第九章 吸光光度法第一节 概述
1、概念：
2、方法分类：
基于 物质对光的选择性吸收 而建立起来的分析方法根据物质吸收光波长不同分为紫外分光光度法,λ10～ 400nm
可见分光光度法,λ400～ 700nm
红外分光光度法,λ0.75～ 1000μm
优点,⑴ 灵敏度高,主要用于微量分析；
⑵准确度高,相对误差仅有 2~5%；
⑶操作简便、迅速，所需设备并不复杂；
⑷应用广泛。
缺点,⑴ 仅适合微量分析；
⑵所需仪器相对昂贵。
3.吸光光度法的优缺点
Fe3+ + 3SCN- Fe(SCN)3
几乎无色 无色 血红色
4.吸光光度法的测定步骤（两步法）
①先显色,如被测物颜色深且稳定者，可直接测定；但大多数被测物无色或颜色很浅，故测定前需加入适当试剂（ 显色剂 ），使被测物质生成稳定的有色物质。如：
② 再测定 。
第二节 吸光光度法的基本原理
1、光的基本知识单色光,具有某一特定波长的光。
复合光,可分解为两种或两种以上的单色光。
互补色光,两种适当色光按一定强度混合可得到白光光是一种电磁波，具有波粒二相性。
光分为 单色光 和 复合光 。
2、溶液对光的选择性吸收和溶液的颜色
⑴ 溶液为什么会有颜色？
溶液之所以呈现不同的颜色，是由于溶液中的质点选择性地吸收某种颜色的光所引起的。
⑵ 吸收光与溶液颜色的关系：
当白光通过某一均匀溶液时：
① 如溶液对其全不吸收,光全透过,溶液为无色；
② 如溶液对其全部吸收,无光透过,溶液呈黑色；
③ 如溶液对其部分吸收,其余光透过,溶液呈透过光的颜色。
例如,CuSO4溶液，吸收了 白光 中的 黄光,透过的为 黄光 的互补光 蓝光,故其溶液呈 蓝色 。
又例如,K2CrO4溶液，吸收了白光中的蓝光,透过的为 蓝光 的互补光 黄光,故其溶液呈 黄色 。
再例如,NaCl,KNO3溶液，对其射入的可见光 全不吸收，光全透过,因此溶液为无色。
溶液 颜色与吸收光颜色的关系：
to see p-187 table 9-3
3、吸收光谱曲线某一溶液对何种波长的光吸收？吸收的程度如何？
这可通过使不同波长的光通过某一固定浓度的有色溶液，分别测量每一波长下对应的光的吸收程度（吸光度），作 A-λ曲线，即吸收光谱曲线。
4、朗伯－比尔定律
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透光率吸光度单色光器有色溶液光电管光源检流计第三节 分光光度法的测定原理、
方法和仪器一,分光光度法的测定原理二、测定方法
1、标准曲线法（工作曲线法）
⑴ 测定步骤
①首先配制一系列被测物的标准溶液，测其吸光度，绘出 A-c工作曲线；
②在相同条件下，测出被测物的吸光度 Ax;
③ 根据 Ax的值在工作曲线上查处 cx的大小。
⑵适用范围大批重复试样的分析。
2、比较法
A
A
c
c
x
s
x
s? c
A
Ac
s
s
x
x
⑴ 测定原理当用同一强度的单色光通过两个厚度相同而浓度不同的有色溶液时，两溶液的浓度之比等于两溶液的吸光度之比。即：
即：
② 在相同条件下，测出待测液和标准溶液的吸光度 Ax,As;
③ 将 Ax,As,cs的值代入上式，即可求出待测溶液浓度的大小。
⑵ 测定步骤
①首先配制一份浓度为 cs的被测物的标准溶液，其浓度与待测液相近；
⑶ 适用范围单个试样的分析。
三、分光光度计
1,72型分光光度计
2,721型分光光度计
3,722型分光光度计
4,751GW型 紫外 /可见 分光光度计本次课基本要求
1,了解物质对光的选择性吸收,溶液有色理论,分光光度计的基本构造等知识；
2,掌握朗伯－比尔定律,分光光度法的测定原理及方法 。
本周实验内容实验十一 分光光度法测定磷含量各班实验时间与上周同请事先预习！
以下为答疑时间，
有问题请举手示意。
讯问者，智之本；
思虑者，智之道也。
—— 询问，是增长智慧的根本；
思考，是增长智慧的途径。
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光是一种电磁波，如果按照波长或频率排列，可得到电磁波谱图,
