动物胚胎移植技术
郑州牧业工程高等专科学校 主讲人：张长兴
动物繁殖新技术系列讲座
目录
? 第一节 胚胎工程概述
? 第二节 胚胎移植的原理
? 第三节 胚胎移植的技术程序
? 第四节 牛的胚胎移植
? 第五节 羊胚胎移植
动物繁殖新技术系列讲座
第一节 胚胎移植概述
1.胚胎移植的历史
2.胚胎移植技术的应用
3.胚胎移植的成本
4.胚胎移植的经济效益
动物胚胎移植技术
1.胚胎移植的历史
胚胎移植概述
? 1.1初始阶段,1890-1900 W.Heape将安
哥拉兔和荷兰兔的受精卵分别移植到比
利时兔的输卵管内，分别获得仔兔 2只。
胚胎移植的历史
? 1.2初级阶段,1900-1950 主要由英美科
学家在家兔、绵羊、山羊小家畜方面研
究，成功率 35%左右。
胚胎移植的历史
? 1.3发展阶段,1950-1970 日本首次在牛
胚胎移植上成功，之后日、美采用非手
术法移植成功。胚胎移植成功率达 70-
80%
胚胎移植的历史
? 1.4实用化初始阶段,1970-1980 加美开
始成立牛胚胎移植公司,1973年牛冻胚
移植成功（英）
胚胎移植的历史
? 1.5实用化研究阶段,1982- 大规模胚胎移植、
核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外
受精在英美日德广泛开展。克隆羊诞生。
胚胎移植的历史
2.胚胎移植的应用范围
? 在家畜改良方面的应用
? 在特定品种扩繁上的应用
? 在动物生物多样性上的应用
? 其它方面应用：转基因动物、性别控制、体外
受精
胚胎移植概述
2.1在家畜改良方面的应用
? 人工授精技术可成几十到几百倍地提高了优秀
种公畜的配种效能。但对优秀母畜来说，受其
产仔数和世代间隔的限制，尤其是牛羊等繁殖
力较低的畜种更是如此。
? 通过超数排卵和胚胎移植技术（ multiple
ovulation and embryo transfer,MOET)牛羊
的生长性状年遗传进展可比正常繁殖提高 80%
和 70%；产奶性状提高 33%。
胚胎移植的应用范围
2.2在特定品种扩繁上的应用
? 牛羊等低繁殖力家畜，从引进到形成一个纯种
群体需要 7-8个世代,15-20年。而采用 MEOT
法，一次就可获得一个纯种群体
? 80年代初，美、澳、新从欧洲引进的大型肉牛
品种均采用胚胎移植技术扩繁
? 2000年前后，我国的波尔山羊也是采用胚胎移
植进行扩繁的
胚胎移植的应用范围
2.3在动物生物多样性上的应用
? 在保护动物遗传资源，提高家畜生产性能，挽
救濒临灭绝的野生动物方面，胚胎移植技术越
越来发挥出重要作用。
? 冷冻能够很好地保存濒临灭绝动物的胚胎或生
殖细胞，但该种动物雌性个体的减少，也是这
种动物的胚胎或生殖细胞无法得到移植，科学
家开始研究在该种动物的亚种或亲缘种中试验，
并取得一些成功。如斑马胚胎移植给马，蒙古
马胚胎移植给驴，白肢野牛移植给荷斯坦牛。
胚胎移植的应用范围
2.4其它方面应用
? 胚胎移植是克隆技术的必须过程
? 体外受精必须借助胚胎移植实现“试管婴儿的
继续发育
? 转基因及动物生物反应器的研究也必须借助胚
胎移植
胚胎移植的应用范围
3.胚胎移植的成本
? 种母畜购入或培育成本及饲养费，胚胎成本
分摊
? 配种费
? 激素,FSH,LH,PG
? 手术费：手术药品及耗材、手术辅助人员报
酬等
? 技术费：技术人员约定报酬
? 其它：实验室配置、差旅费、招待费
胚胎移植概述
4.胚胎移植的经济效益
胚胎移植是一个技术过程复杂，各个环节环环
相扣，任何一个不能出现失误的系统工程。
影响胚胎移植成功率的因素很多，同时，其运
作成本较高。这使其应用中存在经济效益上的高风
险性。
如果不是基于急需扩群、供体高经济价值、育
种目的，一般尽量采用自然繁殖。在特殊情况下，
如供种初始阶段，少量优秀个体的扩增，胚胎移植
可创造较好的经济效益。
胚胎移植概述
第二节 胚胎移植的生理基础及原则
? 1.胚胎移植的生理学基础
? 2.胚胎移植的基本原则
动物胚胎移植技术
1.胚胎移植的生理学基础
? 成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在
外源激素作用下，每个发情期的卵泡发育和
排卵数可达十数个
? 每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育
? 早期胚胎处于游离状态
? 胚胎发育不存在免疫问题
? 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组
联系
? 胚胎的遗传性不受受体的影响
胚胎移植的生理基础及原则
2,胚胎移植的基本原则
? 胚胎移植前后所处的环境的同一性
– 供体和受体在分类学上的相同属性
– 动物生理上的一致性：受体和供体在发情时间
上的同期性
– 动物解剖位置上的一致性：空间环境的一致性
? 胚胎的发育期限：必须处于周期黄体期内
? 胚胎的质量：胚胎必须是正常的，并在处理过程
中不受不良因素的影响
至目录
胚胎移植的生理基础及原则
第三节 胚胎移植的技术程序
? 1.供体和受体的选择
? 2,超数排卵处理
? 3.供体母畜的配种
? 4.胚胎的收集
? 5.胚胎的检查
? 6.胚胎的保存与培养
? 7.胚胎的移植
? 8.供体和受体的术后观察
动物胚胎移植技术
1.供体和受体的选择
? 供体应具有相当高的育种价值
? 供体生殖机能应处于较高的状态：产后 60天以
上，无生殖系统疾病，体质强健
? 受体应容易购买，繁殖性能好，对地方适应性
强，体型中上等，非优良品种
? 受体健康状况良好，已进入发情季节
? 供受体发情时间应接近或一致
胚胎移植的技术程序
2,超数排卵处理
? 意义：让每个供体提供更多的胚胎
? 处理时间,
– 牛：预计自然发情时间的前 4天，或发情
周期的第 16-17天
– 羊：发情周期的第 12-15天，促性腺激素
处理的第二天或第三天，注射 PG
胚胎移植的技术程序
3.供体母畜的配种
? 必须用优秀的种公畜进行多次配种，一般隔
8-12小时进行一次配种，直到发情结束
? 配种前应对种公畜的精液进行质量检查
? 可优秀种公畜不足时，可考虑首次采用本交，
以后采用人工授精，也可以全部采用人工授
精
胚胎移植的技术程序
4.胚胎的收集
? 胚胎冲洗液的配制：杜氏磷酸缓冲液 PBS,布
林斯特液 SOF合成输卵管液
? 手术法收集胚胎
– 输卵管冲胚：顺向冲胚、逆向冲胚
– 子宫角冲胚
? 非手术法收集胚胎
– 二路法
– 三路法
胚胎移植的技术程序
? 收集到的冲洗液静置，冲洗液分离
? 拣胚：将胚胎移至培养液或保存液中
? 胚胎鉴定：根据透明带、胚胎细胞、发
育阶段及细胞在透明带中的比例确定胚
胎级别
胚胎移植的技术程序
5.胚胎的检查
? 胚胎的降温：使胚胎停止发育，延长其
体外生存时间
? 体外培养：将胚胎置于体温条件下，在
培养液中，使其继续发育
? 胚胎冷冻：通过一定的处理程序，将胚
胎降温冷冻后，保存于液氮中
胚胎移植的技术程序
6.胚胎的保存
? 手术法移植
? 非手术法移植
胚胎移植的技术程序
7.胚胎移植
? 供体和受体的抗炎处理
? 健康状况检查
? 返情状况检查
? 妊娠检查及妊娠确定
胚胎移植的技术程序
8.供体和受体的术后观察及处理
动物胚胎移植技术
第四节 牛的胚胎移植
目 录
一、供体牛的选择
二、供体牛的饲养
三、超数排卵处理
四、采卵
五、检卵
六、胚胎的鉴定和分级
七、胚胎的移植
八、妊娠诊断
? 1.应符合本品种标准, 具有较高的生产性能 。
? 2.1.5～ 8岁, 体格健壮, 无遗传性疾病, 繁殖机能正常 。
? 3.产犊记录清楚, 无流产史, 产后有两次正常发情记录 。
? 4.生殖器官正常, 无繁殖疾病 。
? 5.重复超数排卵间隔 60d左右 。 最多连续处理 4次后, 自然
繁殖后再使用 。 凡 2次超数排卵反应差的母牛不再用作供
体 。
? 6.供体牛的超数排卵处理应在情期的第 9～ 13d进行 。 凡黄
体发育不良, 卵巢静止的母牛不宜用 。
? 7.应选择性情温顺的母牛作供体，以便于操作。
牛的胚胎移植
一、供体牛的选择
牛的胚胎移植
二,供体牛的饲养管理
1.良好的营养状况,要保证给供体牛足够的优质
干草, 青贮或多汁饲料, 精料以及维生素和矿
物质, 并供给清洁的饮水和盐, 做到合理饲养,
精心管理 。
? 2．供体牛在采卵前后要特别注意保持良好的
饲管环境，不得任意变换饲草；饲料和管理程
序，避免因过强的应激所造成的神经紧张状态。
三,超数排卵处理
牛的胚胎移植
1.FSH法
超数排卵处理
放栓 发情鉴定 配种
0123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
7:00
FSH 4ml
18:00
FSH 4 ml
7:00
FSH
2.5ml
18:00
FSH
2.5ml
7:00 FSH
2ml
14:00 PG6ml
18:00 FSH
2ml
7:00 FSH
1.5ml
14:00 取栓
18:00 FSH
1.5ml
配
种
配
种
检
查
黄
体
冲
胚
移
胚
处 理 时 间
18 19 20 21 22 23 24
7:00FSH2.4ml 7:00FSH1.4ml 7:00FSH1.2ml
2:00PG0.8ml 2:00 取栓
6:00FSH2.4ml
6:00FSH1.4ml 6:00FSH1.2ml
发 情
鉴定
配种
发情
鉴定
配种
冲胚
移胚
牛超数排卵示意图
超数排卵处理
2.PMSG法
孕马血清促性腺激素 (PMSG)处理法
在情期的 11～ 12d,一次肌注 PMSG2500～ 30001U，
48h后宫注 PGF2α 2.4mg。 发情后约 18h肌注等量
的抗 PMSG。
超数排卵处理
放栓 发情鉴定 配种
0123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
12:00
PMSG
2500IU
12:00宫注
氯前列烯醇
4ml
12:00
取栓
抗
血
清
配
种
配
种
检
查
黄
体
冲
胚
移
胚
3.发情观察和配种
PGF2α 处理后 40～ 48h,大部分处理牛发情 。
通常要求从注 PG第 2d傍晚开始观察发情, 至少早
晚各观察一次 。 在观察到接受爬跨后 4～ 6h进行
第一次输精, 间隔 12h后第二次输精 。 每次有效
精子数不得少于 50× 106,输入两侧子宫角或子
宫体 。 注意输精时不得触摸卵巢 。
超数排卵处理
四,采卵
牛的胚胎移植
1．采卵时间
以发情日为第 0d,在第 5～ 6d检查卵巢
确定黄体数, 以便于安排受体头数 。 第
7d(或第 6～ 8d)非手术回收卵 。
采卵
2．器械和冲卵液的准备
灭菌处理过的冲卵管用 PBS液冲洗 2～ 3次,
插入钢芯, 检查气球 。 在无菌间用导管连接吊瓶
和集卵杯灌流装置 。 装入 PBS液的吊瓶在 37℃ 水
浴中预温待用 。 准备好必要的麻醉剂, 注射器,
酒精棉球和冲洗消毒剂等 。
采卵
3．供体牛的保定和麻醉
供体牛保定完毕后, 在第一, 二尾椎骨
间酒精消毒, 用 2%普鲁卡因 3～ 5ml作硬膜
外麻醉, 或肌注 2%静松灵 l ml。 （三）采卵
采卵
4．外阴清洗、消毒
麻醉后将牛尾竖直绑在保定架上, 清除粪便, 用清
水冲洗会阴部及外阴, 再用高锰酸钾液冲洗消毒,
用灭菌卫生纸擦干, 最后用酒精棉球消毒外阴部 。
采卵
5．冲卵管的插入和冲卵部位
助手将准备好的冲卵管交给术者的右手, 术者左手
食指和拇指压开阴门插入冲卵管, 再将左手伸入
直肠, 仔细小心地诱导冲卵管经子宫颈进入一侧
子宫角至大弯处, 抽出少许钢芯, 再将冲卵管向
前推, 使其尖端靠近子宫角深部 。 由助手持 30ml
注射器一次推入 10ml空气, 然后按术者要求, 以
1ml计数充气 。 根据子宫大小及冲卵管在子宫的
位置确定充气量, 一般青年牛充气 14～ 16ml,经
产牛为 18～ 25ml。 冲卵管固定后抽出钢芯, 开始
灌流 。
（三）采卵
采卵
6．灌流方法
将吊瓶挂在距外阴部 1.0m高处, 接通三通管 (Y型 )
和冲卵管 。 术者用右手控制进流和出流开关, 每
次灌注 30～ 50ml,由少到多, 每侧总量为 300～
500ml。 左手通过直肠辅助按摩子宫角 。 每侧子
宫角冲 8～ 10次 。 或者用 50ml注射器, 每次注入
30～ 50ml的 PBS冲卵液, 分次冲洗子宫角, 回收
后注入加盖量筒 。 另一侧子宫角的冲洗是由术者
右手拉直冲卵管, 助手小心插入钢芯 。 术者的左
手在直肠内诱导钢芯插稳后, 给气球放气 。 术者
再将冲卵管插入另一侧子宫角, 用同样的方法冲
洗 。 全过程需在室温 (20℃ 左右 )操作 。
（三）采卵
采卵
（三）采卵
采卵
7．术后处理
两侧子宫角冲卵完成后, 从气球放出一部分
空气, 将冲卵管抽至子宫体灌注土霉素溶
液 (3g土霉素粉溶于 100ml灭菌双蒸水或生
理盐水 )或 10ml青霉素 (80万 u)和链霉素
(100万 u),拔出冲卵管 。
（三）采卵
采卵
五、检卵
（三）采卵
1．过滤集卵杯 (日本产 )法
回收结束后, 用带 4G针头的注射器冲洗滤网
2～ 3次, 吸去杯中的泡沫, 置实体显微镜
下检查 。
（三）采卵
检卵
2．过滤杯 (美国产 )法
滤去冲卵液, 将过滤杯中留下的 30～ 50ml倒
入平皿, 用冲卵液冲洗过滤杯 2～ 3次, 一
并倒入平皿, 置镜下检查 。
（三）采卵
检卵
3．沉淀法 (或滤网吸液法 )
将回收的冲卵液注入 1000ml量筒, 在 20～
25℃ 下静置 20～ 30min(min),用导管吸去
上层液体 。 或者按好滤网, 用导管在滤网
上吸去上部冲卵液, 将残留的 80～ 100ml
倒入平皿内检卵 。
（三）采卵
检卵
4．检卵前的准备
在酒精灯上拉好内径为 200～ 300um的玻璃吸
管和玻璃棒, 在吸管上连接乳胶管 (也可用
1ml一次性注射器与一支采血管接一起 )。
在小培养皿内做好含 10%或 20%牛血清的
PBS保存液液滴 3～ 5个, 覆盖上液体石蜡
油, 作好编号, 放入培养箱待用 。
（三）采卵
检卵
5．检卵
用玻璃棒清除卵外围的粘液, 杂质 。 用吸管将卵移
至培养皿的液滴内, 同一供体牛的卵放于同一液
滴内 。 然后用吸管先吸入少量第二液滴的 PBS保
存液至第一液滴, 吸入全部卵, 防止吸入黏液,
杂质, 移至第二液滴, 依次冲洗卵 3～ 5次 。 室温
20～ 25℃, 需 2人进行检卵及胚胎鉴定 。
（三）采卵
检卵
六、胚胎的鉴定和分级
胚胎的鉴定及分级
1．胚胎的鉴定
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
在 100～ 200倍实体解剖镜下观察受精卵
的形态, 色调, 分裂球的大小, 均匀度,
细胞的密度, 与透明带的间隙以及变性情
况等 。
凡卵子的卵黄未形成分裂球及细胞团的,
均列为未受精卵 。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
二细胞至四细胞胚胎
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
胚胎的早期发育过程
胚胎的鉴定及分级
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
通常受精后 6～ 8d非手术回收的正常受精卵发
育情况如下,
桑椹胚一发情后第 5～ 6d回收的卵, 只能观察到
球状的细胞团, 分不清分裂球, 占据透明带内
腔的大部分 。
致密桑椹胚：发情后第 6～ 7d回收的卵, 细胞团
变小, 占透明带内腔 60%～ 70%。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
（三）采卵
早期囊胚：发情后第 7～ 8d回收的卵，细胞的一
部分出现发亮的胚泡腔。细胞团占透明带内腔
70%～ 80%，难以分清内细胞团和滋养层。
囊胚：发情后第 7～ 8d回收，内细胞团和滋养层
界线清晰，胚泡腔明显，细胞充满透明带内腔。
扩大囊胚：发情后第 8～ 9d回收，胚泡腔明显扩
大，体积增大到原来的 1.2～ 1.5倍，与透明带之
间无空隙，透明带变薄，相当于正常厚度的 1/3。
胚胎的鉴定及分级
孵育胚：一般在发情后 9～ 11d,由于胚泡腔继
续扩张, 致使透明带破裂, 卵细胞脱出 。
凡在发情后第 6～ 8d回收的 16细胞以下的受精卵
均应列为非正常发育卵, 不能用于移植或冷冻保
存
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
2．胚胎的分级,
（三）采卵
胚胎的等级划分还应考虑到受精卵的发育程度。
如：发情后第 7d回收的受精卵在正常发育时应处
于致密桑椹胚至囊胚阶段。凡在 16细胞以下的受
精卵及变性细胞超过一半的胚胎均属等外。
胚胎的鉴定及分级
A级
胚胎形态完整, 轮廓清晰, 呈球形, 分裂球
大小均匀, 结构紧凑, 色调和透明度适中,
无附着的细胞和液泡 。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
B级
一轮廓清晰, 色调及细胞密度良好, 可见
到一些附着的细胞和液泡, 变性细胞约占
10%～ 30%
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
C级
轮廓不清晰, 色调发暗, 结构较松散,
游离的细胞或液泡较多, 变性细胞达 30%～
50%。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
塑料细管的编号：剪一段 (2cm)0.5ml的
塑料细管作为标记外套, 内装色纸, 写上
供体品种, 牛号, 胚胎发育阶段及等级,
制作日期 (年, 月, 日 ),并在外套管上写
明序号备查 。
（三）采卵
3.胚胎的标记
七、胚胎的移植
（三）采卵
牛的胚胎移植
1．受体牛的选择标准
年龄在 3～ 8岁, 健康, 无疾病, 体格较大, 膘
度好 。
繁殖性能正常, 产后 60d以上, 并有两次以上的
正常自然发情记录 。
泌乳性能好, 无难产史 。 不使用两次人工授精
未孕的牛 。
（三）采卵
胚胎的移植
2．受体牛的饲养管理
● 做到精心管理, 合理饲养, 环境清洁, 饲草,
饲料, 饮水要新鲜, 补充食盐和必要的添加剂 。
● 组成一定数量的牛群 。 圈舍内防止过挤, 以便于
发情观察 。
● 农户长期舍饲的母牛要注意加强运动 。
● 防止在移植前后因饲料及环境改变造成的应激
反应 。
（三）采卵
胚胎的移植
3．供体牛、受体牛的同期发情
自然发情
根据受体牛的发情观察, 与供体牛发情前后
相差一天内的牛, 可作为受体 。
（三）采卵
胚胎的移植
使用 PGF2α 。 (一次宫注 )诱发发情
一般在供体牛注射 PGF2α 前一天, 给处于情期 8～
15d且直检黄体好的受体牛一次宫注 PGF2α 2mg诱
发发情 。
两次 PGF2α 处理
在不考虑发情周期的情况下, 可间隔 11d,前后两
次宫注 PGF2α 受体牛的处理日程安排应与供体牛
超排处理相吻合 。
（三）采卵
胚胎的移植
4.发情观察
原则上根据母牛接受爬跨确认发情, 早, 晚各观察
30min发情情况 。 对发情牛需做直检以确认卵泡,
次日上午或晚上确定是否排卵 。
若在发情后 36h以后排卵的牛不能用作受体 。
（三）采卵
胚胎的移植
供体牛, 受体牛的发情日差 移植胚胎时, 如果供体和受体牛的发情周期不一致,
则难以受胎 。 要求两者的子宫环境相一致 。 受体
牛的发情日比供体牛早一天为 +1,晚一天为 -1，
同日发情为 0。 超过 2d不能用于移植 。
按胚胎发育情况选受体牛的发情日差
可将致密桑椹胚移植给发情 6d的受体牛, 将早期囊
胚移植给发情 7d的受体牛, 将囊胚和扩大囊胚移
植给发情 8d的受体牛 。
（三）采卵
胚胎的移植
5.器械准备
仿西德式金属移植器, 先将移植枪, 枪头及金属保
护外套分别用纸包扎好, 高压消毒 。 塑料卡苏式
移植枪需经气体灭菌 。 移植时, 先用 70%酒精棉
球消毒装有胚胎的塑料细管, 然后剪掉封口一端,
装入移植枪内, 套上保护外套 。
（三）采卵
胚胎的移植
6.移植前胚胎装管
胚胎移植时可用 0.25ml细管分三段吸入
PBS保存液, 中间由两个气泡隔开, 中段含
有胚胎 。 也可用小气泡分成多段装管, 胚
胎在中段 。 一步细管法解冻脱甘油后, 用
酒精棉球多次消毒细管, 剪去封口即可用
于移植 。
（三）采卵
胚胎的移植
（三）采卵
胚胎装管示意图
胚胎的移植
7.受体牛的准备
将受体牛保定, 清除粪便, 肌注 2%静松
灵 l ml或用 2%的普鲁卡因 3ml在 1,2尾椎
间硬膜外麻醉 。 清洗外阴, 用高锰酸钾水
冲洗消毒, 用灭菌纸擦干, 最后经酒精棉
球消毒 。
（三）采卵
胚胎的移植
8.移植
术者用左手压开外阴, 右手持移植器插入
阴道 。 然后左手伸进直肠, 移植器到达子宫颈口
时, 右手用力将移植枪捅破外套填片, 插入子宫
颈 。 左手在直肠内诱导使枪头轻轻稳妥地插入黄
体侧子宫角至大弯处, 持移植器的右手推出胚胎,
缓慢旋转地抽出移植枪 。
（三）采卵
胚胎的移植
移胚
（三）采卵
胚胎的移植
八, 妊娠诊断
（三）采卵
牛的胚胎移植
1．直肠检查法
通常在移植后三个月开始检查 。 妊娠
90d时, 子宫继续增大, 落入腹腔, 可感觉
到胎儿的浮动, 孕角出现孕脉, 子宫壁可
触到子叶 。
（三）采卵
妊娠诊断
2．超声波诊断 (B超 )
★ 对妊娠 25d以上的受体牛可用 B超检查 。 利用探头
通过直肠轻轻地在子宫角滑动, 在荧光屏上便可
观察到周围黑色中间有一个长 1～ 2cm灰白色图像,
即是胎儿 。 胎儿 60日龄时为 6～ 7cm长, 90日龄时
为 14～ 17cm长 。
★ 使用 B超探头检查时要特别注意, 防止动作过重,
检查过度, 以免引起流产 。
（三）采卵
妊娠诊断
（三）采卵
胚胎移植产出的犊牛
第五节 羊的胚胎移植
目录
一、供体羊的选择
二、受体羊的选择
三、供受体羊的饲养管理
四、供受体羊的同期发情
五、供体羊的超数排卵
六、供体羊的配种
七、供体羊的冲胚
八、检胚与胚胎鉴定
九、胚胎的装管与移植
一、供体羊的选择
? 供体羊的体形
? 供体羊毛色
? 供体羊的健康状况及生殖系统检查
? 供体羊的发情登记及最终选择（用 PG检
查是否发情）
? 供羊的分组
波尔羊：原产于南非，意为农民。头颈部为棕
色，有白色流星。体形成长筒形。生长快，耐
粗饲，成年体重公 80-100公斤，母 60-70公斤。
杜泊羊是由有角陶赛特羊和波斯黑头羊杂交育成，
最初在南非较干旱的地区进行繁殖和饲养，因其适
应性强、早期生长发育快、胴体质量好而闻名。杜
泊羊分为白头和黑头两种。
萨福克 [Suffolk]羊属肉用羊品种，世界上
最好的终端杂交父本品种，公羊体重 90-
120kg,母羊体重 80-90kg,产羔率 150%。
无角道塞特 [Po11 Dorset]羊。属肉用羊品种。
公羊体重 90-110kg,母羊体重 65-75kg,产羔
率 170%，常年发情。
夏洛来 [harolais]羊。属
肉用羊品种。公羊体重
100-150kg,母羊 75-
95kg,产羔率 180%,
特克塞尔［ text1］ 羊。属
长强毛型肉毛兼用羊。公
羊体重 110－ 140kg,母羊
70-90kg,产羔率 200%。
原产于瑞士，是世界上最优秀的奶山羊品种之一，
是奶山羊的代表型。现有的奶山羊品种几乎半数以
上都程度不同的含有萨能奶山羊的血缘。
谢谢！
The End
郑州牧业工程高等专科学校 主讲人：张长兴
动物繁殖新技术系列讲座
目录
? 第一节 胚胎工程概述
? 第二节 胚胎移植的原理
? 第三节 胚胎移植的技术程序
? 第四节 牛的胚胎移植
? 第五节 羊胚胎移植
动物繁殖新技术系列讲座
第一节 胚胎移植概述
1.胚胎移植的历史
2.胚胎移植技术的应用
3.胚胎移植的成本
4.胚胎移植的经济效益
动物胚胎移植技术
1.胚胎移植的历史
胚胎移植概述
? 1.1初始阶段,1890-1900 W.Heape将安
哥拉兔和荷兰兔的受精卵分别移植到比
利时兔的输卵管内，分别获得仔兔 2只。
胚胎移植的历史
? 1.2初级阶段,1900-1950 主要由英美科
学家在家兔、绵羊、山羊小家畜方面研
究，成功率 35%左右。
胚胎移植的历史
? 1.3发展阶段,1950-1970 日本首次在牛
胚胎移植上成功，之后日、美采用非手
术法移植成功。胚胎移植成功率达 70-
80%
胚胎移植的历史
? 1.4实用化初始阶段,1970-1980 加美开
始成立牛胚胎移植公司,1973年牛冻胚
移植成功（英）
胚胎移植的历史
? 1.5实用化研究阶段,1982- 大规模胚胎移植、
核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外
受精在英美日德广泛开展。克隆羊诞生。
胚胎移植的历史
2.胚胎移植的应用范围
? 在家畜改良方面的应用
? 在特定品种扩繁上的应用
? 在动物生物多样性上的应用
? 其它方面应用：转基因动物、性别控制、体外
受精
胚胎移植概述
2.1在家畜改良方面的应用
? 人工授精技术可成几十到几百倍地提高了优秀
种公畜的配种效能。但对优秀母畜来说，受其
产仔数和世代间隔的限制，尤其是牛羊等繁殖
力较低的畜种更是如此。
? 通过超数排卵和胚胎移植技术（ multiple
ovulation and embryo transfer,MOET)牛羊
的生长性状年遗传进展可比正常繁殖提高 80%
和 70%；产奶性状提高 33%。
胚胎移植的应用范围
2.2在特定品种扩繁上的应用
? 牛羊等低繁殖力家畜，从引进到形成一个纯种
群体需要 7-8个世代,15-20年。而采用 MEOT
法，一次就可获得一个纯种群体
? 80年代初，美、澳、新从欧洲引进的大型肉牛
品种均采用胚胎移植技术扩繁
? 2000年前后，我国的波尔山羊也是采用胚胎移
植进行扩繁的
胚胎移植的应用范围
2.3在动物生物多样性上的应用
? 在保护动物遗传资源，提高家畜生产性能，挽
救濒临灭绝的野生动物方面，胚胎移植技术越
越来发挥出重要作用。
? 冷冻能够很好地保存濒临灭绝动物的胚胎或生
殖细胞，但该种动物雌性个体的减少，也是这
种动物的胚胎或生殖细胞无法得到移植，科学
家开始研究在该种动物的亚种或亲缘种中试验，
并取得一些成功。如斑马胚胎移植给马，蒙古
马胚胎移植给驴，白肢野牛移植给荷斯坦牛。
胚胎移植的应用范围
2.4其它方面应用
? 胚胎移植是克隆技术的必须过程
? 体外受精必须借助胚胎移植实现“试管婴儿的
继续发育
? 转基因及动物生物反应器的研究也必须借助胚
胎移植
胚胎移植的应用范围
3.胚胎移植的成本
? 种母畜购入或培育成本及饲养费，胚胎成本
分摊
? 配种费
? 激素,FSH,LH,PG
? 手术费：手术药品及耗材、手术辅助人员报
酬等
? 技术费：技术人员约定报酬
? 其它：实验室配置、差旅费、招待费
胚胎移植概述
4.胚胎移植的经济效益
胚胎移植是一个技术过程复杂，各个环节环环
相扣，任何一个不能出现失误的系统工程。
影响胚胎移植成功率的因素很多，同时，其运
作成本较高。这使其应用中存在经济效益上的高风
险性。
如果不是基于急需扩群、供体高经济价值、育
种目的，一般尽量采用自然繁殖。在特殊情况下，
如供种初始阶段，少量优秀个体的扩增，胚胎移植
可创造较好的经济效益。
胚胎移植概述
第二节 胚胎移植的生理基础及原则
? 1.胚胎移植的生理学基础
? 2.胚胎移植的基本原则
动物胚胎移植技术
1.胚胎移植的生理学基础
? 成年母畜卵巢上存在数千到上万个卵泡，在
外源激素作用下，每个发情期的卵泡发育和
排卵数可达十数个
? 每个发情周期生殖器官都有一个孕向发育
? 早期胚胎处于游离状态
? 胚胎发育不存在免疫问题
? 胚胎发育到一定阶段会与子宫发生生理和组
联系
? 胚胎的遗传性不受受体的影响
胚胎移植的生理基础及原则
2,胚胎移植的基本原则
? 胚胎移植前后所处的环境的同一性
– 供体和受体在分类学上的相同属性
– 动物生理上的一致性：受体和供体在发情时间
上的同期性
– 动物解剖位置上的一致性：空间环境的一致性
? 胚胎的发育期限：必须处于周期黄体期内
? 胚胎的质量：胚胎必须是正常的，并在处理过程
中不受不良因素的影响
至目录
胚胎移植的生理基础及原则
第三节 胚胎移植的技术程序
? 1.供体和受体的选择
? 2,超数排卵处理
? 3.供体母畜的配种
? 4.胚胎的收集
? 5.胚胎的检查
? 6.胚胎的保存与培养
? 7.胚胎的移植
? 8.供体和受体的术后观察
动物胚胎移植技术
1.供体和受体的选择
? 供体应具有相当高的育种价值
? 供体生殖机能应处于较高的状态：产后 60天以
上，无生殖系统疾病，体质强健
? 受体应容易购买，繁殖性能好，对地方适应性
强，体型中上等，非优良品种
? 受体健康状况良好，已进入发情季节
? 供受体发情时间应接近或一致
胚胎移植的技术程序
2,超数排卵处理
? 意义：让每个供体提供更多的胚胎
? 处理时间,
– 牛：预计自然发情时间的前 4天，或发情
周期的第 16-17天
– 羊：发情周期的第 12-15天，促性腺激素
处理的第二天或第三天，注射 PG
胚胎移植的技术程序
3.供体母畜的配种
? 必须用优秀的种公畜进行多次配种，一般隔
8-12小时进行一次配种，直到发情结束
? 配种前应对种公畜的精液进行质量检查
? 可优秀种公畜不足时，可考虑首次采用本交，
以后采用人工授精，也可以全部采用人工授
精
胚胎移植的技术程序
4.胚胎的收集
? 胚胎冲洗液的配制：杜氏磷酸缓冲液 PBS,布
林斯特液 SOF合成输卵管液
? 手术法收集胚胎
– 输卵管冲胚：顺向冲胚、逆向冲胚
– 子宫角冲胚
? 非手术法收集胚胎
– 二路法
– 三路法
胚胎移植的技术程序
? 收集到的冲洗液静置，冲洗液分离
? 拣胚：将胚胎移至培养液或保存液中
? 胚胎鉴定：根据透明带、胚胎细胞、发
育阶段及细胞在透明带中的比例确定胚
胎级别
胚胎移植的技术程序
5.胚胎的检查
? 胚胎的降温：使胚胎停止发育，延长其
体外生存时间
? 体外培养：将胚胎置于体温条件下，在
培养液中，使其继续发育
? 胚胎冷冻：通过一定的处理程序，将胚
胎降温冷冻后，保存于液氮中
胚胎移植的技术程序
6.胚胎的保存
? 手术法移植
? 非手术法移植
胚胎移植的技术程序
7.胚胎移植
? 供体和受体的抗炎处理
? 健康状况检查
? 返情状况检查
? 妊娠检查及妊娠确定
胚胎移植的技术程序
8.供体和受体的术后观察及处理
动物胚胎移植技术
第四节 牛的胚胎移植
目 录
一、供体牛的选择
二、供体牛的饲养
三、超数排卵处理
四、采卵
五、检卵
六、胚胎的鉴定和分级
七、胚胎的移植
八、妊娠诊断
? 1.应符合本品种标准, 具有较高的生产性能 。
? 2.1.5～ 8岁, 体格健壮, 无遗传性疾病, 繁殖机能正常 。
? 3.产犊记录清楚, 无流产史, 产后有两次正常发情记录 。
? 4.生殖器官正常, 无繁殖疾病 。
? 5.重复超数排卵间隔 60d左右 。 最多连续处理 4次后, 自然
繁殖后再使用 。 凡 2次超数排卵反应差的母牛不再用作供
体 。
? 6.供体牛的超数排卵处理应在情期的第 9～ 13d进行 。 凡黄
体发育不良, 卵巢静止的母牛不宜用 。
? 7.应选择性情温顺的母牛作供体，以便于操作。
牛的胚胎移植
一、供体牛的选择
牛的胚胎移植
二,供体牛的饲养管理
1.良好的营养状况,要保证给供体牛足够的优质
干草, 青贮或多汁饲料, 精料以及维生素和矿
物质, 并供给清洁的饮水和盐, 做到合理饲养,
精心管理 。
? 2．供体牛在采卵前后要特别注意保持良好的
饲管环境，不得任意变换饲草；饲料和管理程
序，避免因过强的应激所造成的神经紧张状态。
三,超数排卵处理
牛的胚胎移植
1.FSH法
超数排卵处理
放栓 发情鉴定 配种
0123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
7:00
FSH 4ml
18:00
FSH 4 ml
7:00
FSH
2.5ml
18:00
FSH
2.5ml
7:00 FSH
2ml
14:00 PG6ml
18:00 FSH
2ml
7:00 FSH
1.5ml
14:00 取栓
18:00 FSH
1.5ml
配
种
配
种
检
查
黄
体
冲
胚
移
胚
处 理 时 间
18 19 20 21 22 23 24
7:00FSH2.4ml 7:00FSH1.4ml 7:00FSH1.2ml
2:00PG0.8ml 2:00 取栓
6:00FSH2.4ml
6:00FSH1.4ml 6:00FSH1.2ml
发 情
鉴定
配种
发情
鉴定
配种
冲胚
移胚
牛超数排卵示意图
超数排卵处理
2.PMSG法
孕马血清促性腺激素 (PMSG)处理法
在情期的 11～ 12d,一次肌注 PMSG2500～ 30001U，
48h后宫注 PGF2α 2.4mg。 发情后约 18h肌注等量
的抗 PMSG。
超数排卵处理
放栓 发情鉴定 配种
0123456789 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
12:00
PMSG
2500IU
12:00宫注
氯前列烯醇
4ml
12:00
取栓
抗
血
清
配
种
配
种
检
查
黄
体
冲
胚
移
胚
3.发情观察和配种
PGF2α 处理后 40～ 48h,大部分处理牛发情 。
通常要求从注 PG第 2d傍晚开始观察发情, 至少早
晚各观察一次 。 在观察到接受爬跨后 4～ 6h进行
第一次输精, 间隔 12h后第二次输精 。 每次有效
精子数不得少于 50× 106,输入两侧子宫角或子
宫体 。 注意输精时不得触摸卵巢 。
超数排卵处理
四,采卵
牛的胚胎移植
1．采卵时间
以发情日为第 0d,在第 5～ 6d检查卵巢
确定黄体数, 以便于安排受体头数 。 第
7d(或第 6～ 8d)非手术回收卵 。
采卵
2．器械和冲卵液的准备
灭菌处理过的冲卵管用 PBS液冲洗 2～ 3次,
插入钢芯, 检查气球 。 在无菌间用导管连接吊瓶
和集卵杯灌流装置 。 装入 PBS液的吊瓶在 37℃ 水
浴中预温待用 。 准备好必要的麻醉剂, 注射器,
酒精棉球和冲洗消毒剂等 。
采卵
3．供体牛的保定和麻醉
供体牛保定完毕后, 在第一, 二尾椎骨
间酒精消毒, 用 2%普鲁卡因 3～ 5ml作硬膜
外麻醉, 或肌注 2%静松灵 l ml。 （三）采卵
采卵
4．外阴清洗、消毒
麻醉后将牛尾竖直绑在保定架上, 清除粪便, 用清
水冲洗会阴部及外阴, 再用高锰酸钾液冲洗消毒,
用灭菌卫生纸擦干, 最后用酒精棉球消毒外阴部 。
采卵
5．冲卵管的插入和冲卵部位
助手将准备好的冲卵管交给术者的右手, 术者左手
食指和拇指压开阴门插入冲卵管, 再将左手伸入
直肠, 仔细小心地诱导冲卵管经子宫颈进入一侧
子宫角至大弯处, 抽出少许钢芯, 再将冲卵管向
前推, 使其尖端靠近子宫角深部 。 由助手持 30ml
注射器一次推入 10ml空气, 然后按术者要求, 以
1ml计数充气 。 根据子宫大小及冲卵管在子宫的
位置确定充气量, 一般青年牛充气 14～ 16ml,经
产牛为 18～ 25ml。 冲卵管固定后抽出钢芯, 开始
灌流 。
（三）采卵
采卵
6．灌流方法
将吊瓶挂在距外阴部 1.0m高处, 接通三通管 (Y型 )
和冲卵管 。 术者用右手控制进流和出流开关, 每
次灌注 30～ 50ml,由少到多, 每侧总量为 300～
500ml。 左手通过直肠辅助按摩子宫角 。 每侧子
宫角冲 8～ 10次 。 或者用 50ml注射器, 每次注入
30～ 50ml的 PBS冲卵液, 分次冲洗子宫角, 回收
后注入加盖量筒 。 另一侧子宫角的冲洗是由术者
右手拉直冲卵管, 助手小心插入钢芯 。 术者的左
手在直肠内诱导钢芯插稳后, 给气球放气 。 术者
再将冲卵管插入另一侧子宫角, 用同样的方法冲
洗 。 全过程需在室温 (20℃ 左右 )操作 。
（三）采卵
采卵
（三）采卵
采卵
7．术后处理
两侧子宫角冲卵完成后, 从气球放出一部分
空气, 将冲卵管抽至子宫体灌注土霉素溶
液 (3g土霉素粉溶于 100ml灭菌双蒸水或生
理盐水 )或 10ml青霉素 (80万 u)和链霉素
(100万 u),拔出冲卵管 。
（三）采卵
采卵
五、检卵
（三）采卵
1．过滤集卵杯 (日本产 )法
回收结束后, 用带 4G针头的注射器冲洗滤网
2～ 3次, 吸去杯中的泡沫, 置实体显微镜
下检查 。
（三）采卵
检卵
2．过滤杯 (美国产 )法
滤去冲卵液, 将过滤杯中留下的 30～ 50ml倒
入平皿, 用冲卵液冲洗过滤杯 2～ 3次, 一
并倒入平皿, 置镜下检查 。
（三）采卵
检卵
3．沉淀法 (或滤网吸液法 )
将回收的冲卵液注入 1000ml量筒, 在 20～
25℃ 下静置 20～ 30min(min),用导管吸去
上层液体 。 或者按好滤网, 用导管在滤网
上吸去上部冲卵液, 将残留的 80～ 100ml
倒入平皿内检卵 。
（三）采卵
检卵
4．检卵前的准备
在酒精灯上拉好内径为 200～ 300um的玻璃吸
管和玻璃棒, 在吸管上连接乳胶管 (也可用
1ml一次性注射器与一支采血管接一起 )。
在小培养皿内做好含 10%或 20%牛血清的
PBS保存液液滴 3～ 5个, 覆盖上液体石蜡
油, 作好编号, 放入培养箱待用 。
（三）采卵
检卵
5．检卵
用玻璃棒清除卵外围的粘液, 杂质 。 用吸管将卵移
至培养皿的液滴内, 同一供体牛的卵放于同一液
滴内 。 然后用吸管先吸入少量第二液滴的 PBS保
存液至第一液滴, 吸入全部卵, 防止吸入黏液,
杂质, 移至第二液滴, 依次冲洗卵 3～ 5次 。 室温
20～ 25℃, 需 2人进行检卵及胚胎鉴定 。
（三）采卵
检卵
六、胚胎的鉴定和分级
胚胎的鉴定及分级
1．胚胎的鉴定
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
在 100～ 200倍实体解剖镜下观察受精卵
的形态, 色调, 分裂球的大小, 均匀度,
细胞的密度, 与透明带的间隙以及变性情
况等 。
凡卵子的卵黄未形成分裂球及细胞团的,
均列为未受精卵 。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
二细胞至四细胞胚胎
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
胚胎的早期发育过程
胚胎的鉴定及分级
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
通常受精后 6～ 8d非手术回收的正常受精卵发
育情况如下,
桑椹胚一发情后第 5～ 6d回收的卵, 只能观察到
球状的细胞团, 分不清分裂球, 占据透明带内
腔的大部分 。
致密桑椹胚：发情后第 6～ 7d回收的卵, 细胞团
变小, 占透明带内腔 60%～ 70%。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
（三）采卵
早期囊胚：发情后第 7～ 8d回收的卵，细胞的一
部分出现发亮的胚泡腔。细胞团占透明带内腔
70%～ 80%，难以分清内细胞团和滋养层。
囊胚：发情后第 7～ 8d回收，内细胞团和滋养层
界线清晰，胚泡腔明显，细胞充满透明带内腔。
扩大囊胚：发情后第 8～ 9d回收，胚泡腔明显扩
大，体积增大到原来的 1.2～ 1.5倍，与透明带之
间无空隙，透明带变薄，相当于正常厚度的 1/3。
胚胎的鉴定及分级
孵育胚：一般在发情后 9～ 11d,由于胚泡腔继
续扩张, 致使透明带破裂, 卵细胞脱出 。
凡在发情后第 6～ 8d回收的 16细胞以下的受精卵
均应列为非正常发育卵, 不能用于移植或冷冻保
存
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
2．胚胎的分级,
（三）采卵
胚胎的等级划分还应考虑到受精卵的发育程度。
如：发情后第 7d回收的受精卵在正常发育时应处
于致密桑椹胚至囊胚阶段。凡在 16细胞以下的受
精卵及变性细胞超过一半的胚胎均属等外。
胚胎的鉴定及分级
A级
胚胎形态完整, 轮廓清晰, 呈球形, 分裂球
大小均匀, 结构紧凑, 色调和透明度适中,
无附着的细胞和液泡 。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
B级
一轮廓清晰, 色调及细胞密度良好, 可见
到一些附着的细胞和液泡, 变性细胞约占
10%～ 30%
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
C级
轮廓不清晰, 色调发暗, 结构较松散,
游离的细胞或液泡较多, 变性细胞达 30%～
50%。
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
（三）采卵
胚胎的鉴定及分级
塑料细管的编号：剪一段 (2cm)0.5ml的
塑料细管作为标记外套, 内装色纸, 写上
供体品种, 牛号, 胚胎发育阶段及等级,
制作日期 (年, 月, 日 ),并在外套管上写
明序号备查 。
（三）采卵
3.胚胎的标记
七、胚胎的移植
（三）采卵
牛的胚胎移植
1．受体牛的选择标准
年龄在 3～ 8岁, 健康, 无疾病, 体格较大, 膘
度好 。
繁殖性能正常, 产后 60d以上, 并有两次以上的
正常自然发情记录 。
泌乳性能好, 无难产史 。 不使用两次人工授精
未孕的牛 。
（三）采卵
胚胎的移植
2．受体牛的饲养管理
● 做到精心管理, 合理饲养, 环境清洁, 饲草,
饲料, 饮水要新鲜, 补充食盐和必要的添加剂 。
● 组成一定数量的牛群 。 圈舍内防止过挤, 以便于
发情观察 。
● 农户长期舍饲的母牛要注意加强运动 。
● 防止在移植前后因饲料及环境改变造成的应激
反应 。
（三）采卵
胚胎的移植
3．供体牛、受体牛的同期发情
自然发情
根据受体牛的发情观察, 与供体牛发情前后
相差一天内的牛, 可作为受体 。
（三）采卵
胚胎的移植
使用 PGF2α 。 (一次宫注 )诱发发情
一般在供体牛注射 PGF2α 前一天, 给处于情期 8～
15d且直检黄体好的受体牛一次宫注 PGF2α 2mg诱
发发情 。
两次 PGF2α 处理
在不考虑发情周期的情况下, 可间隔 11d,前后两
次宫注 PGF2α 受体牛的处理日程安排应与供体牛
超排处理相吻合 。
（三）采卵
胚胎的移植
4.发情观察
原则上根据母牛接受爬跨确认发情, 早, 晚各观察
30min发情情况 。 对发情牛需做直检以确认卵泡,
次日上午或晚上确定是否排卵 。
若在发情后 36h以后排卵的牛不能用作受体 。
（三）采卵
胚胎的移植
供体牛, 受体牛的发情日差 移植胚胎时, 如果供体和受体牛的发情周期不一致,
则难以受胎 。 要求两者的子宫环境相一致 。 受体
牛的发情日比供体牛早一天为 +1,晚一天为 -1，
同日发情为 0。 超过 2d不能用于移植 。
按胚胎发育情况选受体牛的发情日差
可将致密桑椹胚移植给发情 6d的受体牛, 将早期囊
胚移植给发情 7d的受体牛, 将囊胚和扩大囊胚移
植给发情 8d的受体牛 。
（三）采卵
胚胎的移植
5.器械准备
仿西德式金属移植器, 先将移植枪, 枪头及金属保
护外套分别用纸包扎好, 高压消毒 。 塑料卡苏式
移植枪需经气体灭菌 。 移植时, 先用 70%酒精棉
球消毒装有胚胎的塑料细管, 然后剪掉封口一端,
装入移植枪内, 套上保护外套 。
（三）采卵
胚胎的移植
6.移植前胚胎装管
胚胎移植时可用 0.25ml细管分三段吸入
PBS保存液, 中间由两个气泡隔开, 中段含
有胚胎 。 也可用小气泡分成多段装管, 胚
胎在中段 。 一步细管法解冻脱甘油后, 用
酒精棉球多次消毒细管, 剪去封口即可用
于移植 。
（三）采卵
胚胎的移植
（三）采卵
胚胎装管示意图
胚胎的移植
7.受体牛的准备
将受体牛保定, 清除粪便, 肌注 2%静松
灵 l ml或用 2%的普鲁卡因 3ml在 1,2尾椎
间硬膜外麻醉 。 清洗外阴, 用高锰酸钾水
冲洗消毒, 用灭菌纸擦干, 最后经酒精棉
球消毒 。
（三）采卵
胚胎的移植
8.移植
术者用左手压开外阴, 右手持移植器插入
阴道 。 然后左手伸进直肠, 移植器到达子宫颈口
时, 右手用力将移植枪捅破外套填片, 插入子宫
颈 。 左手在直肠内诱导使枪头轻轻稳妥地插入黄
体侧子宫角至大弯处, 持移植器的右手推出胚胎,
缓慢旋转地抽出移植枪 。
（三）采卵
胚胎的移植
移胚
（三）采卵
胚胎的移植
八, 妊娠诊断
（三）采卵
牛的胚胎移植
1．直肠检查法
通常在移植后三个月开始检查 。 妊娠
90d时, 子宫继续增大, 落入腹腔, 可感觉
到胎儿的浮动, 孕角出现孕脉, 子宫壁可
触到子叶 。
（三）采卵
妊娠诊断
2．超声波诊断 (B超 )
★ 对妊娠 25d以上的受体牛可用 B超检查 。 利用探头
通过直肠轻轻地在子宫角滑动, 在荧光屏上便可
观察到周围黑色中间有一个长 1～ 2cm灰白色图像,
即是胎儿 。 胎儿 60日龄时为 6～ 7cm长, 90日龄时
为 14～ 17cm长 。
★ 使用 B超探头检查时要特别注意, 防止动作过重,
检查过度, 以免引起流产 。
（三）采卵
妊娠诊断
（三）采卵
胚胎移植产出的犊牛
第五节 羊的胚胎移植
目录
一、供体羊的选择
二、受体羊的选择
三、供受体羊的饲养管理
四、供受体羊的同期发情
五、供体羊的超数排卵
六、供体羊的配种
七、供体羊的冲胚
八、检胚与胚胎鉴定
九、胚胎的装管与移植
一、供体羊的选择
? 供体羊的体形
? 供体羊毛色
? 供体羊的健康状况及生殖系统检查
? 供体羊的发情登记及最终选择（用 PG检
查是否发情）
? 供羊的分组
波尔羊：原产于南非，意为农民。头颈部为棕
色，有白色流星。体形成长筒形。生长快，耐
粗饲，成年体重公 80-100公斤，母 60-70公斤。
杜泊羊是由有角陶赛特羊和波斯黑头羊杂交育成，
最初在南非较干旱的地区进行繁殖和饲养，因其适
应性强、早期生长发育快、胴体质量好而闻名。杜
泊羊分为白头和黑头两种。
萨福克 [Suffolk]羊属肉用羊品种，世界上
最好的终端杂交父本品种，公羊体重 90-
120kg,母羊体重 80-90kg,产羔率 150%。
无角道塞特 [Po11 Dorset]羊。属肉用羊品种。
公羊体重 90-110kg,母羊体重 65-75kg,产羔
率 170%，常年发情。
夏洛来 [harolais]羊。属
肉用羊品种。公羊体重
100-150kg,母羊 75-
95kg,产羔率 180%,
特克塞尔［ text1］ 羊。属
长强毛型肉毛兼用羊。公
羊体重 110－ 140kg,母羊
70-90kg,产羔率 200%。
原产于瑞士，是世界上最优秀的奶山羊品种之一，
是奶山羊的代表型。现有的奶山羊品种几乎半数以
上都程度不同的含有萨能奶山羊的血缘。
谢谢！
The End
