羊的人工授精技术讲座
郑州牧业工程高等专科学校畜牧工程系
主讲人：张长兴
人工授精的意义
? 提高优秀种公羊的配种效能
? 防止传染病
? 避免公母羊体重悬殊造成的配种困难
? 能够有效地进行同期发情集中配种
? 加速品种改良
本交与人工授精比较
项目 人工授精 本交
一次射精配种母羊数 30-50 1
公母比 1:1000 1:40
受胎率 (估计 )% 鲜精 75、冻精 30-40 80左右
如何在羊场开展人工授精
? 配备人工授精设备
? 人工授精人员培训
? 选好种公羊
? 建立一个人工授精实验室
羊人工授精设备清单
（一）采精用品
? 1、假阴道部件：假阴道外壳、内胎（每
个外壳三条）、集精杯（每个外壳备用
两个）、橡胶塞、医用气伐、固定皮圈、
保护套
? 2、安装假阴道用品：瓷盘、温度计、石
蜡油（或凡士林）、毛巾,75%乙醇棉
球、漏斗、玻璃棒、镊子
?3、羊采精架
（二）稀释液配制用品
? 1,主要用品：三角锥瓶 （ 250毫升, 4个 ）,
定性滤纸, 玻璃漏斗, 玻璃棒, 量筒 （ 100毫
升 ）, 试管架, 漏斗架, 精液稀释粉 （ 100毫
升 ）
? 2,辅助用品：电炉 （ 500瓦 ）, 注射器 （ 一
次性, 10毫升 ）, 蒸馏水 （ 500毫升, 3瓶 ）,
洗瓶 （ 1个 ）, 石棉网, 消毒柜
（五）输精用品
? 输精器 （ 10只 ）, 胶头 （ 10个 ）, 酒精
棉球, 开膣器或羊用内窥镜, 输精架或
采精架
（四）精液品质检查用品
? 显微镜（ 100-400倍）、显微镜保温板、
载玻片、盖玻片,0.5%龙胆紫、计数板、
吸管或微量移液器
（五）输精用品
? 输精器（ 10只）、胶头或一次性注射器
（ 10个）、高锰酸钾、开膣器或羊用内
窥镜、输精架或采精架、纸巾
羊的人工授精操作技术
（一）稀释液配用品的清洗与消毒,
? 所有玻璃用品应用洗涤剂洗净后，用清
水反复冲洗，避免有洗涤剂残留。用蒸
馏水冲洗三次后，涳干水分后，放入消
毒柜中干燥。自然放凉后使用。
1、基础液配制,
? （ 1）先将稀释粉（ 100毫升用）三角锥瓶中，
加入 100毫升水中，用玻璃棒搅拌，充分溶解
? （ 2）将定性滤纸对折两次，折成锥形，放入
漏斗中，并将其放置在三角锥瓶上，将溶解后
的稀释液沿玻璃棒倒入漏斗中过滤
? （ 3）将石棉网放在电炉上，然后将锥形瓶放
在石棉网上，将稀释液加热至沸腾，立即取下
（ 4）稀释液放冷后，加入双抗（青霉素、链
霉素），充分溶解，并静置 20分钟以上
2、稀释液配制,
? （ 1）用吸管从中层吸取基础液，冲洗刻度试管并弃
去，重复三次。之后从中层取基础液加入刻度试管
至 8毫升处。
? （ 2）将新鲜鸡蛋擦干净，用 75%的酒精消毒表面，
待干燥后，打开鸡蛋分离出蛋清，将卵黄置于消毒
纸巾上，倾斜纸巾使其滚动，将卵黄表面的蛋清吸
干，用吸管轻轻挑破卵黄膜，吸取卵黄液加入刻度
试管中，使总液体容量为 10毫升。用吸管反复吸吐
使卵黄液与基础液混匀，贴上标签备用。
? 3、剩余的基础液贴上标签备用：用于冲洗假阴道和
输精器械
（二）安装假阴道,
? 1、将假阴道各部件充分洗涤干净，用蒸馏水
冲洗后，放在有余热的消毒柜中干燥，内胎应
用夹子夹好县挂在消毒柜内，安装前将瓷盘用
酒精消毒。逐件检查各部件是否有破损、漏水、
针眼。
? 2、将内胎光面向里，向外翻到外壳上，并使
其周正
? 3、用医用 75%乙醇棉球消毒内胎内壁、翻边及
集精杯
? 4、待乙醇干燥后，将集精杯安装在假阴
道上，用纱布套和固定皮圈固定
? 5、在内胎与夹壁间注入 50-55℃ 热水，
约占其体积 1/2，并左右平行摇动
? 6、用基础液冲洗内胎内壁及集精杯
? 7、用消毒的玻璃棒醮取少量凡士林或石
蜡油，从外口向内均匀涂布，涂布深度
为假阴道长度的 1/2
? 8、加塞、气伐，充气至压力适当（假阴
道外口的内胎呈 Y型，温度插入时感到有
一定阻力）
? 9、用温度计测量假阴道内的温度 2分钟。
合适的温度为 38-40℃,如不合适，再注
入适当温度的热水
? 10、用毛巾将安装好的假阴道包好，以
使保温备用
（三）采精
? 1、安装好假阴道并使其内部温度适当
? 2、将发情旺盛的母羊保定在采精架内
? 3、一切准备就绪后，再将公羊赶至采精
场并避免公羊靠近母羊，等待约 1分钟左
右
? 4、采精员手持假阴道蹲在右侧一旁
? 5、当公羊跳爬母羊臀部后，立即用左手
掌扶住包皮导引公羊阴茎，右手将假阴
道固定在母羊臀部右侧，使公羊阴茎伸
入假阴道内，公羊向上一冲，说明已经
射精。待公羊跳下，立即放掉假阴道内
空气，并垂直放置。
? 6、取出集精杯，使假阴道内的精液全部
进入集精杯中
（四）精液稀释
? 1、用吸管将精液移入用基础液冲洗过的刻度
试管中，与放稀释液的刻度试管一起放在 500
毫升 33℃ 水浴中（ 500毫升烧杯）预温 5分钟
? 2、计算稀释后精液容量：一般稀释比例为 1:3，
如 0.7毫升的原精液稀释后体积为 0.7× 4=2.8毫
升
? 3、用吸管将稀释液沿试管壁，缓慢加入精液
中，轻轻摇动混匀后，加塞密封
（五）精液保存
? 1、将盛放稀释后精液的刻度试管放在
500毫升 33℃ 的水浴中，然后再放入 2-
5℃ 冰箱中，约 40分钟降温至 2-5℃ 后。
继续在冰箱中的水浴中保存直到使用。
精液保存时间可达 72小时。在使用中，
保存时间超过 24小时，应对精子活力进
行检查，以便确定精液处理过程是否有
问题和精液能否继续使用
? 2、如果供电不正常或冰箱控温不可靠，
可将装稀释过的精液的试管用 4层纱布包
裹，装入自制的小塑料袋中，然后放入
加有碎冰块的广口保温杯中保存。经常
检查保温杯中的冰块，及时将溶化的冰
水倒掉，添加新的冰块。
母羊的发情鉴定
——判断母羊的最佳配种时机
母羊的生殖生理
项目 绵羊 山羊
初情期（月） 6-8 4-7
性成熟（月） 8-10 6-8
初配年龄 10-16 8-10
发情周期 (天 ) 16-17 20-21
发情期 (小时 ) 24-36 40
排卵时间 发情结束时 发情结束时
发情季节 秋 春秋
妊娠期（天） 150 150
产羔数 因品种不同 因品种不同
产后发情 下一个发情季节 分娩后 35天
（六）输精
? 1、每天用试情公羊检查母羊群两次，上下午各
一次，公羊用试情布兜住腹部，避免发生自然交
配
? 2、如果母羊接受公羊跳爬，证明已经发情，应
在发现发情后 6-12小时内第一次配种,12-18小
时后第二次配种。经产羊应于发现发情后 6-12小
时第一次配种，间隔 12-16小时后第二次配种。
初配羊应于发现发情后 12小时第一次配种，间隔
12小时第二次配种。
? 3、将母羊保定在采精架或专用保定架内，外
阴部及肛门用 0.3%的高锰酸钾冲洗后，用灭菌
纸巾擦干
? 4、将开膣器或内窥镜内外用酒精擦拭；用酒
精消毒输精器外部，并用稀释液冲洗内管备用
? 5、待酒精完全挥发后，在内窥镜或开膣器外
部涂上石蜡油；用输精器吸取稀释后的精液
0.05-0.15毫升
?6、由两位助手抓住母羊后腿，使其离地。
操作人员左手分开母羊阴门，将内窥镜
插入至阴道底部，打开光源；右手持输
精器，找到子宫颈管外口（子宫外口颜
色较暗），将输精器前端伸入子宫颈管
内 1-2厘米，将精液输入，记录输精情况
羊的输精
山羊冷冻精液技术
山羊冷冻精液的意义
? 精液保存时间可达几十年
? 最大限度利用种公羊，有利于以较低的
成本对本地山羊进行杂交改良
? 有足够的时间进行后裔鉴定
? 种公羊的产值更高
山羊冷冻精液稀释液配方
葡 -乳 -柠 -甘液 葡 -乳 -甘液 果 -乳 -甘液 解冻液
葡萄糖 3.00 2.00 - 3.00
果糖 - - 1.50 -
乳糖 3.18 9.00 10.50 -
柠檬酸钠 2.00 - - 1.4
双蒸水 100 100 100 100
青链霉素 各 10万单位 各 10万单位 各 10万单位 各 10万单位
毫摩尔浓度 526 361 375 356
第一
液
基础液 80 80 80
卵黄 20 20 20
第二
液
第一液 45 45 45
甘油 5 5 5
稀释液配制用品清单
序号 用品名 用量 序号 用品名 用量
1 250ml烧杯 4个 13 硫酸纸 10cm 10张
2 250ml三角瓶 4个 14 天平 (感量 0.01g) 1台
3 500ml输液瓶 5个 15 电炉及石棉网 1套
4 100或 250ml量筒 2个 16 纯水 2000毫升
5 胶头滴管 5支 17 葡萄糖 1瓶
6 玻璃棒 (30cm) 4支 18 柠檬酸钠 1瓶
7 玻璃漏斗 4个 19 果糖 1瓶
8 刻度试管 10支 20 乳糖 1瓶
9 5ml一次性注射器 10支 21 甘油 1瓶
10 试管架 1个 22 青链霉素 各 1瓶
11 温度计 2支 23 标签纸 1张 (30份 )
12 定性滤纸 1盒 24 圆珠笔 1支
采精及精液品质检查用品清单
序号 名称 数量 序号 名称 数量
1 假阴道外壳 10 温度计
2 内胎 11 500ml烧杯
3 集精杯 12 漏斗
4 气伐 13 显微镜及保温板
5 保温棉或毛巾 14 载玻片及盖玻片 各 20张
6 75%酒精棉球
7 95%酒精棉球
8 医用凡士林
9 镊子 (25cm)
精液冷冻用品清单
序号 名称 数量 序号 名称 数量
1 液氮罐及液氮 10 250ml烧杯
2 泡沫塑料盒 11 温度计
3 铝饭盒 12 解冻液
4 氟板 13 标签
5 镊子
6 滴管
7 细管
8 微量移液器
9 纱布袋或塑料筒
稀释液的配制
? 基础液的配制：秤量 -放入烧杯 -加入 100
毫升蒸馏水 -溶解 -过滤 -加热 -放冷
? 第一液配制：用基础液 80毫升，加入卵
黄液 20毫升。（附卵黄的取法）
? 第二液配制：第一液 45毫升，用一次性
注射器取甘油 5毫升，加入混合均匀。
? 解冻液的配制,2.9%的柠檬酸钠液
冷冻精液的程序
1、精液的采集：山羊采精可采用一次采精两个射精
量的方法（间隔时间 15分钟）
2、品质检查：精液的密度和活力都必须符合要求
（密度为密以上，活力 0.7以上）。
3、稀释前处理：如果用条件可将山羊精液进行清洗，
有利于提高解冻后的活力及受胎率。
4、稀释：最常使用的是二次稀释法：即第一次在
30℃ 下，用不含甘油的稀释液稀释，降温至 2-5℃ 时，
用含甘油的稀释液进行稀释，并平衡 2小时。
冷冻精液的程序
? 稀释
– 第一次稀释：在 30℃ 温度下，根据计算的稀释倍数
进行第一次稀释，一般为 1:0.5稀释,放在 500毫升的
烧杯中与第二液一起缓慢降温至 2-5 ℃ 。
– 第二次稀释：在 2-5 ℃ 下进行,一般为 1:1稀释
5、平衡：是精液与防冻剂（甘油）相互的时间。
一般 2小时。
6、分装：山羊冷冻精液最常用的剂型是细管
(0.25ml)和颗粒 (0.1ml)两种。
冷冻精液的程序
7、冷冻,
– 冷源：干冰（ -79 ℃ ）、最常用液氮（ -196 ℃ ）
– 冷冻用品,
? 冷冻面：铜网、氟板（聚四氟乙烯）、铝板
? 冷冻槽：广口液氮罐、液氮槽
? 钢匙、镊子、低温温度计
– 冷冻方法,
? 干冰埋藏法
? 液氮熏蒸法
– 不同剂型冷冻方法,
? 颗粒冻精
? 细管冻精
8、活力检查：解冻后活力应在 0.3以上
颗粒冻精制作方法
? 在泡沫塑料盒中注入液氮，并使液氮面距冷冻
面 1厘米左右
? 将铝饭盒和氟板浸入液氮中片刻
? 将铝饭盒固定在液氮面上 2厘米左右高处
? 在氟板的凹槽中，各滴入平衡后的精液 0.1毫升
（约两滴），全部滴完后，加盖
? 将铝饭盒浸入液氮中片刻，将颗粒冻精倒入浸
在液氮中的铝盒内
? 分装到纱布袋中或塑料筒中
细管冻精制作
? 细管冻精的分装
? 平衡及上架
? 将冷冻架放入距液氮面 10厘米的广口液
氮罐中约 5分钟
? 将其收集后浸入液氮中保存
山羊冷冻精液制作应注意的事项
? 所有接触平衡后的精液的用品都必须处于 2-5℃
? 冷冻板必须在预冷（约 -110℃ ）后才能滴冻精液
? 滴冻过程应保证以下几个要求,
– 规格的一致（每个颗粒约 0.1ml） 或每毫升 10个颗粒
– 形状一致 呈球形或大半球形
– 无气泡 浸入液氮后应沉入底部
– 相互不连结
– 一定要有熏蒸过程
? 所有接触冻精的用品必须经过液氮预冷
? 分装过程中应避免冻精在空气中暴露时间过长（ 3秒以
内）
冻精的解冻
? 解冻温度：有冰水解冻,30-40 ℃ 解冻，高温
（ 50-75 ℃ ）解冻，一般认为山羊冻精的解冻
以高温解冻效果最好。
? 解冻方法,
– 湿解冻法：在试管中加入 0.5-1ml解冻液，升温到
30-40 ℃,投入一粒冻精，摇动并取出
– 干解冻法：先将试管预热至 30-40 ℃,投入冻精颗
粒后，至融化一半时，取出加入 20-30 ℃ 的解冻液
– 细管冻精解冻：将细管从液氮罐或液氮槽中取出，
投入 30-40 ℃ 的水中至融化一半时取出用手搓至完
全融化或用体温解冻
? 解冻后温度,5-8℃
? 解冻后保存：在 2-5℃ 下或冰瓶中可保存 12小时
以上。
冷冻精液的保存
? 冻精（颗粒）应进行标记,
– 公畜名（号）、采精日期、容量
? 保持液氮罐中液氮面高度
? 接触冷冻精液的用品都要进行预冷
? 在冻精进行转移时，应尽可能减少在空气中暴露的
时间。如果是颗粒冻精应先移入液氮槽中再解冻。
? 液氮罐应放在凉爽通风处，避免放在高温或通风不
畅的地方
? 液氮罐在运输中应防止暴晒和碰撞。
山羊冷冻精液制作
牛冷冻精液制作
八、妊娠诊断
? 1、根据输精情况记录，于配种后第 19-
22天观察母羊是否返情，如果返情应安
排补配。如未返情可基本确定为妊娠
? 2、用妊娠诊断仪于配种后 20天后检测以
确定母羊是否受孕
八、配种情况分析
? 1、检查母羊受孕情况，评估配种技术水
平，总结经验
? 2、根据记录查找未受配母羊，并分析未
配原因，及时处理
郑州牧业工程高等专科学校畜牧工程系
主讲人：张长兴
人工授精的意义
? 提高优秀种公羊的配种效能
? 防止传染病
? 避免公母羊体重悬殊造成的配种困难
? 能够有效地进行同期发情集中配种
? 加速品种改良
本交与人工授精比较
项目 人工授精 本交
一次射精配种母羊数 30-50 1
公母比 1:1000 1:40
受胎率 (估计 )% 鲜精 75、冻精 30-40 80左右
如何在羊场开展人工授精
? 配备人工授精设备
? 人工授精人员培训
? 选好种公羊
? 建立一个人工授精实验室
羊人工授精设备清单
（一）采精用品
? 1、假阴道部件：假阴道外壳、内胎（每
个外壳三条）、集精杯（每个外壳备用
两个）、橡胶塞、医用气伐、固定皮圈、
保护套
? 2、安装假阴道用品：瓷盘、温度计、石
蜡油（或凡士林）、毛巾,75%乙醇棉
球、漏斗、玻璃棒、镊子
?3、羊采精架
（二）稀释液配制用品
? 1,主要用品：三角锥瓶 （ 250毫升, 4个 ）,
定性滤纸, 玻璃漏斗, 玻璃棒, 量筒 （ 100毫
升 ）, 试管架, 漏斗架, 精液稀释粉 （ 100毫
升 ）
? 2,辅助用品：电炉 （ 500瓦 ）, 注射器 （ 一
次性, 10毫升 ）, 蒸馏水 （ 500毫升, 3瓶 ）,
洗瓶 （ 1个 ）, 石棉网, 消毒柜
（五）输精用品
? 输精器 （ 10只 ）, 胶头 （ 10个 ）, 酒精
棉球, 开膣器或羊用内窥镜, 输精架或
采精架
（四）精液品质检查用品
? 显微镜（ 100-400倍）、显微镜保温板、
载玻片、盖玻片,0.5%龙胆紫、计数板、
吸管或微量移液器
（五）输精用品
? 输精器（ 10只）、胶头或一次性注射器
（ 10个）、高锰酸钾、开膣器或羊用内
窥镜、输精架或采精架、纸巾
羊的人工授精操作技术
（一）稀释液配用品的清洗与消毒,
? 所有玻璃用品应用洗涤剂洗净后，用清
水反复冲洗，避免有洗涤剂残留。用蒸
馏水冲洗三次后，涳干水分后，放入消
毒柜中干燥。自然放凉后使用。
1、基础液配制,
? （ 1）先将稀释粉（ 100毫升用）三角锥瓶中，
加入 100毫升水中，用玻璃棒搅拌，充分溶解
? （ 2）将定性滤纸对折两次，折成锥形，放入
漏斗中，并将其放置在三角锥瓶上，将溶解后
的稀释液沿玻璃棒倒入漏斗中过滤
? （ 3）将石棉网放在电炉上，然后将锥形瓶放
在石棉网上，将稀释液加热至沸腾，立即取下
（ 4）稀释液放冷后，加入双抗（青霉素、链
霉素），充分溶解，并静置 20分钟以上
2、稀释液配制,
? （ 1）用吸管从中层吸取基础液，冲洗刻度试管并弃
去，重复三次。之后从中层取基础液加入刻度试管
至 8毫升处。
? （ 2）将新鲜鸡蛋擦干净，用 75%的酒精消毒表面，
待干燥后，打开鸡蛋分离出蛋清，将卵黄置于消毒
纸巾上，倾斜纸巾使其滚动，将卵黄表面的蛋清吸
干，用吸管轻轻挑破卵黄膜，吸取卵黄液加入刻度
试管中，使总液体容量为 10毫升。用吸管反复吸吐
使卵黄液与基础液混匀，贴上标签备用。
? 3、剩余的基础液贴上标签备用：用于冲洗假阴道和
输精器械
（二）安装假阴道,
? 1、将假阴道各部件充分洗涤干净，用蒸馏水
冲洗后，放在有余热的消毒柜中干燥，内胎应
用夹子夹好县挂在消毒柜内，安装前将瓷盘用
酒精消毒。逐件检查各部件是否有破损、漏水、
针眼。
? 2、将内胎光面向里，向外翻到外壳上，并使
其周正
? 3、用医用 75%乙醇棉球消毒内胎内壁、翻边及
集精杯
? 4、待乙醇干燥后，将集精杯安装在假阴
道上，用纱布套和固定皮圈固定
? 5、在内胎与夹壁间注入 50-55℃ 热水，
约占其体积 1/2，并左右平行摇动
? 6、用基础液冲洗内胎内壁及集精杯
? 7、用消毒的玻璃棒醮取少量凡士林或石
蜡油，从外口向内均匀涂布，涂布深度
为假阴道长度的 1/2
? 8、加塞、气伐，充气至压力适当（假阴
道外口的内胎呈 Y型，温度插入时感到有
一定阻力）
? 9、用温度计测量假阴道内的温度 2分钟。
合适的温度为 38-40℃,如不合适，再注
入适当温度的热水
? 10、用毛巾将安装好的假阴道包好，以
使保温备用
（三）采精
? 1、安装好假阴道并使其内部温度适当
? 2、将发情旺盛的母羊保定在采精架内
? 3、一切准备就绪后，再将公羊赶至采精
场并避免公羊靠近母羊，等待约 1分钟左
右
? 4、采精员手持假阴道蹲在右侧一旁
? 5、当公羊跳爬母羊臀部后，立即用左手
掌扶住包皮导引公羊阴茎，右手将假阴
道固定在母羊臀部右侧，使公羊阴茎伸
入假阴道内，公羊向上一冲，说明已经
射精。待公羊跳下，立即放掉假阴道内
空气，并垂直放置。
? 6、取出集精杯，使假阴道内的精液全部
进入集精杯中
（四）精液稀释
? 1、用吸管将精液移入用基础液冲洗过的刻度
试管中，与放稀释液的刻度试管一起放在 500
毫升 33℃ 水浴中（ 500毫升烧杯）预温 5分钟
? 2、计算稀释后精液容量：一般稀释比例为 1:3，
如 0.7毫升的原精液稀释后体积为 0.7× 4=2.8毫
升
? 3、用吸管将稀释液沿试管壁，缓慢加入精液
中，轻轻摇动混匀后，加塞密封
（五）精液保存
? 1、将盛放稀释后精液的刻度试管放在
500毫升 33℃ 的水浴中，然后再放入 2-
5℃ 冰箱中，约 40分钟降温至 2-5℃ 后。
继续在冰箱中的水浴中保存直到使用。
精液保存时间可达 72小时。在使用中，
保存时间超过 24小时，应对精子活力进
行检查，以便确定精液处理过程是否有
问题和精液能否继续使用
? 2、如果供电不正常或冰箱控温不可靠，
可将装稀释过的精液的试管用 4层纱布包
裹，装入自制的小塑料袋中，然后放入
加有碎冰块的广口保温杯中保存。经常
检查保温杯中的冰块，及时将溶化的冰
水倒掉，添加新的冰块。
母羊的发情鉴定
——判断母羊的最佳配种时机
母羊的生殖生理
项目 绵羊 山羊
初情期（月） 6-8 4-7
性成熟（月） 8-10 6-8
初配年龄 10-16 8-10
发情周期 (天 ) 16-17 20-21
发情期 (小时 ) 24-36 40
排卵时间 发情结束时 发情结束时
发情季节 秋 春秋
妊娠期（天） 150 150
产羔数 因品种不同 因品种不同
产后发情 下一个发情季节 分娩后 35天
（六）输精
? 1、每天用试情公羊检查母羊群两次，上下午各
一次，公羊用试情布兜住腹部，避免发生自然交
配
? 2、如果母羊接受公羊跳爬，证明已经发情，应
在发现发情后 6-12小时内第一次配种,12-18小
时后第二次配种。经产羊应于发现发情后 6-12小
时第一次配种，间隔 12-16小时后第二次配种。
初配羊应于发现发情后 12小时第一次配种，间隔
12小时第二次配种。
? 3、将母羊保定在采精架或专用保定架内，外
阴部及肛门用 0.3%的高锰酸钾冲洗后，用灭菌
纸巾擦干
? 4、将开膣器或内窥镜内外用酒精擦拭；用酒
精消毒输精器外部，并用稀释液冲洗内管备用
? 5、待酒精完全挥发后，在内窥镜或开膣器外
部涂上石蜡油；用输精器吸取稀释后的精液
0.05-0.15毫升
?6、由两位助手抓住母羊后腿，使其离地。
操作人员左手分开母羊阴门，将内窥镜
插入至阴道底部，打开光源；右手持输
精器，找到子宫颈管外口（子宫外口颜
色较暗），将输精器前端伸入子宫颈管
内 1-2厘米，将精液输入，记录输精情况
羊的输精
山羊冷冻精液技术
山羊冷冻精液的意义
? 精液保存时间可达几十年
? 最大限度利用种公羊，有利于以较低的
成本对本地山羊进行杂交改良
? 有足够的时间进行后裔鉴定
? 种公羊的产值更高
山羊冷冻精液稀释液配方
葡 -乳 -柠 -甘液 葡 -乳 -甘液 果 -乳 -甘液 解冻液
葡萄糖 3.00 2.00 - 3.00
果糖 - - 1.50 -
乳糖 3.18 9.00 10.50 -
柠檬酸钠 2.00 - - 1.4
双蒸水 100 100 100 100
青链霉素 各 10万单位 各 10万单位 各 10万单位 各 10万单位
毫摩尔浓度 526 361 375 356
第一
液
基础液 80 80 80
卵黄 20 20 20
第二
液
第一液 45 45 45
甘油 5 5 5
稀释液配制用品清单
序号 用品名 用量 序号 用品名 用量
1 250ml烧杯 4个 13 硫酸纸 10cm 10张
2 250ml三角瓶 4个 14 天平 (感量 0.01g) 1台
3 500ml输液瓶 5个 15 电炉及石棉网 1套
4 100或 250ml量筒 2个 16 纯水 2000毫升
5 胶头滴管 5支 17 葡萄糖 1瓶
6 玻璃棒 (30cm) 4支 18 柠檬酸钠 1瓶
7 玻璃漏斗 4个 19 果糖 1瓶
8 刻度试管 10支 20 乳糖 1瓶
9 5ml一次性注射器 10支 21 甘油 1瓶
10 试管架 1个 22 青链霉素 各 1瓶
11 温度计 2支 23 标签纸 1张 (30份 )
12 定性滤纸 1盒 24 圆珠笔 1支
采精及精液品质检查用品清单
序号 名称 数量 序号 名称 数量
1 假阴道外壳 10 温度计
2 内胎 11 500ml烧杯
3 集精杯 12 漏斗
4 气伐 13 显微镜及保温板
5 保温棉或毛巾 14 载玻片及盖玻片 各 20张
6 75%酒精棉球
7 95%酒精棉球
8 医用凡士林
9 镊子 (25cm)
精液冷冻用品清单
序号 名称 数量 序号 名称 数量
1 液氮罐及液氮 10 250ml烧杯
2 泡沫塑料盒 11 温度计
3 铝饭盒 12 解冻液
4 氟板 13 标签
5 镊子
6 滴管
7 细管
8 微量移液器
9 纱布袋或塑料筒
稀释液的配制
? 基础液的配制：秤量 -放入烧杯 -加入 100
毫升蒸馏水 -溶解 -过滤 -加热 -放冷
? 第一液配制：用基础液 80毫升，加入卵
黄液 20毫升。（附卵黄的取法）
? 第二液配制：第一液 45毫升，用一次性
注射器取甘油 5毫升，加入混合均匀。
? 解冻液的配制,2.9%的柠檬酸钠液
冷冻精液的程序
1、精液的采集：山羊采精可采用一次采精两个射精
量的方法（间隔时间 15分钟）
2、品质检查：精液的密度和活力都必须符合要求
（密度为密以上，活力 0.7以上）。
3、稀释前处理：如果用条件可将山羊精液进行清洗，
有利于提高解冻后的活力及受胎率。
4、稀释：最常使用的是二次稀释法：即第一次在
30℃ 下，用不含甘油的稀释液稀释，降温至 2-5℃ 时，
用含甘油的稀释液进行稀释，并平衡 2小时。
冷冻精液的程序
? 稀释
– 第一次稀释：在 30℃ 温度下，根据计算的稀释倍数
进行第一次稀释，一般为 1:0.5稀释,放在 500毫升的
烧杯中与第二液一起缓慢降温至 2-5 ℃ 。
– 第二次稀释：在 2-5 ℃ 下进行,一般为 1:1稀释
5、平衡：是精液与防冻剂（甘油）相互的时间。
一般 2小时。
6、分装：山羊冷冻精液最常用的剂型是细管
(0.25ml)和颗粒 (0.1ml)两种。
冷冻精液的程序
7、冷冻,
– 冷源：干冰（ -79 ℃ ）、最常用液氮（ -196 ℃ ）
– 冷冻用品,
? 冷冻面：铜网、氟板（聚四氟乙烯）、铝板
? 冷冻槽：广口液氮罐、液氮槽
? 钢匙、镊子、低温温度计
– 冷冻方法,
? 干冰埋藏法
? 液氮熏蒸法
– 不同剂型冷冻方法,
? 颗粒冻精
? 细管冻精
8、活力检查：解冻后活力应在 0.3以上
颗粒冻精制作方法
? 在泡沫塑料盒中注入液氮，并使液氮面距冷冻
面 1厘米左右
? 将铝饭盒和氟板浸入液氮中片刻
? 将铝饭盒固定在液氮面上 2厘米左右高处
? 在氟板的凹槽中，各滴入平衡后的精液 0.1毫升
（约两滴），全部滴完后，加盖
? 将铝饭盒浸入液氮中片刻，将颗粒冻精倒入浸
在液氮中的铝盒内
? 分装到纱布袋中或塑料筒中
细管冻精制作
? 细管冻精的分装
? 平衡及上架
? 将冷冻架放入距液氮面 10厘米的广口液
氮罐中约 5分钟
? 将其收集后浸入液氮中保存
山羊冷冻精液制作应注意的事项
? 所有接触平衡后的精液的用品都必须处于 2-5℃
? 冷冻板必须在预冷（约 -110℃ ）后才能滴冻精液
? 滴冻过程应保证以下几个要求,
– 规格的一致（每个颗粒约 0.1ml） 或每毫升 10个颗粒
– 形状一致 呈球形或大半球形
– 无气泡 浸入液氮后应沉入底部
– 相互不连结
– 一定要有熏蒸过程
? 所有接触冻精的用品必须经过液氮预冷
? 分装过程中应避免冻精在空气中暴露时间过长（ 3秒以
内）
冻精的解冻
? 解冻温度：有冰水解冻,30-40 ℃ 解冻，高温
（ 50-75 ℃ ）解冻，一般认为山羊冻精的解冻
以高温解冻效果最好。
? 解冻方法,
– 湿解冻法：在试管中加入 0.5-1ml解冻液，升温到
30-40 ℃,投入一粒冻精，摇动并取出
– 干解冻法：先将试管预热至 30-40 ℃,投入冻精颗
粒后，至融化一半时，取出加入 20-30 ℃ 的解冻液
– 细管冻精解冻：将细管从液氮罐或液氮槽中取出，
投入 30-40 ℃ 的水中至融化一半时取出用手搓至完
全融化或用体温解冻
? 解冻后温度,5-8℃
? 解冻后保存：在 2-5℃ 下或冰瓶中可保存 12小时
以上。
冷冻精液的保存
? 冻精（颗粒）应进行标记,
– 公畜名（号）、采精日期、容量
? 保持液氮罐中液氮面高度
? 接触冷冻精液的用品都要进行预冷
? 在冻精进行转移时，应尽可能减少在空气中暴露的
时间。如果是颗粒冻精应先移入液氮槽中再解冻。
? 液氮罐应放在凉爽通风处，避免放在高温或通风不
畅的地方
? 液氮罐在运输中应防止暴晒和碰撞。
山羊冷冻精液制作
牛冷冻精液制作
八、妊娠诊断
? 1、根据输精情况记录，于配种后第 19-
22天观察母羊是否返情，如果返情应安
排补配。如未返情可基本确定为妊娠
? 2、用妊娠诊断仪于配种后 20天后检测以
确定母羊是否受孕
八、配种情况分析
? 1、检查母羊受孕情况，评估配种技术水
平，总结经验
? 2、根据记录查找未受配母羊，并分析未
配原因，及时处理
