工业微生物的筛选和分离
1、醋酸菌分离培养基:1%酵母膏,1%葡萄糖,pH4.5,琼脂2%,0.1MPa灭菌20分钟。干热灭菌CaCO3。6个250ml三角瓶,各装100ml培养基。使用前分别加入3%无水乙醇和2%CaCO3。
2、降解亚硝酸盐培养基:NaNO30.2%,KH2PO4 0.7%,MnSO4.H2O 0.25%,Na2HPO4 1.35%,MgSO4.7H2O 0.1%,葡萄糖1%,琼脂2%,0.1MPa灭菌20分钟。6个250ml三角瓶,各装100ml培养基。
同时灭菌试管20支(分为两个以包装,二个班用),1ml吸管12支(分为两个以包装,二个班用)。普通平皿60个。
土样:5g土样,加入45ml无菌水中。为10-1,然后取1ml加入9ml无菌水,为稀释10-2,直至稀释至10-8。
实验老师准备:(1)课前半小时打开操净工作台灭菌。
(2)课前稀释土样至10-8。
(3)溶化培养基。
同学分组:共分六组,三组分离醋酸菌,三组分离亚硝酸盐分解菌。
分离醋酸菌同学每组分别作10-1,10-2,10-3。
分离亚硝酸盐分解菌同学每组分别作10-4,10-5,10-6。
每位同学做一个平皿。并标记好稀释度和名字。
具体操作方法:吸取相应浓度的土样稀释液0.5ml,加入平皿内,采用倾注稀释法,加入溶化后不烫手的培养基,刚好盖过平皿底部,迅速混匀后放置,使培养基冷却,放入37℃培养箱中倒置培养48小时。
醋酸菌分离观察透明圈大小并计数,亚硝酸盐分解菌分离直接计数平皿上菌的生长数量。
上课时间:生工021:星期一(5月23日)上午8:00至12点。
生工022:星期二(5月24日)晚6:30-8:20。