本科分子生物学试卷（五） 名词解释（14） 1. C-值 2. 内含子 3. 锌指（zinc finger） 4. 转座子 5. 基因家族 二、填空题（20） 1. 酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为________,G为__________和C为____________。 2. 操纵子包括_______、_________和__________。 3. DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是 、 、 、 、 。 4. 在琼脂糖电泳中，DNA会向 极移动。 5. 染色体包括 、 两大部分。 6. 环状DNA双链的复制主要可分为 、 、 三种类型。 7. 转录的基本过程包括 、 、 。 三、判断题（10） （对在题后的括号里划“√”，错的划“ⅹ”并说明理由） 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。（ ） 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物，开放性启动子复合物为三元复合物。（ ） 3. 半保留复制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基因是上一代的。（ ） 4. 基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA 。( ) 8. 对正调控和负调控操纵子而言，诱导物都能促进基因的转录。（ ） 四、问答题（46） 1. 简述遗传密码的性质（6） 2.简述tRNA的结构特征及其作用与作用机制。(8) 3. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。（8） 4. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分结构（12） 5. 比较原核生物与真核生物基因组结构的不同，并指出真核生物细胞的RNA内含子剪接的主要方式（12）。 五、实验题（10）（任选一题，全作该题不得分） 1. 简述PCR原理。 设计一个实验证明DNA的复制是半保留复制。 本科分子生物学（五）参考答案 名词解释（每个2′，共10′） 1. C-值（C-value）：通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。 2. 内含子(intron)：指基因组中的非编码序列。 3. 锌指（zinc finger） ：属于反式作用因子，其特有的半胱氨酸和组氨酸之间氨基酸残基数基本恒定，有锌参与才具备转录调控活性。 4. 转座子(transposon) ：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 5. 基因家族(gene family)：真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合，被称为基因家族。 二、填空题（每空1′，共20′） 1. A为32.8%,G为17.2%，C为17.2%。 2. 调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 3. 模板DNA，TAQ 酶，引物，缓冲液，dNTP。 4. 正。 5. 蛋白质，染色体。 6.θ形，滚环形，D-环形。 7. 转录的起始，延伸，终止。 三、判断题（每题2′，共10′） （对在题后的括号里划“√”，错的划“╳”并说明理由） 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。（╳ ） 答：没有细胞或组织的特异性。 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物，开放性启动子复合物为三元复合物。（ √ ） 3. 半保留复制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基因是上一代的。（ ╳ ） 答：半保留复制指的是复制时只能以一条链为模板，复制出新链，后代与前代有相同的遗传信息。 4. 基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA 。(╳ ) 答：都是RNA 5. 对正调控和负调控操纵子而言，诱导物都能促进基因的转录。（ √ ） 四、问答题（24′） 1. 简述遗传密码的性质（6′） 答案要点：简并性；通用性；特殊性 2.简述tRNA的二级结构特征并指明作用与作用机制。(8′) 答案要点：其结构见朱玉贤教材p109： 1. tRNA携带AA，是一种酶促反应，也称AA的活化 2、 氨基酰是tRNA 是AA参与蛋白合成的活化形式。 AA的活化：氨基酸+ATP-E 氨基酸-AMP-E+PPi 3、 每活化一分子AA需消耗ATP的2个高能磷酸键。 AA的转移：氨基酸+ AMP-E+ tRNA 氨基酸-tRNA+AMP+E 4、 氨基酰tRNA合成酶是高度专一性，既能高度特异性识别AA，又能高度特异性识别相应，这两点是保证翻译准确进行的基本条件之一。 5.氨基酰AMP-E复合体：作为中间产物，利于酶分别对AA和tRNA两种底物特异辨认，如有错配，合成酶有校正活性，水解磷酸酯键，与正确底物结合。 2. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分名称（10′） 答案要点：有：DNA解旋酶、DNA旋转酶、DNA单链结合蛋白、RNA引物、DNA连接酶、DNA聚合酶、其它成分。图略。 五 论述题（两题，共26′） 1. 比较原核生物与真核生物基因组结构的异同，并指出真核生物细胞的RNA内含子剪接的主要方式（12′）。 答案要点：主要从重复序列情况，有无内含子外显子方面论述，剪接的主要方式指GU-AG和 AU-AC类内含子的间接以及I、II类内含子的间接方式。 2. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。（14′） 答案要点：共同点是两者主要是在转录水平进行调控；不同点是原核生物转录与翻译偶联，以操纵子调控的现象普遍；真核生物基因表达复杂，转录和翻译是分开的，转录后从细胞核进入细胞质，调控因此也比较复杂，在DNA水平、转录水平和翻译水平均存在。 六、实验题（10′）（任选一题，全作该题不得分） 1. 简述PCR原理。 答案要点：PCR是在体外扩增DNA序列的方法，原理并不复杂，首先将双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子，DNA聚合酶以单链DNA 为模板并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸合成新生的DNA互补链。包括：DNA解链（变性）、引物与模板DNA结合（退火）DNA合成（延伸）三步，可以被不断重复。 2. 设计一个实验证明DNA的复制是半保留复制。 答案要点：先将大肠杆菌放在15NH4C1培养基中生长多代，使几乎所有的DNA都被15N标记后，再将细菌移到只含有14NH4C1的培养基中培养。随后，在不同的时间取出样品，用十二烷硫酸钠(SDS)裂解细胞后，将裂解液放在CsC1溶液中进行密度梯度离心(140000g，20小时)。离心结束后，从管底到管口，溶液密度分布从高到低形成密度梯度。DNA分子就停留在与其相当的CsC1密度处，在紫外光下可以看到形成的区带。14N - DNA分子密度较轻(1.7g / cm3)，停留在离管口这较近的位置; 15N - DNA密度较大停留在较低的位置上。当含有15N-DNA的细胞在14NH4C1培养液中培养一代后，只有一条区带介于14N - DNA与15N - DNA之间，这时在15N-DNA区已没有吸收带，说明这时的DNA一条链来自15N - DNA，另一条链为新合成的含有14N的新链。培养两代后则在14N - DNA区又出现一条带。在14NH4C1中培养的时间愈久，14N -DNA区带愈强，而14N -15N DNA区带逐渐减弱，但始终未出现其他新的区带。按照半保留复制方式培养两代，只能出现14N -15N DNA两种分子，而且随着代数的增加14N -DNA逐渐增加。