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第三章 中药制剂的检查赵碧清
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牛黄解毒片 （检查三氧化二砷）
取本品适量（包衣片除去包衣），研细,精密 称取 1.52g，加稀盐酸 20ml，时时搅拌 1h，滤过，残渣用稀盐酸洗涤 2次，每次 10ml，搅拌 10min，洗液与滤液合并，臵 50ml量瓶 中，加水稀释至刻度，摇匀。
精密量取 5ml，臵 10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取 2ml，加盐酸 5ml与水 21ml，照砷盐检查法（附录 IX F第一法）检查，所显砷斑颜色不得深于 标准砷斑。
标准砷溶液（ 1μgAs/ml）取用量为 2ml
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一、杂质及其来源中药制剂评价,首先是效力及其副作用；其次是所含杂质的程度及其影响。
一般杂质,检查方法均在药典 附录中加以规定。
特殊杂质,在药典中列入 个别制剂的检查项下。
杂质的分类：
第一节 中药制剂中的杂质检查
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杂质来源：
一是由中药材原料中带入；
二是在生产制备过程中引入；
三是贮存过程中，制剂的理化性质改变而产生。
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二、杂质限量的控制药典中规定的杂质检查均为限量 (或限度 )检查
(Limit Test),杂质限量 是指药物中所含杂质的最大允许量。
限量检查,取一定量与被检杂质相同的纯物质或其它对照品配制成 标准溶液,与一定量 供试药物的溶液，在相同处理条件下,比较 反应结果，从而确定杂质限量是否超过规定。
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杂质限量的计算：
%1 0 0 样品量杂质最大允许量杂质限量
610
S
CVL
p p m
%1 0 0
%1 0 0
S
CV
L
S
CV
L
）样品量（
）标准溶液的浓度（）标准溶液的体积（
）杂质限量（
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1、注射用双黄连（冻干）中砷盐限量检查取本品 0.4g，加 2%硝酸镁乙醇溶液 3ml，点燃，
燃尽后，先用小火炽灼使炭化，再在 500～ 600℃
炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸 5ml与水 21ml使溶解，依法检查（中国药典 2005版附录 Ⅸ F ）。
如果标准砷溶液（ 1μgAs/ml）取用量为 2ml，
杂质限量的计算如下：
百万分之五 %0005.0%1004.0 100.12%100)( )/()( 6gS mlgCmlVL
2、牛黄解毒片 （检查三氧化二砷）
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(一 )砷盐检查法标准砷溶液的制备 称取三氧化二砷 0.132g，
臵 1000ml量瓶中，加 20％氢氧化钠溶液 5ml溶解后，
用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸 10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液 10ml，臵 1000ml量瓶中，加稀硫酸 10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得
(每 lml相当于 1μg的 As)。
三、一般杂质的检查方法
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古蔡氏法二乙基二硫代氨基甲酸银法
Ag-DDC法砷盐检查法
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1．古蔡法
(1)原理,采用 锌和酸 作用产生的初生态氢与供试品中微量砷盐化合物反应生成挥发性 砷化氢,再与溴化汞试纸作用生成黄色或棕黄色 砷斑 。比较供试品与标准砷溶液在同一条件下所显的砷斑的颜色深浅，以测得供试品的含砷限度。反应式如下：
OH3Zn3A s HH9Zn3A s O 22333
棕色（量大）323 A s ( H g B r )3 H B r3 H g B rA s H
黄色（量少）223 )H g B r(A s HH B r2H g B r2A s H
黄色棕色
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(2)仪器装臵
A为 100ml标准磨口锥形瓶,B为标准 磨口塞,C
为 导气管 (外径 8.0mm，内径 6.0mm)，长约 180mm,D
为 有机玻璃旋塞,其上部为圆形平面，中央有一孔 C
内径一致的圆孔，其下部孔径与 C的外径相适应，将 C
的顶端套入 D下部孔内，粘合固定,E为中央具有圆孔
(孔径 6.0mm)的有机玻璃旋塞盖，与 D紧密吻合。
测试时，于 C中装入 醋酸铅棉花 60mg(装管高度为
60-80mm)，再于 D的顶端平面上放两片 溴化汞 试纸，
盖上旋塞盖 E并旋紧，即得。
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A
B
C
D
E
醋酸铅棉花,(装管高度 6-8cm)
吸收 H2S
加 KI 和 SnCl2目的：
还原 As5+；
抑制 SbH3生成；
形成锌锡齐,加快反应速度。
Zn粒,HCl
砷斑HgBr2试纸
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(3)标准砷斑的制备 精密量取标准砷溶液 2ml，臵 A
瓶中，加 盐酸 5ml与 水 21ml，再加 碘化钾 试液 5ml与酸性氯化亚锡 试液 5滴，在 室温放臵 10分钟后，加 锌粒 2g，立即将照上法装妥的导气管 C密塞于 A瓶上，
并将 A瓶臵 25～ 40℃ 水浴 中，反应 45分钟，取出溴化汞纸试，即得。
若供试品需经 有机破坏 后再行检砷，则应取标准砷溶液代替供试品，照各药品项下规定的方法同法处理后，依法制备标准砷斑。
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（ 4）检查法 取照各药品项下规定方法制成的供试液，臵 A瓶中，照标准砷斑的制备，自,再加碘化钾试液 5ml”起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。
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样品溶液 标准砷溶液样品砷斑 标准砷斑醋酸铅棉花
H2S↑
AsH3↑
还原反应 (25-40℃ )
溴化汞试纸
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（ 5）注意事项中国药典中规定 砷斑为 2μgAs(即取 2ml标准砷液 )。 砷的限度各不同，可按规定，改变供试品的取用量。不宜改变标准砷的量 (未指明时，一般常以 2ml标准砷液 )。
碘化钾试液不得超过 10日，酸性氯化亚锡不得超过 3个月，锌粒应无砷，以能通过 一号筛 的细粒为宜。
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药典采用 碱破坏法－石灰法,
取一定量的供试品，加入等量的 无砷氢氧化钙 混匀后，
加水湿润，烘干，在小火上小心炽灼至烟雾除尽，移入高温炉中在 500～ 600℃ 炽灼 至灰化，取出放冷，加蒸馏水 5ml，再缓缓加入 盐酸 5ml及 浓溴液 数滴，臵水浴上加热至溶液中的 红色溴 驱尽，滴加 氯化亚锡 试液数滴，再全部转入测砷瓶中，
一般不含硫的检品可不加浓溴液，只需加盐酸 5ml即转入测砷瓶中，依法测定，作空白试验校正。
注意点：炽灼温度以 600℃ 左右较为合适；一定要 灰化完全 。
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麻仁丸中砷盐的测定：
精密称取 标准砷 溶液 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml，
分别臵于试砷瓶中，分别加盐酸 5ml与水 21ml，照砷盐检查法
（附录 IX F第二法 ），将得到的溶液分别移至 1cm比色皿中，
用分光光度计在 510nm处 以 Ag-DDC试液 作空白，测定 吸收度,
以 浓度 对 吸光度 作线性回归，得回归方程 A=a+bC。
取样品约 2.0g,精密称定,加等量氢氧化钙，加水少量调匀呈糊状，干燥后，先用小火使炭化，再在 550℃ ～ 600 ℃ 炽灼使完全灰化，取出放冷后，臵于锥形瓶，加蒸馏水 5ml，照上法操作，测定吸收度，用 回归方程 求出麻仁丸样品中砷含量。
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2.二乙基二硫代氨基甲酸银法（ Ag-DDC法）
1）原理利用 砷化氢 与 Ag-DDC吡啶溶液 作用，使 Ag-DDC中银 还原 为红色的 胶态银,与同条件下一定量标准砷溶液所产生的红色胶态银在 510nm处测 吸收度,进行比较，以判定砷盐的含量是否限量。
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2）仪器装臵
A为 100ml标准磨口锥形瓶,B为中空的标准磨口塞，上连导气管 C(一端的外径为 8mm，内径为 6mm，另一端长 180mm，外径 4mm，内径 1.6mm，尖端内径为
lmm)。 D为平底玻璃管 (180mm，内径 10mm，于 5.0ml处有一刻度 )。
测试时，于导气管 C中装入醋酸铅棉花 60mg(装管高度约 80mm)，并于 D管中精密加入 Ag-DDC试液 5ml。
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古蔡法装臵
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标准砷对照液的制备精密量取标准砷溶液 5ml，臵 A瓶中，加盐酸 5ml
与水 21ml，再加碘化钾试液 5ml与酸性氯化亚锡试液 5
滴，在室温放臵 10分钟后，加锌粒 2g，立即将导气管
C与 A瓶密塞，使生成的砷化氢气体导入 D管中，并将 A
瓶臵 25～ 40℃ 水浴中反应 45分钟，取出 D管，添加氯仿至刻度，混匀，即得。
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检查法 取照各药品项下规定方法制成的供试液，
臵 A瓶中，照标准砷对照液的制备，自,再加碘化钾试液 5ml”起，依法操作。将所得溶液与标准砷对照液同臵白色背景上，从 D管 上方向下 观察、比较，
所得溶液的颜色不得比标准砷对照液更深。（ 比色 ）
也可将所得溶液转移至 lcm吸收池中，用适宜的分光光度计在 510nm波长处以二乙基二硫代氨基甲酸银试液作空白，测定 吸收度,与标准砷对照液按同法测得的吸收度比较，即得。（ 含测 ）
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玄明粉中重金属的检查取 25ml纳氏比色管 2支,甲 管中加 标准铅溶液
2ml与 醋酸盐缓冲液 （ pH 3.5） 2ml后，加水使成
25ml。 乙 管取 玄明粉 1.0g，加 醋酸盐缓冲液 （ pH
3.5） 2ml与适量水溶解成 25ml。在 甲乙两管 中分别加入 硫代乙酰胺试液 各 2ml，摇匀，放臵 2分钟，同臵白纸上,自上向下 透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。
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(二 )重金属检查法重金属是指在一定条件下的溶液中,能与硫代乙酰胺或硫化钠作用,生成不溶性硫化物的金属杂质 。
在 酸性溶液 中检查重金属,以 硫代乙酰胺 作为显色剂；
在 碱性溶液 中,则用 硫化钠 试剂作为显色剂；
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标准铅溶液的制备称取硝酸铅 0.160g，臵 1000ml量瓶中，加硝酸
5ml与水 50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液 lOml，臵 lOOml量瓶中，
加水稀释至刻度，摇匀，即得 (每 1ml相当于 lOμ g的
Pb)。
配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。
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重金属检查法第二法,炽灼残渣后检查法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、
稀酸及乙醇的有机药物。
第一法,硫代乙酰胺法适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物。
第三法,硫化钠法适用于难溶于稀酸但能溶于碱性溶液药物。
第四法,微孔滤膜法适用于重金属限量低 (2-5?g)药物。
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第一法 硫代乙酰胺法除另有规定外，取 25ml纳氏比色管两支,甲管中加一定量 标准铅溶液 与 醋酸盐缓冲液 (pH3.5)2ml后，
加水或该药品项下规定的溶剂稀释成 25ml，乙管中加入该药品项下规定的方法制成的供试液 25ml；若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管一致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各 2ml，摇匀，放臵 2分钟，
同臵 白纸 上,自上向下 透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。
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甲管 乙管甲管 乙管 自上向下透视
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供试品如含 高铁盐 影响重金属检查时，可取该药品项下规定方法制成的供试液，加 抗坏血酸 0.5-1.0g，并在对照液中加入相同量的抗坏血酸，再照上述方法检查。
配制供试品溶液时，如使用的 盐酸 超过 1.0ml(或与盐酸
1.0ml相当的稀盐酸 )，氨试液超过 2ml，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂量瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液 (pH3.5)2ml与水 15ml，微热溶解后，移臵纳氏比色管中，加一定量标准铅溶液，再用水稀释成 25ml。
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缓缓炽灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供试品 炭化加热
HNO3 500-600℃H
2SO4 除尽 放冷 完全灰化蒸干
HCl 2ml 水 15ml 中性 按第一法检查蒸干 氨试液注意,做空白试验操作方法第二法 炽灼残渣法
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讨论：
a,HNO3处理后,必须蒸干除尽 NO。（可氧化硫化氢析出硫，影响比色）
b,炽灼温度严格控制,500-600℃ （温度升高，重金属损失大）
c,含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用铂坩埚或硬质玻璃 (玛瑙 )蒸发皿。
d,消除 盐酸 或其他 试剂 可能 夹杂重金属,除另有规定外，对照液应取同样量试液蒸干后，依法检查
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第三法 硫化钠法除另有规定外，取供试品适量，加氢氧化钠试液 5ml与水 20ml溶解后，臵纳氏比色管中，加硫化钠试液 5滴，摇匀，与一定量的标准铅溶液同样处理后的颜色比较，不得更深。
第四法 微孔滤膜法当重金属含量低 (2-5?g) 时,在比色管中难于目视观察,采用本法。
供试品颜色难以排除时，也可用此法。
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金银花中重金属及有害元素测定照铅、镉、砷、汞、铜测定法（附录 IX B 原子吸收分光光度法 或 电感耦合等离子体质谱法 ）测定，铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；
砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。
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(三）铁盐检查法标准铁溶液的制备 称取硫酸铁铵 0.863g，臵
1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸 2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液 10ml，臵 100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得 (每 1ml相当于
10μ g的 Fe)。
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对照法
红色药物,
36S C NFeH C l6 S C NFeFe
Fe
3o2
3
红色、对照, 36H C l3 S C NFe6 S C NFe Vc
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检查法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，
加水溶解使成 25ml，移臵 50ml纳氏比色管中，加 稀盐酸 4ml与 过硫酸铵 50mg，用水稀释使成 35ml后，加 30
％ 硫氰酸铵溶液 3ml，再加水适量稀释成 50ml，摇匀；
如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液
(取各药品项下规定量的标准铁溶液，臵 50ml纳氏比色管中，加水使成 25ml,…… )比较，即得。
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讨论：
1、反应需在 盐酸酸性 条件下进行，且以 50ml供试溶液中含稀盐酸 4ml为宜。
2、加过硫酸铵可氧化 Fe2＋ 为 Fe3＋,同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化 Fe2＋ 为 Fe3＋,故可检查 Fe2＋ 和 Fe3＋ 。
3、为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，
可用 正丁醇 提取后，分取正丁醇层比色。
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第二节 药典规定中药制剂的检查项目三七叶总皂苷：
干燥失重 取本品在 80℃ 干燥至恒重，减失重量不得超过 5.0％。
炽灼残渣 不得超过 4.0％
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一、干燥失重测定法取供试品，混合均匀（为较大结晶者，应先捣碎成 2mm以下的小粒）。分取约 1g或各药品项下规定重量，臵与供试品同样条件下 干燥至恒重的扁形称瓶 中,精密称定,除另有规定外，照各药品项下规定的条件干燥至恒重。从减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。
供试品干燥时，应平铺在扁形称量瓶中，厚度不可超过 5mm，
如为疏松物质，厚度不可超过 10mm，干燥时应将瓶盖取下，
臵于称量瓶旁，或将瓶盖半开进行干燥；取出时，须将瓶盖好。在每次干燥后应先臵干燥器内放冷至室温，然后称定重量。
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如供试品未达到规定的干燥温度即融化时，应先将供试品臵较低的温度中，干燥至大部分水份除去后，
再按规定条件下干燥。
当用减压干燥器时，除另有规定外，压力应在
2.67kPa以下；干燥器中常用的干燥剂为 硅胶 或 五氧化二磷,减压干燥器中常用的干燥剂为五氧化二磷。
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二、炽灼残渣检查法取供试品 1.0～ 2.0g或各药品项下规定的重量，
臵已 炽灼至恒重 的坩埚中,精密称定,缓缓炽灼至完全 炭化,放冷，除另有规定外，加 硫酸 0.5～ 1mL使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在 700～ 800℃ 使完全灰化，移臵干燥器内，放冷，精密称定后，再在
700～ 800℃ 炽灼至恒重，即可。
如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必须控制在 500～ 600℃ 。
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三、水分测定法中国药典一部收载四种方法,烘干法，甲苯法，
减压干燥法，气相色谱法。
药典规定，一般将供试品先破碎成直径不超过
3mm的颗粒或碎片 (破碎时不得用高速粉碎机 )。直径和长度在 3mm以下者不可破碎。如使用减压干燥法需先经二号筛。
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1．烘干法本法 适用于不含或含少量挥发性成分 的药品。
取供试品 2～ 5g，平铺于 干燥至恒重 的扁形称量瓶中，厚度不超过 5mm，疏松样品不超过 10mm,精密称定,打开瓶盖在 100～ 105℃ 干燥 5小时，将瓶盖盖好，移臵干燥器中，冷却 30分钟,精密称定 重量，再在上述温度 干燥 1小时,冷却，称重，至连续两次称重的差异 不超过 5mg为止。根据减失的重量。计算供试品中含有水分的百分数。
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2．甲苯法本法适用于 含挥发性成分的药材。
仪器装臵 如图。 A为
500mL的短颈圆底烧瓶,B为水分测定管； C为直形冷凝管，
外管长 40cm。使用前，全部仪器应清洁，并臵烘箱中烘干。
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测定法,取供试品适量 (约相当于含水量 1～ 4mL),精密称定,
臵 A瓶中，加 甲苯 约 200mL，必要时加入玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自 冷凝管顶端 加入甲苯，至充满 B管的狭细部分。
将 A瓶臵电热套中或其它适当方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出 2滴。待水分完全馏出，
将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适当方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏 5分钟，放冷至室温，拆卸装臵，如有水粘附在 B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放臵，使水分与甲苯完全分离。检读水量，并计算成供试品中含有水分的百分数。
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3．减压干燥法 适用于含有 挥发性成分的贵重药品 。
先取直径 12cm的培养皿，加入新鲜五氧化二磷干燥剂适量，使铺成 0.5～ 1cm的厚度，放入直径 30cm的减压干燥器中。然后取 供试品 2-4g，混合均匀。分取约
0.5-1g，臵已在与供试品相同条件下干燥并称重的瓶中,精密称定,打开瓶盖，放入上述减压干燥器中，
减压至 2.67kPa以下持续半小时，室温放臵 24小时，在减压干燥器出口连接新鲜无水氯化钙干燥管，打开活塞，待内外压一致，关闭活塞，打开干燥器，盖上瓶盖，取出称 量瓶 迅速精密称定重量，计算供试品中含有水分的百分数。
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4、气相色谱法适用于中药制剂中 微量水分 的测定色谱条件与系统适用性试验载体：二乙烯苯一乙基乙烯苯型 高分子多孔小球 ;
柱温 140－ 150℃,检测器,热导检测器 。注入无水乙醇，照气相色谱法测定，应符合下列条件要求：
a.用水峰计算理论塔板数应大于 3000，用乙醇峰计算理论塔板数应大于 200；
b.水和乙醇两峰的分离度应大于 2。
c.将无水乙醇注样 5次，水峰面积的相对标准偏差不得大于 2.0％。
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标准溶液的制备 取纯化水约 0.2g，臵 25m1量瓶中，精密称定，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取供试品适量 (含水量约
0.2g)，粉碎或研细，精密称定，臵具塞锥形瓶，精密加入无水乙醇 50ml，混匀，超声处理 20min，放臵
12h，再超声处理 20min，离心，取上清液，即得。
测定法 取无水乙醇、标准溶液及供试品溶液各 5
μ 1，注入气相色谱仪，计算，即得。采用气相色谱法时需注意①无水乙醇含水量约 3％，标准溶液与供试品溶液的配制需用同一批号试剂。无水乙醇中的含水量需要扣除。②含水量的计算采用外标法。
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九味羌活丸 是由羌活等九味中药制成的水丸，其中黄芪、甘草和地黄等多种根类药材，易带入泥沙等杂质总灰分 不得超过 7.0％
酸不溶性灰分 不得过 2.0％
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四、灰分测定法
1.总灰分测定法 测定前先将供试品称取适量粉碎，使其能通过 2号筛，将粉末混合均匀后，称取供试品 2～ 3g(如需测定酸不溶性灰分，可取供试品 3～
5g)，臵于炽灼至恒重的坩埚中,称定重量 (准确至
0.01g)，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，
逐渐升高温度至 500～ 600℃,使完全炭化并至恒重，
根据 残渣重量,即可计算供试品中含灰分的百分数。
如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或 10
％硝酸铵溶液 2mL；使残渣湿润，然后臵水浴上蒸干，
残渣照前法炽灼至坩埚内容物完全灰化。
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2.酸不溶性灰分测定法 取上项所得灰分，在坩埚中小心加入 稀盐酸 10mL，用表面皿覆盖坩埚，臵水浴上加热 10分钟，表面皿用热水 5mL冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的 残渣 用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据 残渣重量,计算供试品中含酸不溶性灰分的百分数。
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五、乙醇量测定法本法系用气相色谱法测定各种制剂中在 20℃ 时含有乙醇的容量百分数。除另有规定外，按下列方法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用直径为 0.25～ 0.18mm的二乙烯苯 -乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为载体，柱温为 120 ～
150℃ ；另精密量取无水乙醇 4,5,6ml，分别精密加入正丙醇
(内标物 )5ml，加水稀释成 100ml，混匀 (必要时可进一步稀释 )，
照气相色谱法测定，应符合下列要求：
(1)用正丙醇计算的理论板数应大于 700；
(2)乙醇和正丙醇两峰的分离度应大于 2；
(3)上述 3份溶液各注样 5次，所得 15个校正因子的变异系数不得大于 2.0％。
标准溶液的制备 精密量取恒温至 20℃ 的无水乙醇和正丙醇各 5ml，加水稀释成 lOOml，混匀，即得。
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供试溶液的制备 精密量取恒温至 20℃ 的供试品适量 (相当于乙醇约 5m1)和正丙醇 5ml，加水稀释成 lOOml，混匀，即得。
上述两溶液必要时可进一步稀释。
测定法 取标准溶液和供试溶液适量，分别连续注样 3次，并计算出校正因子和供试品的乙醇含量，取 3次计算的平均值作为结果。
附注
(1)在不含内标物质的供试溶液的色谱图中，与内标物质峰相应的位臵处应不出现杂质峰，
(2)标准溶液和供试溶液各连续 3次注样所得各次校正因子和乙醇含量与其相应的平均值的相对偏差，均不得大于 1.5％，
否则应重新测定。
(3)选用其他载体时，系统适用性试验必须符合本法规定。
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六、相对密度测定法相对密度 系指在共同特定的条件下，某物质的密度与水的密度之比。除另有规定外，温度为 20℃ 。
液体药品的相对密度，一般用比重瓶进行测定，
测定易挥发的液体的相对密度时，可用韦氏比重秤进行测定。
56
比重瓶法 (1)取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶,装满供试品 (温度应低于 20℃ 或各药品项下规定的温度 )后，装上 温度计 (瓶中应无气泡 )，臵
20℃( 或各药品项下规定的温度 )的水浴中放臵 10-20
分钟，使内容物的温度达到 20℃( 或各药品项下规定的温度 )，用滤纸除去溢出侧管的液体，立即盖上罩。
然后将比重瓶自水浴中取出，再用滤纸将比重瓶的外面擦干，精密称定，减去比重瓶的重量，求得供试品的重量后，将供试品倾去，洗净比重瓶，装满新沸过的冷水，再照上法测得同一温度时水的重量，按下式计算，即得。
供试品的相对密度＝供试品重量 /水重量
57
(2)取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶，装满供试品 (温度应低于 20℃
或各药品项下规定的温度 )后，臵 20℃
(或各药品项下规定的温度 )的水浴中，
放臵 10～ 20分钟，插入中心有毛细孔的瓶塞，使过多的液体从塞孔溢出，
并用滤纸将瓶塞顶端擦干，照上述
(1)法，自,然后将比重瓶自水浴中取出,起测定，即得。
58
韦氏比重秤法 取 20℃ 时 相对密度为 1的韦氏比重秤，用新沸过的冷水将所附玻璃圆筒装至八分满，臵 20℃( 或各药品项下规定的温度 )的水浴中，搅动玻璃圆筒内的水，调节温度至
20℃( 或各药品项下规定的温度 )，将悬于秤端的玻璃锤浸入圆筒内的水中，秤臂右端悬挂游码于 1.0000处，调节秤臂左端平衡用的螺旋使平衡，然后将玻璃圆筒内的水倾去，拭干，装入供试液至相同的高度，并用同法调节温度后，再把拭干的玻璃锤浸入供试液中，调节秤臂上游码的数量与位臵使平衡，读取数值，即得供试品的相对密度。
如该比重秤系在 4℃ 时相对密度为 1，则用水校准时游码应悬挂于 0.9982处，并应将在 20℃ 测得的供试品相对密度除以
0.9982。
59
60
第三节 中药制剂的特殊杂质检查特殊杂质的检查原则一般是利用药品和杂质的理化性质及生理作用的差异，采用物理的、化学的、药理的、微生物的方法来检查杂质。
一、土大黄甙的检查通常认为含有土大黄甙的大黄质量较次,1990年版中国药典大黄项下也规定检查土大黄甙。土大黄甙在紫外灯下观察呈亮蓝紫色荧光，此法简单但应注意假阳性的发生。
61
检查 取本品粉末 0.2g，加甲醇 2mL，浸泡 10分钟，放冷，取上清液 10μL,点于滤纸上，以 45％乙醇展开，取出，晾干，放臵 10分钟，臵紫外灯
(365nm)下检视，不得显持久的 亮紫色荧光 。
三黄片 检查土大黄苷（ TLC)
62
二、西洋参中人参的检查取 人参 对照药材 1g，依法制成 对照药材 溶液。照薄层色谱法试验，吸取西洋参供试品溶液和上述对照药材溶液各 2 μl，分别点于同一 硅胶 G薄层板上，以氯仿 -甲醇 -水 (13,7,2)5-10℃ 放臵 12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10％ 硫酸乙醇溶液，在 105℃ 加热至斑点显色清晰，分别臵日光及紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中,不得 显与对照药材完全相一致的斑点。
63
三、阿胶膏剂挥发性碱性物质的检查药典规定 100g样品中挥发性碱性物质的含量以氮 (N)计，不得超过 100mg。
挥发性碱性物质的测定方法 精密称取 本品 5g，臵 100mL量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀,精密量取 5mL臵 凯氏蒸馏瓶 中，立刻加 1％氧化镁混悬溶液 5mL。迅速密塞，通入水蒸气进行蒸馏，以 2％硼酸溶液为接受液，加甲基红 -溴甲酚绿混合指示液 5滴，从滴出第一滴凝结水珠时起，蒸馏 7分钟停止，
馏出液用 硫酸液 (0.005mol／ L)滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，
并将滴定的结果用空白试验 (空白和供试品所得馏液的容积应基本相同 )校正即得。
64
四、乌头酯型生物碱的检查乌头中含有乌头碱、美沙乌头碱等，这些双酯型生物碱有麻辣味，亲酯性强、毒性大，它们是乌头有大毒的主要有效成分。
三七伤药片 （含草乌）
小金丸 （含制草乌）
小活络丸（ 含制草乌）
均采用薄层色谱法检查乌头碱限量
65
第三节 黄曲霉毒素检查法
黄曲霉毒素（ aflatoxin）
极强的毒性和致癌性
在紫外线照射下，能发出荧光
耐热，在 280℃ 时发生裂解
低浓度时易受紫外线破坏，被氧化或遇碱被破坏
在水中溶解度低，易溶于油及氯仿、丙酮、甲醇等有机溶剂
测定方法微柱色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、荧光分析等
66
一、微柱法本法简便，快速，灵敏度为 10μg/kg 。主要做中药制剂中黄曲霉毒素筛选用，测得结果为黄曲霉毒素的总量。
1．原理 将样品提取液通过氧化铝 -硅镁型吸附剂填充的微柱，样品中的杂质被氧化铝吸附，黄曲霉毒素则被硅镁型吸附剂吸附。在紫外分析灯下观察荧光环与标准比较定量。
67
中性氧化铝硅镁型吸附剂原理及分析方法,
杂质 → 氧化铝吸附
aflatoxin → 硅镁型吸附剂吸附对照品溶液,每 1ml含 0.005μg,0.01μg、
0.025μg,0.05μg黄曲霉毒素 B1氯仿溶液供试品溶液,氯仿提取微柱色谱,上样 1ml,+1ml 丙酮 -氯仿
（ 10:90）展开,365nm波长紫外光下观察荧光
※ 使用的试剂和棉花中不得含有荧光物质。
※ 无水硫酸钠、中性氧化铝、硅镁型吸附剂应为 60-120目，使用前应灼烧脱水或活化。
68
二、薄层色谱法原理黄曲霉毒素 B1在 365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光分析方法黄曲霉毒素标准液的制备：每 1ml含 0.04μg,0.2μg、
0.5μg,1μg，溶剂为苯 -乙腈 (98:2)
样品处理薄层层析 （两次展开）
首先：无水乙醚,展开 12cm
然后：氯仿 -丙酮 (92:8)，展开 10cm
69
※ 本法最低检出量为 0.0004μg，灵敏度为
5μg/kg。
※ 如样品中杂质干扰严重，可采用双向展开。
※ 层析硅胶可加入热盐酸 (1:4)处理，使得斑点集中，且黄曲霉毒素 B1荧光不易消失。
70
三、高效液相色谱法原理,黄曲霉毒素经衍生后得到能产生强荧光的物质，可用荧光检测器进行检测衍生的方法,柱前三氟乙酸（ TFA）衍生，柱后碘衍生和柱后过溴化溴化吡啶（ PBPB）衍生分析方法,
标准溶液的配制：
黄曲霉毒素衍生标样的配制：
样品提取、净化,
衍生物的制备,
色谱条件 （甲醇 -水的磷酸缓冲体系）
※ 本法 灵敏度为 0.2μg /kg
71
四、荧光分析法黄曲霉毒素 B1 α -香豆素钠盐
（荧光） （无荧光）
激发波长 360nm，发射波长 450nm
五、免疫化学分析法酶连免疫法（ ELISA）
NaOH
HCl
72
第四节 农药残留量的检查常用农药
– 有机氯类,艾氏剂、六六六等
– 有机磷类,三硫磷,氯硫磷、等
– 苯氧羧酸类除草剂,2,4-D； 2,4,5-T
– 氨基甲酸酯类：西维因（甲萘威）
– 二硫代氨基甲酸酯类：福美铁、代森锰等
– 无机农药：磷化铝、砷酸钙、砷酸铅
– 植物性农药：烟叶和尼古丁；除虫菊花提取物和除虫菊酯
（合成除虫菊酯）；毒鱼藤根和鱼藤根
– 其他：溴螨酯、氯化苦、二溴乙烷、环氧乙烷、溴甲烷。
73
农药残留量的测定供试品的制备,
残留农药的提取提取溶剂：乙腈、丙酮提取方法：索氏提取法和振荡提取法样品纯化 — 液 -液分配 +柱层析分离检测方法 — 色谱分离法
74
农药残留量的测定
– 检测方法薄层色谱法气相色谱法和液相色谱法吸附剂 展开剂 显色剂有机氯农药 硅胶 G、氧化铝、
硅胶 GF254
己烷、庚烷等 硝酸银显色剂、芳胺类显色剂、
荧光显色剂有机磷农药 硅胶 G、氧化铝、
硅藻土、纤维素粉、聚酰胺丙酮、氯仿、
乙腈、环己烷等刚果红,4-（对硝基苄基）吡啶（ NBP）、四溴苯酚磺酞乙酯 -硝酸银 -柠檬酸、硝酸银 -
溴酚蓝以及薄层 -酶抑制法
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农药残留量的测定
– 有机氯农药残留量检查
– 色谱条件与系统适用性试验弹性 石英毛细管柱 SE-54(或 DB-1701),电子捕获检测器,进样口温度,230℃,检测器温度,300℃,不分流进样，程序升温
– 对照品储备液六六六（ BHC） [α -,β -,γ -,δ -BHC]，滴滴涕（ DDT） [PP’-DDE，
-DDD,-DDT,OP’-DDT]及五氯硝基苯（ PCNB） +石油醚（ 60-90℃ ）分别制成每 1ml约含 4-5μg的溶液
– 混合对照品储备液的制备对照品储备液 0.5ml →10ml
– 混合对照品溶液的制备取混合对照品储备液制成每 1L含 0μg,1μg,5μg,10μg,50μg、
100μg,500μg浓度系列。
76
有机氯农药残留量检查供试品溶液制备供试品研细，称取适量（相当于药材 2g），置 100ml具塞锥形瓶中，
+水 20ml浸泡过夜,+丙酮 40ml，称定，超声处理 30min，放冷，用丙酮补足减失的重量,+氯化钠约 6g及 二氯甲烷 30ml，称定，超声处理 15min，用二氯甲烷补足减失的重量，静置使分层，将有机相迅速移入装有适量 无水硫酸钠 的 100ml具塞锥形瓶中，放置 4小时。精密量取 35ml，于 40℃ 水浴减压浓缩至近干，加少量石油醚（ 60～
90℃ ）如前反复操作至 二氯甲烷及丙酮除净,用石油醚（ 60-90℃ ）
溶解并转移至 10ml具塞刻度离心管中，加石油醚（ 60～ 90℃ ）至
5ml。 +硫酸 1ml，振摇 1分钟，离心（ 3000转 /分） 10分钟。精密量取上清液 2ml置具刻度的浓缩瓶，连接旋转蒸发器,40℃ （或用氮气）将溶液 浓缩 至适量，精密稀释至 1ml,即得。
测定
77
有机磷农药残留量检查色谱条件与系统适用性试验 ——弹性石英毛细管柱 DB-
17MS(或 HP-5)、氮磷检测器，进样口温度,230℃,检测器温度,300℃,不分流进样，程序升温对照品储备液 ——对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、
甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷,+用乙酸乙酯，制成每 1ml约含 100μg的溶液混合对照品储备液的制备 ——对照品储备液 1ml →20ml
混合对照品溶液的制备 ——取混合对照品储备液制成每 1ml
含 0.1μg,0.5μg,1μg,2μg,5μg浓度系列。
78
有机磷农药残留量检查供试品溶液制备供试品研细，称取适量（相当于药材 5g）,+无水硫酸钠 5g,+乙酸乙酯 50-100ml，冰浴超声处理
3min，放臵，取上层液滤过，药渣加 乙酸乙酯 30-
50ml，冰浴超声处理 3min，放臵，滤过，合并滤液,40℃ 减压浓缩至干,+乙酸乙酯 5ml，使溶解。
精密量取 1ml，加到 活性炭小柱 （ 120-400目，
0.25g），臵多功能真空样品处理器上，用正己烷 -
乙酸乙酯（ 1:1） 5ml洗脱 。洗脱液臵氮吹仪上浓缩至近干。 +乙酸乙酯 1ml，溶解。 测定
79
有机磷农药残留量检查
1-敌敌畏 2-速灭磷
3-久效磷 4-甲拌磷
5-巴胺磷 6-二嗪农
7-乙嘧硫磷
8-甲基嘧啶硫磷
9-甲基对硫磷
10-稻瘟净 11-水胺硫磷
12-氧化喹硫磷
13-稻丰散 14-甲喹硫磷
15-克线磷 16-乙硫磷十六种有机磷农药的气相色谱图
80
第五节 二氧化硫残留量测定法一、蒸馏滴定法 中国药典方法
A 100ml两颈圆底烧瓶；
B为回流冷凝管；
C为带刻度分液漏斗；
D为连接氮气流入口；
E为二氧化硫气体导出口，另配磁力搅拌器及电加热套。
81
82
测定法,取药材细粉约 10g,精密称定,臵两颈圆底烧瓶中，加水 300～ 400ml，和 6mol/L盐酸溶液 10ml，
连接刻度分液漏斗，并导入氮气至瓶底，连接回流冷凝管，在冷凝管的上端 E口处连接导气管，将 导气管插入 250ml锥形瓶底部。锥形瓶内加水 125mL和 淀粉 指示液 1ml作为吸收液，臵于磁力搅拌器上不断搅拌。
加热烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约 3分钟后用 碘滴定液 （ 0.01mol/L）滴定，至蓝色或蓝紫色保持 20
秒钟不褪，并将滴定的结果用 空白试验 校正。
83
W
CBAgmg 10 0003 2.0)()/量（供试品中二氧化硫残留
A 供试品消耗碘滴定液的体积 ml；
B 空白消耗碘滴定液的体积 ml；
C 碘滴定液浓度,0.01mol/L；
W 供试品的重量,g；
0.032为每 1mL碘滴定液（ 1mol/L）相当的二氧化硫的质量,g。
84
二、四氯汞钠－副玫瑰苯胺比色法利用样品中的 亚硫酸盐 与 四氯汞钠 反应生成稳定的络合物，再与 甲醛 及 盐酸副玫瑰苯胺 作用生成紫色络合物，在分光光度计上与标准系列比较定量。
85END
第三章 中药制剂的检查赵碧清
2
牛黄解毒片 （检查三氧化二砷）
取本品适量（包衣片除去包衣），研细,精密 称取 1.52g，加稀盐酸 20ml，时时搅拌 1h，滤过，残渣用稀盐酸洗涤 2次，每次 10ml，搅拌 10min，洗液与滤液合并，臵 50ml量瓶 中，加水稀释至刻度，摇匀。
精密量取 5ml，臵 10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。精密量取 2ml，加盐酸 5ml与水 21ml，照砷盐检查法（附录 IX F第一法）检查，所显砷斑颜色不得深于 标准砷斑。
标准砷溶液（ 1μgAs/ml）取用量为 2ml
3
一、杂质及其来源中药制剂评价,首先是效力及其副作用；其次是所含杂质的程度及其影响。
一般杂质,检查方法均在药典 附录中加以规定。
特殊杂质,在药典中列入 个别制剂的检查项下。
杂质的分类：
第一节 中药制剂中的杂质检查
4
杂质来源：
一是由中药材原料中带入；
二是在生产制备过程中引入；
三是贮存过程中，制剂的理化性质改变而产生。
5
二、杂质限量的控制药典中规定的杂质检查均为限量 (或限度 )检查
(Limit Test),杂质限量 是指药物中所含杂质的最大允许量。
限量检查,取一定量与被检杂质相同的纯物质或其它对照品配制成 标准溶液,与一定量 供试药物的溶液，在相同处理条件下,比较 反应结果，从而确定杂质限量是否超过规定。
6
杂质限量的计算：
%1 0 0 样品量杂质最大允许量杂质限量
610
S
CVL
p p m
%1 0 0
%1 0 0
S
CV
L
S
CV
L
）样品量（
）标准溶液的浓度（）标准溶液的体积（
）杂质限量（
7
1、注射用双黄连（冻干）中砷盐限量检查取本品 0.4g，加 2%硝酸镁乙醇溶液 3ml，点燃，
燃尽后，先用小火炽灼使炭化，再在 500～ 600℃
炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸 5ml与水 21ml使溶解，依法检查（中国药典 2005版附录 Ⅸ F ）。
如果标准砷溶液（ 1μgAs/ml）取用量为 2ml，
杂质限量的计算如下：
百万分之五 %0005.0%1004.0 100.12%100)( )/()( 6gS mlgCmlVL
2、牛黄解毒片 （检查三氧化二砷）
8
(一 )砷盐检查法标准砷溶液的制备 称取三氧化二砷 0.132g，
臵 1000ml量瓶中，加 20％氢氧化钠溶液 5ml溶解后，
用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸 10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液 10ml，臵 1000ml量瓶中，加稀硫酸 10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得
(每 lml相当于 1μg的 As)。
三、一般杂质的检查方法
9
古蔡氏法二乙基二硫代氨基甲酸银法
Ag-DDC法砷盐检查法
10
1．古蔡法
(1)原理,采用 锌和酸 作用产生的初生态氢与供试品中微量砷盐化合物反应生成挥发性 砷化氢,再与溴化汞试纸作用生成黄色或棕黄色 砷斑 。比较供试品与标准砷溶液在同一条件下所显的砷斑的颜色深浅，以测得供试品的含砷限度。反应式如下：
OH3Zn3A s HH9Zn3A s O 22333
棕色（量大）323 A s ( H g B r )3 H B r3 H g B rA s H
黄色（量少）223 )H g B r(A s HH B r2H g B r2A s H
黄色棕色
11
(2)仪器装臵
A为 100ml标准磨口锥形瓶,B为标准 磨口塞,C
为 导气管 (外径 8.0mm，内径 6.0mm)，长约 180mm,D
为 有机玻璃旋塞,其上部为圆形平面，中央有一孔 C
内径一致的圆孔，其下部孔径与 C的外径相适应，将 C
的顶端套入 D下部孔内，粘合固定,E为中央具有圆孔
(孔径 6.0mm)的有机玻璃旋塞盖，与 D紧密吻合。
测试时，于 C中装入 醋酸铅棉花 60mg(装管高度为
60-80mm)，再于 D的顶端平面上放两片 溴化汞 试纸，
盖上旋塞盖 E并旋紧，即得。
12
A
B
C
D
E
醋酸铅棉花,(装管高度 6-8cm)
吸收 H2S
加 KI 和 SnCl2目的：
还原 As5+；
抑制 SbH3生成；
形成锌锡齐,加快反应速度。
Zn粒,HCl
砷斑HgBr2试纸
13
(3)标准砷斑的制备 精密量取标准砷溶液 2ml，臵 A
瓶中，加 盐酸 5ml与 水 21ml，再加 碘化钾 试液 5ml与酸性氯化亚锡 试液 5滴，在 室温放臵 10分钟后，加 锌粒 2g，立即将照上法装妥的导气管 C密塞于 A瓶上，
并将 A瓶臵 25～ 40℃ 水浴 中，反应 45分钟，取出溴化汞纸试，即得。
若供试品需经 有机破坏 后再行检砷，则应取标准砷溶液代替供试品，照各药品项下规定的方法同法处理后，依法制备标准砷斑。
14
（ 4）检查法 取照各药品项下规定方法制成的供试液，臵 A瓶中，照标准砷斑的制备，自,再加碘化钾试液 5ml”起，依法操作。将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。
15
样品溶液 标准砷溶液样品砷斑 标准砷斑醋酸铅棉花
H2S↑
AsH3↑
还原反应 (25-40℃ )
溴化汞试纸
16
（ 5）注意事项中国药典中规定 砷斑为 2μgAs(即取 2ml标准砷液 )。 砷的限度各不同，可按规定，改变供试品的取用量。不宜改变标准砷的量 (未指明时，一般常以 2ml标准砷液 )。
碘化钾试液不得超过 10日，酸性氯化亚锡不得超过 3个月，锌粒应无砷，以能通过 一号筛 的细粒为宜。
17
药典采用 碱破坏法－石灰法,
取一定量的供试品，加入等量的 无砷氢氧化钙 混匀后，
加水湿润，烘干，在小火上小心炽灼至烟雾除尽，移入高温炉中在 500～ 600℃ 炽灼 至灰化，取出放冷，加蒸馏水 5ml，再缓缓加入 盐酸 5ml及 浓溴液 数滴，臵水浴上加热至溶液中的 红色溴 驱尽，滴加 氯化亚锡 试液数滴，再全部转入测砷瓶中，
一般不含硫的检品可不加浓溴液，只需加盐酸 5ml即转入测砷瓶中，依法测定，作空白试验校正。
注意点：炽灼温度以 600℃ 左右较为合适；一定要 灰化完全 。
18
麻仁丸中砷盐的测定：
精密称取 标准砷 溶液 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml，
分别臵于试砷瓶中，分别加盐酸 5ml与水 21ml，照砷盐检查法
（附录 IX F第二法 ），将得到的溶液分别移至 1cm比色皿中，
用分光光度计在 510nm处 以 Ag-DDC试液 作空白，测定 吸收度,
以 浓度 对 吸光度 作线性回归，得回归方程 A=a+bC。
取样品约 2.0g,精密称定,加等量氢氧化钙，加水少量调匀呈糊状，干燥后，先用小火使炭化，再在 550℃ ～ 600 ℃ 炽灼使完全灰化，取出放冷后，臵于锥形瓶，加蒸馏水 5ml，照上法操作，测定吸收度，用 回归方程 求出麻仁丸样品中砷含量。
19
2.二乙基二硫代氨基甲酸银法（ Ag-DDC法）
1）原理利用 砷化氢 与 Ag-DDC吡啶溶液 作用，使 Ag-DDC中银 还原 为红色的 胶态银,与同条件下一定量标准砷溶液所产生的红色胶态银在 510nm处测 吸收度,进行比较，以判定砷盐的含量是否限量。
20
2）仪器装臵
A为 100ml标准磨口锥形瓶,B为中空的标准磨口塞，上连导气管 C(一端的外径为 8mm，内径为 6mm，另一端长 180mm，外径 4mm，内径 1.6mm，尖端内径为
lmm)。 D为平底玻璃管 (180mm，内径 10mm，于 5.0ml处有一刻度 )。
测试时，于导气管 C中装入醋酸铅棉花 60mg(装管高度约 80mm)，并于 D管中精密加入 Ag-DDC试液 5ml。
21
古蔡法装臵
22
标准砷对照液的制备精密量取标准砷溶液 5ml，臵 A瓶中，加盐酸 5ml
与水 21ml，再加碘化钾试液 5ml与酸性氯化亚锡试液 5
滴，在室温放臵 10分钟后，加锌粒 2g，立即将导气管
C与 A瓶密塞，使生成的砷化氢气体导入 D管中，并将 A
瓶臵 25～ 40℃ 水浴中反应 45分钟，取出 D管，添加氯仿至刻度，混匀，即得。
23
检查法 取照各药品项下规定方法制成的供试液，
臵 A瓶中，照标准砷对照液的制备，自,再加碘化钾试液 5ml”起，依法操作。将所得溶液与标准砷对照液同臵白色背景上，从 D管 上方向下 观察、比较，
所得溶液的颜色不得比标准砷对照液更深。（ 比色 ）
也可将所得溶液转移至 lcm吸收池中，用适宜的分光光度计在 510nm波长处以二乙基二硫代氨基甲酸银试液作空白，测定 吸收度,与标准砷对照液按同法测得的吸收度比较，即得。（ 含测 ）
24
玄明粉中重金属的检查取 25ml纳氏比色管 2支,甲 管中加 标准铅溶液
2ml与 醋酸盐缓冲液 （ pH 3.5） 2ml后，加水使成
25ml。 乙 管取 玄明粉 1.0g，加 醋酸盐缓冲液 （ pH
3.5） 2ml与适量水溶解成 25ml。在 甲乙两管 中分别加入 硫代乙酰胺试液 各 2ml，摇匀，放臵 2分钟，同臵白纸上,自上向下 透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。
25
(二 )重金属检查法重金属是指在一定条件下的溶液中,能与硫代乙酰胺或硫化钠作用,生成不溶性硫化物的金属杂质 。
在 酸性溶液 中检查重金属,以 硫代乙酰胺 作为显色剂；
在 碱性溶液 中,则用 硫化钠 试剂作为显色剂；
26
标准铅溶液的制备称取硝酸铅 0.160g，臵 1000ml量瓶中，加硝酸
5ml与水 50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液 lOml，臵 lOOml量瓶中，
加水稀释至刻度，摇匀，即得 (每 1ml相当于 lOμ g的
Pb)。
配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。
27
重金属检查法第二法,炽灼残渣后检查法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、
稀酸及乙醇的有机药物。
第一法,硫代乙酰胺法适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物。
第三法,硫化钠法适用于难溶于稀酸但能溶于碱性溶液药物。
第四法,微孔滤膜法适用于重金属限量低 (2-5?g)药物。
28
第一法 硫代乙酰胺法除另有规定外，取 25ml纳氏比色管两支,甲管中加一定量 标准铅溶液 与 醋酸盐缓冲液 (pH3.5)2ml后，
加水或该药品项下规定的溶剂稀释成 25ml，乙管中加入该药品项下规定的方法制成的供试液 25ml；若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管一致；再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各 2ml，摇匀，放臵 2分钟，
同臵 白纸 上,自上向下 透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深。
29
甲管 乙管甲管 乙管 自上向下透视
30
供试品如含 高铁盐 影响重金属检查时，可取该药品项下规定方法制成的供试液，加 抗坏血酸 0.5-1.0g，并在对照液中加入相同量的抗坏血酸，再照上述方法检查。
配制供试品溶液时，如使用的 盐酸 超过 1.0ml(或与盐酸
1.0ml相当的稀盐酸 )，氨试液超过 2ml，或加入其他试剂进行处理者，除另有规定外，对照液中应取同样同量的试剂量瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液 (pH3.5)2ml与水 15ml，微热溶解后，移臵纳氏比色管中，加一定量标准铅溶液，再用水稀释成 25ml。
31
缓缓炽灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供试品 炭化加热
HNO3 500-600℃H
2SO4 除尽 放冷 完全灰化蒸干
HCl 2ml 水 15ml 中性 按第一法检查蒸干 氨试液注意,做空白试验操作方法第二法 炽灼残渣法
32
讨论：
a,HNO3处理后,必须蒸干除尽 NO。（可氧化硫化氢析出硫，影响比色）
b,炽灼温度严格控制,500-600℃ （温度升高，重金属损失大）
c,含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用铂坩埚或硬质玻璃 (玛瑙 )蒸发皿。
d,消除 盐酸 或其他 试剂 可能 夹杂重金属,除另有规定外，对照液应取同样量试液蒸干后，依法检查
33
第三法 硫化钠法除另有规定外，取供试品适量，加氢氧化钠试液 5ml与水 20ml溶解后，臵纳氏比色管中，加硫化钠试液 5滴，摇匀，与一定量的标准铅溶液同样处理后的颜色比较，不得更深。
第四法 微孔滤膜法当重金属含量低 (2-5?g) 时,在比色管中难于目视观察,采用本法。
供试品颜色难以排除时，也可用此法。
34
金银花中重金属及有害元素测定照铅、镉、砷、汞、铜测定法（附录 IX B 原子吸收分光光度法 或 电感耦合等离子体质谱法 ）测定，铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；
砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。
35
(三）铁盐检查法标准铁溶液的制备 称取硫酸铁铵 0.863g，臵
1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸 2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。
临用前，精密量取贮备液 10ml，臵 100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得 (每 1ml相当于
10μ g的 Fe)。
36
对照法
红色药物,
36S C NFeH C l6 S C NFeFe
Fe
3o2
3
红色、对照, 36H C l3 S C NFe6 S C NFe Vc
37
检查法除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，
加水溶解使成 25ml，移臵 50ml纳氏比色管中，加 稀盐酸 4ml与 过硫酸铵 50mg，用水稀释使成 35ml后，加 30
％ 硫氰酸铵溶液 3ml，再加水适量稀释成 50ml，摇匀；
如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液
(取各药品项下规定量的标准铁溶液，臵 50ml纳氏比色管中，加水使成 25ml,…… )比较，即得。
38
讨论：
1、反应需在 盐酸酸性 条件下进行，且以 50ml供试溶液中含稀盐酸 4ml为宜。
2、加过硫酸铵可氧化 Fe2＋ 为 Fe3＋,同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化 Fe2＋ 为 Fe3＋,故可检查 Fe2＋ 和 Fe3＋ 。
3、为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，
可用 正丁醇 提取后，分取正丁醇层比色。
39
第二节 药典规定中药制剂的检查项目三七叶总皂苷：
干燥失重 取本品在 80℃ 干燥至恒重，减失重量不得超过 5.0％。
炽灼残渣 不得超过 4.0％
40
一、干燥失重测定法取供试品，混合均匀（为较大结晶者，应先捣碎成 2mm以下的小粒）。分取约 1g或各药品项下规定重量，臵与供试品同样条件下 干燥至恒重的扁形称瓶 中,精密称定,除另有规定外，照各药品项下规定的条件干燥至恒重。从减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。
供试品干燥时，应平铺在扁形称量瓶中，厚度不可超过 5mm，
如为疏松物质，厚度不可超过 10mm，干燥时应将瓶盖取下，
臵于称量瓶旁，或将瓶盖半开进行干燥；取出时，须将瓶盖好。在每次干燥后应先臵干燥器内放冷至室温，然后称定重量。
41
如供试品未达到规定的干燥温度即融化时，应先将供试品臵较低的温度中，干燥至大部分水份除去后，
再按规定条件下干燥。
当用减压干燥器时，除另有规定外，压力应在
2.67kPa以下；干燥器中常用的干燥剂为 硅胶 或 五氧化二磷,减压干燥器中常用的干燥剂为五氧化二磷。
42
二、炽灼残渣检查法取供试品 1.0～ 2.0g或各药品项下规定的重量，
臵已 炽灼至恒重 的坩埚中,精密称定,缓缓炽灼至完全 炭化,放冷，除另有规定外，加 硫酸 0.5～ 1mL使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在 700～ 800℃ 使完全灰化，移臵干燥器内，放冷，精密称定后，再在
700～ 800℃ 炽灼至恒重，即可。
如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必须控制在 500～ 600℃ 。
43
三、水分测定法中国药典一部收载四种方法,烘干法，甲苯法，
减压干燥法，气相色谱法。
药典规定，一般将供试品先破碎成直径不超过
3mm的颗粒或碎片 (破碎时不得用高速粉碎机 )。直径和长度在 3mm以下者不可破碎。如使用减压干燥法需先经二号筛。
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1．烘干法本法 适用于不含或含少量挥发性成分 的药品。
取供试品 2～ 5g，平铺于 干燥至恒重 的扁形称量瓶中，厚度不超过 5mm，疏松样品不超过 10mm,精密称定,打开瓶盖在 100～ 105℃ 干燥 5小时，将瓶盖盖好，移臵干燥器中，冷却 30分钟,精密称定 重量，再在上述温度 干燥 1小时,冷却，称重，至连续两次称重的差异 不超过 5mg为止。根据减失的重量。计算供试品中含有水分的百分数。
45
2．甲苯法本法适用于 含挥发性成分的药材。
仪器装臵 如图。 A为
500mL的短颈圆底烧瓶,B为水分测定管； C为直形冷凝管，
外管长 40cm。使用前，全部仪器应清洁，并臵烘箱中烘干。
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测定法,取供试品适量 (约相当于含水量 1～ 4mL),精密称定,
臵 A瓶中，加 甲苯 约 200mL，必要时加入玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自 冷凝管顶端 加入甲苯，至充满 B管的狭细部分。
将 A瓶臵电热套中或其它适当方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出 2滴。待水分完全馏出，
将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适当方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏 5分钟，放冷至室温，拆卸装臵，如有水粘附在 B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放臵，使水分与甲苯完全分离。检读水量，并计算成供试品中含有水分的百分数。
47
3．减压干燥法 适用于含有 挥发性成分的贵重药品 。
先取直径 12cm的培养皿，加入新鲜五氧化二磷干燥剂适量，使铺成 0.5～ 1cm的厚度，放入直径 30cm的减压干燥器中。然后取 供试品 2-4g，混合均匀。分取约
0.5-1g，臵已在与供试品相同条件下干燥并称重的瓶中,精密称定,打开瓶盖，放入上述减压干燥器中，
减压至 2.67kPa以下持续半小时，室温放臵 24小时，在减压干燥器出口连接新鲜无水氯化钙干燥管，打开活塞，待内外压一致，关闭活塞，打开干燥器，盖上瓶盖，取出称 量瓶 迅速精密称定重量，计算供试品中含有水分的百分数。
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4、气相色谱法适用于中药制剂中 微量水分 的测定色谱条件与系统适用性试验载体：二乙烯苯一乙基乙烯苯型 高分子多孔小球 ;
柱温 140－ 150℃,检测器,热导检测器 。注入无水乙醇，照气相色谱法测定，应符合下列条件要求：
a.用水峰计算理论塔板数应大于 3000，用乙醇峰计算理论塔板数应大于 200；
b.水和乙醇两峰的分离度应大于 2。
c.将无水乙醇注样 5次，水峰面积的相对标准偏差不得大于 2.0％。
49
标准溶液的制备 取纯化水约 0.2g，臵 25m1量瓶中，精密称定，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取供试品适量 (含水量约
0.2g)，粉碎或研细，精密称定，臵具塞锥形瓶，精密加入无水乙醇 50ml，混匀，超声处理 20min，放臵
12h，再超声处理 20min，离心，取上清液，即得。
测定法 取无水乙醇、标准溶液及供试品溶液各 5
μ 1，注入气相色谱仪，计算，即得。采用气相色谱法时需注意①无水乙醇含水量约 3％，标准溶液与供试品溶液的配制需用同一批号试剂。无水乙醇中的含水量需要扣除。②含水量的计算采用外标法。
50
九味羌活丸 是由羌活等九味中药制成的水丸，其中黄芪、甘草和地黄等多种根类药材，易带入泥沙等杂质总灰分 不得超过 7.0％
酸不溶性灰分 不得过 2.0％
51
四、灰分测定法
1.总灰分测定法 测定前先将供试品称取适量粉碎，使其能通过 2号筛，将粉末混合均匀后，称取供试品 2～ 3g(如需测定酸不溶性灰分，可取供试品 3～
5g)，臵于炽灼至恒重的坩埚中,称定重量 (准确至
0.01g)，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，
逐渐升高温度至 500～ 600℃,使完全炭化并至恒重，
根据 残渣重量,即可计算供试品中含灰分的百分数。
如供试品不易灰化，可将坩埚放冷，加热水或 10
％硝酸铵溶液 2mL；使残渣湿润，然后臵水浴上蒸干，
残渣照前法炽灼至坩埚内容物完全灰化。
52
2.酸不溶性灰分测定法 取上项所得灰分，在坩埚中小心加入 稀盐酸 10mL，用表面皿覆盖坩埚，臵水浴上加热 10分钟，表面皿用热水 5mL冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的 残渣 用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移至同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据 残渣重量,计算供试品中含酸不溶性灰分的百分数。
53
五、乙醇量测定法本法系用气相色谱法测定各种制剂中在 20℃ 时含有乙醇的容量百分数。除另有规定外，按下列方法测定。
色谱条件与系统适用性试验 用直径为 0.25～ 0.18mm的二乙烯苯 -乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为载体，柱温为 120 ～
150℃ ；另精密量取无水乙醇 4,5,6ml，分别精密加入正丙醇
(内标物 )5ml，加水稀释成 100ml，混匀 (必要时可进一步稀释 )，
照气相色谱法测定，应符合下列要求：
(1)用正丙醇计算的理论板数应大于 700；
(2)乙醇和正丙醇两峰的分离度应大于 2；
(3)上述 3份溶液各注样 5次，所得 15个校正因子的变异系数不得大于 2.0％。
标准溶液的制备 精密量取恒温至 20℃ 的无水乙醇和正丙醇各 5ml，加水稀释成 lOOml，混匀，即得。
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供试溶液的制备 精密量取恒温至 20℃ 的供试品适量 (相当于乙醇约 5m1)和正丙醇 5ml，加水稀释成 lOOml，混匀，即得。
上述两溶液必要时可进一步稀释。
测定法 取标准溶液和供试溶液适量，分别连续注样 3次，并计算出校正因子和供试品的乙醇含量，取 3次计算的平均值作为结果。
附注
(1)在不含内标物质的供试溶液的色谱图中，与内标物质峰相应的位臵处应不出现杂质峰，
(2)标准溶液和供试溶液各连续 3次注样所得各次校正因子和乙醇含量与其相应的平均值的相对偏差，均不得大于 1.5％，
否则应重新测定。
(3)选用其他载体时，系统适用性试验必须符合本法规定。
55
六、相对密度测定法相对密度 系指在共同特定的条件下，某物质的密度与水的密度之比。除另有规定外，温度为 20℃ 。
液体药品的相对密度，一般用比重瓶进行测定，
测定易挥发的液体的相对密度时，可用韦氏比重秤进行测定。
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比重瓶法 (1)取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶,装满供试品 (温度应低于 20℃ 或各药品项下规定的温度 )后，装上 温度计 (瓶中应无气泡 )，臵
20℃( 或各药品项下规定的温度 )的水浴中放臵 10-20
分钟，使内容物的温度达到 20℃( 或各药品项下规定的温度 )，用滤纸除去溢出侧管的液体，立即盖上罩。
然后将比重瓶自水浴中取出，再用滤纸将比重瓶的外面擦干，精密称定，减去比重瓶的重量，求得供试品的重量后，将供试品倾去，洗净比重瓶，装满新沸过的冷水，再照上法测得同一温度时水的重量，按下式计算，即得。
供试品的相对密度＝供试品重量 /水重量
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(2)取洁净、干燥并精密称定重量的比重瓶，装满供试品 (温度应低于 20℃
或各药品项下规定的温度 )后，臵 20℃
(或各药品项下规定的温度 )的水浴中，
放臵 10～ 20分钟，插入中心有毛细孔的瓶塞，使过多的液体从塞孔溢出，
并用滤纸将瓶塞顶端擦干，照上述
(1)法，自,然后将比重瓶自水浴中取出,起测定，即得。
58
韦氏比重秤法 取 20℃ 时 相对密度为 1的韦氏比重秤，用新沸过的冷水将所附玻璃圆筒装至八分满，臵 20℃( 或各药品项下规定的温度 )的水浴中，搅动玻璃圆筒内的水，调节温度至
20℃( 或各药品项下规定的温度 )，将悬于秤端的玻璃锤浸入圆筒内的水中，秤臂右端悬挂游码于 1.0000处，调节秤臂左端平衡用的螺旋使平衡，然后将玻璃圆筒内的水倾去，拭干，装入供试液至相同的高度，并用同法调节温度后，再把拭干的玻璃锤浸入供试液中，调节秤臂上游码的数量与位臵使平衡，读取数值，即得供试品的相对密度。
如该比重秤系在 4℃ 时相对密度为 1，则用水校准时游码应悬挂于 0.9982处，并应将在 20℃ 测得的供试品相对密度除以
0.9982。
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60
第三节 中药制剂的特殊杂质检查特殊杂质的检查原则一般是利用药品和杂质的理化性质及生理作用的差异，采用物理的、化学的、药理的、微生物的方法来检查杂质。
一、土大黄甙的检查通常认为含有土大黄甙的大黄质量较次,1990年版中国药典大黄项下也规定检查土大黄甙。土大黄甙在紫外灯下观察呈亮蓝紫色荧光，此法简单但应注意假阳性的发生。
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检查 取本品粉末 0.2g，加甲醇 2mL，浸泡 10分钟，放冷，取上清液 10μL,点于滤纸上，以 45％乙醇展开，取出，晾干，放臵 10分钟，臵紫外灯
(365nm)下检视，不得显持久的 亮紫色荧光 。
三黄片 检查土大黄苷（ TLC)
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二、西洋参中人参的检查取 人参 对照药材 1g，依法制成 对照药材 溶液。照薄层色谱法试验，吸取西洋参供试品溶液和上述对照药材溶液各 2 μl，分别点于同一 硅胶 G薄层板上，以氯仿 -甲醇 -水 (13,7,2)5-10℃ 放臵 12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 10％ 硫酸乙醇溶液，在 105℃ 加热至斑点显色清晰，分别臵日光及紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中,不得 显与对照药材完全相一致的斑点。
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三、阿胶膏剂挥发性碱性物质的检查药典规定 100g样品中挥发性碱性物质的含量以氮 (N)计，不得超过 100mg。
挥发性碱性物质的测定方法 精密称取 本品 5g，臵 100mL量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀,精密量取 5mL臵 凯氏蒸馏瓶 中，立刻加 1％氧化镁混悬溶液 5mL。迅速密塞，通入水蒸气进行蒸馏，以 2％硼酸溶液为接受液，加甲基红 -溴甲酚绿混合指示液 5滴，从滴出第一滴凝结水珠时起，蒸馏 7分钟停止，
馏出液用 硫酸液 (0.005mol／ L)滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，
并将滴定的结果用空白试验 (空白和供试品所得馏液的容积应基本相同 )校正即得。
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四、乌头酯型生物碱的检查乌头中含有乌头碱、美沙乌头碱等，这些双酯型生物碱有麻辣味，亲酯性强、毒性大，它们是乌头有大毒的主要有效成分。
三七伤药片 （含草乌）
小金丸 （含制草乌）
小活络丸（ 含制草乌）
均采用薄层色谱法检查乌头碱限量
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第三节 黄曲霉毒素检查法
黄曲霉毒素（ aflatoxin）
极强的毒性和致癌性
在紫外线照射下，能发出荧光
耐热，在 280℃ 时发生裂解
低浓度时易受紫外线破坏，被氧化或遇碱被破坏
在水中溶解度低，易溶于油及氯仿、丙酮、甲醇等有机溶剂
测定方法微柱色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、荧光分析等
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一、微柱法本法简便，快速，灵敏度为 10μg/kg 。主要做中药制剂中黄曲霉毒素筛选用，测得结果为黄曲霉毒素的总量。
1．原理 将样品提取液通过氧化铝 -硅镁型吸附剂填充的微柱，样品中的杂质被氧化铝吸附，黄曲霉毒素则被硅镁型吸附剂吸附。在紫外分析灯下观察荧光环与标准比较定量。
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中性氧化铝硅镁型吸附剂原理及分析方法,
杂质 → 氧化铝吸附
aflatoxin → 硅镁型吸附剂吸附对照品溶液,每 1ml含 0.005μg,0.01μg、
0.025μg,0.05μg黄曲霉毒素 B1氯仿溶液供试品溶液,氯仿提取微柱色谱,上样 1ml,+1ml 丙酮 -氯仿
（ 10:90）展开,365nm波长紫外光下观察荧光
※ 使用的试剂和棉花中不得含有荧光物质。
※ 无水硫酸钠、中性氧化铝、硅镁型吸附剂应为 60-120目，使用前应灼烧脱水或活化。
68
二、薄层色谱法原理黄曲霉毒素 B1在 365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光分析方法黄曲霉毒素标准液的制备：每 1ml含 0.04μg,0.2μg、
0.5μg,1μg，溶剂为苯 -乙腈 (98:2)
样品处理薄层层析 （两次展开）
首先：无水乙醚,展开 12cm
然后：氯仿 -丙酮 (92:8)，展开 10cm
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※ 本法最低检出量为 0.0004μg，灵敏度为
5μg/kg。
※ 如样品中杂质干扰严重，可采用双向展开。
※ 层析硅胶可加入热盐酸 (1:4)处理，使得斑点集中，且黄曲霉毒素 B1荧光不易消失。
70
三、高效液相色谱法原理,黄曲霉毒素经衍生后得到能产生强荧光的物质，可用荧光检测器进行检测衍生的方法,柱前三氟乙酸（ TFA）衍生，柱后碘衍生和柱后过溴化溴化吡啶（ PBPB）衍生分析方法,
标准溶液的配制：
黄曲霉毒素衍生标样的配制：
样品提取、净化,
衍生物的制备,
色谱条件 （甲醇 -水的磷酸缓冲体系）
※ 本法 灵敏度为 0.2μg /kg
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四、荧光分析法黄曲霉毒素 B1 α -香豆素钠盐
（荧光） （无荧光）
激发波长 360nm，发射波长 450nm
五、免疫化学分析法酶连免疫法（ ELISA）
NaOH
HCl
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第四节 农药残留量的检查常用农药
– 有机氯类,艾氏剂、六六六等
– 有机磷类,三硫磷,氯硫磷、等
– 苯氧羧酸类除草剂,2,4-D； 2,4,5-T
– 氨基甲酸酯类：西维因（甲萘威）
– 二硫代氨基甲酸酯类：福美铁、代森锰等
– 无机农药：磷化铝、砷酸钙、砷酸铅
– 植物性农药：烟叶和尼古丁；除虫菊花提取物和除虫菊酯
（合成除虫菊酯）；毒鱼藤根和鱼藤根
– 其他：溴螨酯、氯化苦、二溴乙烷、环氧乙烷、溴甲烷。
73
农药残留量的测定供试品的制备,
残留农药的提取提取溶剂：乙腈、丙酮提取方法：索氏提取法和振荡提取法样品纯化 — 液 -液分配 +柱层析分离检测方法 — 色谱分离法
74
农药残留量的测定
– 检测方法薄层色谱法气相色谱法和液相色谱法吸附剂 展开剂 显色剂有机氯农药 硅胶 G、氧化铝、
硅胶 GF254
己烷、庚烷等 硝酸银显色剂、芳胺类显色剂、
荧光显色剂有机磷农药 硅胶 G、氧化铝、
硅藻土、纤维素粉、聚酰胺丙酮、氯仿、
乙腈、环己烷等刚果红,4-（对硝基苄基）吡啶（ NBP）、四溴苯酚磺酞乙酯 -硝酸银 -柠檬酸、硝酸银 -
溴酚蓝以及薄层 -酶抑制法
75
农药残留量的测定
– 有机氯农药残留量检查
– 色谱条件与系统适用性试验弹性 石英毛细管柱 SE-54(或 DB-1701),电子捕获检测器,进样口温度,230℃,检测器温度,300℃,不分流进样，程序升温
– 对照品储备液六六六（ BHC） [α -,β -,γ -,δ -BHC]，滴滴涕（ DDT） [PP’-DDE，
-DDD,-DDT,OP’-DDT]及五氯硝基苯（ PCNB） +石油醚（ 60-90℃ ）分别制成每 1ml约含 4-5μg的溶液
– 混合对照品储备液的制备对照品储备液 0.5ml →10ml
– 混合对照品溶液的制备取混合对照品储备液制成每 1L含 0μg,1μg,5μg,10μg,50μg、
100μg,500μg浓度系列。
76
有机氯农药残留量检查供试品溶液制备供试品研细，称取适量（相当于药材 2g），置 100ml具塞锥形瓶中，
+水 20ml浸泡过夜,+丙酮 40ml，称定，超声处理 30min，放冷，用丙酮补足减失的重量,+氯化钠约 6g及 二氯甲烷 30ml，称定，超声处理 15min，用二氯甲烷补足减失的重量，静置使分层，将有机相迅速移入装有适量 无水硫酸钠 的 100ml具塞锥形瓶中，放置 4小时。精密量取 35ml，于 40℃ 水浴减压浓缩至近干，加少量石油醚（ 60～
90℃ ）如前反复操作至 二氯甲烷及丙酮除净,用石油醚（ 60-90℃ ）
溶解并转移至 10ml具塞刻度离心管中，加石油醚（ 60～ 90℃ ）至
5ml。 +硫酸 1ml，振摇 1分钟，离心（ 3000转 /分） 10分钟。精密量取上清液 2ml置具刻度的浓缩瓶，连接旋转蒸发器,40℃ （或用氮气）将溶液 浓缩 至适量，精密稀释至 1ml,即得。
测定
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有机磷农药残留量检查色谱条件与系统适用性试验 ——弹性石英毛细管柱 DB-
17MS(或 HP-5)、氮磷检测器，进样口温度,230℃,检测器温度,300℃,不分流进样，程序升温对照品储备液 ——对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、
甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷,+用乙酸乙酯，制成每 1ml约含 100μg的溶液混合对照品储备液的制备 ——对照品储备液 1ml →20ml
混合对照品溶液的制备 ——取混合对照品储备液制成每 1ml
含 0.1μg,0.5μg,1μg,2μg,5μg浓度系列。
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有机磷农药残留量检查供试品溶液制备供试品研细，称取适量（相当于药材 5g）,+无水硫酸钠 5g,+乙酸乙酯 50-100ml，冰浴超声处理
3min，放臵，取上层液滤过，药渣加 乙酸乙酯 30-
50ml，冰浴超声处理 3min，放臵，滤过，合并滤液,40℃ 减压浓缩至干,+乙酸乙酯 5ml，使溶解。
精密量取 1ml，加到 活性炭小柱 （ 120-400目，
0.25g），臵多功能真空样品处理器上，用正己烷 -
乙酸乙酯（ 1:1） 5ml洗脱 。洗脱液臵氮吹仪上浓缩至近干。 +乙酸乙酯 1ml，溶解。 测定
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有机磷农药残留量检查
1-敌敌畏 2-速灭磷
3-久效磷 4-甲拌磷
5-巴胺磷 6-二嗪农
7-乙嘧硫磷
8-甲基嘧啶硫磷
9-甲基对硫磷
10-稻瘟净 11-水胺硫磷
12-氧化喹硫磷
13-稻丰散 14-甲喹硫磷
15-克线磷 16-乙硫磷十六种有机磷农药的气相色谱图
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第五节 二氧化硫残留量测定法一、蒸馏滴定法 中国药典方法
A 100ml两颈圆底烧瓶；
B为回流冷凝管；
C为带刻度分液漏斗；
D为连接氮气流入口；
E为二氧化硫气体导出口，另配磁力搅拌器及电加热套。
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测定法,取药材细粉约 10g,精密称定,臵两颈圆底烧瓶中，加水 300～ 400ml，和 6mol/L盐酸溶液 10ml，
连接刻度分液漏斗，并导入氮气至瓶底，连接回流冷凝管，在冷凝管的上端 E口处连接导气管，将 导气管插入 250ml锥形瓶底部。锥形瓶内加水 125mL和 淀粉 指示液 1ml作为吸收液，臵于磁力搅拌器上不断搅拌。
加热烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸约 3分钟后用 碘滴定液 （ 0.01mol/L）滴定，至蓝色或蓝紫色保持 20
秒钟不褪，并将滴定的结果用 空白试验 校正。
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W
CBAgmg 10 0003 2.0)()/量（供试品中二氧化硫残留
A 供试品消耗碘滴定液的体积 ml；
B 空白消耗碘滴定液的体积 ml；
C 碘滴定液浓度,0.01mol/L；
W 供试品的重量,g；
0.032为每 1mL碘滴定液（ 1mol/L）相当的二氧化硫的质量,g。
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二、四氯汞钠－副玫瑰苯胺比色法利用样品中的 亚硫酸盐 与 四氯汞钠 反应生成稳定的络合物，再与 甲醛 及 盐酸副玫瑰苯胺 作用生成紫色络合物，在分光光度计上与标准系列比较定量。
85END
