课件 002 兽医微生物学教学课件 1
兽医微生物学兽医微生物学
(多媒体教学课件 )
天津农学院动科系动物预防医学教研室制作
2003/02/28
课件 002 兽医微生物学教学课件 3
绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、
致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、
微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定等 。
内容简介课件 002 兽医微生物学教学课件 4
第十五章 革兰氏阳性球菌第十六章 肠杆菌科第十七章 弧菌科第十八章 巴氏杆菌科及相关属第十九章 革兰氏阴性需氧杆菌第二十章 革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌第二十一章 革兰氏阳性无芽孢杆菌第二十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌第二十三章 分支杆菌及相似属第二十四章 螺旋体第二十五章 霉形体第二十六章 立克次体及衣原体课件 002 兽医微生物学教学课件 5
第二十五章 霉 形 体 等第一节 概述第二节 猪霉形体第三节 禽霉形体第四节 牛羊的致病霉形体第五节 其他微生物课件 002 兽医微生物学教学课件 6
第二十五章 霉形体第一节 概述霉形体 又称 支原体,是一类 无细胞壁 的原核单细胞微生物 。 多形性,能通过细菌滤器,能在人工培养基中生长繁殖,含有 DNA和 RNA,二分裂或芽生繁殖 。
1,分布 广泛分布环境和动植物体中,常污染实验室的细胞培养及生物制品,有的种对人或畜禽有致病性 。
2,分类 为柔膜体纲,有 8个属 。 兽医学的主要对象为霉形体属及脲原体属的成员 。
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3,形态结构形态大小 无细胞壁,故具有 多形性 和 滤过性 。 常呈球状,两极状,环状,杆状和丝状 。 革兰氏染色呈阴性 。
结构 无细胞壁,细胞膜具有三层结构,内,
外层主要是蛋白质,中间层主要是脂质 。
其他胞质,核体等与细菌相似 。
4,繁殖方式 以二分裂为主,也有出芽等 。
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5,培养特性 霉形体的核质是一个环形双股 DNA，
但分子量较小,生物合成能力较弱 。
营养要求较高 培养基中除基础营养外,需牛心浸液,酵母膏,辅酶 I,氨基酸等,有的需要加 10％ -20％ 的动物血清 。 为抑制细菌生长,常加入青霉素,醋酸铊,叠氮钠等药物 。
有氧条件 有氧生长良好,在 5％ CO2和 95％ N2
的环境中,生长为佳 。 适宜温度为 36℃ 。
生长缓慢 在琼脂培养基上孵育 2-6d,才长出低倍显微镜下可见的微小菌落 （ 10-600um）,典型菌落呈,煎荷包蛋状,。
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可在鸡胚卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长,也能在细胞培养液中生长 。
6,理化特性 根据对糖类分解能力,分为两群 。 一群能分解多种糖类 产酸不产气,称 发酵型 ；另一群 不能分解糖,称为 非发酵型,但 能利用精氨酸作为碳素和能量来源 。
某些菌株在含血液的培养基中其菌落周围可形成 β型 或 α型溶血 。
禽败血霉形体,肺炎霉形体的菌落能吸附禽类红细胞 。
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β型或 α型溶血病毒红细胞凝集
（ HA）
病毒红细胞凝集抑制
（ HI）
霉形体菌落吸附禽类红细胞血细胞吸附试验 禽败血霉形体能与禽红细胞上的唾液酸相结合，而发生吸附。特异性抗血清可抑制红 细胞的吸附活性。
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7,抵抗力 霉形体对理化因素敏感 。 但对 醋酸铊,
结晶紫等有较强的抵抗力 。
对 青霉素,先锋霉素有抵抗作用,对影蛋白质合成的抗生素如 泰乐菌素,强力霉素,红霉素,
支原净 等敏感 。
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8.致病性病原性 常感染动物 呼吸道,泌尿生殖道,乳腺,
眼,腹膜,关节滑液囊膜 等 。 主要营寄生生活,单独感染症状轻微,当细菌或病毒等继发感染或受外界不利因素的作用,引起疾病 。
疾病特点是潜伏期长,呈慢性经过,地方性流行 。
致病菌主要有 猪肺炎霉形体,禽败血霉形体,滑液囊霉形体,牛羊霉形体 （ 牛肺疫,肺炎,关节炎,
乳房炎 ） 等 。
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9,微生物学诊断 取病料分离培养和形态学,理化及血清学鉴定 。
（ 1） 分离培养 将无菌病料用液体培养基稀释,
再稀释至 10-5-10-6,37℃ 培养 2-7d。 初代培养未发生颜色变化时可盲目传代 2-3次 。 初代分离时在含有 5％ -10％ CO2的环境中生长更佳 。 固体培养基接种后须置高湿环境培养 。
（ 2） 生理生化性状测定 毛地黄苷敏感性测定,
葡萄糖,精氨酸分解试验 。
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（ 3） 血清学鉴定 血清学试验方法中特异性较强,
敏感性较高,应用较多的是 生长抑制试验 和 表面免疫荧光试验 。
生长抑制试验 (GIT) 霉形体在固体培养基上生长可被相应的抗血清所抑制,常用圆纸片法 。
表面免疫荧光法 用已知抗血清制成荧光抗体,
直接染色琼脂块上的霉形体菌落,在荧光显微镜下观察菌落的特异性荧光 。
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第二节 猪的霉形体以猪为宿主的霉形体有 猪肺炎霉形体,猪鼻霉形体,猪滑液霉形体 等 。 对猪具有致病性的是前 3种 。
猪肺炎霉形体 猪地方流行性肺炎 (猪喘气病 )的病原 。
1,形态及染色 形态多样,大小不等 。 可通过 0.3um
孔径滤膜,革兰氏阴性,姬姆萨或瑞氏染色良好 。
2,培养及生化特性 兼性厌氧,对营养要求更高,
在 A26的液体培养基中,37℃ 培养 2-10d可长成直径
25-100um的菌落,但不呈,煎荷包蛋状,。
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3,抵抗力 对外界环境的抵抗力较弱,存活一般不超过 26h。 病原体在 -15℃ 可保存 45d,在甘油中
0℃ 可保存 8个月 。 经冷冻干燥的培养物在 4℃ 可存活 4年 。
对常用化学消毒剂敏感 。 对 泰乐菌素,螺旋霉素,林可霉素敏感；青霉素,链霉素,红霉素和磺胺对其无效 。
4.致病性与免疫性致病性 仅感染猪,引起猪地方流行性肺炎 。
幼猪最为易感 。 不良的环境因素和继发感染,常使病情加剧 。
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免疫性 康复猪具有较坚强的免疫力 。 我国研制的猪喘气病冻干兔化弱毒菌苗,有一定的免疫效果 。
5,微生物学诊断 一般根据临床症状,病理刻检,
结合流行病学即可确诊 。 x光检查具有重要诊断价值 。 必要时可进行微生物学诊断 。
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第三节 禽的霉形体禽的霉形体有多种,如 禽败血霉形体,滑液霉形体,火鸡霉形体 等 。
禽败血霉形体又名 鸡毒霉形体 。 是引起鸡和火鸡等多种禽类慢性呼吸道病 (CRD)或火鸡传染性窦炎的病原 。
1,形态及染色 菌体多形性 （ 直径 0.2-0.5um） 。
姬姆萨或瑞氏染色色良好,革兰氏阴性 。
2,培养及生化特性 需氧和兼性厌氧,对营养要求较高 。
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在含马血清或灭活鸡,猪血清的培养基中生长良好,一般常用牛心浸出液培养基,用前加入 10
％ -20％ 马血清,为了抑制杂菌的生长需加入 醋酸铊 (1,4000倍 )和 青霉素 1000IU/mL,调 pH 7.8-8.0。
培养 在液体培养基中,37℃ 经 2-5d可呈现轻度浑浊，在固体培养基上经 3-10d，可形成圆形露滴样小菌落，直径约 0.2-0.3mm。
在 5-7d龄 鸡胚卵黄囊 内繁殖良好，并可使鸡胚在接种后 5-7d内死亡。
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3,抵抗力 对理化因素的抵抗力不强 。 在肉汤培养物中 -30℃ 能存活 2-4年,冻干后在 -4℃ 能存活 7年 。
在卵黄中 37℃ 能存活 8周,在孵化的鸡胚中 45.6℃ 经
12-24h可被灭活 。 对 泰乐菌素,红霉素等敏感 。
4,致病性与免疫性 本菌主要感染鸡和火鸡,引起
CRD。 病原体存在于病鸡和带菌鸡的 呼吸道,卵巢,
输卵管 和 公鸡精液 中,带菌鸡胚 可垂直传递 给后代 。
应激因子 可协同作用,使病情恶化,症状明显 。
大肠杆菌特别是 O78,O2,Ol株继发感染 。
常见窦炎,气管炎,气囊炎 。
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免疫性 血清抗体可用于检测,但不能产生免疫保护 。 弱毒菌苗免疫力不强 。
5,微生物学诊断 分离不易,主要靠血清学试验快速诊断 。
血清学诊断 常用平板 凝集试验,试管凝集试验等 。
抽样检查,检出抗体阳性鸡,判为阳性鸡群 。
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滑液霉形体
1,致病及生化性 致鸡和火鸡 传染性滑液囊炎,并可通过蛋传播 。 营养要求更高 。
2,微生物学诊断 采取病鸡的 关节渗出液,肝,脾等为材料,分离培养 。 菌落压片用荧光抗体,酶标抗体检查鉴定 。
尚无本菌的疫苗应用 。
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复习思考题
1,什么是霉形体?与其他微生物比较有何特点?
2,霉形体与细菌 L型的相似与区别 。
3,如何鉴别霉形体菌落,细菌菌落及细菌 L型菌落?
4,目前霉形体,种,的鉴定主要依据什么?
5,试述猪肺炎霉形体致病特点及诊断要点 。
6,禽败血霉形体致鸡的何种疾病?如何诊断? 。
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绪言 共六部分，介绍微生物与微生物学的概念，微生物学发展简史，微生物学理论与技术成就及应用，兽医微生物学的地位、任务与贡献。
细菌总论 共七章，介绍细菌的形态、构造、生理，消毒与灭菌，细菌生态、
致病机理、遗传变异，细菌分类与命名等。
免疫基础 共七章，介绍抗原抗体，免疫系统，抗感染免疫，变态反应，免疫调节，免疫技术及应用等。
细菌各论 共十二章，介绍各属重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、
微生物学诊断和免疫防治等。
真菌 共二章，介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性，真菌病的诊断与防治等。
病毒 共十四章，介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养，病毒的致病性。各科属重要病毒形态、生化及致病特性，微生物学诊断和防治等。
实验 共十多个，显微镜油镜的使用，细菌形态及构造观察，细菌抹片制备及染色，培养基的制备，细菌的分离培养、生长表现观察、生化试验、药敏试验，沉淀反应和凝集反应，重要病原菌的认识，真菌与病毒培养测定等 。
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第十五章 革兰氏阳性球菌第十六章 肠杆菌科第十七章 弧菌科第十八章 巴氏杆菌科及相关属第十九章 革兰氏阴性需氧杆菌第二十章 革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌第二十一章 革兰氏阳性无芽孢杆菌第二十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌第二十三章 分支杆菌及相似属第二十四章 螺旋体第二十五章 霉形体第二十六章 立克次体及衣原体课件 002 兽医微生物学教学课件 5
第二十五章 霉 形 体 等第一节 概述第二节 猪霉形体第三节 禽霉形体第四节 牛羊的致病霉形体第五节 其他微生物课件 002 兽医微生物学教学课件 6
第二十五章 霉形体第一节 概述霉形体 又称 支原体,是一类 无细胞壁 的原核单细胞微生物 。 多形性,能通过细菌滤器,能在人工培养基中生长繁殖,含有 DNA和 RNA,二分裂或芽生繁殖 。
1,分布 广泛分布环境和动植物体中,常污染实验室的细胞培养及生物制品,有的种对人或畜禽有致病性 。
2,分类 为柔膜体纲,有 8个属 。 兽医学的主要对象为霉形体属及脲原体属的成员 。
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3,形态结构形态大小 无细胞壁,故具有 多形性 和 滤过性 。 常呈球状,两极状,环状,杆状和丝状 。 革兰氏染色呈阴性 。
结构 无细胞壁,细胞膜具有三层结构,内,
外层主要是蛋白质,中间层主要是脂质 。
其他胞质,核体等与细菌相似 。
4,繁殖方式 以二分裂为主,也有出芽等 。
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5,培养特性 霉形体的核质是一个环形双股 DNA，
但分子量较小,生物合成能力较弱 。
营养要求较高 培养基中除基础营养外,需牛心浸液,酵母膏,辅酶 I,氨基酸等,有的需要加 10％ -20％ 的动物血清 。 为抑制细菌生长,常加入青霉素,醋酸铊,叠氮钠等药物 。
有氧条件 有氧生长良好,在 5％ CO2和 95％ N2
的环境中,生长为佳 。 适宜温度为 36℃ 。
生长缓慢 在琼脂培养基上孵育 2-6d,才长出低倍显微镜下可见的微小菌落 （ 10-600um）,典型菌落呈,煎荷包蛋状,。
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可在鸡胚卵黄囊或绒毛尿囊膜上生长,也能在细胞培养液中生长 。
6,理化特性 根据对糖类分解能力,分为两群 。 一群能分解多种糖类 产酸不产气,称 发酵型 ；另一群 不能分解糖,称为 非发酵型,但 能利用精氨酸作为碳素和能量来源 。
某些菌株在含血液的培养基中其菌落周围可形成 β型 或 α型溶血 。
禽败血霉形体,肺炎霉形体的菌落能吸附禽类红细胞 。
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β型或 α型溶血病毒红细胞凝集
（ HA）
病毒红细胞凝集抑制
（ HI）
霉形体菌落吸附禽类红细胞血细胞吸附试验 禽败血霉形体能与禽红细胞上的唾液酸相结合，而发生吸附。特异性抗血清可抑制红 细胞的吸附活性。
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7,抵抗力 霉形体对理化因素敏感 。 但对 醋酸铊,
结晶紫等有较强的抵抗力 。
对 青霉素,先锋霉素有抵抗作用,对影蛋白质合成的抗生素如 泰乐菌素,强力霉素,红霉素,
支原净 等敏感 。
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8.致病性病原性 常感染动物 呼吸道,泌尿生殖道,乳腺,
眼,腹膜,关节滑液囊膜 等 。 主要营寄生生活,单独感染症状轻微,当细菌或病毒等继发感染或受外界不利因素的作用,引起疾病 。
疾病特点是潜伏期长,呈慢性经过,地方性流行 。
致病菌主要有 猪肺炎霉形体,禽败血霉形体,滑液囊霉形体,牛羊霉形体 （ 牛肺疫,肺炎,关节炎,
乳房炎 ） 等 。
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9,微生物学诊断 取病料分离培养和形态学,理化及血清学鉴定 。
（ 1） 分离培养 将无菌病料用液体培养基稀释,
再稀释至 10-5-10-6,37℃ 培养 2-7d。 初代培养未发生颜色变化时可盲目传代 2-3次 。 初代分离时在含有 5％ -10％ CO2的环境中生长更佳 。 固体培养基接种后须置高湿环境培养 。
（ 2） 生理生化性状测定 毛地黄苷敏感性测定,
葡萄糖,精氨酸分解试验 。
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（ 3） 血清学鉴定 血清学试验方法中特异性较强,
敏感性较高,应用较多的是 生长抑制试验 和 表面免疫荧光试验 。
生长抑制试验 (GIT) 霉形体在固体培养基上生长可被相应的抗血清所抑制,常用圆纸片法 。
表面免疫荧光法 用已知抗血清制成荧光抗体,
直接染色琼脂块上的霉形体菌落,在荧光显微镜下观察菌落的特异性荧光 。
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第二节 猪的霉形体以猪为宿主的霉形体有 猪肺炎霉形体,猪鼻霉形体,猪滑液霉形体 等 。 对猪具有致病性的是前 3种 。
猪肺炎霉形体 猪地方流行性肺炎 (猪喘气病 )的病原 。
1,形态及染色 形态多样,大小不等 。 可通过 0.3um
孔径滤膜,革兰氏阴性,姬姆萨或瑞氏染色良好 。
2,培养及生化特性 兼性厌氧,对营养要求更高,
在 A26的液体培养基中,37℃ 培养 2-10d可长成直径
25-100um的菌落,但不呈,煎荷包蛋状,。
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3,抵抗力 对外界环境的抵抗力较弱,存活一般不超过 26h。 病原体在 -15℃ 可保存 45d,在甘油中
0℃ 可保存 8个月 。 经冷冻干燥的培养物在 4℃ 可存活 4年 。
对常用化学消毒剂敏感 。 对 泰乐菌素,螺旋霉素,林可霉素敏感；青霉素,链霉素,红霉素和磺胺对其无效 。
4.致病性与免疫性致病性 仅感染猪,引起猪地方流行性肺炎 。
幼猪最为易感 。 不良的环境因素和继发感染,常使病情加剧 。
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免疫性 康复猪具有较坚强的免疫力 。 我国研制的猪喘气病冻干兔化弱毒菌苗,有一定的免疫效果 。
5,微生物学诊断 一般根据临床症状,病理刻检,
结合流行病学即可确诊 。 x光检查具有重要诊断价值 。 必要时可进行微生物学诊断 。
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第三节 禽的霉形体禽的霉形体有多种,如 禽败血霉形体,滑液霉形体,火鸡霉形体 等 。
禽败血霉形体又名 鸡毒霉形体 。 是引起鸡和火鸡等多种禽类慢性呼吸道病 (CRD)或火鸡传染性窦炎的病原 。
1,形态及染色 菌体多形性 （ 直径 0.2-0.5um） 。
姬姆萨或瑞氏染色色良好,革兰氏阴性 。
2,培养及生化特性 需氧和兼性厌氧,对营养要求较高 。
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在含马血清或灭活鸡,猪血清的培养基中生长良好,一般常用牛心浸出液培养基,用前加入 10
％ -20％ 马血清,为了抑制杂菌的生长需加入 醋酸铊 (1,4000倍 )和 青霉素 1000IU/mL,调 pH 7.8-8.0。
培养 在液体培养基中,37℃ 经 2-5d可呈现轻度浑浊，在固体培养基上经 3-10d，可形成圆形露滴样小菌落，直径约 0.2-0.3mm。
在 5-7d龄 鸡胚卵黄囊 内繁殖良好，并可使鸡胚在接种后 5-7d内死亡。
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3,抵抗力 对理化因素的抵抗力不强 。 在肉汤培养物中 -30℃ 能存活 2-4年,冻干后在 -4℃ 能存活 7年 。
在卵黄中 37℃ 能存活 8周,在孵化的鸡胚中 45.6℃ 经
12-24h可被灭活 。 对 泰乐菌素,红霉素等敏感 。
4,致病性与免疫性 本菌主要感染鸡和火鸡,引起
CRD。 病原体存在于病鸡和带菌鸡的 呼吸道,卵巢,
输卵管 和 公鸡精液 中,带菌鸡胚 可垂直传递 给后代 。
应激因子 可协同作用,使病情恶化,症状明显 。
大肠杆菌特别是 O78,O2,Ol株继发感染 。
常见窦炎,气管炎,气囊炎 。
课件 002 兽医微生物学教学课件 21
免疫性 血清抗体可用于检测,但不能产生免疫保护 。 弱毒菌苗免疫力不强 。
5,微生物学诊断 分离不易,主要靠血清学试验快速诊断 。
血清学诊断 常用平板 凝集试验,试管凝集试验等 。
抽样检查,检出抗体阳性鸡,判为阳性鸡群 。
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滑液霉形体
1,致病及生化性 致鸡和火鸡 传染性滑液囊炎,并可通过蛋传播 。 营养要求更高 。
2,微生物学诊断 采取病鸡的 关节渗出液,肝,脾等为材料,分离培养 。 菌落压片用荧光抗体,酶标抗体检查鉴定 。
尚无本菌的疫苗应用 。
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1,什么是霉形体?与其他微生物比较有何特点?
2,霉形体与细菌 L型的相似与区别 。
3,如何鉴别霉形体菌落,细菌菌落及细菌 L型菌落?
4,目前霉形体,种,的鉴定主要依据什么?
5,试述猪肺炎霉形体致病特点及诊断要点 。
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