第九章
免疫学的临床应用
■ 免疫学诊断
■ 免疫学防治
目的要求
1.掌握 人工自动免疫和人工被动免疫的
概念及特点比较;凝集反应、沉淀反应、
免疫标记技术的概念及常用方法;
2.熟悉 各种抗原、抗体检测方法的原理
及其应用 ;常用细胞免疫的检测方法 ;常用
人工自动免疫和人工被动免疫制剂。
3.了解 其他免疫学检测方法 ;
第一节
免疫学防治
机体特异性免疫力获得方式:
自动免疫
被动免疫
自然自动免疫:患传染病、隐
性感染
自然被动免疫:母体 IgG经胎盘
进入胎儿体内
人工自动免疫, 接种疫苗、
类毒素
人工被动免疫,注射抗毒素、
丙球
一、人工免疫的概念及种类
人为地给机体输入 抗 原 以增强机
体的免疫功能,或直接输入 免疫血清、
细胞免疫制剂 等,使机体获得某种特
异性免疫力,从而达到预防或治疗某些
疾病的方法称为人工免疫。
人工免疫主要包括人工自动免疫、
人工被动免疫和过继免疫三大类。
二、人工自动免疫
(一 )概念:是用人工接种的方法给机
体输入 疫苗、类毒素等抗原 物质,
通过刺激机体产生免疫应答,使机体
获得特异性免疫力的方法。
(二 )特点:免疫力出现慢、维持时间
长,常用于传染病的特异性预防。
(三 )常用人工自动免疫制剂
■ 死疫苗 是用物理或化学方法将病原微生
物杀死后制成的制剂。
■ 活疫苗 是用减毒或无毒的病原微生物制
成的制剂。
■ 类毒素 是用细菌的外毒素经 0.3%~0.4%
甲醛处理后,其毒性消失但保留免疫原性
故称为类毒素。
死疫苗与活疫苗的特点比较
区别要点 死疫苗 活疫苗
制剂特点 强毒株制成 弱毒或无毒株制成
接种方式 多为皮下注射 多模拟自然感染途径
接种剂量次数 量较大,2~3次 量较小,多为 1次
副作用 较大 较小
免疫效果 较差,维持 较好,维持 3~5年
数月 ~数年 或更长
疫苗保存 较易保存 不易保存
■ 亚单位疫苗 应用化学方法提取病原微
生物中有效成分制成的纯化疫苗。
■ 基因工程疫苗或 DNA重组疫苗
新研制的疫苗
■ 合成疫苗 用人工合成多肽抗原连接适
当载体与佐剂制成的疫苗。
(四)计划免疫
1.概念
根据特定传染病的疫情监测和人
群免疫状况分析,按照规定的免疫程
序有计划地进行人群预防接种,以提
高人群免疫水平,控制或消灭相应传
染病。
2.我国儿童计划免疫程序(表)
三、人工被动免疫
(一 )概念:是人为的给机体输入 抗毒
素、免疫血清等免疫效应 物质,使机
体立即获得特异性免疫力的方法。
(二 )特点:免疫力出现 快,维持时间
短,可用于传染病的特异性 治疗 和 紧
急预防 。
(三 )常用人工被动免疫制剂
■ 抗毒素 用细菌类毒素多次给马注射,
待其产生大量抗体后,放血并分离马血清
经提纯后制成的制剂。
■ 胎盘球蛋白 从胎盘血中提取的免疫球
蛋白( IgG)。
■ 血浆丙种球蛋白 从正常人血中提取的
免疫球蛋白( IgG,IgM)。
是指给患者转输具有在体内继
续扩增效应细胞的一种疗法。
四、过继免疫治疗
五、免疫增强剂和免疫抑制剂
1.免疫增强剂
■ 微生物制剂,BCG、短小棒状杆菌、酵母
多糖等。
■ 化学合成药:多聚核苷酸等。
■ 多糖类物质:黄芪、人参、灵芝等提取物。
■ 细胞因子,IL-2,IFN,TNF等。
2.免疫抑制剂
■ 化学合成药:激素、烷化剂等。
■ 真菌代谢产物:环孢素 A,FK-506等。
■ 单克隆抗体:抗 T细胞单抗。
■ 中草药及其有效成分:如雷公藤多甙等。
第二节 免疫学诊断
● 抗原或抗体的检测
● 免疫细胞及其功能检测
一、抗原或抗体的检测
(一 ) 检测的原理
1,已知抗体测抗原(多用于定性)
2.已知抗原测抗体(多用于定量)
(三 ) 影响抗原抗体反应的因素
1.温度,最适温度为 37℃
2.电解质:常用生理盐水
3.pH:最适 pH6~8
3.抗原抗体反应的可见性
2.抗原抗体反应的可逆性
1.抗原抗体反应的特异性
(二 )抗原抗体反应的特点
(四)常见抗原抗体反应的种类
1.凝集反应
类型:
★直接凝集反应
★ 间接凝集反应
★ 间接凝集抑制试验
★ 协同凝集试验
概念:细菌、红细胞等颗粒性抗原与
相应抗体结合后形成凝集团块称凝集反
应。
凝集反应原理图解(一)
凝集反应原理图解(二)
凝集反应原理图解(三)
2.沉淀反应
概念:可溶性抗原与相应抗体结合后出
现沉淀物称沉淀反应。
类型:
★单向免疫扩散
★ 免疫比浊法
★ 双向免疫扩散
★ 对流免疫电泳
单向琼脂扩散试验
双向琼脂扩散试验
对流免疫电泳
测吸光度
计算抗原
或抗体的
含量
抗体 抗原
免疫复合物的
浓度与透射光
的衰减呈正相
关
免疫比浊法原理
3.中和反应 如抗,O”试验
4.免疫标记技术
概念:用荧光素、酶、同位素等
标记抗体或抗原用以测定相应抗原或
抗体的技术称为免疫标记技术。常用
方法有免疫荧光技术、酶免疫技术、
放射免疫检测技术等。
特点:敏感、特异、快速,能定
性、定量、定位。
★ 免疫印迹法
★ 斑点金结合试验
★ 放射免疫测定法
★ 酶免疫测定法( ELISA)
★ 免疫荧光技术
常用免疫标记技术:
免疫荧光技术
酶联免疫吸附试验 (ELISA-间接法 )
斑点金免疫渗滤试验
A
DC
B
阴性(未怀孕)
阳性(怀孕)
加尿样 除去滤器
加胶体金标记抗体 加洗涤液
结果判定
兔抗鼠 IgG
鼠抗 HCG单抗
金标鼠抗 HCG单抗 尿液浸湿标志线
手持端
斑点金免疫层析试验(一)
斑点金免疫层析试验(二)
尿样
阳性 弱阳性 阴性 无效
质控线
测试线
免疫印迹法图解
SDS裂解
病毒
聚丙酰胺凝胶电泳
- +
95 68 45 12KD
电转印至 NC膜上
置待测血清中,漂洗;
加酶标抗抗体,漂洗;
加底物 显色
120 41 24KD
二、淋巴细胞的测定
(一) T细胞总数及亚群的测定
(二) T细胞功能的测定
1.淋巴细胞增殖试验
形态学方法,3H-TdR掺入法等。
2.细胞毒试验
3.细胞因子测定
抗
凝
血
分层液
抗凝血 血浆
白膜层
红细胞
离心
淋巴细胞的分离
T细胞亚群的检测 —— 花环法(一)
T细胞亚群的检测 —— 花环法(二)
三、免疫学检测的应用
(一)协助诊断感染性疾病
(三)协助诊断免疫系统疾病
(四)进行免疫学监测
(二)协助诊断肿瘤
思考题
1.解释名词
人工自动免疫 人工被动免疫
凝集反应 沉淀反应
2.何谓免疫标记技术?常用方法有哪些?
3.试比较人工自动免疫和人工被动免疫有
何不同?
4.常用人工自动免疫和人工被动免疫制剂
有哪些?
免疫学的临床应用
■ 免疫学诊断
■ 免疫学防治
目的要求
1.掌握 人工自动免疫和人工被动免疫的
概念及特点比较;凝集反应、沉淀反应、
免疫标记技术的概念及常用方法;
2.熟悉 各种抗原、抗体检测方法的原理
及其应用 ;常用细胞免疫的检测方法 ;常用
人工自动免疫和人工被动免疫制剂。
3.了解 其他免疫学检测方法 ;
第一节
免疫学防治
机体特异性免疫力获得方式:
自动免疫
被动免疫
自然自动免疫:患传染病、隐
性感染
自然被动免疫:母体 IgG经胎盘
进入胎儿体内
人工自动免疫, 接种疫苗、
类毒素
人工被动免疫,注射抗毒素、
丙球
一、人工免疫的概念及种类
人为地给机体输入 抗 原 以增强机
体的免疫功能,或直接输入 免疫血清、
细胞免疫制剂 等,使机体获得某种特
异性免疫力,从而达到预防或治疗某些
疾病的方法称为人工免疫。
人工免疫主要包括人工自动免疫、
人工被动免疫和过继免疫三大类。
二、人工自动免疫
(一 )概念:是用人工接种的方法给机
体输入 疫苗、类毒素等抗原 物质,
通过刺激机体产生免疫应答,使机体
获得特异性免疫力的方法。
(二 )特点:免疫力出现慢、维持时间
长,常用于传染病的特异性预防。
(三 )常用人工自动免疫制剂
■ 死疫苗 是用物理或化学方法将病原微生
物杀死后制成的制剂。
■ 活疫苗 是用减毒或无毒的病原微生物制
成的制剂。
■ 类毒素 是用细菌的外毒素经 0.3%~0.4%
甲醛处理后,其毒性消失但保留免疫原性
故称为类毒素。
死疫苗与活疫苗的特点比较
区别要点 死疫苗 活疫苗
制剂特点 强毒株制成 弱毒或无毒株制成
接种方式 多为皮下注射 多模拟自然感染途径
接种剂量次数 量较大,2~3次 量较小,多为 1次
副作用 较大 较小
免疫效果 较差,维持 较好,维持 3~5年
数月 ~数年 或更长
疫苗保存 较易保存 不易保存
■ 亚单位疫苗 应用化学方法提取病原微
生物中有效成分制成的纯化疫苗。
■ 基因工程疫苗或 DNA重组疫苗
新研制的疫苗
■ 合成疫苗 用人工合成多肽抗原连接适
当载体与佐剂制成的疫苗。
(四)计划免疫
1.概念
根据特定传染病的疫情监测和人
群免疫状况分析,按照规定的免疫程
序有计划地进行人群预防接种,以提
高人群免疫水平,控制或消灭相应传
染病。
2.我国儿童计划免疫程序(表)
三、人工被动免疫
(一 )概念:是人为的给机体输入 抗毒
素、免疫血清等免疫效应 物质,使机
体立即获得特异性免疫力的方法。
(二 )特点:免疫力出现 快,维持时间
短,可用于传染病的特异性 治疗 和 紧
急预防 。
(三 )常用人工被动免疫制剂
■ 抗毒素 用细菌类毒素多次给马注射,
待其产生大量抗体后,放血并分离马血清
经提纯后制成的制剂。
■ 胎盘球蛋白 从胎盘血中提取的免疫球
蛋白( IgG)。
■ 血浆丙种球蛋白 从正常人血中提取的
免疫球蛋白( IgG,IgM)。
是指给患者转输具有在体内继
续扩增效应细胞的一种疗法。
四、过继免疫治疗
五、免疫增强剂和免疫抑制剂
1.免疫增强剂
■ 微生物制剂,BCG、短小棒状杆菌、酵母
多糖等。
■ 化学合成药:多聚核苷酸等。
■ 多糖类物质:黄芪、人参、灵芝等提取物。
■ 细胞因子,IL-2,IFN,TNF等。
2.免疫抑制剂
■ 化学合成药:激素、烷化剂等。
■ 真菌代谢产物:环孢素 A,FK-506等。
■ 单克隆抗体:抗 T细胞单抗。
■ 中草药及其有效成分:如雷公藤多甙等。
第二节 免疫学诊断
● 抗原或抗体的检测
● 免疫细胞及其功能检测
一、抗原或抗体的检测
(一 ) 检测的原理
1,已知抗体测抗原(多用于定性)
2.已知抗原测抗体(多用于定量)
(三 ) 影响抗原抗体反应的因素
1.温度,最适温度为 37℃
2.电解质:常用生理盐水
3.pH:最适 pH6~8
3.抗原抗体反应的可见性
2.抗原抗体反应的可逆性
1.抗原抗体反应的特异性
(二 )抗原抗体反应的特点
(四)常见抗原抗体反应的种类
1.凝集反应
类型:
★直接凝集反应
★ 间接凝集反应
★ 间接凝集抑制试验
★ 协同凝集试验
概念:细菌、红细胞等颗粒性抗原与
相应抗体结合后形成凝集团块称凝集反
应。
凝集反应原理图解(一)
凝集反应原理图解(二)
凝集反应原理图解(三)
2.沉淀反应
概念:可溶性抗原与相应抗体结合后出
现沉淀物称沉淀反应。
类型:
★单向免疫扩散
★ 免疫比浊法
★ 双向免疫扩散
★ 对流免疫电泳
单向琼脂扩散试验
双向琼脂扩散试验
对流免疫电泳
测吸光度
计算抗原
或抗体的
含量
抗体 抗原
免疫复合物的
浓度与透射光
的衰减呈正相
关
免疫比浊法原理
3.中和反应 如抗,O”试验
4.免疫标记技术
概念:用荧光素、酶、同位素等
标记抗体或抗原用以测定相应抗原或
抗体的技术称为免疫标记技术。常用
方法有免疫荧光技术、酶免疫技术、
放射免疫检测技术等。
特点:敏感、特异、快速,能定
性、定量、定位。
★ 免疫印迹法
★ 斑点金结合试验
★ 放射免疫测定法
★ 酶免疫测定法( ELISA)
★ 免疫荧光技术
常用免疫标记技术:
免疫荧光技术
酶联免疫吸附试验 (ELISA-间接法 )
斑点金免疫渗滤试验
A
DC
B
阴性(未怀孕)
阳性(怀孕)
加尿样 除去滤器
加胶体金标记抗体 加洗涤液
结果判定
兔抗鼠 IgG
鼠抗 HCG单抗
金标鼠抗 HCG单抗 尿液浸湿标志线
手持端
斑点金免疫层析试验(一)
斑点金免疫层析试验(二)
尿样
阳性 弱阳性 阴性 无效
质控线
测试线
免疫印迹法图解
SDS裂解
病毒
聚丙酰胺凝胶电泳
- +
95 68 45 12KD
电转印至 NC膜上
置待测血清中,漂洗;
加酶标抗抗体,漂洗;
加底物 显色
120 41 24KD
二、淋巴细胞的测定
(一) T细胞总数及亚群的测定
(二) T细胞功能的测定
1.淋巴细胞增殖试验
形态学方法,3H-TdR掺入法等。
2.细胞毒试验
3.细胞因子测定
抗
凝
血
分层液
抗凝血 血浆
白膜层
红细胞
离心
淋巴细胞的分离
T细胞亚群的检测 —— 花环法(一)
T细胞亚群的检测 —— 花环法(二)
三、免疫学检测的应用
(一)协助诊断感染性疾病
(三)协助诊断免疫系统疾病
(四)进行免疫学监测
(二)协助诊断肿瘤
思考题
1.解释名词
人工自动免疫 人工被动免疫
凝集反应 沉淀反应
2.何谓免疫标记技术?常用方法有哪些?
3.试比较人工自动免疫和人工被动免疫有
何不同?
4.常用人工自动免疫和人工被动免疫制剂
有哪些?