呼吸道病毒
（第二十四章第 4节 P359-371)
温州医学院检验医学与公共卫生学院
温州医学院附属第一医院
周铁丽
目 的
掌握流行性感冒病毒的生物学性状
了解其它呼吸道病毒的性状
概 念
呼吸道病毒是指（ 1）侵犯呼吸道并导
致呼吸道病变包括：流感病毒，鼻病毒，
呼吸道合胞病毒等。（ 2）以呼吸道途径
感染而主要引起呼吸道以外组织器官病变
的病毒。包括：麻疹病毒，腮腺炎病毒，
风疹病毒等。
分 类
正粘病毒科
流感病毒（甲、乙、丙型）
副粘病毒科
副流感病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，
风疹病毒
其它
鼻病毒，冠状病毒，风疹病毒，等
正粘病毒与副粘病毒的区别
生物学性状 正粘病毒 副粘病毒
形态和大小 （ nm） 多形性 80～ 120 多形性 150～ 300
核酸类型 单股负链 RNA,分节段 单股负链 RNA,不分节段
核衣壳形成部位 细胞核内 细胞浆内
血凝素 有 有
神经氨酸酶 有 多数没有
溶血作用 无 有
融细胞作用 无 有
包涵体形成 无 浆内
鸡胚中生成 良好 多数不佳
流行性感冒病毒
(Influenza virus)
流行性感冒病毒简称流感病毒，是引起
流感的病原体，流感是一种上呼吸道急性传
染病，它传染性强、传播快、潜伏期短、发
病率高。
微生物特性（ I）
形 态 多形性，大多为粗糙球形
结 构 （ 1）核心 （核衣壳） =核酸 +衣壳蛋白
核酸：为单股负链 RNA，分子量为 5.9-6.3× 106道尔顿,分节段。
衣壳蛋白：为 RNA外包绕的蛋白质。
结 构
（ 2）包膜,由内向外，基质蛋白、类脂和糖蛋白三层
基质 蛋白（ M蛋白 ）,由病毒编码，抗原稳定（具有型特异性）
保护病毒核心，维持病毒形态
类脂层,脂质双层结构，它来自宿主细胞膜或核膜
糖蛋白层,镶嵌于脂质双层中向外突出形成刺突
微生物特性（ II）
微生物特性（ III）
血凝素 (Hemagglutinin HA)
由病毒基因组片段 4编码
能与多种动物和人的红细胞发生凝集
与病毒吸附和穿入宿主细胞有关
（ HA2具有膜融合活性，促进病毒包膜与细胞膜融合）
为流感病毒的主要中和抗原,能产生中和抗体
抗原性最易发生变异，是流感病毒亚型划分依据之一
神经氨酸酶（ Neuraminidase NA）
由病毒基因组片段 6编码
具有酶活性，有利于成熟病毒的释放
具有抗原性，但无中和病毒作用
抗原易变异，是流感病毒亚型划分依据之一
微生物特性（ IV）
分型与变异
乙型和丙型流感病毒少发生变异
抗原性比较稳定；动物感染少
甲型流感病毒极易发生变异
表面抗原 HA,NA最易变异（二者可同时变异，也可分别发生）
与动物流感病毒发生基因重组
微生物特性（ VI）
培养特性
鸡胚（最适）：初次分离羊膜腔最佳
组织培养 动物接种
病变不明显，需用血凝试验或免疫学方法证实
抵抗力
流感病毒抵抗力较弱
不耐热,56℃30 分钟即被灭活
对酸、干燥、日光、紫外线及乙醚、甲醛等敏感
-70℃ 或冷冻干燥后活性可长期保存
微生物检验（ I）
流感病毒的检验方法
显微镜检查
病毒的分离培养
病毒的抗原检测
病毒的 RNA检测
血清学检测
微生物检验（ II）
标本采集和处理要求
疾病早期采集
无菌操作
标本应置无菌 pH7.2肉汤或 Hanks液运送
置冰瓶立即送检
培养标本应加适量青霉素和链霉素处理后接种
微生物检验（ III）
显微镜检查
基本原理：标本经染色处理后，根据病毒颗粒的形态作出判断。
流感病毒电镜下形态
微生物检验（ IV）
分离培养与鉴定（实验室诊断的金标准）
基本原理
病毒在活的敏感细胞、组织、胚胎或动物体内复制繁殖
细胞培养分离病毒主要过程
细胞培养，病毒分离和病毒鉴定
标本在鸡胚或特定组织细胞内培养数天后，
用红细胞吸附与血凝试 验核查结果
培养阳性者检测方法
用血凝抑制试验（ HI ）
和中和试验鉴定
病毒 RNA检测
副流感病毒
（ Parainfluenza virus,PIV）
经飞沫传播，引起儿童或成人呼吸道感染
四个血清型
PIV1,PIV2（主要致病因子）,常引起哮喘
PIV3,常引起下呼吸道感染
PIV4,引起轻微上呼吸道感染
微生物特性
?形 态
多形性，大多为球形
结 构 （ 1） 核衣壳：螺旋对称
核酸：为单股负链 RNA，不分节段
（ 2）包膜：来源于宿主的细胞膜
内面：基质蛋白 M
表面,2种糖蛋白组成的棘突
HN（ hemagglutinin neuraminidase）：具凝血和神经氨酸酶活性
F糖蛋白（ fusion）：具有细胞融合和病毒穿入细胞并传播扩散的作用
抵抗力 抵抗力弱
对热敏感，不耐酸,4℃ 短暂存活
微生物检验（ II）
显微镜检查
（ 1）观察脱落细胞胞质内嗜酸性包涵体（辅助检查）
（ 2）电子显微镜直接检查病毒颗粒
分离培养
标本接种原代人胚肾或原代猴肾细胞培养
用豚鼠红细胞吸附试验检测培养结果
培养阳性者检测方法
微生物检验（ II）
其 它
直接检测病毒抗原
采用间接免疫荧光,ELISA技术
应用单克隆抗体
血清学诊断
检测 PIV抗体
IgM：交叉反应较少
IgG：需要急性期和至少两周以后的恢复期血清
血凝抑制试验，中和试验鉴定,补体结合试验等
呼吸道合胞病毒
（ Respiratorysyncytical virus,RSV）
在组织培养中产生细胞融合病变而得名
传播途径：经飞沫；污染的手或污染物直接接触传播
抵抗力较低，
对热不稳定，冰冻融化易被灭活,环境中可生存 6小时
易感人群：婴幼儿，成人，老人
婴幼儿呼吸道感染的重要病原体
微生物特性
球型颗粒，直径为 100-300nm
核 酸
单股负链 RNA，不分节段
囊 膜
（ 1）内膜蛋白（为 M蛋白）
具有维持病毒体的结构和完整性的作用
（ 2）表面刺突
G蛋白：它能使 RSV吸附于宿主细胞上导致感染开始
F蛋白：能引起病毒囊膜与宿主细胞膜融合，有利于病毒穿入细胞
微生物检验
分离培养
RSV未发现带毒者，分离出病毒即可确诊
培养特点
（ 1）不能在鸡胚内增殖，
只能在人和猴细胞如 Hep-2,Hela等细胞株中培养增殖
（ 2） 阳性出现明显的细胞病变效应（ cytopathic effect,CPE）
细胞界线不清、融合成多核巨细胞等
（ 3）阳性出现时间：约 2～ 3周
鉴定方法
中和试验或补体结合试验
传播途径
粪一口途径
飞沫传播
所致疾病
咽喉炎，结膜炎，肺炎，角膜炎
胃肠炎，膀胱炎，尿道炎等
腺病毒感染后，机体可获得对同型病毒的持久免疫力
腺病毒（ Adenovirus）
微生物特性
球型颗粒，直径 60～ 90nm
核心为双链 DNA，无包膜
不能在鸡胚内增殖，最适细胞为原代人胚肾细胞
对热敏感，但对酸和乙醚不敏感
微生物检验
病毒颗粒或 包涵体 镜检
病毒在组织内增殖后，在胞浆或核内用光学显微镜观察
到的大小不等，数量不同的圆形或不规则斑块
分离鉴定,选择敏感细胞
抗原检测,荧光标记染色
抗体检测,双份血清 4倍以上升高有诊断价值
核酸检测
腮腺炎病毒 ( Mumps viras)
经飞沫传播,人为唯一宿主
主要引起流行性腮腺炎，多流行于冬、春季
潜伏期较长（ 18～ 21天）
易感人群：学龄儿童
接种减毒活疫苗有较好的预防效果
经飞沫传播,人为其自然宿主
麻疹的病原体
潜伏期 6～ 18天
人群普遍易感，接触患者后几乎 100%患病
接种减毒活疫苗有较好的预防效果
麻疹病毒（ Measlesvirus）
呼吸道传播,经病毒血症播散全身
风疹的病原体
潜伏期 10-25天
人群普遍易感
可致胎儿畸形
孕妇血液中风疹病毒抗体检测作为产前常规检测
风疹病毒（ rubella virus）
冠状病毒（ Coronavirus）
由于病毒包膜表面广泛生出花瓣状突起，
电镜下见病毒颗粒的外型形如冠状而得名
临床特点
呼吸道传播,引起轻型感染
普通感冒的病原体、还与腹泻和胃肠炎有关
潜伏期 2-5天
各年龄组均可发病，以婴儿为主
难以分离培养
再 见
（第二十四章第 4节 P359-371)
温州医学院检验医学与公共卫生学院
温州医学院附属第一医院
周铁丽
目 的
掌握流行性感冒病毒的生物学性状
了解其它呼吸道病毒的性状
概 念
呼吸道病毒是指（ 1）侵犯呼吸道并导
致呼吸道病变包括：流感病毒，鼻病毒，
呼吸道合胞病毒等。（ 2）以呼吸道途径
感染而主要引起呼吸道以外组织器官病变
的病毒。包括：麻疹病毒，腮腺炎病毒，
风疹病毒等。
分 类
正粘病毒科
流感病毒（甲、乙、丙型）
副粘病毒科
副流感病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，
风疹病毒
其它
鼻病毒，冠状病毒，风疹病毒，等
正粘病毒与副粘病毒的区别
生物学性状 正粘病毒 副粘病毒
形态和大小 （ nm） 多形性 80～ 120 多形性 150～ 300
核酸类型 单股负链 RNA,分节段 单股负链 RNA,不分节段
核衣壳形成部位 细胞核内 细胞浆内
血凝素 有 有
神经氨酸酶 有 多数没有
溶血作用 无 有
融细胞作用 无 有
包涵体形成 无 浆内
鸡胚中生成 良好 多数不佳
流行性感冒病毒
(Influenza virus)
流行性感冒病毒简称流感病毒，是引起
流感的病原体，流感是一种上呼吸道急性传
染病，它传染性强、传播快、潜伏期短、发
病率高。
微生物特性（ I）
形 态 多形性，大多为粗糙球形
结 构 （ 1）核心 （核衣壳） =核酸 +衣壳蛋白
核酸：为单股负链 RNA，分子量为 5.9-6.3× 106道尔顿,分节段。
衣壳蛋白：为 RNA外包绕的蛋白质。
结 构
（ 2）包膜,由内向外，基质蛋白、类脂和糖蛋白三层
基质 蛋白（ M蛋白 ）,由病毒编码，抗原稳定（具有型特异性）
保护病毒核心，维持病毒形态
类脂层,脂质双层结构，它来自宿主细胞膜或核膜
糖蛋白层,镶嵌于脂质双层中向外突出形成刺突
微生物特性（ II）
微生物特性（ III）
血凝素 (Hemagglutinin HA)
由病毒基因组片段 4编码
能与多种动物和人的红细胞发生凝集
与病毒吸附和穿入宿主细胞有关
（ HA2具有膜融合活性，促进病毒包膜与细胞膜融合）
为流感病毒的主要中和抗原,能产生中和抗体
抗原性最易发生变异，是流感病毒亚型划分依据之一
神经氨酸酶（ Neuraminidase NA）
由病毒基因组片段 6编码
具有酶活性，有利于成熟病毒的释放
具有抗原性，但无中和病毒作用
抗原易变异，是流感病毒亚型划分依据之一
微生物特性（ IV）
分型与变异
乙型和丙型流感病毒少发生变异
抗原性比较稳定；动物感染少
甲型流感病毒极易发生变异
表面抗原 HA,NA最易变异（二者可同时变异，也可分别发生）
与动物流感病毒发生基因重组
微生物特性（ VI）
培养特性
鸡胚（最适）：初次分离羊膜腔最佳
组织培养 动物接种
病变不明显，需用血凝试验或免疫学方法证实
抵抗力
流感病毒抵抗力较弱
不耐热,56℃30 分钟即被灭活
对酸、干燥、日光、紫外线及乙醚、甲醛等敏感
-70℃ 或冷冻干燥后活性可长期保存
微生物检验（ I）
流感病毒的检验方法
显微镜检查
病毒的分离培养
病毒的抗原检测
病毒的 RNA检测
血清学检测
微生物检验（ II）
标本采集和处理要求
疾病早期采集
无菌操作
标本应置无菌 pH7.2肉汤或 Hanks液运送
置冰瓶立即送检
培养标本应加适量青霉素和链霉素处理后接种
微生物检验（ III）
显微镜检查
基本原理：标本经染色处理后，根据病毒颗粒的形态作出判断。
流感病毒电镜下形态
微生物检验（ IV）
分离培养与鉴定（实验室诊断的金标准）
基本原理
病毒在活的敏感细胞、组织、胚胎或动物体内复制繁殖
细胞培养分离病毒主要过程
细胞培养，病毒分离和病毒鉴定
标本在鸡胚或特定组织细胞内培养数天后，
用红细胞吸附与血凝试 验核查结果
培养阳性者检测方法
用血凝抑制试验（ HI ）
和中和试验鉴定
病毒 RNA检测
副流感病毒
（ Parainfluenza virus,PIV）
经飞沫传播，引起儿童或成人呼吸道感染
四个血清型
PIV1,PIV2（主要致病因子）,常引起哮喘
PIV3,常引起下呼吸道感染
PIV4,引起轻微上呼吸道感染
微生物特性
?形 态
多形性，大多为球形
结 构 （ 1） 核衣壳：螺旋对称
核酸：为单股负链 RNA，不分节段
（ 2）包膜：来源于宿主的细胞膜
内面：基质蛋白 M
表面,2种糖蛋白组成的棘突
HN（ hemagglutinin neuraminidase）：具凝血和神经氨酸酶活性
F糖蛋白（ fusion）：具有细胞融合和病毒穿入细胞并传播扩散的作用
抵抗力 抵抗力弱
对热敏感，不耐酸,4℃ 短暂存活
微生物检验（ II）
显微镜检查
（ 1）观察脱落细胞胞质内嗜酸性包涵体（辅助检查）
（ 2）电子显微镜直接检查病毒颗粒
分离培养
标本接种原代人胚肾或原代猴肾细胞培养
用豚鼠红细胞吸附试验检测培养结果
培养阳性者检测方法
微生物检验（ II）
其 它
直接检测病毒抗原
采用间接免疫荧光,ELISA技术
应用单克隆抗体
血清学诊断
检测 PIV抗体
IgM：交叉反应较少
IgG：需要急性期和至少两周以后的恢复期血清
血凝抑制试验，中和试验鉴定,补体结合试验等
呼吸道合胞病毒
（ Respiratorysyncytical virus,RSV）
在组织培养中产生细胞融合病变而得名
传播途径：经飞沫；污染的手或污染物直接接触传播
抵抗力较低，
对热不稳定，冰冻融化易被灭活,环境中可生存 6小时
易感人群：婴幼儿，成人，老人
婴幼儿呼吸道感染的重要病原体
微生物特性
球型颗粒，直径为 100-300nm
核 酸
单股负链 RNA，不分节段
囊 膜
（ 1）内膜蛋白（为 M蛋白）
具有维持病毒体的结构和完整性的作用
（ 2）表面刺突
G蛋白：它能使 RSV吸附于宿主细胞上导致感染开始
F蛋白：能引起病毒囊膜与宿主细胞膜融合，有利于病毒穿入细胞
微生物检验
分离培养
RSV未发现带毒者，分离出病毒即可确诊
培养特点
（ 1）不能在鸡胚内增殖，
只能在人和猴细胞如 Hep-2,Hela等细胞株中培养增殖
（ 2） 阳性出现明显的细胞病变效应（ cytopathic effect,CPE）
细胞界线不清、融合成多核巨细胞等
（ 3）阳性出现时间：约 2～ 3周
鉴定方法
中和试验或补体结合试验
传播途径
粪一口途径
飞沫传播
所致疾病
咽喉炎，结膜炎，肺炎，角膜炎
胃肠炎，膀胱炎，尿道炎等
腺病毒感染后，机体可获得对同型病毒的持久免疫力
腺病毒（ Adenovirus）
微生物特性
球型颗粒，直径 60～ 90nm
核心为双链 DNA，无包膜
不能在鸡胚内增殖，最适细胞为原代人胚肾细胞
对热敏感，但对酸和乙醚不敏感
微生物检验
病毒颗粒或 包涵体 镜检
病毒在组织内增殖后，在胞浆或核内用光学显微镜观察
到的大小不等，数量不同的圆形或不规则斑块
分离鉴定,选择敏感细胞
抗原检测,荧光标记染色
抗体检测,双份血清 4倍以上升高有诊断价值
核酸检测
腮腺炎病毒 ( Mumps viras)
经飞沫传播,人为唯一宿主
主要引起流行性腮腺炎，多流行于冬、春季
潜伏期较长（ 18～ 21天）
易感人群：学龄儿童
接种减毒活疫苗有较好的预防效果
经飞沫传播,人为其自然宿主
麻疹的病原体
潜伏期 6～ 18天
人群普遍易感，接触患者后几乎 100%患病
接种减毒活疫苗有较好的预防效果
麻疹病毒（ Measlesvirus）
呼吸道传播,经病毒血症播散全身
风疹的病原体
潜伏期 10-25天
人群普遍易感
可致胎儿畸形
孕妇血液中风疹病毒抗体检测作为产前常规检测
风疹病毒（ rubella virus）
冠状病毒（ Coronavirus）
由于病毒包膜表面广泛生出花瓣状突起，
电镜下见病毒颗粒的外型形如冠状而得名
临床特点
呼吸道传播,引起轻型感染
普通感冒的病原体、还与腹泻和胃肠炎有关
潜伏期 2-5天
各年龄组均可发病，以婴儿为主
难以分离培养
再 见
