养牛学实验教学大纲适用畜牧专业本科 共10学时教学时间分配表:
实验名称
学时
实验方式
牧草NDF含量的测定
5
讲授
牧草粗蛋白含量的测定
5
讲授
总体要求:
饲料是NDF、CP的含量对于草食动物的饲养具有比较重要的意义,掌握饲料NDF、CP的测定方法对草业专业学生来说是一个基本的测试技能。
实验一 牧草NDF含量的测定采用范氏(Van Soest)酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)的测定方法。
准确称取1g左右样品(磨碎并通过1mm筛孔)置于高脚烧杯中,加入中性或酸性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘(消泡剂)以及0.5g无水亚硫酸钠。
套上冷凝装置,立即置于电炉上尽快煮沸(5~10min),回流1h(调节电炉温度,使溶液保持在微沸状态,防止泡沫上升),经常摇动样品与溶液充分混合和接触。
回流完毕,取下高脚烧杯,将杯中溶液缓慢倒入铺有干燥并恒重的定量滤纸漏斗过滤。将高脚杯中的样品残渣全部倒在滤纸上,并用热蒸馏水(90~100℃)冲洗两次,至溶液呈中性反应后为止(用蓝色试纸检验),用丙酮冲洗残渣两次至流下的丙酮液呈无色为止。
将残渣用滤纸包好,置105℃烘箱内烘干24h,取出放入干燥器中冷却,称至恒重。
NDF含量的计算
NDF(%)=×100
实验二 牧草CP含量的测定采用凯氏定氮法。以浓硫酸加催化剂(硫酸铜与硫酸钾以1:15比例混合)在高热状态下消化样品。每份样品0.2~0.5g、准确至0.0002g。总共需时12h。同时消化一个空白样,空白消化以0.02g蔗糖代替样品,其他与样品相同。消化后样品生成硫酸铵,而非氮物质则转化成CO2、H2O、SO2以气体形式逸出,剩下的为消化液。将消化液转移到100ml容量瓶中。然后移取定量消化液(10ml)进行蒸馏,使其与碱反应生成氨,用硼酸溶液吸收之并与铵形成四硼酸铵。蒸馏出的四硼酸铵用甲基红溴甲酚绿显色,用低浓度的盐酸标准溶液滴定,间接计算出氮的含量,再乘以系数即得。一般蛋白质含氮16%。将样品含氮量乘以6.25即视为蛋白质的含量。
CP含量的计算公式
CP(%)=×100
-盐酸滴定量(ml) c-盐酸的浓度(mol/l)
-试样分解液蒸馏用体积(ml) V-试样分解液定溶体积(ml)
m-风干试样质量
实验名称
学时
实验方式
牧草NDF含量的测定
5
讲授
牧草粗蛋白含量的测定
5
讲授
总体要求:
饲料是NDF、CP的含量对于草食动物的饲养具有比较重要的意义,掌握饲料NDF、CP的测定方法对草业专业学生来说是一个基本的测试技能。
实验一 牧草NDF含量的测定采用范氏(Van Soest)酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)的测定方法。
准确称取1g左右样品(磨碎并通过1mm筛孔)置于高脚烧杯中,加入中性或酸性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘(消泡剂)以及0.5g无水亚硫酸钠。
套上冷凝装置,立即置于电炉上尽快煮沸(5~10min),回流1h(调节电炉温度,使溶液保持在微沸状态,防止泡沫上升),经常摇动样品与溶液充分混合和接触。
回流完毕,取下高脚烧杯,将杯中溶液缓慢倒入铺有干燥并恒重的定量滤纸漏斗过滤。将高脚杯中的样品残渣全部倒在滤纸上,并用热蒸馏水(90~100℃)冲洗两次,至溶液呈中性反应后为止(用蓝色试纸检验),用丙酮冲洗残渣两次至流下的丙酮液呈无色为止。
将残渣用滤纸包好,置105℃烘箱内烘干24h,取出放入干燥器中冷却,称至恒重。
NDF含量的计算
NDF(%)=×100
实验二 牧草CP含量的测定采用凯氏定氮法。以浓硫酸加催化剂(硫酸铜与硫酸钾以1:15比例混合)在高热状态下消化样品。每份样品0.2~0.5g、准确至0.0002g。总共需时12h。同时消化一个空白样,空白消化以0.02g蔗糖代替样品,其他与样品相同。消化后样品生成硫酸铵,而非氮物质则转化成CO2、H2O、SO2以气体形式逸出,剩下的为消化液。将消化液转移到100ml容量瓶中。然后移取定量消化液(10ml)进行蒸馏,使其与碱反应生成氨,用硼酸溶液吸收之并与铵形成四硼酸铵。蒸馏出的四硼酸铵用甲基红溴甲酚绿显色,用低浓度的盐酸标准溶液滴定,间接计算出氮的含量,再乘以系数即得。一般蛋白质含氮16%。将样品含氮量乘以6.25即视为蛋白质的含量。
CP含量的计算公式
CP(%)=×100
-盐酸滴定量(ml) c-盐酸的浓度(mol/l)
-试样分解液蒸馏用体积(ml) V-试样分解液定溶体积(ml)
m-风干试样质量