAD＋ 、NADP＋ 、 CoA 的分子组成及生物学功能。 14.写出其催化反应测定酶活力时为什么要测量初速度，且一般以测定产物的增加量为宜？ 15.举例说明酶的专一性。试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性。 (1)脲酶(只催化尿素NH2CONH2的水解，但不能作用于NH2CONHCH3) (2)β-D-葡萄糖苷酶(只作用β-D-葡萄糖形成的各种糖苷，但不能作用于其他的糖苷，例如果糖苷) (3)酯酶(作用于R1COOR2的水解反应) (4)L-AA氧化酶(只作用于L-AA，而不能作用于D-AA) (5)反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸(延胡索酸)，而不能作用于顺丁烯二酸 (马来酸)] (6)甘油激酶(催化甘油磷酸化，生成甘油-1-磷酸) 16.假如反应体系中存在着下列各种情况，求其初速度v相当于理论最大速度Vmax的百分数：（1）[S]=Km (2) [S]=1/2 Km (3) [S]=2Km (4) [S]=1/10 Km (5) [S]=10Km 17.称取25mg蛋白酶配成25ml溶液，取2ml溶液测得含蛋白氮0.2mg，另取0.1ml溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生1500ug酪氨酸，假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1ug酪氨酸的酶量，请计算：(1)酶溶液的蛋白浓度及比活(2)每克酶制剂的总蛋白含量及总活力。 18.Vmax和米氏常数可以通过作图法求得，试比较v～［S］图，双倒数图，v～v/［S］作图，［S］/v～［S］作图及直接线性作图法求Vmax和Km的优缺点。 19.有时别构酶的活性可以被低浓度的竞争性抑制剂激活，请解释。 20.在很多酶的活性中心均有His残基参与，请解释。 21.解释下列名词:单成份酶和双成份酶、全酶和辅因子、辅基和辅酶、酶促反应、底物、酶的活性中心、酶的活性基团、酶的抑制剂和激活剂、酶原、单体酶、寡聚酶、多酶复合体、.同工酶、诱导酶、构酶、固相酶、酶活力、酶活力单位、比活力、米氏常数、温度系数、核酶、维生素、酶的专一性、酶促反应初速度、中间产物学说、酶的最适温度和最适PH、酶的热稳定范围，酶的酸碱稳定范围、竞争性抑制剂。 22.过氧化氢酶的Km为2.5×10-2mol/L,当底物H2O2浓度为100mmmol/L时，求反应速度达到最大速度的百分数。 23.试对比不同类型可逆抑制剂的特点。 24.为什么测酶活力时，酶液要适当稀释？“适当”的标准时什么？ 25.称取500mg蛋白酶粉配制成500ml的酶液，从中取出0.1ml酶液，以酪蛋白为底物，用福林－酚法测定酶活力，得每小时产生1500μg酪氨酸。试计算1ml酶溶液得活力及酶制剂得活力。 26.有0.5gα－淀粉酶制剂，配制成500ml溶液，从中取出1ml，在规定条件下进行酶促反应，测得10min分解5g淀粉成糊精，试计算酶制剂得酶活力。 27.酶制剂应该在什么条件下保存？为什么？ 28.酶的分离纯化一般经过哪些步骤？应注意哪些问题？ 29.什么叫固定化酶、固定化细胞？固定化酶、固定化细胞的方法有哪几种类型？其优缺点是什么？