第六章 细菌的遗传分析
学习要点:
1 名词概念
质粒,F因子,Hfr,转化子、转导子、性导、
半合子、附加体、高频转导、低频转导、
感受态因子、特异性转导、合子诱导
2 了解细菌染色体大小与结构;
3 细菌的突变型的类型;
4 细菌菌株的类型、接合的组合方式与重组特点;
5 中断杂交实验作图的原理与方法;
6 细菌基因重组的特点;
7 转化、转导转移遗传物质的特点与共转率作图。
第一节 细菌的细胞和染色体
一 细菌细胞
大小,1-2 ?m;
繁殖方式:二裂式均等分裂,1代 /20min。
二 细菌染色体 P145 表 6-1
1 结构,
环状双链 DNA,单倍性,以折叠或螺旋状态存在 ;
2 大小,长约 250-35000?m(未螺旋 );
3 复制方式,着膜式复制。
分裂特点,均等分裂,无基因重组。
第二节 大肠杆菌的突变型及筛选
一 细菌作遗传研究材料的优点
1 有许多营养缺陷型,且易于选择和鉴定
基本培养基
补充培养基
完全培养基
选择培养基
2 生活周期短, 繁殖快,积累代谢物质多;
3 繁殖快,数量大,易发现和鉴定突变型;
4 结构简单, DNA裸露,单倍性,利于基因精
细结构和基因功能表达调控的研究
二 细菌的突变型
(一 )合成代谢功能的突变型,(营养缺陷型)
(二 )分解代谢功能的突变型:
(三 )抗药性突变型,
青霉素, penr,pens
链霉素, strr,strs
penicillin
Streptomycin
抗性, resistance
敏感, sensitive( 四)抗噬菌体突变型 T
1噬菌体 Tonr Tons
T2噬菌体 Ttor Ttos
三 突变型的筛选
例如,营养缺陷型的筛选, u.v ?
野生型细菌
?
完全培养基:
?影印培养
基本培养基:
?
补充培养基,
氨基酸类 维生素类
?
系列氨基酸
补充培养基:赖氨酸 脯氨酸 精氨酸 …,
第三节 大肠杆菌的性别
一 细菌的接合
1经典的杂交实验 1946年 Lederberg; Tatum 图 7-1
品系 A 品系 B
基因型, met-bio-thr+leu+thi+ X met+bio+thr-leu-thi-
↓ ↓ ↓
基本培养基,
无菌落 有 10-7 无 菌落
2 出现野生型菌落的可能原因:
回复突变;转化;互养; 细菌间发生了基因重组
3 转化、互养的排除 —U 型管试验
无 无
结论,1,野生型不是转化或互养产生的 ;
2:两菌株细胞的直接接触对野生型的产生是必要的,
菌株 A B菌株
基本培养基
证明,细菌发生了基因重组
二 Ecoli性别的发现
1 Hayes 的实验
A,met-bio-thr+leu+thi+strs
X 加链霉素
B,met+bio+thr-leu-thi-strr
↓
基本培养基,出现菌落
met-bio-thr+leu+thi+
strr
X 加链霉素
met+bio+thr-leu-thi-strs
↓
无菌落出现
2 结果得出结论,
(1) Ecoli有相当于高等生物的性别
(2) Ecoli的遗传物质是由♂ → ♀单向传递的,
♂
♀
3 F因子的发现
1) Hayes实验 品系 A strs ♂
↓ 突变
品系 B strr♀ X A strS 突变型, ♂,
↓ ↓ 加链霉素
不育 Astrr,♂, X A strs♂
↓ 加链霉素
品系 B strr♀ X A strr♂
↓
重组体
(- F)
(F-)
(+F)
2) Hayes 的解释
( 1) 细菌是有性别的,细菌的性别是由性因子 (F)
决定的,F+♂,F- ♀
( 2) F因子可以自发地丢失或者得到,
F+♂ -F +F F- ♀
( 3) 杂交时产生重组体,双亲之一必需是 F+;
F+ X F- → 重组体
质 粒, 指任何染色体以外的遗传结构。
附加体, 在细胞中或以游离状态或与染色体相结
合状态存在的遗传结构。
三 F因子与高频重组
1 F基因子的结构
2F因子的整合与切割 图 6-12 图 6-13
3 F因子状态与遗传物质转移特点
不能进行
极少转移F
因子,大量
转移细菌基
因。
转移F因
子,还转
移细菌个
别基因。
F因子状态 游离 整合
菌株类型 F + Fˊ H f r F -
菌株性别 ♂ ♀
杂交类型 F +XF - Fˊ XF - H frXF - F -XF -
? ? ? ?
传递特点 只转移F
因子不转
移细菌基因。
4 高频重组菌株H fr
Hfr的F因子转移特点,
(1)F整合后呈线状;
(2)转移起点 0位于中间;
(3)先转移 F因子的一部分,
F的后面部分最后转移。
四 细菌基因重组的特点
1 部分二倍体,指含有一个
完整基因组和部分基因组
的细胞,(半合子 )P151
内基因子,P151
外基因子,P151
2 细菌基因重组的特点,
(1)细菌基因重组是在部分
二倍体中进行 ;
(2)只有偶数交换才产生有
活性的重组体 ;
(3)相反的重组体不出现,
第四节 中断杂交与重组作图
一 中断杂交实验作图
1中断杂交实验 Hfr thr+ leu+ azir Tonr lac+ gal+ strs
X
F- thr- leu- azis tons lac- gal- strr
选择培养基 9′ 11′ 18′ 25′
加 str ↓ ↓ ↓ ↓
无 thr,leu
↓ ↓ ↓
影印接种 azi Ton lac gal ┆ ┆ ┆
表 6-7 Hfr的未选择性标记基因进入 F-所需时间
转入时间 转移的 Hfr基因 出现在 F-中的频率
(分钟)
8` thr+(选择性标记 ) 100%
8.5` leu+(选择性标记 ) 100%
9` azir开始出现在 F-
11` tonr开始出现在 F- azir已达 30%
18` lac+开始出现在 F- azir达 90%,tonr达 75%
25` gal+开始出现在 F- azir达 95%,tonr达 80% lac+达 30%
2 中断杂交实验作图原理
A,Hfr染色体上的基因是从某一点开始,以线性
方式进入F -的,
B,离原点愈近的基因进入F -愈早,出现在F -
中的比例愈大,反之,则愈小,
3 中断杂交作图, 指在 HfrXF-杂交中,把接合中的细
菌在不同时间取样,搅拌中断杂交,分析受体菌基
因型,以 Hfr基因出现在F -中的先后为顺序,以转移
的时间 (分钟 )为图距单位进行基因作图的方法,
4 作图
(原点 ) aziTon lac gal F
0 9 11 18 25min
5 Ecoli的染色体呈环状
P154表 6-4 几个 Hfr菌株的基因顺序
菌 株 转 移 顺 序
HfrH
Hfr1
Hfr2
Hfr3
312
O thr pro lac pur gal his gly thi
O thr thi gly his gal pur lac pro
0 pro thr thi gly his gal pur lac
0 pur lac pro thr thi gly his gal
0 thi thr pro lac pur gal his gly
1)不同的 Hfr品系转移的起始基因是不同的 ;
说明:F因子可以在不同的位点插入细菌染色体 ;
2)与同一基因相邻的基因是相同的 ;
说明:不同品系细菌的基因顺序是相同的 ;
3)Hfr基因可以两个不同方向转移基因进入F -;
4)一个 Hfr转移的起始基因是另一个 Hfr最后转移的基因
说明:细菌的染色体是环状的, P153 图 6-9
thr
lac
his
galpur
pro
2gly
HfrH
3
312
1
二 重组作图 (难点 )
1 细菌的重组作图的前提
(1)两个基因紧密连锁 ; (2) 两个基因进入受体菌的先后 ;
例:已知 lac 和 ade紧密连锁 ; lac+比 ade+先进入F -;
2 杂交、选择、统计重组体
Hfr lac+ ade+ strs X F- lac- ade- strr
?
选择培养基 ?
加 str,无 ade F -ade+strr 伊红美兰培养基
紫红色菌落 ade+ lac+
粉红色菌落 ade+ lac-
P155图 6-11 B,lac+ ade+
A:lac+ ade+ C,lac+ ade+? F- lac+ ade+ 亲组合 52
? F- lac- ade+ 重组合 15
3 计算重组体
重组值 =重组菌落数 /总菌落数 X100 %
=(lac- ade+)/[(lac+ ade+ )+(lac- ade+)]X100%
= 15/(52+15)X100% ≈ 20%
已知中断杂交实验该两个基因相距 1分钟,
重组作图与中断杂交作图的图距关系,
1分钟图距 ≈ 20% 重组值
4 Ecoli染色体全长,
90分钟;含有,3.6X106bp
20X90 ≈ 1800 cM
第五节 F`因子与性导
一 F`因子与 F`菌株
F`因子,指整合态的 F因子从 Hfr上错误切割下来,
且带有细菌个别基因的 F因子。
F`菌株,指带有 F`因子的细菌。
二 性导, P156 指利用F因子将供体菌的基因导入受体形成
部 分二倍体的过程。
Hfr X F- → Hfr + F- F`X F- → F`+ F`
1 性导的特点,只能转移F因子插入位点附近的基因。
2 性导在遗传分析中的应用, P156 4点
(1) F`因子可自主复制;
(2) 性导所形成的部分二倍体可用作测定两突变形间的互补试验;
(3) 确定部分二倍体中两基因的显隐系;
(4) 利用两基因的共性导率作图,
第六节 转化与转导作图
一 细菌的转化与作图
(一)转化,指外源 DNA片断不经中间媒介体直接进
入感受态细胞进行基因重组形成重组体的过程。
转化子,通过转化而形成的重组体,
(二)转化作图
1 转化作图的条件,
2 转化基因间关系及其确定
DNA浓度
下降比率
A转化率下
降比率
B转化率
下降比率
A与 B共转化
率下降比率
A与 B
关系
1/2 1/2 1/2 1/2 连锁
1/2 1/2 1/2 1/4 不连锁
2 转化基因间重组值的计算
转化子数 (重组体数 )
亲组合数 +转化子数
例,供体 trp2+ his2+ tyr1+?trp2- his2- tyr1-
P158 表 6-5的重组值
trp2—his2的重组值 =34%
trp2—tyr1的重组值 =40%
his2—tyr1的重组值 =13%
根据重组值作图:
trp2 34 his2 13 tyr1
重组值 = = (+ -)+(- +)(+ +)+(+ -)+(- +)
二 转导与作图
(一 )普遍性转导与作图
1 普遍性转导:
(1)普遍性转导的机制 P159 图 6-14
(2)普遍性转导特点,
2 普遍性转导作图
(1) 作图原理,两基因的共转率愈大相距愈近,反之则愈远
(2)双因子转导作图
例如:确定 abc三个基因在染色体上的顺序,
分别测定 a-b,a-c,b-c 的共转导率;
如果,a-b的共导率最大,a-c较大,而 b-c的最小,
则顺序为,b a c
(2) 两点法基因顺序的确定
(1) 杂交测定三个共转率,
例,P1→ 供体 thr+ leu+ azir
X
受体 thr- leu- azis
转导子基因型 共转率
leu+ azir 50 %
leu+ thr+ 2 %
thr+ leu+ 3 %
thr+ azir 0 %
基因可能顺序
thr azi leu
或 thr leu azi
基因顺序是, thr leu azi
2) 三因子转导作图
2) 三因子转导作图
例,P1→ 供体 thr+ leu+ azir
X
受体 thr- leu- azis
各种选择性培养基 转导子基因型 共转率
P1+供体菌 受体
leu
加 azi
加 azi
无 thr
无 leu
无 thr
thr+ leu+ 3%
thr+ azir 0%
leu+ azir 50%
leu+ thr+ 2%
(2)中间位点法 供体菌,supC+ trpA+ pyrF+
X
受体菌,supC- trpA- pyrF-
↓
基因顺序是, supC trpA pyrF
转导子 ( 1) supC+ trpA+ pyrF+ 36(双交换)
( 2) supC+ trpA+ pyrF- 114( 双交换)
( 3) supC+ trpA- pyrF+ 0( 四交换)
( 4) supC+ trpA- pyrF- 453( 双交换 )
3)共转率与图距
关系公式, d(图距 )=L(1-√x)
L,转导 DNA的平均长度
X,两个基因的共转导频率
3
3 稳定转导与流产转导
稳定转导, 指外基因子重组到受体 菌基因组 中的转导。
流产转导, 指外基因子未重组到受体菌中的不 能 稳定转导。
(二)局限性转导
1概念:
2 转导的机制,
3 低频转导与高频转导
噬菌体
↓ 感染
供体菌 → 裂解液 (转导噬菌体 )
(溶源菌 ) (10-6) 双重溶源性转导子
↓ 裂解、感染
50%转导子 (高频转导 )
非溶源
性细菌
溶源
性细菌
→ 溶源性转导子或重组型转导子
(低频转导 )
→
(二)局限性转导
1概念,只能转移细菌染色体特定部分基因的转导,
2 局限性转导的过程
3 转导的机制,是因为噬菌体在细菌染色体的特定位
点上整合。
4 低频转导与高频转导
噬菌体
↓ 感染
供体菌 → 裂解液 (转导噬菌体 )→ 非溶源
(溶源菌 ) (10-6) 性细菌
溶源性转导子
重组性转导子
低频转导,指 溶源性细菌 经诱导所释放的噬菌体所
进行的转导,
高频转导,指双重溶源转导子所进行的转导。
?
?dgal+
↓ ?
↙
?dgal+
?
?dgal+
→裂解 →
感染
50%
转导子
50%溶源性转导子 双重溶源性转导子
10-6
裂解、感染 →50%转导子
学习要点:
1 名词概念
质粒,F因子,Hfr,转化子、转导子、性导、
半合子、附加体、高频转导、低频转导、
感受态因子、特异性转导、合子诱导
2 了解细菌染色体大小与结构;
3 细菌的突变型的类型;
4 细菌菌株的类型、接合的组合方式与重组特点;
5 中断杂交实验作图的原理与方法;
6 细菌基因重组的特点;
7 转化、转导转移遗传物质的特点与共转率作图。
第一节 细菌的细胞和染色体
一 细菌细胞
大小,1-2 ?m;
繁殖方式:二裂式均等分裂,1代 /20min。
二 细菌染色体 P145 表 6-1
1 结构,
环状双链 DNA,单倍性,以折叠或螺旋状态存在 ;
2 大小,长约 250-35000?m(未螺旋 );
3 复制方式,着膜式复制。
分裂特点,均等分裂,无基因重组。
第二节 大肠杆菌的突变型及筛选
一 细菌作遗传研究材料的优点
1 有许多营养缺陷型,且易于选择和鉴定
基本培养基
补充培养基
完全培养基
选择培养基
2 生活周期短, 繁殖快,积累代谢物质多;
3 繁殖快,数量大,易发现和鉴定突变型;
4 结构简单, DNA裸露,单倍性,利于基因精
细结构和基因功能表达调控的研究
二 细菌的突变型
(一 )合成代谢功能的突变型,(营养缺陷型)
(二 )分解代谢功能的突变型:
(三 )抗药性突变型,
青霉素, penr,pens
链霉素, strr,strs
penicillin
Streptomycin
抗性, resistance
敏感, sensitive( 四)抗噬菌体突变型 T
1噬菌体 Tonr Tons
T2噬菌体 Ttor Ttos
三 突变型的筛选
例如,营养缺陷型的筛选, u.v ?
野生型细菌
?
完全培养基:
?影印培养
基本培养基:
?
补充培养基,
氨基酸类 维生素类
?
系列氨基酸
补充培养基:赖氨酸 脯氨酸 精氨酸 …,
第三节 大肠杆菌的性别
一 细菌的接合
1经典的杂交实验 1946年 Lederberg; Tatum 图 7-1
品系 A 品系 B
基因型, met-bio-thr+leu+thi+ X met+bio+thr-leu-thi-
↓ ↓ ↓
基本培养基,
无菌落 有 10-7 无 菌落
2 出现野生型菌落的可能原因:
回复突变;转化;互养; 细菌间发生了基因重组
3 转化、互养的排除 —U 型管试验
无 无
结论,1,野生型不是转化或互养产生的 ;
2:两菌株细胞的直接接触对野生型的产生是必要的,
菌株 A B菌株
基本培养基
证明,细菌发生了基因重组
二 Ecoli性别的发现
1 Hayes 的实验
A,met-bio-thr+leu+thi+strs
X 加链霉素
B,met+bio+thr-leu-thi-strr
↓
基本培养基,出现菌落
met-bio-thr+leu+thi+
strr
X 加链霉素
met+bio+thr-leu-thi-strs
↓
无菌落出现
2 结果得出结论,
(1) Ecoli有相当于高等生物的性别
(2) Ecoli的遗传物质是由♂ → ♀单向传递的,
♂
♀
3 F因子的发现
1) Hayes实验 品系 A strs ♂
↓ 突变
品系 B strr♀ X A strS 突变型, ♂,
↓ ↓ 加链霉素
不育 Astrr,♂, X A strs♂
↓ 加链霉素
品系 B strr♀ X A strr♂
↓
重组体
(- F)
(F-)
(+F)
2) Hayes 的解释
( 1) 细菌是有性别的,细菌的性别是由性因子 (F)
决定的,F+♂,F- ♀
( 2) F因子可以自发地丢失或者得到,
F+♂ -F +F F- ♀
( 3) 杂交时产生重组体,双亲之一必需是 F+;
F+ X F- → 重组体
质 粒, 指任何染色体以外的遗传结构。
附加体, 在细胞中或以游离状态或与染色体相结
合状态存在的遗传结构。
三 F因子与高频重组
1 F基因子的结构
2F因子的整合与切割 图 6-12 图 6-13
3 F因子状态与遗传物质转移特点
不能进行
极少转移F
因子,大量
转移细菌基
因。
转移F因
子,还转
移细菌个
别基因。
F因子状态 游离 整合
菌株类型 F + Fˊ H f r F -
菌株性别 ♂ ♀
杂交类型 F +XF - Fˊ XF - H frXF - F -XF -
? ? ? ?
传递特点 只转移F
因子不转
移细菌基因。
4 高频重组菌株H fr
Hfr的F因子转移特点,
(1)F整合后呈线状;
(2)转移起点 0位于中间;
(3)先转移 F因子的一部分,
F的后面部分最后转移。
四 细菌基因重组的特点
1 部分二倍体,指含有一个
完整基因组和部分基因组
的细胞,(半合子 )P151
内基因子,P151
外基因子,P151
2 细菌基因重组的特点,
(1)细菌基因重组是在部分
二倍体中进行 ;
(2)只有偶数交换才产生有
活性的重组体 ;
(3)相反的重组体不出现,
第四节 中断杂交与重组作图
一 中断杂交实验作图
1中断杂交实验 Hfr thr+ leu+ azir Tonr lac+ gal+ strs
X
F- thr- leu- azis tons lac- gal- strr
选择培养基 9′ 11′ 18′ 25′
加 str ↓ ↓ ↓ ↓
无 thr,leu
↓ ↓ ↓
影印接种 azi Ton lac gal ┆ ┆ ┆
表 6-7 Hfr的未选择性标记基因进入 F-所需时间
转入时间 转移的 Hfr基因 出现在 F-中的频率
(分钟)
8` thr+(选择性标记 ) 100%
8.5` leu+(选择性标记 ) 100%
9` azir开始出现在 F-
11` tonr开始出现在 F- azir已达 30%
18` lac+开始出现在 F- azir达 90%,tonr达 75%
25` gal+开始出现在 F- azir达 95%,tonr达 80% lac+达 30%
2 中断杂交实验作图原理
A,Hfr染色体上的基因是从某一点开始,以线性
方式进入F -的,
B,离原点愈近的基因进入F -愈早,出现在F -
中的比例愈大,反之,则愈小,
3 中断杂交作图, 指在 HfrXF-杂交中,把接合中的细
菌在不同时间取样,搅拌中断杂交,分析受体菌基
因型,以 Hfr基因出现在F -中的先后为顺序,以转移
的时间 (分钟 )为图距单位进行基因作图的方法,
4 作图
(原点 ) aziTon lac gal F
0 9 11 18 25min
5 Ecoli的染色体呈环状
P154表 6-4 几个 Hfr菌株的基因顺序
菌 株 转 移 顺 序
HfrH
Hfr1
Hfr2
Hfr3
312
O thr pro lac pur gal his gly thi
O thr thi gly his gal pur lac pro
0 pro thr thi gly his gal pur lac
0 pur lac pro thr thi gly his gal
0 thi thr pro lac pur gal his gly
1)不同的 Hfr品系转移的起始基因是不同的 ;
说明:F因子可以在不同的位点插入细菌染色体 ;
2)与同一基因相邻的基因是相同的 ;
说明:不同品系细菌的基因顺序是相同的 ;
3)Hfr基因可以两个不同方向转移基因进入F -;
4)一个 Hfr转移的起始基因是另一个 Hfr最后转移的基因
说明:细菌的染色体是环状的, P153 图 6-9
thr
lac
his
galpur
pro
2gly
HfrH
3
312
1
二 重组作图 (难点 )
1 细菌的重组作图的前提
(1)两个基因紧密连锁 ; (2) 两个基因进入受体菌的先后 ;
例:已知 lac 和 ade紧密连锁 ; lac+比 ade+先进入F -;
2 杂交、选择、统计重组体
Hfr lac+ ade+ strs X F- lac- ade- strr
?
选择培养基 ?
加 str,无 ade F -ade+strr 伊红美兰培养基
紫红色菌落 ade+ lac+
粉红色菌落 ade+ lac-
P155图 6-11 B,lac+ ade+
A:lac+ ade+ C,lac+ ade+? F- lac+ ade+ 亲组合 52
? F- lac- ade+ 重组合 15
3 计算重组体
重组值 =重组菌落数 /总菌落数 X100 %
=(lac- ade+)/[(lac+ ade+ )+(lac- ade+)]X100%
= 15/(52+15)X100% ≈ 20%
已知中断杂交实验该两个基因相距 1分钟,
重组作图与中断杂交作图的图距关系,
1分钟图距 ≈ 20% 重组值
4 Ecoli染色体全长,
90分钟;含有,3.6X106bp
20X90 ≈ 1800 cM
第五节 F`因子与性导
一 F`因子与 F`菌株
F`因子,指整合态的 F因子从 Hfr上错误切割下来,
且带有细菌个别基因的 F因子。
F`菌株,指带有 F`因子的细菌。
二 性导, P156 指利用F因子将供体菌的基因导入受体形成
部 分二倍体的过程。
Hfr X F- → Hfr + F- F`X F- → F`+ F`
1 性导的特点,只能转移F因子插入位点附近的基因。
2 性导在遗传分析中的应用, P156 4点
(1) F`因子可自主复制;
(2) 性导所形成的部分二倍体可用作测定两突变形间的互补试验;
(3) 确定部分二倍体中两基因的显隐系;
(4) 利用两基因的共性导率作图,
第六节 转化与转导作图
一 细菌的转化与作图
(一)转化,指外源 DNA片断不经中间媒介体直接进
入感受态细胞进行基因重组形成重组体的过程。
转化子,通过转化而形成的重组体,
(二)转化作图
1 转化作图的条件,
2 转化基因间关系及其确定
DNA浓度
下降比率
A转化率下
降比率
B转化率
下降比率
A与 B共转化
率下降比率
A与 B
关系
1/2 1/2 1/2 1/2 连锁
1/2 1/2 1/2 1/4 不连锁
2 转化基因间重组值的计算
转化子数 (重组体数 )
亲组合数 +转化子数
例,供体 trp2+ his2+ tyr1+?trp2- his2- tyr1-
P158 表 6-5的重组值
trp2—his2的重组值 =34%
trp2—tyr1的重组值 =40%
his2—tyr1的重组值 =13%
根据重组值作图:
trp2 34 his2 13 tyr1
重组值 = = (+ -)+(- +)(+ +)+(+ -)+(- +)
二 转导与作图
(一 )普遍性转导与作图
1 普遍性转导:
(1)普遍性转导的机制 P159 图 6-14
(2)普遍性转导特点,
2 普遍性转导作图
(1) 作图原理,两基因的共转率愈大相距愈近,反之则愈远
(2)双因子转导作图
例如:确定 abc三个基因在染色体上的顺序,
分别测定 a-b,a-c,b-c 的共转导率;
如果,a-b的共导率最大,a-c较大,而 b-c的最小,
则顺序为,b a c
(2) 两点法基因顺序的确定
(1) 杂交测定三个共转率,
例,P1→ 供体 thr+ leu+ azir
X
受体 thr- leu- azis
转导子基因型 共转率
leu+ azir 50 %
leu+ thr+ 2 %
thr+ leu+ 3 %
thr+ azir 0 %
基因可能顺序
thr azi leu
或 thr leu azi
基因顺序是, thr leu azi
2) 三因子转导作图
2) 三因子转导作图
例,P1→ 供体 thr+ leu+ azir
X
受体 thr- leu- azis
各种选择性培养基 转导子基因型 共转率
P1+供体菌 受体
leu
加 azi
加 azi
无 thr
无 leu
无 thr
thr+ leu+ 3%
thr+ azir 0%
leu+ azir 50%
leu+ thr+ 2%
(2)中间位点法 供体菌,supC+ trpA+ pyrF+
X
受体菌,supC- trpA- pyrF-
↓
基因顺序是, supC trpA pyrF
转导子 ( 1) supC+ trpA+ pyrF+ 36(双交换)
( 2) supC+ trpA+ pyrF- 114( 双交换)
( 3) supC+ trpA- pyrF+ 0( 四交换)
( 4) supC+ trpA- pyrF- 453( 双交换 )
3)共转率与图距
关系公式, d(图距 )=L(1-√x)
L,转导 DNA的平均长度
X,两个基因的共转导频率
3
3 稳定转导与流产转导
稳定转导, 指外基因子重组到受体 菌基因组 中的转导。
流产转导, 指外基因子未重组到受体菌中的不 能 稳定转导。
(二)局限性转导
1概念:
2 转导的机制,
3 低频转导与高频转导
噬菌体
↓ 感染
供体菌 → 裂解液 (转导噬菌体 )
(溶源菌 ) (10-6) 双重溶源性转导子
↓ 裂解、感染
50%转导子 (高频转导 )
非溶源
性细菌
溶源
性细菌
→ 溶源性转导子或重组型转导子
(低频转导 )
→
(二)局限性转导
1概念,只能转移细菌染色体特定部分基因的转导,
2 局限性转导的过程
3 转导的机制,是因为噬菌体在细菌染色体的特定位
点上整合。
4 低频转导与高频转导
噬菌体
↓ 感染
供体菌 → 裂解液 (转导噬菌体 )→ 非溶源
(溶源菌 ) (10-6) 性细菌
溶源性转导子
重组性转导子
低频转导,指 溶源性细菌 经诱导所释放的噬菌体所
进行的转导,
高频转导,指双重溶源转导子所进行的转导。
?
?dgal+
↓ ?
↙
?dgal+
?
?dgal+
→裂解 →
感染
50%
转导子
50%溶源性转导子 双重溶源性转导子
10-6
裂解、感染 →50%转导子