陕西医学高等专科学校教案（基础课程） 课程名称 病原生物学和免疫学 班级  专业，层次 临床、全科医学（大专）  教 师  专业技 术职务  授课方式 （大，小班，实习） 大班 学时 2学时  授课题目 （章，节） 第二十六章 病毒的感染与免疫 第二十七章 病毒感染的检查方法及防治原则  基本教材或主要参考书 1.?病原生物学和免疫学?（第五版），陈兴保主编.人民卫生出版社.北京.2004.7 2.?医学微生物学?本科教材（第六版），周正任主编.人民卫生出版社.北京.2003.12 3.?医学免疫学?本科教材（第三版），陈慰峰主编.人民卫生出版社.北京.2000.8  教学目的： 1．掌握干扰素的概念、种类及其生物学活性。 2．熟悉病毒的感染方式与途径；病毒的感染类型；病毒的致病机制；抗病毒免疫；病毒标本的采集与送检原则；双份血清测定特异性抗体的临床意义；病毒感染的特异性预防。 3．了解病毒感染的快速诊断；病毒的分离培养与鉴定。  教学内容： 1．病毒的致病机制 （30分钟） 2．病毒的感染方式和类型 （25分钟） 3．抗病毒免疫 （15分钟） 4．病毒感染的检查方法、免疫学防治 （25分钟）  教学方法：启发式教学  教具：多媒体、胶片  教学重点，难点： 重点：1.病毒的致病机制； 2.干扰素的概念、种类及其生物学活性。 难点：病毒的致病机制。  教研室审阅意见 安排合理，同意实施。 姜凤良 （教研室主任签名） 年 月 日   小 结 （5分钟）  1．病毒的致病机制。 2．病毒的感染方式和类型。 3．干扰素的概念、种类及其生物学活性。 4．病毒标本采集原则及检查方法。 5．病毒感染特异性防治原则。  复习思考题 作业题  试述病毒的致病机制。 何谓干扰素，简述其生物学活性？ 试述病毒标本采集原则。  教学后记    第二十九章 病毒的感染与免疫 第一节 感染的方式 一．水平传播：不同个体之间的传播 通过皮肤传播：创伤﹑叮咬. 通过粘膜表面：呼吸道﹑肠道﹑接触. ３．医源性传播：经注射﹑输血﹑拔牙等传播． 二．垂直传播：亲代直接传给子代 １．胎盘． ２．产道传播． 第二节 病毒致病机制 病毒对宿主细胞的直接作用 1．影响细胞的生命活力 杀细胞感染机制： 阻断细胞大分子合成 病毒蛋白的毒性作用 使溶酶体酶释放，细胞自溶． 对细胞的直接损伤． 非杀细胞感染：细胞可多次出芽释放病毒，但最终仍不免死亡． 细胞融合：形成多核巨细胞，寿命缩短． 细胞融合 2．包涵体形成：有些病毒感染细胞，在光镜下可见胞浆或胞核内有嗜酸性、嗜碱性的圆形或不规则团块结构，称为包涵体． 3．细胞转化：病毒核酸整合到细胞核酸中，使细胞遗传特性改变而导致肿瘤发生． 4．细胞凋亡． 二．病毒引起的免疫病理损伤 １．体液免疫病理作用：通过II、III型超敏反应引起组织损伤，如登革热病毒、乙肝病毒等。 ２．细胞免疫病理作用：通过IV型超敏反应引起组织损伤，如乙型肝炎病毒等。 ３．病毒直接损伤淋巴细胞或淋巴器官，如HIV。 第三节 感染类型 一．隐性感染： 病毒在宿主细胞内增殖但不引起临床症状者，称为隐性感染或亚临床感染． 二．显性感染（急性感染与持续性感染）： 病毒在宿主细胞内增殖，引起明显临床症状者，称为显性感染． （一）急性感染： 感染时间短，宿主一般能将病毒彻底消灭而恢复． （二）持续感染： 病毒在宿主体内持续存在较长时间，甚至终生者，称为持续感染． 1. 慢性感染： 病毒间歇性增殖并排出体外，病程长，如乙肝． 2. 潜伏感染： 原发感染后长时间潜伏，若干年后开始增殖，出现临床症状．如单纯疱疹。 3. 迟发性感染：慢发病毒感染 潜伏期长，亚急性进行性经过，预后不良．如麻疹病毒急性感染后，经若干年后慢慢出现的亚急性硬化性全脑炎． 第四节 抗病毒免疫 一．体液免疫的保护作用 （一）中和抗体：由病毒的表面抗原刺激机体产生，可与表面抗原结合，阻止病毒吸附和穿入易感细胞，保护细胞免受病毒感染． IgM：出现早． IgG：主要抗体。 IgA：ＳIgA局部抗病毒． （二）补体结合抗体：抗体结合病毒抗原或细胞膜表面病毒抗原后，通过活化补体，类似溶细胞作用破坏有胞膜病毒或溶解病毒寄生的宿主细胞． 二．细胞免疫： 由ＴC和ＴH1细胞发挥作用。 三.干扰素的抗病毒作用： （一）干扰素(IFN) 是由病毒或其它干扰素诱生剂刺激单核吞噬细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等产生的糖蛋白，具有高度活性及多种功能． （二）种类 1.白细胞——α-IFN 2.成纤维细胞——β-IFN 3.致敏T细胞——γ-IFN （三）产生机理 诱生剂 细胞 产生特异性因子 结合 抑制蛋白 干扰素基因解抑 IFN基因活化转录出干扰素mRNA 翻译蛋白质 （四）抗病毒机理 1.诱生剂与抑制蛋白结合。 2.干扰素基因活化,干扰素产生并释放。 诱导细胞产生抗病毒蛋白。 IFN的产生及其抗病毒机制 （五）生物学活性： １．抗病毒作用：出现早，限制病毒扩散（α-IFN、β-IFN活性较γ-IFN强） 2．免疫调节：γ-IFN活化ＮＫ、ＴＣ 细胞增强杀伤能力． ３．抗肿瘤作用：γ-IFN调节癌基因表达，抑制细胞分裂． 第三十章 病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 检查方法 一．标本的采集与送检： １．采集标本：早期（发病１–２天），根据感染部位采集． ２．标本处理：严格无菌操作．本身带有杂菌的标本需用抗生素处理． ３．冷藏送检：标本采后１–２小时送到，不能立即送检者,需放入含抗生素的50﹪甘油缓冲盐水中、低温下保存送检． ４．血清学检查：取双份血清（在发病初期和病后２–３周各取一份血清），后者抗体效价较前者升高４倍以上，有诊断意义． 二．分离培养与鉴定： （一）．分离培养： ⑴. 动物接种 ⑵. 鸡胚培养． ⑶. 组织培养：从其来源，传代次数分为原代细胞﹑二配体细胞与传代细胞三种类型；从其生长方式可分为单层细胞和悬浮细胞两种． （二）．病毒的鉴定： 病毒在细胞中增殖的指标： 常有细胞圆缩﹑聚集﹑拉丝和脱落等，再有可行成多核巨细胞和包涵体． 病毒感染性测定及病毒鉴定： ⑴. 50﹪感染量（ID５０）或50﹪组织细胞感染量（TCID５０）测量法：ID５０或TCID５０使测定病毒感染动物鸡胚或细胞后，引起50﹪发生死亡和病变的最小量 ． ⑵. 蚀斑测定法： 是一种准确测定病毒感染性的方法． ⑶．新分离病毒的鉴定：鉴定较复杂，需按鉴定程序逐步做出确切诊断． 三．病毒感染的快速诊断： （一）形态学检查： 电镜和免疫电镜检查：有高浓度的病毒颗粒的样品． 光学显微镜检查：大型病毒颗粒和包涵体． （二）检查病毒性抗原： 采用免疫标记技术，检测标本中的抗原．此法敏感性高、特异性强、速度快． （三）IgM型抗病毒抗体的检测： 可用于病毒早期诊断，尤其是孕妇是否感染风疹病毒的诊断． （四）病毒核酸的检测： 核酸杂交技术： 利用DNA可易变性与复性的特性，制成用放射性核素和非放射性物质，标记的单链DNA片段基因探针，与提纯的病毒核酸，及待测的变性DNA进行杂交，再用放射自显影技术或其它显色法来确定与探针DNA是否有同源性． ⑴ 斑点核酸杂交． ⑵ 细胞内原位杂交． ⑶ DNA印迹杂交． ⑷ RNA印迹杂交． 核酸扩增技术： 标本中核酸极其微量，可用体外核酸扩增技术，使较低水平的核酸在短时间内达到一定水平而检出． ⑴．聚合酶链反应． ⑵．连接酶链反应． ⑶．核酸序列扩增系统． ⑷．转录依赖性扩增系统． 第二节 病毒感染的防治原则 一．免疫预防： （一）人工自动免疫： １．灭活疫苗：如流行性乙型脑炎疫苗﹑流感疫苗等． ２．减毒活疫苗：如脊髓灰质炎疫苗，麻疹疫苗等． 新型疫苗：如基因重组疫苗﹑基因缺失活疫苗． 亚单位疫苗． （二）人工被动免疫：丙种球蛋白﹑胎盘丙种球蛋白﹑转移因子． 二．病毒感染的治疗： （一）抗病毒的化学制剂： １．核苷类物：无环鸟苷﹑叠氮胸苷等． ２．蛋白酶抑制物． 3．其它抗病毒抑制物． （二）干扰素和干扰素诱生剂： 1．干扰素：广谱抗病毒作用． 2．干扰素诱生剂：用于机体可诱生干扰素． （三）中草药的抗病毒作用．