第三章商品农药的一般分析方法
商品农药由于主要只分析有效成分，被分析的对象化学结构清楚，而且在出厂前已经有了标准的分析方法，并且多为定量分析。相对而言简单易行。
一般分析方法如下：
电位滴定法，极谱分析法
分光光度法（红外、紫外和可见光分析）
气相色谱法
液相色谱法等电位滴定法电位滴定法原理,通过对被测溶液电极电位滴定，确定滴定终点，从而达到容量分析的目的
参比电极,电位不随浓度变化。
指示电极：电位随浓度变化。
滴定终点前后被测物浓度的微小变化引起电极电位急剧变化，突跃点为终点
仪器与试剂
仪器,酸度剂（ pH剂）或自动电位滴定仪。
2mV或 0.02pH精确玻璃电极，甘汞电极及双盐桥甘汞、银、铂、锌、钨离子选择电极。
电磁搅拌器、滴定管
被测样品反应的标准溶液分析步骤方法：称取待测样品（准确到 0.2mg），
溶于适当溶剂，插入电极，开动搅拌器，
进行滴定。
过程：先加入 90%的标准溶液，测电位或 pH次，然后每加 1mL测一次电位或 pH,
接近终点前后每加 0.1mL测一次电位或
pH 。一直滴到电位或 pH改变不大为止。
然后按作图法确定终点，进行计算。
终点确定与绘图计算
终点确定：以滴定液的体积为横坐标,pH（或者电位）为纵坐标，作滴定曲线。作与纵坐标成 45° 角的两平行切线切滴定曲线。二切线的平行等分线与曲线交点，
为滴定终点。
pH
V
二级微商法计算滴定终点
依滴定体积与电位（ pH）变化计算 △ V和 △ E
（ △ pH）
两相邻体积之差为 △ V，两相邻电位之差为 △ E
（ △ pH）。 △ E△ pH和 △ V的比值 △ E/△ V为一级微商。
两相邻一级微商之差为二级微商，即
△ 2E/△ V2= （ △ E/△ V ） 2 — （ △ E/△ V） 1
一级微商最大，二级微商为 0处为滴定终点。
E/v ΔE V/mL ΔV （ ΔE/ΔV ） （ Δ2E/ΔV2 ）
E1
E2
E3
E4
E5
E6
V1
V2
V3
V4
V5
V6
A1
A2
A3
A4
A5
B1
B2
B3
B4
B5
A1/B1
A2/B2
A3/B3
A4/B4
A5/B5
C1
C2
C3
C4
二级微商的计算公式
V0=V+[a/（ a-b） ]△ V
其中 V0 为终点时标准溶液的体积
a是二级微商为 0之前的二级微商
B是二级微商为 0之后的二级微商
△ V是 a与 b之间的 △ V（ mL）
V是在 a时所用标准溶液的体积
其中 ΔEn= An＋ 1 - An,单位为 mV
ΔVn= Bn＋ 1 - Bn,单位为 mL
（ Δ 2E/Δ V2 ） =
[（ ΔE n＋ 1 /ΔV n＋ 1 ） - （ ΔE n/ΔV n ） ]
平均体积作图法
也可以用 △ E/△ V对平均体积 V*作图
其中第 n次测量的平均体积 V*=总体积 / n
所得图形有一极大值为终点
或 △ 2E/△ V2对体积作图，与横坐标交点为终点。
V
E
V
*
V
E
V
2
2
电位滴定法分析敌百虫含量实例
分析原理：敌百虫在碱性条件下会分解出氯化钠。
用硝酸银溶液滴定生成的氯化钠，一分子硝酸银相当于一分子敌百虫。
P
O Cl
Cl
Cl
O H
O
OCH
3
CH 3
P
O Cl
Cl
O
OCH
3
CH 3
Na 2 CO 3 N a C l+
极谱分析法
极谱分析法创建于 1922年，现在已经形成了一系列的近代极谱方法与技术。
极谱分析是以小面积工作电极与参比电极组成电解池，电解被分析物质的稀溶液，根据所得的电流 /电压曲线来进行分析。
被分析物质满足的条件,
凡在滴汞电极上可以氧化或还原的物质均可进行分析，分析浓度范围 10-2-10-5
mol/L。
极谱的分类
常见极谱技术有如下类别：
交流极谱、示波极谱、方波极谱、脉冲极谱、阳极溶出极谱、催化极谱、薄层极谱等。
催化极谱的灵敏度可以提高到 10-9-10-11
mol/L
薄层极谱适合于多杂质农药分析。
极谱分析的工作原理
基本原理：滴汞电极中的汞以每秒 0.2-0.3滴速度从毛细管滴入电解池（烧杯），甘汞为阳极，滴汞为阴极，通过灵敏检流计从 0电压向负电压递增，记下电压与电流数值，以电压为横坐标，以电流为纵坐标作图。当负电压较小时被测物没有电解，此时电流称残余电流；
当负电压继续增加到某一值时，电流值会发生突跃，
此时被分析物质开始分解，当电流增加至一极限电流时：
极限电流 -残余留电流 =极限扩散电流，
极限扩散电流与被分析物浓度成正比，是定量分析的基础。
左图：圆圈表示电流计；不规则圈表示电压计；
右图； I表示电流,V表示电压,A表示极限电流,B(A-C)表极限扩散电流,C表示残余电流,D表示半波电位。
极谱分析装置与电流电压图参比电极 SCE 滴汞电极 DME V
A
B
C
D
I
扩散电流与半波电位
扩散电流 =1/2极限电流时的电位称半波电位，半波电位是被分析物质的特性，不随浓度变化，是定性分析基础。
扩散电流：在电解池中支持电解的作用下，滴汞电极加上的电压等于被测物质的还原电势时，处在滴汞表面可还原或氧化的物质就开始氧化或还原反应。
滴汞表面小，电流密度大,电解物质很快在表面降低浓度,溶液静止,电解靠扩散维持。
扩散与液体本体浓度维持平衡时电流维持不变。
扩散速度与离子浓度的关系
ilkovic公式
id=706n D 1/2m2/3t1/6C
id:扩散电流；
n 被还原离子的价数；
D：被还原离子的扩散系数 ;
C：被还原离子浓度；
m：汞流浓度 mg/s;
t:滴汞周期。
对给定物质，相同毛细管汞电极，同一电解质溶液则 n,D,m,t合并为一常数：
id=kc
干扰电流
除扩散电流外其他原因引起的电流称 干扰电流,干扰电流 干扰测定。
干扰电流主要有：
迁移电流
残余电流
极大现象
氧波迁移 电流及其消除方法
迁移电流,在电极静电作用下，离子迁移至电极表面而产生，不与离子浓度成正比。
消除方法：加入大量电解质，使阴阳离子互相作用，将电极对离子作用降为 0，从而达到清除目的。
加入电解质称支持电解质。其浓度为被测物
80-100倍，分解电压应比被测物高 0.2V以上。
常用支持电解质为 NaCl,KNO3,KCl、
NH4Cl,LiCl,Me4NBr等。
极大现象及其 消除方法
极大现象,正常极谱波出现的峰形电流（极谱极大）,影响半波电位与扩散电流测量。
消除方法：加入 0.03%以下的抑制剂。
抑制剂种类：动物胶、聚乙烯醇，非离子型表面活性剂。（有机极大比无机少）
注意：农药本身多含表面活性剂，多加会降低 id。
残余电流,微量杂质引起，对高灵敏极谱测定干扰大。
仪器清除残留不理想，可以用作图法扣除。
氧波干扰及其消除方法
氧波干扰,溶剂中溶解氧而产生。氧在滴汞电极上还原产生两个波。
第一波,O2 + 2H+ + 2e = H2O2
半波电位 E1/2 =-0.2V
第二波,H2O2 + 2H+ + 2e = 2H2O
半波电位 E1/2 =-0.8V
消除方法：溶剂中通过 N2 或 H210— 15min可消除。
碱性溶液中可加适量 NaHSO3 除 O2。
电解池溶剂选择与影响因素
无机物用水做溶剂，有机物用水或有机溶剂或混合物。
有机物不利于被测物扩散，在保证样品可溶前提下尽量少用。
有机溶剂的要求：极性强，与水互溶，如,
DMSO,DMF,EtOH,Me2CO
pH值的影响,pH值影响大，不同被测物质需不同 pH
值。
例：五氯硝基苯在 pH =6有两个不规则极 谱波；
pH=2.2一个极 谱波；
甲基对硫磷与杂质硝机酚 pH〈 7时互相干扰,pH=8.1
可分别测定。
温度对扩散有影响，每增加 1℃,id 增加 1.3%。故应与标样在相同温度下做测定。
定量分析方法
一般测量极谱波图中扩散电流，对照标准样品求浓度。
波高测量方法：
有延长线法，三切线法，中点法，平行线法
导数极谱曲线法等。
Id
Id
Id
被测物含量计算
含量计算可以用直接比较法。
用标准样测波高 h标,试样测波高 h试
试样含量 = h试 m标 /m试 h标
极谱方法分析实例,甲基对硫磷含量分析
标准样品测定：
称取标准样品 0.1-0.15g于 50mL容量瓶中，用无水乙醇定容。移取 2mL 此溶液于 50mL容量瓶中依次准确加入无水乙醇 20mL 缓冲溶液（ PH=8.3）
15mL； 0.1%聚乙烯醇 5mL，水定容。倾注适当该溶液于电解槽中，通 N2（ H2） 10min 然后从 -0.4V
至 -1.0绘制极谱曲线，用切线法求标样波高试样含量测定
称取样品 0.12-0.17g （如样品中有晶体,55℃ 水浴溶解，摇均匀后再取样称量）,操作同标准样品的操作。
测得波高后按上式计算含量
工作曲线法：
对于大量样品的分析，
可以用一系列浓度的标准样品，
绘制浓度 — 波高工作曲线。
对于任一样品，在相同条件下测得波高后可以在工作曲线上求得样品的浓度。
H
C
可见 — 紫外光分光光度法
分光光度法即光电比色分析法，对于部分样品的分析具有仪器设备简单、方便可靠的特点。
紫外光（ uv）波长为 10-380nm 一般分析用
200-380nm，低于 200 nm属于真空紫外。
可见光波长为 380-760nm。
原理：物质受电磁辐射，吸收能量，发生跃迁。
能量吸收分为三类：旋转、振动、电子跃迁。
在可见 — 紫外照射下，只有 N,O,S,X外层孤电子对（ n电子）和 π电子发生跃迁物质结构与吸收波长的关系
生色基：含 π电子的基团：烯烃、芳香环等
助色基：饱和的含孤电子对（称 n电子）的基团。
两者相连，发生 p-π(n-π)共轭，改变吸收波长（向长波方向移动称红移）产生颜色。
如果助色基与生色基不共轭，吸收重复加和（即不改变吸收波长，只改变吸收强度）苯环上有取代基产生强度和红移的双重作用。
对位取代苯环发生红移，间位取代只增加吸收强度，
红移不明显；金属螯合物可能增加红移。
离子与配体之间氧化 — 还原反应决定其颜色深浅。
经过化学反应，可以使被测物吸收波长落有显色范围。
溶剂影响与朗伯 — 比耳定律
溶剂的作用：应该在设定波长下无明显吸收。
许多有机溶剂对紫外有吸收，而水对紫外吸收最小，用紫外测定时应考虑溶剂的吸收
公式,
吸光度 A=lgI0/I = acL = lg（ 1/T）
T为透光率,L为吸收池厚度,C为浓度
I0为入射光强度,I透射光强度,a为吸光系数
上述公式只适用于稀溶液 。
光谱波长检测
KMnO4溶液检测法（传统方法）,
取 2mL 0.1mol/LKMnO4溶液稀释到 100mL
(2× 10-3mol/L),于 1cm比色皿中,以水为空白,
在 460,480,500,515,520……,550，
570nm测吸光度，并绘制 A— λ吸收曲线，其
Amax=525nm.如 Amax=525± 10nm属正常，否则应调整刻度盘。
现在有自动扫描装置进行扫描，自动绘制出吸收曲线，由此确定最大吸收峰。
波长的选择
选择合适波长，取最大吸收波长可以减少杂质，
溶剂的干扰及仪器夹缝宽度，波长变化对测定的影响。
方法：绘制 A— λ吸光度曲线，取最大值。或用 lgA
对波长作图。溶剂往往改变图形；还与仪器性能，
单色分辨率，放大增益，记录器惯量有关现在的一起一般可以自动绘制 A— λ或 T— λ曲线 。
注意：物质经纯化或不纯化直接测。物质本身有适合波长，杂质不干扰 — 直接测；物质本身有适合波长，杂质干扰 — 纯化后测。
物质本身无适合波长或不易纯化 — 用化学反应，
使其转化成符合条件的样品进行测量：
如水解，氧化 — 还原，加显色剂等。
溶剂选择与浓度确定
农药分析多用有机溶剂。要求农药在溶剂中可溶，在测定波长范围内无明显吸收；
确定浓度范围吸光度范围，吸光度 A在
0.190— 0.700之间测定误差较小。
另外浓度变化可能会使被测组分存在形式发生变化等致偏离郎伯 — 比尔定律。
用标准溶液确定有效浓度范围。用控制浓度或改变比色皿厚度方法来调节范围。
紫外分光光度法测杀虫螟松含量
95%乙醇作溶剂，杀螟松在 268nm有最大吸收；而在 CHCl3中，杀螟松在 270nm有最大吸收。用紫外分光光度法在 10— 20mg/mL范围内可以测定。
称取 1g样品，于 50mL容量瓶中，用正己烷 —
CHCl3 定溶。 400× 8mm色谱柱,8g纯化硅胶填充；
5mL样品溶液加入柱内，用 70mL正己烷 — CHCl3洗脱。洗脱速度为 0.5mL/min；再用 50mLCHCl3洗；
弃出开始流出的 70mL洗脱液，收集后流出的 50mL
洗脱液，取洗脱液 2mL，于 100mL容量瓶中 CHCl3
定溶。在 271nm测吸光度，绘制标准曲线。然后一标准曲线测定样品浓度。
可见光分光光度法农药一般无色，需要显色。如杀灭威和速灭威同时存在下测定速灭威，其碱性水解物分别在 295nm和 292nm有极大吸收，故二者互相干扰。如把速灭威在水解后制成偶氮化合物，
在 495nm最大吸收。而杀灭威无此反应。
CH 3
CH 3
O
O
N H
C H 3
CH 3
CH 3
O H
N 2 +
OH 3
+
CH 3 O
O
N H
C H 3
CH 3
O H
N 2 +
N
N
CH 3
O HOH 3
+
不形成偶氮化合物速灭威杀灭威主要的显色反应
显色反应主要有三类：偶氮反应，对位无取代的活化苯环，如酚,苯胺。
可以水解出酚,苯胺的农药大多可以用此法，如：西维因,百克威,叶蝉散,萎锈灵。
O H
N 2 +
N
N O H
O H
N 2 +
N
N O H
O
O
N H
C H 3
C H 3CH 3
O
O
N H
C H 3
O
O
N H
C H 3
CH 3
C H 3
C H 3
N H
O
O
S
CH 3
不直接发生偶连反应的化合物
苯环上硝基的化合不偶连，如：对硫磷、乐散松、
甲基对硫磷（但是可以水解后用 Zn +HCl还原成胺再偶连） 。
对硫磷 乐散松 甲基对硫磷苯硫磷 杀螟松 氯硫磷
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
Et
Et
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
O
N
+
O
-
O
P
S
O Et
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
Cl
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
形成 π络合物 — 使用于有机磷农药
经一系列化学反应，生成 π络合物显色的化合物有：
有机磷 转化成 H3PO4,再转化成磷钼杂多酸或磷钼蓝
特点：不需标准品，但需提纯净化，一切有机磷均干扰测定。例如 40%稻瘟净乳油用薄层分离。硝酸氧化，高氮酸分解成 H3PO4,在强酸性条件下与偏钒酸铵和钼酸铵生成杂多酸
H3(PMo3O10)4 在 420nm测定。该反应也可用浓
H2SO4代替 HClO4，可 HClO4比 H2SO4反应快。
有机磷农药分析实例
0.37g～ 0.45g样品于 250mL锥型瓶中，缓缓加入 10mL浓 HNO3及 5mL70% HClO4。缓热至
NO2气体消失。要使有机物全部分解后加入
HClO4,否则爆炸。说法不一，小心为上！
（四川农科院报道）
磷钼酸亦可用 SnCl2还原成磷钼蓝。在 735nm
比色。
形成铜盐络合物比色分析
形成铜盐络合物
亚胺硫磷
马拉硫鳞
,
O
O
N
S P
S
O
O
Et
Et
Cu
2+
420 nm
Cu
2+
420 nmS
P
S
O
O
C H 3
C H 3O
O
O
O
CH 3
CH 3
形成根或离子进行比色分析
联吡啶农药如百草枯、杀草快，在碱性介质中被
Na2S2O4还原形成稳定兰色游离基分别在 600nm和
377nm有最大吸收。
能水解出硝基酚的形成离子在 400nm处可测定 。
N + N + C H 3CH 3 Br -Br
- Na 2 S 2 O 4
ON
+
O -
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
O HN
+
O -
O
硝基酚分光光度法示例
对硫磷水解比色法
原理,
试剂,仪器（略）
实验过程：
对硝基酚标准吸收光度工作曲线绘制。
称取 0.1g对硝基酚纯品于 1000mL容量瓶中，用甲醇稀释定容。取此溶液 1,2,3,4,5,6mL分别置于 6个 100mL的容量瓶中。用 1mol/L KOH的 50%
的甲醇溶液 2mL。蒸馏水定容。以蒸馏水为空白，
在 420nm比色。 A为纵坐标,C为横坐标作吸光度曲线。（ 6ppm以下符合比尔定律）
ON +
O -
O
P
S
O
O
Et
Et
OH -
O HN +
O -
O
样品的测定
取 1g待测样甲醇溶解后转移至于 50mL容量瓶中，
甲醇定容。干燥滤纸滤入 100mL锥形瓶。取滤液
1mL于直径 3cm试管中，加 1mol/L的 NaOH 溶液
2mL，沸水浴水解 20min。水解液转移到 100mL容量瓶中，蒸馏水定容后测吸光度 A总
另取滤液 5mL于 50mL容量瓶中，加入 10mL甲醇，
10mLPH=10的缓冲溶液。蒸馏水定容后测 A游
计算：由 A总,A游 在标准曲线上查出 C总,C游偶氮比色法分析实例
测定内容：巴沙含量的测定
样品剂型：乳油
测定原理：巴沙有效成分为氨基甲酸酯，碱性水解出 2-叔丁基苯酚。 2-叔丁基苯酚与对硝基苯重氮二氟硼酸盐反应生成偶氮化合物，
用分光光度法比色分析。
O
O
N H
C H 3
C H 3
C H 3
C H 3
OH 2
OH -
O H
C H 3
C H 3
C H 3
+ CH 3 N H 2
O H
C H 3
C H 3
C H 3
N
+
NO 2 N
O H
CH 3
C H 3
C H 3
N
NO 2 N
分析步骤
标准溶液的制备与测定
准确称取 0.1g巴沙,20mL甲醇在烧杯中溶解，
转移至 100mL容量瓶中甲醇定容。移取 1mL
此液于 50mL容量瓶中，甲醇定容
（ C=2ug/mL） 为标准溶液。
移取 2mL标准溶液入 25mL三角瓶中，加入
3mL甲醇,0.8mLKOH(0.1mol/l),50℃ 恒温水浴 60min水解，冷至室温。
加 0.03%对硝基苯重氮二氟硼酸盐的甲醇溶液,30min后转移至 25mL容量瓶甲醇定容，
摇均匀，试剂空白对照,510nm测吸光度。
样品的制备与测定
称取巴沙样品（约含纯品 0.1g）,于 100mL
容量瓶中甲醇定容，取 1.0mL点板（距底沿
3cm，两边缘 2cm ），冷气流吹干。用少量甲醇外洗移液管尖的巴沙，洗液点于板上，
空气中 15min晾干。用乙酸乙酯 -正己烷展开，
晾干。乙酸乙酯 -正己烷二次展开，溶剂移动 14cm以上，晾干 30min，紫外灯下观察谱带，作计号。用吸收管吸收巴沙谱带硅胶，
置于玻璃垂熔漏斗中用 10mL甲醇 × 4洗脱巴沙，洗脱液于 50mL容量瓶定容。
以下按标准溶液分析操作操作步骤进行巴沙含量计算
巴沙含量 X = m 1A2P× 100%/m2A1
m 1,m2 分别是标样、式样重量
A1A2分别是标样、式样吸光度。
P是标样纯度。
硅胶板制备：
50g HF254 +140mLH2O,均匀涂 6块 20×
20cm的板。
厚度 0.5mm，干燥过夜,110℃ 烘 1hr，
正己烷：乙酸乙酯 =8,2展开。
分解定磷法分析实例
分析内容：稻瘟尽含量测定
分析原理：稻瘟尽属于硫代磷酸酯，用高氯酸氧化成磷酸。磷酸与喹钼柠酮试剂反应，定量生成稳定的、分子量大的喹钼柠酮沉淀，用重量法分析。
S
P
S
O
O C H 3
C H 3
H C lO 4
H 3 PO 4
N
3
P Mo 3 O 10
4
分析步骤
消化：准确称取 0.37-0.45g样品放入 250mL锥形瓶，
缓缓加入 10mL浓 HNO3,5mL70%HClO4,缓缓加热至无 NO2气体放出。然后转入 250mL容量瓶用水定容。
中和：取 50mL上层清液，在 300mL烧杯中用 20%
NaOH中和，酚酞作指示剂，中和至微红。
沉淀：加 10mL 1,1 的 HNO3,加水至 100mL，加入 50mL喹钼柠酮试剂，盖上表面皿，沸水浴 1min，
冷至室温，倾析清液，水洗沉淀 1-2次，过滤，
180℃ 烘 45min，干燥器中放冷，然后称重。
稻瘟净 含量计算
稻瘟净含量 X =（ G1 /G2 ） 0.11749 × 100%
G2为沉淀重,G1为样品重； 0.11749为换算因子。
此反应非特性反应，干扰大。
喹钼柠酮试剂 E的制备：
试剂 A,20g钼酸钠 +150mL水
试剂 B,60g 柠檬酸 +80mLHNO3+150mLH2O
试剂 C,A+B搅拌制成试剂 D,5mL喹啉 +35mLHNO3+100mLH2O
试剂 E,D+C 混合 24hr后过滤，滤液 +280mL丙酮喹钼柠酮沉淀组成：
N
3
P Mo 3 O 10
4
铜盐含量比色法实例
分析内容,马拉硫磷含量测定,
分析原理：铜离子有空轨道，硫原子有易于变形的价层电子，硫原子向铜离子配位，生成螯合物显色。
S
P
S
O
O
C H
3
C H
3
O
O
O
O
CH
3
CH
3
Cu
2+
S
+
P
S
+
O
O
C H
3
C H
3
O
O
O
O
CH
3
CH
3
S
+
P
S
+
O
O
C H
3
CH
3
O
O
O
O
C H
3
C H
3
Cu
2-
分析步骤
薄板分离纯化：称取 0.28— 0.30g样品于 25mL容量瓶中,CHCl3定容,0.5mL样品液点于 GF254板（底、
侧各 2.5cm宽）呈直线状，风干，石油醚 +乙酸乙酯
（ 8,2）展开，上行 14-16cm，挥发至干。
紫外灯下，用大头针圈谱带，吸滤器吸收谱带，用棉球醮乙醇擦空处 2次，合并至吸滤器中，加 10mL
乙醇搅动，盖紧塞子,双链球压液体于容量瓶,重复 3
次，乙醇定容,取 5mL洗脱液加入干燥的分液漏斗中，
加入 5mL乙醇和 2mLmol/L的 KOH-乙醇溶液，摇 10
分钟，静 2min,0.1mol/L,激烈摇 1min，分层后取
CCl4层用 2cm比色皿比色,CCl4空白对照,10min
内测出 A样
用同样方法测标准溶液的 A标马拉硫磷含量 计算
X = (m1 p × 0.05 × 0.05 × A2 × 1000) × 1.041 × 100%
(m 2 × 0.02 × 0.1 × A1 × 1000）
其中 m1 m 2 分别为标样和试样重
A2 A1分别为标样和试样吸光度,
1.041为换算因子
薄板的制备,12g 硅胶 +25mL水,制备 20 × 20 cm板,
r.T.固化,60 ℃ hr,120130 ℃ 1 hr
标准溶液,亚胺硫磷 0.1g+100 mL无水乙醇定容,取 5 mL,用
100 mL无水乙醇定容,O
O
N S P
S
O
O
Et
Et
游离基比色方法实例
分析内容,百草枯含量测定
分析原理：百草枯为联吡啶盐，可以还原成双游离基显色。
标准样品测试
准确称取 0.1728g经 100-120℃ 恒温烘干的样品，
500mL水定容，浓度 0.25mg/mL，现配现用。
分别移取 9.0,10.0,11.0,12.0,13.0mL标准液加入 5个 100mL容量瓶，再加 70mL蒸馏水。取一瓶，
加入 10mL1%连二亚硫酸钠溶液后定容，倒顺反复三次（不激烈摇，防氧化）立刻倒入 1cm比色皿，
永久蓝玻璃参考,600nm光测 A，测定再做第二瓶。
绘制标准曲线
N + N +CH 3 C H 3
Cl - Cl -
N + N +CH 3 C H 3
Cl - Cl -
百草枯样品测定
称取含 1.6-1.8g百草枯的样品于 250mL容量瓶水定容（ A），取该液 10mL，于 250mL容量瓶水定容
（ B）。取 B液 10mL，仿标准品操作,
含量计算
X =m 1× 250 × 250 × 100%/m2 × 10 × 10
× 1000
m 1:依吸光度在标准曲线上查处的重量
M2:样品重量
连二亚硫酸钠溶液保留不超过 3小时 ;有水亦分解,
固体存于真空干燥器中,
其他有色物质的测定
可以水解生成有色物质的农药可以水解后直接比色，
如对硫磷、杀螟松水解生成硝基酚
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
Et
Et
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
ON
+
O
-
O
P
S
O Et ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
Cl
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
自身有色的物质的分析
自身有色的物质也可以直接比色
敌克松
黄棕色溶于水
敌鼠 黄色，溶于丙酮
水解后生成二硫代磷酸的，可以与 Cu2+ 显色后比色
如马拉硫磷
亚胺硫磷
N
CH 3
CH 3
N N SO 3 Na
O
O
C 6 H 5
C 6 H 5
O
P
S
S H
O
OR
R Cu
2+
P
S
SH
O
O
R
R
S P
S
O
O
C H 3
C H 3
O
O
O
O
CH 3
CH 3
其它分析方法
硫逐磷酸类农药可以和二苯酮反应显蓝色
二苯硫酮，兰色
用薄层分离提纯的样品还可以作极谱分析。亦可以用化学方法进行定量分析。
如脂肪卤可以用碱 — 乙醇回流脱卤后分析 X含量。
芳卤型分离后可以用 Na + 戊醇脱卤后分析 X含量。
硅胶板中硅胶含 Cl 0.02% 测定时空白中加入同量硅胶。
P
S
R
O
O
R
R H 5 C 6
C 6 H 5
O
P
O
R
O
O
R
R
H 5 C 6
C 6 H 5
S
溴化（氧化法）分析法
溴化（氧化法）法：含硫农药组分如硫代磷酸酯，取代硫豚，沙蚕毒在一定条件下定量被溴氧化；
水解成酚或苯胺的农药能定量被溴取代。从薄板上洗脱后可以用溴化法进行定量分析，
如果分子中还有可以被溴不定量氧化的基团如醇、酮则不能用此法。故用溴化法分析的展开剂应用烃类（烷烃）
溴化（氧化法）分析实例
如杀虫双、杀虫单和沙蚕毒杀虫双 沙蚕毒 杀虫单
用 KBrO3-KBr/HCl 代 Br2氧化成 H2SO4，剩余溴加 KI
后用 Na2S2O3回滴
S
SO 3 Na
S
SO 3 Na
N
C H 3
CH 3
S
SO 3 Na
S
SO 3 H
N
C H 3
CH 3S
S
N
CH 3
CH 3
中和分析法
含 -CO2H的农药从板上洗脱后可以直接用 NaOH滴定。如 2，
4—— 滴用甲基红作指示剂
2—— 甲 — 4—— 氯，用酚红作指示剂
酯类物质先加过量碱皂化（水解）然后回滴过量碱。如 2，
4—— 滴丁酯。
Cl
Cl
O
C O O H
Cl
C H 3
O
C O O HCl
C H 3
O
O
O
C H 3
铵盐类农药的分析方法
铵盐类可以用回滴法测定，如杀虫脒。
Cl
CH 3
N N
C H 3
C H 3
ClH
碘量分析法
含不饱和烃基的农药或水解后生成－ SH的农药可以用此方法分析，如久效磷,磷胺,甲胺磷,稻瘟净。
商品农药由于主要只分析有效成分，被分析的对象化学结构清楚，而且在出厂前已经有了标准的分析方法，并且多为定量分析。相对而言简单易行。
一般分析方法如下：
电位滴定法，极谱分析法
分光光度法（红外、紫外和可见光分析）
气相色谱法
液相色谱法等电位滴定法电位滴定法原理,通过对被测溶液电极电位滴定，确定滴定终点，从而达到容量分析的目的
参比电极,电位不随浓度变化。
指示电极：电位随浓度变化。
滴定终点前后被测物浓度的微小变化引起电极电位急剧变化，突跃点为终点
仪器与试剂
仪器,酸度剂（ pH剂）或自动电位滴定仪。
2mV或 0.02pH精确玻璃电极，甘汞电极及双盐桥甘汞、银、铂、锌、钨离子选择电极。
电磁搅拌器、滴定管
被测样品反应的标准溶液分析步骤方法：称取待测样品（准确到 0.2mg），
溶于适当溶剂，插入电极，开动搅拌器，
进行滴定。
过程：先加入 90%的标准溶液，测电位或 pH次，然后每加 1mL测一次电位或 pH,
接近终点前后每加 0.1mL测一次电位或
pH 。一直滴到电位或 pH改变不大为止。
然后按作图法确定终点，进行计算。
终点确定与绘图计算
终点确定：以滴定液的体积为横坐标,pH（或者电位）为纵坐标，作滴定曲线。作与纵坐标成 45° 角的两平行切线切滴定曲线。二切线的平行等分线与曲线交点，
为滴定终点。
pH
V
二级微商法计算滴定终点
依滴定体积与电位（ pH）变化计算 △ V和 △ E
（ △ pH）
两相邻体积之差为 △ V，两相邻电位之差为 △ E
（ △ pH）。 △ E△ pH和 △ V的比值 △ E/△ V为一级微商。
两相邻一级微商之差为二级微商，即
△ 2E/△ V2= （ △ E/△ V ） 2 — （ △ E/△ V） 1
一级微商最大，二级微商为 0处为滴定终点。
E/v ΔE V/mL ΔV （ ΔE/ΔV ） （ Δ2E/ΔV2 ）
E1
E2
E3
E4
E5
E6
V1
V2
V3
V4
V5
V6
A1
A2
A3
A4
A5
B1
B2
B3
B4
B5
A1/B1
A2/B2
A3/B3
A4/B4
A5/B5
C1
C2
C3
C4
二级微商的计算公式
V0=V+[a/（ a-b） ]△ V
其中 V0 为终点时标准溶液的体积
a是二级微商为 0之前的二级微商
B是二级微商为 0之后的二级微商
△ V是 a与 b之间的 △ V（ mL）
V是在 a时所用标准溶液的体积
其中 ΔEn= An＋ 1 - An,单位为 mV
ΔVn= Bn＋ 1 - Bn,单位为 mL
（ Δ 2E/Δ V2 ） =
[（ ΔE n＋ 1 /ΔV n＋ 1 ） - （ ΔE n/ΔV n ） ]
平均体积作图法
也可以用 △ E/△ V对平均体积 V*作图
其中第 n次测量的平均体积 V*=总体积 / n
所得图形有一极大值为终点
或 △ 2E/△ V2对体积作图，与横坐标交点为终点。
V
E
V
*
V
E
V
2
2
电位滴定法分析敌百虫含量实例
分析原理：敌百虫在碱性条件下会分解出氯化钠。
用硝酸银溶液滴定生成的氯化钠，一分子硝酸银相当于一分子敌百虫。
P
O Cl
Cl
Cl
O H
O
OCH
3
CH 3
P
O Cl
Cl
O
OCH
3
CH 3
Na 2 CO 3 N a C l+
极谱分析法
极谱分析法创建于 1922年，现在已经形成了一系列的近代极谱方法与技术。
极谱分析是以小面积工作电极与参比电极组成电解池，电解被分析物质的稀溶液，根据所得的电流 /电压曲线来进行分析。
被分析物质满足的条件,
凡在滴汞电极上可以氧化或还原的物质均可进行分析，分析浓度范围 10-2-10-5
mol/L。
极谱的分类
常见极谱技术有如下类别：
交流极谱、示波极谱、方波极谱、脉冲极谱、阳极溶出极谱、催化极谱、薄层极谱等。
催化极谱的灵敏度可以提高到 10-9-10-11
mol/L
薄层极谱适合于多杂质农药分析。
极谱分析的工作原理
基本原理：滴汞电极中的汞以每秒 0.2-0.3滴速度从毛细管滴入电解池（烧杯），甘汞为阳极，滴汞为阴极，通过灵敏检流计从 0电压向负电压递增，记下电压与电流数值，以电压为横坐标，以电流为纵坐标作图。当负电压较小时被测物没有电解，此时电流称残余电流；
当负电压继续增加到某一值时，电流值会发生突跃，
此时被分析物质开始分解，当电流增加至一极限电流时：
极限电流 -残余留电流 =极限扩散电流，
极限扩散电流与被分析物浓度成正比，是定量分析的基础。
左图：圆圈表示电流计；不规则圈表示电压计；
右图； I表示电流,V表示电压,A表示极限电流,B(A-C)表极限扩散电流,C表示残余电流,D表示半波电位。
极谱分析装置与电流电压图参比电极 SCE 滴汞电极 DME V
A
B
C
D
I
扩散电流与半波电位
扩散电流 =1/2极限电流时的电位称半波电位，半波电位是被分析物质的特性，不随浓度变化，是定性分析基础。
扩散电流：在电解池中支持电解的作用下，滴汞电极加上的电压等于被测物质的还原电势时，处在滴汞表面可还原或氧化的物质就开始氧化或还原反应。
滴汞表面小，电流密度大,电解物质很快在表面降低浓度,溶液静止,电解靠扩散维持。
扩散与液体本体浓度维持平衡时电流维持不变。
扩散速度与离子浓度的关系
ilkovic公式
id=706n D 1/2m2/3t1/6C
id:扩散电流；
n 被还原离子的价数；
D：被还原离子的扩散系数 ;
C：被还原离子浓度；
m：汞流浓度 mg/s;
t:滴汞周期。
对给定物质，相同毛细管汞电极，同一电解质溶液则 n,D,m,t合并为一常数：
id=kc
干扰电流
除扩散电流外其他原因引起的电流称 干扰电流,干扰电流 干扰测定。
干扰电流主要有：
迁移电流
残余电流
极大现象
氧波迁移 电流及其消除方法
迁移电流,在电极静电作用下，离子迁移至电极表面而产生，不与离子浓度成正比。
消除方法：加入大量电解质，使阴阳离子互相作用，将电极对离子作用降为 0，从而达到清除目的。
加入电解质称支持电解质。其浓度为被测物
80-100倍，分解电压应比被测物高 0.2V以上。
常用支持电解质为 NaCl,KNO3,KCl、
NH4Cl,LiCl,Me4NBr等。
极大现象及其 消除方法
极大现象,正常极谱波出现的峰形电流（极谱极大）,影响半波电位与扩散电流测量。
消除方法：加入 0.03%以下的抑制剂。
抑制剂种类：动物胶、聚乙烯醇，非离子型表面活性剂。（有机极大比无机少）
注意：农药本身多含表面活性剂，多加会降低 id。
残余电流,微量杂质引起，对高灵敏极谱测定干扰大。
仪器清除残留不理想，可以用作图法扣除。
氧波干扰及其消除方法
氧波干扰,溶剂中溶解氧而产生。氧在滴汞电极上还原产生两个波。
第一波,O2 + 2H+ + 2e = H2O2
半波电位 E1/2 =-0.2V
第二波,H2O2 + 2H+ + 2e = 2H2O
半波电位 E1/2 =-0.8V
消除方法：溶剂中通过 N2 或 H210— 15min可消除。
碱性溶液中可加适量 NaHSO3 除 O2。
电解池溶剂选择与影响因素
无机物用水做溶剂，有机物用水或有机溶剂或混合物。
有机物不利于被测物扩散，在保证样品可溶前提下尽量少用。
有机溶剂的要求：极性强，与水互溶，如,
DMSO,DMF,EtOH,Me2CO
pH值的影响,pH值影响大，不同被测物质需不同 pH
值。
例：五氯硝基苯在 pH =6有两个不规则极 谱波；
pH=2.2一个极 谱波；
甲基对硫磷与杂质硝机酚 pH〈 7时互相干扰,pH=8.1
可分别测定。
温度对扩散有影响，每增加 1℃,id 增加 1.3%。故应与标样在相同温度下做测定。
定量分析方法
一般测量极谱波图中扩散电流，对照标准样品求浓度。
波高测量方法：
有延长线法，三切线法，中点法，平行线法
导数极谱曲线法等。
Id
Id
Id
被测物含量计算
含量计算可以用直接比较法。
用标准样测波高 h标,试样测波高 h试
试样含量 = h试 m标 /m试 h标
极谱方法分析实例,甲基对硫磷含量分析
标准样品测定：
称取标准样品 0.1-0.15g于 50mL容量瓶中，用无水乙醇定容。移取 2mL 此溶液于 50mL容量瓶中依次准确加入无水乙醇 20mL 缓冲溶液（ PH=8.3）
15mL； 0.1%聚乙烯醇 5mL，水定容。倾注适当该溶液于电解槽中，通 N2（ H2） 10min 然后从 -0.4V
至 -1.0绘制极谱曲线，用切线法求标样波高试样含量测定
称取样品 0.12-0.17g （如样品中有晶体,55℃ 水浴溶解，摇均匀后再取样称量）,操作同标准样品的操作。
测得波高后按上式计算含量
工作曲线法：
对于大量样品的分析，
可以用一系列浓度的标准样品，
绘制浓度 — 波高工作曲线。
对于任一样品，在相同条件下测得波高后可以在工作曲线上求得样品的浓度。
H
C
可见 — 紫外光分光光度法
分光光度法即光电比色分析法，对于部分样品的分析具有仪器设备简单、方便可靠的特点。
紫外光（ uv）波长为 10-380nm 一般分析用
200-380nm，低于 200 nm属于真空紫外。
可见光波长为 380-760nm。
原理：物质受电磁辐射，吸收能量，发生跃迁。
能量吸收分为三类：旋转、振动、电子跃迁。
在可见 — 紫外照射下，只有 N,O,S,X外层孤电子对（ n电子）和 π电子发生跃迁物质结构与吸收波长的关系
生色基：含 π电子的基团：烯烃、芳香环等
助色基：饱和的含孤电子对（称 n电子）的基团。
两者相连，发生 p-π(n-π)共轭，改变吸收波长（向长波方向移动称红移）产生颜色。
如果助色基与生色基不共轭，吸收重复加和（即不改变吸收波长，只改变吸收强度）苯环上有取代基产生强度和红移的双重作用。
对位取代苯环发生红移，间位取代只增加吸收强度，
红移不明显；金属螯合物可能增加红移。
离子与配体之间氧化 — 还原反应决定其颜色深浅。
经过化学反应，可以使被测物吸收波长落有显色范围。
溶剂影响与朗伯 — 比耳定律
溶剂的作用：应该在设定波长下无明显吸收。
许多有机溶剂对紫外有吸收，而水对紫外吸收最小，用紫外测定时应考虑溶剂的吸收
公式,
吸光度 A=lgI0/I = acL = lg（ 1/T）
T为透光率,L为吸收池厚度,C为浓度
I0为入射光强度,I透射光强度,a为吸光系数
上述公式只适用于稀溶液 。
光谱波长检测
KMnO4溶液检测法（传统方法）,
取 2mL 0.1mol/LKMnO4溶液稀释到 100mL
(2× 10-3mol/L),于 1cm比色皿中,以水为空白,
在 460,480,500,515,520……,550，
570nm测吸光度，并绘制 A— λ吸收曲线，其
Amax=525nm.如 Amax=525± 10nm属正常，否则应调整刻度盘。
现在有自动扫描装置进行扫描，自动绘制出吸收曲线，由此确定最大吸收峰。
波长的选择
选择合适波长，取最大吸收波长可以减少杂质，
溶剂的干扰及仪器夹缝宽度，波长变化对测定的影响。
方法：绘制 A— λ吸光度曲线，取最大值。或用 lgA
对波长作图。溶剂往往改变图形；还与仪器性能，
单色分辨率，放大增益，记录器惯量有关现在的一起一般可以自动绘制 A— λ或 T— λ曲线 。
注意：物质经纯化或不纯化直接测。物质本身有适合波长，杂质不干扰 — 直接测；物质本身有适合波长，杂质干扰 — 纯化后测。
物质本身无适合波长或不易纯化 — 用化学反应，
使其转化成符合条件的样品进行测量：
如水解，氧化 — 还原，加显色剂等。
溶剂选择与浓度确定
农药分析多用有机溶剂。要求农药在溶剂中可溶，在测定波长范围内无明显吸收；
确定浓度范围吸光度范围，吸光度 A在
0.190— 0.700之间测定误差较小。
另外浓度变化可能会使被测组分存在形式发生变化等致偏离郎伯 — 比尔定律。
用标准溶液确定有效浓度范围。用控制浓度或改变比色皿厚度方法来调节范围。
紫外分光光度法测杀虫螟松含量
95%乙醇作溶剂，杀螟松在 268nm有最大吸收；而在 CHCl3中，杀螟松在 270nm有最大吸收。用紫外分光光度法在 10— 20mg/mL范围内可以测定。
称取 1g样品，于 50mL容量瓶中，用正己烷 —
CHCl3 定溶。 400× 8mm色谱柱,8g纯化硅胶填充；
5mL样品溶液加入柱内，用 70mL正己烷 — CHCl3洗脱。洗脱速度为 0.5mL/min；再用 50mLCHCl3洗；
弃出开始流出的 70mL洗脱液，收集后流出的 50mL
洗脱液，取洗脱液 2mL，于 100mL容量瓶中 CHCl3
定溶。在 271nm测吸光度，绘制标准曲线。然后一标准曲线测定样品浓度。
可见光分光光度法农药一般无色，需要显色。如杀灭威和速灭威同时存在下测定速灭威，其碱性水解物分别在 295nm和 292nm有极大吸收，故二者互相干扰。如把速灭威在水解后制成偶氮化合物，
在 495nm最大吸收。而杀灭威无此反应。
CH 3
CH 3
O
O
N H
C H 3
CH 3
CH 3
O H
N 2 +
OH 3
+
CH 3 O
O
N H
C H 3
CH 3
O H
N 2 +
N
N
CH 3
O HOH 3
+
不形成偶氮化合物速灭威杀灭威主要的显色反应
显色反应主要有三类：偶氮反应，对位无取代的活化苯环，如酚,苯胺。
可以水解出酚,苯胺的农药大多可以用此法，如：西维因,百克威,叶蝉散,萎锈灵。
O H
N 2 +
N
N O H
O H
N 2 +
N
N O H
O
O
N H
C H 3
C H 3CH 3
O
O
N H
C H 3
O
O
N H
C H 3
CH 3
C H 3
C H 3
N H
O
O
S
CH 3
不直接发生偶连反应的化合物
苯环上硝基的化合不偶连，如：对硫磷、乐散松、
甲基对硫磷（但是可以水解后用 Zn +HCl还原成胺再偶连） 。
对硫磷 乐散松 甲基对硫磷苯硫磷 杀螟松 氯硫磷
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
Et
Et
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
O
N
+
O
-
O
P
S
O Et
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
Cl
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
形成 π络合物 — 使用于有机磷农药
经一系列化学反应，生成 π络合物显色的化合物有：
有机磷 转化成 H3PO4,再转化成磷钼杂多酸或磷钼蓝
特点：不需标准品，但需提纯净化，一切有机磷均干扰测定。例如 40%稻瘟净乳油用薄层分离。硝酸氧化，高氮酸分解成 H3PO4,在强酸性条件下与偏钒酸铵和钼酸铵生成杂多酸
H3(PMo3O10)4 在 420nm测定。该反应也可用浓
H2SO4代替 HClO4，可 HClO4比 H2SO4反应快。
有机磷农药分析实例
0.37g～ 0.45g样品于 250mL锥型瓶中，缓缓加入 10mL浓 HNO3及 5mL70% HClO4。缓热至
NO2气体消失。要使有机物全部分解后加入
HClO4,否则爆炸。说法不一，小心为上！
（四川农科院报道）
磷钼酸亦可用 SnCl2还原成磷钼蓝。在 735nm
比色。
形成铜盐络合物比色分析
形成铜盐络合物
亚胺硫磷
马拉硫鳞
,
O
O
N
S P
S
O
O
Et
Et
Cu
2+
420 nm
Cu
2+
420 nmS
P
S
O
O
C H 3
C H 3O
O
O
O
CH 3
CH 3
形成根或离子进行比色分析
联吡啶农药如百草枯、杀草快，在碱性介质中被
Na2S2O4还原形成稳定兰色游离基分别在 600nm和
377nm有最大吸收。
能水解出硝基酚的形成离子在 400nm处可测定 。
N + N + C H 3CH 3 Br -Br
- Na 2 S 2 O 4
ON
+
O -
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
O HN
+
O -
O
硝基酚分光光度法示例
对硫磷水解比色法
原理,
试剂,仪器（略）
实验过程：
对硝基酚标准吸收光度工作曲线绘制。
称取 0.1g对硝基酚纯品于 1000mL容量瓶中，用甲醇稀释定容。取此溶液 1,2,3,4,5,6mL分别置于 6个 100mL的容量瓶中。用 1mol/L KOH的 50%
的甲醇溶液 2mL。蒸馏水定容。以蒸馏水为空白，
在 420nm比色。 A为纵坐标,C为横坐标作吸光度曲线。（ 6ppm以下符合比尔定律）
ON +
O -
O
P
S
O
O
Et
Et
OH -
O HN +
O -
O
样品的测定
取 1g待测样甲醇溶解后转移至于 50mL容量瓶中，
甲醇定容。干燥滤纸滤入 100mL锥形瓶。取滤液
1mL于直径 3cm试管中，加 1mol/L的 NaOH 溶液
2mL，沸水浴水解 20min。水解液转移到 100mL容量瓶中，蒸馏水定容后测吸光度 A总
另取滤液 5mL于 50mL容量瓶中，加入 10mL甲醇，
10mLPH=10的缓冲溶液。蒸馏水定容后测 A游
计算：由 A总,A游 在标准曲线上查出 C总,C游偶氮比色法分析实例
测定内容：巴沙含量的测定
样品剂型：乳油
测定原理：巴沙有效成分为氨基甲酸酯，碱性水解出 2-叔丁基苯酚。 2-叔丁基苯酚与对硝基苯重氮二氟硼酸盐反应生成偶氮化合物，
用分光光度法比色分析。
O
O
N H
C H 3
C H 3
C H 3
C H 3
OH 2
OH -
O H
C H 3
C H 3
C H 3
+ CH 3 N H 2
O H
C H 3
C H 3
C H 3
N
+
NO 2 N
O H
CH 3
C H 3
C H 3
N
NO 2 N
分析步骤
标准溶液的制备与测定
准确称取 0.1g巴沙,20mL甲醇在烧杯中溶解，
转移至 100mL容量瓶中甲醇定容。移取 1mL
此液于 50mL容量瓶中，甲醇定容
（ C=2ug/mL） 为标准溶液。
移取 2mL标准溶液入 25mL三角瓶中，加入
3mL甲醇,0.8mLKOH(0.1mol/l),50℃ 恒温水浴 60min水解，冷至室温。
加 0.03%对硝基苯重氮二氟硼酸盐的甲醇溶液,30min后转移至 25mL容量瓶甲醇定容，
摇均匀，试剂空白对照,510nm测吸光度。
样品的制备与测定
称取巴沙样品（约含纯品 0.1g）,于 100mL
容量瓶中甲醇定容，取 1.0mL点板（距底沿
3cm，两边缘 2cm ），冷气流吹干。用少量甲醇外洗移液管尖的巴沙，洗液点于板上，
空气中 15min晾干。用乙酸乙酯 -正己烷展开，
晾干。乙酸乙酯 -正己烷二次展开，溶剂移动 14cm以上，晾干 30min，紫外灯下观察谱带，作计号。用吸收管吸收巴沙谱带硅胶，
置于玻璃垂熔漏斗中用 10mL甲醇 × 4洗脱巴沙，洗脱液于 50mL容量瓶定容。
以下按标准溶液分析操作操作步骤进行巴沙含量计算
巴沙含量 X = m 1A2P× 100%/m2A1
m 1,m2 分别是标样、式样重量
A1A2分别是标样、式样吸光度。
P是标样纯度。
硅胶板制备：
50g HF254 +140mLH2O,均匀涂 6块 20×
20cm的板。
厚度 0.5mm，干燥过夜,110℃ 烘 1hr，
正己烷：乙酸乙酯 =8,2展开。
分解定磷法分析实例
分析内容：稻瘟尽含量测定
分析原理：稻瘟尽属于硫代磷酸酯，用高氯酸氧化成磷酸。磷酸与喹钼柠酮试剂反应，定量生成稳定的、分子量大的喹钼柠酮沉淀，用重量法分析。
S
P
S
O
O C H 3
C H 3
H C lO 4
H 3 PO 4
N
3
P Mo 3 O 10
4
分析步骤
消化：准确称取 0.37-0.45g样品放入 250mL锥形瓶，
缓缓加入 10mL浓 HNO3,5mL70%HClO4,缓缓加热至无 NO2气体放出。然后转入 250mL容量瓶用水定容。
中和：取 50mL上层清液，在 300mL烧杯中用 20%
NaOH中和，酚酞作指示剂，中和至微红。
沉淀：加 10mL 1,1 的 HNO3,加水至 100mL，加入 50mL喹钼柠酮试剂，盖上表面皿，沸水浴 1min，
冷至室温，倾析清液，水洗沉淀 1-2次，过滤，
180℃ 烘 45min，干燥器中放冷，然后称重。
稻瘟净 含量计算
稻瘟净含量 X =（ G1 /G2 ） 0.11749 × 100%
G2为沉淀重,G1为样品重； 0.11749为换算因子。
此反应非特性反应，干扰大。
喹钼柠酮试剂 E的制备：
试剂 A,20g钼酸钠 +150mL水
试剂 B,60g 柠檬酸 +80mLHNO3+150mLH2O
试剂 C,A+B搅拌制成试剂 D,5mL喹啉 +35mLHNO3+100mLH2O
试剂 E,D+C 混合 24hr后过滤，滤液 +280mL丙酮喹钼柠酮沉淀组成：
N
3
P Mo 3 O 10
4
铜盐含量比色法实例
分析内容,马拉硫磷含量测定,
分析原理：铜离子有空轨道，硫原子有易于变形的价层电子，硫原子向铜离子配位，生成螯合物显色。
S
P
S
O
O
C H
3
C H
3
O
O
O
O
CH
3
CH
3
Cu
2+
S
+
P
S
+
O
O
C H
3
C H
3
O
O
O
O
CH
3
CH
3
S
+
P
S
+
O
O
C H
3
CH
3
O
O
O
O
C H
3
C H
3
Cu
2-
分析步骤
薄板分离纯化：称取 0.28— 0.30g样品于 25mL容量瓶中,CHCl3定容,0.5mL样品液点于 GF254板（底、
侧各 2.5cm宽）呈直线状，风干，石油醚 +乙酸乙酯
（ 8,2）展开，上行 14-16cm，挥发至干。
紫外灯下，用大头针圈谱带，吸滤器吸收谱带，用棉球醮乙醇擦空处 2次，合并至吸滤器中，加 10mL
乙醇搅动，盖紧塞子,双链球压液体于容量瓶,重复 3
次，乙醇定容,取 5mL洗脱液加入干燥的分液漏斗中，
加入 5mL乙醇和 2mLmol/L的 KOH-乙醇溶液，摇 10
分钟，静 2min,0.1mol/L,激烈摇 1min，分层后取
CCl4层用 2cm比色皿比色,CCl4空白对照,10min
内测出 A样
用同样方法测标准溶液的 A标马拉硫磷含量 计算
X = (m1 p × 0.05 × 0.05 × A2 × 1000) × 1.041 × 100%
(m 2 × 0.02 × 0.1 × A1 × 1000）
其中 m1 m 2 分别为标样和试样重
A2 A1分别为标样和试样吸光度,
1.041为换算因子
薄板的制备,12g 硅胶 +25mL水,制备 20 × 20 cm板,
r.T.固化,60 ℃ hr,120130 ℃ 1 hr
标准溶液,亚胺硫磷 0.1g+100 mL无水乙醇定容,取 5 mL,用
100 mL无水乙醇定容,O
O
N S P
S
O
O
Et
Et
游离基比色方法实例
分析内容,百草枯含量测定
分析原理：百草枯为联吡啶盐，可以还原成双游离基显色。
标准样品测试
准确称取 0.1728g经 100-120℃ 恒温烘干的样品，
500mL水定容，浓度 0.25mg/mL，现配现用。
分别移取 9.0,10.0,11.0,12.0,13.0mL标准液加入 5个 100mL容量瓶，再加 70mL蒸馏水。取一瓶，
加入 10mL1%连二亚硫酸钠溶液后定容，倒顺反复三次（不激烈摇，防氧化）立刻倒入 1cm比色皿，
永久蓝玻璃参考,600nm光测 A，测定再做第二瓶。
绘制标准曲线
N + N +CH 3 C H 3
Cl - Cl -
N + N +CH 3 C H 3
Cl - Cl -
百草枯样品测定
称取含 1.6-1.8g百草枯的样品于 250mL容量瓶水定容（ A），取该液 10mL，于 250mL容量瓶水定容
（ B）。取 B液 10mL，仿标准品操作,
含量计算
X =m 1× 250 × 250 × 100%/m2 × 10 × 10
× 1000
m 1:依吸光度在标准曲线上查处的重量
M2:样品重量
连二亚硫酸钠溶液保留不超过 3小时 ;有水亦分解,
固体存于真空干燥器中,
其他有色物质的测定
可以水解生成有色物质的农药可以水解后直接比色，
如对硫磷、杀螟松水解生成硝基酚
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
Et
Et
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
ON
+
O
-
O
P
S
O Et ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
Cl
ON
+
O
-
O
P
S
O
O
C H 3
C H 3
C H 3
自身有色的物质的分析
自身有色的物质也可以直接比色
敌克松
黄棕色溶于水
敌鼠 黄色，溶于丙酮
水解后生成二硫代磷酸的，可以与 Cu2+ 显色后比色
如马拉硫磷
亚胺硫磷
N
CH 3
CH 3
N N SO 3 Na
O
O
C 6 H 5
C 6 H 5
O
P
S
S H
O
OR
R Cu
2+
P
S
SH
O
O
R
R
S P
S
O
O
C H 3
C H 3
O
O
O
O
CH 3
CH 3
其它分析方法
硫逐磷酸类农药可以和二苯酮反应显蓝色
二苯硫酮，兰色
用薄层分离提纯的样品还可以作极谱分析。亦可以用化学方法进行定量分析。
如脂肪卤可以用碱 — 乙醇回流脱卤后分析 X含量。
芳卤型分离后可以用 Na + 戊醇脱卤后分析 X含量。
硅胶板中硅胶含 Cl 0.02% 测定时空白中加入同量硅胶。
P
S
R
O
O
R
R H 5 C 6
C 6 H 5
O
P
O
R
O
O
R
R
H 5 C 6
C 6 H 5
S
溴化（氧化法）分析法
溴化（氧化法）法：含硫农药组分如硫代磷酸酯，取代硫豚，沙蚕毒在一定条件下定量被溴氧化；
水解成酚或苯胺的农药能定量被溴取代。从薄板上洗脱后可以用溴化法进行定量分析，
如果分子中还有可以被溴不定量氧化的基团如醇、酮则不能用此法。故用溴化法分析的展开剂应用烃类（烷烃）
溴化（氧化法）分析实例
如杀虫双、杀虫单和沙蚕毒杀虫双 沙蚕毒 杀虫单
用 KBrO3-KBr/HCl 代 Br2氧化成 H2SO4，剩余溴加 KI
后用 Na2S2O3回滴
S
SO 3 Na
S
SO 3 Na
N
C H 3
CH 3
S
SO 3 Na
S
SO 3 H
N
C H 3
CH 3S
S
N
CH 3
CH 3
中和分析法
含 -CO2H的农药从板上洗脱后可以直接用 NaOH滴定。如 2，
4—— 滴用甲基红作指示剂
2—— 甲 — 4—— 氯，用酚红作指示剂
酯类物质先加过量碱皂化（水解）然后回滴过量碱。如 2，
4—— 滴丁酯。
Cl
Cl
O
C O O H
Cl
C H 3
O
C O O HCl
C H 3
O
O
O
C H 3
铵盐类农药的分析方法
铵盐类可以用回滴法测定，如杀虫脒。
Cl
CH 3
N N
C H 3
C H 3
ClH
碘量分析法
含不饱和烃基的农药或水解后生成－ SH的农药可以用此方法分析，如久效磷,磷胺,甲胺磷,稻瘟净。
