Section D Bacterial structure and function
细菌的结构与功能
D5 The Archaea
古细菌 Bacteria Eukarya
Archaea
Crenarchaeota Euryarchaeota
Korarchaeota
1.Current taxonomic status of the Archaea
古细菌当前的分类地位
? 1.1 1977年卡尔,沃申根据 16sRNA的顺序提出了一个全新的界,
开始称为 ‘ Archaeabacteria’,后来改为 ‘ Archaea’.
? 1.2 古细菌可分为 3部分:
? Euryarchaeota( 广古细菌)
? Crenarchaeota( 泉古细菌)
? Korarchaeota( 初生古细菌)
2.Extreme habitats 古细菌极端的生活环境
? 2.1 古细菌能够生活在物理或者化学条件极其恶劣的环境下。
? Temperature,Pyrolobus fumarii will not grow below 90℃ ; The
cryophilic Archaea growing at temperatures bilow 4℃,
? Salinity( 盐度),
? pH,grow at pH 2; or grow at pH 10;
? 2.2 古细菌并不限于极限环境,在温和环境中也可以找到古细菌。
3.Methanogenesis 甲烷的生成
? 3.1 古细菌的能量代谢在许多方面与细菌合真核生物相同,但是
碳源新陈代谢的结果却是十分特殊的。
? CO2 + 4H2 → CH4 +2H2O
? CH3OH + H2 → CH4 + H2O
? 4CH3OH → CH4 + 2CO2 + 2H2O
? CH3COOH + H2O → CH4 + H2CO3
? 3.2 上述所用代谢反应都与 ATP的合成相联系,乙酸营养性的产能
最少,二氧化碳为基质的产能最多。
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细菌的结构与功能
D6 Growth in the laboratory
实验室培养
1.Growth media ( 生长培养基)
? 1.1 实验室中的细菌通常生长在液体培养基或者固体培养基中。培养基的
性质取决于细菌对营养的要求,细菌的种类很多,生长要求大相径庭。它
们有共同的要求:
? 水、能源、碳源、氮源、基本的无机离子(磷、硫、钠、钙、镁、钾、铁)、
许多微量元素(锌、锰、钼、钴、铜、镍、钨)
? 异养菌的能源和碳源可以由某些分子得到。
? 1.2 根据细菌对营养的要求,可以将其分成两类:
? 原养型( prototrophs),从上述基本成分中能够合成生活的所有物质,自然
界中的大多数微生物都能做到这一点。
? 营养缺陷型( auxotrophy),这一类微生物在生长过程中必须添加一些有机因
子,如维生素、氨基酸、含氮碱基。
1.Growth media ( 生长培养基)
? 1.3 培养基的分类:
? 限定培养基或者合成培养基( defined medium),含有特殊微生物生长基
本要求的确定成分,含有最低生长要求的培养基。
? 天然培养基( complex mediun),含有不确定的成分如蛋白胨和酵母提取
液(氨基酸、维生素、糖和碱基),广泛适合微生物的生长。
? 选择培养基( selective medium),用于分离特殊的微生物类群,选择培养
基含有抑制非目的细菌生长的成分。如添加青霉素,分离出能够抗青霉素
的细菌。
? 鉴别培养基( enrichment),用于鉴别某些特殊的微生物类群,通常在培
养几种加入某种化学物质如染料,可以区分发酵乳糖的细菌和其他非发酵
乳糖的细菌。大肠杆菌发酵乳糖产酸,水中是否有大肠杆菌可以用这种方
法进行鉴别。
? 1.4 液体培养几种加入琼脂能变成固体培养基,琼脂不被细菌降解,
40~42℃ 凝固,80~90℃ 融化。
2.Environmental conditions for growth
( 生长的环境条件)
? 2.1 温度:许多细菌都有最高生长范围、最低生长范围和最适生长范围。
? 嗜冷微生物( psychrophiles),适合于 -10℃,最适 20℃ 左右。
? 嗜温微生物( mesophiles),适合 15~45℃,最适 37℃
? 嗜热微生物( themophiles),适合 30~75℃,最氏 55℃
? 2.2 氧浓度:细菌对氧的需求变化很大,一般有以下几类:
? 好氧菌( aerobes),在有分子氧的条件下才能生长的细菌;
? 厌氧菌( anaerobes),生长不需要氧的细菌;
? 专性厌氧菌( obigate anaerobes),有氧的条件下致死;
? 兼性厌氧菌( facultative anaerobes),有氧条件下生长的更好,无氧的条件下也
能生长;
? 耐氧菌( aerotolerant),由氧无氧条件下生长情况一样。
? 微好氧菌( microaerophilic),在正常大气氧浓度下( 20%)受到损伤,只有在低
氧浓度下才能存活
Aerobes Obligate Anaerobes Facultative Anaerobes Microaerophilic
2.Environmental conditions for growth
( 生长的环境条件)
? 2.3 pH
? 嗜碱菌( alkaliphiles),生活在高 pH( 8.5~11.5) 的微生物;
? 嗜酸菌( acidophiles),生活在低 pH( 0~5.5) 的微生物。
? 2.4 水活度
? 微生物对周围环境的渗透压很敏感。低渗透压时,水将向细胞中聚集,高渗
透压时水会逸出。
? 有许多化合物如甜菜碱、胆碱、钾离子可以保持细胞渗透平衡。
? 有一些细菌能够在较高盐浓度的环境中生长,称作耐盐菌( osmotolerant),
能够在极高盐浓度环境中生长的细菌称作嗜盐菌( halophiles)
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细菌的结构与功能
D7 Prokaryote growth and cell
cycle
原核生物的生长和细胞周期
1.How bacteria grow( 细菌如何生长)
? 1.1 细胞长大(细菌在培养基
中积累营养物,合成细胞结
构成分) → 准备分裂(复制
它的遗传物质,合成新的细
胞壁) → 细胞分裂(一个细
胞分裂变成两个细胞)
1.How bacteria grow( 细菌如何生长)
? 1.2 Binary fission( 二分裂),Page 97
? 1.3 Exponential growth( 指数生长),Page 98
? 1.4 Generation time( 世代时间):
? 1.5 Mean growth rate( 比生长速率), 细菌生长的速度称为比
生长速率( μ)
? 1.6 细菌生长和分裂的速度与微生物的特性、培养基的成分和环
境条件有关。
G = t2-t 1n n = 3, 3 ( l g N - l g N 0)
μ = 0.69g G
2.The bacterial growth curve细菌生长曲线
? 2.1 Batch culture( 分批培养):将细菌接种在有培养基的容器中,
在合适的温度和通气的条件下,研究微生物在其中生长规律的方
法。
? 2.2 The bacterial growth curve
? 延迟期( lag phase),这个时期细菌需要适应性的环境,合成新的酶
类,增长细胞体积和准备分裂。延迟期的长短于培养基的性质有关。
? 对数期( log phase),细菌开始分裂,细胞数目以恒速增加,能够反
应细胞的倍增时间。
? 稳定期( stationary phase),细菌在培养基中的生长繁殖耗尽了营养
物,产生了有毒的代谢产物,死亡的细胞和产生的细胞数目相等,
细胞的数目没有净增长。
? 衰亡期( death phase),细胞的衰亡速率大于细胞的分裂速率,活细
胞数目下降,细胞裂解,培养物混浊度下降。
Time
Lg viable count
延迟期
对数期
稳定期
衰亡期
细菌典型的生长曲线
3.Continuous culture连续培养
? 3.1 分批培养不更换培养基,最终由于营养物质耗尽和有毒物质的积累,
细胞的生长下降。若用新鲜的培养基不断更换用过的培养基,就可以保
证细胞持续不断的生长。这就是连续培养。
? 3.2 恒化器( chemosetat) 是一个恒定容积的流动系统,新鲜培养基恒速流
入此系统,又以相同的速率流出多余的液体,所以细菌保持在指数生长
期。
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细菌的结构与功能
D8 Techniques used to study
microorganisms
常用来研究细菌的实验技术
1.Aseptic( sterile) technique无菌(灭菌)技术
? 1.1 灭菌与消毒( sterilization and disinfection),灭菌是完全根除活
细胞和病毒的过程;消毒是消除潜在的病原微生物。
? 1.2 灭菌方法:
? 湿热灭菌法,煮沸、蒸汽处理(对芽孢无效);高压蒸汽灭菌
? 巴斯德消毒法,71.7℃, 15秒
? 间歇灭菌法:用 90~100℃ 蒸煮 10分钟,三次,每次间隔 24小时。
? 干热灭菌法:灼烧法、热空气灭菌法( 160~170℃, 2小时)。
? 过滤除菌:滤器 0.22~0.45?m,不能除去病毒。
? 辐射:紫外线(穿透能力差); γ射线(穿透能力好)
2.Obtaining prokaryote colonies 获得细菌菌落的方法
? 2.1 Pure cultures( 纯培养):一个特定菌株的培养。
? 2.2 分离单个细菌的方法:
? Streaking( 划线分离)
? Spread plate( 涂布平板)
? Pour plates( 倾注平板)
3.Counting bacteria 细菌计数
? 3.1 总菌计数
? 3.2 活菌计数
? 3.3 比浊法
? 3.4 其它方法
玻璃载玻片计数室
稀释分离菌落计数法
Exercise
? 1,Explain the following words
? Sterilization and disinfection ; Batch culture ; Generation time ; Anaerobes ; Solid
medium; Auxotrophy
? 2,Answer the following questions
? How many kinds would the media be divided into? What characteristic does each kind
have?
? How many ways would isolating bacteria has? And how would every way be operated?
? How many kinds would Aseptic technique has? What characteristic does each kind have?
? 3,State bacterial growth curve and its reason.
? 4,State the common necessities for the growth of all prokaryotes and functions of
the common necessities.