本科生分子生物学试卷（二） 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题1.5分，共30分） 　　1.DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确： 　　　A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 　　　B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似 　　　C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧 　　　D.二股多核苷酸链通过A-T,C-T之间的氢键连接 　　　E.维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。 　　2.有关DNA的变性哪条正确： 　　　A.变性是分子中磷酸二酯键的断裂 　　　B.变性后紫外吸收增加 　　　C.变性后粘度增加 　　　D.热变性DNA速冷后可复性 　　　E.DNA分子开始变性的温度叫Tm 　　3.DNA聚合酶III的描述中哪条不对： 　　　A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物 　　　B.具有5′→3′外切酶活性 　　　C.具有3′→5′外切酶活性 　　　D.具有5′→3′聚合活性 　　　E.聚合反应需要引物 　　4.有关反转录的正确叙述： 　　　A.反转录反应不需要引物 　　　B.反转录后的产物是cDNA 　　　C.反转录的板可以是RNA,也可以是DNA 　　　D.合成链的方向是3′→5′ 　　　E.反转录反应的底物是4种NTP。 　　5.有关蛋白质合成，下列哪条是错误的： 　　　A.基本原料是20种氨基酸 　　　B.直接模板是mRNA 　　　C.合成的方向是从羧基端到氨基础 　　　D.是一个多因子参加的耗能过程 　　　E.是多聚核蛋白体循环 　　6.在乳糖操纵子中，阻遏蛋白结合的是： 　　　A.操纵基因　　　B.调节基因 　　　C.启动基因　　　D.结构基因 　　　E.终止基因 　　7.氨基酸活化酶： 　　　A.能识别一组同功tRNA 　　　B.催化磷酸二酯键的形成 　　　C.催化氨基酸结合到tRNA 　　　D.催化氨基酸的氨基与tRNA结合 　　　E.催化氨基酸的羧基与GTP反应 　　8.稀有核苷酸含量最高的核酸是： 　　　A.tRNA　　　B.mRNA　　C.rRNA　　D.DNA　　E.hnRNA 　　9.真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是： 　　　A.翻译与转录偶联进行 　　　B.模板都是多顺反子 　　　C.转录后的产物都需要进行加工修饰 　　　D.甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸 　　　E.都需要GTP 　　10.与pCAGCT互补的DNA序列是： 　　　A.pAGCTG　　B.pGTCGA　　C.pGUCGA 　　　D.pAGCUG　　E.pTCGAC 　　11.色氨酸操纵子的调控需要： 　　　A.增强子　　B.转录子　　　C.衰减子 　　　D.顺反子　　E.调节子 　　12.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码： 　　　A.甲硫氨酸　B.S-腺苷蛋氨酸　　　C.苯丙氨酸 　　　D.丙氨酸　　E.以上都不是，而是TAG 　　13.真核细胞中mRNA的加工修饰不包括： 　　　A.在mRNA3′末端另polyA尾 　　　B.mRNA的前体是核内hnRNA 　　　C.在mRNA5′端形成7甲基尿苷酸帽子结构 　　　D.除去非结构信息部分 　　　E.不同RNA片断之间的拼接 　　14.真核生物基因组中没有： 　　　A.内含子　　　B.外显子　　C.转录因子 　　　D.插入序列　　E.高度重复序列 　　15.DNA的半保留复制需要 　　　A.核心酶和单链DNA结合蛋白　B.模板DNA和四种NTP 　　　C.引物和RNA聚合酶　　　　　D.DNA引物和连接酶 　　　E.冈崎片段和终止因子 　　16.PCR实验的特异性主要取决于 　　　A.DNA聚合酶的种类　　　　B.反应体系中模板DNA的量 　　　C.引物序列的结构和长度　　D.四种dNTP的浓度 　　　E.循环周期的次数 　　17.RNA电泳转移后与探针杂交叫作： 　　　A.Southernblot　　　B.Northernblot 　　　C.Westernblot　　　　D.斑点杂交 　　　E.原位杂交 　　18.对限制性核酸内切酶的作用，下列哪个不正确： 　　　A.识别序列长度一般为4-6bp 　　　B.识别序列具有回文结构 　　　C.切割原核生物D分子 　　　D.只能识别和切割双链DNA分子 　　　E.只能识别和切割原核生物DNA分子 　　19.在基因工程实验中，DNA重组体是指： 　　　A.不同来源的的两段DNA单链的复性 　　　B.目的基因与载体的连接物 　　　C.不同来原的DNA分子的连接物 　　　D.原核DNA与真核DNA的连接物 　　　E.两个不同的结构基因形成的连接物 　　20.对基因工程载体的描述，下列哪个不正确： 　　　A.都可以转入宿主细胞 　　　B.都有限制性核酸内切酶的识别位点 　　　C.都可以连接进目的基因 　　　D.都是环状双链DNA分子 　　　E.都有筛选标志 二、简答题（每题5分，共40分） 　　1.衰减子 　　2.DNA拓扑异构酶 　　3.基因表达? 　　4.前导肽? 　　5.启动子? 　　6. DNA分子克隆技术 　　7.G蛋白 　　8.受体型酪氨酸激酶 三、论述题（每题10分，共30分） 　　1.操纵子中的诱导剂和辅阻遏对基因表达的调控有何不同？ 　　2.细胞内第二信使包括哪些物质?它们是怎样产生的,有何作用?? 　　3.PCR和细胞内DNA复制两者有哪些主要的相同点和不同点? 本科生分子生物学试卷（二）参考答案 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题1.5分，共30分） 1.D；2.B；3.A；4.A；5.A；6.C；7.C ；8.C ；9.B； 10.E　 二、填空题（每题1分） 1．质粒DNA具有三种不同的构型分别是：（ SC构型 ）、（ oc构型 ）、（ L构型 ）。在电泳中最前面的是（ SC构型 ）。 2.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是（ TFIID ）、（ SP-1 ）和（ CTF/NF1 ）。 3. 与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种（ 螺旋-转角-螺旋 ）、（ 锌指模体 ）、（碱性-亮氨酸拉链模体 ）。 4. 转基因动物常用的方法有：（逆转录病毒感染法）、（DNA显微注射法）、（胚胎干细胞法 ）。 5. RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： （ D、A、B、E ）。其中TFII-D的功能是（与TATA盒结合 ）。 三、简答题（每题5分，共40分） 1.衰减子 答案要点：在色氨酸操纵子中，当mRNA合成起始以后，除非培养基中完全没有色氨酸，否则，转录总是在长162bp的前导区终止，产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子，终止trp基因转录，因为转录终止发生在这一区域，并且这种终止是被调节的，这个区域被称为衰减子。 2.DNA拓扑异构酶 答案要点：DNA在细胞内往往以超螺旋状态存在，DNA拓扑酶催化同一DNA分子不同超螺旋状态之间的转变。DNA拓扑异构酶有两类，大肠杆菌的ε蛋白(MW-110000)就是一种典型的拓扑异构酶Ⅰ.它的作用是暂时切断一条DNA链，形成酶-DNA共价中间物而使超螺旋DNA松弛化，然后再将切断的单链DNA连接起来，而不需要任何辅助因子。而大肠杆菌中的DNA旋转酶(DNAgyrase)则的典型的拓扑异构酶Ⅱ，能将负超螺旋引入DNA分子，该酶能暂时性地切断和重新连接双链DNA，同时需要ATP水解为ADP以供能。? 3.基因表达 ?答案要点：遗传信息从DNA到RNA再到蛋白质的过程。 4.前导肽 ?答案要点：分析色氨酸操纵子前导肽的序列发现，它包括起始密码子AUG和终止密码子UGA；如果翻译起始于AUG，应该产生一个14个氨基酸的多肽，这个假设的多肽被称为前导肽（实际上还没有观察到）。 5.启动子? 答案要点：启动子是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中，转录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始过程。 6. DNA分子克隆技术 答案要点：（也称基因克隆技术） 在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接，转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接，制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。载体（vecors）在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段。主要目的是获得某一基因或NDA片段的大量拷贝，有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库，一种是基因组文库（genomic library）,另一种是cDNA库。 7.G蛋白 答案要点：受体与配体结合后即与膜上的偶联蛋白结合，使其释放活性因子，再与效应器发生反应。位于受体与效应器之间的则是偶联蛋白。目前所知的偶联蛋白种类较多，都属于结构和功能极为类似的一个家族，由于它们都能结合并水解GTP，所以通常称G蛋白，即鸟苷酸调节蛋白（guanine nucleotide regulatory protein）。 8.受体型酪氨酸激酶 答案要点：蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase，PTK)是一组催化酪氨酸残基磷酸化的酶，他们通过从三磷酸腺苷上转移一个磷原子到酪氨酸残基上，而使底物蛋白活化. 目前，已发现PTK有100多个家族成员，他们通过活化底物蛋白，参与细胞的信号转导，最终，这些信号转导入细胞核内，引起某些基因表达水平的改变，使诸如细胞生长之类的复杂的细胞功能得以调节. 因此在调节细胞的分化、生长和激活中起到重要作用.根据PTK的结构，可分为受体型和非受体型PTK两大类，前者又称跨膜PTK，后者又称细胞内PTK. 生长因子受体PTK(受体型酪氨酸激酶或RTK): 这一类蛋白酪氨酸激酶为跨膜蛋白，其胞外部分为配体结合区，中间有跨膜区，胞内部分含有蛋白酪氨酸激酶的催化结构域. 根据他们的结构不同可分为，表皮生长因子受体(EGFR)家族、胰岛素受体家族、血小板衍生生长因子(PDGF)受体家族和成纤维细胞生长因子受体(FGFR)家族. 四、论述题（每题10分，共30分） 1. DNA与蛋白质相互作用研究方法及其原理？ 答案要点：1、凝胶阻滞实验； 2、DNaseI足迹实验。 原理参见朱玉贤高教（二）版《现代分子生物学》教材166~170页。 2.试述真核生物基因表达调控的一般规律?? 答案要点：分为两大类：（一）瞬时调控或称可逆调控，它相当于原核细胞对环境条件作出的反应，包括某种底物或激素水平升降时，或细胞不同阶段中酶活性的调节；（二）发育调控或称不可逆调控，是真核基因调控的精髓部分，它决定了真核细胞生长、分化、发育的全部进程。根据基因调控在同一事件中发生的先后次序，又可将其分为转录水平、转录后水平调控。后者又进一步分为RNA加工成熟过程调控、翻译水平调控和蛋白质加工水平的调控。 3.细胞内第二信使包括哪些物质?有何作用?? 答案要点：生物细胞的信号分子从溶解性来看又可分为脂溶性和水溶性两类。脂溶性信号分子，如甾类激素和甲状腺素，可直接穿膜进入靶细胞，与胞内受体结合形成激素-受体复合物，调节基因表达。水溶性信号分子，如神经递质、细胞因子和水溶性激素，不能穿过靶细胞膜，只能与膜受体结合，经信号转换机制，通过胞内信使（如cAMP）或激活膜受体的激酶活性（如受体酪氨酸激酶），引起细胞的应答反应。所以这类信号分子又称为第一信使（primary messenger），而cAMP这样的胞内信号分子被称为第二信使（secondary messenger）。目前公认的第二信使有cAMP、cGMP、三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DG），Ca2+被称为第三信使是因为其释放有赖于第二信使。第二信使的作用是对胞外信号起转换和放大的作用。