IH与 IS-PCR复习要点一,名词解释
( 1) 多克隆抗体与单克隆抗体 (p13);
( 2) 特异性抗体与连接抗体 (p60-
61,p74-75);
( 3) 标记抗体与不标记抗体 (p52,p74-
75;
( 4) PAP与 APAAP(p77,p86);
( 5 ) LsAB 与 sABC(p83-84);
( 6 ) IGS 与 IGSS(p104-106);
( 7) IG(Ab) 5nm与 PAG5nm(p104);
( 8 ) CSA 与 UIP (p87,p90);
( 9 ) EPOS 与 EnVision (p88-89);
( 10) PBS与 TBS(p235-236) ;
( 11) PLP液与 PFG液 ( p31-32) ;
( 12 ) 质粒与引物 ( p25 ) ;
( 13) 酶消化与热修复 ( 或热诱导
p42-43 ) ;
( 14) 空白对照与替代对照 ( p121) ;
( 15) 吸收试验与抑制试验 ( 对照,
p121 ) ;
( 16) 假阳性与假阴性 ( p122-130) ;
( 17) DAB/H2O2与 AEC/H2O2( p72) ;
( 18) 原位 PCR与原位 RT-PCR(p157-
161) ;
( 19 ) 肿瘤标记物与肿瘤探针
( p183,p132,p157 ) ;
( 20) AR,ER与 PR( p217) ;
( 21) LCK与 LCA( p183,p193) ;
( 22) Vimentin与 Desmin( p186) ;
二,思考题
1.什么是免疫组化与杂交组化,其特点有哪些?( p1,p27,p120,p157)根据所学知识,其示踪显示的方法有哪些,各自的显色 原 理 有 什 么 不 同?(p1,p48,p71-
72,p93,p105)
2.叙述 PAP法与 S-P(LsAB)法的基本原理及其异同点? (p78-79,p83-85)
3.CSA法与 EnVision法的基本原理和技术特点是什么?其所用的增敏放大试剂各有什么特点?(p87,p89-90)
4.免疫组化结果的判断原则是什么?
(p120,p130)
5.实施免疫组化染色中为什么强调必须同时做对照,可设哪些对照,如何操作?(p120-122)
6.什么是免疫组化与杂交组化染色的假阳性和假阴性?导致假阳性和假阴性的原因有哪些?(p120,p122,p130)
三、考试方式 -----闭卷笔试时间 100min,A,B卷题型有四:
名词解释 10× 2分= 20分多选题( A1) 20× 1分= 20分填空题 20× 1分 =20分问答题 3道 40分( 5,10,25)
试题举例:
请按抗体说明书所示第一抗体试剂及其要求,书写出 IH的操作流 程,并说明采用方法的原理 (技术类型亦可自定 )?有时,甚至要求分析染色的可能结果和产生原因,以及提出对应的解决措施?
回答这类考题,文字叙述必须理论联系实际,要 与 题 意 吻 合 。
由于目前大多抗体试剂 说明书的文字是英文,为使同学们有所了解,特介绍如下,
( 一 ) 说 明 书 通 用 格 式免疫原 ( immunogen )
细 胞 克 隆 ( clone )
抗 体 介 绍 ( presentation )
特异性 ( specifficity )
反 应 性 ( reactivity )
染色步骤 ( staining precedure)
保存 ( store)
( 二 ) 书写思路
1.依据试题要求和所定抗体特性及选用方法的原理列出相关操作步骤和试剂要求 ;
2.操作流程包括:切片前处理 (脱蜡,
消化或抗原修复,内源物阻断 )---免疫组化染色 ---切片后处理 (衬染,封固 );
3.根据预实验免疫染色结果的好坏,
摸索和改良操作步骤 (特别是特异性抗体的工作浓度 );即阐明应注意的问题 。
4,正式应用