本科生分子生物学试卷(三) —.选择题(每题只选一个答案,每题1.5分) 1.有关DNA链的描述哪条不对 A.DNA是由很多脱氧单核苷酸形成的多核苷酸 B.DNA5’端是-OH基,3’端是磷酸 C.DNA一级结构的书写为P:pACTGAC D.单核苷酸之间通过磷酸二酯键相连 E.DNA的一级结构是指dAMP,dGMP,dCMP,dTMP的排列 2.有关DNA变性的描述哪条对?      A.DNA变性时粘度增加  B.变性时磷酸二酯键断裂      C.DNA变性温度的中点叫TmD.DNA变性时紫外吸收增加      E.DNA变性时280nm波长吸收增加 3.DNA聚合酶催化的反应      A.催化四种单核苷酸的聚合      B.需要DNA做引物      C.DNA聚合酶有种属特异性      D.产物DNA的性质取决于模板,与DNA聚合酶来源无关      E.沿着3’-5’方向合成 4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式:      A.环式  B.D-环式 C.半保留      D.全保留 E.散布式 5.真核细胞mRNA的加互修饰不包括:      A.除去非结构信息部分  B.在mRNA的3’末端加polyA尾巴      C.经过较多的甲基化过程 D.在mRNA的5’末端形成帽子结构      E.mRNA由核内不均一RNA转变而来 6.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码子?      A.苯丙氨酸;   B.酪氨酸;  C.甲硫氨酸;      D.S-腺苷蛋氨酸  E.以上均不是,而是TAG 7.翻译的起始不需要:      A.Met-tRNA  B.mRNA模板  C.核蛋白体      D.起始因子  E.dGTP 8.下面哪些因素可防止DNA上的一个点突变表现在蛋白质的一级结构?      A.DNA的修复作用    B.密码的简并性      C.校正tRNA的作用    D.核糖体对mRNA的校正      E.以上都正确 9.关于氨基酰tRNA合成酶,哪项不正确?      A.有20种,对应于20种氨基酸   B.可使酶识别tRNA和氨基酸      C.有α及/或β亚基        D.疏基酶      E.借次级键与相应的氨基酸结合 10.真核基因调控中最重要的环节是:      A.基因重排;   B.基因转录;  C.DNA的甲基化与去甲基化;      D.mRNA的半衰期; E.翻译速度;     二、名词解释(每题3分) 1.cDNA与cccDNA 2.CAP 3.回文序列: 4.micRNA: 5.核酶: 6.信号肽: 7.弱化子: 8.上游启动子元件: 9.DNA探针: 10.SD序列: 11.单克隆抗体: 12.顺式作用元件: 13.Klenow酶: 三.问答题 1. 激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用?(12分)? 2. 典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤?(12分) 3. 分别说出5种以上RNA的功能? (11分)? 4. 对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面? (11分) 本科生分子生物学试卷(三) —、单选题(每题只选一个答案,每题1.5分) 1.E 2. B 3. D. 4. C 5. A 6. C 7. C 8. E. 9. A 10. B 二、名词解释(每题3分) 1.cDNA与cccDNA:cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA;cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2.CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 3.回文序列:DNA片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。 4.micRNA:互补干扰RNA或称反义RNA,与mRNA序列互补,可抑制mRNA的翻译。 5.核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 6.信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。 7.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 8.上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。 9.DNA探针:是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。 10.SD序列:是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。 11.单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 12.顺式作用元件:在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。 13.Klenow酶:DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’ 3’外切酶活性 三.问答题 1. 激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用?(12分)? 答案要点:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMPactivated protein )。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征(TTGACA)。因此RNA聚合酶难以与其结合。 CAP的存在(功能):能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现以下二方面: ①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合,起到取代-35区功能的作用。 ②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合,从而提高与其特定启动子结合的概率。 2. 典型的DNA重组实验通常包括哪些步骤?(12分) 答案要点:a、提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形成一个新的重组DNA分子。 b、将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。 c、对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 d、对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。 3. 分别说出5种以上RNA的功能? (11分)? 答案要点: 转运RNA tRNA 转运氨基酸 核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成 信使RNA mRNA 蛋白质合成模板 不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体 小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接 小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分 反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用 核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的RNA 4. 对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面? (11分) 答案要点:天然质粒往往存在着缺陷,因而不适合用作基因工程的载体,必须对之进行改造构建: a、加入合适的选择标记基因,如两个以上,易于用作选择,通常是抗生素基因。 b、增加或减少合适的酶切位点,便于重组。 c、缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。 d、改变复制子,变严紧为松弛,变少拷贝为多拷贝。