动物繁殖学实习指导 权凯 （动物繁殖组） 郑州牧业工程高等专科学校 畜牧工程系动物繁殖组 2005年7月22日 前言 实验实习指导是根据教学大纲编写的实验室及现场实习的指导材料，考虑到不同专业不同需要，在授课中可根据具体情况，安排全部或部分实验实习。生产实习和校内实训另有教材。 实验课是本课程的基本教学环节，原则上在校内进行。对学生进行动物繁殖的技能训练；务求正确使用仪器设备、操作规范化，某些内容则要求熟练掌握；鼓励学生开展小型科学研究活动。以下是动物繁殖学课程必须进行的实验内容： 实习一、母畜的直肠检查 掌握直检触摸大家畜卵巢和子宫的步骤，方法，要领和注意事项。判断卵泡的发育形态和适配时机。 实验二、人工授精器械的识别及假阴道的安装 掌握常规人工授精各个技术环节所必需的仪器设备的结构和原理。要求学生熟练掌握牛、羊、猪假阴道安装的技术过程及其洗涤、消毒。 实验三、采精 掌握采精前的各项准备工作，包括器械、人员、场地、种畜的准备和严格的卫生要求；各种家畜的采精技术和注意事项。 实验四、精液的直观指标检查和活力检查 熟悉衡量精液质量的指标，重点掌握精子活力检查的方法。 实验五、精子密度测定和畸形率测定 熟练掌握血球计数器进行精子密度测定的方法，要求反复训练，力求正确掌握。初步掌握用分光光度计和其它比色仪器进行密度测定的方法。 实习六、精液稀释液配制及精液稀释 掌握各种类型精液稀释液的成份、配方及配制方法，着重掌握配制方法及稀释方法和基本程序。 实习七、颗粒冻精的制作 掌握颗粒冻精制作的各个技术环节及规范，颗粒冻精的解冻技术和冷冻精液的正确保存以及冷冻精液在不同容器中的转移方法。 实习八、输精 要求学生掌握输精前母畜的准备，着重掌握输精技术，特别是母牛直肠把握法输精技术应反复训练，要求正确掌握。 实习九、妊娠判断 掌握孕畜的外部表现及生殖器官的变化，大家畜妊娠诊断直检法的触摸部位，孕畜卵巢、子宫的特征以及胎儿大小，胎膜有无等。 实习十、录像 通过观察专题录像片，使学生认识和掌握冻精制作、发情鉴定、输精技术、妊娠诊断、助产及胚胎移植等各项繁殖技术的规范操作方法。 目 录 实验一 母牛的直肠检查 4 一、实验目的 4 二、实验材料 4 三、实验内容 4 实验二、人工授精器械的识别及假阴道的安装 7 一、实验目的 7 二、实验器械设备 7 三、实验内容及进行步骤 7 四、作业 9 实验三、采精 10 一、实验目的 10 二、实验材料 10 三、实验内容 10 四、作业 11 实验四、精液的直观指标检查和活力检查 12 一、实验目的 12 二、实验材料 12 三、实验内容 12 实验五、精子密度和畸形率测定 15 一、实验目的 15 二、实验料材 15 三、实验内容 15 实习六、精液稀释液配制及精液稀释 18 一、实验目的 18 二、实验材料 18 三、实习内容 18 实习七、颗粒冻精的制作 20 一、实验目的 20 二、实验材料 20 三、实验内容 20 实验八 输精 22 一、实验目的 22 二、实验材料 22 三、实验内容 22 实习九、妊娠判断 24 一、外部检查法 24 二、阴道检查法 25 三、直肠检查法 25 实习十、录像 27 实验一 母牛的直肠检查 一、实验目的 1．掌握牛直肠检查的基本操作方法。 2．熟悉母牛生殖器官各部分的自然位置、形状、质地及相互关系，为通过直肠检查鉴定母畜发情状态、妊娠及生殖器官疾病诊断奠定基础。 3．本次实验主要掌握直肠检查要领、触摸卵巢的方法及卵巢的形态、大小等感觉，掌握子宫的触摸方法。 二、实验材料 1．母牛若干头。 2．保定架(或保定带)。 3．母牛生殖器官标本。 4．搪瓷盆、肥皂、毛巾。 5．煤酚皂或新洁而灭。 三、实验内容 (一)直肠检查前的准备工作 1.将受检母畜保定于六柱栏内，防止检查人员被踢伤。 2．为了避免肠胃中内容物过多时妨碍操作，可事先禁食半天，或临检查时用温水灌肠。 3．剪短指甲并锉圆，在手臂上涂肥皂沫以滑润，便于通过肛门。 4．将受检母畜的尾巴拉向一侧。 (二)检查方法 1、检查的操作要点： (1)将被检母畜保定在六柱栏(诊疗架)内。 (2)助手将被检母畜的尾巴拉向一侧。 (3)术者将衣袖挽至肩关节处，手臂上涂以润滑剂（石蜡油或肥皂水），有条件者可戴上长臂手套（操作者较多时，不宜用长臂手套，以防止刺激性过强导致直肠出血。 (4)术者站立于被检母牛的正后方，给母畜的肛门周围涂以较多的润滑剂，并抚摸肛门（起安抚作用）。 (5)术者将手指并拢成楔状，手心向上，以缓缓地旋转动作伸入肛门。对于体型较小的母畜，掌心应朝向一侧，以便进入肛门，因为尾椎上下活动的范围较大，而左右横径由于坐骨粗隆的限制，不便扩张。 (6)手臂伸入肛门后，直肠内如有宿粪，可用手指扩张肛门，使空气由手指缝进入直肠内，促使宿粪排出（空气排粪法），否则要以手指掏出。掏出粪便时，手掌须展平，少量而多次地取出，切勿抓粪一把向外硬拉。最好设法促使母畜自动排粪。其方法是将手掌在直肠内向前轻推，以阻止粪便排出，待粪便蓄积较多时，逐渐撤出手臂，即可促使排尽宿粪。 (7)掏粪完毕，应再次向手臂涂以润滑剂，伸入直肠，除拇指外，将四指并拢探入结肠内，即可探摸欲检查的器官。 在直肠检查过程中，往往遇到以下三种情况，应予正确处理。 ①母畜强烈努责，将手臂向外排挤。此时手臂切忌向里硬推，否则可能会使肠壁穿孔。当母畜努责时，助手可用手指掐捏母畜的腰部，或抚摸阴蒂，或抓提膝部皮肤皱襞，或喂给饲料，以减弱或停止其努责。 ②结肠及直肠持续性收缩，肠壁紧套手术者的手臂上，但并不向外挤压，致使手臂无法自如地探摸。此时可采用上述制止努责的方法，使肠臂停止收缩。 ⑧直肠壁变硬，向骨盆腔周围臌起呈坛状，手掌在直肠内拍打时，可以听到瓷坛声。遇此状态，可将手指聚拢成锥状，缓缓地向前推进，刺激结肠的蠕动后移，以促使直肠壁舒展变软。如果上述措施无效，只有耐心等待，其自行舒展后，再行探摸触诊。 2．直肠检查操作注意事项：为了避免发生操作事故，现就人、畜的安全问题做如下说明： (1)为了检查人员的安全，应注意以下事项： ①严冬及早春季节施行操作时，注意保暖防寒措施，防止操作人员受冻感冒。必要时，可定制棉背心，以确保操作人员不受冻。 ②手臂如有破伤口，不应操作。有条件时应提供长臂手套后，再进行直肠检查。 ③保定架的后两柱之间，不可架设横木，或拴系绳索，以免母畜滑倒下卧时导致操作人员手臂骨折或关节脱臼。 ④检查过程中，时刻提防母畜蹴踢。母牛后腿的外展肌发达，因此，操作者不宜站在母牛的外侧，而应站在母牛的正后方。 ⑤每次直肠检查完毕后，要用消毒剂（一般可用75%酒精，或0.2%的新洁尔灭）洗涤消毒手臂，并涂以皮肤滋润保护剂，以免皮肤糙裂。 (2)为了被检查母畜的安全，应注意以下事项。 ①检查者的指甲必须剪短锉圆，并要磨光（在粗布上磨擦）。 ②检查者的手臂上须涂以润滑剂，切忌用干涩的手臂向母畜肛门内硬插。 ③在直肠内探摸过程中，只允许使用指肚，切不可用指甲乱抠、乱抓、乱划。 ④直肠壁上如有马虻幼虫吸附，不可揪掉，以免肠壁出血，或使幼虫吸附于检查者手臂上造成剧痛或感染。 ⑤在直肠内经久寻找不到目的物时，应间隔一定时间将手臂取出查看有无血迹，以便及时发现肠壁破损进行医治处理。一旦肠壁有轻度破损可灌注3%明矾水500～1000ml，或涂以碘甘油和磺胺粉涂于创面。 ⑥检查动作应轻缓，对于不知生理状态的母畜，尤应注意动作轻缓，以免造成孕畜流产。 ⑦如需做阴道检查，务须做好手臂的消毒及母畜外阴部的消毒工作。绝对禁止将粪便及其他污物带入阴道，造成感染。 ⑧输精过程中，应注意观察阴道粘膜、粘液性状及子宫颈状态，如有异常现象须做复查，防止因误配而造成孕畜流产。 3．母牛生殖器官检查法： (1)检查者的手指并拢成楔形，缓慢地以旋转动作插入肛门并逐渐地进入直肠。 (2)直肠内如有宿粪，应分次少量地掏出。 (3)当手腕进入母畜肛门后应先寻找子宫颈。手指向下轻压肠壁，摸到一个坚实的、纵向似棒状物即为子宫颈，可用拇指、中指及无名指握住子宫颈。 (4)沿子宫角的弯曲部(大弯)向外侧下行，在子宫角尖端的外侧下方即可感触到呈椭圆形柔软有弹性的卵巢，然后确定其形状和质地。如图实—4。 (5)在触摸过程中如失去子宫角不易摸到卵巢时，最好再从子宫颈开始沿着子宫角触摸卵巢。 作业 1．绘图说明受检母牛卵巢的形状。 2．叙述牛直肠检查触摸卵巢的要领。 3．试述直肠检查母牛子宫的特点。 实验二、人工授精器械的识别及假阴道的安装 一、实验目的 1．熟悉家畜人工授精所用的各种器械，了解其用途，构造和使用方法。 2．掌握假阴道的安装步骤和方法。 二、实验器械设备 1．消毒用具：手提式高压蒸气消毒器、煮沸消毒器、酒精灯。 2. 采精用具：各种家畜假阴道(全套)、温度计等。 3．精液品质检查用具：量精杯、显微镜、显微镜、保温箱、血球计数器。盖玻片、载玻片、烧杯、 pH计等。 4．配制稀释液及保存、运输精液用具：量筒、天平、角质药匙、漏斗架，沪纸、 冰箱和广口保温瓶。 5. 输精用具：各种家畜开膣器、各式输精器，头灯或手电筒等。 6．精液冷冻设备：液氮机、液氮罐、广口保温瓶、精液冷冻器械,各种类型冷冻精液，细管精液输精器，CO2气瓶。 7．普通用品：玻璃棒、脱脂棉、纱布、大小玻璃瓶，搪瓷盘，水桶、热水瓶，面 盆、毛巾、剪刀、肥皂、工作服等。 8．常用药品：新洁而灭、苏打、酒精，氯化钠、葡葡糖，白凡士林，染色剂、液体石腊、蒸馏水等。 三、实验内容及进行步骤 (一)、器械设备 根据实习设备的分类和顺序，了解人工授精所需的器械、用具，特别是采精和输精器械的名称，构造、用途和使用方法。 1.马：马假阴道的外壳是由镀锌铁皮作成的圆筒，两端大小不同。将内胎的边缘翻卷在外壳上以后，小端上可套以橡胶质广口集精杯。 在金属外壳的中部或靠近小端处有一短筒，其中插有一个带气咀的橡皮塞子，由此灌水和打气。外壳的中部还有一把手，以便采精时握住假阴道.假阴道的内胎由橡胶制成，装于外壳中，其两端翻卷并固定在外壳的两端上， 2.牛、羊：牛，羊假阴道的构造基本相同，唯羊假阴道较小。牛、羊假阴道外壳用硬橡胶或塑料制成。将内胎装好后，一端套上集精杯。集精杯有两种，一种是双壁集精杯，另一种是在橡皮漏斗上套上一小玻璃管。外壳中部有一圆孔，其中插有带气咀的的塞子。 3. 猪：猪假阴道的构造基本与牛，羊的相同。 4. 精液冷冻设备 ① 冷源 干冰，是由CO2气压缩成为雪花状的固体，将CO2气瓶出口放低，放出的液态CO2用一厚布口袋承接即可得到干冰。或从工厂直接购得。干冰本身的温度为～79℃ 液态氮：是利用空气分离设备——液氮机将空气重覆压缩，膨胀，冷却后液化成透 明的液体。液体本身温度为～196℃。 ② 冷冻精液保存容器 广口保温瓶：即市售的玻璃胆保温瓶或以热水瓶也可代用。液氮罐：多由铝合金制成，外层称外壳，上有罐口，手柄以及已密封的抽气孔。内层为金属制瓶罐，内外层在罐口处以绝热粘合剂牢固粘合。内外层之间为高度真空，并放置有绝热材料活性碳等。罐塞由塑料制成并留有空隙能保证安全排出氮蒸气。在罐颈处可以固定数个提筒以贮存精液。液氮罐因不同容量有不同型号 ③ 冷冻精液类型： 颗粒型：将精液在干冰或液氮滴冻成o.1毫升左右的丸剂，待溶解后用一般人工授精输精器输精。 安瓿型：将精液封装于安瓿中在干冰或液氮中冻结。加热溶解后用一般人工授精输精器输精。 细管型：将精液分装成0．5毫升或0．25毫升的细塑料管内，一般用液氮蒸气冻结。加热溶解后用特制的细管输精器输精。 ④ 细管输精器： 一般是由一金属制的外套和里面的推杆组成。使用时将精液细管的一端剪去，将另一端装置于输精器的推杆上。推动推杆，借助细管中的活塞即可将溶解后的精液排出。 5. 手提式高压灭菌器的使用方法 手提式高压灭菌器系由合金制成，轻便耐用，适用于小量物品灭菌，因此为人工授 精站所广泛采用。其主要构造为器身，器盖及器内的安置桶所组成。盖上附有压力表， 安全阀门、放气阀门，与放气软管，在安置桶壁装有一小筒，用以插入放气软管，桶底面有多孔的隔板。 使用时先在灭菌器内放2500～3000毫升的清水。再将盛有需灭菌的各种人工授精器械，物品的安置桶放入器身内，合上器盖，同时注意将放气软管插入安置桶壁小桶中，将锁紧螺丝扭紧，使盖平稳、牢固地合紧以免漏气。然后将灭菌器置于火炉上加热，此时可将放气阀门的手柄直立，待灭菌器的空气排尽而有白色蒸气冒出时再于平放，或者待压力表指针升至0.5千克左右时打开放气阀门以排空气，待排尽空气而有蒸气冒出 时再关闭阀门，继续给灭菌器加热，控制灭菌器内的压力维持到表压0.7千克／厘米2(温度115℃)经30分钟，或1．0千克／厘米2 (温度120C)经20分钟。灭菌完毕后，等压力表上的指针下降至零度时，将放气阀门打开，放尽灭菌器中蒸气，趁热打开灭菌器盖，取出各种物品待用。 (二)、假阴道的安装 (1) 安装前的检查 ①假阴道外壳是否有裂缝或小孔；②假阴道内胎是否漏气，内胎的光滑面是否在里边，边缘是否有裂口；③气门活塞是否有裂口或漏气，扭动是否灵活。 (2) 安装方法 ①装内胎：将假阴道内胎装入外壳中，光滑面应朝向内腔。把假阴道外壳夹在安装者的大腿之间，使内胎的两端翻卷于外壳两端上，注意使内胎不得扭曲，内胎的中轴应与外壳中轴重合，即内胎的两端和外壳的两端应成为同心圆位置；②固定：然后用橡皮圈将两端扎紧；③消毒：用75％酒精棉球将内胎涂擦消毒，注意消毒必须从内向外旋转，一侧消毒完，在消毒另一端；④装水：用漏斗将45～55℃的温水加入假阴道内，加水量为1／3～1／2之间；⑤充气：安装气门活塞，充入空气使内胎一端的中央形成”Y”形。⑥润滑；用凡士林或石蜡油润滑假阴道的一段；⑦最后在另一端装上集精杯。 (3) 注意事项 ①安装者的指甲须剪短以防将内胎划破；②安装好的假阴道须平置，勿碰及其它硬物而损伤内胎。 四、作业 试述牛假阴道的组成及安装时的注意事项。 实验三、采精 一、实验目的 学习家畜的采精操作方法和技术要领。 二、实验材料 经调教好采精用的种公畜(牛、猪、羊、兔)。 各种动物用的假阴道及采精器械。 三、实验内容 (一)、假阴道的准备 1．消毒：将安装好的假阴道用75％酒精棉球消毒，待酒精气味完全挥发后，再以生理盐水或稀释液冲洗，然后套上经消毒过的集精杯(瓶)。牛用集精管需用乳胶漏斗加以连接。 2．灌水：由假阴道外壳的注水孔灌入45～55℃左右的热水，注入的水量为外壳与内胎夹层容量的1/2～1/3。 3．测温：调整热水和冷水的比例，使阴道内腔的温度在采精时控制在38—40℃为宜。 4.涂抹润滑剂：用经消毒的玻棒蘸取润滑剂(医用凡士林+液体石蜡或红霉素软膏)由假阴道入口处向内腔壁均匀地涂抹，深度以1/2～1/3段为宜。 5．调压：经注水孔安装的调节钮注入适量空气，使假阴道内腔具有一定的压力，其大小应根据畜种和个体要求而定。 (二)台畜的准备 选择发情盛期、体格适当、健康的母畜作采精用的台畜。最好调教公畜使用假台畜采精，既安全又方便。台畜的后躯须保持干净并经消毒，做好保定，将尾巴系于一侧，等候采精。 (三)采精操作 1．牛、羊、兔的采精：这几种动物的射精特点是快速、短促，因此采精操作的动作须敏捷。台畜准备好以后，当公畜的两前肢爬跨到台畜的背部时，应迅速用左手托住阴茎包皮，将阴茎导入假阴道。当公畜出现纵身前冲的动作，即为射精完毕，迅速直立假阴道，打开调节钮排气，取下集精杯送交精液处理室。公兔射精完毕，突然摔倒在一侧，且发出“咕—”的尖叫声。 2．猪的采精：公猪的射精时间比较长，更适宜于应用假台畜采精。目前多改用徒手采精法，使采精操作更为简便。其方法是当公猪爬跨上台畜后，立即将阴茎握住并拉出，有节奏地施加压力，当公猪安静爬伏不动时，射精即开始。可根据公猪的射精波段，采集其浓稠段精液。 四、作业 1.学习各种家畜的采精操作过程。 2.填写下列表格说明公畜的射精特点 畜种 对温度的敏感性 对压力的敏感性 射精行为特征 射精时间  牛      羊      猪      兔       实验四、精液的直观指标检查和活力检查 一、实验目的 掌握精液直观指标检查的方法，熟悉肉眼检查精液品质的方法及精液的活力评定方法及评价指标。 二、实验材料 1. 家畜：种公羊、母羊，种公牛、母牛。 2. 药械用品：牛羊假阴道全套，3％和0．9%氯化钠溶液。滑润剂(11份石腊油+2份凡士林)、温度计、镊子、漏斗、玻璃棒，大塘瓷盘、热水、显微镜、载玻片、盖玻片、乙醚、纱布、试管，2％煤酚皂液、1／1000新洁尔灭、保温箱、冰、酒精、美兰。 3. 图表、精子密度图。 三、实验内容 (一)精液的肉眼检查：观察测定下列各项并登记入表内。 1. 射精量：将采得的精液倒在有刻度的试管或杯中，测其容量。各种家畜的射精量平均为：马70(30～100)毫升，驴50(20～80)毫升，牛(2～10)毫升；羊1(0.7～2)毫升；猪250(150～500)毫升。 2．观察精液的色泽并嗅闻气味。 3．云雾状的观察，观察精液的云雾状翻腾滚动。按以下符号记入表内、云雾状显著者以“卅”表示，有云雾状以“廿”表示，云雾状不明显者以“+”表示。 (二)精子密度及活率评定： 1．检查精子的密度：取一小滴精液于清洁的载玻片上，加上盖玻片，使精液分散成均匀一薄层，但不得有气泡，也不能使精液外流或溢于盖玻片上，置显微镜下放大400～600倍观察，按下列等级评定其密度。 密——在整个视野中精于密度很大，彼此之间空隙很小，看不清楚各个精子运动的活动情况，这一级属于“密”，每毫升含精子数约在10亿以上。 中——精子之间的空隙明显，精于彼此之间的距离约有一个精子的长度。有些精子的活动情况可以清楚地看到。这种精液的密度评为“中”，每毫升所含精子数约在2—10亿之间。 稀——精子分散存在，精子间的空隙超过一个精子长度，这种精液每毫升所含精子在2亿以下。 2．评定精子的活率：必须于采精后立刻在18—25℃实验室中进行，最好在37℃保温箱内进行，同时也可以测定精于的密度。 用玻棒蘸取一滴原精液或稀释的精液(马、猪、精液密度低不须稀释，牛，羊密度大，需用0．9％氯化钠溶液稀释，其温度相近)，滴在载玻片上，也可滴在载片上翻放于凹玻片的凹窝上，最后置于显微镜下，放大250—400倍检查，显微镜的载物台须放平。并最好在暗视野中进行。 精子的活动有三种类型：前进运动、旋转运动和振摆运动，评价精子活率是根据前进运动精子数多少而定。 精子活率=（总精子数～非前进运动精子数）/总精子数 目前评定精子活率等级的方法有两种： 十级制——在显微镜下估计直线前进运动精子所占百分数，直线前进运动精子为100%者评为1．0级：90％者评为0．9级，依此类推。 五级制——全部精子都呈前进运动者属于“5”级，绝大多数精子(约80％)呈前进运动者为“4”级，前进运动的精于略多，于半数者(约60％)为“3”级，不及半数者为“2”级；呈前进运动的精子数目极少者属“1”级。 牛及羊的精液中由于附性腺分泌物少，要求“密5’即密度为“密”，活率为“5”级)及“密4”或“中5”及“中4”一级才能作为输精之用。马与猪的精液中附性腺分泌多，就是“稀5” “稀4”甚至“稀3”的亦可用于输精。 (三)理化因素对精子的影响 1．温度的影响； 理化因素对精子活率影响记载表 畜别 畜号 采精时间 射精量 (毫升) 色泽 气味 云雾状 密度 活率    年 月 日                                             ① 将采得的原精液一滴滴在载玻片上，放在显微镜下观察其活率，再放在45—50℃下2分钟观察精子活率有何变化。 ② 将新采得的精液立即检查其活率后，随后即移入0—5℃温度下2—3分钟，温度回升到37—38℃后再检查精子活率，注意降温前后精子活率变化情况。 2．渗透压的影响： 观察原精液的活率后，分别在三滴原精液内各加入1％氯化钠溶液、3％氯化钠溶液和蒸馏水，观察其活率及形态有何变化。 3．取1—2毫升经稀释过的精液放入小试管中，经检查活率后，用手上下剧烈振动2—3分钟，再观察其活率有何变化。 4. 取1—2毫升稀释过的精液放入小试管中，经检查活率后，经阳光直射10分钟后，观察精子活率的变化。 5．化学药品的影响： 取一滴精液于载玻片上，用滴管分别滴入以下药液混合后复以盖玻片。 ① 2％煤酚皂液。 ② 1/3000新洁尔灭液 ③ 75％酒精。 分别观察其精子活率及形态有何变化。 处 理 前 活率评分 处 理 后 活率评分  37—— 38℃  40—— 45℃   降温处理前  降温处理后     加入1％NaCl溶液后   加入不同浓度溶液前  加入3％NaCl 溶液后     加入蒸馏水后   振 荡 前  经 剧 烈 振 动   阳光照射前  阳 光照 射 后     加2％煤酚皂液   加入药液前  加入1／1000新洁尔灭溶液     加入75％酒精后    实验五、精子密度和畸形率测定 一、实验目的 掌握以血球计算盘检查单位容积(毫升)中所含精子数的方法，以及测定精子畸形率的操作要点。 二、实验料材 1. 材料：公牛、公羊、公马、公猪精液 2．器械及用品：显微镜、载玻片、玻捧、0．9％NaCl溶液、95％和75％酒精、染色缸、胡氏溶液，凡那他氏染色液、氨水、3％盐水、0．5％美兰溶液、0．25％硝酸银、乙醚、兰墨水、0.5％龙胆紫酒精溶液、红、自血球稀释管、血球计算盘、5ml试管、血吸管和lml吸管。 3．畸形精子形态图。 三、实验内容 血球计算盘构造模式图。 (一)精子数量计算： 1．清洗器械：先将血球计算盘及盖玻片用蒸馏水冲洗，使其自然干燥，血吸管先用蒸馏水冲洗，再用95％酒精清洗，最后用乙醚清洗。5ml试管及lml吸管烘干。 2．精液稀释： ①用lml吸管吸3％NaCl0.2毫升或2毫升，放入小试管中，(根据稀释倍数确定)用血吸管吸出10或20微升NaCI抛掉。 ②用血吸管将精液吸至刻度10或20微升处。 ③用纱布擦去吸管尖端所附的精液。 ④用姆指按住试管口，振荡2—3分钟使其均匀混合。 3．精子的计数： ①将擦洗干净的计算盘放于显微镜的载物台上，盖上盖玻片。 ②将试管中稀释好的精液滴一滴于计算盘盖玻片的边缘使精液自动渗进计算室，注意不要使精液溢出于盖玻片之外，并不可使精液不够而致计算室内有气泡或干燥之处，如有这些现象应重做。 ③静置3分钟便可在400—600倍的显微镜下检查。 ④计数计算室的四角及中央共五个大方格即80个小方格内的精子数。 ⑤计算每小格内的精子，只数格内及压在左线和上线者。 ⑥由五个大方格(80个小方格)所数到的精子数代入下式，即得出每毫升的精子数， (X/80)×400×10×稀释倍数×1000=每毫升内所含精子数： 确定精液稀释倍数可按下表计算。 血吸管或红、白球吸管稀释精液的倍数查算表 精 液  稀释管种类  吸取时所达到的刻度  稀释倍数     精 液  3％Nal      0.5  101  200   牛 羊 红血球吸管  1  101  100    血 吸 管  10微升  1990微升  200     20微升  1980微升  100    白血球吸管  0.5  11  20   猪 马   1  11  10    血 吸 管  10微升  190微升  20     20微升  180微升  10   或以所得精子数乘千万(稀释200倍时)、或乘五百万(稀释100倍时)、或乘百万(稀释20倍时)、或乘50万(稀释10倍时，这样就计算出每毫升精液中所含精子数了。 为了减少误差，必须进行两次计数，如果前后两次误差大于10％，应作第三次检查。最后在三次检查中取两次误差不超过10％，求出平均数，即为所确定的精子数。 (二)直线运动精子数的计算(精子活率的计算)： 方法基本和精子数量计算法相同，有以下几点不同。 l.用0.9％生理盐水作为稀释剂，以保持正常活精子运动。 2．显微镜置于保温箱中，保持37～38℃。 3．计数四角及中央五个方格中的非直线(包括死精子、摆动旋转运动的精子)运动精子数，求出每毫升精液中非直线运动的精子数。 4.将计算盘放入120℃干烤箱中烤5分钟，利用高温杀死精子后，计数四角及中央五个方格中的精子数，求出每毫升精液中的总精子数。 5．计算直线运动精子的百分率。 活率=总精子数～非直线运动的精子数×100/总精子数 (三)测定精子畸形率： 1．以细玻璃棒蘸精液一滴，滴于载玻片上一端，如系牛羊精液应再加1～2滴0．9 2．以另一载玻片的顶端呈35度的角度抵于精液滴上向另一端推去，将精液均匀涂 抹于载玻片上。 3．抹片于空气中干燥。 4．用下列方法的任一方法固定染色。 ①用0.5％的尤胆紫酒精液染色三分钟，水洗、待干后即可镜检，(也可由普通红蓝 墨水代用)。 ②置于95％酒精中(或5％福尔马林溶液)固定5—6分钟，取出以水冲洗后，阴干或 烘干，用蓝、红墨水等染色3—5分钟，再用水冲洗，使干燥置于显微镜下检查。 ③凡那他氏镀银法：将自然干燥的抹片，以胡氏溶液(福尔马林2.0，醋酸1.0，蒸 馏水100．0)滴在玻片上，固定一分钟，水洗10秒，将染色剂(单宁酸5.0、石炭酸1．0， 蒸馏水100．0)滴在玻片上，慢慢加热发生蒸气为止，用水冲洗30钞钟后，再加上0.25％酸硝银2—3滴，立即滴上一滴氨水，将标本左右摇动，则产生混浊的黄褐色，再放在酒精灯上慢慢加热，经20一30秒钟，直至将要发出水蒸汽似的“白雾”状为止，最后再行水洗，待干便可镜检。 5．镜检：将制好的抹片置于显微镜下、查数不同视野的500个精子，计算出其中所含畸形精子数，求出畸形百分率。 四、作业 描述测定精子畸形率的操作要点。 实习六、精液稀释液配制及精液稀释 一、实验目的 掌握稀释配制的基本程序和操作方法。 二、实验材料 主要用品：250ml三角瓶、250ml烧杯、100ml量筒、感量为0.1克的天平、玻璃漏斗、电炉、石棉网、玻璃棒、定性滤纸、消毒纸巾、硫酸纸、灭菌牛皮纸、橡皮筋、10ml一次性注射器、1ml注射器、5ml注射器、鸡蛋、75%酒精棉球、葡萄糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素 三、实习内容 1．玻璃用品的清洗与消毒：将所有玻璃用品用洗涤剂洗净，用稀盐酸浸泡并用自来水冲洗干净后，用蒸馏水冲洗四遍，空干水分，用纸将瓶口包好，放入120℃干燥箱中干燥1h，放凉备用。 2．天平的标准：用两张圆形硫酸纸放在天平的左右托盘上，校准天平。 3．称量药品：称取配方需要量的药品，并放入大烧杯中 4．溶液配制：用量筒量取双蒸水100ml，加入烧杯中，用磁力搅拌器或玻璃棒搅拌使其溶解。 5．用一层定性滤纸过滤溶液至三角瓶中 6．在三角瓶上加牛皮纸盖并橡皮筋固定，放在盖有石棉网的电炉上加热至沸腾，迅速将其取下，放凉。制成基础液。基础液如果不马上使用可放入在2～5℃冰箱中备用，保存时间不超过12h。 羊精液稀释液推荐配方： 低温（2～5℃）保存液 冷冻保存液  基础液 葡萄糖（一水） 3.3g 8.8   柠檬酸钠（二水） 1.4g ～   双蒸馏水 100ml 100ml  低温保存或第一液 基础液 80 ml 80ml   卵黄 20ml 20ml  第二液 第一液  47ml   甘油  3ml  牛精液冷冻精液稀释液推荐配方举例： 细管冷冻精液稀释液配方  11%乳糖或12%蔗糖73ml  卵黄20ml  甘油7ml  青霉素10万单位  链霉素10万单位  7．取卵黄液：新鲜鸡蛋用75%的酒精棉球消毒外壳，待其完全挥发后，将鸡蛋磕开，分离蛋清、蛋黄和系带，将蛋黄盛于鸡蛋壳小头的半个蛋壳内，并小心地将蛋黄倒在用四层对折（8层）的消毒纸巾上。小心地使蛋黄在纸巾上滚动，使其表面的稀蛋清被纸巾吸附。先用针头小心将卵黄膜挑一个小口，再用去掉针头的10ml的一次性注射器，从小口慢慢吸取卵黄，尽量避免将气泡吸入，同时应避免吸入卵黄膜。吸入10ml后。再用同样的方法吸取另一个鸡蛋的卵黄。也可将卵黄移至纸巾的边缘，用针头挑一个小口，将卵黄液缓缓倒入量筒中，注意避免将卵黄膜倒入量筒中。 8．卵黄液与基础液的混合：取80ml放凉的基础液，加入三角瓶中，然后将卵黄液注入或将卵黄液从量筒中倒入三角瓶中，将量取的80ml基础液反复冲洗量筒中的卵黄，使其全部溶解入基础液中，然后将全部的基础液倒入三角瓶中。摇匀。 9．加入抗生素：分别用1ml注射器吸取基础液1ml，分别注入80万单位和100万单位的青霉素和链霉素瓶中，使其彻底溶解。分别从青霉素瓶中吸取0.1～0.12ml和链霉素瓶中吸取0.1ml，将其注入三角瓶中，并摇匀。另一种方法是，是称取0.1克的青霉素和0.1克的链霉素加入三角瓶中，摇匀。用基础液、卵黄液和抗生素混合制成第一液。 10．第二液的制作：用量筒量取第一液47ml，加入另一只三角瓶中，用注射器吸取3ml消毒甘油，注入三角瓶中，摇匀。制成羊冷冻精液的第二液。 作业 简述基础液、低温保存稀释液、冷冻保存稀释液的制作方法。 实习七、颗粒冻精的制作 一、实验目的 精液的冷冻是人工授精技术基本操作之一，通过本次实验基本掌握冷冻精液的制作技术。 二、实验材料 1．牛的采精器械(集精杯、假阴道等)，牛精液。 2．12％蔗糖、鸡蛋、甘油、2．9％柠檬酸钠。 3. 100ml量杯,20ml量筒，50—100ml烧杯、滴管10ml、试管、冰壶，10ml注射器，水浴锅，温度计。 4．干冰冷冻盒、打洞改锥，铲子，木锤，干冰袋，饭盒。 三、实验内容 (一)配制稀释液 1．取12％蔗糖8m1，2ml卵黄(20％)为I液。 2．取I液9.3ml、 加甘油0.7ml为Ⅱ液． (二)稀释和冷却：为了保证精液的质量，原精活率不低于0．7．采精后，立即检查活率，并用等温的I液稀释后(1：1)将精液包以12—～16层纱布，放入冰壶和冰箱内，一小时后，缓慢降温至5—2℃，再以同温的第Ⅱ液做等量稀释。(第一次稀释后总量1：l，总稀释比1：3)，稀释后总倍数应根据活率和精液的耐冻情况而定，应保证每个颗粒在解冻后有1000万个以上直线前进的运动精子。 (三)平衡：在2～5℃下静置2～4小时。 (四)冷冻； 1．干冰法：在木盒中将干冰压紧，约1．5～2寸厚，放一铝板，铝板上面再放一寸厚干冰捣实，用直径4—6毫米的改锥扎约4厘米深的小洞，以滴管滴入2滴(约0．1ml）稀释精液，随即用干冰封住洞口(在滴冻的过程中，要注意使待滴冻的精液保持平衡时的温度。防止回升)5分钟后即可取出。 2．液氮法：用铝制饭盘争盛满液氮。为了减少液氮的损耗，可在饭盒下面，四周包以厚棉垫。将饭盒盖反放在饭盒上(铝板或氟板)盖距液氮面l.5—2厘米，待盒盖冷透后，以滴管将精液滴在盒盖上，每个颗粒的直径以6—8毫米为宜待颗粒由白色转为黄亮时认为完全冻结，收拢起来，浸入液氮中，再在饭盒盖上连续滴冻。 (五)保存： 1．干冰保存；用铝管埋入广口保温瓶中，周围装干冰捣实，将盛精液颗粒小瓶放入铝管内，将绳和标签留在保温瓶外即可。 2.液氮法：浸入液氮即可。 (六)解冻： 取lml 2.9％的柠檬酸钠放入试管中，将试管浸入40℃温水，待投入冷冻颗粒溶化剩余二分之一时，取出在外界至完全溶化检查评定活率． (七)注意事项： 1.器械的清洗及消毒、采精、精液处理、输精应严格遵守人工授精操作规程。 2.在稀释、平衡、冷冻过程中，必须保持所要求的温度严防回升。 四、作业 检查解冻后精子活率，试讨沦如何提高冷冻精液的解冻活率? 实验八 输精 一、实验目的 学习牛、猪、羊的输精操作方法和要领。 二、实验材料 1．发情母畜以及各种动物用的输精器械和精液。 2．消毒溶液。 三、实验内容 (一)外阴部的清洗、消毒 动物在输精前，外阴部须经清洗，再使用1/3000新洁而灭溶液或酒精棉球擦拭消毒，待干燥后，用生理盐水棉球擦拭或以凉开水冲洗。 (二)牛输精方法 1．母牛的保定：将母牛固定在六柱栏内。为了防止在操作中母牛骚动，可在甲部设攀压带。 2．将输精器插入阴道：左手呈楔形插入母牛直肠，触摸子宫、卵巢、子宫颈的位置，并使母牛排除宿粪，然后消毒外阴部。为了保护输精器在插入阴道前不被污染，可退出左手，使左手四指留在肛门口，向下压在肛门下缘，同时用左手拇指压在阴唇上并向上提拉，使阴门张开。右手趁势将输精器插入阴道，左手再进入直肠，把握住子宫颈尽量向前推送，右手随之将输精器向上，再平插，转向下方，直至子宫颈内口附近。 3．固定子宫颈的方法， （1）左手插入直肠摸清子宫颈后，用食指和中指向下压即可固定子宫颈，用大拇指按住子宫颈外口上缘。 (2)左手心朝向右侧握住子宫颈，无名指平行握在子宫颈外口周围，以便插入输精器。 (3)当母牛努责难以用以上两种方法握住子宫颈时，手指可并拢将子宫颈压于耻骨体上或骨盆腔侧壁，使之固定。在遇到直肠形成坛状时，这种方法较易操作。 若母牛努责过甚，可采用喂给饲草、捏腰、拍打眼睛、按摩阴蒂等方法使之缓解。若母牛直肠呈坛状时，可用手臂在直肠中前后抽动以促使松弛。 4．输精器插入子宫颈外口： (1)左手把握好子宫颈，大拇指肚按压子宫颈外口上缘，右手持输精器通过阴道，探索抵达拇指肚，再导入子宫颈外口内。 (2)左手握住子宫颈，右手持输精器沿左手臂向左手心中探插，输精器即可进入宫颈外口。 5．输精器通过子宫颈管，抵达子宫体：进入子宫颈外口的输精器，才能通过子宫颈，因此成为输精操作最为困难的部位。操作时两手需配合好，将输精器顺利地通过子宫颈管的4～5个皱襞，进入子宫体部位。具体方法是：左手拳握住子宫颈，右手持已进入子宫颈外口的输精器做多处转换方向，向前探插，同时用左手将子宫颈前段稍做抬高，并向输精器上套。输精器通过子宫颈管内的硬皱襞时，会有明显的感觉。当输精器一旦越过子宫颈皱襞，立刻感到畅通无阻，这时即抵达子宫体处。输精器处在子宫颈管内时，手指是摸不到的，输精器一旦进入子宫体，即可很清楚地触摸到输精器的前段。 6．注入精液，取出输精器：当确认输精器进入子宫体时，应向后抽退一点，勿使子宫壁堵塞住输精器尖端出口处，缓慢地、顺利地将精液注入，然后轻轻地抽出输精器。 (三)猪输精方法 1．右手持输精胶管插入母猪阴道，开始插入的方向稍向斜上方，然后水平旋转徐徐插入25—30cm，感到有阻力时，用力向前推进子宫颈4～6cm。 2．将连接于输精管的精液瓶或袋抬高，将精液注入子宫内。 3．为了防止精液倒流，可将输精器塑料管折起并套入精液袋的小孔，以刺激子宫蠕动，3～5分钟后取下输精器。 4．母猪1次输精量应为50～100m1，输入前进运动精子数不少于20亿个。 (四)羊输精方法 1．将经消毒的开膣器轻缓地插入阴道，打开阴道，寻找子宫颈外口。 2．将吸有精液的输精器通过开膣器尽可能地插入子宫颈外口内，深度为0.5～2cm。 3．母羊1次输精量原精液为0.05～0.1ml，稀释后精液应为0.1～0.2ml，输入前进运动精子数不少于7000万个。 四、作业 写出母畜输精的体会。 实习九、妊娠判断 诊断母畜妊娠的方法有：外部检查法、阴道检查法。直肠检查法和实验室法等。其中以直肠检查法为最准确、可靠、且简便易行。虽然外部检查法的准确性不太大，但均属于畜牧工作者必备的一般知识。所以，必须掌握此种方法。 一、外部检查法 (一) 实验目的：掌握外部检查妊娠方法。 (二) 实验材料： 1.妊娠后期的母马、母牛，妊娠二个半月以上的母羊、母猪。 2.各种妊娠母畜外部触诊法挂图。 3.保定器械、听诊器。 (三) 外部检查的方法：外诊包括视诊、触诊和听诊三种方法。 1.视诊： 怀孕家畜，可以看到腹围增大，臁部凹陷．乳房增大．山现胎动。但不到怀孕末期，通常难以得到确诊。 (1)马：由后侧观看时，已妊娠母马的左侧腹壁较右侧腹壁膨大，臁窝亦较充满，在妊娠末期其左下腹壁较右侧下垂。 （2）牛：由于母牛左后腹腔为瘤胃所占据，所以，站于妊娠母牛后侧观察时，以发现右腹壁突出。 (3) 羊：同牛，在妊娠后半期右壁表现下垂而突出。 (4) 猪：妊娠后半期，腹部显著增大下垂(在胎儿很少时，则不明显)，乳房皮肤发红，逐渐增大，乳头也增大。 2．触诊：在怀孕后期，可以从外部触知胎儿。 (1) 马：在乳房稍前方的腹壁上，用手掌多次抵压来进行触摸。能触到胎儿的时间在瘦马是七个月以后，肥马在八个月以后。 (2) 牛：早晨饲喂之前，用手掌在右膝襞之前方，臁部之下方，压触以诱发胎儿运动，亦可用拳头在臁部往返抵动。以触知胎儿，但此方法不可过于猛烈，以免引起流产。能触知的时间一般须在怀孕六个月以后。如果从右侧触诊不到可在左侧试验。 (3) 羊：检查者在羊体右侧并列而立，或两腿夹于羊之颈部，以左手从左侧围住腹部，而右手从右侧抱之，如此用两手在腰椎下方压缩腹壁，然后用力压左侧腹壁，即可将子宫转向右腹壁而右手则施以微弱压力进行触摸，胎儿是硬的，好象漂浮于腹腔中， 营养较差被毛校少的母羊有时可以摸到子宫，甚至可以摸到胎盘。 (4) 猪：触诊时，使母猪向左侧卧下，然后细心地触摸腹壁，在妊娠三个月时，在乳腺的上方与最后两乳头平行处触摸可发现胎儿，有坚硬的质地，但仅是瘦的母猪在后期才能摸到。 3.听诊：听取胎儿的心音。 (1) 方法： 马：可在乳房与脐之间或后腹部下方听取，能听到的时间在怀孕第八个月以后，但往往由于受肠蠕动音的影响而不易听到。 牛：在怀孕第六个月以后，可在安静场所由右臁腹下方或膝襞内侧听取。 (2) 心音数：无论马和牛，胎儿心音均比母畜多达二倍以上。 (3) 价值：诊断价值和触诊相同，不同之处是可以断定胎儿的生死，但在应用上比触诊困难。 二、阴道检查法 (一)目的：认识母畜妊娠后阴道内所发生的变化，从而帮助直肠检查法，作出准确的妊娠诊断。 (二)、材料及实习动物： 1.妊娠三个月以上的母马及未孕母马，未孕母牛及怀孕母牛。 2.妊娠二个半月以上及未孕母羊、母猪。 3.保定架、绳索、鼻捻捧，尾绷带，开膣器、额灯或手电筒，热水、脸盆、肥皂、石蜡油，酒精棉球，细竹捧(长约40厘米)消毒棉花、玻片、滴管，95％酒精、姬姆萨染色剂，蒸馏水，显微镜、红兰试纸和制成的膣垢抹片。 (三)，准备工作： 1，控制家畜：置家畜于保定架内妥为保定，并将其尾缠绷带后扎于一侧。如无保定架也可用三角绊控制。 2，消毒：检查用具，如脸盆、镜子、开膣器等，先用清水洗净后，再以火焰消毒，或用消毒液浸泡消毒。但其后必须再用开水或蒸馏水，将消毒液冲净。 母畜阴唇及肛门附近先用温水洗净，最后用酒精棉花涂擦。如须将手伸入阴道进行检查时，消毒手的方法与手术前手的准备相同，但最后必须用温开水或蒸馏水将残留于手上的消毒液冲净。 (四)、检查的方法及妊娠时阴道的变化： 1.检查阴道粘膜及子宫颈变化的方法： (1)、给巳消毒过的开膣器前端约五公分处向后涂以滑润剂(石腊油等)，在检查之后用消毒纱布复盖，以免灰尘沾污。 (2).检查者站于母畜左右侧，右手持开膣器，左手姆食二指将阴唇分开，将开膣合拢呈侧向，并使其前端略微向上缓缓送入，待完全进入后，轻轻转动开膣器，使其两片成扁平状态，最后压紧两柄使其完全张开，进行观察。 (3).检查完毕，将开膣器恢复如送入时状态，然后再缓慢抽出，抽出时切忌将开膣器闭合，否则易于损伤阴道粘膜。 (4)，检查完毕将开膣器进行消毒。 2．妊娠时阴道粘膜及子宫颈之变化。 (1)、妊娠时阴道粘膜变为苍白、干燥、无光泽(妊娠末期除外)至妊娠后半期，感觉阴道肥厚。 (2)、子宫颈的位置改变，向前移(随时间不同而异)，而且往往偏于一侧，子宫颈口紧闭，外有浓稠沾液，在妊娠后半期粘液量逐渐增加，非常粘稠(牛在妊娠末期则变为滑润)。 (3)、附着于开膣器上之粘液成条纹状或块状，灰白色，在马妊娠后半期稍带红色，以石蕊试纸检查呈酸性反应。 三、直肠检查法 （一）、实验目的： 掌握大家畜(牛、马、驴)怀孕在各月份生殖器官各部分的变化，从而确定其是否怀孕及怀孕时间长短． （二）、实验材料： 1. 家畜：怀孕1～3个月、4～5十月及6个月以上的母马(驴)和母牛。 2. 器械及用品：保定架、缠尾绷带、指甲剪、肥皂、温水，毛巾． 3.马、牛怀孕各月份的生殖器官标本和挂图． (三) 、实验内容： 1. 检查前的准备工作： 同发情鉴定直肠检查前的准备工作。 2. 检查方法和步骤： (1) 检查者站立于母畜后一侧，以涂有润滑剂的手抚摸肛门，然后手指合拢成锥状，缓缓地以旋转动作插入肛门逐渐伸入直肠。 (2) 直肠如有宿粪，应分次少量的掏完。 (3)将手指合拢成锥状，伸入直肠狭窄部前之小结肠内，将手尽可能的能地向前推进，以期在肠道比较活动的部分，能够使手臂自由地在各个方向探摸。 (4)寻找卵巢和子宫。 (5)注意触摸以下几个项目。 子宫角的质地、形状、大小，位置；胚胎大小位置；有无漂浮的胎儿及胎儿活动情况。 子宫内液体的性状；宫动脉的粗细及有无妊娠脉博。 牛： (1)手臂伸入直肠的方法同马。 (2)注意触摸以下项目： 子宫角的大小，形状、对称程度，质地、位置； 子宫体，子宫角可否摸到胎盘，胎盘的大小；有无漂浮的胎儿及胎儿活动状况；子宫内液体的性状；子宫动脉的粗细及妊娠脉博有无。 3.怀孕时间长短的判断： 方法：根据怀孕各时期生殖器官各部分的变化情况(参考下列表)。 (1).马怀孕各月分卵巢，子宫及胎儿的变化。 (2).牛怀孕各月分卵巢、子宫及胎儿的变化。 四、作业 1．列表比较妊娠诊断的各种外部检查法的适用时间、检查部位，检查方法及准确性。 2、将阴道检查的情况结果记录于实验报告纸上。 3．妊娠时阴道发生变化的原因是什么?其生物学意义是什么? 4. 将检查结果写出实习报告，并诊断是否怀孕或怀孕时间长短。 五、实习计划 本实验最好在牧场各畜群中进行，先由教师介绍妊娠母畜的外部观察法及阴道检查法约30分钟，以后分3～5人一组进行实际操作取样，约1小时，阴道检查及取样在配种站实验室进行。 由教师讲解直肠检查注意事项后，先检查妊娠时间长的，然后检查妊娠中期的再检查妊娠期短的，在检查过程中，对怀孕子宫禁忌揉捏或上提。 在实习本试验前，最好用实习马，牛做直肠检查练习，熟练掌握触摸卵巢、子宫后，再在畜牧场、农村或配种站实习本次实验。 实习十、录像 一、实验目的： 通过观察专题录像片，使学生认识和掌握冻精制作、发情鉴定、输精技术、妊娠诊断、助产及胚胎移植等各项繁殖技术的规范操作方法。 二、实验内容： 1、观看各种动物的发情行为表现录像和发情鉴定方法。 2、各种家畜的输精技术录像 3、各种家畜的妊娠后的表现和妊娠诊断方法。 4、各种家畜的分娩行为和助产方法 5、牛羊胚胎移植 三、实验安排： 分两个班进行在实验室和微机室进行观看VCD和课程网络上录像资料。由于录像时间长，不可能仅在实验课时间观看，由任课教师签字，有计划地在课余时间上网或在实验室观看录像。对关键技术应反复观看。 四、作业： 1、简述猪、牛、羊的发情特点和判断配种时机的方法。 2、简述猪、牛、羊妊娠后的表现和妊娠诊断的一般方法。