第七章 微生物的生长及其控制
个体生长 个体繁殖 群体生长
平衡生长
量 数 量
群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖
第一节 测定微生物繁殖的方法
一、测生长量
直接法
间接法
比例计数法
血球计数法
测体积
称干重
比浊法
生理指标法
直接法
间接法 液体稀释法 平板菌落计数法
二、测繁殖数
第二节 微生物的生长规律
一、细菌的个体生长和同步生长
1,同步培养( synchronous
culture):即设法使群体中的所有
细胞尽可能都处于同样细胞生长和
分裂同期中,然后分析此群体的各
种生物化学特 征,从而了解单个细
胞所发生的变化。
2、同步生长( synchronous growth):
通过同步培养而使细胞群体处于分
裂步调的状态,就称 同步生长。
二、典型生长曲线
? 1、典型生长曲线,
将菌种接种在液体培养基
中隔一定时间取样,计算菌数,
以菌数的对数为纵坐标,生长
时间为横坐标作图。
? 包括 延滞期、指数期、稳定期
和衰亡期等四个时期
? R(生长速率常数 )=分裂次数
(代 )/单位时间
霉菌的生长曲线是否是典型生长曲线?
固体培养基表面菌落是否为典型生长曲线?

(一)延滞期( las phase)
1 特点,
? 细胞数目不增加 (R=0)
? 细胞长、大
? 代谢旺盛 (RNA含量增加 )
? 诱导酶迅速合成
? 对不良条件敏感,抵抗力降低
2 影响因素
? 菌种
? 接种龄,即, 种子, 的群体生长年龄,即处在生长曲线上的 哪一个阶段,
这是一种生理年龄。
? 接种量:接种量的大小明显影响延滞期的长短。
? 种子培养基成分,接种到营养丰富的天然培养基中的微生物,要比接种
到营养单调的组分 培养基中的延滞期短。
(二)指数期( exponential phase)
1 特点,
? 生长速率常数最大,繁殖数 > 死亡数
? 代时短,即 细胞每分裂一次所需的代时 G(增代时间,generation
time)或原生质增加一倍所需的倍增时间( doubling time)最短,
? 成分均匀
? 酶活力高,酶系活跃,代谢旺盛。
2 三个重要参数
(三)稳定期( stationary phase)
1 特点,
? 细胞数目不增加 (R=0),即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等,
或正生长与负生长相等的动态平衡之中。
? 菌体产量达到了最高点,而 且菌体产量与营养物质的消耗间呈现出
一定的比例关系
? 细胞长、大
? 代谢旺盛 (RNA含量增加 )
? 诱导酶迅速合成
? 对不良条件敏感,抵抗力降低
2 稳定期到来的原因主要是,
? 营养物尤其是生长限制因子的耗尽;
? 营养物的比例失调,如 C/ N比值不合适;
? 酸、醇、毒素或 H20等有害代谢产物的累积;
? pH、氧化还原势 等物化条件越来越不适宜。
3 应用
稳定期是以生产菌体或与
菌体生长相平行的代谢产物,
例如单细胞蛋白、乳酸等为
目的的一些发酵生产的最佳
收获期,也是对某些生长因
子例如维生素和氨基酸等进
行生物测定的 必要前提。此
外,由于对稳定期到来的原
因进行研究,还促进了连续
培养技术的设计和研究 。
(四)衰亡期( decline Phase或 death Phase)
1 特点,
? 个体死亡的速度超过新生的速度 (繁殖数 <死亡数 ),整个群体就呈现
出负生长( R<0)。
? 细胞形态多样,例如会产生很多膨大、不规则的退化形态;
? 有的微生物因蛋白水解酶活力的增强就发生自溶( autolysis);
? 有的微生物在这时产生或释放对人类有用的抗生素等次生代谢产物;
? 在芽抱杆菌中,芽抱释放往往也发生在这一时期。
2 影响因素
? 环境不利,分解代谢速度 >>合成速度
三 微生物的连续培养
? 连续培养 ( continuous culture) 又
称开放培养 ( open culture), 是相对
于上述绘制典型生长 曲线时所采用的那
种单批培养 ( batch culture) 或密闭培养
( closed culture) 而言的 。
? 原理,通过认识稳定期到来, 并采取相
应的 有效措施:反, 稳定期, 的到来 。
? 。
? 恒法器( turbidostat)这是根据培养器内微生物的生长密
度,并借光电控制系统来控制培养液流速,以取得菌体密
度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。 在恒浊
器中的微生物,始终能以最高生长速率进行生长,并可在
允许范围内控制不同的 菌体密度。
? 恒化器 ( chemostat或 bactosen) 与恒浊器相反, 恒化器
是一种设法使培养液流速保持不变, 并使微生物始终在低
于其最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装
置 。 这 B一种通过控制某一种营养物的浓度, 使其始终成
为生长限制因子的条件下体到的,
第三节 理化因子对微生物生长的影响
一 温度
生长温度的三基点
最低温度
最适温度
最高温度
最适温度:某菌分裂代时最短、
生长速率最高的温度。
嗜冷菌,< 20℃
中温菌,20~45 ℃
嗜热菌,>45 ℃
二 氧气
1 微生物与 O2关系
2厌氧菌受氧毒害机制
三 pH值
缓冲液
内源性
备用碱, CaCO3
外加调节:直接加酸、碱 (工业适用 )
等克分子量,pH值为 6.8 KH2PO4 K
2HPO4
一 基本概念
第二节 有害微生物的控制
1 灭菌
2 消毒
3防腐
4化疗
二 高温灭菌
湿热灭菌效力高的 原因,
1)有水,蛋白质易凝固
2)热蒸汽的穿透力强
3)蒸汽有潜热存在
三 化学杀菌剂
(一 )表面消毒剂
? 对一切活细胞都有毒性、不能用作活细胞内的化学治疗用
的化学药剂
? 石炭酸系数,在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的
最高稀释度与达到同效石炭酸的最高稀释度的比率。
(二 )化学治疗剂
? 抗代谢药物 --磺胺类
? 嘌呤对抗物 --6-巯基嘌呤
? 氨基酸对抗物 --5-甲基色嘌呤
? 吡哆醇对抗物 --异烟肼
抗代谢药物一磺脓类药物
? 1934年德国 Domagk对各
种偶氮染料进行抗菌试
验 -- ‘百浪多息 ’ 可治疗
人的链球菌病及儿童的
丹毒
? 磺胺 是 PABA的 结构类似
物,发生竞争性桔抗作
用,形成“假二氢叶酸”
(三 )抗生素
? 由生物在其生命活动中产生的一种次
生代谢物,在低浓度时可抑制或杀死
其它的微生物。
? 抗菌谱,抗生素对微生物作用的范围。
? 抗生素的作用方式
? 抑制细胞壁的形成:青霉素、杆菌肽、
环丝氨酸
? 阻碍核酸的合成:利福霉素、丝裂霉素、
博莱霉素
? 干扰蛋白质的合成:链霉素、红霉素、
四环素
? 损伤细胞膜的功能:多粘菌素、短杆菌

多粘菌素
萘啶酸、诺氟沙星、环丙沙星