目 录第 二 十 一 章基因诊断与基因治疗
Genetic Diagnosis and Gene Therapy
目 录基因变异致病类型内源基因的变异基因结构突变基因表达异常外源基因的入侵目 录第 一 节基 因 诊 断
Genetic Diagnosis
目 录特点针对性强特异性强灵敏度高适应性强一、基因诊断的概念和特点定义利用现代分子生物学和分子遗传学的技术和方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。
目 录二、基因诊断常用技术方法
限制性内切酶谱分析法
DNA限制性长度多态性 (restriction fragment
length polymorphism,RLFP)分析
等位基因特异寡核苷酸探针 (allele specific
oligonucleotide,ASO)
（一）核酸分子杂交技术目 录
（二）聚合酶链反应 (PCR)
（三）基因测序
（四）基因芯片目 录
×
MstⅡ 酶切位点 (GCTNAGG)
5′ 3′
正常基因
5′ 3′
突变基因
1.15kb
1.35kb
镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析目 录
+
﹣
0.2kb
1.15kb
1.35kb
正常人 突变携带着 患者镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析目 录
RLFP分析法目 录
PCR/单链构象多态性分析
(single strand conformation polymorphism,SSCP)
PCR产物变性后，经聚丙烯酰胺凝胶电泳，正常基因和变异基因的迁移位置不同，借此可分析确定致病基因的存在。
目 录正常人 纯合突变 杂合突变
Leber 病患者 PCR/SSCP分析
+
﹣
目 录三、基因诊断的应用
遗传疾病
肿瘤
感染性疾病，传染性流行病
判断个体疾病易感性
器官移植组织配型
法医学中个体识别、亲子鉴定目 录第 二 节基 因 治 疗
Gene Therapy
目 录定义早期 是指用正常的基因整合入细胞基因组，
以校正和置换致病基因的一种治疗方法。
目前 广义上来讲是指将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法。
一、基因治疗的概念目 录基因治疗的基本方法基因矫正 (gene correction)
基因置换 (gene replacement)
基因增补 (gene augmentation)
基因失活 (gene inactivation)
目 录几种常见的基因失活技术
① 反义核酸技术
② 核酶技术
③ 三链技术
④ 干扰 RNA技术基因治疗的其他方法,如,自杀基因,
的应用，基因疫苗等目 录二、基因治疗的基本程序治疗性基因的选择基因载体的选择靶细胞的选择基因转移外源基因表达的筛选 利用在体中的标记基因回输体内病毒载体非病毒载体体细胞生殖细胞间接体内疗法直接体内疗法目 录目 录三、基因治疗的应用与展望应用展望遗传性疾病、心血管疾病、肿瘤、
感染性疾病、神经系统疾病进一步寻找切实有效的基因精密调控外源基因在人体内的表达体细胞移植和重建的生物学研究减少外源基因对机体的不利影响
Genetic Diagnosis and Gene Therapy
目 录基因变异致病类型内源基因的变异基因结构突变基因表达异常外源基因的入侵目 录第 一 节基 因 诊 断
Genetic Diagnosis
目 录特点针对性强特异性强灵敏度高适应性强一、基因诊断的概念和特点定义利用现代分子生物学和分子遗传学的技术和方法，直接检测基因结构及其表达水平是否正常，从而对疾病作出诊断的方法。
目 录二、基因诊断常用技术方法
限制性内切酶谱分析法
DNA限制性长度多态性 (restriction fragment
length polymorphism,RLFP)分析
等位基因特异寡核苷酸探针 (allele specific
oligonucleotide,ASO)
（一）核酸分子杂交技术目 录
（二）聚合酶链反应 (PCR)
（三）基因测序
（四）基因芯片目 录
×
MstⅡ 酶切位点 (GCTNAGG)
5′ 3′
正常基因
5′ 3′
突变基因
1.15kb
1.35kb
镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析目 录
+
﹣
0.2kb
1.15kb
1.35kb
正常人 突变携带着 患者镰状红细胞贫血患者基因组的限制性酶切分析目 录
RLFP分析法目 录
PCR/单链构象多态性分析
(single strand conformation polymorphism,SSCP)
PCR产物变性后，经聚丙烯酰胺凝胶电泳，正常基因和变异基因的迁移位置不同，借此可分析确定致病基因的存在。
目 录正常人 纯合突变 杂合突变
Leber 病患者 PCR/SSCP分析
+
﹣
目 录三、基因诊断的应用
遗传疾病
肿瘤
感染性疾病，传染性流行病
判断个体疾病易感性
器官移植组织配型
法医学中个体识别、亲子鉴定目 录第 二 节基 因 治 疗
Gene Therapy
目 录定义早期 是指用正常的基因整合入细胞基因组，
以校正和置换致病基因的一种治疗方法。
目前 广义上来讲是指将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，以达到治疗疾病目的的方法。
一、基因治疗的概念目 录基因治疗的基本方法基因矫正 (gene correction)
基因置换 (gene replacement)
基因增补 (gene augmentation)
基因失活 (gene inactivation)
目 录几种常见的基因失活技术
① 反义核酸技术
② 核酶技术
③ 三链技术
④ 干扰 RNA技术基因治疗的其他方法,如,自杀基因,
的应用，基因疫苗等目 录二、基因治疗的基本程序治疗性基因的选择基因载体的选择靶细胞的选择基因转移外源基因表达的筛选 利用在体中的标记基因回输体内病毒载体非病毒载体体细胞生殖细胞间接体内疗法直接体内疗法目 录目 录三、基因治疗的应用与展望应用展望遗传性疾病、心血管疾病、肿瘤、
感染性疾病、神经系统疾病进一步寻找切实有效的基因精密调控外源基因在人体内的表达体细胞移植和重建的生物学研究减少外源基因对机体的不利影响
