实验三 饲料中粗蛋白的测定 一、适用范围 本标准适用于配合饲料，浓缩饲料和单一饲料。 二、原理 凯氏法测定试样中的含N量，即在催化剂作用下，用H2SO4破坏有机物，使含N物转化成（NH4）2SO4，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出N含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出CP含量。 三、试剂 1、H2SO4 2、混合催化剂 3、NaOH 4、硼酸 5、混合指示剂 6、HCl标准液 7、蔗糖 8、硫酸铵 9、硼酸吸收液 四、仪器设备 1、粉碎机 2、分样筛 3、分析天平 4、消煮炉 5、滴定管 6、凯式定N仪 7、锥形瓶 9、容量瓶 10、消煮管 五、分析步骤 1、试样的消煮，称取试样0.5g，准确至0.0202g，放入消煮管中加入6.4g混合催化剂与试样混合均匀，再加入12ml H2SO4将消煮瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化、泡沫消失后，再加强火力（360-410℃）直至吴透明的蓝绿色，然后再继续加热至少2h。 2、NH3的蒸馏 将装有硼酸吸收液和指示剂的锥形东半球，放在冷凝管末端，装好消煮管，打开碱并关，至消煮管中变为黑色，并闭碱开关，打开气天关，至锥形瓶内液体由粉红色变为橙黄色，到流出液体体积为150ml时停止，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。 3、滴定 蒸馏后的吸收液用HCl标准溶液滴定，溶液由橙黄色变为粉红色为终点。 3、空白测定 称取蔗糖0.5g代替试样进行空白测定 七、计算 CP= V2：滴定试样时所需标准溶液体积ml V1：滴定空白时，所需标准溶液体积ml C：盐酸标准溶液浓度mol/l M：试样质量 g 0.0140：与1mol HCl标准溶液相当的以g表示的N的质量。 6.25：N换算成Br的平均系数。