课件 002 兽医微生物学教学课件 1
兽医微生物学兽医微生物学
(多媒体教学课件 )
天津农学院动科系动物预防医学教研室制作
2003/02/28
课件 002 兽医微生物学教学课件 3
绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、
致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、
微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定等 。
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第八章 抗原与抗体第九章 免疫系统与免疫应答第十章 抗感染免疫第十一章 变态反应第十二章 免疫调节与免疫遗传第十三章 免疫血清学技术第十四章 免疫学的应用课件 002 兽医微生物学教学课件 5
第十四章 免疫学的应用第一节 免疫诊断与检测第二节 免疫防治第三节 佐剂与免疫增强剂课件 002 兽医微生物学教学课件 6
兽医生物制品兽医生物制品 指用于动物传染病预防、诊断、
治疗的生物制剂。包括疫苗、诊断液、免疫血清。
（ 一 ） 疫苗 用于人工自动免疫预防动物传染病的生物制剂 。 包括弱毒活疫苗,灭活疫苗,类毒素和新型疫苗等 。
（ 二 ） 诊断液 用于动物传染病免疫学诊断的生物制剂 。 包括诊断抗原,诊断抗体,冻干补体等 。
（ 三 ） 免疫血清 用于动物传染病免疫防治的含有高效价抗体的动物血清制剂 。 包括抗菌血清,抗病毒血清,抗毒素,康复血清,高免蛋黄抗体等 。
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第一节 免疫诊断与检测免疫学在兽医学的应用主要在病原微生物及其相关产物的检测与疾病防治多个方面 。
一,免疫血清学技术的应用
1,疾病诊断 用免疫血清学技术通过检测相应抗原,
抗体对动物传染病,寄生虫病等进行诊断 。
2,生物活性物质的超微定量 动物激素,维生素等,
在体内含量极微,但在调节机体的生理活动中起重要作用,可通过分析测定这些微量物质含量及变化,研究机体各种生理功能 (如生长,生殖等 )。
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由于这些物质含量极低，常规方法不能准确测出。
用放射免疫测定和酶免疫技术已能精确测出 ng(10-
9g)或 pg(10-12g)/mL水平的物质，已成为测定动植物、昆虫体中微量激素及其他活性物质，研究动物生殖、植物生理和生物防治的重要手段。
3,物种鉴定 各种生物之间的差异都可表现在抗原性不同，物种种源越远，抗原性差异越大，可用区分抗原性的血清学反应，进行包括微生物在内的物种鉴定、物种的分类等。
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4,生物性状免疫标记与选择育种 通过分析动物,
植物一些优良性状 (如高产,优质,抗逆性等 )的特异性抗原,用血清学方法进行标记选择育种,是很有前途的方向 。
5,免疫增强药物和疫苗研究 疫苗研究中需用血清学反应和细胞免疫技术测定免疫效果,研究免疫增强药物,尤其研究抗肿瘤药物时还需用细胞免疫技术分析测定对机体细胞免疫功能的增强作用 。
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6,抗原抗体在细胞和亚细胞水平的定位 传染性病原从机体特定部位入侵,并在特定组织细胞内增殖,
引起发病 。 以荧光抗体染色或免疫酶组化染色,可在细胞水平上确定病毒等病原微生物 I的感染细胞,
进行抗原的定位 。
7,分子生物学研究领域 在基因工程中，基因的分离、克隆、筛选、表达产物的定性与定量分析、表达产物的纯化等均涉及到免疫技术。
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二,细胞免疫检测技术细胞免疫检测主要包括,T细胞及亚群的计数 (玫瑰花环试验,细胞表面分化抗原分析 ),T细胞活性测定 (淋巴细胞转化试验,致敏 T细胞毒试验,白细胞移动抑制试验 ),各种 淋巴因子的检测 以及 K细胞,
NK细胞活性试验 。
细胞免疫检测技术通常用于四个方面：
① 测定机体细胞免疫状态 疾病个体的细胞免疫状态及水平,以分析其发病机制,对研究免疫缺陷,
自身免疫病,肿瘤免疫以及细胞内病原感染等疾病过程中免疫功能的变化,尤其重要 。
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② 测定细胞免疫反应能力 抗原注射机体后的细胞免疫反应,分析该抗原刺激 T细胞免疫的表现及其细胞免疫机制 。
③筛选药物 免疫增强剂或免疫抑制剂药物，或研究化学药物、物理疗法对机体免疫功能的影响。
④研制淋巴因子 如干扰素、白细胞介素制剂过程中，测定其活性及效价水平。
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第二节 免疫防治机体对病原微生物的免疫力分为 先天性免疫 和 获得性免疫 两种,前者是动物体在种族进化进程中得到的天然防御能力,后者是动物体在个体发育过程中受到病原体及其产物刺激而产生的特异性免疫力 。
特异性免疫 又分为 主动免疫 和 被动免疫 两种 。
用疫苗对动物进行免疫接种经主动免疫方式使动物获得免疫力,是预防和控制动物传染病的重要手段和中心工作 。
获得性免疫的类型,
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一,天然被动免疫新生动物通过母体 胎盘,初乳或卵黄 从母体获得某种特异性抗体,从而获得对某种病原体的免疫力称为天然被动免疫 。 天然被动免疫在免疫防治中具有重要意义 。 由于动物在生长发育的早期 (如胎儿和幼龄动物 ),免疫系统还不够健全,对病原体感染的抵抗力较弱,此时可通过获得母源抗体增强免疫力,以保证早期的健康生长发育 。
天然被动免疫既可保护胎儿免受病原体的感染,
又可抵御幼龄动物传染病 。
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在初乳中的 IgG,IgM可抵抗败血性感染,IgA可抵抗肠道病原体的感染。然而母源抗体可干扰弱毒疫苗对幼龄动物的免疫效果。
二、天然主动免疫天然主动免疫是指动物在 感染某种病原微生物 耐过后产生的对该病原体再次侵入的不感染状态（免疫力、抵抗力）。
自然环境中的致病微生物可通过呼吸道、消化道、
皮肤或黏膜侵入动物机体，在体内不断增殖，与此同时刺激动物机体的免疫系统产生免疫应答。
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三,人工被动免疫将 免疫血清 或自然发病动物的 康复血清 等抗体制剂 人工输入 动物体内,使其获得某种特异抵抗力,称为人工被动免疫 。
特点 1,免疫力产生快 （ 30min)。 2,免疫力维持时间短,一般 1-4周 。
免疫血清 可用同种动物或异种动物制备,用同种动物制备的血清称为 同种血清,用异种动物制备的血清称为 异种血清 。
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抗细菌血清和抗毒素通常用大动物 (马、牛等 )制备，
如用马制备破物风抗毒素，用牛制备猪丹毒血清均为异种血清。抗病毒血清常用同种动物制备，同种动物血清的产量有限，但免疫后不引起应答反应，因而比异种血清免疫期长。
在家禽还常用 卵黄抗体 制剂进行人工接种，如鸡群发生 IBD时，用高效价 IBD卵黄抗体进行紧急接种，
可起到良好的防治效果。
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四,人工主动免疫人工主动免疫是给动物接种疫苗等生物制品,
刺激机体免疫系统发生应答反应,产生特异性免疫力 。
1.与人工被动免疫比较 所接种的物质不是免疫血清或卵黄抗体,而是刺激免疫应答的各种疫苗,
类毒素等；需要一定的诱导期 。 如病毒抗原需 3-
4d,细菌抗原需 5-7d,毒素抗原需 2-3周；但人工主动免疫产生的免疫力持续时间长,免疫期可达数月甚至数年,而且有回忆反应,某些疫苗免疫后,可产生终生免疫 。
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2.疫苗的种类 已有的疫苗概括起来分为 活疫苗,
灭活疫苗,代谢产物和亚单位疫苗以及生物技术疫苗,其中生物技术疫苗又分基因工程亚单位疫苗,合成肽疫苗,抗独特型疫苗,基因工程活疫苗以及 DNA疫苗等 。
（ 1）活疫苗 简称活苗，有强毒苗、弱毒苗和异源苗三种。
强毒苗 是应用最早的疫苗种类，使用强毒进行免疫有较大的危险，非情况特殊不予使用。
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弱毒苗 是目前使用的最广泛的疫苗,弱毒苗的毒力已致弱,仍保持原有抗原性,并能在体内繁殖,
用 较少剂量 诱导产生坚实的免疫力 。 有些弱毒苗可 刺激产生干扰素,可抵抗其他野毒的感染 。
但是弱毒苗有的 可能散毒,有的 贮存与运输的不便,而且 保存期较短,将其制成冻干苗可延长保存期 。
异源苗 是用具有共同保护性抗原的不同种微生物制备成的疫苗 。 如用火鸡疱疹病毒 (HVT)接种预防鸡马立克病,用鸽痘病毒预防鸡痘等 。
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（ 2） 灭活疫苗 病原微生物经理化方法灭活后,仍然保持免疫原性,接种后使动物产生特异性抵抗力,
这种疫苗称为 灭活疫苗 （ 死苗 ） 。 由于死苗接种后不能在动物体内繁殖,因此使用 接种剂量较大,免疫期较短,需加入适当的 佐剂 以增强免疫效果延长免疫期 。
优点是 研制周期短,使用 安全和易于保存 。 目前所使用的有组织灭活苗,油佐剂灭活苗和氢氧化铝胶灭活苗等 。
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（ 3） 代谢产物和亚单位疫苗代谢产物疫苗,如毒素,酶等都可制成疫苗,破伤风毒素,白喉毒素,肉毒毒素,致病性大肠杆菌肠毒素,经甲醛灭活后制成的类毒素有好的免疫原性,可作为主动免疫制剂 。
亚单位疫苗 是将病毒的衣壳蛋白与核酸分开,除去核酸用提纯的蛋白质衣壳制成的疫苗 。 此类苗保含有病毒的抗原成分,无核酸,因而无不良反应,使用安全,效果较好 。 猪口蹄疫,伪狂犬病,
狂犬病等亚单位疫苗已有成功的试验报道 。 亚单位疫苗由于制备困难,价格昂贵 。
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（ 4） 生物技术疫苗 生物技术疫苗是利用生物技术制备的分子水平的疫苗,包括基因工程亚单位疫苗,合成肽疫苗,抗独特型疫苗,基因工程活疫苗以及 DNA疫苗 。
基因工程亚单位疫苗 基因工程亚单位疫苗是用 DNA重组技术，将编码病原微生物保护性抗原的基因导人受体菌 (如大肠杆菌 )或细胞，使其在受体细胞中高效表达，分泌保护性抗原肽链。
提取保护性抗原肽链，加入佐剂即制成基因工程亚单位疫苗。
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合成肽疫苗 合成肽疫苗是用化学合成法，人工合成病原微生物的保护性多肽，并将其连接到大分子载体上，再加入佐剂制成的疫苗。
抗独特型疫苗 抗独特型疫苗是免疫调节网络学说发展到新阶段的产物。抗独特型抗体，可刺激机体产生与抗原特异性抗体具有同等免疫效应的抗体。但制备不易，成本较高。
基因工程活疫苗 基因工程活疫苗包括基因缺失疫苗和重组活载体疫苗及非复制性疫苗三类。
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基因缺失疫苗 是用基因工程技术将强毒株毒力相关基因切除构建的活疫苗。该苗安全性好、不易返祖、免疫力坚实、免疫期长、适于局部接种，
诱导产生黏膜免疫力，因而是较理想的疫苗。
重组活载体疫苗 是用基因工程技术将保护性抗原基因 (目的基因 )转移到载体中，使之表达。痘病毒、腺病毒和疱疹病毒等可作载体。
非复制性疫苗 又称活 -死疫苗，与重组活载体疫苗类似，但载体病毒接种后只产生顿挫感染，不能完成复制过程，无排毒的隐患，同时又可表达目的抗原，产生有效的免疫保护。
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DNA疫苗 这是一种最新的分子水平的生物技术疫苗，将编码保护性抗原的基因与能在真核细胞中表达的载体 DNA重组，重组的 DNA可直接注射 (接种 )到动物 (如小鼠 )体内，目的基因可在动物体内表达，刺激机体产生体液免疫和细胞免疫。
（ 5） 多价苗与联苗 多价苗 是指将同一种细菌
(或病毒 )的不同血清型混合制成的疫苗 。 如巴氏杆菌多价苗,大肠杆菌多价苗等 。 联苗 是指由两种以上的细菌 (或病毒 )联合制成的疫苗,一次免疫可达到预防几种疾病的目的 。
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3.疫苗的使用免疫途径 接种疫苗的方法有滴鼻、点眼、刺种、
注射、饮水和气雾等。
家禽免疫可采用滴鼻、点眼、饮水、注射及气雾等多种途径。
滴鼻与点眼 免疫效果较好，仅用于接种弱毒疫苗，
可直接刺激眼底哈德腺和结膜下弥散淋巴组织等，
产生局部免疫。
饮水免疫 是最方便的疫苗接种方法,但免疫效果较差,不适于初次免疫 。
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刺种与注射 也是常用的免疫方法，适于某些弱毒苗如鸡痘与马立克病免疫。另外灭活苗的免疫也必须用注射的方法进行。刺种与注射方法免疫确实，效果好。
气雾免疫 分为喷雾免疫和气溶胶免疫两种方式。喷雾免疫的雾粒大小为 10-100um，在新城疫免疫中，气雾免疫效果较好，不仅可诱导产生循环抗体，而且也可产生局部免疫力，但气雾免疫会造成一定程度的应激反应，容易引起呼吸道感染。
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4.免疫程序 免疫程序应根据疫病在本地区的流行情况及规律,畜禽的用途 (种用,肉用或蛋用 ),年龄,母源抗体水平和饲养条件,以及使用疫苗的种类,性质,免疫途径等方面的因素制定,不宜作统一规定 。 免疫程序应随情况的变化而作适当的调整,不存在普遍适用的最佳免疫程序 。 动物的抗体监测是重要的参考依据 。
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第三节 佐剂与免疫增强剂一,佐剂 一种物质先于抗原或与抗原混合同时注入动物体内,能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答,发挥辅助作用,这类物质统称为 佐剂 或 免疫佐剂 。
（ 一 ） 佐剂的作用 可 增强抗原 物质的抗原性外,
还可通过加入佐剂 减少抗原用量 和接种次数,增强 抗原所激发的 抗体应答,达到产生大量特异性抗体的目的 。
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（ 二 ） 佐剂的作用方式
1,在接种部位形成抗原贮存库 使抗原缓慢释放,
延长抗原在局部组织内的滞留时间,较长时间使抗原与免疫细胞接触并激发对抗原的应答 。
2,增加抗原的表面积 提高抗原的免疫原性,辅助抗原暴露并将能刺激特异性免疫应答的抗原表位递呈给免疫细胞 。
3,促进局部的炎症反应 增强吞噬细胞的活性,
促进免疫细胞的增殖与分化,诱导细胞因子的分泌 。
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（ 三 ） 佐剂的类型
1.不溶性铝盐类佐剂 是一类在疫苗上应用很广泛的佐剂，通常使用的主要有氢氧化铝胶、明矾、磷酸三钙等。
2.油水乳剂佐剂 是用矿物油、乳化剂 (如 Span-80、
Tween-80)及稳定剂 (硬脂酸铝 )，按一定比例混合作为油相，然后与抗原液混合制成各种类型的油水乳剂，例如油包水型乳剂 (W/O)，水包油包水型双乳化佐剂等。
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3.蜂胶佐剂 蜂胶是蜜蜂采自植物幼芽分泌的树脂，
并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂蜡、花粉及其他一些有机与无机物的一种天然物质。它作为佐剂具有良好的免疫增强作用。
4.合成佐剂 这类佐剂有胞壁酰二肽 (MDP)及其衍生物等 。
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二,免疫增强剂免疫增强剂是指一些单独使用即能引起机体出现短暂的免疫功能增强作用的物质,有的可与抗原同时使用,有的佐剂本身也是免疫增强剂 。
免疫增强剂的种类繁多,主要有以下几类：
1.生物性免疫增强剂 这类免疫增强剂有转移因子,
免疫核糖核酸 (iRNA),胸腺激素,干扰素,植物及中药多糖成分 。
2.细菌性免疫增强剂 包括小棒状杆菌,卡介苗,细菌脂多糖等 。
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3.化学性免疫增强剂 有左旋咪唑,吡喃,梯洛龙,
多聚核苷酸等 。
4.营养性免疫增强剂 包括维生素,微量元素等 。
免疫增强剂可用于治疗某些传染病如真菌感染,免疫性疾病如免疫缺陷,免疫抑制性疾病,以及非免疫性疾病如肿瘤 。
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细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、
致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、
微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定等 。
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第八章 抗原与抗体第九章 免疫系统与免疫应答第十章 抗感染免疫第十一章 变态反应第十二章 免疫调节与免疫遗传第十三章 免疫血清学技术第十四章 免疫学的应用课件 002 兽医微生物学教学课件 5
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兽医生物制品兽医生物制品 指用于动物传染病预防、诊断、
治疗的生物制剂。包括疫苗、诊断液、免疫血清。
（ 一 ） 疫苗 用于人工自动免疫预防动物传染病的生物制剂 。 包括弱毒活疫苗,灭活疫苗,类毒素和新型疫苗等 。
（ 二 ） 诊断液 用于动物传染病免疫学诊断的生物制剂 。 包括诊断抗原,诊断抗体,冻干补体等 。
（ 三 ） 免疫血清 用于动物传染病免疫防治的含有高效价抗体的动物血清制剂 。 包括抗菌血清,抗病毒血清,抗毒素,康复血清,高免蛋黄抗体等 。
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第一节 免疫诊断与检测免疫学在兽医学的应用主要在病原微生物及其相关产物的检测与疾病防治多个方面 。
一,免疫血清学技术的应用
1,疾病诊断 用免疫血清学技术通过检测相应抗原,
抗体对动物传染病,寄生虫病等进行诊断 。
2,生物活性物质的超微定量 动物激素,维生素等,
在体内含量极微,但在调节机体的生理活动中起重要作用,可通过分析测定这些微量物质含量及变化,研究机体各种生理功能 (如生长,生殖等 )。
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由于这些物质含量极低，常规方法不能准确测出。
用放射免疫测定和酶免疫技术已能精确测出 ng(10-
9g)或 pg(10-12g)/mL水平的物质，已成为测定动植物、昆虫体中微量激素及其他活性物质，研究动物生殖、植物生理和生物防治的重要手段。
3,物种鉴定 各种生物之间的差异都可表现在抗原性不同，物种种源越远，抗原性差异越大，可用区分抗原性的血清学反应，进行包括微生物在内的物种鉴定、物种的分类等。
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4,生物性状免疫标记与选择育种 通过分析动物,
植物一些优良性状 (如高产,优质,抗逆性等 )的特异性抗原,用血清学方法进行标记选择育种,是很有前途的方向 。
5,免疫增强药物和疫苗研究 疫苗研究中需用血清学反应和细胞免疫技术测定免疫效果,研究免疫增强药物,尤其研究抗肿瘤药物时还需用细胞免疫技术分析测定对机体细胞免疫功能的增强作用 。
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6,抗原抗体在细胞和亚细胞水平的定位 传染性病原从机体特定部位入侵,并在特定组织细胞内增殖,
引起发病 。 以荧光抗体染色或免疫酶组化染色,可在细胞水平上确定病毒等病原微生物 I的感染细胞,
进行抗原的定位 。
7,分子生物学研究领域 在基因工程中，基因的分离、克隆、筛选、表达产物的定性与定量分析、表达产物的纯化等均涉及到免疫技术。
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二,细胞免疫检测技术细胞免疫检测主要包括,T细胞及亚群的计数 (玫瑰花环试验,细胞表面分化抗原分析 ),T细胞活性测定 (淋巴细胞转化试验,致敏 T细胞毒试验,白细胞移动抑制试验 ),各种 淋巴因子的检测 以及 K细胞,
NK细胞活性试验 。
细胞免疫检测技术通常用于四个方面：
① 测定机体细胞免疫状态 疾病个体的细胞免疫状态及水平,以分析其发病机制,对研究免疫缺陷,
自身免疫病,肿瘤免疫以及细胞内病原感染等疾病过程中免疫功能的变化,尤其重要 。
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② 测定细胞免疫反应能力 抗原注射机体后的细胞免疫反应,分析该抗原刺激 T细胞免疫的表现及其细胞免疫机制 。
③筛选药物 免疫增强剂或免疫抑制剂药物，或研究化学药物、物理疗法对机体免疫功能的影响。
④研制淋巴因子 如干扰素、白细胞介素制剂过程中，测定其活性及效价水平。
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第二节 免疫防治机体对病原微生物的免疫力分为 先天性免疫 和 获得性免疫 两种,前者是动物体在种族进化进程中得到的天然防御能力,后者是动物体在个体发育过程中受到病原体及其产物刺激而产生的特异性免疫力 。
特异性免疫 又分为 主动免疫 和 被动免疫 两种 。
用疫苗对动物进行免疫接种经主动免疫方式使动物获得免疫力,是预防和控制动物传染病的重要手段和中心工作 。
获得性免疫的类型,
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一,天然被动免疫新生动物通过母体 胎盘,初乳或卵黄 从母体获得某种特异性抗体,从而获得对某种病原体的免疫力称为天然被动免疫 。 天然被动免疫在免疫防治中具有重要意义 。 由于动物在生长发育的早期 (如胎儿和幼龄动物 ),免疫系统还不够健全,对病原体感染的抵抗力较弱,此时可通过获得母源抗体增强免疫力,以保证早期的健康生长发育 。
天然被动免疫既可保护胎儿免受病原体的感染,
又可抵御幼龄动物传染病 。
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在初乳中的 IgG,IgM可抵抗败血性感染,IgA可抵抗肠道病原体的感染。然而母源抗体可干扰弱毒疫苗对幼龄动物的免疫效果。
二、天然主动免疫天然主动免疫是指动物在 感染某种病原微生物 耐过后产生的对该病原体再次侵入的不感染状态（免疫力、抵抗力）。
自然环境中的致病微生物可通过呼吸道、消化道、
皮肤或黏膜侵入动物机体，在体内不断增殖，与此同时刺激动物机体的免疫系统产生免疫应答。
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三,人工被动免疫将 免疫血清 或自然发病动物的 康复血清 等抗体制剂 人工输入 动物体内,使其获得某种特异抵抗力,称为人工被动免疫 。
特点 1,免疫力产生快 （ 30min)。 2,免疫力维持时间短,一般 1-4周 。
免疫血清 可用同种动物或异种动物制备,用同种动物制备的血清称为 同种血清,用异种动物制备的血清称为 异种血清 。
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抗细菌血清和抗毒素通常用大动物 (马、牛等 )制备，
如用马制备破物风抗毒素，用牛制备猪丹毒血清均为异种血清。抗病毒血清常用同种动物制备，同种动物血清的产量有限，但免疫后不引起应答反应，因而比异种血清免疫期长。
在家禽还常用 卵黄抗体 制剂进行人工接种，如鸡群发生 IBD时，用高效价 IBD卵黄抗体进行紧急接种，
可起到良好的防治效果。
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四,人工主动免疫人工主动免疫是给动物接种疫苗等生物制品,
刺激机体免疫系统发生应答反应,产生特异性免疫力 。
1.与人工被动免疫比较 所接种的物质不是免疫血清或卵黄抗体,而是刺激免疫应答的各种疫苗,
类毒素等；需要一定的诱导期 。 如病毒抗原需 3-
4d,细菌抗原需 5-7d,毒素抗原需 2-3周；但人工主动免疫产生的免疫力持续时间长,免疫期可达数月甚至数年,而且有回忆反应,某些疫苗免疫后,可产生终生免疫 。
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2.疫苗的种类 已有的疫苗概括起来分为 活疫苗,
灭活疫苗,代谢产物和亚单位疫苗以及生物技术疫苗,其中生物技术疫苗又分基因工程亚单位疫苗,合成肽疫苗,抗独特型疫苗,基因工程活疫苗以及 DNA疫苗等 。
（ 1）活疫苗 简称活苗，有强毒苗、弱毒苗和异源苗三种。
强毒苗 是应用最早的疫苗种类，使用强毒进行免疫有较大的危险，非情况特殊不予使用。
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弱毒苗 是目前使用的最广泛的疫苗,弱毒苗的毒力已致弱,仍保持原有抗原性,并能在体内繁殖,
用 较少剂量 诱导产生坚实的免疫力 。 有些弱毒苗可 刺激产生干扰素,可抵抗其他野毒的感染 。
但是弱毒苗有的 可能散毒,有的 贮存与运输的不便,而且 保存期较短,将其制成冻干苗可延长保存期 。
异源苗 是用具有共同保护性抗原的不同种微生物制备成的疫苗 。 如用火鸡疱疹病毒 (HVT)接种预防鸡马立克病,用鸽痘病毒预防鸡痘等 。
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（ 2） 灭活疫苗 病原微生物经理化方法灭活后,仍然保持免疫原性,接种后使动物产生特异性抵抗力,
这种疫苗称为 灭活疫苗 （ 死苗 ） 。 由于死苗接种后不能在动物体内繁殖,因此使用 接种剂量较大,免疫期较短,需加入适当的 佐剂 以增强免疫效果延长免疫期 。
优点是 研制周期短,使用 安全和易于保存 。 目前所使用的有组织灭活苗,油佐剂灭活苗和氢氧化铝胶灭活苗等 。
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（ 3） 代谢产物和亚单位疫苗代谢产物疫苗,如毒素,酶等都可制成疫苗,破伤风毒素,白喉毒素,肉毒毒素,致病性大肠杆菌肠毒素,经甲醛灭活后制成的类毒素有好的免疫原性,可作为主动免疫制剂 。
亚单位疫苗 是将病毒的衣壳蛋白与核酸分开,除去核酸用提纯的蛋白质衣壳制成的疫苗 。 此类苗保含有病毒的抗原成分,无核酸,因而无不良反应,使用安全,效果较好 。 猪口蹄疫,伪狂犬病,
狂犬病等亚单位疫苗已有成功的试验报道 。 亚单位疫苗由于制备困难,价格昂贵 。
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（ 4） 生物技术疫苗 生物技术疫苗是利用生物技术制备的分子水平的疫苗,包括基因工程亚单位疫苗,合成肽疫苗,抗独特型疫苗,基因工程活疫苗以及 DNA疫苗 。
基因工程亚单位疫苗 基因工程亚单位疫苗是用 DNA重组技术，将编码病原微生物保护性抗原的基因导人受体菌 (如大肠杆菌 )或细胞，使其在受体细胞中高效表达，分泌保护性抗原肽链。
提取保护性抗原肽链，加入佐剂即制成基因工程亚单位疫苗。
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合成肽疫苗 合成肽疫苗是用化学合成法，人工合成病原微生物的保护性多肽，并将其连接到大分子载体上，再加入佐剂制成的疫苗。
抗独特型疫苗 抗独特型疫苗是免疫调节网络学说发展到新阶段的产物。抗独特型抗体，可刺激机体产生与抗原特异性抗体具有同等免疫效应的抗体。但制备不易，成本较高。
基因工程活疫苗 基因工程活疫苗包括基因缺失疫苗和重组活载体疫苗及非复制性疫苗三类。
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基因缺失疫苗 是用基因工程技术将强毒株毒力相关基因切除构建的活疫苗。该苗安全性好、不易返祖、免疫力坚实、免疫期长、适于局部接种，
诱导产生黏膜免疫力，因而是较理想的疫苗。
重组活载体疫苗 是用基因工程技术将保护性抗原基因 (目的基因 )转移到载体中，使之表达。痘病毒、腺病毒和疱疹病毒等可作载体。
非复制性疫苗 又称活 -死疫苗，与重组活载体疫苗类似，但载体病毒接种后只产生顿挫感染，不能完成复制过程，无排毒的隐患，同时又可表达目的抗原，产生有效的免疫保护。
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DNA疫苗 这是一种最新的分子水平的生物技术疫苗，将编码保护性抗原的基因与能在真核细胞中表达的载体 DNA重组，重组的 DNA可直接注射 (接种 )到动物 (如小鼠 )体内，目的基因可在动物体内表达，刺激机体产生体液免疫和细胞免疫。
（ 5） 多价苗与联苗 多价苗 是指将同一种细菌
(或病毒 )的不同血清型混合制成的疫苗 。 如巴氏杆菌多价苗,大肠杆菌多价苗等 。 联苗 是指由两种以上的细菌 (或病毒 )联合制成的疫苗,一次免疫可达到预防几种疾病的目的 。
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3.疫苗的使用免疫途径 接种疫苗的方法有滴鼻、点眼、刺种、
注射、饮水和气雾等。
家禽免疫可采用滴鼻、点眼、饮水、注射及气雾等多种途径。
滴鼻与点眼 免疫效果较好，仅用于接种弱毒疫苗，
可直接刺激眼底哈德腺和结膜下弥散淋巴组织等，
产生局部免疫。
饮水免疫 是最方便的疫苗接种方法,但免疫效果较差,不适于初次免疫 。
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刺种与注射 也是常用的免疫方法，适于某些弱毒苗如鸡痘与马立克病免疫。另外灭活苗的免疫也必须用注射的方法进行。刺种与注射方法免疫确实，效果好。
气雾免疫 分为喷雾免疫和气溶胶免疫两种方式。喷雾免疫的雾粒大小为 10-100um，在新城疫免疫中，气雾免疫效果较好，不仅可诱导产生循环抗体，而且也可产生局部免疫力，但气雾免疫会造成一定程度的应激反应，容易引起呼吸道感染。
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4.免疫程序 免疫程序应根据疫病在本地区的流行情况及规律,畜禽的用途 (种用,肉用或蛋用 ),年龄,母源抗体水平和饲养条件,以及使用疫苗的种类,性质,免疫途径等方面的因素制定,不宜作统一规定 。 免疫程序应随情况的变化而作适当的调整,不存在普遍适用的最佳免疫程序 。 动物的抗体监测是重要的参考依据 。
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第三节 佐剂与免疫增强剂一,佐剂 一种物质先于抗原或与抗原混合同时注入动物体内,能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答,发挥辅助作用,这类物质统称为 佐剂 或 免疫佐剂 。
（ 一 ） 佐剂的作用 可 增强抗原 物质的抗原性外,
还可通过加入佐剂 减少抗原用量 和接种次数,增强 抗原所激发的 抗体应答,达到产生大量特异性抗体的目的 。
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（ 二 ） 佐剂的作用方式
1,在接种部位形成抗原贮存库 使抗原缓慢释放,
延长抗原在局部组织内的滞留时间,较长时间使抗原与免疫细胞接触并激发对抗原的应答 。
2,增加抗原的表面积 提高抗原的免疫原性,辅助抗原暴露并将能刺激特异性免疫应答的抗原表位递呈给免疫细胞 。
3,促进局部的炎症反应 增强吞噬细胞的活性,
促进免疫细胞的增殖与分化,诱导细胞因子的分泌 。
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（ 三 ） 佐剂的类型
1.不溶性铝盐类佐剂 是一类在疫苗上应用很广泛的佐剂，通常使用的主要有氢氧化铝胶、明矾、磷酸三钙等。
2.油水乳剂佐剂 是用矿物油、乳化剂 (如 Span-80、
Tween-80)及稳定剂 (硬脂酸铝 )，按一定比例混合作为油相，然后与抗原液混合制成各种类型的油水乳剂，例如油包水型乳剂 (W/O)，水包油包水型双乳化佐剂等。
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3.蜂胶佐剂 蜂胶是蜜蜂采自植物幼芽分泌的树脂，
并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂蜡、花粉及其他一些有机与无机物的一种天然物质。它作为佐剂具有良好的免疫增强作用。
4.合成佐剂 这类佐剂有胞壁酰二肽 (MDP)及其衍生物等 。
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二,免疫增强剂免疫增强剂是指一些单独使用即能引起机体出现短暂的免疫功能增强作用的物质,有的可与抗原同时使用,有的佐剂本身也是免疫增强剂 。
免疫增强剂的种类繁多,主要有以下几类：
1.生物性免疫增强剂 这类免疫增强剂有转移因子,
免疫核糖核酸 (iRNA),胸腺激素,干扰素,植物及中药多糖成分 。
2.细菌性免疫增强剂 包括小棒状杆菌,卡介苗,细菌脂多糖等 。
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3.化学性免疫增强剂 有左旋咪唑,吡喃,梯洛龙,
多聚核苷酸等 。
4.营养性免疫增强剂 包括维生素,微量元素等 。
免疫增强剂可用于治疗某些传染病如真菌感染,免疫性疾病如免疫缺陷,免疫抑制性疾病,以及非免疫性疾病如肿瘤 。
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