第十九章 革兰氏阴性
需氧杆菌
岳 华
西南民族大学
Pseudomonas
aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa
colonies on agar
西南民族大学
布氏杆菌属 (Brucella)
布氏杆菌又名布鲁菌, 是多种动物和人布氏
杆菌病 (brucellmis)的病原, 不仅危害畜牧生
产, 而且严重损害人类健康, 因此在医学或兽医
学领域都极为重视 。
西南民族大学
西南民族大学
形态及染色特性
细菌呈球形、球杆形或短杆形，新分离者趋向
球形。 0.5～ 0.7um× 0.6～ 1.5um，多单在，很少
成双、短链或小堆状。 不形成芽孢和荚膜,偶尔
有类似荚膜样结构,无鞭毛 不运动。革兰氏染色
阴性，姬姆萨氏染色呈紫色。 经柯兹罗夫斯基或
改良 ZiehlNeelsen、改良 Koster等鉴别染色法染
成红色,可与其他细菌相区别。 DNA的 G+Cmol%为
为 55～ 58。
西南民族大学光镜下的布氏杆菌
西南民族大学
电镜下的布氏杆菌
西南民族大学
培养及生化特性
此属细菌专性需氧，但许多菌株，尤其是
在初代分离培养时尚需 5%～ 10%CO2。最适生长
温度 37℃,最适 pH为 6.6～ 7.4。
种和生物型 该属现包括 6个种 20个生物型，即
马尔他布氏杆菌生物型 1～ 3、流产布氏杆菌生
物型 1～ 9、猪布氏杆菌生物型 1～ 5、绵羊布氏
杆菌、沙林鼠布氏杆菌和犬布氏杆菌。
西南民族大学
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抗原性
布氏杆菌抗原结构非常复杂，目前可分为属内抗原
与属外抗原，前者包括 A,M及 R抗原等表面抗原。
属内抗原 A抗原与 M抗原 其抗原决定簇位于细
胞壁的脂多糖蛋白复合物上，为外露的多糖链部
分。
R抗原 为细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物。
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抵抗力
本菌对外界环境的抵抗力较强, 在污染的土壤和水
中可存活 1～ 4个月, 皮毛上 2～ 4个月, 鲜乳中 8d，
乳, 肉食品中约 2个月, 粪便中 120d,流产胎儿中
至少 75d,子宫渗出物中 200d。 在直射阳光下可存
活 4h。
对湿热的抵抗力不强, 60℃ 加热 30min或 70℃ 5min即
杀死, 煮沸立即死亡 。
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对消毒剂的抵抗力也不强, 2%石炭酸, 来
苏儿, 烧碱溶液或 0.1%的升汞, 可于 lh内杀死
本菌 ;5%新鲜石灰乳 Zh或 1%～ 2%福尔马林 3h可
将其杀死 ;0· 5%洗必泰或 0· 01%度米芬, 消毒
净或新洁尔灭, Smin内即可杀死本菌 。 在 pH5
或更低情况下迅速死亡 。
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致病性
本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。
本属细菌可感染的动物种类极多, 目前查知者已
有 60多种, 包括各种家畜, 野生哺乳动物, 啮
齿动物, 鸟类, 爬虫类, 两栖类和鱼类 。
布氏杆菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等实验动物感
染,豚鼠最为易感 。
西南民族大学
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西南民族大学
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布氏杆菌性关节炎
布氏杆菌
性睾丸炎
西南民族大学
微生物学诊断
布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染, 其诊
断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查 。
细菌学检查仅用于发生流产的动物和其他特殊情
况 。
1· 细菌学检查 病料最好用流产胎儿的胃内
容物, 肺, 肝和脾以及流产胎盘和羊水等 。 也可
采用阴道分泌物, 乳汁, 血液, 精液, 尿液以及
急宰病畜的子宫, 乳房, 精囊, 睾丸, 附睾, 淋
巴结, 骨髓和其他有局部病变的器官 。
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显微镜检查 病料直接涂片，作革兰氏和柯兹
洛夫斯基染色镜检。若发现革兰氏阴性、鉴别
染色为红色的球状杆菌或短小杆菌，即可作出
初步的疑似诊断。此法更适合于作流产材料及
流产数日月内的阴道分泌物检查。
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2· 血清学检查
有多种检查方法, 归纳起来不外乎血清中布氏杆
菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法 。
用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌, 或
分离培养物是否为布氏杆菌, 比细菌学检查法
简便快速, 因而具有较大实用价值 。 常用方法
有荧光抗体技术, 反向间接血凝试验, 间接炭
凝集试验以及免疫酶组化法染色等 。
西南民族大学
动物在感染布氏杆菌 7～ 15d可出现抗体，
检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的
主要手段。方法多，各有所长，目前还没有一
种完美的方法。因此在实际工作中，最好用一
种以上的方法相互配合。
西南民族大学
在大规模检疫时可采用准确性较差、操作
较简便的方法进行普遍筛选 (初筛试验 )，然
后再用准确性较高、但操作复杂的方法予以复
核 (确定试验 )。国内常用玻板凝集试验、虎
红平板凝集试验、乳汁环状试验进行现场或牧
区大群检疫，以试管凝集试验和补体结合试验
进行实验室最后确诊。
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3· 变态反应检查
皮肤变态反应一般在感染后的 20～ 25d出现，
因此不宜作早期诊断。本法适于动物的大群检疫，
主要用于绵羊和山羊，其次为猪。
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凝集反应, 补体结合反应和变态反应出现
的时间各有特点 。 即动物感染布氏杆菌后, 首
先出现凝集反应, 消失较早 ;其次出现补体结
合反应, 消失较晚；最后出现变态反应, 保持
时间也较长 。 在感染初期阶段, 凝集反应常为
阳性, 补体结合反应或为阳性或为阴性, 变态
反应则为阴性 。 到晚期慢性或恢复阶段, 则凝
集反应与补体结合反应均转为阴性, 仅变态反
应呈现阳性 。 因此有人主张, 为了彻底消除各
类病畜, 应同时使用三种方法进行综合诊断 。
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免疫防治
菌苗接种虽有显著效果, 但欲根除此病, 则尚
须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的措施 。 已
有的菌苗种类很多, 我国创制和应用的菌苗有羊
型和猪型两种弱毒菌苗 。
西南民族大学
附：
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学
本病是由绿脓杆菌感染引起的鸡的传染病，
主要危害 10日龄以内的雏鸡。近年来本病在我国
时有发生，已成为威胁养鸡业发展的重要疾病之
一。
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学
【 流行特点 】
本病四季均可发生，以春季多见，雏鸡最
易感，随着年龄增加，抵抗力增强。育雏室温度
过低、通风不良、注射马立克氏病疫苗、孵化环
境污染等均可诱发本病。
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【 临床特征 】
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败血型多发于 1～ 6日龄雏鸡，死亡率为 30%～ 60%，
表现为精神不振，食欲废绝，排白色稀便
鸡绿脓杆菌病
少数病例出现角膜或眼前房混浊（范国雄 ）
有时病鸡出现震颤，很快死亡
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学注射部位皮下胶冻样浸润（头部）
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学肝脏轻度肿大，有出血点和小坏死灶
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学肝脏肿大，有出血点和小坏死灶，胆囊扩张
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学
【 防治要点 】
西南民族大学
切实做好种蛋收集、贮存、入孵、孵化中期
和出雏中的消毒工作，接种疫苗时，应注意对器
械严格消毒，尽量避免接种感染。也可在接种前
后 2～ 3天使用药物进行预防。对病鸡应及时淘汰，
全群口服氯霉素、强力霉素、氧氟沙星、环丙沙
星等，有一定疗效。
鸡绿脓杆菌病
需氧杆菌
岳 华
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Pseudomonas
aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa
colonies on agar
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布氏杆菌属 (Brucella)
布氏杆菌又名布鲁菌, 是多种动物和人布氏
杆菌病 (brucellmis)的病原, 不仅危害畜牧生
产, 而且严重损害人类健康, 因此在医学或兽医
学领域都极为重视 。
西南民族大学
西南民族大学
形态及染色特性
细菌呈球形、球杆形或短杆形，新分离者趋向
球形。 0.5～ 0.7um× 0.6～ 1.5um，多单在，很少
成双、短链或小堆状。 不形成芽孢和荚膜,偶尔
有类似荚膜样结构,无鞭毛 不运动。革兰氏染色
阴性，姬姆萨氏染色呈紫色。 经柯兹罗夫斯基或
改良 ZiehlNeelsen、改良 Koster等鉴别染色法染
成红色,可与其他细菌相区别。 DNA的 G+Cmol%为
为 55～ 58。
西南民族大学光镜下的布氏杆菌
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电镜下的布氏杆菌
西南民族大学
培养及生化特性
此属细菌专性需氧，但许多菌株，尤其是
在初代分离培养时尚需 5%～ 10%CO2。最适生长
温度 37℃,最适 pH为 6.6～ 7.4。
种和生物型 该属现包括 6个种 20个生物型，即
马尔他布氏杆菌生物型 1～ 3、流产布氏杆菌生
物型 1～ 9、猪布氏杆菌生物型 1～ 5、绵羊布氏
杆菌、沙林鼠布氏杆菌和犬布氏杆菌。
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抗原性
布氏杆菌抗原结构非常复杂，目前可分为属内抗原
与属外抗原，前者包括 A,M及 R抗原等表面抗原。
属内抗原 A抗原与 M抗原 其抗原决定簇位于细
胞壁的脂多糖蛋白复合物上，为外露的多糖链部
分。
R抗原 为细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物。
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抵抗力
本菌对外界环境的抵抗力较强, 在污染的土壤和水
中可存活 1～ 4个月, 皮毛上 2～ 4个月, 鲜乳中 8d，
乳, 肉食品中约 2个月, 粪便中 120d,流产胎儿中
至少 75d,子宫渗出物中 200d。 在直射阳光下可存
活 4h。
对湿热的抵抗力不强, 60℃ 加热 30min或 70℃ 5min即
杀死, 煮沸立即死亡 。
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对消毒剂的抵抗力也不强, 2%石炭酸, 来
苏儿, 烧碱溶液或 0.1%的升汞, 可于 lh内杀死
本菌 ;5%新鲜石灰乳 Zh或 1%～ 2%福尔马林 3h可
将其杀死 ;0· 5%洗必泰或 0· 01%度米芬, 消毒
净或新洁尔灭, Smin内即可杀死本菌 。 在 pH5
或更低情况下迅速死亡 。
西南民族大学
致病性
本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。
本属细菌可感染的动物种类极多, 目前查知者已
有 60多种, 包括各种家畜, 野生哺乳动物, 啮
齿动物, 鸟类, 爬虫类, 两栖类和鱼类 。
布氏杆菌可引起豚鼠、小鼠和家兔等实验动物感
染,豚鼠最为易感 。
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西南民族大学
布氏杆菌性关节炎
布氏杆菌
性睾丸炎
西南民族大学
微生物学诊断
布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染, 其诊
断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查 。
细菌学检查仅用于发生流产的动物和其他特殊情
况 。
1· 细菌学检查 病料最好用流产胎儿的胃内
容物, 肺, 肝和脾以及流产胎盘和羊水等 。 也可
采用阴道分泌物, 乳汁, 血液, 精液, 尿液以及
急宰病畜的子宫, 乳房, 精囊, 睾丸, 附睾, 淋
巴结, 骨髓和其他有局部病变的器官 。
西南民族大学
显微镜检查 病料直接涂片，作革兰氏和柯兹
洛夫斯基染色镜检。若发现革兰氏阴性、鉴别
染色为红色的球状杆菌或短小杆菌，即可作出
初步的疑似诊断。此法更适合于作流产材料及
流产数日月内的阴道分泌物检查。
西南民族大学
2· 血清学检查
有多种检查方法, 归纳起来不外乎血清中布氏杆
菌抗体检查和病料中布氏杆菌检查两类方法 。
用已知抗体可检查病料中是否存在布氏杆菌, 或
分离培养物是否为布氏杆菌, 比细菌学检查法
简便快速, 因而具有较大实用价值 。 常用方法
有荧光抗体技术, 反向间接血凝试验, 间接炭
凝集试验以及免疫酶组化法染色等 。
西南民族大学
动物在感染布氏杆菌 7～ 15d可出现抗体，
检测血清中的抗体是布氏杆菌病诊断和检疫的
主要手段。方法多，各有所长，目前还没有一
种完美的方法。因此在实际工作中，最好用一
种以上的方法相互配合。
西南民族大学
在大规模检疫时可采用准确性较差、操作
较简便的方法进行普遍筛选 (初筛试验 )，然
后再用准确性较高、但操作复杂的方法予以复
核 (确定试验 )。国内常用玻板凝集试验、虎
红平板凝集试验、乳汁环状试验进行现场或牧
区大群检疫，以试管凝集试验和补体结合试验
进行实验室最后确诊。
西南民族大学
3· 变态反应检查
皮肤变态反应一般在感染后的 20～ 25d出现，
因此不宜作早期诊断。本法适于动物的大群检疫，
主要用于绵羊和山羊，其次为猪。
西南民族大学
凝集反应, 补体结合反应和变态反应出现
的时间各有特点 。 即动物感染布氏杆菌后, 首
先出现凝集反应, 消失较早 ;其次出现补体结
合反应, 消失较晚；最后出现变态反应, 保持
时间也较长 。 在感染初期阶段, 凝集反应常为
阳性, 补体结合反应或为阳性或为阴性, 变态
反应则为阴性 。 到晚期慢性或恢复阶段, 则凝
集反应与补体结合反应均转为阴性, 仅变态反
应呈现阳性 。 因此有人主张, 为了彻底消除各
类病畜, 应同时使用三种方法进行综合诊断 。
西南民族大学
免疫防治
菌苗接种虽有显著效果, 但欲根除此病, 则尚
须严格执行畜群全面检疫及淘汰病畜的措施 。 已
有的菌苗种类很多, 我国创制和应用的菌苗有羊
型和猪型两种弱毒菌苗 。
西南民族大学
附：
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学
本病是由绿脓杆菌感染引起的鸡的传染病，
主要危害 10日龄以内的雏鸡。近年来本病在我国
时有发生，已成为威胁养鸡业发展的重要疾病之
一。
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学
【 流行特点 】
本病四季均可发生，以春季多见，雏鸡最
易感，随着年龄增加，抵抗力增强。育雏室温度
过低、通风不良、注射马立克氏病疫苗、孵化环
境污染等均可诱发本病。
西南民族大学
【 临床特征 】
西南民族大学
败血型多发于 1～ 6日龄雏鸡，死亡率为 30%～ 60%，
表现为精神不振，食欲废绝，排白色稀便
鸡绿脓杆菌病
少数病例出现角膜或眼前房混浊（范国雄 ）
有时病鸡出现震颤，很快死亡
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学注射部位皮下胶冻样浸润（头部）
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学肝脏轻度肿大，有出血点和小坏死灶
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学肝脏肿大，有出血点和小坏死灶，胆囊扩张
鸡绿脓杆菌病
西南民族大学
【 防治要点 】
西南民族大学
切实做好种蛋收集、贮存、入孵、孵化中期
和出雏中的消毒工作，接种疫苗时，应注意对器
械严格消毒，尽量避免接种感染。也可在接种前
后 2～ 3天使用药物进行预防。对病鸡应及时淘汰，
全群口服氯霉素、强力霉素、氧氟沙星、环丙沙
星等，有一定疗效。
鸡绿脓杆菌病
