第九章
免疫学的临床应用
■ 免疫学诊断
■ 免疫学防治
目的要求
1.掌握 人工自动免疫和人工被动免疫的
概念及特点比较;凝集反应、沉淀反应、
免疫标记技术的概念及常用方法;
2.熟悉 各种抗原、抗体检测方法的原理
及其应用 ;常用细胞免疫的检测方法 ;常用
人工自动免疫和人工被动免疫制剂。
3.了解 其他免疫学检测方法 ;
第一节
免疫学防治
机体特异性免疫力获得方式:
自动免疫
被动免疫
自然自动免疫:患传染病、隐
性感染
自然被动免疫:母体 IgG经胎盘
进入胎儿体内
人工自动免疫, 接种疫苗、
类毒素
人工被动免疫,注射抗毒素、
丙球
一、人工免疫的概念及种类
人为地给机体输入 抗 原 以增强机
体的免疫功能,或直接输入 免疫血清、
细胞免疫制剂 等,使机体获得某种特
异性免疫力,从而达到预防或治疗某些
疾病的方法称为人工免疫。
人工免疫主要包括人工自动免疫、
人工被动免疫和过继免疫三大类。
二、人工自动免疫
(一 )概念:是用人工接种的方法给机
体输入 疫苗、类毒素等抗原 物质,
通过刺激机体产生免疫应答,使机体
获得特异性免疫力的方法。
(二 )特点:免疫力出现慢、维持时间
长,常用于传染病的特异性预防。
(三 )常用人工自动免疫制剂
■ 死疫苗 是用物理或化学方法将病原微生
物杀死后制成的制剂。
■ 活疫苗 是用减毒或无毒的病原微生物制
成的制剂。
■ 类毒素 是用细菌的外毒素经 0.3%~0.4%
甲醛处理后,其毒性消失但保留免疫原性
故称为类毒素。
死疫苗与活疫苗的特点比较
区别要点 死疫苗 活疫苗
制剂特点 强毒株制成 弱毒或无毒株制成
接种方式 多为皮下注射 多模拟自然感染途径
接种剂量次数 量较大,2~3次 量较小,多为 1次
副作用 较大 较小
免疫效果 较差,维持 较好,维持 3~5年
数月 ~数年 或更长
疫苗保存 较易保存 不易保存
■ 亚单位疫苗 应用化学方法提取病原微
生物中有效成分制成的纯化疫苗。
■ 基因工程疫苗或 DNA重组疫苗
新研制的疫苗
■ 合成疫苗 用人工合成多肽抗原连接适
当载体与佐剂制成的疫苗。
(四)计划免疫
1.概念
根据特定传染病的疫情监测和人
群免疫状况分析,按照规定的免疫程
序有计划地进行人群预防接种,以提
高人群免疫水平,控制或消灭相应传
染病。
2.我国儿童计划免疫程序(表)
三、人工被动免疫
(一 )概念:是人为的给机体输入 抗毒
素、免疫血清等免疫效应 物质,使机
体立即获得特异性免疫力的方法。
(二 )特点:免疫力出现 快,维持时间
短,可用于传染病的特异性 治疗 和 紧
急预防 。
(三 )常用人工被动免疫制剂
■ 抗毒素 用细菌类毒素多次给马注射,
待其产生大量抗体后,放血并分离马血清
经提纯后制成的制剂。
■ 胎盘球蛋白 从胎盘血中提取的免疫球
蛋白( IgG)。
■ 血浆丙种球蛋白 从正常人血中提取的
免疫球蛋白( IgG,IgM)。
是指给患者转输具有在体内继
续扩增效应细胞的一种疗法。
四、过继免疫治疗
五、免疫增强剂和免疫抑制剂
1.免疫增强剂
■ 微生物制剂,BCG、短小棒状杆菌、酵母
多糖等。
■ 化学合成药:多聚核苷酸等。
■ 多糖类物质:黄芪、人参、灵芝等提取物。
■ 细胞因子,IL-2,IFN,TNF等。
2.免疫抑制剂
■ 化学合成药:激素、烷化剂等。
■ 真菌代谢产物:环孢素 A,FK-506等。
■ 单克隆抗体:抗 T细胞单抗。
■ 中草药及其有效成分:如雷公藤多甙等。
第二节 免疫学诊断
● 抗原或抗体的检测
● 免疫细胞及其功能检测
一、抗原或抗体的检测
(一 ) 检测的原理
1,已知抗体测抗原(多用于定性)
2.已知抗原测抗体(多用于定量)
(三 ) 影响抗原抗体反应的因素
1.温度,最适温度为 37℃
2.电解质:常用生理盐水
3.pH:最适 pH6~8
3.抗原抗体反应的可见性
2.抗原抗体反应的可逆性
1.抗原抗体反应的特异性
(二 )抗原抗体反应的特点
(四)常见抗原抗体反应的种类
1.凝集反应
类型:
★直接凝集反应
★ 间接凝集反应
★ 间接凝集抑制试验
★ 协同凝集试验
概念:细菌、红细胞等颗粒性抗原与
相应抗体结合后形成凝集团块称凝集反
应。
凝集反应原理图解(一)
凝集反应原理图解(二)
凝集反应原理图解(三)
2.沉淀反应
概念:可溶性抗原与相应抗体结合后出
现沉淀物称沉淀反应。
类型:
★单向免疫扩散
★ 免疫比浊法
★ 双向免疫扩散
★ 对流免疫电泳
单向琼脂扩散试验
双向琼脂扩散试验
对流免疫电泳
测吸光度
计算抗原
或抗体的
含量
抗体 抗原
免疫复合物的
浓度与透射光
的衰减呈正相

免疫比浊法原理
3.中和反应 如抗,O”试验
4.免疫标记技术
概念:用荧光素、酶、同位素等
标记抗体或抗原用以测定相应抗原或
抗体的技术称为免疫标记技术。常用
方法有免疫荧光技术、酶免疫技术、
放射免疫检测技术等。
特点:敏感、特异、快速,能定
性、定量、定位。
★ 免疫印迹法
★ 斑点金结合试验
★ 放射免疫测定法
★ 酶免疫测定法( ELISA)
★ 免疫荧光技术
常用免疫标记技术:
免疫荧光技术
酶联免疫吸附试验 (ELISA-间接法 )
斑点金免疫渗滤试验
A
DC
B
阴性(未怀孕)
阳性(怀孕)
加尿样 除去滤器
加胶体金标记抗体 加洗涤液
结果判定
兔抗鼠 IgG
鼠抗 HCG单抗
金标鼠抗 HCG单抗 尿液浸湿标志线
手持端
斑点金免疫层析试验(一)
斑点金免疫层析试验(二)
尿样
阳性 弱阳性 阴性 无效
质控线
测试线
免疫印迹法图解
SDS裂解
病毒
聚丙酰胺凝胶电泳
- +
95 68 45 12KD
电转印至 NC膜上
置待测血清中,漂洗;
加酶标抗抗体,漂洗;
加底物 显色
120 41 24KD
二、淋巴细胞的测定
(一) T细胞总数及亚群的测定
(二) T细胞功能的测定
1.淋巴细胞增殖试验
形态学方法,3H-TdR掺入法等。
2.细胞毒试验
3.细胞因子测定



分层液
抗凝血 血浆
白膜层
红细胞
离心
淋巴细胞的分离
T细胞亚群的检测 —— 花环法(一)
T细胞亚群的检测 —— 花环法(二)
三、免疫学检测的应用
(一)协助诊断感染性疾病
(三)协助诊断免疫系统疾病
(四)进行免疫学监测
(二)协助诊断肿瘤
思考题
1.解释名词
人工自动免疫 人工被动免疫
凝集反应 沉淀反应
2.何谓免疫标记技术?常用方法有哪些?
3.试比较人工自动免疫和人工被动免疫有
何不同?
4.常用人工自动免疫和人工被动免疫制剂
有哪些?