球菌
? 革兰阳性球菌
– 兼性厌氧球菌 9属、专性厌氧球菌 5属、专性
需氧球菌 1属
– 葡萄球菌、链球菌、肠球菌
? 革兰阴性球菌
– 奈瑟菌属、布兰汉菌属
? 化脓性球菌 pyogenic cocci
葡萄球菌属 Staphylococcus
? 概况
? 分类
– 32个种 15个亚种
? 金黄色葡萄球菌 S.aureus,表皮葡萄球菌 S.epidermidis,头
状葡萄球菌 S.capitis,人葡萄球菌 S.hominis,腐生葡萄球菌
S.saprophyticus
? 溶血、模仿、中间、木糖葡萄球菌等
– 根据是否产生凝固酶
? 凝固酶阳性
? 凝固酶阴性
– 其他分型
临床意义
? 化脓性感染
– 局部感染：疖、痈、脓肿
– 全身感染：败血症、脓毒血症、骨髓炎、肺
炎、心内膜炎等
? 食物中毒
? 人类皮肤烫伤样综合症
? 毒性休克综合症
临床意义
? 凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘膜正常菌
群，是医院感染的主要病原菌。
? 葡萄球菌的对抗生素的耐药性不断演变，目
前最为严重的是 耐甲氧西林的葡萄球菌
（ Methecillin resistant staphylococcus,MRS)
致病物质
? 侵袭性酶类：血浆凝固酶、透明质酸酶、磷脂酶、
触酶、耐热核酸酶
? 毒素：
– 溶血毒素 (α,β,γ,δ ）
? α溶血素对哺乳动物红细胞有溶血作用特别对兔红细胞最敏感
? 损伤白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞
– 杀白细胞素
? 破坏中性粒细胞和巨噬细胞
– 肠毒素
? A,B,C1,C2,C3,D,E,G,H9个血清型，以 A,D型多见
? 常为凝固酶阳性菌株产生，耐热核酸酶与肠毒素平行存在
致病物质
? 表皮剥脱毒素
– 主要由噬菌体 Ⅱ 组产生，有 A,B两个血清型
– 引起剥脱性皮炎，多见于新生儿、幼儿和免
疫低下者
? 毒性休克综合症毒素 -1
微生物特性
? 形态大小
– 直径 0.5~1.5μm, 革兰阳性球菌
– 单个、成双、短链或成簇排列葡萄状
– 无鞭毛和芽胞
– 有些菌株有荚膜
葡萄球菌培养特性
? 营养要求不高
? pH7.4~7.6,最适温度 35℃ ~37℃,
? 兼性厌氧
葡萄球菌生长情况
? 普通平板：
– 2~3mm,金黄色、白色、柠檬色，色素为脂溶性
? 血平板：
– 2~3mm,金黄色、白色、柠檬色，有的出现透明
溶血环
? 高盐甘露醇平板：
– 10~15%氯化钠，金黄色葡萄球菌生长发酵甘露醇
呈黄色菌落
? 液体培养基
– 均匀混浊生长
葡萄球菌抵抗力
? 为无芽胞细菌中抵抗力最强
? 干燥脓汁、痰液中存活 2~3月
? 加热 60 ℃ 1h或 80 ℃ 30min才被杀死
? 2%石炭酸 15min,1%升汞 10min死亡
? 耐盐性强，在含 10%~15%氯化钠中生长
? 对碱性染料敏感,1,100000~200000龙
胆紫抑制生长
? 常用抗生素敏感，耐药菌增长
葡萄球菌生化反应
? 生化反应
微生物检验
? 检验程序
? 标本采集
? 标本直接检查
分离培养与鉴定
? 一般标本
– 血琼脂平板 2~3mm,金黄色或白色,β溶
血或不溶血，光滑、不透明、圆形凸起菌落
? 污染标本
– 高盐甘露醇平板 发酵甘露醇为黄色菌落
? 血液标本
– 液体培养基增菌培养
鉴定
? 涂片革兰染色
– 革兰阳性球菌，单个、成串、葡萄串样
? 与链球菌区别
– 触酶试验 阳性
? 与微球菌区别
– 厌氧葡萄糖产酸、需氧甘油产酸,0.4μg/ml红霉素耐受
? 属内鉴别
– 凝固酶试验、耐热核酸酶试验、磷酸酶试验、吡咯烷酮芳基
酰胺酶（ PYR） 试验、新生霉素敏感试验等。
凝固酶试验
? 玻片法凝固酶试验
? 试管法凝固酶试验
? 其他方法
其它鉴定试验
? 耐热核酸酶试验
? 磷酸酶试验
? 吡咯烷酮芳基酰胺酶（ PYR） 试验
? 新生霉素敏感试验
? 鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、半乳糖
苷酶试验,3-羟基丁酮酸试验、多粘菌
素 B耐药试验、糖产酸试验
商品化鉴定产品
? API-staph
? ID32 staph
? Microscan
? VITEK GPI
体外药物敏感性试验的药物
? A组
– 青霉素、苯唑西林
? B组
– 红霉素、克林霉素,SMZ/TMP,万古霉素
? C组
– 环丙沙星、庆大霉素、氯霉素
? D组（尿路感染用）
– 诺氟沙星、呋喃妥因
耐甲氧西林葡萄球菌
methecillin resistant staphylococcus,MRS
? 携带 mecA基因，编码 PBP2a青霉素结合
蛋白，与目前所有 β-内酰胺类抗生素亲
和力极低，且替代其他 PBP的功能
? 异质性表达
? 常伴随对大环内酯类、氨基糖苷类、四
环素类耐药
MRS的检出
? 加 2%NaCl,<35℃ 孵育至 24小时，才能完全检
出
? 苯唑西林 1μg纸片抑菌环
– 金黄色葡萄球菌 ≤ 10mm
– 凝固酶阴性葡萄球菌 ≤ 17mm
– 或抑菌环内有菌落生长
? 苯唑西林 MIC
– 金黄色葡萄球菌 ≥ 4 μg/ml
– 凝固酶阴性葡萄球菌 ≥ 0.5 μg/ml
? 革兰阳性球菌
– 兼性厌氧球菌 9属、专性厌氧球菌 5属、专性
需氧球菌 1属
– 葡萄球菌、链球菌、肠球菌
? 革兰阴性球菌
– 奈瑟菌属、布兰汉菌属
? 化脓性球菌 pyogenic cocci
葡萄球菌属 Staphylococcus
? 概况
? 分类
– 32个种 15个亚种
? 金黄色葡萄球菌 S.aureus,表皮葡萄球菌 S.epidermidis,头
状葡萄球菌 S.capitis,人葡萄球菌 S.hominis,腐生葡萄球菌
S.saprophyticus
? 溶血、模仿、中间、木糖葡萄球菌等
– 根据是否产生凝固酶
? 凝固酶阳性
? 凝固酶阴性
– 其他分型
临床意义
? 化脓性感染
– 局部感染：疖、痈、脓肿
– 全身感染：败血症、脓毒血症、骨髓炎、肺
炎、心内膜炎等
? 食物中毒
? 人类皮肤烫伤样综合症
? 毒性休克综合症
临床意义
? 凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘膜正常菌
群，是医院感染的主要病原菌。
? 葡萄球菌的对抗生素的耐药性不断演变，目
前最为严重的是 耐甲氧西林的葡萄球菌
（ Methecillin resistant staphylococcus,MRS)
致病物质
? 侵袭性酶类：血浆凝固酶、透明质酸酶、磷脂酶、
触酶、耐热核酸酶
? 毒素：
– 溶血毒素 (α,β,γ,δ ）
? α溶血素对哺乳动物红细胞有溶血作用特别对兔红细胞最敏感
? 损伤白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞
– 杀白细胞素
? 破坏中性粒细胞和巨噬细胞
– 肠毒素
? A,B,C1,C2,C3,D,E,G,H9个血清型，以 A,D型多见
? 常为凝固酶阳性菌株产生，耐热核酸酶与肠毒素平行存在
致病物质
? 表皮剥脱毒素
– 主要由噬菌体 Ⅱ 组产生，有 A,B两个血清型
– 引起剥脱性皮炎，多见于新生儿、幼儿和免
疫低下者
? 毒性休克综合症毒素 -1
微生物特性
? 形态大小
– 直径 0.5~1.5μm, 革兰阳性球菌
– 单个、成双、短链或成簇排列葡萄状
– 无鞭毛和芽胞
– 有些菌株有荚膜
葡萄球菌培养特性
? 营养要求不高
? pH7.4~7.6,最适温度 35℃ ~37℃,
? 兼性厌氧
葡萄球菌生长情况
? 普通平板：
– 2~3mm,金黄色、白色、柠檬色，色素为脂溶性
? 血平板：
– 2~3mm,金黄色、白色、柠檬色，有的出现透明
溶血环
? 高盐甘露醇平板：
– 10~15%氯化钠，金黄色葡萄球菌生长发酵甘露醇
呈黄色菌落
? 液体培养基
– 均匀混浊生长
葡萄球菌抵抗力
? 为无芽胞细菌中抵抗力最强
? 干燥脓汁、痰液中存活 2~3月
? 加热 60 ℃ 1h或 80 ℃ 30min才被杀死
? 2%石炭酸 15min,1%升汞 10min死亡
? 耐盐性强，在含 10%~15%氯化钠中生长
? 对碱性染料敏感,1,100000~200000龙
胆紫抑制生长
? 常用抗生素敏感，耐药菌增长
葡萄球菌生化反应
? 生化反应
微生物检验
? 检验程序
? 标本采集
? 标本直接检查
分离培养与鉴定
? 一般标本
– 血琼脂平板 2~3mm,金黄色或白色,β溶
血或不溶血，光滑、不透明、圆形凸起菌落
? 污染标本
– 高盐甘露醇平板 发酵甘露醇为黄色菌落
? 血液标本
– 液体培养基增菌培养
鉴定
? 涂片革兰染色
– 革兰阳性球菌，单个、成串、葡萄串样
? 与链球菌区别
– 触酶试验 阳性
? 与微球菌区别
– 厌氧葡萄糖产酸、需氧甘油产酸,0.4μg/ml红霉素耐受
? 属内鉴别
– 凝固酶试验、耐热核酸酶试验、磷酸酶试验、吡咯烷酮芳基
酰胺酶（ PYR） 试验、新生霉素敏感试验等。
凝固酶试验
? 玻片法凝固酶试验
? 试管法凝固酶试验
? 其他方法
其它鉴定试验
? 耐热核酸酶试验
? 磷酸酶试验
? 吡咯烷酮芳基酰胺酶（ PYR） 试验
? 新生霉素敏感试验
? 鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、半乳糖
苷酶试验,3-羟基丁酮酸试验、多粘菌
素 B耐药试验、糖产酸试验
商品化鉴定产品
? API-staph
? ID32 staph
? Microscan
? VITEK GPI
体外药物敏感性试验的药物
? A组
– 青霉素、苯唑西林
? B组
– 红霉素、克林霉素,SMZ/TMP,万古霉素
? C组
– 环丙沙星、庆大霉素、氯霉素
? D组（尿路感染用）
– 诺氟沙星、呋喃妥因
耐甲氧西林葡萄球菌
methecillin resistant staphylococcus,MRS
? 携带 mecA基因，编码 PBP2a青霉素结合
蛋白，与目前所有 β-内酰胺类抗生素亲
和力极低，且替代其他 PBP的功能
? 异质性表达
? 常伴随对大环内酯类、氨基糖苷类、四
环素类耐药
MRS的检出
? 加 2%NaCl,<35℃ 孵育至 24小时，才能完全检
出
? 苯唑西林 1μg纸片抑菌环
– 金黄色葡萄球菌 ≤ 10mm
– 凝固酶阴性葡萄球菌 ≤ 17mm
– 或抑菌环内有菌落生长
? 苯唑西林 MIC
– 金黄色葡萄球菌 ≥ 4 μg/ml
– 凝固酶阴性葡萄球菌 ≥ 0.5 μg/ml
